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      延緩衰老的仙茅口服液制備方法及其口服液與流程

      文檔序號(hào):11899360閱讀:553來源:國知局

      本發(fā)明涉及含有來源于植物、動(dòng)物或礦物原料的醫(yī)用保健品,特別涉及一種延緩衰老的仙茅保健口服液及其制備方法。



      背景技術(shù):

      現(xiàn)代科學(xué)認(rèn)為:衰老是不可抗拒的自然規(guī)律,人的衰老和死亡是絕對(duì)的。但是,通過科學(xué)方法,完全可以延緩人的衰老,推遲生老病死的時(shí)間和提高人體的生命質(zhì)量。讓人們?cè)谧銐蜷L的時(shí)間里保持好的精神狀態(tài)和美麗容顏,讓人類在現(xiàn)有生存條件下最大極限的長壽,這些確實(shí)是我們能夠做到的?,F(xiàn)代的生命科學(xué)家在長期的研究人體衰老過程中,提出了許許多多的“衰老理論”和“衰老模型學(xué)說”。

      中國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)對(duì)延年益壽的研究,有著悠久的歷史、珍貴的文獻(xiàn)記載和豐富的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)?!渡褶r(nóng)本草經(jīng)》記述了有關(guān)抗衰老藥物,是抗衰老藥物最早最寶貴的文獻(xiàn)。漢魏六朝至唐代,抗衰老的醫(yī)藥研究,進(jìn)一步受到重視,大醫(yī)學(xué)家孫思邈強(qiáng)調(diào)抗衰老應(yīng)以補(bǔ)法、食療為主,亦為延緩衰老作出了寶貴的貢獻(xiàn),直至明朝,偉大的醫(yī)藥學(xué)家李時(shí)珍總結(jié)了明萬歷以前傳統(tǒng)抗衰老藥物的經(jīng)驗(yàn),他所著的《本草綱目》收藏了延年益壽藥物253種,還選錄了延年益壽方89首。其中有些方劑至今仍被用作老年保健品,同時(shí),他還推崇抗衰老藥物亦應(yīng)辨證使用和提倡用無毒動(dòng)植物藥,古人的經(jīng)驗(yàn)為現(xiàn)代抗衰老研究提供了寶貴的資料。新中國成立后,特別自20世紀(jì)70年代以來,我國老年醫(yī)學(xué)崛起,隨著中醫(yī)、中西醫(yī)結(jié)合對(duì)老年醫(yī)學(xué)研究的逐步深入,抗衰老藥物的研究日益受到重視,各地醫(yī)藥工作者對(duì)抗衰老復(fù)方藥物的研究方興未艾。當(dāng)前,我國即將步入老齡化社會(huì),深入研究抗衰老復(fù)方藥物,必將有利于我國“健康的老齡化”目標(biāo)的實(shí)現(xiàn)。

      現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明,衰老的本質(zhì)是干細(xì)胞的衰退、免疫力的下降、組織器官功能的退化、抗衰老基因的衰退;因此,科學(xué)家認(rèn)為要提高人體的免疫力,最根本的辦法是延緩人體的衰老過程。追求長生不老,延緩生命,是人類幾千年來的夢想,人類科學(xué)家仍長期不懈地研究有關(guān)人類長壽的課題。隨著現(xiàn)代基因技術(shù)的發(fā)展,科學(xué)家仿佛揭開了人類衰老之謎,種種抗衰老藥物層出不窮花樣繁多,其作用可見一斑。它雖不能讓人類長生不老,卻能使人健康長壽,也算是讓神話變?yōu)楝F(xiàn)實(shí)。事實(shí)上,隨著人類抗衰老醫(yī)學(xué)的發(fā)展,科學(xué)家們已經(jīng)揭示出這樣一個(gè)全新的觀念:人類的衰老并非不可抗拒,人體的衰老本身是一種疾病。進(jìn)而科學(xué)家也找到了預(yù)防和治療人類衰老的藥物。臨床實(shí)踐也表明,通過治療,人體的衰老過程不僅可以延緩而且可以逆轉(zhuǎn)。細(xì)胞對(duì)人來講就意味著生命,細(xì)胞的生老病死也是人體漸衰的一個(gè)過程。細(xì)胞的生長靠得是分裂,一旦細(xì)胞的分裂速度減緩就預(yù)示著新生細(xì)胞的減少,那就是人人都害怕的衰老的開始,所以防止衰老的根本最終歸結(jié)到細(xì)胞。今天,人們利用羊胚胎素內(nèi)的活性細(xì)胞幫助老化的細(xì)胞恢復(fù)活性,加快人體細(xì)胞的分裂,從而使新生細(xì)胞數(shù)目增加。

      據(jù)生物科學(xué)家考證,生物細(xì)胞分裂的次數(shù)與壽命是成正比的,比如,海豚的細(xì)胞分裂次數(shù)是80次,它的平均壽命則可達(dá)150歲。而人體衰老的原因正是肌體生命最基本的組成單位--細(xì)胞出現(xiàn)了衰變。隨著年齡的增大,細(xì)胞再生的分裂越來越慢,積聚的老化細(xì)胞使器官的機(jī)能不斷下降,發(fā)生老化甚至病變,人也隨之日益衰老。

      仙茅(學(xué)名:Curculigo orchioides Gaertn.),又名地棕(四川、貴州),獨(dú)茅(四川),山黨參(福建),仙茅參(云南),海南參(海南),茅爪子,婆羅門參,屬仙茅科,花期4~9月。藥用植物,具有補(bǔ)腎助陽、益精血、強(qiáng)筋骨和行血消腫的作用。仙茅能溫腎陽壯;祛除寒濕。主陽萎精冷;小便失禁;脘腹冷痛;腰膝酸痛;筋骨軟弱;下肢拘攣;更年期綜合征。

      仙茅的藥理作用

      對(duì)免疫功能作用

      1、對(duì)巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響:給小鼠灌服仙茅70%醇浸劑10,20g/kg,每天1次,連續(xù)7天,于給藥后第5天分別腹腔注射0.4%肝糖原2ml,而于末次給藥后1小時(shí),腹腔注射2%雞紅血球懸液1ml,2小時(shí)后處死小鼠。按文獻(xiàn)(張?zhí)N芬等,北京醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)1979)法測定吞噬功能。結(jié)果表明仙茅可使小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬百分?jǐn)?shù)與吞噬指數(shù),均比對(duì)照組明顯增加。

      2、對(duì)正常及免疫功能抑制小鼠T淋巴細(xì)胞百分率的影響:采用酯酶法(南京鐵道醫(yī)學(xué)院組胚教研室中華醫(yī)學(xué)雜志1980)測定小鼠T淋巴細(xì)胞百分率。結(jié)果證明,仙茅不能提高正常小鼠T淋巴細(xì)胞百分率,但對(duì)環(huán)磷酰胺所致免疫功能受抑制小鼠的T淋巴細(xì)胞的降低有明顯的作用。

      3、仙茅水提物有促進(jìn)抗體生成并延長其功效,仙茅甙促進(jìn)巨噬細(xì)胞增生并提高其吞噬功能,可認(rèn)為有增強(qiáng)免疫功能。

      對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的作用

      1、對(duì)戊巴比妥鈉睡眠時(shí)間的影響:給小鼠腹腔注射仙茅醇浸劑10g/kg后30分鐘,腹腔注射戊巴比妥鈉40mg/kg,記錄小鼠睡眠時(shí)間,結(jié)果給藥組與對(duì)照組(生理鹽水)小鼠的平均睡眠時(shí)間分別為304.9±24.2與63.4±11.6(分鐘)。證明仙茅有明顯延長睡眠時(shí)間作用(P<0.001)。

      2、對(duì)印防己毒素致驚厥作用的影響:給小鼠腹腔注射仙茅后30分鐘,再腹腔注射印防己毒素200mg/kg,記錄小鼠出現(xiàn)陣攣性驚厥的潛伏時(shí)間。結(jié)果表明,仙茅組和對(duì)照組出現(xiàn)驚厥的潛伏時(shí)間分別為24.38±3.78與7.57±0.63分鐘,兩組間差異非常顯著(P<0.001)。說明仙茅對(duì)印防己毒素所致小鼠驚厥,能明顯推遲其出現(xiàn)驚厥的潛伏期。

      3、仙茅所含的石堿,給予大鼠腹腔注射5mg/kg,可顯著延長其條件反射的潛伏期,使陽性條件反射部分消失而后恢復(fù),給小鼠注射2mg/kg,有顯著的鎮(zhèn)靜作用,劑量為12mg/kg可延長戊巴比妥的催眠時(shí)間,并有顯著的鎮(zhèn)痛和解熱作用。

      對(duì)下丘腦-垂體-性腺軸功能的作用

      1、對(duì)正常大白鼠垂體-卵巢內(nèi)分泌功能的影響:用正常雌性大白鼠35只,體重150~200g,隨機(jī)分為8組:仙茅組、菟絲子組、巴戟天組、熟地組、肉蓯蓉組、淫羊藿組、枸杞子組和對(duì)照組。藥物組(煎液)以灌胃給藥,按1ml/100g體重,每日2次,連服5天。對(duì)照組灌胃同量生理鹽水。第6天處理動(dòng)物,在戊巴比妥鈉麻醉下,由腹主動(dòng)脈取血1ml,分離血漿,留作血漿黃體生成素(LH)測定。摘出垂體前葉、子宮和卵巢并稱重,將卵巢立即投入冰凍之Tris-Hcl緩沖液中留作測定絨毛膜促性腺激素/黃體生成素受體。結(jié)果表明,仙茅等助陽補(bǔ)腎中藥能使大白鼠垂體前葉重量、卵巢重量、子宮重量比對(duì)照組明顯增重(P<0.01);但血漿中黃體生成素水平未見改變;卵巢絨毛膜促性腺激素/黃體生成素受體特異結(jié)合力服藥組比對(duì)照組也明顯提高(P<0.01)。

      2、對(duì)去卵巢大白鼠垂體對(duì)促黃體釋放激素反應(yīng)性的影響:實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)參照J(rèn)ohnson JH和Davis CL(1981)的方法。取35只成年健康雌性大白鼠,體重150~200g,在乙醚麻醉下切除雙側(cè)卵巢。1周后,隨機(jī)分為8組,7組為相應(yīng)各服藥組,1組為對(duì)照組。每日灌胃給藥2次,按1ml/100g體重,連服5天;對(duì)照組服同量生理鹽水。第6天上午8點(diǎn),用戊巴比妥鈉皮下注射麻醉(50mg/kg),30分鐘后,由腹腔靜脈抽血0.4ml(肝素抗凝),然后由隱靜脈注射D-丙-促黃體釋放激素(100ng/100g體重)。在注射促黃體釋放激素后30分鐘和90分鐘,由腹腔靜脈各取血0.4ml。離心分離3次,所取血樣之血漿留作黃體生成素測定,以判定垂體對(duì)注射促黃體釋放激素后黃體生成素分泌反應(yīng)。結(jié)果表明,各組動(dòng)物在戊巴比妥鈉麻醉下,血漿黃體生成素水平很低。注射了D-丙-促黃體釋放激素后,對(duì)照組動(dòng)物在30分鐘時(shí)血漿黃體生成素水平增加到22.25ng/ml,90分鐘時(shí)為18.50ng/ml。而服仙茅等助陽補(bǔ)腎中藥的大白鼠,垂體對(duì)注射促黃體釋放激素后黃體生成素分泌反應(yīng)明顯增加,注射后90分鐘時(shí)血漿黃體生成素水平仙茅組為55.90ng/ml,比對(duì)照組明顯增高(P<0.01)。

