本發(fā)明涉及含有甘菊及桂皮的混合提取物作為有效成分的用于抑制痛風(fēng)的組合物。
背景技術(shù)：
：：痛風(fēng)是通過飲食攝取的被稱為嘌呤(purine)的物質(zhì)被人體代謝后剩下的產(chǎn)物尿酸在血液中的濃度升高而生成的尿酸鹽結(jié)晶(尿酸鈉一水合物結(jié)晶(monosodiumuratemonohydratecrystals；msu))沉積到關(guān)節(jié)的軟骨、腱、周圍組織的疾病。作為這種痛風(fēng)關(guān)節(jié)炎的患病率增加的原因，可以列舉如飲食生活的西化、肥胖的增加、人口的高齡化、腎臟疾病和高血壓患病率的增加、噻嗪類(thiazide)等利尿劑和低劑量阿司匹林使用的增加等。此外，痛風(fēng)是在成年男性中非常常見的炎癥性關(guān)節(jié)炎。在西方顯示約為1～2％的患病率，已知與西洋人相比，東洋人的患病率要低，而最近由于西化的飲食生活或生活習(xí)慣，報道稱西方和亞洲地區(qū)的患病率均呈上升趨勢。在韓國也已確認成年人中的9.3％(男性的14.3％，女性的2.2％)患有高尿酸血癥。痛風(fēng)為肥胖男性易患的成人疾病的一種，在血液中增加的尿酸以尿酸結(jié)晶(尿酸鈉結(jié)晶(monosodiumuratecystal；msu))的形態(tài)沉積到關(guān)節(jié)或周圍組織中，從而誘發(fā)炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致疼痛、浮腫，嚴重時，還會引起關(guān)節(jié)的變形。疾病的過程為，從血中的尿酸濃度增加，但沒有癥狀的時期轉(zhuǎn)為急性間歇性關(guān)節(jié)炎，然后轉(zhuǎn)為伴隨有關(guān)節(jié)變形的慢性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎。已知，痛風(fēng)是治療方法明確且能夠成功地治愈的疾病，但是常伴有高血壓、慢性腎功能衰竭等其它疾病，因此需要仔細考慮藥劑的副作用的情況較多，并且，作為非藥物性治療，患者對改變生活習(xí)慣而作出努力是對于長期治療中獲得良好預(yù)后是必需的。痛風(fēng)和高尿酸血癥顯示出高血壓、高脂血癥、血糖增加、腹部肥胖等臨床癥狀，雖然不會成為還會帶來動脈硬化性心臟疾病和第二型糖尿病等增加成人病的風(fēng)險的復(fù)合性病癥的代謝癥候群的診斷標(biāo)準(zhǔn)，但被認為與代謝癥候群具有密切的關(guān)系。在韓國，報告稱痛風(fēng)患者中的44％伴有代謝癥候群。痛風(fēng)大致會顯示為急性單關(guān)節(jié)炎形態(tài)，但也有侵入小關(guān)節(jié)或很罕見地侵入多關(guān)節(jié)的情況。已知使用在急性痛風(fēng)的治療中的非甾體抗炎藥(non-steroidalanti-inflammatorydrugs；nsaids)具有抑制炎癥反應(yīng)的功效，通過抑制白細胞的活性及移動來顯示出抗炎癥作用的秋水仙堿(colchicine)、類固醇均為能夠有效地治療痛風(fēng)發(fā)作的藥劑，并且，已知選擇性環(huán)氧合酶(cyclooxygenase；cox-2)抑制劑也具有與現(xiàn)有的非甾體抗炎藥相同的效果。此外，將血液中的尿酸濃度長時間維持在飽和狀態(tài)以下時，不僅能夠預(yù)防急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎，還能夠減小已經(jīng)生成的痛風(fēng)石(tophi)的大小。