本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體是涉及一種蔗糖鐵注射液及其制備方法。

背景技術(shù)：

蔗糖鐵注射液是靜脈注射的無菌、多核氫氧化鐵－蔗糖復(fù)合物溶液，是使用歷史最悠久的靜脈補(bǔ)鐵劑。蔗糖鐵是由氫氧化鐵膠體和蔗糖絡(luò)合制備的，是一種水溶性的氫氧化鐵蔗糖復(fù)合物，其包含的鐵處于非離子狀態(tài)，平均分子量為34000-60000Da。自1950年在瑞士上市以來，已在全球68個(gè)國(guó)家和地區(qū)上市銷售。適用于口服鐵劑效果不好而需要靜脈鐵劑治療的病人，如口服鐵劑不能耐受的病人；口服鐵劑吸收不好的病人。

目前在中國(guó)、美國(guó)、日本和歐盟上市的蔗糖鐵注射液主要為拜耳集團(tuán)或其分公司生產(chǎn)，商品名為VENOFER(中文商品名：維樂福)。由于蔗糖鐵注射液是膠體溶液，本身具有介穩(wěn)性，特別是由于處方及工藝的原因，已知蔗糖鐵注射液有出現(xiàn)物理不穩(wěn)定的現(xiàn)象，比如出現(xiàn)沉淀物等，特別是在過冷或過熱的情況下。蔗糖鐵注射液為小容量注射劑，如何有效的采用無菌生產(chǎn)工藝也是目前研究的一個(gè)方向。

蔗糖鐵注射液為小容量注射劑。根據(jù)歐盟滅菌工藝選擇決策樹要求，小容量注射劑建議首選過度殺滅法(F0≥12)，如產(chǎn)品不能耐受過度殺滅的條件，可考慮采用殘存概率法(8≤F0<12)，但均應(yīng)保證產(chǎn)品滅菌后的SAL不大于10-6。采用其它F₀值小于8的終端滅菌條件的工藝，原則上不予認(rèn)可。如有充分的依據(jù)證明不能采用終端滅菌工藝，且為臨床必需注射給藥的品種，方可考慮采用無菌生產(chǎn)工藝。

中國(guó)專利CN201310298423.1公布了一種蔗糖鐵注射液及其制法，產(chǎn)品的處方同原研處方，通過活性炭反復(fù)吸附等降低了可見異物檢出率，制劑的熱穩(wěn)定性也有了一定提高，但活性炭反復(fù)吸附的工藝比較復(fù)雜，最終產(chǎn)品僅能耐受殘存概率法的終端滅菌(115℃×30min，F(xiàn)0≈8)，未能進(jìn)行過度殺滅法滅菌，無菌保證水平相對(duì)較低。

中國(guó)專利CN200610021229.9公布了一種蔗糖鐵無菌粉針及制備方法，產(chǎn)品采用藥液噴霧干燥后在無菌分裝室內(nèi)分裝制得，產(chǎn)品只能采用無菌生產(chǎn)工藝生產(chǎn)，無菌保證水平較低，專利中未見制劑生物等效性方面的研究。

中國(guó)專利CN200510094323.2公布了一種治療缺鐵性貧血的蔗糖鐵注射液及其制備方法，產(chǎn)品采用的滅菌方法可能為無菌過濾、流通蒸汽滅菌15-60min或水煮15-60min，前述的流通蒸汽滅菌和水煮工藝的F₀值均小于8，原則上審評(píng)機(jī)構(gòu)不予認(rèn)可。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

為解決上述技術(shù)問題，對(duì)于蔗糖鐵這一類具有介穩(wěn)性，生物利用度極易受化學(xué)結(jié)構(gòu)影響以及無菌要求高的注射劑，迫切需要一種能改善制劑物理穩(wěn)定性、提高生物利用度和無菌保證水平的技術(shù)。本發(fā)明提供一種蔗糖鐵注射液及其制備方法，該制備方法不會(huì)大幅增加制造成本，又可長(zhǎng)期有效保證制劑可見異物符合注射劑要求，提供的蔗糖鐵注射液不僅生物利用度，而且無菌保證水平均較高。

