本發(fā)明涉及組合物，具體是增強(qiáng)學(xué)習(xí)記憶力功能的組合物，屬于保健品領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
：現(xiàn)代社會工作、學(xué)習(xí)節(jié)奏不斷加快，社會壓力增大，導(dǎo)致許多人出現(xiàn)了不同程度的學(xué)習(xí)記憶力衰退情況，嚴(yán)重影響了正常生活。如今，學(xué)習(xí)記憶力減退已成為臨床熱點(diǎn)問題之一，開發(fā)改善或治療這類疾病的保健品及藥物已刻不容緩。目前，臨床上針對該癥狀，主要采用鎮(zhèn)靜催眠及調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)藥物進(jìn)行輔助干預(yù)，效果不佳；另外目前多采用化學(xué)藥物，毒副作用較大，不適于長期使用。中醫(yī)中藥在我國有著悠久的歷史，有“藥食同源”的理論作基礎(chǔ)，來源于天然產(chǎn)物，毒副作用較小，可以長期服用，因此特別適合于學(xué)習(xí)記憶力減退等亞健康狀態(tài)的調(diào)理和治療。因此，從天然中藥及食材中尋找具有改善學(xué)習(xí)記憶力的活性成分，并據(jù)此開發(fā)藥物和保健食品已成為研究熱點(diǎn)，具有十分重要的現(xiàn)實(shí)意義。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：基于此，本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種用于增強(qiáng)學(xué)習(xí)記憶力的組合物，該組合物具有很好的增強(qiáng)學(xué)習(xí)記憶力的作用。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取以下技術(shù)方案：一種用于增強(qiáng)學(xué)習(xí)記憶力的組合物，所述組合物的有效成分由以下重量份的原料制備而成：蠶蛹10-30份，石菖蒲2-10份，遠(yuǎn)志2-10份，人參1-5份，五味子1-5份，益智仁1-5份，肉蓯蓉1-5份，菟絲子1-5份。另外的，一種用于增強(qiáng)學(xué)習(xí)記憶力的組合物的有效成分由以下重量份的原料制備而成：蠶蛹10-15份，石菖蒲2-3份，遠(yuǎn)志2-3份，人參1-1.2份，五味子1-1.2份，益智仁1-1.2份，肉蓯蓉1-1.2份，菟絲子1-1.2份。另外的，一種用于增強(qiáng)學(xué)習(xí)記憶力的組合物的有效成分由以下重量份的原料制備而成：蠶蛹10份，石菖蒲2份，遠(yuǎn)志2份，人參1份，五味子1份，益智仁1份，肉蓯蓉1份，菟絲子1份。本發(fā)明還公開一種上述的用于增強(qiáng)學(xué)習(xí)記憶力的組合物的制備方法，包括以下步驟：制備浸膏一：按重量份稱取蠶蛹，粉碎，得粗粉，按蠶蛹原料重量的10-15倍加水浸泡，隨后以鹽酸調(diào)節(jié)溶液ph值為1.5-2.5，再按蠶蛹重量百分比的0.3-0.6%加入胃蛋白酶和按蠶蛹重量百分比的0.3-0.6%加入胰蛋白酶，37℃酶解3-6小時，然后加熱使酶失活，過濾，得酶解液，將酶解液濃縮，即得浸膏一；制備浸膏二：按重量份稱取石菖蒲、遠(yuǎn)志和人參，按石菖蒲、遠(yuǎn)志和人參總重量的6-10倍加入體積百分含量為60%-80%乙醇溶液，回流提取2-4次，每次回流提取時間為2-4小時，合并濾液，將濾液濃縮，即得浸膏二；制備浸膏三：按重量份稱取五味子、益智仁、肉蓯蓉和菟絲子，按五味子、益智仁、肉蓯蓉和菟絲子總重量的10-15倍加入水，在80-100℃下浸提2-4次，每次浸提時間為2-4小時，合并濾液，將濾液濃縮，即得浸膏三；混合：將上述得到的浸膏一、浸膏二和浸膏三混合均勻，即得具有增強(qiáng)學(xué)習(xí)記憶力功能的組合物。該組合物再經(jīng)真空干燥，粉碎，得到粉末狀的浸膏，命名為組合物1。本發(fā)明的一種用于增強(qiáng)學(xué)習(xí)記憶力的組合物及其制備方法，采用復(fù)合生物酶解超濾技術(shù)提取蠶蛹有效成分，工藝方法獨(dú)特、條件溫和，可在有效提取蠶蛹活性成分的同時保留其生物活性，使得蠶蛹有效成分得到最大限度的利用。且該制備方法中，工藝科學(xué)合理，質(zhì)量穩(wěn)定、可控、便于操作，可實(shí)現(xiàn)工業(yè)化連續(xù)生產(chǎn)，生產(chǎn)成本低。