在痛風(fēng)的慢性期中實施降低血液中的尿酸濃度的治療，根據(jù)機理尿酸降低劑大致分為黃嘌呤氧化酶(xanthineoxidase；xo)抑制劑和尿酸排出促進劑(uricosuricagent)，尿酸合成抑制劑有通常廣為使用的別嘌呤醇(allopurinol)和最近開發(fā)為新藥的非布索坦(febuxostat)。別嘌呤醇(allopurinol)為黃嘌呤氧化酶(xanthineoxidase；xo)抑制劑，其為與高尿酸血癥的原因無關(guān)，可有效使用的藥物，但是，別嘌呤醇的最為嚴重的副作用為過敏性癥候群(hypersensitivitysyndrome)，已知會引起發(fā)熱、紅斑、嗜酸性粒細胞的增加、肝炎、腎衰竭等，還會有死亡的危險。非布索坦(febuxostat)也為黃嘌呤氧化酶抑制劑，但與別嘌呤醇不同，其為非嘌呤類選擇性阻斷劑，主要在肝中代謝而形成葡糖苷酸(glucuronide)。大部分的痛風(fēng)都進行為慢性痛風(fēng)，此時，雖然沒有癥狀，也要實施預(yù)防性的抗炎癥制劑和降低尿酸濃度的治療。這種預(yù)防治療需要在疾病維持一定時間的鎮(zhèn)靜狀態(tài)后再使用，否則會復(fù)發(fā)為更嚴重的痛風(fēng)。但是，對于適當(dāng)?shù)募膊〉逆?zhèn)靜期間方面還有很大的爭論余地，而且，就這種預(yù)防治療而言，使用目前所開發(fā)出的藥劑也難以抑制間歇性復(fù)發(fā)的痛風(fēng)的急性發(fā)病，并且，利用天然物質(zhì)來抑制作為痛風(fēng)(gout)誘發(fā)酶的氧化酶方面的技術(shù)還非常少。需要以慢性的方式使用痛風(fēng)藥，因此，秋水仙堿或別嘌呤醇所引起的副作用會成為非常嚴重的問題。因此，需要研究開發(fā)出一種以預(yù)防性的方式長期使用也沒有副作用，并能夠緩解炎癥的天然物質(zhì)制劑，但還沒有活躍地展開研究開發(fā)，作為已知的研究結(jié)果中的天然物質(zhì)之一，已知韓國第2014-0106772號公開專利中公開有“甘菊提取物”具有抑制痛風(fēng)的效果。此外，一直以來桂皮作為體質(zhì)虛弱且氣血虛的人所使用的中藥材，已知其具有促進免疫能力的效果(韓國第0842053號授權(quán)專利)，公開有關(guān)于含有桂皮提取物的用于預(yù)防及治療動脈硬化癥的組合物(韓國第0294091號授權(quán)專利)、含有肉桂皮提取物的化妝品組合物(韓國第2001-0018668號公開專利)及含有納米顆?；鹌ぬ崛∥锏挠糜谠鰪娍谇恍l(wèi)生的組合物(韓國第0489267號授權(quán)專利)。但是，沒有公開如本發(fā)明含有甘菊及桂皮的混合提取物作為有效成分的用于抑制痛風(fēng)的組合物對抑制痛風(fēng)具有增強效果的內(nèi)容。技術(shù)實現(xiàn)要素：要解決的技術(shù)問題本發(fā)明是根據(jù)如上所述的要求而提出的，本發(fā)明涉及含有甘菊及桂皮的混合提取物作為有效成分的用于抑制痛風(fēng)的組合物，詳細地，通過確認本發(fā)明的甘菊及桂皮的混合提取物與單獨使用甘菊提取物或桂皮提取物相比，黃嘌呤氧化酶的抑制率得到顯著增強，從而完成了本發(fā)明。技術(shù)方案為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供含有甘菊(chrysanthemumindicum)及桂皮(cinnamomumcassia)的混合提取物作為有效成分的用于抑制痛風(fēng)的組合物。此外，本發(fā)明提供含有甘菊(chrysanthemumindicum)及桂皮(cinnamomumcassia)的混合提取物作為有效成分的用于預(yù)防或改善痛風(fēng)的健康功能食品。