為達(dá)到上述目的，一方面，本發(fā)明提供一種蔗糖鐵注射液，包括蔗糖鐵、穩(wěn)定劑、抑菌劑、酸堿調(diào)節(jié)劑和注射用水。

所述蔗糖鐵注射液每毫升藥液中包含10～30mg蔗糖鐵。進(jìn)一步優(yōu)選地，所述蔗糖鐵注射液每毫升藥液中包含15～25mg蔗糖鐵。更進(jìn)一步優(yōu)選地，所述蔗糖鐵注射液每毫升藥液中包含20mg。

所述的穩(wěn)定劑包含兩類：第一類穩(wěn)定劑包括葡萄糖酸鈉、葡萄糖酸鈣和葡萄糖酸鋅；第二類穩(wěn)定劑包括蔗糖、乳糖和麥芽糖。進(jìn)一步優(yōu)選地，所述的穩(wěn)定劑包含兩類：第一類穩(wěn)定劑包括葡萄糖酸鈉；第二類穩(wěn)定劑包括蔗糖。

所述蔗糖鐵注射液每毫升藥液中包含第一類穩(wěn)定劑的量為16～30mg，第二類穩(wěn)定劑的量為54～195mg。進(jìn)一步優(yōu)選地，所述蔗糖鐵注射液每毫升藥液中包含第一類穩(wěn)定劑的量為18～28mg，第二類穩(wěn)定劑的量為80～120mg。更進(jìn)一步優(yōu)選地，所述蔗糖鐵注射液每毫升藥液中包含第一類穩(wěn)定劑的量為20～25mg，第二類穩(wěn)定劑的量為80～100mg。再進(jìn)一步優(yōu)選地，所述蔗糖鐵注射液每毫升藥液中包含第一類穩(wěn)定劑的量為23mg，第二類穩(wěn)定劑的量為100mg。

所述的抑菌劑為苯甲醇、苯乙醇或丙二醇。

所述蔗糖鐵注射液每毫升中包含的抑菌劑量為5～20mg。進(jìn)一步優(yōu)選地，所述蔗糖鐵注射液每毫升中包含的抑菌劑量8～15mg。進(jìn)一步優(yōu)選地，所述蔗糖鐵注射液每毫升中包含的抑菌劑量9mg。

所述酸堿調(diào)節(jié)劑的用量是將藥液pH值調(diào)節(jié)至10.0～11.5范圍的量；所述的酸堿調(diào)節(jié)劑是鹽酸溶液或者氫氧化鈉溶液。

所述注射用水作為溶劑使用，其量是使注射液體積擴(kuò)增到規(guī)定值。

另一方面，本發(fā)明提供一種蔗糖鐵注射液的制備方法，具體步驟為：

1)配制罐中加入初始量的注射用水，調(diào)節(jié)水溫，依次加入處方量的第一類穩(wěn)定劑和第二類穩(wěn)定劑，攪拌溶解；

2)加入處方量的抑菌劑，攪拌混合均勻；

3)繼續(xù)加入處方量的主要活性成分蔗糖鐵，攪拌至完全溶解；

4)緩慢加入適量酸堿調(diào)節(jié)劑或其溶液，調(diào)節(jié)溶液pH至10.0～11.5，混合均勻；

5)補(bǔ)加注射用水至全量；

6)所得散裝藥液使用過濾器除菌過濾，過濾后藥液收集于緩沖罐；

7)根據(jù)產(chǎn)品規(guī)格調(diào)整灌裝量，將中間體溶液灌裝至玻璃安瓿中，熔封；

8)將灌裝中間產(chǎn)品轉(zhuǎn)移至產(chǎn)品滅菌柜中，采用過度殺滅法進(jìn)行終端濕熱滅菌；

9)對(duì)滅菌后產(chǎn)品進(jìn)行真空色水檢漏，產(chǎn)品出箱，進(jìn)行燈檢、貼簽、包裝、檢驗(yàn)及入庫(kù)，即得蔗糖鐵注射液。