      雄性激素樣作用

      取體重為60-90g的雄性大鼠16只,切除兩側(cè)睪丸,手術(shù)后第7天,分為2組,分別灌胃仙茅70%醇浸劑10g/kg與生理鹽水,每天1次,連續(xù)21天。于末次給藥后的次日,處死動(dòng)物,剖出精囊腺稱重。結(jié)果仙茅組與對(duì)照組大鼠的精囊腺重分別為0.116±0.009與0.0679±0.003mg/g體重,有顯著差異(P<0.01)。說明仙茅有雄性激素樣作用。

      適應(yīng)原樣作用

      1、耐缺氧作用:給小鼠灌胃仙茅70%醇浸劑20和40g/kg,1小時(shí)后,將小鼠置于250ml帶塞廣口瓶中,密封瓶口,記錄各組小鼠的存活時(shí)間。結(jié)果仙茅醇浸劑20g/kg、40g/kg組與對(duì)照組小鼠的存活時(shí)間分別為28.8±1.14、33.6±1.19和26.8±0.77(分鐘,X±SE)。仙茅40g/kg有明顯的抗缺氧作用(P<0.001)。

      2、抗高溫作用:給小鼠腹腔注射仙茅70%醇浸劑10g/kg,30分鐘后,將其置于45±1℃的恒溫箱內(nèi),以藥物組與對(duì)照組小鼠的總數(shù)死亡一半為界,記錄各組小鼠死亡率。結(jié)果仙茅組的20只小鼠中死亡5只(死亡率力25%),而對(duì)照組20只小鼠中,死亡14只(死亡率為70%),兩組間差別顯著(P<0.05)。說明仙茅有抗高溫作用。

      抗炎作用

      給小鼠腹腔注射仙茅70%醇浸劑10g/kg,可的松50mg/kg及生理鹽水,給藥后30分鐘以巴豆油致炎。結(jié)果仙茅組、可的松組與對(duì)照組小鼠耳片腫脹度分別為9.25±1.23mg、4.1±1.35mg與14±1.04mg。表明仙茅對(duì)小鼠實(shí)驗(yàn)性炎癥有明顯的抑制作用(P<0.05)。

      對(duì)紅細(xì)胞膜Na(+)、K(+)-ATP酶活性的作用

      給小鼠灌胃12%的仙茅等補(bǔ)益中藥的水煎液6g/kg,每天1次,連續(xù)10天。對(duì)照組給予等容積的水。測定酶活性。結(jié)果表明仙茅等補(bǔ)益藥均可升高Na(+)、K(+)-ATP酶的活性。

      抗菌作用

      100%煎劑用平板挖溝法,對(duì)史氏、福氏、宋氏痢疾桿菌有抑制作用。

      抗腫瘤作用

      仙茅的丙酮提取物對(duì)艾氏腹水癌實(shí)體型瘤有抑制作用。石蒜堿能抑制小鼠腹水癌細(xì)胞的無氧酵解,但不影響其氣化有呼吸,由于癌細(xì)胞一般以無氧醇解為能量的主要來源,可認(rèn)為仙茅對(duì)癌細(xì)胞的糖代謝有一定干擾功效。

      其他作用

      仙茅水提取液可擴(kuò)張冠脈,強(qiáng)心。給緩性心律失常家兔靜脈注射6g/kg,可顯著增加心率,使突變細(xì)胞數(shù)顯著下降,使嘌呤系統(tǒng)轉(zhuǎn)化酶活性抑制約20%,使膽囊收縮素抑制約80%,使甲狀腺機(jī)能減退,病人血清的環(huán)-磷酸腺苷水平降低者回升,環(huán)-磷酸鳥苷水平升高者回降,環(huán)-磷酸腺苷/環(huán)-磷酸鳥苷比值趨于正常。給大鼠腹腔注射石蒜堿6mg/kg,可增加尿酸排泄,對(duì)小鼠腎臟琥珀酸脫氫酶有顯著抑制作用,輕度降壓,抗實(shí)驗(yàn)性關(guān)節(jié)炎。

      中藥氣味清苦,口感不佳;很多人不愿服用;讓人使用時(shí)也產(chǎn)生抗拒心理。怎么把五味子抗衰老的功效發(fā)揮到最大又不傷害人體,并且明顯改善口感,使人能接受,是我們迫切需要解決的問題。五味子里面含有大量安全有效的抗衰老的成分,中藥抗衰具有無毒、能被生物體完全吸收的優(yōu)點(diǎn),是我們研究的主要方向。



      技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:

      本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于,中藥氣味清苦,口感不佳;很多人不愿服用;讓人使用時(shí)也產(chǎn)生抗拒心理。鑒于中醫(yī)具有辯證論治的特色,中藥有毒副作用小的優(yōu)勢,中藥保健治療引起廣泛關(guān)注。仙茅用于老年人延緩衰老等,故為治療老年病的有效藥物。該品能提高體力,消除疲勞,改善智力及提高工作效率。老年人隨增齡而腎精漸虛,體力日衰,腦力減退,本發(fā)明補(bǔ)腎精改善腦力,故能益智強(qiáng)身,而實(shí)驗(yàn)研究表明仙茅在泌尿生殖系統(tǒng)有一定的抗衰老作用。因此,仙茅是一味對(duì)延緩衰老有益并能治療某些老年病的有效藥物。

      本發(fā)明以仙茅為主料,加入一些滋補(bǔ)肝腎,性味平和的中藥,明顯改善口感,針對(duì)中藥氣味清苦,口感不佳,使用不方便,做出很大的改善,具有很強(qiáng)的市場前景;諸藥合用補(bǔ)肺金、滋腎水、斂肺氣、止咳喘,補(bǔ)腎精、改善腦力,故能益智強(qiáng)身,對(duì)泌尿生殖系統(tǒng)有一定的抗衰老作用,是一種延緩衰老的保健品。

      為解決上述技術(shù)問題,本發(fā)明提供一種延緩衰老的仙茅保健口服液,其所述口服液可以包括以下重量份數(shù)的原料藥:仙茅10~50份,覆盆子10~20份,熟地10~20份,五味子10~20份,當(dāng)歸10~20份,三七10~20份,刺五加10~20份,石斛10~20份,制首烏10~20份,山茱萸10~20份,玉竹10~20份,菟絲子10~20份,益母草10~20份,黃芪10~20份,黨參10~20份,桑葚10~20份,遠(yuǎn)志10~20份,丹皮10~20份,絞股藍(lán)10~20份,紅景天10~20份,枸杞子10~20份。

      所述延緩衰老的仙茅保健口服液,其所述口服液原料藥的重量份數(shù)還可以為:仙茅10~30份,覆盆子10~15份,熟地10~15份,五味子10~15份,當(dāng)歸10~15份,三七10~15份,刺五加10~15份,石斛10~15份,制首烏10~15份,山茱萸10~15份,玉竹10~15份,菟絲子10~20份,益母草10~15份,黃芪10~20份,黨參10~20份,桑葚10~20份,遠(yuǎn)志10~20份,丹皮10~20份,絞股藍(lán)10~20份,紅景天10~20份,枸杞子10~20份。

      所述延緩衰老的仙茅保健口服液,其所述口服液原料藥的重量份數(shù)也可以為:仙茅10~40份,覆盆子10~20份,熟地10~20份,五味子10~20份,當(dāng)歸10~20份,三七10~20份,刺五加10~20份,石斛10~20份,制首烏10~20份,山茱萸10~20份,玉竹10~20份,菟絲子10~20份,益母草10~20份,黃芪10~15份,黨參10~15份,桑葚10~15份,遠(yuǎn)志10~15份,丹皮10~15份,絞股藍(lán)10~15份,紅景天10~15份,枸杞子10~15份。

      為解決上述技術(shù)問題,本發(fā)明還提供一種延緩衰老的仙茅保健口服液的制備方法,其所述保健口服液的制備步驟包括:

      a.仙茅的萃取,作為組分1;

      b.將所述其余原料藥放入乙醇中加熱回流提取2次,作為組分2;

      c.將上述兩種提取液組分1和組分2合并,濃縮后加糊精調(diào)和,消毒殺菌后制備成保健口服液劑。

      所述步驟a中,可以將采集的仙茅切碎,將其浸泡置于有蓋不銹鋼桶內(nèi),加70%乙醇液,質(zhì)量為粗顆粒的0.8-1倍,攪拌均勻,濕潤密閉放置1小時(shí)以上,使充分膨脹;將滲漉筒底部濾板用紗布袋包裹鋪平后再將濕潤膨脹后的藥物樣品拌松弄散,然后用不銹鋼勺盛粉,均勻的裝入滲漉筒,裝10-12厘米厚,用T型棒壓勻,再按上述操作,一層一層的裝入,適當(dāng)加壓,藥粉填裝不得超過滲漉筒的2/3高處;藥粉面上蓋不銹鋼孔板壓牢,打開滲漉筒下面的放料閥,并放一容器,然后緩緩加入70%乙醇液;待排出藥粉粉粒之間的空氣,并有乙醇流出約20L左右,關(guān)閉放料閥,蓋上漉筒、浸漬24小時(shí),然后開放料閥進(jìn)行滲漉,控制滲漉速度一般為1000g藥材每分鐘流出2~3ml,濾液放入貯液缸內(nèi),并將排空時(shí)的乙醇液倒入貯液缸;將滲濾液合并靜置,靜置備用,作為組分1。

      所述步驟b中,可以將其余原料泡入10倍量乙醇中10-15天后,加熱提取2次,每次1-2小時(shí),去上清液,合并提取液,100-110目濾過,再經(jīng)截流分子量為6000-10000的超濾柱超濾,超濾液減壓濃縮相對(duì)密度為80℃時(shí)1.36的浸膏,加熱濃縮至膏狀,靜置備用,成組分2。

      所述步驟c中,可以將上述步驟提取的提取液,放入雙效真空濃縮器中混合,先將濾液濃縮至80℃時(shí)相對(duì)密度為1.32的濃縮液,置0~5℃低溫冷藏24小時(shí);將冷藏液加0.3%的助濾劑硅藻土,過濾,濾液再置入雙效真空濃縮器中,濃縮至每1ml含0.1g浸膏,加糊精調(diào)和,消毒殺菌后制備成保健口服液劑。

