專利名稱：可注射入活的生物體的穩(wěn)定微泡的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及適用于注入活體的介質(zhì)，如用于超聲波回波描記的目的，更具體地講涉及包含空氣或生理學(xué)上可接受的氣體的微泡作為在水質(zhì)液體載體中的穩(wěn)定分散液或懸浮液的可注射的液體組合物。這些組合物在超聲波回波描記術(shù)中作為對(duì)比劑(contrast agent)非常有用，以使活體如病人或動(dòng)物的血管及其它腔內(nèi)部成像。其它的作用如以下所示公開的也作了考慮。
本發(fā)明也涉及干燥的組合物，它與水質(zhì)載體液體混合時(shí)，將產(chǎn)生上述微泡的無菌懸浮液，它可作為對(duì)比劑用于超聲波回波描記術(shù)及其它目的。
已知象空氣或氣體的微小球或微顆粒的微體，如微泡或微氣球，懸浮在液體中是在回波描記術(shù)中異常有效的超聲波反射體。在此文本中，術(shù)語“微泡”特定地指一般以分離的形式導(dǎo)入空氣或氣體而產(chǎn)生的在液體懸浮液中的空氣或氣體小球，在液體中優(yōu)先還含有表面活性劑以控制其表面性能及泡的穩(wěn)定性。更特定地，可考慮到微泡的內(nèi)體積系由氣體/液體界面所限定，或者換一句話說，微泡僅由相當(dāng)短暫的包復(fù)物限定，該包復(fù)物包含液體分子及松散連接在氣體到液體接合界面的表面活性劑。
相反地，術(shù)語“微囊”或“微氣球”系較佳指有物質(zhì)界面或外殼包復(fù)的空氣或氣體，該物質(zhì)界面或外殼由除懸浮液液體分子以外的物質(zhì)構(gòu)成，如聚合物膜壁。微泡和微氣球均適于做超聲波對(duì)比劑。例如，將在液體載體中的氣體微泡或微小球(在0.5到10μm范圍內(nèi))的懸浮液注入活體的血管流內(nèi)將大大增強(qiáng)超聲波回波描記術(shù)所成像，從而幫助顯現(xiàn)內(nèi)部器官的可見度。血管及內(nèi)部器官的成像可以大大幫助醫(yī)療上的診斷，如用于檢測心血管及其它疾病。
可根據(jù)各種方法制備適用于回波描記術(shù)的在可注射液體載體中的微泡懸浮液。例如在DE-A-3529195(Max-Planck Gesell)中公開了一種產(chǎn)生0.5-50μm泡的技術(shù)，其中含有水溶性聚合物，一種油及無機(jī)鹽的水質(zhì)可乳化混合物與少量空氣在一起，來回強(qiáng)迫從一個(gè)注射器通過一個(gè)小開口到另一個(gè)中去。在這里，機(jī)械力可使在液體中形成泡。
M.W.Keller st al.(J.ulfrasound Med.5(1986)，439-8)報(bào)道了使含高濃度溶質(zhì)如葡萄糖，Renografin-76，Iopamidol(一種X-射線對(duì)比劑)的溶液在大氣壓力下經(jīng)受超聲波空化。通過空化的能量將空氣驅(qū)動(dòng)入溶液中。
其它技術(shù)依賴于震搖其中已摻入含微粒的空氣的液體載體，所述液體載體通常包括有粘度增強(qiáng)劑作為穩(wěn)定劑，如水溶性多肽類或碳水化合物和/或表面活性劑。已有效地確認(rèn)通過液體載體的粘度和表面性質(zhì)可以控制微泡的穩(wěn)定性，以防止微泡的衰變或逃逸到大氣中。在微粒中的空氣或氣體可包括粒子間的或晶體內(nèi)所截留的氣體，也可包括表面吸附氣體，或由液體載體，通常是水質(zhì)的，反應(yīng)而產(chǎn)生的氣體。所有這些在如EP-A-52，575(Ultra Med.Inc)中得以充分描述，其中在1，2-乙二醇或聚乙二醇或其它水溶性聚合體的含水溶液中用了1-50μm微粒大小碳水化合物的聚集體(如半乳糖，麥芽糖，山梨醇，葡糖酸，蔗糖，葡萄糖及其類似物)。
