本發(fā)明屬于蜂產(chǎn)品制備方法領(lǐng)域，涉及一種水溶性蜂膠及其制備方法。
背景技術(shù)：
：蜂膠是蜜蜂采集植物樹脂，并混入蜂蠟和其它分泌物加工而成的一種芳香物質(zhì)。蜂膠具有廣泛的藥理活性，如抑菌、抗氧化、抗病毒、消炎、保肝和抗癌等。蜂膠作為功能性成分已廣泛應(yīng)用于食品、藥品及保健品行業(yè)。目前，由于蜂膠是醇溶性的，限制了蜂膠在食品及醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用。蜂膠的水溶性很差，應(yīng)用蜂膠時(shí)主要采用有機(jī)溶劑和乳化劑來制備蜂膠溶液，如乙醇、聚乙二醇等溶解或通過吐溫、大豆磷脂、卵磷酯等乳化。以乙醇作為溶劑制備的蜂膠乙醇水溶液有很強(qiáng)的刺激味道，粘度大，從而限制其應(yīng)用。采用乳化劑乳化后的蜂膠與水混合時(shí)形成乳濁液，難以在水為介質(zhì)的產(chǎn)品中應(yīng)用。而蜂膠水提取物大多提取蜂膠中水溶性物質(zhì)，而主要活性成分黃酮類物質(zhì)難以提取。因此，如果增加蜂膠的水溶性是當(dāng)前迫切需要解決的問題。公開號(hào)cn200510049326.4的發(fā)明專利申請(qǐng)公開了蜂膠水溶液的制備工藝及應(yīng)用，該專利是采用95％乙醇提取后加入50-100度熱水中得到混合液，然后蒸發(fā)除去乙醇得到的，所提物質(zhì)大多是蜂膠中的水溶性物質(zhì)，黃酮含量低。公開號(hào)cn03150648.8的發(fā)明專利申請(qǐng)公開了一種水溶性蜂膠及提取方法，該專利是采用卵磷脂、大豆磷脂、聚乙二醇6000、吐溫80、甘油酯等表面活性劑增加蜂膠水溶性。但在水比例加大時(shí)易沉淀。公開號(hào)cn1460512a的發(fā)明專利申請(qǐng)公開了一種水溶性蜂膠液及其制備方法，該專利是采用聚乙二醇增加蜂膠溶解性，但隨水比例加大，蜂膠易析出。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是提供一種水溶性蜂膠的制備方法。本發(fā)明通過以下步驟實(shí)現(xiàn)：(1)在蜂膠原料中加入60％～95％的乙醇水溶液(g/ml)，超聲波提取，過濾，除去不溶物，殘?jiān)磸?fù)提取三次，合并濾液得蜂膠提取液r1。蜂膠與乙醇比例限定在1：2～8(g：ml)。(2)在r1中按與蜂膠質(zhì)量比1：0.5～3加入增溶劑聚氧乙烯醚氫化蓖麻油，攪拌使其完全溶解，然后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)回收乙醇至液體無醇味得r2。(3)將r2置于熱水中溫浴，按與蜂膠質(zhì)量比1：1～5加入助溶劑丙二醇，充分?jǐn)嚢枋狗淠z完全溶解。濾液冷卻至室溫、靜置，過濾，即得蜂膠水溶液m。(4)將m干燥蒸出水份即得水溶性蜂膠流浸膏。其中：步驟(1)中超聲波處理時(shí)間為15～45分鐘。步驟(2)中的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮是在溫度45～70℃條件下進(jìn)行。步驟(3)溫浴溫度為65～85℃。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供上述方法制備獲得的水溶性蜂膠在化妝品、醫(yī)藥、保健食品領(lǐng)域中的應(yīng)用。本發(fā)明制備的水溶性蜂膠的性能進(jìn)行了如下項(xiàng)目測試：1、總黃酮含量(1)蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密吸取蘆丁對(duì)照品使用溶液(0.2g/l)1ml，2ml，3ml，4ml，5ml，6ml，分別置于50ml容量瓶中。