      為解決上述技術(shù)問題,本發(fā)明也提供一種延緩衰老的仙茅保健口服液的制備方法,其制備步驟還可以為:

      a.仙茅的制備,作為組分1;

      b.將所述其余原料藥切碎提取作為組分2;

      c.將組分1和組分2混合,濃縮后加適量蜂蜜調(diào)和,紫外線消毒殺菌后裝瓶。

      所述步驟a中,可以將采集的仙茅泡入10倍量乙醇中10-15天后,加熱提取2次,每次1-2小時(shí),去上清液,合并提取液,100-110目濾過,再經(jīng)截流分子量為6000-10000的超濾柱超濾,超濾液減壓濃縮相對(duì)密度為80℃時(shí)1.36的浸膏,加熱濃縮至膏狀,靜置備用,成組分1。

      所述步驟b中,可以將其余原料藥材混合,切碎過100~120目篩,過篩后細(xì)粉備用,粗顆粒放入耐酸堿浸漬鍋,在室溫下,與70度以上乙醇一起浸漬15~30天,然后加熱回流提取2次,每次1~2小時(shí),將2次提取液合并靜置,過濾,分離后取濾液;用紗布過濾,殘?jiān)屑尤?0-60%乙醇,60℃-70℃繼續(xù)浸提2h,每10min攪拌一次,紗布過濾,合并浸提液,濃縮成糊狀成為組分2。

      本發(fā)明將現(xiàn)代營養(yǎng)學(xué)理論與傳統(tǒng)中醫(yī)藥養(yǎng)生保健理論有機(jī)結(jié)合,鑒于中醫(yī)具有辯證論治的特色,中藥有毒副作用小的優(yōu)勢,中藥保健治療引起廣泛關(guān)注。本發(fā)明能提高體力,消除疲勞,改善智力及提高工作效率。老年人隨增齡而腎精漸虛,體力日衰,腦力減退,仙茅補(bǔ)腎精改善腦力,故能益智強(qiáng)身,而實(shí)驗(yàn)研究表明仙茅在泌尿生殖系統(tǒng)有一定的抗衰老作用。因此,仙茅是一味對(duì)延緩衰老有益并能治療某些老年病的有效藥物。

      具體實(shí)施方式

      中國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)對(duì)延年益壽的研究,有著悠久的歷史、珍貴的文獻(xiàn)記載和豐富的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。《神農(nóng)本草經(jīng)》記述了有關(guān)抗衰老藥物,是抗衰老藥物最早最寶貴的文獻(xiàn)。漢魏六朝至唐代,抗衰老的醫(yī)藥研究,進(jìn)一步受到重視,大醫(yī)學(xué)家孫思邈強(qiáng)調(diào)抗衰老應(yīng)以補(bǔ)法、食療為主,亦為延緩衰老作出了寶貴的貢獻(xiàn),直至明朝,偉大的醫(yī)藥學(xué)家李時(shí)珍總結(jié)了明萬歷以前傳統(tǒng)抗衰老藥物的經(jīng)驗(yàn),他所著的《本草綱目》收藏了延年益壽藥物253種,還選錄了延年益壽方89首。其中有些方劑至今仍被用作老年保健品,同時(shí),他還推崇抗衰老藥物亦應(yīng)辨證使用和提倡用無毒動(dòng)植物藥,古人的經(jīng)驗(yàn)為現(xiàn)代抗衰老研究提供了寶貴的資料。新中國成立后,特別自20世紀(jì)70年代以來,我國老年醫(yī)學(xué)崛起,隨著中醫(yī)、中西醫(yī)結(jié)合對(duì)老年醫(yī)學(xué)研究的逐步深入,抗衰老藥物的研究日益受到重視,各地醫(yī)藥工作者對(duì)抗衰老復(fù)方藥物的研究方興未艾。當(dāng)前,我國即將步入老齡化社會(huì),深入研究抗衰老復(fù)方藥物,必將有利于我國“健康的老齡化”目標(biāo)的實(shí)現(xiàn)。

      仙茅的藥理作用

      對(duì)免疫功能作用

      1、對(duì)巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響:給小鼠灌服仙茅70%醇浸劑10,20g/kg,每天1次,連續(xù)7天,于給藥后第5天分別腹腔注射0.4%肝糖原2ml,而于末次給藥后1小時(shí),腹腔注射2%雞紅血球懸液1ml,2小時(shí)后處死小鼠。按文獻(xiàn)(張?zhí)N芬等,北京醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)1979)法測定吞噬功能。結(jié)果表明仙茅可使小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬百分?jǐn)?shù)與吞噬指數(shù),均比對(duì)照組明顯增加。

      2、對(duì)正常及免疫功能抑制小鼠T淋巴細(xì)胞百分率的影響:采用酯酶法(南京鐵道醫(yī)學(xué)院組胚教研室中華醫(yī)學(xué)雜志1980)測定小鼠T淋巴細(xì)胞百分率。結(jié)果證明,仙茅不能提高正常小鼠T淋巴細(xì)胞百分率,但對(duì)環(huán)磷酰胺所致免疫功能受抑制小鼠的T淋巴細(xì)胞的降低有明顯的作用。

      3、仙茅水提物有促進(jìn)抗體生成并延長其功效,仙茅甙促進(jìn)巨噬細(xì)胞增生并提高其吞噬功能,可認(rèn)為有增強(qiáng)免疫功能。

      對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的作用

      1、對(duì)戊巴比妥鈉睡眠時(shí)間的影響:給小鼠腹腔注射仙茅醇浸劑10g/kg后30分鐘,腹腔注射戊巴比妥鈉40mg/kg,記錄小鼠睡眠時(shí)間,結(jié)果給藥組與對(duì)照組(生理鹽水)小鼠的平均睡眠時(shí)間分別為304.9±24.2與63.4±11.6(分鐘)。證明仙茅有明顯延長睡眠時(shí)間作用(P<0.001)。

      2、對(duì)印防己毒素致驚厥作用的影響:給小鼠腹腔注射仙茅后30分鐘,再腹腔注射印防己毒素200mg/kg,記錄小鼠出現(xiàn)陣攣性驚厥的潛伏時(shí)間。結(jié)果表明,仙茅組和對(duì)照組出現(xiàn)驚厥的潛伏時(shí)間分別為24.38±3.78與7.57±0.63分鐘,兩組間差異非常顯著(P<0.001)。說明仙茅對(duì)印防己毒素所致小鼠驚厥,能明顯推遲其出現(xiàn)驚厥的潛伏期。

      3、仙茅所含的石堿,給予大鼠腹腔注射5mg/kg,可顯著延長其條件反射的潛伏期,使陽性條件反射部分消失而后恢復(fù),給小鼠注射2mg/kg,有顯著的鎮(zhèn)靜作用,劑量為12mg/kg可延長戊巴比妥的催眠時(shí)間,并有顯著的鎮(zhèn)痛和解熱作用。

      對(duì)下丘腦-垂體-性腺軸功能的作用

      1、對(duì)正常大白鼠垂體-卵巢內(nèi)分泌功能的影響:用正常雌性大白鼠35只,體重150~200g,隨機(jī)分為8組:仙茅組、菟絲子組、巴戟天組、熟地組、肉蓯蓉組、淫羊藿組、枸杞子組和對(duì)照組。藥物組(煎液)以灌胃給藥,按1ml/100g體重,每日2次,連服5天。對(duì)照組灌胃同量生理鹽水。第6天處理動(dòng)物,在戊巴比妥鈉麻醉下,由腹主動(dòng)脈取血1ml,分離血漿,留作血漿黃體生成素(LH)測定。摘出垂體前葉、子宮和卵巢并稱重,將卵巢立即投入冰凍之Tris-Hcl緩沖液中留作測定絨毛膜促性腺激素/黃體生成素受體。結(jié)果表明,仙茅等助陽補(bǔ)腎中藥能使大白鼠垂體前葉重量、卵巢重量、子宮重量比對(duì)照組明顯增重(P<0.01);但血漿中黃體生成素水平未見改變;卵巢絨毛膜促性腺激素/黃體生成素受體特異結(jié)合力服藥組比對(duì)照組也明顯提高(P<0.01)。

      2、對(duì)去卵巢大白鼠垂體對(duì)促黃體釋放激素反應(yīng)性的影響:實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)參照J(rèn)ohnson JH和Davis CL(1981)的方法。取35只成年健康雌性大白鼠,體重150~200g,在乙醚麻醉下切除雙側(cè)卵巢。1周后,隨機(jī)分為8組,7組為相應(yīng)各服藥組,1組為對(duì)照組。每日灌胃給藥2次,按1ml/100g體重,連服5天;對(duì)照組服同量生理鹽水。第6天上午8點(diǎn),用戊巴比妥鈉皮下注射麻醉(50mg/kg),30分鐘后,由腹腔靜脈抽血0.4ml(肝素抗凝),然后由隱靜脈注射D-丙-促黃體釋放激素(100ng/100g體重)。在注射促黃體釋放激素后30分鐘和90分鐘,由腹腔靜脈各取血0.4ml。離心分離3次,所取血樣之血漿留作黃體生成素測定,以判定垂體對(duì)注射促黃體釋放激素后黃體生成素分泌反應(yīng)。結(jié)果表明,各組動(dòng)物在戊巴比妥鈉麻醉下,血漿黃體生成素水平很低。注射了D-丙-促黃體釋放激素后,對(duì)照組動(dòng)物在30分鐘時(shí)血漿黃體生成素水平增加到22.25ng/ml,90分鐘時(shí)為18.50ng/ml。而服仙茅等助陽補(bǔ)腎中藥的大白鼠,垂體對(duì)注射促黃體釋放激素后黃體生成素分泌反應(yīng)明顯增加,注射后90分鐘時(shí)血漿黃體生成素水平仙茅組為55.90ng/ml,比對(duì)照組明顯增高(P<0.01)。

      雄性激素樣作用

      取體重為60-90g的雄性大鼠16只,切除兩側(cè)睪丸,手術(shù)后第7天,分為2組,分別灌胃仙茅70%醇浸劑10g/kg與生理鹽水,每天1次,連續(xù)21天。于末次給藥后的次日,處死動(dòng)物,剖出精囊腺稱重。結(jié)果仙茅組與對(duì)照組大鼠的精囊腺重分別為0.116±0.009與0.0679±0.003mg/g體重,有顯著差異(P<0.01)。說明仙茅有雄性激素樣作用。