所述步驟1)的注射用水初始加入量為配制總量的60％～90％。進(jìn)一步地，所述步驟1)的注射用水初始加入量為配制總量的70％～85％。更進(jìn)一步地，所述步驟1)的注射用水初始加入量為配制總量的80％。所述注射用水溫度控制在10℃～60℃。進(jìn)一步地，所述注射用水溫度控制在15℃～45℃。更進(jìn)一步地，所述注射用水溫度控制在20℃～30℃。

所述步驟4)的溶液pH值調(diào)節(jié)至10.5-11.5。進(jìn)一步地，所述步驟4)的溶液pH值調(diào)節(jié)至10.5～11.1。

所述步驟6)的散裝藥液除菌過濾使用的過濾器至少包含1個(gè)0.22um除菌級(jí)過濾器，過濾器為親水型過濾器，濾膜材質(zhì)為聚醚砜膜、聚偏二氟乙烯膜、聚四氟乙烯膜或尼龍膜。

所述步驟7)的產(chǎn)品灌裝量是根據(jù)產(chǎn)品規(guī)格和藥液濃度進(jìn)行折算，產(chǎn)品規(guī)格包含有50mg/瓶、75mg/瓶、100mg/瓶、150mg/瓶和200mg/瓶。

所述步驟8)的過度殺滅法是指F₀≥12的終端濕熱滅菌方法。更進(jìn)一步地，所述步驟8)的過度殺滅法是指F₀取值為12、15、30或60的終端濕熱滅菌方法，例如121℃×12min(F₀＝12)，例如121℃×15min(F₀＝15)，例如121℃×30min(F₀＝30)，例如121℃×60min(F₀＝60)。

有益效果

本發(fā)明一種蔗糖鐵注射液及其制備方法，制備工藝簡(jiǎn)單，無需反復(fù)加入活性炭進(jìn)行吸附，便于工業(yè)化生產(chǎn)操作，生產(chǎn)周期短，能耗低；蔗糖鐵注射液制劑的熱穩(wěn)定性得到了明顯的改善，可以采用過度殺滅法進(jìn)行終端滅菌，相對(duì)于殘存概率法終端滅菌、特別是無菌生產(chǎn)工藝生產(chǎn)的制劑，產(chǎn)品的無菌保證水平得到了明顯的提高；制劑的穩(wěn)定性得到改善還表現(xiàn)為，制劑貯存期間的物理穩(wěn)定性也得到提高，不容易因貯存環(huán)境的變化、特別是環(huán)境溫度的變化而出現(xiàn)絮凝、沉淀等現(xiàn)象。

本發(fā)明涉及的含有蔗糖鐵的注射液其特別地可用于治療缺鐵性貧血，特別是其可通過滴注或緩慢注射的方式靜脈給藥而適用于口服鐵劑效果不好而需要靜脈鐵劑治療的病人，例如口服鐵劑不能耐受的病人以及口服鐵劑吸收不好的病人。

具體實(shí)施方式

為了使本領(lǐng)域的技術(shù)人員更好地理解本發(fā)明的技術(shù)方案，下面進(jìn)一步披露一些非限制實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。

實(shí)施例1

配方：

制備步驟：

1)配制罐中加入總量80％的注射用水，調(diào)節(jié)水溫至15℃～30℃，依次加入處方量的葡萄糖酸鈉和蔗糖，攪拌溶解；

2)加入處方量的苯甲醇，攪拌混合均勻；

3)繼續(xù)加入處方量的主要活性成分蔗糖鐵，攪拌至完全溶解；

4)緩慢加入1M氫氧化鈉溶液或1M鹽酸溶液，調(diào)節(jié)溶液pH至10.5～11.1，混合均勻；

5)補(bǔ)加注射用水至全量。

將步驟5)所得注射液使用兩級(jí)0.22um親水型聚偏二氟乙烯過濾器除菌過濾，收集于緩沖罐中，以約5ml/瓶灌裝至玻璃安瓿中，熔封；將灌裝中間產(chǎn)品轉(zhuǎn)移至產(chǎn)品滅菌柜中，在121℃下濕熱滅菌15min(F₀＝15)，滅菌結(jié)束進(jìn)行真空色水檢漏；