制備的組合物具有良好的增強(qiáng)學(xué)習(xí)記憶力作用，同時還是抗衰老抗氧化和增強(qiáng)免疫力的代表中藥，尤其適用于老年學(xué)習(xí)記憶力減退患者。并且，這些原料均為食材或藥食兩用的藥材，符合中醫(yī)“藥食同源”理論，天然、毒副作用低，適合長期服用。具體實(shí)施方式下面詳細(xì)描述本發(fā)明的具體實(shí)施方式，本發(fā)明不受下述實(shí)施案例限制，可根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案與實(shí)際情況確定具體的實(shí)施方式。在描述中，在此所使用的某些術(shù)語僅用于參照，并不意味著進(jìn)行限制。本發(fā)明采取以下技術(shù)方案：一種用于增強(qiáng)學(xué)習(xí)記憶力的組合物，所述組合物的有效成分由以下重量份的原料制備而成：蠶蛹10-30份，石菖蒲2-10份，遠(yuǎn)志2-10份，人參1-5份，五味子1-5份，益智仁1-5份，肉蓯蓉1-5份，菟絲子1-5份。方中：蠶蛹為蠶蛾科昆蟲家蠶bymbyxmori(linnaeus)的干燥蛹。味甘、辛、咸，性微溫。歸脾、胃、肝、腎經(jīng)。蠶蛹《本草綱目》、《日華子本草》、《東醫(yī)寶鑒》、《醫(yī)林纂要》、《圣惠方》、《圣濟(jì)總錄》等古代醫(yī)藥經(jīng)典著作中均有詳細(xì)記載，蠶蛹具有生津止渴、消食理氣、鎮(zhèn)驚、壯陽、和脾胃、祛風(fēng)濕、長肌退熱等功效,用于治療虛損、小兒疳瘦、心血管疾病、慢性肝炎、腎陽不足等疾病，此外，還有滋補(bǔ)強(qiáng)壯作用。現(xiàn)代研究表明，蠶蛹中富含蛋白質(zhì)、脂肪、維生素a、b2、d和麥角甾醇等物質(zhì)。具有增強(qiáng)學(xué)習(xí)記憶力、降血糖、降血脂、抑制血小板凝集等功效。在增強(qiáng)學(xué)習(xí)記憶力方面，蠶蛹能明顯地提高正常小鼠跳臺被動回避反應(yīng)再現(xiàn)能力和提高避暗反應(yīng)再現(xiàn)能力，具有明顯改善記憶作用。還能顯著提高d-半乳糖所致衰老小鼠腦組織sod、gsh-px活性，降低脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物mda的含量，具有改善d-半乳糖致衰老小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力的作用。石菖蒲為天南星科植物石菖蒲a(bǔ)corustatarinowiischott的干燥根莖。味辛、苦，性溫。歸心、胃經(jīng)。具有化濕開胃，開竅豁痰，醒神益智的功效。用于脘痞不饑，噤口下痢，神昏癲癇，健忘耳聾等癥?，F(xiàn)代研究表明，石菖蒲中含有揮發(fā)油、糖類、有機(jī)酸、氨基酸等成分。具有調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、植物神經(jīng)系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和消化系統(tǒng)的作用，其最主要的藥理作用表現(xiàn)為中樞鎮(zhèn)靜抗驚作用。此外，藥理實(shí)驗(yàn)證明，與石菖蒲配伍的復(fù)方制劑能對抗樟柳堿引起的小鼠記憶障礙，提高正常小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力，增加大鼠腦內(nèi)去甲腎上腺素（na）和多巴胺（da）的含量，減少5-羥色胺（5-ht）、5-羥吲哚乙酸（5-hiaa）含量及增加腦內(nèi)蛋白質(zhì)和核酸的含量。遠(yuǎn)志為遠(yuǎn)志科植物遠(yuǎn)志polygalatenuifoliawilld.的干燥根。味苦、辛，性微溫。歸心、腎、肺經(jīng)。具有安神益智，祛痰，消腫的功效。用于心腎不交引起的失眠多夢，健忘驚悸，神志恍惚，咳痰不爽，瘡瘍腫毒，乳房腫痛等癥?，F(xiàn)代研究表明，遠(yuǎn)志中含有多種皂苷、口山酮、糖酯、生物堿類物質(zhì)。具有增強(qiáng)學(xué)習(xí)記憶力、鎮(zhèn)靜、中樞降壓、抗氧化、抗衰老等作用。人參五加科植物人參panaxginsengc.a.mey.的干燥根。味甘、微苦，性平。歸脾、肺、心經(jīng)。具有大補(bǔ)元?dú)?