      適應(yīng)原樣作用

      1、耐缺氧作用:給小鼠灌胃仙茅70%醇浸劑20和40g/kg,1小時(shí)后,將小鼠置于250ml帶塞廣口瓶中,密封瓶口,記錄各組小鼠的存活時(shí)間。結(jié)果仙茅醇浸劑20g/kg、40g/kg組與對(duì)照組小鼠的存活時(shí)間分別為28.8±1.14、33.6±1.19和26.8±0.77(分鐘,X±SE)。仙茅40g/kg有明顯的抗缺氧作用(P<0.001)。

      2、抗高溫作用:給小鼠腹腔注射仙茅70%醇浸劑10g/kg,30分鐘后,將其置于45±1℃的恒溫箱內(nèi),以藥物組與對(duì)照組小鼠的總數(shù)死亡一半為界,記錄各組小鼠死亡率。結(jié)果仙茅組的20只小鼠中死亡5只(死亡率力25%),而對(duì)照組20只小鼠中,死亡14只(死亡率為70%),兩組間差別顯著(P<0.05)。說明仙茅有抗高溫作用。

      抗炎作用

      給小鼠腹腔注射仙茅70%醇浸劑10g/kg,可的松50mg/kg及生理鹽水,給藥后30分鐘以巴豆油致炎。結(jié)果仙茅組、可的松組與對(duì)照組小鼠耳片腫脹度分別為9.25±1.23mg、4.1±1.35mg與14±1.04mg。表明仙茅對(duì)小鼠實(shí)驗(yàn)性炎癥有明顯的抑制作用(P<0.05)。

      對(duì)紅細(xì)胞膜Na(+)、K(+)-ATP酶活性的作用

      給小鼠灌胃12%的仙茅等補(bǔ)益中藥的水煎液6g/kg,每天1次,連續(xù)10天。對(duì)照組給予等容積的水。測定酶活性。結(jié)果表明仙茅等補(bǔ)益藥均可升高Na(+)、K(+)-ATP酶的活性。

      抗菌作用

      100%煎劑用平板挖溝法,對(duì)史氏、福氏、宋氏痢疾桿菌有抑制作用。

      抗腫瘤作用

      仙茅的丙酮提取物對(duì)艾氏腹水癌實(shí)體型瘤有抑制作用。石蒜堿能抑制小鼠腹水癌細(xì)胞的無氧酵解,但不影響其氣化有呼吸,由于癌細(xì)胞一般以無氧醇解為能量的主要來源,可認(rèn)為仙茅對(duì)癌細(xì)胞的糖代謝有一定干擾功效。

      茯苓味甘、淡、性平,入藥具有利水滲濕、益脾和胃、寧心安神之功用?,F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究:茯苓能增強(qiáng)機(jī)體免疫功能,茯苓多糖有明顯的抗腫瘤及保肝臟作用。茯苓性味甘淡平,入心、肺、脾經(jīng)。具有滲濕利水,健脾和胃,寧心安神的功效??芍涡”悴焕[脹滿,痰飲咳逆,嘔逆,惡阻,泄瀉,遺精,淋濁,驚悸,健忘等癥。茯苓之利水,是通過健運(yùn)脾肺功能而達(dá)到的,與其它直接利水的中藥不同。用于脾虛泄瀉,帶下茯苓既能健脾,又能滲濕,對(duì)于脾虛運(yùn)化失常所致泄瀉、帶下,應(yīng)用茯苓有標(biāo)本兼顧之效,常與黨參、白術(shù)、山藥等配伍。有可用為補(bǔ)肺脾,治氣虛之輔佐藥。

      山茱萸,主治心下邪氣寒熱,溫中,逐寒溫痹,去三蟲,久服輕身有強(qiáng)陰益精、安五臟、通九竅、止小便淋瀝之功;久服明目、強(qiáng)力長年。山茱萸,又名山芋肉、藥棗、實(shí)棗兒、棗皮、肉棗等,為我國常用名貴中藥材,應(yīng)用歷史悠久。它以其補(bǔ)力平和、壯陽而不助火,滋陰而不膩膈,收斂而不留邪等特殊功效被歷代醫(yī)學(xué)所喜用。張仲景以山茱萸為君創(chuàng)制了“金匱腎氣丸”。據(jù)化學(xué)分析,山茱萸含有生理活性較強(qiáng)的山茱萸甙、酒石酸、沒食子酸、蘋果酸、樹酯、鞣質(zhì)和多種維生素等有效成分,具有增強(qiáng)免疫、抗炎、抗菌等藥理作用,是中醫(yī)臨床中常用的一味藥。

      熟地又名熟地黃或伏地,屬玄參科植物,是一種上好中藥材,具有補(bǔ)血滋陰功效,可用于血虛萎黃,眩暈,心悸失眠,月經(jīng)不調(diào),崩漏等癥,亦可用于腎陰不足的潮熱骨蒸、盜汗、遺精、消渴等癥,是虛證類非處方藥藥品六味地黃丸主要成分之一。肝腎陰虛諸證,本品質(zhì)潤入腎,善滋補(bǔ)腎陰,填精益髓,為補(bǔ)腎陰之要藥。古人謂之“大補(bǔ)五臟真陰”,“大補(bǔ)真水”。常與山藥、山茱萸等同用,治療肝腎陰虛,腰膝酸軟、遺精、盜汗、耳鳴、耳聾及消渴等,可補(bǔ)肝腎,益精髓,如六味地黃丸

      天花粉為葫蘆科植物栝蔞的根,是一種中藥,為清熱瀉火類藥物,其具體功效是清熱瀉火,生津止渴,排膿消腫。主治:治熱病口渴、消渴、黃疸、肺燥咳血、癰腫、痔痿。對(duì)于治療糖尿病,常用它與滋陰藥配合使用,以達(dá)到標(biāo)本兼治的作用?!侗静輩R言》:天花粉,退五臟郁熱,如心火盛而舌干口燥,肺火盛而咽腫喉痹,脾火盛而口舌齒腫,痰火盛而咳嗽不寧。若肝火之脅脹走注,腎火之骨蒸煩熱,或癰疽已潰未潰,而熱毒不散,或五疸身目俱黃,而小水若淋若澀,是皆火熱郁結(jié)所致,惟此劑能開郁結(jié),降痰火,并能治之。又其性甘寒,善能治渴,從補(bǔ)藥而治虛渴,從涼藥而治火渴,從氣藥而治郁渴,從血藥而治煩渴,乃治渴之要藥也。

      黃精:黃精以根莖入藥。具有補(bǔ)氣養(yǎng)陰,健脾,潤肺,益腎功能。用于治療脾胃虛弱,體倦乏力,口干食少,肺虛燥咳,精血不足,內(nèi)熱消渴等癥。對(duì)于糖尿病很有療效。黃精具有降血壓,降血糖,降血脂,防止動(dòng)脈粥樣硬化,延緩衰老和抗菌等作用,黃精多糖具有免疫激活作用。用于陰虛肺燥,干咳少痰,及肺腎陰虛的勞嗽久咳等。用于脾胃虛弱。既補(bǔ)脾陰,又益脾氣,用于腎虛精虧得頭暈,腰膝酸軟,須發(fā)早白及消渴等。黃精壯筋骨,益精髓,變白發(fā);適宜用于肺陰不足所致的咳嗽痰少,干咳無痰,咳血等癥。

      玉竹:滋陰潤肺;養(yǎng)胃生津。燥咳;勞嗽;熱病陰液耗傷之咽干口渴;內(nèi)熱消渴;陰虛外感;頭昏眩暈;筋脈攣痛。玉竹味甘多脂,質(zhì)柔而潤,是一味養(yǎng)陰生津的良藥。玉竹中所含的維生素A,改善干裂、粗糙的皮膚狀況,使之柔軟潤滑。起到美容護(hù)膚的作用?!侗静萁?jīng)集注》云“莖干強(qiáng)直,似竹箭桿,有節(jié)?!惫视杏裰裰V参锏母o可供藥用,中藥名亦為玉竹,秋季采挖,洗凈,曬至柔軟后,反復(fù)揉搓,晾曬至無硬心,曬干,或蒸透后,揉至半透明,曬干,切厚片或段用?!侗静菡x》:“治肺胃燥熱,津液枯涸,口渴嗌干等癥,而胃火熾盛,燥渴消谷,多食易饑者,尤有捷效”。

      益母草味辛苦、涼。活血、祛淤、調(diào)經(jīng)、消水。治療婦女月經(jīng)不調(diào),胎漏難產(chǎn),胞衣不下,產(chǎn)后血暈,瘀血腹痛,崩中漏下,尿血、瀉血,癰腫瘡瘍。益母草含益母草堿、延胡索酸等物質(zhì),有活血調(diào)經(jīng)、降血壓、利尿消腫等作用。

      覆盆子溫;甘、酸;歸腎、膀胱經(jīng)。用于益腎,固精,縮尿。治療腎虛遺尿,小便頻數(shù),陽痿早泄,遺精滑精。《藥性論》:″主男子腎精虛竭,女子食之有子。主陰痿。″《日華子本草》:″安五臟,益顏色,養(yǎng)精氣,長發(fā),強(qiáng)志。療中風(fēng)身熱及驚。″《開寶本草》載其:″補(bǔ)虛續(xù)絕,強(qiáng)陰建陽,悅澤肌膚,安和臟腑,溫中益力,療勞損風(fēng)虛,補(bǔ)肝明目?!濉侗静萁?jīng)疏》:″覆盆子,其主益氣者,言益精氣也。腎藏精、腎納氣,精氣充足,則身自輕,發(fā)不白也。蘇恭主補(bǔ)虛續(xù)絕,強(qiáng)陰建陽,悅澤肌膚,安和臟腑。甄權(quán)主男子腎精虛竭,陰痿,女子食之有子。大明主安五臟,益顏色,養(yǎng)精氣,長發(fā),強(qiáng)志。皆取其益腎添精,甘酸收斂之義耳。″《本草通玄》:覆盆子,甘平入腎,起陽治痿,固精攝溺,強(qiáng)腎而無燥熱之偏,固精而無疑澀之害,金玉之品也。

      制首烏是將生首烏與黑豆同煮后曬干的首烏,是一味補(bǔ)肝腎、益精血、養(yǎng)心寧神的良藥。主要用于治療因肝腎不足、精血虧損而引起的腰膝酸軟、頭暈眼花、心悸失眠、頭發(fā)早白等癥。何首烏的烏發(fā)功能是通過補(bǔ)腎、益精、養(yǎng)血寧神的作用發(fā)揮出來的。制首烏具有補(bǔ)益精血,養(yǎng)肝安神,強(qiáng)筋骨,固腎烏須,用于血虛而見頭昏目眩,心悸失眠健忘,萎黃乏力,肝腎精血虧虛的眩暈耳鳴,腰膝酸軟,遺精崩帶,須發(fā)早白等癥。當(dāng)歸