滅菌檢漏結(jié)束，產(chǎn)品出箱，進(jìn)行燈檢、貼簽、包裝、檢驗(yàn)及入庫(kù)，即得。

實(shí)施例2

蔗糖鐵注射液的熱力學(xué)穩(wěn)定性評(píng)估

取實(shí)施例1制備的灌裝中間產(chǎn)品(滅菌前)和適量市售產(chǎn)品分成6組，其中1組不進(jìn)行終端濕熱滅菌，其余5組分別于115℃×30min，121℃×12min，121℃×15min，121℃×30min和121℃×60min進(jìn)行濕熱滅菌，上述6組樣品編號(hào)分別為S2-1、S2-2、S2-3、S2-4、S2-5和S2-6。滅菌結(jié)束，參考美國(guó)藥典USP36-NF31各論“Iron Sucrose Injection”中收載方法測(cè)定不同樣品中蔗糖鐵的分子量。

具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表1

表1、不同滅菌條件下蔗糖鐵分子量檢測(cè)結(jié)果

上述結(jié)果顯示，相對(duì)于某些市售產(chǎn)品，自研產(chǎn)品在常規(guī)的終端滅菌工藝下均表現(xiàn)出極高的熱力學(xué)穩(wěn)定性，主要活性成分分子量在滅菌前后均未發(fā)生明顯變化，處于質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)范圍(34000-60000Da)，說明氫氧化鐵核心尺寸和表面碳水化合物化學(xué)并未因終端濕熱滅菌而發(fā)生改變。

實(shí)施例3

處方和工藝參照以上實(shí)施例1，不同的僅是將處方中的第一類穩(wěn)定劑葡萄糖酸鈉調(diào)整為等量的葡萄糖酸鋅或葡萄糖酸鈣，制得兩批樣品；或者，處方和工藝參照以上實(shí)施例1，不同的僅是將處方中的第二類穩(wěn)定劑蔗糖調(diào)整使用等量的麥芽糖和乳糖，制得兩批樣品。

實(shí)施例4

處方和工藝參照以上實(shí)施例1，不同的僅是將處方中的抑菌劑苯甲醇調(diào)整使用丙二醇(150mg，常用抑菌濃度)或乙醇(100mg，常用抑菌濃度)，制得兩批樣品，分別標(biāo)記為S4-1和S4-2；

實(shí)施例5

配方：

制備步驟：

1)配制罐中加入總量90％的注射用水，調(diào)節(jié)水溫至10℃～25℃，依次加入處方量的葡萄糖酸鈉和蔗糖，攪拌溶解；

2)加入處方量的苯甲醇，攪拌混合均勻；

3)繼續(xù)加入處方量的主要活性成分蔗糖鐵，攪拌至完全溶解；

4)緩慢加入1M氫氧化鈉溶液或1M鹽酸溶液，調(diào)節(jié)溶液pH至10.0～10.5，混合均勻；

5)補(bǔ)加注射用水至全量。

將步驟5)所得注射液使用兩級(jí)0.22um親水型聚偏二氟乙烯過濾器除菌過濾，收集于緩沖罐中，以約5ml/瓶灌裝至玻璃安瓿中，熔封；將灌裝中間產(chǎn)品轉(zhuǎn)移至產(chǎn)品滅菌柜中，在121℃下濕熱滅菌12min(F₀＝12)，滅菌結(jié)束進(jìn)行真空色水檢漏；