，?fù)脈固脫，補(bǔ)脾益肺，生津，安神等功效。用于體虛欲脫，肢冷脈微，脾虛食少，肺虛喘咳，津傷口渴，內(nèi)熱消渴，久病虛羸，驚悸失眠，陽痿宮冷；心力衰竭，心原性休克等癥?，F(xiàn)代研究表明，人參中含皂甙、揮發(fā)油、多糖、有機(jī)酸、黃酮類物質(zhì)和多種維生素。具有興奮神經(jīng)系統(tǒng)、調(diào)節(jié)血壓和血糖、抗氧化、抗衰老、提高視力等作用。五味子為木蘭科植物五味子schisandrachinensis（turcz.）baill.或華中五味子schisandrasphenantherarehd.etwils.的干燥成熟果實(shí)。味酸、甘，性溫。歸肺，心、腎經(jīng)。具有收斂固澀，益氣生津，補(bǔ)腎寧心之功效。用于久嗽虛喘，夢遺滑精，遺尿尿頻，久瀉不止，自汗，盜汗，津傷口渴，短氣脈虛，內(nèi)熱消渴，心悸失眠等癥?，F(xiàn)代研究表明，五味子中主要含有多種木脂素類物質(zhì)、多糖和揮發(fā)油。具有調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、提高學(xué)習(xí)記憶力、促進(jìn)肝糖原生成、提高免疫力等作用。益智仁為姜科植物益智alpiniaoxyphyllamiq.的果實(shí)。味辛，性溫。歸脾、腎經(jīng)。具有溫脾止瀉攝涎，暖腎縮尿固精的功效。用于脾胃虛寒，嘔吐，泄瀉，腹中冷痛，口多唾涎，腎虛遺尿，尿頻，遺精，白濁等癥。含有揮發(fā)油、并含豐富的b族維生素及維生素c，以及微量元素錳、鋅、鉀、鈉、鈣、鎂、磷、鐵、銅等。具有調(diào)節(jié)心血管系統(tǒng)、抗胃損傷、抑制前列腺素、升高外周血液白細(xì)胞的作用。肉蓯蓉為列當(dāng)科植物肉蓯蓉cistanchedeserticolay.c.ma的干燥帶鱗葉的肉質(zhì)莖。味甘、咸，性溫。歸腎、大腸經(jīng)。功效為補(bǔ)腎陽，益精血，潤腸通便?，F(xiàn)代研究表明，肉蓯蓉的主要成分是苯乙醇苷、環(huán)烯醚萜、木脂素和多糖類，肉蓯蓉總苷、苯乙醇苷類和多糖類具有改善微循環(huán)，增加心、腦及外周末梢血管循環(huán)的作用，能夠明顯的保護(hù)心腦血管和神經(jīng)系統(tǒng)。此外，肉蓯蓉還有抗疲勞、抗衰老、提高免疫力、調(diào)節(jié)循環(huán)系統(tǒng)等作用，有利于患者身體達(dá)到健康平衡狀態(tài)。菟絲子為旋花科植物菟絲子cuscutachinensislam.的干燥成熟種子。味辛、甘，性平。歸肝、腎、脾經(jīng)。具有補(bǔ)益肝腎，固精縮尿，安胎，明目，止瀉之功效。常用于肝腎不足，腰膝酸軟，陽痿遺精，遺尿尿頻，腎虛胎漏，胎動不安，目昏耳鳴，脾腎虛瀉；外治白癜風(fēng)等癥。菟絲子含生物堿、蒽醌、香豆素、黃酮、甙類、甾醇、鞣酸、糖類等成分。具有壯陽、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌、調(diào)節(jié)血壓、鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛等作用?！夺t(yī)方集解·補(bǔ)養(yǎng)之劑》指出“人之精與志，皆藏于腎，腎精不足則志氣衰，不能上通于心，故迷惑善忘也?！惫视洃浟p退多由精血虧虛所引起，由于年老肝腎虧虛，精虧髓減，腦髓失所養(yǎng)或思慮過度勞傷心脾、情志不遂木郁克土、飲食不節(jié)傷及脾胃而致脾胃運(yùn)化失司，氣血生化乏源，不能上榮于腦，腦髓失所養(yǎng)，皆可致記憶力減退。治宜益精氣，填精髓，補(bǔ)氣血，寧心養(yǎng)神。本方以蠶蛹為君，性平味甘，益精氣，健脾，生津止渴，營養(yǎng)先天之本；石菖蒲、遠(yuǎn)志芳香開竅，寧心安神，人參補(bǔ)益氣血，強(qiáng)壯后天之本，三藥共為臣藥；五味子補(bǔ)腎寧心，肉蓯蓉、益智仁、菟絲子補(bǔ)益肝腎，加強(qiáng)君藥益精填髓之力，共為佐使藥，全方共奏補(bǔ)精填髓之效。上述幾種藥材或食材通過合理的藥物配伍，達(dá)到了改善睡眠的作用。在其中一個實(shí)施例中，所述組合物的有效成分由以下重量份的原料制備而成：蠶蛹10-15份，石菖蒲2-3份，遠(yuǎn)志2-3份，人參1-1.2份，五味子1-1.2份，益智仁1-1.2份，肉蓯蓉1-1.2份，菟絲子1-1.2份。