在EP-A-123，235和122，624(Schering，也參見EP-A-320，433)中也應(yīng)用了吸收于固體中的空氣。例如，122，624權(quán)利要求保護(hù)的一種用于超聲波回波描記術(shù)的液體載體對(duì)比組合物，它含有固體表面活性劑的微粒，微粒任意地可與非表面活性劑的微粒結(jié)合。如在這個(gè)文本中所解釋，在溶液中的空氣泡是由于顆粒表面吸附的空氣，或在顆粒晶格內(nèi)吸收的空氣，或捕獲在單個(gè)顆粒間的空氣的釋放而形成的，當(dāng)微粒與液體載體攪和時(shí)，就出現(xiàn)這樣的情況。
EP-A-131，540(Schering)也公開了制備微泡懸浮液的方法，其中一種穩(wěn)定的可注射的液體載體，如生理鹽水溶液，或一種糖溶液如麥芽糖，葡萄糖，乳糖或半乳糖的溶液，沒有粘度增強(qiáng)劑，與含有截留空氣的同樣糖的微粒(在0.1到1μm范圍內(nèi))混合。為了使氣泡的懸浮液能在液體載體中形成，上述文本建議在無菌條件下劇烈攪拌液體和固體組分，對(duì)兩個(gè)組分的同時(shí)攪拌進(jìn)行幾秒鐘，一旦完成后，須立即使用此懸浮液，即必須在5到10分鐘內(nèi)注射它后即進(jìn)行回波描記術(shù)的測量，這表明懸浮液中的氣泡壽命不長，因此微泡懸浮液注射的一個(gè)實(shí)際困難是缺少隨時(shí)間的穩(wěn)定性。本發(fā)明充分克服了此缺點(diǎn)。
在US-A-4，466，442(Schering)中，揭示了一系列生產(chǎn)在液體載體中氣體微泡的懸浮液的不同技術(shù)，使用(a)一種在液體載體(水質(zhì))中的表面活性劑溶液，及(b)一種粘度增強(qiáng)劑作為穩(wěn)定劑。為產(chǎn)生氣泡，那兒使用的技術(shù)包括加力使(a)，(b)和空氣的混合物以高速通過一小的開口;或在使用生理學(xué)上合格的氣體之前一點(diǎn)點(diǎn)時(shí)間，將(a)注入(b)中;或在(a)中加入一種酸，及在(b)中加入一種碳酸鹽，就在使用前混合兩組分，酸與碳酸鹽反應(yīng)產(chǎn)生CO2氣泡;或?qū)⒊鰤旱目諝庾⑷朐趦?chǔ)存中的(a)和(b)的混合物中，當(dāng)使用混合物注射前，所述氣體被釋放成微泡。
在US-A-4，466，442的組分(a)中使用的表面活性劑包括卵磷脂;脂肪酸的酯和醚;以及具有聚氧乙烯和多氧乙基化多元醇的脂肪醇，如山梨醇，1，2-乙二醇及甘油，膽固醇;以及聚氧乙烯-聚氧丙烯聚合體。提高及穩(wěn)定粘度的化合物包括例如單糖類或多糖類(葡萄糖，乳糖，蔗糖，右旋糖，山梨醇);多元醇，例如甘油，聚乙二醇;及多肽如蛋白質(zhì)，明膠，氧代聚合明膠，血漿蛋白質(zhì)及其類似物。
在此文本中的一個(gè)典型較好的實(shí)施例中，等量體積的(a)0.5%重量的Pluronic F-68(一種聚氧丙烯-聚氧乙烯聚合體)及(b)10%的乳糖溶液在一起在無菌條件下劇烈震搖(封閉管形瓶)，以提供微泡懸浮液，適于用作超聲波對(duì)比劑，并可維持至少2分鐘，約50%氣泡的大小小于50μm。
雖然已有技術(shù)的實(shí)行具有優(yōu)點(diǎn)，但是它們具有幾個(gè)極大的局限它們被醫(yī)生和醫(yī)院實(shí)際應(yīng)用的缺點(diǎn)，即它們比較短的生存時(shí)間(這使測試重演性困難)，相當(dāng)?shù)偷钠鹗細(xì)馀轁舛?泡數(shù)很少，少于104-105個(gè)/ml，此計(jì)數(shù)隨時(shí)間快速下降)，從測試到測試的起始?xì)馀萦?jì)數(shù)的重演性差(這也使得和對(duì)照難于比較)。也承認(rèn)有效地使一些器官如左心臟造影，需要小于50μm，較佳在0.5到10μm范圍的氣泡;更長的氣泡可能有凝塊及連續(xù)性栓塞的危險(xiǎn)。