      石斛:益胃生津,滋陰清熱。用于陰傷津虧,口干煩渴,食少干嘔,病后虛熱,目暗不明。石斛是有名的養(yǎng)陰類中藥,其甘寒氣清,能清肺熱,養(yǎng)胃陰,生腎水,益精氣,退虛熱,為養(yǎng)陰清熱、益胃生津要藥。同時(shí)它清相火而攝元?dú)?,滋腎水而柔肝陰,在《神農(nóng)本草經(jīng)》中被列為上品。對(duì)免疫功能的影響:小鼠灌服金釵石斛水煎液0.5mg/只,共6日,對(duì)腹腔巨噬細(xì)胞的功能有明顯促進(jìn)作用,但不能改善大劑量氫考所造成的巨噬細(xì)胞功能低下。此外,還有抗衰老,升血糖及微弱的止痛退熱作用。

      丹參苦,微寒。歸心、肝經(jīng)。祛瘀止痛,活血通經(jīng),清心除煩。用于月經(jīng)不調(diào),經(jīng)閉痛經(jīng),癥瘕積聚,胸腹刺痛,熱痹疼痛,瘡瘍腫痛,心煩不眠。用于胸肋脅痛,風(fēng)濕痹痛,癥瘕結(jié)塊,瘡瘍腫痛,跌仆傷痛,月經(jīng)不調(diào),經(jīng)閉痛經(jīng),產(chǎn)后瘀痛等。治療胸肋疼痛、癥瘕結(jié)塊,以及月經(jīng)不調(diào)、經(jīng)閉經(jīng)痛具有良效?!毒V目》載:丹參,按《婦人明理論》云,四物湯治婦人病,不問產(chǎn)前產(chǎn)后,經(jīng)水多少,皆可通用,惟一味丹參散,主治與之相同。蓋丹參能破宿血,補(bǔ)新血,安生胎,落死胎,止崩中滯下,調(diào)經(jīng)脈。丹參主要成分丹參酮有擴(kuò)張血管、改善循環(huán)、解除血管內(nèi)凝血等作用,具有活血化痕之功效,并能促進(jìn)肝臟血液循環(huán),利于肝細(xì)胞再生。

      黃芪具有補(bǔ)氣固表、利水退腫、托毒排膿、生肌等功效。黃芪的藥用迄今已有2000多年的歷史,現(xiàn)代研究,黃芪含皂甙、蔗糖、多糖、多種氨基酸、葉酸及硒、鋅、銅等多種微量元素。有增強(qiáng)機(jī)體免疫功能、保肝、利尿、抗衰老、抗應(yīng)激、降壓和較廣泛的抗菌作用。但表實(shí)邪盛,氣滯濕阻,食積停滯,癰疽初起或潰后熱毒尚盛等實(shí)證。黃芪具有補(bǔ)氣固表,利尿托毒,排膿,斂瘡生肌的功效。用于氣虛乏力,食少便溏,中氣下陷,久瀉脫肛,便血崩漏,表虛自汗,癰疽難潰,久潰不斂,血虛萎黃,內(nèi)熱消渴?!侗窘?jīng)》記載:“主癰疽,久敗瘡,排膿止痛。補(bǔ)虛,小兒百病?!薄度杖A子本草》記載:“助氣壯筋骨,長肉補(bǔ)血?!?/p>

      黨參為中國常用的傳統(tǒng)補(bǔ)益藥,古代以山西上黨地區(qū)出產(chǎn)的黨參為上品,具有補(bǔ)中益氣,健脾益肺之功效。現(xiàn)代研究,黨參含多種糖類、酚類、甾醇、揮發(fā)油、黃芩素葡萄糖甙、皂甙及微量生物堿,具有增強(qiáng)免疫力、擴(kuò)張血管、降壓、改善微循環(huán)、增強(qiáng)造血功能等作用。此外對(duì)化療放療引起的白細(xì)胞下降有提升作用。黨參具有補(bǔ)中益氣,健脾益肺的功效。用于脾肺虛弱,氣短心悸,食少便溏,虛喘咳嗽,內(nèi)熱消渴等?!侗静輳男隆酚涊d:“補(bǔ)中益氣、和脾胃、除煩渴。中氣微弱,用以調(diào)補(bǔ),甚為平妥?!?/p>

      女貞子,味甘苦、性涼,歸肝腎經(jīng),具有滋補(bǔ)肝腎、益陰養(yǎng)血之功。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證明,女貞子內(nèi)含熊果酸、甘露醇、葡萄糖、脂肪油等,有強(qiáng)心、利尿和保肝作用,能使因化療引起的白細(xì)胞下降數(shù)量升高,并對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌有抑制作用。女貞子中含有齊墩果酸女貞子酸、女貞苷、熊果酸、硬脂酸、油酸、甘露醇、白樺脂醇、磷脂以及糖類如女貞子多糖、阿拉伯糖、葡萄糖等,還含有15種氨基酸,11種微量元素及揮發(fā)油等。研究認(rèn)為女貞子有降血糖及降血脂并有抗動(dòng)脈粥樣硬化作用,還有抗菌、抗病毒作用,女貞子煎劑對(duì)金黃色葡萄球菌、福氏痢疾桿菌、傷寒桿菌、綠膿桿菌和大腸桿菌均有抑制作用。對(duì)B型腺病毒有中等度抑制作用。升高白細(xì)胞:女貞子及其成分制劑對(duì)血細(xì)胞均有一定影響,它對(duì)因化療所致白細(xì)胞下降有升高作用。含女貞子的復(fù)方也有升白細(xì)胞作用??寡ㄗ饔茫糊R墩果酸可加快血小板細(xì)胞的流動(dòng)性,減弱了血小板之間的碰撞,使之不易粘連和聚集,更不易在血管內(nèi)膜沉積,減緩或防止血栓形成,又可降低脂質(zhì)內(nèi)膜的沉積,為防治老年人的血栓性疾病提供了部分實(shí)驗(yàn)依據(jù)??顾ダ咸岣呙庖吡Γ号懽蛹鍎┛墒剐∈竺庖咂鞴傩叵?、脾臟重量增加;明顯提高小鼠血清溶血素抗體活性,對(duì)小鼠脾淋巴細(xì)胞產(chǎn)生白介素-2的影響具有雙向調(diào)節(jié)作用。女貞子具有顯著的免疫增強(qiáng)作用,清除自由基從而抗衰老。應(yīng)用女貞子防治:心血管疾病、冠心病、高脂血癥、糖尿病、血小板減少癥、白細(xì)胞減少癥,慢性腎炎、慢性支氣管炎、頑固性失眠、慢性苯中毒、腫瘤、營養(yǎng)不良、免疫功能低下癥、脂溢性皮炎

      桑葚滋陰養(yǎng)血藥;生津藥;潤腸藥。補(bǔ)血滋陰,生津潤燥。用于眩暈耳鳴,心悸失眠,須發(fā)早白,津傷口渴,內(nèi)熱消渴,血虛便秘。補(bǔ)肝,益腎,熄風(fēng),滋液。治肝腎陰虧,消渴,便秘,目暗,耳鳴,瘰疬,關(guān)節(jié)不利。既可入食,又可入藥,中醫(yī)認(rèn)為桑葚味甘酸,性微寒,入心、肝、腎經(jīng),為滋補(bǔ)強(qiáng)壯、養(yǎng)心益智佳果。具有補(bǔ)血滋陰,生津止渴,潤腸燥等功效,主治陰血不足而致的頭暈?zāi)垦?,耳鳴心悸,煩躁失眠,腰膝酸軟,須發(fā)早白,消渴口干,大便干結(jié)等癥。

      遠(yuǎn)志性溫,味苦、辛,具有安神益智、祛痰、消腫的功能,用于心腎不交引起的失眠多夢、健忘驚悸,神志恍惚,咳痰不爽,瘡瘍腫毒,乳房腫痛?!渡褶r(nóng)本草經(jīng)》:主咳逆?zhèn)?,補(bǔ)不足,除邪氣,利九竅,益智慧,耳目聰明,不忘,強(qiáng)志倍力?!侗静菥V目》:遠(yuǎn)志,入足少陰腎經(jīng),非心經(jīng)藥也。其功專于強(qiáng)志益精,治善忘。蓋精與志,皆腎經(jīng)之所藏也。腎經(jīng)不足,則志氣衰,不能上通于心,故迷惑善忘?!鹅`樞經(jīng)》云,腎藏精,精合志,腎盛怒而不止則傷志,志傷則喜忘其前言,腰脊不可以俯仰屈伸,毛悴色夭。又云,人之善忘者,上氣不足,下氣有余,腸胃實(shí)而心肺虛,虛則營衛(wèi)留于下,久之,不以時(shí)上,故善忘也。陳言《三因方》遠(yuǎn)志酒治癰疽,云有奇功,蓋亦補(bǔ)腎之力爾。

      丹皮性寒,味苦;涼;微寒。歸心;肝;腎;肺經(jīng)。清熱涼血;活血散瘀。溫?zé)岵崛胙郑话l(fā)斑;吐衄;熱病后期熱伏陰分發(fā)熱;陰虛骨蒸潮熱;血滯經(jīng)閉;痛經(jīng);癰腫瘡毒;跌撲傷痛;風(fēng)濕熱痹。給小鼠分別灌胃牡牡丹皮,牡丹皮酚、芍藥甙、氧化芍藥甙、苯甲酰芍藥甙,均能促進(jìn)靜脈注射的碳粒在血中的廓清速度,即使單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)功能處于低下狀態(tài)也有促進(jìn)作用,顯微鏡檢查見肝中枯氏細(xì)胞及脾中巨噬細(xì)胞吞噬力增強(qiáng)。芍藥甙、氧化芍藥甙在體外亦能增強(qiáng)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞對(duì)乳液的吞噬功能。牡丹皮液給小鼠腹腔注射能使其脾臟溶血后斑數(shù)增加。用牡丹皮酚給小鼠腹腔注射每大25mg/kg,連用6天,能使脾重明顯增加,且可對(duì)抗考的松、環(huán)磷酰胺所致胸腺重量的減輕。由上可見牡牡丹皮對(duì)體液及細(xì)胞免疫均有增強(qiáng)作用?!侗静萁?jīng)疏》:牡丹皮,其味苦而微辛,其氣寒而無毒,辛以散結(jié)聚,苦寒除血熱,入血分,涼血熱之要藥也。寒熱者,陰虛血熱之候也。中風(fēng)瘛疭、痙、驚癇,皆陰虛內(nèi)熱,營血不足之故。熱去則血涼,涼則新血生、陰氣復(fù),陰氣復(fù)則火不炎而無因熱生風(fēng)之證矣,故悉主之。