在其中一個實(shí)施例中，所述組合物的有效成分由以下重量份的原料制備而成：蠶蛹10份，石菖蒲2份，遠(yuǎn)志2份，人參1份，五味子1份，益智仁1份，肉蓯蓉1份，菟絲子1份。本發(fā)明還公開一種上述的用于增強(qiáng)學(xué)習(xí)記憶力的組合物的制備方法，包括以下步驟：制備浸膏一：按重量份稱取蠶蛹，粉碎，得粗粉，按蠶蛹原料重量的10-15倍加水浸泡，隨后以鹽酸調(diào)節(jié)溶液ph值為1.5-2.5，再按蠶蛹重量百分比的0.3-0.6%加入胃蛋白酶和按蠶蛹重量百分比的0.3-0.6%加入胰蛋白酶，37℃酶解3-6小時，然后加熱使酶失活，過濾，得酶解液，將酶解液濃縮，即得浸膏一；制備浸膏二：按重量份稱取石菖蒲、遠(yuǎn)志和人參，按石菖蒲、遠(yuǎn)志和人參總重量的6-10倍加入體積百分含量為60%-80%乙醇溶液，回流提取2-4次，每次回流提取時間為2-4小時，合并濾液，將濾液濃縮，即得浸膏二；制備浸膏三：按重量份稱取五味子、益智仁、肉蓯蓉和菟絲子，按五味子、益智仁、肉蓯蓉和菟絲子總重量的10-15倍加入水，在80-100℃下浸提2-4次，每次浸提時間為2-4小時，合并濾液，將濾液濃縮，即得浸膏三；混合：將上述得到的浸膏一、浸膏二和浸膏三混合均勻，即得具有增強(qiáng)學(xué)習(xí)記憶力功能的組合物。該組合物再經(jīng)真空干燥，粉碎，得到粉末狀的浸膏，命名為組合物1。本發(fā)明的制備方法，采用現(xiàn)代制藥技術(shù)提取原料中的有效成份，在保證療效的前提下，提高了便利性和口感。并且在制備蠶蛹浸膏一時，以胃蛋白酶和胰蛋白酶進(jìn)行酶解，使蠶蛹蛋白質(zhì)中的部分肽鍵水解，獲得吸收速度更快、生物活性更強(qiáng)的小分子多肽，使其更利于人體吸收，增加蠶蛹的生物利用度。在其中一個實(shí)施例中，制備浸膏一步驟中，所述胃蛋白酶和胰蛋白酶的重量比為2:1-1:2。在其中一個實(shí)施例中，制備浸膏一步驟中，將酶解液以截留分子量為50000的超濾柱進(jìn)行過濾，得濾液，濾液減壓濃縮，即得浸膏一。去除大分子雜質(zhì)，保留蠶蛹酶解所得的多肽、腺苷、多糖、多種維生素等主要活性成份，對蠶蛹的有效成份進(jìn)行純化。在其中一個實(shí)施例中，制備浸膏一步驟中，加熱至100℃保持20-30分鐘使酶失活。在其中一個實(shí)施例中，制備浸膏一步驟中，濾液減壓濃縮至55-65℃時密度為1.15-1.25g/ml的稠浸膏，再經(jīng)真空干燥，粉碎，得到粉末狀的浸膏一；制備浸膏二步驟中，濾液減壓濃縮至55-65℃時密度為1.15-1.25g/ml的稠浸膏，再經(jīng)真空干燥，粉碎，得到粉末狀的浸膏二；制備浸膏三步驟中，濾液減壓濃縮至55-65℃時密度為1.15-1.25g/ml的稠浸膏，再經(jīng)真空干燥，粉碎，得到粉末狀的浸膏三。本發(fā)明還公開了一種上述的組合物在制備用于增強(qiáng)學(xué)習(xí)記憶力的藥物或保健食品中的應(yīng)用。在其中一個實(shí)施例中，所述藥物或保健食品的劑型為片劑、顆粒劑、硬膠囊、軟膠囊、口服液、丸劑或滴丸。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果：本發(fā)明的一種用于增強(qiáng)學(xué)習(xí)記憶力的組合物，原料由蠶蛹、石菖蒲、遠(yuǎn)志、人參、五味子、益智仁、肉蓯蓉和菟絲子組成。這幾種藥材和食材相互配合，協(xié)同作用，具有良好的增強(qiáng)學(xué)習(xí)記憶力作用，同時還是抗衰老抗氧化和增強(qiáng)免疫力的代表中藥，尤其適用于老年學(xué)習(xí)記憶力減退患者。并且，這些原料均為食材或藥食兩用的藥材，符合中醫(yī)“藥食同源”理論，天然、毒副作用低，適合長期服用。對比例1石菖蒲、遠(yuǎn)志、人參組合物，通過以下原料制備而成：石菖蒲120克，遠(yuǎn)志120克，人參60克。具體制備方法如下：以上三味，按原料總重量的10倍量加入體積百分含量為70%的乙醇溶液，回流提取3小時，過濾，濾渣再以同樣的條件提取2次，合并濾液，在0.06mpa的壓力下以60℃濃縮至密度為1.15-1.25g/ml（60℃測）的稠浸膏；再在0.06mpa的壓力下以65℃干燥成干浸膏；干浸膏經(jīng)粉碎，過80目篩，得粉末狀的石菖蒲、遠(yuǎn)志、人參組合物。命名為組合物2。對比例2遠(yuǎn)志、人參、肉蓯蓉、菟絲子組合物，通過以下原料制備而成：遠(yuǎn)志120克，人參60克，肉蓯蓉60克、菟絲子60克。