另外，在液體載體中固體微?；蚋邼舛入娊赓|(zhì)及其它比較惰性的溶質(zhì)的強(qiáng)迫性存在時(shí)，在有些情況下可能在生理學(xué)上是不需要的。最后，懸浮液在儲(chǔ)存條件下是完全不穩(wěn)定的，并且不能以此市售;因此就在使用前合適的時(shí)間需要制備微泡。
當(dāng)然也存在微囊的穩(wěn)定懸浮液，即具有固體，封存空氣的堅(jiān)固聚合物膜，它在懸浮液中完好地抵抗長時(shí)間的儲(chǔ)存時(shí)間，已發(fā)展了它以克服此缺點(diǎn)(參見如K.J.Widder，EP-A-324，938);但是，在其中氣體封閉在固體膜囊中的微囊的性質(zhì)與本發(fā)明的空氣微泡有本質(zhì)上的不同，并且屬于不同領(lǐng)域;例如當(dāng)在載體液中的穩(wěn)定劑經(jīng)排泄或代謝時(shí)，所討論的氣體微泡僅僅在血流中逃逸或溶解，形成上述微氣球的壁的固體聚合物材料須最終由測試的生物體清除，這可能使之增加很重的后負(fù)擔(dān)。另外，具有固體非彈性膜的囊可能在壓力變化下不可逆地破裂。
本發(fā)明的如權(quán)利要求1限定的組合物完全克服了上述的缺點(diǎn)。
術(shù)語“多層片型”限定本發(fā)明組合物的至少一部分表面活性劑或表面活性劑的條件表明此表面活性劑，與已有技術(shù)的微粒強(qiáng)烈相反(例如EP-A-123，325)，是薄膜型，它包括一種或多種分子層(以多層片型)。將形成膜的表面活性劑轉(zhuǎn)變成多層型能夠容易地做成的，例如通過高壓均化或通過聲波化在聲學(xué)或超聲波頻率下進(jìn)行。在此必須指出的是脂質(zhì)體的存在是眾所周知的及有用的描述，來描述其中表面活性劑，更特定地是脂質(zhì)類，是多層片型的情況。
脂質(zhì)體溶液是細(xì)小囊的水質(zhì)懸浮液，通常是球形的，其中包裹了物質(zhì)。這些囊通常由一或多種同心安排的分子層(薄層)的兩親性化合物形成，即兼具有憎脂親水部分和親脂疏水部分的化合物。例見“Liposome Mcthodology”，Ed，L.D.Leserman et al Inserm 136，2-8 May 1982)。許多表面活性劑，包括脂類，尤其是磷脂，可以層壓至相應(yīng)于此結(jié)構(gòu)。在此發(fā)明中，人們優(yōu)先使用通常用來制作脂質(zhì)體的脂類，例如在其后公開的卵磷脂及其它表面活性劑，但這并不排除用其它表面活性劑，只要它們能形成多層或多層膜層。
重要的是需注意不應(yīng)在本發(fā)明和Ryan(US-A-4，900，540)文本之間有任何混淆，后者報(bào)告用于回波描記術(shù)的空氣或氣體填充脂質(zhì)體。在此方法中Ryan在脂質(zhì)體小囊中包裹了空氣或氣體;在本發(fā)明的實(shí)施例中，在脂質(zhì)體懸浮液中形成了本發(fā)明的空氣或氣體微泡(即裝有液體的脂質(zhì)體)，以及脂質(zhì)體能明顯地穩(wěn)定微泡。在Ryan中，空氣在脂質(zhì)體內(nèi)，它意味著在現(xiàn)今用的命名的范圍內(nèi)，Ryan的裝有空氣的脂質(zhì)體屬于微氣球?qū)伲粚儆诒景l(fā)明的微泡。