滅菌檢漏結(jié)束，產(chǎn)品出箱，進(jìn)行燈檢、貼簽、包裝、檢驗(yàn)及入庫(kù)，即得。

實(shí)施例6

配方：

制備步驟：

1)配制罐中加入總量70％的注射用水，調(diào)節(jié)水溫至20℃～30℃，依次加入處方量的葡萄糖酸鈉和蔗糖，攪拌溶解；

2)加入處方量的苯甲醇，攪拌混合均勻；

3)繼續(xù)加入處方量的主要活性成分蔗糖鐵，攪拌至完全溶解；

4)緩慢加入1M氫氧化鈉溶液或1M鹽酸溶液，調(diào)節(jié)溶液pH至10.2～10.8，混合均勻；

5)補(bǔ)加注射用水至全量。

將步驟5)所得注射液依次使用0.45μm和0.22μm聚醚砜過濾器除菌過濾，收集于緩沖罐中，以約5ml/瓶灌裝至玻璃安瓿中，熔封；將灌裝中間產(chǎn)品轉(zhuǎn)移至產(chǎn)品滅菌柜中，在121℃下濕熱滅菌30min(F₀＝30)，滅菌結(jié)束進(jìn)行真空色水檢漏；

滅菌檢漏，產(chǎn)品出箱，進(jìn)行燈檢、貼簽、包裝、檢驗(yàn)及入庫(kù)，即得。

實(shí)施例7

配方：

制備步驟：

1)配制罐中加入總量85％的注射用水，調(diào)節(jié)水溫至25℃～45℃，依次加入處方量的葡萄糖酸鈉和蔗糖，攪拌溶解；

2)加入處方量的苯甲醇，攪拌混合均勻；

3)繼續(xù)加入處方量的主要活性成分蔗糖鐵，攪拌至完全溶解；

4)緩慢加入1M氫氧化鈉溶液或1M鹽酸溶液，調(diào)節(jié)溶液pH至10.5～11.1，混合均勻；

5)補(bǔ)加注射用水至全量。

將步驟5)所得注射液使用兩級(jí)0.22μm尼龍膜過濾器除菌過濾，收集于緩沖罐中，以約8ml/瓶灌裝至玻璃安瓿中，熔封；將灌裝中間產(chǎn)品轉(zhuǎn)移至產(chǎn)品滅菌柜中，在121℃下濕熱滅菌15min(F₀＝15)，滅菌結(jié)束進(jìn)行真空色水檢漏；

滅菌檢漏結(jié)束，產(chǎn)品出箱，進(jìn)行燈檢、貼簽、包裝、檢驗(yàn)及入庫(kù)，即得。

實(shí)施例8

配方：

制備步驟：

1)配制罐中加入總量60％的注射用水，調(diào)節(jié)水溫至45℃～60℃，依次加入處方量的葡萄糖酸鈉和蔗糖，攪拌溶解；

2)加入處方量的苯甲醇，攪拌混合均勻；

3)繼續(xù)加入處方量的主要活性成分蔗糖鐵，攪拌至完全溶解；

4)緩慢加入1M氫氧化鈉溶液或1M鹽酸溶液，調(diào)節(jié)溶液pH至10.5～11.5，混合均勻；

5)補(bǔ)加注射用水至全量。

將步驟5)所得注射液依次使用0.45μm和0.22μm親水型聚四氟乙烯過濾器除菌過濾，收集于緩沖罐中，以約5ml/瓶灌裝至玻璃安瓿中，熔封；將灌裝中間產(chǎn)品轉(zhuǎn)移至產(chǎn)品滅菌柜中，在121℃下濕熱滅菌60min(F₀＝60)，滅菌結(jié)束進(jìn)行真空色水檢漏；

檢漏滅菌結(jié)束，產(chǎn)品出箱，進(jìn)行燈檢、貼簽、包裝、檢驗(yàn)及入庫(kù)，即得。

實(shí)施例9

取以上實(shí)施例1～實(shí)施例8制備的樣品，參考美國(guó)藥典USP36-NF31各論“Iron Sucrose Injection”中收載的方法測(cè)定制劑的分子量、可見異物、不溶性微粒、渾濁點(diǎn)pH范圍、細(xì)菌內(nèi)毒素和無菌等關(guān)鍵質(zhì)量屬性，以確認(rèn)制備的蔗糖鐵注射液是否符合藥典要求：MW(重均分子量)＝34,000–60,000Da，MN(數(shù)均分子量)不小于24,000Da，MW/MN不得超過1.7；渾濁點(diǎn)的pH范圍為4.4-5.3；不溶性微粒應(yīng)符合小容量注射劑光阻法粒子計(jì)數(shù)測(cè)試要求；可見異物應(yīng)符合規(guī)定；每毫克Fe中細(xì)菌內(nèi)毒素不得超過3.7EU；無菌檢查應(yīng)符合無菌制劑規(guī)定。