此外，本發(fā)明提供含有甘菊(chrysanthemumindicum)及桂皮(cinnamomumcassia)的混合提取物作為有效成分的用于預(yù)防或治療痛風(fēng)的藥物組合物。此外，本發(fā)明提供含有甘菊(chrysanthemumindicum)及桂皮(cinnamomumcassia)的混合提取物作為有效成分的用于預(yù)防或治療因痛風(fēng)引起的關(guān)節(jié)炎的藥物組合物。有益效果本發(fā)明涉及含有甘菊(chrysanthemumindicum)及桂皮(cinnamomumcassia)的混合提取物作為有效成分的用于抑制痛風(fēng)的組合物，其抑制作為痛風(fēng)誘發(fā)酶的黃嘌呤氧化酶(xanthineoxidase)，并且減少尿液中的尿酸量，從而具有預(yù)防、改善或治療痛風(fēng)的效果。附圖說明圖1為對本發(fā)明的甘菊及桂皮的混合提取物的黃嘌呤氧化酶的抑制活性進行確認的結(jié)果。圖2為對本發(fā)明的基于50、100、200mg/kg/天的甘菊及桂皮的混合提取物的不同濃度進行處理的尿液中所含的尿酸含量進行確認的結(jié)果。*、***表示相比于高尿酸血癥誘發(fā)組的別嘌呤醇處理組和50、100、200mg/kg/天的甘菊及桂皮的混合提取物的不同濃度處理組中，尿液中所含的尿酸的含量在統(tǒng)計學(xué)上具有顯著性差異，*表示p值小于0.05，***表示p值小于0.001。圖3為對基于100mg/kg/天的甘菊提取物、100mg/kg/天的桂皮提取物以及100mg/kg/天的本發(fā)明的甘菊及桂皮的混合提取物進行處理的尿液中所含的尿酸的含量進行確認的結(jié)果。*、***表示相比于高尿酸血癥誘發(fā)組的別嘌呤醇處理組、甘菊提取物處理組、桂皮提取物處理組、甘菊及桂皮的混合提取物的不同濃度處理組的尿液中所含的尿酸的含量在統(tǒng)計學(xué)上具有顯著性差異，*表示p值小于0.05，***表示p值小于0.001。圖4為對基于100mg/kg/天的甘菊提取物、100mg/kg/天的桂皮提取物以及100mg/kg/天的本發(fā)明的甘菊及桂皮的混合提取物進行處理的血清內(nèi)所含的尿酸的含量進行確認的結(jié)果。*、***表示相比于高尿酸血癥誘發(fā)組的別嘌呤醇處理組、甘菊提取物處理組、桂皮提取物處理組、甘菊及桂皮的混合提取物的不同濃度處理組的血清內(nèi)所含的尿酸的含量在統(tǒng)計學(xué)上具有顯著性差異，*表示p值小于0.05，***表示p值小于0.001。優(yōu)選實施方式本發(fā)明涉及含有甘菊(chrysanthemumindicum)及桂皮(cinnamomumcassia)的混合提取物作為有效成分的用于抑制痛風(fēng)的組合物。所述甘菊(chrysanthemumindicum)及桂皮(cinnamomumcassia)的混合提取物優(yōu)選使用水、乙醇或它們的混合溶劑進行提取，但并不限定于此，所述甘菊(chrysanthemumindicum)及桂皮(cinnamomumcassia)的混合提取物的混合比例優(yōu)選以1:0.1～10的重量比混合，更優(yōu)選以1:1的重量比混合。本發(fā)明的甘菊(chrysanthemumindicum)及桂皮(cinnamomumcassia)的混合提取物優(yōu)選分別提取甘菊提取物和桂皮提取物后進行混合，但也可以將甘菊和桂皮混合并進行提取后使用。本發(fā)明中使用的甘菊可以使用植物的整體、花、葉、莖及根等任何部位，桂皮是指用通常的樟屬科的樹皮制備的藥材。