加無水乙醇至總體積為15ml，依次加人硝酸鋁溶液(100g/l)1ml，醋酸鉀溶液(9.8g/l)1ml，搖勻，加水至刻度，搖勻。靜置1h。用1cm比色杯于415nm處，以30％乙醇溶液為空白，測定吸光度。以50ml中蘆丁質(zhì)量(mg)為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線或按直線回歸方程計(jì)算。線性工作范圍0mg-1.2mg(50ml)。(2)空白試驗(yàn)精密稱待測水溶性蜂膠樣品1.0g，置于50ml容量瓶中，加無水乙醇至總體積為15ml，加水稀釋至刻度，搖勻。(3)測定總黃酮含量精密稱待測水溶性蜂膠樣品1.0g，置于50ml容量瓶中，加無水乙醇至總體積為15ml，依次加人硝酸鋁溶液(100g/l)1ml，醋酸鉀溶液(9.8g/l)1ml，搖勻，加水至刻度，搖勻。靜置1h。以空白試液(2.2.2.3.3.2)作參比，用1cm比色杯，在波長415nm處測定試料溶液的吸光度。查標(biāo)準(zhǔn)曲線或通過回歸方程計(jì)算，求出水溶性蜂膠中的黃酮類化合物含量(mg)。2、抗氧化能力dpph自由基清除活性測定將本發(fā)明水溶性蜂膠樣品用無水乙醇稀釋一系列的濃度梯度，蜂膠樣品：20～200μg/ml。取上述稀釋液100μl加入100μl新配置的0.1mg/mldpph工作液，同時(shí)以不加dpph(以100μl無水乙醇代替dpph)的供試品溶液各濃度作為對(duì)照以消除供試品本身顏色對(duì)測試結(jié)果的干擾，并設(shè)dpph陰性對(duì)照(以100μl無水乙醇代替供試品)，每組設(shè)2個(gè)平行復(fù)孔。室溫避光反應(yīng)30min后，在517nm處測定吸光度，使其讀數(shù)在0.2～0.8之間。dpph清除率(％)＝(a0-as)/a0*100％as：加入樣品提取液的dpph溶液的吸光度；a0：加入無水乙醇的dpph溶液的吸光度。3、抑菌能力配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、沙氏葡萄糖培養(yǎng)基，進(jìn)行金黃色葡萄球菌、變形鏈球菌、白色念珠菌的活化及純化，制備菌懸液和濾紙片。采用抑菌圈法測定本發(fā)明水溶性蜂膠對(duì)金黃色葡萄球菌、變形鏈球菌、白色念珠菌的抑菌圈大小，重復(fù)3次實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行顯著性分析。本發(fā)明克服蜂膠水溶性難的缺點(diǎn)，提供一種水溶性蜂膠的制備方法。所獲得的水溶性蜂膠提取物無醇味，無異味，蜂膠原有活性成分不會(huì)損失，與水以任意比例混溶。與現(xiàn)有的水溶性蜂膠相比，本發(fā)明的水溶性蜂膠具有下述特點(diǎn)：(1)制得的水溶性蜂膠加入任意量的水均可完全溶解。(2)總黃酮含量可高達(dá)18％，而現(xiàn)有水溶性蜂膠總黃酮含量低于5％。(3)不含乙醇，無刺激作用。(4)無刺激性氣味，口感佳，受眾廣。具體實(shí)施方式本發(fā)明結(jié)合實(shí)施例作進(jìn)一步的說明。通過下述實(shí)施例將能夠更好地理解本發(fā)明。實(shí)施例1：本發(fā)明水溶性蜂膠的制備該實(shí)施例的實(shí)施步驟如下：(1)在蜂膠原料中按重量體積比1:3加入體積比95％的乙醇水溶液(g/ml)，超聲波提取，過濾，除去不溶物，殘?jiān)磸?fù)提取三次，合并濾液得蜂膠提取液r1。(2)在r1中按與蜂膠質(zhì)量比1：3加入聚氧乙烯醚氫化蓖麻油，攪拌使其完全溶解，然后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)回收乙醇至液體無醇味得r2。(3)將r2置于熱水中溫浴，按與蜂膠質(zhì)量比1：1加入丙二醇，充分?jǐn)嚢枋狗淠z完全溶解。