      當(dāng)歸,其味甘而重,故專能補(bǔ)血,其氣輕而辛,故又能行血,補(bǔ)中有動(dòng),行中有補(bǔ),誠血中之氣藥,亦血中之圣藥。大約佐之以補(bǔ)則補(bǔ),故能養(yǎng)營養(yǎng)血,補(bǔ)氣生精,安五臟,強(qiáng)形體,益神志,凡有形虛損之病,無所不宜。佐之以攻則通,故能祛痛通便,利筋骨,治拘攣、癱瘓、燥、澀等證。營虛而表不解者,佐以柴、葛、麻、桂等劑,大能散表衛(wèi)熱,而表不斂者,佐以大黃之類,又能固表。惟其氣辛而動(dòng),故欲其靜者當(dāng)避之,性滑善行,大便不固者當(dāng)避之。凡陰中火盛者,當(dāng)歸能動(dòng)血,亦非所宜,陰中陽虛者,當(dāng)歸能養(yǎng)血,乃不可少。

      三七甘、微苦,溫,歸肝、胃經(jīng)。功效散瘀止血,消腫定痛。主治用于咯血,吐血,衄血,便血,崩漏,外傷出血,胸腹刺痛,跌撲腫痛?!侗静菥V目》:止血散血定痛,金刃箭傷、跌撲杖瘡、血出不止者,嚼爛涂,或?yàn)槟街?,其血即止。亦主吐血衄血,下血血痢,崩中?jīng)水不止,產(chǎn)后惡血不下,血運(yùn)血痛,赤目癰腫,虎咬蛇傷諸病?!侗静萸笳妗罚簩H敫挝?。兼入心大腸。又名山漆。時(shí)珍曰。或云能合金瘡。如漆粘物也。

      刺五加,拉丁學(xué)名:Eleutherococcus senticosus,別名:刺拐棒、坎拐棒子、一百針、老虎潦、五加參、俄國參、西伯利亞人參,落葉灌木,根皮祛風(fēng)濕、強(qiáng)筋骨,泡酒制五加皮酒(或制成五加皮散)。根皮含揮發(fā)油、鞣質(zhì)、棕桐酸、亞麻仁油酸、維生素A,B1。史料記載見于《神農(nóng)本草經(jīng)》,列為上品。上品乃指無毒,久服可以輕身、延年益壽而無害。刺五加自古即被視為具有添精補(bǔ)髓及抗衰老作用的良藥。商品名為五加參,原主產(chǎn)于黑龍江省山區(qū),地方土名習(xí)稱“老虎潦”,在日本則稱為蝦夷五加,而在前蘇聯(lián)又稱為西伯利亞人參。明朝李時(shí)珍《本草綱目》稱刺五加,以五葉交加者良,故名五加,又名五花。五加治風(fēng)濕,壯筋骨,其功良深,寧得一把五加,不用金玉滿車,又“文章作酒,能成其味,以金買草,不言其貴”之說,對(duì)五加做了很高的贊譽(yù)。《名醫(yī)別錄》認(rèn)為五加有「補(bǔ)中,益精,堅(jiān)筋骨,強(qiáng)意志」等功效。刺五加于《實(shí)用補(bǔ)養(yǎng)中藥一書》中記載,屬于補(bǔ)氣藥,具有補(bǔ)虛扶弱的功效,可來預(yù)防或治療體質(zhì)虛弱之癥候,滋補(bǔ)強(qiáng)壯,延年益壽。

      枸杞:甘,平。枸杞葉:苦、甘;性涼。功能:枸杞子:養(yǎng)肝,滋腎,潤肺。枸杞葉:補(bǔ)虛益精,清熱明目。枸杞多糖是一種水溶性多糖,是枸杞中最主要的活性成分,相對(duì)分子質(zhì)量為68-200,成為國內(nèi)外研究熱點(diǎn)。其中又以枸杞多糖的免疫調(diào)節(jié)和抗腫瘤作用的研究最多。現(xiàn)已有很多研究表明枸杞多糖具有促進(jìn)免疫、抗衰老、抗腫瘤、清除自由基、抗疲勞、抗輻射、保肝、生殖功能保護(hù)和改善等作用。

      絞股藍(lán),又稱:天堂草、福音草、超人參、公羅鍋底、遍地生根、七葉膽、五葉參和七葉參等,拉丁文名:Gynostemmapentaphyllum(Thunb.)Makino葫蘆科、絞股藍(lán)屬草質(zhì)攀援植物;莖細(xì)弱,具分枝,具縱棱及槽,無毛或疏被短柔毛,生長在南方的絞股藍(lán)藥用含量比較高,民間稱其為神奇的“不老長壽藥草”,絞股藍(lán)主要有效成份是絞股藍(lán)皂甙、絞股藍(lán)糖甙(多糖)、水溶性氨基酸、黃酮類、多種維生素、微量元素、礦物質(zhì)等。作用功效:降血脂,調(diào)血壓防治血栓,防治心血管疾患,調(diào)節(jié)血糖,促睡眠,緩衰老,防抗癌,提高免疫力,調(diào)節(jié)人體生理機(jī)能。絞股藍(lán)能保護(hù)腎上腺和胸腺及內(nèi)分泌器官隨年齡的增長而不致萎縮,維持內(nèi)分泌系統(tǒng)的機(jī)能,并具有降血糖和改善糖代謝作用。

      紅景天(學(xué)名:Rhodiola rosea L.),別名:薔薇紅景天,掃羅瑪布爾(藏名)等;為多年生草本植物,高10-20厘米。根粗壯,圓錐形,肉質(zhì),褐黃色,根頸部具多數(shù)須根,根莖短,粗狀,圓柱形,被多數(shù)覆瓦狀排列的鱗片狀的葉。[1]生長在海拔1800-2500米高寒無污染地帶,其生長環(huán)境惡劣,因而具有很強(qiáng)的生命力和特殊的適應(yīng)性??勺魉幱?,能夠補(bǔ)氣清肺,益智養(yǎng)心,是一味作用廣泛的中藥。亦有很大的美容效果,可作護(hù)膚品,也可食用。性味:寒、甘、澀。歸經(jīng):肺經(jīng)。功能主治:有補(bǔ)氣清肺、益智養(yǎng)心、收澀止血、散瘀消腫的功效。主治氣虛體弱、病后畏寒、氣短乏力、肺熱咳嗽、咯血、白帶腹瀉、跌打損傷等。中國古代第一部醫(yī)學(xué)典籍《神農(nóng)本草經(jīng)》,將紅景天列為藥中上品,服用紅景天輕身益氣,不老延年,無毒多服,久服不傷人。能補(bǔ)腎,理氣養(yǎng)血,主治周身乏力、胸悶等;還具有活血止血、清肺止咳、解熱,并止帶下的功效。

      本發(fā)明具體實(shí)施方式

      具體實(shí)施例1:秋天選取成熟度高,比較壯實(shí)的仙茅;分選時(shí),選出其中的雜質(zhì),泥土石塊,用振動(dòng)篩和水洗槽進(jìn)行分選;篩凈灰屑,除去雜質(zhì),置蒸籠內(nèi)蒸透,取出曬干。

      將晾曬好的仙茅切碎,大約5000g將其浸泡置于有蓋不銹鋼桶內(nèi),加70%乙醇液,質(zhì)量為粗顆粒的0.8-1倍,攪拌均勻,濕潤密閉放置1小時(shí)以上,使充分膨脹;將滲漉筒底部濾板用紗布袋包裹鋪平后再將濕潤膨脹后的藥物樣品拌松弄散,然后用不銹鋼勺盛粉,均勻的裝入滲漉筒,裝10-12厘米厚,用T型棒壓勻,再按上述操作,一層一層的裝入,適當(dāng)加壓,藥粉填裝不得超過滲漉筒的2/3高處;藥粉面上蓋不銹鋼孔板壓牢,打開滲漉筒下面的放料閥,并放一容器,然后緩緩加入70%乙醇液;待排出藥粉粉粒之間的空氣,并有乙醇流出約20L左右,關(guān)閉放料閥,蓋上漉筒、浸漬24小時(shí),然后開放料閥進(jìn)行滲漉,控制滲漉速度一般為1000g藥材每分鐘流出2~3ml,濾液放入貯液缸內(nèi),并將排空時(shí)的乙醇液倒入貯液缸;將滲濾液合并靜置,靜置備用,作為組分1。

      將其余原料藥覆盆子1000g,熟地1000g,五味子1000g,當(dāng)歸1000g,三七1000g,刺五加1000g,石斛1000g,制首烏1000g,山茱萸1000g,玉竹1000g,菟絲子1000g,益母草1000g,黃芪1000g,黨參1000g,桑葚1000g,遠(yuǎn)志1000g,丹皮1000g,絞股藍(lán)1000g,紅景天1000g,枸杞子1000g,放入10倍量乙醇中,浸泡10天以上,加熱提取2次,每次1-2小時(shí),合并提取液,靜置后去上清液,然后放入減壓濃縮罐內(nèi),減壓回收乙醇,抽濾至濾液的相對(duì)密度為80℃時(shí)1.36的浸膏,成為組分2。

      將組分1和組分2合并后置入雙效真空濃縮器中,先將濾液濃縮至80℃時(shí)相對(duì)密度為1.32的濃縮液,置0~5℃低溫冷藏24小時(shí);將冷藏液加0.3%的助濾劑硅藻土,過濾,濾液再置入雙效真空濃縮器中,濃縮至每1ml含0.1g浸膏,濃縮后的膏劑加蜂蜜調(diào)和,紫外線消毒殺菌后裝瓶。

      具體實(shí)施例2:秋天選仙茅曬干。將晾曬好的仙茅4000g泡入10倍量乙醇中15天,加熱提取2次,每次1-2小時(shí),去上清液,合并提取液,100-120目濾過,再經(jīng)截流分子量為6000-10000的超濾柱超濾,超濾液減壓濃縮相對(duì)密度為80℃時(shí)1.36的浸膏,加熱濃縮至膏狀,靜置備用,成組分1。將覆盆子1000g,熟地1000g,五味子1000g,當(dāng)歸1000g,三七1000g,刺五加1000g,石斛1000g,制首烏1000g,山茱萸1000g,玉竹1000g,菟絲子1000g,益母草1000g,黃芪1000g,黨參1000g,桑葚1000g,遠(yuǎn)志1000g,丹皮1000g,絞股藍(lán)1000g,紅景天1000g,枸杞子1000g,放入10倍量乙醇中,浸泡15天,然后加熱提取2次,每次1-2小時(shí),合并提取液,靜置后去上清液,然后放入減壓濃縮罐內(nèi),減壓回收乙醇,濃縮至藥液濃度為0.6g生藥/mL,抽濾至濾液的相對(duì)密度為20℃時(shí)1.06的浸膏,成為組分2。將組分1和組分2合并后置入雙效真空濃縮器中,濃縮至90℃時(shí)相對(duì)密度為1.05的濃縮液,濃縮后的膏劑加糊精調(diào)和,紫外線消毒殺菌后裝瓶。