所述甘菊(chrysanthemumindicum)及桂皮(cinnamomumcassia)的混合提取物具有抑制黃嘌呤氧化酶(xanthineoxidase)的特征。此外，本發(fā)明涉及含有甘菊(chrysanthemumindicum)及桂皮(cinnamomumcassia)的混合提取物作為有效成分的用于預(yù)防或改善痛風(fēng)的健康功能食品。所述含有甘菊(chrysanthemumindicum)及桂皮(cinnamomumcassia)的混合提取物的用于預(yù)防或改善痛風(fēng)的健康功能食品可以制備成選自飲料、丸劑、片劑(tablet)、膠囊劑(capsule)、散劑中的任一種，或者也可以添加到其它食品或食品成分中進行制備，可以采用常規(guī)的方法來制備。作為可添加本發(fā)明的甘菊(chrysanthemumindicum)及桂皮(cinnamomumcassia)的混合提取物的食品的一個例子，可以是包括肉類、香腸、面包、巧克力、糖果類、點心(snack)類、餅干類、披薩、方便面面、其它面類、口香糖類、冰淇淋類的乳制品，各種湯、飲料、茶、飲劑、酒精飲料及維生素復(fù)合劑中的任一種形態(tài)，包括通常意義上的所有健康食品。所述健康功能食品可以含有各種營養(yǎng)劑、維生素、礦物(電解質(zhì))、合成及天然風(fēng)味劑、著色劑及增強劑(奶酪、巧克力等)、果膠酸及其鹽、海藻酸及其鹽、有機酸、保護性膠體增稠劑、ph調(diào)節(jié)劑、穩(wěn)定劑、防腐劑、甘油、醇、碳酸飲料中使用的碳酸化劑等。除此之外，還可以含有用于制備天然果汁及蔬菜飲料的果肉。這些成分可以單獨或組合使用。本發(fā)明的健康功能食品可以含有各種香味劑或天然碳水化合物等作為附加成分。所述天然碳水化合物為葡萄糖、果糖等單糖，麥芽糖、蔗糖等二糖，以及糊精、環(huán)糊精等多糖，木糖醇、山梨糖醇、赤藻糖醇等糖醇。作為甜味劑，可以使用奇異果甜蛋白、甜葉菊提取物等天然甜味劑或糖精、阿斯巴甜等合成甜味劑等。此外，本發(fā)明涉及含有甘菊(chrysanthemumindicum)及桂皮(cinnamomumcassia)的混合提取物作為有效成分的用于預(yù)防或治療痛風(fēng)的藥物組合物。本發(fā)明的藥物組合物中除了所述甘菊(chrysanthemumindicum)及桂皮(cinnamomumcassia)的混合提取物之外，還可以進一步含有載體、賦形劑或稀釋劑?？梢詢?yōu)選包含于本發(fā)明的組合物中的載體、賦形劑或稀釋劑有乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露醇、木糖醇、赤蘚糖醇、麥芽糖醇、淀粉、阿拉伯樹膠、藻酸鹽、明膠、磷酸鈣、硅酸鈣、纖維素、甲基纖維素、微晶纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、水、羥基苯甲酸甲酯、羥基苯甲酸丙酯、滑石粉及硬脂酸鎂等，但并不限定于此。此外，可以根據(jù)通常的方法以口服或非口服劑型施用，在制劑化時，可以使用通常使用的填充劑、增量劑、粘合劑、潤濕劑、崩解劑、表面活性劑等稀釋劑或賦形劑來調(diào)制。用于口服施用的固體制劑包括片劑、丸劑、散劑、顆粒劑、膠囊劑等，這種固體制劑可以通過在上述組合物中至少混合一種以上的賦形劑，例如混合淀粉、碳酸鈣(calciumcarbonate)、蔗糖、乳糖、明膠等來調(diào)制。此外，除了簡單的賦形劑之外，還使用硬脂酸鎂、滑石粉等潤滑劑。用于口服施用的液態(tài)制劑相當(dāng)于懸浮劑、溶液劑、乳劑、糖漿劑等，除了作為常用的簡單的稀釋劑的水、液體石蠟之外，可以包含各種賦形劑，例如潤濕劑、甜味劑、芳香劑、保存劑等。