濾液冷卻至室溫、靜置，過濾，即得蜂膠水溶液m。(4)將m干燥蒸出水份即得水溶性蜂膠流浸膏。采用本申請(qǐng)說明書描述的方法對(duì)本實(shí)施例制備的水溶性蜂膠進(jìn)行了下述性能測試：1、總黃酮含量(1)蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密吸取蘆丁對(duì)照品使用溶液(0.2g/l)1ml，2ml，3ml，4ml，5ml，6ml，分別置于50ml容量瓶中。加無水乙醇至總體積為15ml，依次加人硝酸鋁溶液(100g/l)1ml，醋酸鉀溶液(9.8g/l)1ml，搖勻，加水至刻度，搖勻，靜置1h。用1cm比色杯于415nm處，以30％乙醇溶液為空白，測定吸光度。以50ml中蘆丁質(zhì)量(mg)為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線或按直線回歸方程計(jì)算。線性工作范圍0mg-1.2mg(50ml)。(2)空白試驗(yàn)精密稱待測水溶性蜂膠樣品1.0g，置于50ml容量瓶中，加無水乙醇至總體積為15ml，加水稀釋至刻度，搖勻。(3)測定總黃酮含量精密稱待測水溶性蜂膠樣品1.0g，置于50ml容量瓶中，加無水乙醇至總體積為15ml，依次加人硝酸鋁溶液(100g/l)1ml，醋酸鉀溶液(9.8g/l)1ml，搖勻，加水至刻度，搖勻。靜置1h。以空白試液(2.2.2.3.3.2)作參比，用1cm比色杯，在波長415nm處測定試料溶液的吸光度。查標(biāo)準(zhǔn)曲線或通過回歸方程計(jì)算，求出水溶性蜂膠中的黃酮類化合物含量。2、抗氧化能力dpph自由基清除活性測定將本發(fā)明水溶性蜂膠樣品用無水乙醇稀釋一系列的濃度梯度，蜂膠樣品：20～200μg/ml。取上述稀釋液100μl加入100μl新配置的0.1mg/mldpph工作液，同時(shí)以不加dpph(以100μl無水乙醇代替dpph)的供試品溶液各濃度作為對(duì)照以消除供試品本身顏色對(duì)測試結(jié)果的干擾，并設(shè)dpph陰性對(duì)照(以100μl無水乙醇代替供試品)，每組設(shè)2個(gè)平行復(fù)孔。室溫避光反應(yīng)30min后，在517nm處測定吸光度，使其讀數(shù)在0.2～0.8之間。dpph清除率(％)＝(a0-as)/a0*100％as：加入樣品提取液的dpph溶液的吸光度；a0：加入無水乙醇的dpph溶液的吸光度。表1總黃酮含量、抑菌能力及dpph自由基清除活性3、抑菌能力配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、沙氏葡萄糖培養(yǎng)基，進(jìn)行金黃色葡萄球菌、變形鏈球菌、白色念珠菌的活化及純化，制備菌懸液和濾紙片。采用抑菌圈法測定本發(fā)明水溶性蜂膠對(duì)金黃色葡萄球菌、變形鏈球菌、白色念珠菌的抑菌圈大小，重復(fù)3次實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行顯著性分析。表2蜂膠乙醇提取物對(duì)不同供試菌的抑菌圈直徑實(shí)施例2：本發(fā)明水溶性蜂膠的制備該實(shí)施例的實(shí)施步驟如下：(1)在蜂膠原料中按重量體積比1:8加入體積比60％的乙醇水溶液(g/ml)，超聲波提取，過濾，除去不溶物，殘?jiān)磸?fù)提取三次，合并濾液得蜂膠提取液r1。(2)在r1中按與蜂膠質(zhì)量比1：0.5加入聚氧乙烯醚氫化蓖麻油，攪拌使其完全溶解，然后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)回收乙醇至液體無醇味得r2。(3)將r2置于熱水中溫浴，按與蜂膠質(zhì)量比1：2加入丙二醇，充分?jǐn)嚢枋狗淠z完全溶解。濾液冷卻至室溫、靜置，過濾，即得蜂膠水溶液m。