      具體實(shí)施例3:將晾曬好的仙茅切碎,大約5000g將其浸泡置于有蓋不銹鋼桶內(nèi),加70%乙醇液,質(zhì)量為粗顆粒的0.8-1倍,攪拌均勻,濕潤密閉放置1小時(shí)以上,使充分膨脹;將滲漉筒底部濾板用紗布袋包裹鋪平后再將濕潤膨脹后的藥物樣品拌松弄散,然后用不銹鋼勺盛粉,均勻的裝入滲漉筒,裝10-12厘米厚,用T型棒壓勻,再按上述操作,一層一層的裝入,適當(dāng)加壓,藥粉填裝不得超過滲漉筒的2/3高處;藥粉面上蓋不銹鋼孔板壓牢,打開滲漉筒下面的放料閥,并放一容器,然后緩緩加入70%乙醇液;待排出藥粉粉粒之間的空氣,并有乙醇流出約20L左右,關(guān)閉放料閥,蓋上漉筒、浸漬24小時(shí),然后開放料閥進(jìn)行滲漉,控制滲漉速度一般為1000g藥材每分鐘流出2~3ml,濾液放入貯液缸內(nèi),并將排空時(shí)的乙醇液倒入貯液缸;將滲濾液合并靜置,靜置備用,作為組分1。將覆盆子1100g,熟地1200g,五味子1200g,當(dāng)歸1200g,三七1200g,刺五加1100g,石斛1200g,制首烏1200g,山茱萸1200g,玉竹1200g,菟絲子1200g,益母草1100g,黃芪1100g,黨參1100g,桑葚1200g,遠(yuǎn)志1200g,丹皮1200g,絞股藍(lán)1100g,紅景天1100g,枸杞子1100g,將其余原料藥材混合,切碎過100~120目篩,過篩后細(xì)粉備用,粗顆粒放入耐酸堿浸漬鍋,在室溫下,與70度以上乙醇一起浸漬15~30天,然后加熱回流提取2次,每次1~2小時(shí),將2次提取液合并靜置,過濾,分離后取濾液;用紗布過濾,殘?jiān)屑尤?0-60%乙醇,60℃-70℃繼續(xù)浸提2h,每10min攪拌一次,紗布過濾,合并浸提液,濃縮成糊狀成為組分2。將組分1和組分2合并后置入雙效真空濃縮器中,濃縮至90℃時(shí)相對(duì)密度為1.05的濃縮液,置0~5℃低溫冷藏24小時(shí);將冷藏液加0.3%的助濾劑硅藻土,過濾,濾液再置入雙效真空濃縮器中,濃縮至每1ml含0.1g生藥量;濃縮后的膏劑加糊精調(diào)和,紫外線消毒殺菌后裝瓶。

      藥理學(xué)毒性試驗(yàn)

      實(shí)驗(yàn)例1:本發(fā)明急性毒性試驗(yàn)

      一、試驗(yàn)材料:動(dòng)物:昆明種小鼠,體重18-25g,雌雄各半,山東大學(xué)生物試驗(yàn)室育種。藥物:本發(fā)明(所有原材料混合煎煮2次,合并過濾,取藥液)含0.0365mg/ml。

      二、方法:

      1、LD50計(jì)算:采用改良寇氏法,將小鼠隨機(jī)分成5組,每組10只,雌雄各半,將本發(fā)明加蒸餾水溶解,配成最大濃度,按小鼠最大允許容量給藥,所給劑量按生藥量依次為18,14.4,11.5,9.2,7.4(g.kg-1),在動(dòng)物禁食(不禁水)18小時(shí)后,一日內(nèi)分兩次給藥(間隔半小時(shí)),每次0.5ml,觀察動(dòng)物死亡情況。

      2、最大耐受劑量測定(MTD值):取小鼠20只,雌雄各10只。將本發(fā)明加蒸餾水溶解,配成最高濃度,按動(dòng)物的最大耐受量,以注射灌喂器能抽動(dòng)為準(zhǔn)。在動(dòng)物禁食(不禁水)18小時(shí)后,一日內(nèi)分兩次給藥(間隔半小時(shí)),每次0.5ml(每ml含生藥0.36g),總藥量為18g生藥/kg.d,相當(dāng)臨床成人50Kg體重用量的300倍。給藥后連續(xù)觀察7天。

      三、試驗(yàn)結(jié)果:

      在LD50計(jì)算中當(dāng)用最大允許濃度和最大允許容量給予小鼠時(shí)(18g/Kg.d),未見小鼠死亡,即未測出LD50,只可求最大耐受劑量,在7天觀察期中,動(dòng)物其食欲、活動(dòng)、毛色、精神狀態(tài)等皆正常,發(fā)育正常,未見有死亡。即選用相當(dāng)于臨床劑量的300倍藥量,并無不良反應(yīng)發(fā)生,表明急性毒性極小,MTD>18g/Kg.d。

      實(shí)驗(yàn)例2:急性毒性及長期毒性的試驗(yàn)結(jié)果

      急性毒性試驗(yàn):通過小白鼠一次性灌胃給予本發(fā)明,最高濃度35%,最大灌胃容量0.4ml/10g,劑量14g/kg(每g藥粉相當(dāng)于10g生藥),連續(xù)觀察7天,未發(fā)現(xiàn)任何毒性反應(yīng),因濃度和劑量無法增加,故未能測出該藥的LD 50。最大耐受量測定:以最高濃度,最大灌胃容量,小白鼠灌胃給藥3次,間隔5小時(shí),然后連續(xù)觀察7天,無一例死亡。藥粉劑量為>42g/kg.日(每g藥粉相當(dāng)于10g生藥),按公斤體重計(jì)算相當(dāng)于成人臨床日用量的420倍。

      長期毒性試驗(yàn):為觀察長期用藥是否產(chǎn)生毒性反應(yīng),分別給予大鼠本發(fā)明飼服,按成人臨床日用量的70倍和35倍(即7g/kg/日和3.5g/kg/日),連續(xù)給喂8周,未見大鼠的行為、進(jìn)食、體重出現(xiàn)異常,與對(duì)照組比,血常規(guī),肝腎功能,各種重要臟器均無異常改變,在所用藥劑量范圍內(nèi),未曾發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的任何毒副反應(yīng)。通過動(dòng)物的急慢性毒性試驗(yàn)證實(shí),本發(fā)明安全范圍較大,是一種安全可靠的保健品。

      藥效學(xué)實(shí)驗(yàn):

      對(duì)免疫功能作用

      1、對(duì)巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響:給小鼠灌服仙茅70%醇浸劑10,20g/kg,每天1次,連續(xù)7天,于給藥后第5天分別腹腔注射0.4%肝糖原2ml,而于末次給藥后1小時(shí),腹腔注射2%雞紅血球懸液1ml,2小時(shí)后處死小鼠。按文獻(xiàn)(張?zhí)N芬等,北京醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)1979)法測定吞噬功能。結(jié)果表明仙茅可使小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬百分?jǐn)?shù)與吞噬指數(shù),均比對(duì)照組明顯增加。

      2、對(duì)正常及免疫功能抑制小鼠T淋巴細(xì)胞百分率的影響:采用酯酶法(南京鐵道醫(yī)學(xué)院組胚教研室中華醫(yī)學(xué)雜志1980)測定小鼠T淋巴細(xì)胞百分率。結(jié)果證明,仙茅不能提高正常小鼠T淋巴細(xì)胞百分率,但對(duì)環(huán)磷酰胺所致免疫功能受抑制小鼠的T淋巴細(xì)胞的降低有明顯的作用。

      3、仙茅水提物有促進(jìn)抗體生成并延長其功效,仙茅甙促進(jìn)巨噬細(xì)胞增生并提高其吞噬功能,可認(rèn)為有增強(qiáng)免疫功能。

      對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的作用

      1、對(duì)戊巴比妥鈉睡眠時(shí)間的影響:給小鼠腹腔注射仙茅醇浸劑10g/kg后30分鐘,腹腔注射戊巴比妥鈉40mg/kg,記錄小鼠睡眠時(shí)間,結(jié)果給藥組與對(duì)照組(生理鹽水)小鼠的平均睡眠時(shí)間分別為304.9±24.2與63.4±11.6(分鐘)。證明仙茅有明顯延長睡眠時(shí)間作用(P<0.001)。

      2、對(duì)印防己毒素致驚厥作用的影響:給小鼠腹腔注射仙茅后30分鐘,再腹腔注射印防己毒素200mg/kg,記錄小鼠出現(xiàn)陣攣性驚厥的潛伏時(shí)間。結(jié)果表明,仙茅組和對(duì)照組出現(xiàn)驚厥的潛伏時(shí)間分別為24.38±3.78與7.57±0.63分鐘,兩組間差異非常顯著(P<0.001)。說明仙茅對(duì)印防己毒素所致小鼠驚厥,能明顯推遲其出現(xiàn)驚厥的潛伏期。

      3、仙茅所含的石堿,給予大鼠腹腔注射5mg/kg,可顯著延長其條件反射的潛伏期,使陽性條件反射部分消失而后恢復(fù),給小鼠注射2mg/kg,有顯著的鎮(zhèn)靜作用,劑量為12mg/kg可延長戊巴比妥的催眠時(shí)間,并有顯著的鎮(zhèn)痛和解熱作用。

      對(duì)下丘腦-垂體-性腺軸功能的作用

      1、對(duì)正常大白鼠垂體-卵巢內(nèi)分泌功能的影響:用正常雌性大白鼠35只,體重150~200g,隨機(jī)分為8組:仙茅組、菟絲子組、巴戟天組、熟地組、肉蓯蓉組、淫羊藿組、枸杞子組和對(duì)照組。藥物組(煎液)以灌胃給藥,按1ml/100g體重,每日2次,連服5天。對(duì)照組灌胃同量生理鹽水。第6天處理動(dòng)物,在戊巴比妥鈉麻醉下,由腹主動(dòng)脈取血1ml,分離血漿,留作血漿黃體生成素(LH)測定。摘出垂體前葉、子宮和卵巢并稱重,將卵巢立即投入冰凍之Tris-Hcl緩沖液中留作測定絨毛膜促性腺激素/黃體生成素受體。結(jié)果表明,仙茅等助陽補(bǔ)腎中藥能使大白鼠垂體前葉重量、卵巢重量、子宮重量比對(duì)照組明顯增重(P<0.01);但血漿中黃體生成素水平未見改變;卵巢絨毛膜促性腺激素/黃體生成素受體特異結(jié)合力服藥組比對(duì)照組也明顯提高(P<0.01)。