具體制備方法如下：按配方比稱取遠(yuǎn)志和人參，按原料總重量的10倍量加入體積百分含量為70%的乙醇溶液，回流提取3小時，過濾，濾渣再以同樣的條件提取2次，合并濾液，在0.06mpa的壓力下以60℃濃縮至密度為1.15-1.25g/ml（60℃測）的遠(yuǎn)志、人參浸膏；按配方比稱取肉蓯蓉和菟絲子，按原料總重量的15倍量加入水，煎煮3小時，過濾，濾渣再以同樣的條件提取2次，合并濾液，在0.06mpa的壓力下以60℃濃縮至密度為1.15-1.25g/ml（60℃測）的肉蓯蓉、菟絲子浸膏；將上述兩種浸膏混合，再在0.06mpa的壓力下以65℃干燥成干浸膏；干浸膏經(jīng)粉碎，過80目篩，得粉末狀的遠(yuǎn)志、人參、肉蓯蓉、菟絲子組合物。命名為組合物3。對比例3石菖蒲、遠(yuǎn)志、五味子、益智仁、肉蓯蓉、菟絲子組合物，通過以下原料制備而成：石菖蒲120克、遠(yuǎn)志120克、五味子60克、益智仁60克、肉蓯蓉60克、菟絲子60克。具體制備方法如下：按配方比稱取石菖蒲和遠(yuǎn)志，按原料總重量的10倍量加入體積百分含量為70%的乙醇溶液，回流提取3小時，過濾，濾渣再以同樣的條件提取2次，合并濾液，在0.06mpa的壓力下以60℃濃縮至密度為1.15-1.25g/ml（60℃測）的石菖蒲、遠(yuǎn)志浸膏；按配方比稱取五味子、益智仁、肉蓯蓉和菟絲子，按原料總重量的15倍量加入水，煎煮3小時，過濾，濾渣再以同樣的條件提取2次，合并濾液，在0.06mpa的壓力下以60℃濃縮至密度為1.15-1.25g/ml（60℃測）的五味子、益智仁、肉蓯蓉、菟絲子浸膏；將上述兩種浸膏混合，再在0.06mpa的壓力下以65℃干燥成干浸膏；干浸膏經(jīng)粉碎，過80目篩，得粉末狀的石菖蒲、遠(yuǎn)志、五味子、益智仁、肉蓯蓉、菟絲子組合物。命名為組合物4。對比例4石菖蒲、遠(yuǎn)志、人參、五味子、益智仁、菟絲子組合物，通過以下原料制備而成：石菖蒲120克、遠(yuǎn)志120克、人參60克、五味子60克、益智仁60克、菟絲子60克。具體制備方法如下：按配方比稱取石菖蒲、遠(yuǎn)志和人參，按原料總重量的10倍量加入體積百分含量為70%的乙醇溶液，回流提取3小時，過濾，濾渣再以同樣的條件提取2次，合并濾液，在0.06mpa的壓力下以60℃濃縮至密度為1.15-1.25g/ml（60℃測）的石菖蒲、遠(yuǎn)志、人參浸膏；按配方比稱取五味子、益智仁和菟絲子，按原料總重量的15倍量加入水，煎煮3小時，過濾，濾渣再以同樣的條件提取2次，合并濾液，在0.06mpa的壓力下以60℃濃縮至密度為1.15-1.25g/ml（60℃測）的五味子、益智仁、菟絲子浸膏；將上述兩種浸膏混合，再在0.06mpa的壓力下以65℃干燥成干浸膏；干浸膏經(jīng)粉碎，過80目篩，得粉末狀的石菖蒲、遠(yuǎn)志、人參、五味子、益智仁、菟絲子組合物。命名為組合物5。對比例5石菖蒲、遠(yuǎn)志、人參、五味子、益智仁、肉蓯蓉、菟絲子組合物，通過以下原料制備而成：石菖蒲120克、遠(yuǎn)志120克、人參60克、五味子60克、益智仁60克、肉蓯蓉60克、菟絲子60克。具體制備方法如下：按配方比稱取石菖蒲、遠(yuǎn)志和人參，按原料總重量的10倍量加入體積百分含量為70%的乙醇溶液，回流提取3小時，過濾，濾渣再以同樣的條件提取2次，合并濾液，在0.06mpa的壓力下以60℃濃縮至密度為1.15-1.25g/ml（60℃測）的石菖蒲、遠(yuǎn)志、人參浸膏；按配方比稱取五味子、益智仁、肉蓯蓉和菟絲子，按原料總重量的15倍量加入水，煎煮3小時，過濾，濾渣再以同樣的條件提取2次，合并濾液，在0.06mpa的壓力下以60℃濃縮至密度為1.15-1.25g/ml（60℃測）的五味子、益智仁、菟絲子浸膏；將上述兩種浸膏混合，再在0.06mpa的壓力下以65℃干燥成干浸膏；干浸膏經(jīng)粉碎，過80目篩，得粉末狀的石菖蒲、遠(yuǎn)志、人參、五味子、益智仁、肉蓯蓉、菟絲子組合物。命名為組合物6。實(shí)驗(yàn)例1對morris水迷宮行為的影響將上述實(shí)施例和對比例制備得到的組合物粉末進(jìn)行morris水迷宮實(shí)驗(yàn)。一、材料1.組合物，通過上述實(shí)施例和對比例制備得到的組合物1-6；2.注射用戊巴比妥鈉，上海新亞藥業(yè)有限公司；3.成年昆明小鼠，體重18-22g，雌性，購自軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心。