(4)將m干燥蒸出水份即得水溶性蜂膠流浸膏。采用本申請(qǐng)說明書描述的方法對(duì)本實(shí)施例制備的水溶性蜂膠進(jìn)行了下述性能測試：1、總黃酮含量(1)蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密吸取蘆丁對(duì)照品使用溶液(0.2g/l)1ml，2ml，3ml，4ml，5ml，6ml，分別置于50ml容量瓶中。加無水乙醇至總體積為15ml，依次加人硝酸鋁溶液(100g/l)1ml，醋酸鉀溶液(9.8g/l)1ml，搖勻，加水至刻度，搖勻。靜置1h。用1cm比色杯于415nm處，以30％乙醇溶液為空白，測定吸光度。以50ml中蘆丁質(zhì)量(mg)為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線或按直線回歸方程計(jì)算。線性工作范圍0mg-1.2mg(50ml)。(2)空白試驗(yàn)精密稱待測水溶性蜂膠樣品1.0g，置于50ml容量瓶中，加無水乙醇至總體積為15ml，加水稀釋至刻度，搖勻。(3)測定總黃酮含量精密稱待測水溶性蜂膠樣品1.0g，置于50ml容量瓶中，加無水乙醇至總體積為15ml，依次加人硝酸鋁溶液(100g/l)1ml，醋酸鉀溶液(9.8g/l)1ml，搖勻，加水至刻度，搖勻。靜置1h。以空白試液(2.2.2.3.3.2)作參比，用1cm比色杯，在波長415nm處測定試料溶液的吸光度。查標(biāo)準(zhǔn)曲線或通過回歸方程計(jì)算，求出水溶性蜂膠中的黃酮類化合物含量。表3總黃酮含量、抑菌能力及dpph自由基清除活性2、抗氧化能力dpph自由基清除活性測定將本發(fā)明水溶性蜂膠樣品用無水乙醇稀釋一系列的濃度梯度，蜂膠樣品：20～200μg/ml。取上述稀釋液100μl加入100μl新配置的0.1mg/mldpph工作液，同時(shí)以不加dpph(以100μl無水乙醇代替dpph)的供試品溶液各濃度作為對(duì)照以消除供試品本身顏色對(duì)測試結(jié)果的干擾，并設(shè)dpph陰性對(duì)照(以100μl無水乙醇代替供試品)，每組設(shè)2個(gè)平行復(fù)孔。室溫避光反應(yīng)30min后，在517nm處測定吸光度，使其讀數(shù)在0.2～0.8之間。dpph清除率(％)＝(a0-as)/a0*100％as：加入樣品提取液的dpph溶液的吸光度；a0：加入無水乙醇的dpph溶液的吸光度。3、抑菌能力配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、沙氏葡萄糖培養(yǎng)基，進(jìn)行金黃色葡萄球菌、變形鏈球菌、白色念珠菌的活化及純化，制備菌懸液和濾紙片。采用抑菌圈法測定本發(fā)明水溶性蜂膠對(duì)金黃色葡萄球菌、變形鏈球菌、白色念珠菌的抑菌圈大小，重復(fù)3次實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行顯著性分析。表4蜂膠乙醇提取物對(duì)不同供試菌的抑菌圈直徑mm實(shí)施例3：本發(fā)明水溶性蜂膠的制備該實(shí)施例的實(shí)施步驟如下：(1)在蜂膠原料中按重量體積比1:5加入體積比75％的乙醇水溶液(g/ml)，超聲波提取，過濾，除去不溶物，殘?jiān)磸?fù)提取三次，合并濾液得蜂膠提取液r1。(2)在r1中按與蜂膠質(zhì)量比1：1.5加入聚氧乙烯醚氫化蓖麻油，攪拌使其完全溶解，然后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)回收乙醇至液體無醇味得r2。(3)將r2置于熱水中溫浴，按與蜂膠質(zhì)量比1：5加入丙二醇，充分?jǐn)嚢枋狗淠z完全溶解。濾液冷卻至室溫、靜置，過濾，即得蜂膠水溶液m。(4)將m干燥蒸出水份即得水溶性蜂膠流浸膏。