用于非口服施用的制劑有滅菌的水溶液、非水性溶劑、懸浮劑、乳劑、冷凍干燥制劑、栓劑。此外，作為非水性溶劑、懸浮劑可以使用丙二醇(propyleneglycol)、聚乙二醇、橄欖油等植物性油，油酸乙酯等可注射的酯等。作為栓劑的基劑，可以使用witepsol、聚乙二醇(macrogol)、吐溫(tween)61、可可脂、甘油三月桂酸酯、甘油明膠等。此外，本發(fā)明涉及含有甘菊(chrysanthemumindicum)及桂皮(cinnamomumcassia)的混合提取物作為有效成分的用于預(yù)防或治療因痛風(fēng)引起的關(guān)節(jié)炎的藥物組合物。下面，利用實施例來更加詳細地說明本發(fā)明。這些實施例僅是為了更加具體地說明本發(fā)明，本發(fā)明的范圍并不受限于這些實施例，這對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的。實施例1.甘菊及硅皮的乙醇混合提取物的制備相對于1kg的甘菊及桂皮，分別添加15l的70％乙醇，在85℃下提取3小時后，將濾液在50℃下進行減壓濃縮，從而獲得95g的甘菊乙醇提取物和77g的桂皮乙醇提取物。將上述獲得的甘菊乙醇提取物和桂皮乙醇提取物以1:1的重量比進行混合，從而制備甘菊及桂皮的乙醇混合提取物。實施例2.甘菊及桂皮的水混合提取物的制備相對于1kg的甘菊及桂皮，分別添加15l的純凈水，在100℃下提取3小時后，將濾液在55℃下進行減壓濃縮，從而獲得146g的甘菊水提取物和110g的桂皮水提取物。將上述獲得的甘菊水提取物和桂皮水提取物以1:1的重量比進行混合，從而制備甘菊及桂皮的水混合提取物。實施例3.甘菊及桂皮的乙醇混合提取物對于黃嘌呤氧化酶的抑制活性的分析利用本發(fā)明實施例1中制備的甘菊及桂皮的乙醇混合提取物來分析黃嘌呤氧化酶的抑制活性。黃嘌呤氧化酶的抑制活性分析是根據(jù)斯蒂爾佩(stirpe)和德拉科特(dellacorte)的方法[stirpef，dellacortee.1969.theregulationofratliverxanthineoxidase.jbiolchem244：3855-3563]來實施的。將上述實施例1中制備的混合提取物稀釋成5倍后，在0.1ml的稀釋液和0.6ml的0.1m磷酸鉀緩沖溶液(potassiumphosphatebuffer；ph為7.5)中添加0.2ml的溶解有2mm的黃嘌呤(xanthine)的基質(zhì)液。在其中，添加0.1ml的黃嘌呤氧化酶(0.2u/ml)，并在37℃下反應(yīng)5分鐘后，添加1ml的1nhcl來終止反應(yīng)，然后在吸光度292nm下測定反應(yīng)液中生成的尿酸(uricacid)。對于混合提取物的黃嘌呤氧化酶的抑制活性，將試樣添加區(qū)和未添加區(qū)的吸光度減少率以百分率(％)來表示，作為對照組，則對非混合提取物的甘菊乙醇提取物和桂皮乙醇提取物采用與混合提取物相同的方法進行稀釋，并用相同的方法測定了黃嘌呤氧化酶的抑制活性，并公開在圖1中。其結(jié)果，確認了與使用相同濃度的甘菊提取物或桂皮提取物單獨進行處理時相比，使用甘菊及桂皮的混合提取物進行處理時，黃嘌呤氧化酶的抑制活性在統(tǒng)計學(xué)上具有顯著的協(xié)同效應(yīng)(synergisticeffect)。實施例4.對誘發(fā)痛風(fēng)的動物模型的尿液中包含的尿酸的減少效果的分析為了誘發(fā)作為痛風(fēng)動物模型的sd-大鼠(rat)的高尿酸血癥，通過腹腔注射氧嗪酸鉀(150mg/kg，0.5％的羧甲基纖維素鈉(sodiumcarboxymethylcellulose；cmc-na與0.1m的乙酸鈉，ph為5)。