二、方法1.動物分組和處理將昆明小鼠隨機(jī)分為8組:每組18只,分別為空白對照組、記憶障礙模型組、組合物1-6組（2.0g·kg-1·d-1）。對照組和模型組小鼠灌胃給予生理鹽水（20ml·kg-1·d-1），組合物1-6組分別灌服2.0g·kg-1·d-1的組合物1-6，連續(xù)灌胃14d，第15d除對照組外，其余各組均腹腔注射戊巴比妥鈉（20mg·kg-1）1次，建立記憶障礙動物模型。2.morris水迷宮行為測試于造模結(jié)束后進(jìn)行morris水迷宮系統(tǒng)的學(xué)習(xí)記憶能力測試，歷時5d，每天訓(xùn)練4次，每次分別從4個不同的象限將小鼠面向池壁放入水中，觀察并記錄小鼠在有效區(qū)的停留時間及穿越平臺的次數(shù)。如果小鼠在60s內(nèi)未找到平臺，需將其引至平臺，此時潛伏期記為60s，每次訓(xùn)練間隔60s。前4d為訓(xùn)練適應(yīng)期，第5天記錄小鼠尋找平臺的運(yùn)動軌跡，包括有效區(qū)停留時間、穿越平臺的次數(shù)、到達(dá)平臺的潛伏期，作為行為學(xué)實(shí)驗(yàn)的測試結(jié)果。三、結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表所示。表1各組小鼠morris水迷宮試驗(yàn)潛伏期結(jié)果（n=18）vs對照組：*p＜0.05，**p＜0.01；vs模型組：#p＜0.05，##p＜0.01。結(jié)果顯示，與正常對照組相比，模型組小鼠有效區(qū)停留時間、穿越平臺次數(shù)均縮短，到達(dá)平臺的潛伏期延長（p<0.05，p<0.01），表明記憶障礙動物模型建模成功；與模型組相比，組合物1組可顯著延長小鼠有效區(qū)停留時間、增加穿越平臺的次數(shù)，縮短到達(dá)平臺的潛伏期(p<0.05，p<0.01)，說明組合物1有增強(qiáng)小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的作用；與模型組相比，組合物2可延長小鼠有效區(qū)停留時間、增加穿越平臺的次數(shù)（p<0.05），但效果沒有組合物1明顯。此外，組合物2雖然可以縮短實(shí)驗(yàn)小鼠到達(dá)平臺的潛伏期時間，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與模型組相比，組合物3可增加小鼠穿越平臺的次數(shù)、縮短到達(dá)平臺的潛伏期（p<0.05），但效果沒有組合物1明顯。此外，組合物3雖然可以延長實(shí)驗(yàn)小鼠有效區(qū)停留時間，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與模型組相比，組合物4可延長小鼠有效區(qū)停留時間、增加穿越平臺的次數(shù)（p<0.05），但效果沒有組合物1明顯。此外，組合物4雖然可以縮短小鼠到達(dá)平臺的潛伏期，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與模型組相比，組合物5可增加穿越平臺的次數(shù)，縮短到達(dá)平臺的潛伏期（p<0.05），但效果沒有組合物1明顯。此外，組合物5雖然可以延長實(shí)驗(yàn)小鼠有效區(qū)停留時間，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與模型組相比，組合物6可延長小鼠有效區(qū)停留時間、增加穿越平臺的次數(shù)（p<0.05），但效果沒有組合物1明顯。此外，組合物6雖然可以縮短小鼠到達(dá)平臺的潛伏期，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。實(shí)驗(yàn)例2對氧化應(yīng)激相關(guān)酶活性及含量的影響將上述實(shí)施例和對比例制備得到的組合物粉末進(jìn)行氧化應(yīng)激相關(guān)酶活性及含量測定實(shí)驗(yàn)。一、材料1.組合物，通過上述實(shí)施例和對比例制備得到的組合物1-6；2.超氧化物歧化酶（superoxidedismutase，sod）試劑盒，購自南京建成公司；3.一氧化氮（nitricoxide，no）試劑盒，購自碧云天生物技術(shù)公司；4.過氧化氫酶（catalase，cat）試劑盒，購自南京建成公司；5.