檢測(cè)結(jié)果顯示，所制備的樣品的上述關(guān)鍵質(zhì)量指標(biāo)均符合藥典標(biāo)準(zhǔn)要求。

實(shí)施例10

蔗糖鐵注射液的熱循環(huán)(凍融)穩(wěn)定性評(píng)估

取以上實(shí)施例1～實(shí)施例8制備且全檢合格的樣品，參考國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局審評(píng)中心“穩(wěn)定性考察中的熱循環(huán)(凍融)實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)介”，模擬藥品在運(yùn)輸與使用過程中可能碰到的溫度條件下循環(huán)考察上市包裝的藥品的穩(wěn)定性。

結(jié)果發(fā)現(xiàn)：(1)考察樣品在2～8℃考察兩天，然后在40℃加速條件下考察兩天，重復(fù)3個(gè)循環(huán)，樣品的可見異物、澄清度與顏色及不溶性微粒等均未發(fā)生顯著變化，符合制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求；(2)考察樣品在-10～-20℃考察兩天，然后在40℃加速條件下考察兩天，重復(fù)3個(gè)循環(huán)，樣品的可見異物、澄清度與顏色及不溶性微粒等均未發(fā)生顯著變化，符合制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求。

實(shí)施例11

體外試驗(yàn)的方法評(píng)估本發(fā)明所述的產(chǎn)品和原研品在鐵離子吸收和釋放特性方面的異同

具體情況如下：(1)鐵的吸收：將HepG2細(xì)胞和THP-1巨噬細(xì)胞分別培養(yǎng)于300-1200μM的本發(fā)明所述的產(chǎn)品和溶液中3h。培養(yǎng)結(jié)束，通過高溫高錳酸溶液消化結(jié)合的鐵復(fù)合物，然后通過亞鐵嗪法測(cè)定細(xì)胞內(nèi)的鐵離子水平。(2)鐵的釋放：將HepG2細(xì)胞和THP-1巨噬細(xì)胞分別培養(yǎng)于1200μM的本發(fā)明所述的產(chǎn)品和溶液中3h(37℃)。將培養(yǎng)細(xì)胞從培養(yǎng)液中分離，多次沖洗除去細(xì)胞表面結(jié)合鐵，加入2.5mg/ml的脫鐵轉(zhuǎn)鐵蛋白以促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)鐵的釋放，釋放介質(zhì)中含有的鐵離子通過原子吸收的方法定量測(cè)定。

通過體外試驗(yàn)的方法評(píng)估本發(fā)明所述的產(chǎn)品和原研品在鐵離子吸收和釋放特性方面的異同，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在體外試驗(yàn)中本發(fā)明所述的產(chǎn)品和原研品表現(xiàn)出高度相似的吸收和釋放行為。相對(duì)于THP-1巨噬細(xì)胞，HepG2細(xì)胞吸收更多的鐵，但是分別培養(yǎng)于本發(fā)明所述的產(chǎn)品和溶液的同一類型細(xì)胞并未表現(xiàn)出明顯的鐵攝取率差異。鐵的釋放考察試驗(yàn)中，HepG2細(xì)胞中攝入的鐵復(fù)合物在試驗(yàn)前期釋放較快，THP-1巨噬細(xì)胞攝入的鐵復(fù)合物相對(duì)釋放較慢而持久，但本發(fā)明所述的產(chǎn)品和溶液中培養(yǎng)的同一類型細(xì)胞均表現(xiàn)出一致的釋放行為。

以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例而已，并不用于限制本發(fā)明，對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說，本發(fā)明可以有各種更改和變化。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。