24小時后收集尿液，并使用quantichromtm尿酸測定試劑盒(diua-250，博世生物技術(shù)有限公司(bioassaysystems)，美國)篩選出誘發(fā)了高尿酸血癥的實驗動物。對選出的實驗動物施用200mg/kg、100mg/kg及50mg/kg的甘菊及桂皮的混合提取物(1:1)。同樣地，作為陽性對照組，將50mg/kg的別嘌呤醇懸浮于含有0.1％的聚氧乙烯山梨醇單油酸酯(polyoxyethylenesorbitanemonoleate)的0.01m的磷酸鹽緩沖溶液(pbs，phosphatebufferedsaline)中，并口服施用3天，然后在解剖檢查的前一天使其絕食16小時。最后的口服施用后，收集2小時左右的尿液，用乙醚(ethylether)麻醉后，取血液，并利用quantichromtm尿酸測定試劑盒(diua-250，博世生物技術(shù)有限公司，美國)來測定尿酸量。尿液中包含的尿酸量的測定結(jié)果如圖2中所示，確認了通過施用氧嗪酸鉀，使得尿酸量增加，顯示為約50mg/dl，通過施用本發(fā)明的甘菊及桂皮的混合提取物，使尿酸量減少至約32mg/dl，顯示出與作為陽性對照組的別嘌呤醇相似的效果。實施例5.甘菊及桂皮的提取物對于誘發(fā)痛風(fēng)的動物模型的血液及尿液中包含的尿酸減少的協(xié)同效果分析為了誘發(fā)作為痛風(fēng)動物模型的sd-大鼠(rat)的高尿酸血癥，通過腹腔注射氧嗪酸鉀(150mg/kg，0.5％的羧甲基纖維素鈉(sodiumcarboxymethylcellulose；cmc-na與0.1m的乙酸鈉，ph為5)。24小時后收集尿液，并使用quantichromtm尿酸測定試劑盒(diua-250，博世生物技術(shù)有限公司，美國)篩選出誘發(fā)了高尿酸血癥的實驗動物。對選出的實驗動物分別施用100mg/kg的甘菊提取物、桂皮提取物和甘菊及桂皮的混合提取物(1:1)。同樣地，作為陽性對照組，將50mg/kg的別嘌呤醇懸浮于含有0.1％的聚氧乙烯山梨醇單油酸酯(polyoxyethylenesorbitanemonoleate)的0.01m的磷酸鹽緩沖溶液(pbs，phosphatebufferedsaline)中，并口服施用3天，然后在解剖檢查的前一天使其絕食16小時。最后的口服施用后，收集2小時左右的尿液，用乙醚(ethylether)麻醉后，取血液，并利用quantichromtm尿酸測定試劑盒(diua-250，博世生物技術(shù)有限公司，美國)來測定尿酸量。尿液中包含的尿酸量的測定結(jié)果如圖3中所示，確認了通過施用氧嗪酸鉀，使得尿酸量增加，顯示為約53mg/dl，通過施用本發(fā)明的甘菊及桂皮的混合提取物，使尿酸量減少至約31mg/dl，顯示出與作為陽性對照組的別嘌呤醇相似的效果。另一方面，單獨施用甘菊提取物和桂皮提取物時，尿酸量分別減少至42mg/dl和44mg/dl，與甘菊及桂皮的混合提取物相比，效果不足，因此，確認了對甘菊和桂皮的提取物進行混合具有協(xié)同效果。血液中尿酸量的測定結(jié)果如圖4所示，確認了通過施用氧嗪酸鉀，使得尿酸量增加，顯示為約10.4mg/dl，通過施用本發(fā)明的甘菊及桂皮的混合提取物，使尿酸量減少至約6.3mg/dl，顯示出與作為陽性對照組的別嘌呤醇相似的效果。另一方面，單獨施用甘菊提取物和桂皮提取物時，尿酸量分別減少至8.9mg/dl和8.3mg/dl，與甘菊及桂皮的混合提取物相比，效果不足，因此，確認了對甘菊和桂皮的提取物進行混合具有協(xié)同效果。當(dāng)前第1頁12當(dāng)前第1頁12