實(shí)驗(yàn)動物同實(shí)驗(yàn)例1。二、方法實(shí)驗(yàn)例1中動物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，取小鼠腦組織，用生理鹽水制備10%的腦組織勻漿，4℃，4000r·min-1離心15min，取上清液，按照試劑盒要求分別采用黃嘌呤氧化酶法、化學(xué)發(fā)光法、分光光度法測定腦組織sod，no，cat的活性。三、結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表所示。表2組合物對學(xué)習(xí)記憶障礙小鼠腦組織氧化應(yīng)激的酶的影響（n=18）組別劑量/g·kg-1cat/u·mg(prot)-1sod/u·mg(prot)-1no/μmol·l-1對照組23.52±6.36275.52±65.616.54±3.66模型組10.36±2.28**154.05±26.89**32.65±9.91**組合物12.026.82±6.75##260.36±59.21##10.74±4.22##組合物22.020.91±7.31#204.25±35.32#21.75±1.73組合物32.013.93±3.35201.18±42.46#18.06±5.94#組合物42.019.58±5.22#182.71±32.6316.35±4.27#組合物52.015.62±4.81213.54±55.69#16.88±6.31#組合物62.020.06±6.35#194.36±44.92#23.61±3.62vs對照組：*p＜0.05，**p＜0.01：vs模型組：#p＜0.05，##p＜0.01。結(jié)果顯示，模型組小鼠腦內(nèi)cat、sod活性低于正常對照組（p<0.01），no含量高于對照組（p<0.01），表明造模成功；與模型組相比，組合物1組可顯著提高小鼠腦內(nèi)cat的活性，顯著提高小鼠腦組織內(nèi)的sod活性并顯著降低no含量（p<0.01）；與模型組相比，組合物2組可提高小鼠腦內(nèi)cat的活性，提高小鼠腦組織內(nèi)的sod活性（p<0.05），但效果沒有組合物1明顯。此外，組合物2雖然可以降低小鼠腦組織內(nèi)no含量，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與模型組相比，組合物3組可提高小鼠腦組織內(nèi)的sod活性，降低小鼠腦組織內(nèi)no含量（p<0.05），但效果沒有組合物1明顯。此外，組合物3雖然可以提高小鼠腦內(nèi)cat的活性，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與模型組相比，組合物4組可提高小鼠腦組織內(nèi)的cat活性，降低小鼠腦組織內(nèi)no含量（p<0.05），但效果沒有組合物1明顯。此外，組合物3雖然可以提高小鼠腦內(nèi)sod的活性，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與模型組相比，組合物5組可提高小鼠腦組織內(nèi)的sod活性，降低小鼠腦組織內(nèi)no含量（p<0.05），但效果沒有組合物1明顯。此外，組合物5雖然可以提高小鼠腦內(nèi)cat的活性，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與模型組相比，組合物6組可提高小鼠腦內(nèi)cat的活性，提高小鼠腦組織內(nèi)的sod活性（p<0.05），但效果沒有組合物1明顯。此外，組合物6雖然可以降低小鼠腦組織內(nèi)no含量，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。實(shí)驗(yàn)例3對小鼠腦組織中單胺遞質(zhì)含量的影響將上述實(shí)施例和對比例制備得到的組合物粉末進(jìn)行小鼠腦組織中單胺遞質(zhì)含量測定實(shí)驗(yàn)。一、材料1.組合物，通過上述實(shí)施例和對比例制備得到的組合物1-6；2.去甲腎上腺素（norepinephrine，ne）、多巴胺鹽酸鹽（dopaminehydrochloride，da）、5-羥色胺鹽酸鹽（5-hydroxytryptaminehydrochloride，5-ht）均購自美國sigma公司；3.甲醇（色譜純）、檸檬酸三鈉購自merck公司；4.水為去離子水；5.