采用本申請(qǐng)說明書描述的方法對(duì)本實(shí)施例制備的水溶性蜂膠進(jìn)行了下述性能測試：1、總黃酮含量(1)蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密吸取蘆丁對(duì)照品使用溶液(0.2g/l)1ml，2ml，3ml，4ml，5ml，6ml，分別置于50ml容量瓶中。加無水乙醇至總體積為15ml，依次加人硝酸鋁溶液(100g/l)1ml，醋酸鉀溶液(9.8g/l)1ml，搖勻，加水至刻度，搖勻。靜置1h。用1cm比色杯于415nm處，以30％乙醇溶液為空白，測定吸光度。以50ml中蘆丁質(zhì)量(mg)為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線或按直線回歸方程計(jì)算。線性工作范圍0mg-1.2mg(50ml)。(2)空白試驗(yàn)精密稱待測水溶性蜂膠樣品1.0g，置于50ml容量瓶中，加無水乙醇至總體積為15ml，加水稀釋至刻度，搖勻。(3)測定總黃酮含量精密稱待測水溶性蜂膠樣品1.0g，置于50ml容量瓶中，加無水乙醇至總體積為15ml，依次加人硝酸鋁溶液(100g/l)1ml，醋酸鉀溶液(9.8g/l)1ml，搖勻，加水至刻度，搖勻。靜置1h。以空白試液(2.2.2.3.3.2)作參比，用1cm比色杯，在波長415nm處測定試料溶液的吸光度。查標(biāo)準(zhǔn)曲線或通過回歸方程計(jì)算，求出水溶性蜂膠中的黃酮類化合物含量。2、抗氧化能力dpph自由基清除活性測定將本發(fā)明水溶性蜂膠樣品用無水乙醇稀釋一系列的濃度梯度，蜂膠樣品：20～200μg/ml。取上述稀釋液100μl加入100μl新配置的0.1mg/mldpph工作液，同時(shí)以不加dpph(以100μl無水乙醇代替dpph)的供試品溶液各濃度作為對(duì)照以消除供試品本身顏色對(duì)測試結(jié)果的干擾，并設(shè)dpph陰性對(duì)照(以100μl無水乙醇代替供試品)，每組設(shè)2個(gè)平行復(fù)孔。室溫避光反應(yīng)30min后，在517nm處測定吸光度，使其讀數(shù)在0.2～0.8之間。dpph清除率(％)＝(a0-as)/a0*100％as：加入樣品提取液的dpph溶液的吸光度；a0：加入無水乙醇的dpph溶液的吸光度。表5總黃酮含量、抑菌能力及dpph自由基清除活性3、抑菌能力配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、沙氏葡萄糖培養(yǎng)基，進(jìn)行金黃色葡萄球菌、變形鏈球菌、白色念珠菌的活化及純化，制備菌懸液和濾紙片。采用抑菌圈法測定本發(fā)明水溶性蜂膠對(duì)金黃色葡萄球菌、變形鏈球菌、白色念珠菌的抑菌圈大小，重復(fù)3次實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行顯著性分析。表6蜂膠乙醇提取物對(duì)不同供試菌的抑菌圈直徑實(shí)施例4：本發(fā)明水溶性蜂膠在皮膚清潔劑中的應(yīng)用所述的皮膚清潔劑含有1.0重量份蜂膠提取物、2.0重量份膠原蛋白、1.0重量份果膠、0.1重量份透明質(zhì)酸、3重量份吡咯烷酮羧酸鈉、0.3重量份月桂酰胺丙基甜菜堿與0.5重量份椰子油起泡劑以及補(bǔ)充至總量為100重量份的蒸餾水。采用本申請(qǐng)說明書描述的方法對(duì)本實(shí)施例制備的皮膚清潔劑進(jìn)行了下述性能測試：a、貯存穩(wěn)定性：采用如下方法進(jìn)行高低溫穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)：(1)在溫度40℃-50℃電熱恒溫培養(yǎng)箱中放置30-50天，恢復(fù)室溫后觀察；(2)24小時(shí)之內(nèi)，在溫度0℃-50℃之間反復(fù)頻繁變化，如此反復(fù)處理15-30天，恢復(fù)室溫后觀察；(3)在溫度-5℃及40℃下循環(huán)存放3次，分別每次存放24h，即在-5℃存放24h后，在室溫下存放24h，再放入40℃恒溫箱中存放24h，依次循環(huán)3次，觀察其穩(wěn)定性；(4)在-5℃下存放1周，觀察其穩(wěn)定性。