      2、對(duì)去卵巢大白鼠垂體對(duì)促黃體釋放激素反應(yīng)性的影響:實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)參照J(rèn)ohnson JH和Davis CL(1981)的方法。取35只成年健康雌性大白鼠,體重150~200g,在乙醚麻醉下切除雙側(cè)卵巢。1周后,隨機(jī)分為8組,7組為相應(yīng)各服藥組,1組為對(duì)照組。每日灌胃給藥2次,按1ml/100g體重,連服5天;對(duì)照組服同量生理鹽水。第6天上午8點(diǎn),用戊巴比妥鈉皮下注射麻醉(50mg/kg),30分鐘后,由腹腔靜脈抽血0.4ml(肝素抗凝),然后由隱靜脈注射D-丙-促黃體釋放激素(100ng/100g體重)。在注射促黃體釋放激素后30分鐘和90分鐘,由腹腔靜脈各取血0.4ml。離心分離3次,所取血樣之血漿留作黃體生成素測定,以判定垂體對(duì)注射促黃體釋放激素后黃體生成素分泌反應(yīng)。結(jié)果表明,各組動(dòng)物在戊巴比妥鈉麻醉下,血漿黃體生成素水平很低。注射了D-丙-促黃體釋放激素后,對(duì)照組動(dòng)物在30分鐘時(shí)血漿黃體生成素水平增加到22.25ng/ml,90分鐘時(shí)為18.50ng/ml。而服仙茅等助陽補(bǔ)腎中藥的大白鼠,垂體對(duì)注射促黃體釋放激素后黃體生成素分泌反應(yīng)明顯增加,注射后90分鐘時(shí)血漿黃體生成素水平仙茅組為55.90ng/ml,比對(duì)照組明顯增高(P<0.01)。

      雄性激素樣作用

      取體重為60-90g的雄性大鼠16只,切除兩側(cè)睪丸,手術(shù)后第7天,分為2組,分別灌胃仙茅70%醇浸劑10g/kg與生理鹽水,每天1次,連續(xù)21天。于末次給藥后的次日,處死動(dòng)物,剖出精囊腺稱重。結(jié)果仙茅組與對(duì)照組大鼠的精囊腺重分別為0.116±0.009與0.0679±0.003mg/g體重,有顯著差異(P<0.01)。說明仙茅有雄性激素樣作用。

      二、對(duì)免疫調(diào)節(jié)作用

      用現(xiàn)代免疫學(xué)理論和技術(shù),研究中藥對(duì)增強(qiáng)與調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能的作用,這對(duì)闡明有關(guān)中醫(yī)理論的物質(zhì)基礎(chǔ)有著十分重要的意義。本發(fā)明由仙茅等數(shù)種天然藥物經(jīng)科學(xué)配伍而成。已有的研究發(fā)現(xiàn),本發(fā)明口服液可調(diào)整機(jī)體各系統(tǒng)臟器的功能,對(duì)免疫細(xì)胞和免疫分子均有調(diào)節(jié)作用。現(xiàn)在以實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步探討本發(fā)明口服液對(duì)免疫力低下小鼠免疫調(diào)節(jié)作用的分子免疫學(xué)機(jī)制。

      1材料與方法

      1.1儀器與試劑本發(fā)明口服液由本院制劑科提供;主要原料有:仙茅,覆盆子,熟地,五味子,當(dāng)歸,三七,刺五加,石斛,制首烏,山茱萸,玉竹,菟絲子,益母草,黃芪,黨參,桑葚,遠(yuǎn)志,丹皮,絞股藍(lán),紅景天,枸杞子,用實(shí)施例2的方法制備。注射用環(huán)磷酰胺由上海華聯(lián)制藥有限公司提供。細(xì)胞因子檢測試劑盒均購于美國R&D公司。流式細(xì)胞儀,2000FCA,美國BD公司生產(chǎn)。

      1.2動(dòng)物昆明系雄性小鼠30只,6-8周,體重為23±2g,由山東大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司提供。

      1.3方法

      1.3.1動(dòng)物模型建立與分組將昆明系雄性小鼠隨機(jī)分為3組:空白對(duì)照組、模型組和藥物組,每組10只??瞻讓?duì)照組:實(shí)驗(yàn)進(jìn)程中正常飼養(yǎng)不作任何處理;模型組:腹腔內(nèi)注射100mg/kg環(huán)磷酰胺造成免疫力低下模型,1次/d,連續(xù)3天;藥物組:腹腔內(nèi)注射100mg/kg環(huán)磷酰胺造成免疫力低下模型,1次/d,連續(xù)3天,并在造模第一天在小鼠左脛前肌涂抹給藥,0.1mL/只,一周后加強(qiáng)免疫1次,劑量同第一次。4d后采集樣本。

      1.3.2小鼠免疫器官指數(shù)的測定小鼠稱量體重后,頸椎脫臼處死小鼠,取胸腺、脾臟稱其濕重,計(jì)算胸腺指數(shù)和脾指數(shù):

      胸腺指數(shù)=胸腺重×1000/體重

      脾指數(shù)=脾重×1000/體重

      1.3.3小鼠血清IgG,IgM水平的測定按試劑盒說明書方法,測定小鼠血清中IgG,IgM含量。

      1.3.4小鼠脾組織T淋巴細(xì)胞及其亞群CD4+,CD8+及CD4+/CD8+的測定無菌取脾,置于盛有適量無Hank’s液平皿中,用鑷子輕輕將脾磨碎,制成單個(gè)胞懸液,經(jīng)200目篩網(wǎng)過濾,將細(xì)胞懸浮于1mL的完全培養(yǎng)液中,調(diào)整細(xì)胞濃度1×109L-1,用微量移液器小心地將100μL充分混勻的脾細(xì)胞懸液加到進(jìn)樣管的底部,加20μL單克隆抗體,低速振蕩混勻3S,室溫避光孵育30min,于countler-PREP破碎紅細(xì)胞后,上流式細(xì)胞儀檢測T細(xì)胞亞群含量。

      1.3.5小鼠血清IFN-Y、IL-10水平的測定按試劑盒說明書方法,測定血清中IFN-Y、IL-10的水平。

      1.2統(tǒng)計(jì)學(xué)處理所有數(shù)值均以x±s表示,運(yùn)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,組間比較采用t檢驗(yàn)。以P<0.05作為統(tǒng)計(jì)顯著性差異標(biāo)準(zhǔn)。

      2結(jié)果

      2.1對(duì)免疫力低下小鼠免疫器官的影響由表1得出,與正常對(duì)照組相比,模型組脾臟和胸腺指數(shù)顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<0.01。與模型組比較,藥物組小鼠脾臟指數(shù)明顯增加,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<0.01,胸腺指數(shù)也有所增加,但差異不顯著。

      表1本發(fā)明對(duì)免疫力低下小鼠免疫器官重量的的影響(n=10,mean±S)

      與正常對(duì)照組比:△:P<0.05,△△:P<0.01;與模型組比:*:P<0.05,**:P<0.01

      2.2對(duì)免疫力低下小鼠脾組織T淋巴亞群的影響由表2看出,與正常對(duì)照組相比,模型組小鼠脾臟CD4+細(xì)胞亞群百分比下降,CD8+細(xì)胞亞群百分比上升,具有顯著差異,P<0.05,CD4+/CD8+比值明顯降低,具有極顯著性差異,P<0.01。而藥物組能明顯抵消環(huán)磷酰胺破壞免疫力的作用,具有顯著性差異,P<0.05。

      表2本發(fā)明對(duì)免疫力低下小鼠體液T細(xì)胞亞群的的影響(n=10,mean±SD)

      與正常對(duì)照組比:△P<0.05,△△P<0.05;與比模型組:*P<0.05,**P<0.05。

      胸腺、脾臟為機(jī)體的重要淋巴器官。胸腺是T細(xì)胞發(fā)育,分化,成熟的場地,其結(jié)構(gòu)及功能與機(jī)體狀態(tài)緊密相關(guān)。胸腺指數(shù)的降低以及胸腺萎縮,都是小鼠以細(xì)胞免疫為主的免疫抑制的表現(xiàn)。脾臟是體內(nèi)最大的外周免疫器官,脾臟的免疫細(xì)胞以B淋巴細(xì)胞為主,而B淋巴細(xì)胞是參與體液免疫的主要細(xì)胞,因此脾臟與機(jī)體體液免疫的關(guān)系密切。胸腺指數(shù)和脾指數(shù)直觀的反應(yīng)了免疫機(jī)體功能的強(qiáng)弱。本實(shí)驗(yàn)表明,本發(fā)明口服液對(duì)環(huán)磷酰胺所致免疫力低下小鼠脾臟的發(fā)育有促進(jìn)作用,對(duì)胸腺的發(fā)育也有一定的促進(jìn)作用。

      T淋巴細(xì)胞按其功能可分為CD4+和CD8+兩個(gè)亞群。CD4+T淋巴細(xì)胞在機(jī)體的免疫反應(yīng)中處于非常重要的中心地位,它通過分泌多種淋巴因子激活其他T、B細(xì)胞亞群及參與免疫反應(yīng)的其他細(xì)胞,使其增殖和分化,并協(xié)調(diào)免疫細(xì)胞間的相互作用,發(fā)揮機(jī)體免疫系統(tǒng)的功能。CD4+/CD8+的比值上升,提示免疫應(yīng)答的正調(diào)節(jié)占優(yōu)勢,而比值下降,提示免疫功能低下。

      本發(fā)明通過對(duì)外周血中T淋巴細(xì)胞亞群的測定,表明本發(fā)明能夠使環(huán)磷酰胺所致免疫力低下小鼠CD4+T淋巴細(xì)胞的百分含量升高,使CD4+/CD8+的比值上升,提示本發(fā)明對(duì)T淋巴細(xì)胞免疫系統(tǒng)起正調(diào)節(jié)作用。IgG、IgM水平則反映了體液免疫能力。本研究表明本發(fā)明促進(jìn)免疫力低下小鼠IgG、IgM分泌增加。說明本發(fā)明不但促進(jìn)了機(jī)體細(xì)胞免疫功能的增強(qiáng),同時(shí)對(duì)體液免疫也有促進(jìn)作用。

      本發(fā)明通過觀察本發(fā)明對(duì)多項(xiàng)免疫指標(biāo)的影響,證明本發(fā)明可提高環(huán)磷酰胺所致免疫力低下模型小鼠的體液免疫功能和細(xì)胞免疫功能,能夠糾正T淋巴細(xì)胞亞群的紊亂,使免疫力低下小鼠CD4+/CD8+比值提高至接近正常水平,促進(jìn)B細(xì)胞產(chǎn)生抗體,誘導(dǎo)干擾素分泌等,從而達(dá)到提高小鼠免疫功能的作用。

      現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明,衰老的本質(zhì)是干細(xì)胞的衰退、免疫力的下降、組織器官功能的退化、抗衰老基因的衰退;因此,科學(xué)家認(rèn)為要提高人體的免疫力,最根本的辦法是延緩人體的衰老過程。追求長生不老,延緩生命,是人類幾千年來的夢想,人類科學(xué)家仍長期不懈地研究有關(guān)人類長壽的課題。本實(shí)驗(yàn)從一個(gè)側(cè)面證實(shí),本發(fā)明能明顯提高免疫力水平,進(jìn)而能進(jìn)一步有效抵抗衰老。

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