實(shí)驗(yàn)動物同實(shí)驗(yàn)例1。二、方法在morns水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)束之后，每組取半數(shù)小鼠，用于檢測腦組織中單胺遞質(zhì)的含量。將小鼠斷頭，冰上取腦組織400mg，加0.1mol/l高氯酸（2ml），冰浴勻漿，4℃，14000r·min-1離心20min，取上清，0.45μm濾膜（millipore，usa）過濾，注入高效液相色譜儀，進(jìn)樣100μl。流動相：檸檬酸三鈉（20mmol/l），鹽酸調(diào)ph4.50，0.45μm濾膜過濾，加5％（v/v）甲醇，超聲脫氣，流速：1.0ml/min，柱溫：5℃，熒光檢測器波長：激發(fā)波280nm，發(fā)射波315nm；峰面積定量。三、結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表所示。表3組合物對學(xué)習(xí)記憶障礙小鼠腦組織中ne，da，5-ht含量的影響（n=18）組別劑量/g·kg-1ne/ng·g-1da/ng·g-15-ht/ng·g-1對照組5.54±1.321.25±0.411.72±0.36模型組7.82±1.21*1.52±0.35*0.65±0.39*組合物12.04.34±0.92##1.16±0.22#1.82±0.48##組合物22.05.22±1.57#1.39±0.261.38±0.45#組合物32.06.26±0.961.35±0.241.29±0.32#組合物42.05.45±1.26#1.31±0.321.15±0.41#組合物52.06.07±1.131.22±0.29#1.24±0.27#組合物62.05.66±1.35#1.26±0.38#0.92±0.32vs對照組：*p＜0.05，**p＜0.01；vs模型組：#p＜0.05，##p＜0.01。結(jié)果顯示，與對照組比較，模型組小鼠腦組織中ne，da含量增加，5-ht含量降低，含量變化均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05），表明建模成功；與模型組比較，組合物1組小鼠腦組織中ne，da含量明顯降低，5-ht含量明顯升高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05,p<0.01）；與模型組比較，組合物2組小鼠腦組織中ne含量降低，5-ht含量升高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05），但效果沒有組合物1明顯。此外，組合物2雖然可以降低小鼠腦組織中da含量，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與模型組比較，組合物3組小鼠腦組織中5-ht含量升高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05），但效果沒有組合物1明顯。此外，組合物3雖然可以降低小鼠腦組織中ne和da含量，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與模型組比較，組合物4組小鼠腦組織中ne含量降低，5-ht含量升高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05），但效果沒有組合物1明顯。此外，組合物4雖然可以降低小鼠腦組織中da含量，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與模型組比較，組合物5組小鼠腦組織中da含量降低，5-ht含量升高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05），但效果沒有組合物1明顯。此外，組合物5雖然可以降低小鼠腦組織中ne含量，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與模型組比較，組合物6組小鼠腦組織中ne，da含量降低，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05），但效果沒有組合物1明顯。此外，組合物6雖然可以升高小鼠腦組織中5-ht含量，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。當(dāng)前第1頁12