這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，所得產(chǎn)品在各實(shí)驗(yàn)條件下均未出現(xiàn)沉淀、斷層、析水、粗粒、褪色等現(xiàn)象，產(chǎn)品穩(wěn)定性好。b、衛(wèi)生性能：微生物學(xué)指標(biāo)包括菌落總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)、糞大腸菌群、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌，其測定結(jié)果列于表7中。表7微生物檢測結(jié)果檢驗(yàn)項(xiàng)目檢驗(yàn)結(jié)果限值菌落總數(shù)(cfu/g)＜10≤500霉菌和酵母菌總數(shù)(cfu/g)＜10≤100糞大腸菌群/g未檢出不得檢出金黃色葡萄球菌/g未檢出不得檢出銅綠假單胞菌/g未檢出不得檢出c、衛(wèi)生化學(xué)指標(biāo)采用常規(guī)分析方法對(duì)所得產(chǎn)品的汞、砷、鉛含量進(jìn)行了測定，其測定結(jié)果列于表8中。表8衛(wèi)生化學(xué)檢驗(yàn)結(jié)果檢驗(yàn)項(xiàng)目單位檢驗(yàn)結(jié)果方法檢出濃度限值汞mg/kg未檢出0.3≤1砷mg/kg未檢出1≤10鉛mg/kg未檢出2≤10d、毒理學(xué)試驗(yàn)根據(jù)《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》(2007年版)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行多次皮膚刺激性試驗(yàn)，其試驗(yàn)結(jié)果列于表9中。表9受試物對(duì)家兔多次皮膚刺激性試驗(yàn)結(jié)果檢測結(jié)論：受試物對(duì)家兔多次皮膚刺激檢驗(yàn)結(jié)果為無刺激性，未見其他毒性。實(shí)施例5：本發(fā)明水溶性蜂膠在創(chuàng)傷修復(fù)中的應(yīng)用所述的創(chuàng)傷修復(fù)材料含有5.0重量份蜂膠提取物、4.0重量份明膠、6.0重量份殼聚糖、3.0重量份羧甲基纖維素鈉與余量為至100重量份的蒸餾水。該實(shí)施例制備得到的創(chuàng)傷修復(fù)材料性能評(píng)價(jià)如下：a按照本說明書描述的方法測試了體外凝血指數(shù)，其結(jié)果列于表10中。表10凝血指數(shù)測試結(jié)果敷料種類bci紗布90.42明膠海綿50.62實(shí)驗(yàn)組41.30從表10可以看出，本發(fā)明蜂膠敷料的凝血效果明顯優(yōu)于明膠海綿組。b按照本說明書描述的方法測試了抑菌作用，其結(jié)果列于表11中。表11抑菌活性測試結(jié)果表11結(jié)果表明，本發(fā)明敷料對(duì)兩種菌均有抑菌作用,且隨著與細(xì)菌作用時(shí)間的延長，抑菌率呈增長趨勢。處理20min時(shí)對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌率已達(dá)到52.4％,而對(duì)銅綠假單胞菌的抑菌率為37.3％，至80min時(shí)抑菌率分別達(dá)到89.3％和79.6％。當(dāng)前第1頁12