實(shí)踐上，為了得到本發(fā)明的微泡懸浮液，可以從用已有技術(shù)報(bào)道過的任何技術(shù)制備的脂質(zhì)體懸浮液或溶液開始，明顯的區(qū)別是在現(xiàn)在情況下，脂質(zhì)體囊優(yōu)先是“未裝載”的，即他們不需要在其中包入任何除懸浮液外的外來物質(zhì)，而傳統(tǒng)脂質(zhì)體一般裝有此類目標(biāo)。因此優(yōu)先地，本發(fā)明的脂質(zhì)體含有同溶液本身的含水相相同的或相似的水相。然后將空氣或氣體引入脂質(zhì)體溶液中，這樣將形成微泡懸浮液，所述懸浮液由以多層形的表面活性劑穩(wěn)定。盡管如此，形成脂質(zhì)體壁的材料可以在本發(fā)明范圍內(nèi)加以修飾，例如在其上面用共價(jià)鍵嫁接這些外來分子，這些外來分子將解釋為特定目的而設(shè)計(jì)，的，以后將作說明。
在許多出版物，如US-A-4，224，179和Wo-A-88/09165及所有其中提到的引證中已充分描述了脂質(zhì)體溶液的制備。這個(gè)已有技術(shù)在這里作為舉例說明各種適于將形成膜的表面活性劑轉(zhuǎn)變成多層型的參考材料。另一個(gè)基礎(chǔ)參考例可在M.C.Woodle和D.Papahadjopoulos，“Methods in Enzymology”171(1989)193中發(fā)現(xiàn)。
例如，在D.A.Tyrrell et al，Biochimica & Biophysica Aota 457(1976)，259，302中公開的方法中，劇烈攪拌脂類和水質(zhì)液體載體的混合物，然后在室溫或提升溫度下聲學(xué)或超聲波頻率下使用聲波處理它。在本發(fā)明中，已證實(shí)不用攪拌的聲波處理是可行的。另一方面，可使用做脂質(zhì)體的設(shè)備，例如MicofluidizerR的高壓均化器，它可從Microfluidics Corp.，Newton，MA 02164 USA購得。在可達(dá)600-1200巴的壓力下用此設(shè)備可制得大量脂質(zhì)體溶液。
在另一個(gè)方法中，根據(jù)GB-A-2，134，869(Squibb)所指導(dǎo)的，水溶性固體載體微粒(10μm或更小)(NaCl，蔗糖、乳糖及其它碳水化合物)用兩親試劑包衣;包衣載體在水相中溶解而產(chǎn)生脂質(zhì)囊。在GB-A-2，135，647中，不溶性顆粒如玻璃或樹脂微珠通過在有機(jī)溶劑中的脂類溶液中使它潮濕而包衣，接著蒸發(fā)去除溶劑。脂類包衣的微珠接著與水質(zhì)載體相接觸，其中在載體相中形成脂質(zhì)囊。
將空氣或氣體引入脂質(zhì)體溶液以形成微泡懸浮液可通過一般方法進(jìn)行，特別是注射，即加力迫使所述空氣或氣體通過小孔進(jìn)入脂質(zhì)體溶液，或通過使用壓力單純使氣體溶解在溶液中，然后突然釋放去該壓力。另一種方法是在空氣或可截留在內(nèi)的氣體存在下攪拌或聲波化此脂質(zhì)體溶液，另一方面也可在脂質(zhì)體溶液本身中產(chǎn)生形成氣體，例如通過氣體釋放的化學(xué)反應(yīng)，如用酸分解可溶解碳酸鹽或碳酸氫鹽。同樣的作用也可通過在壓力下在水相中溶解低沸點(diǎn)液體，例如丁烷，然后通過立即降去壓力使所述液體沸騰。
盡管這樣，一種優(yōu)越的方法是在多層型或薄膜形的干燥表面活性劑引入到液體載體相前，使之與空氣或可吸收的或可截留的空氣接觸。在此方面，可用GB-A-2，135，647中揭述的技術(shù)所衍生的方法，即將固體微粒或珠浸在揮發(fā)性溶劑中的成膜表面活性劑(或表面活性劑混合物)溶液中，隨后將溶劑蒸發(fā)掉，將珠留下與空氣(或可吸收氣體)接觸足夠長的時(shí)間使空氣表面上與表面活性劑層的表面結(jié)合。然后，將裝有表面活性劑并有空氣包裹的珠放入液體載體中，通常是有或沒有添加劑的水中，其中通過溫和攪拌在液體中形成空氣泡，根本不需要?jiǎng)×覕嚢琛Ｈ缓罂赏ㄟ^例如過濾將固體珠從微泡懸浮液中分離出來，該微泡懸浮液隨時(shí)間非常穩(wěn)定。
不用說，除用不溶珠或小球外，可以使用支持顆粒水溶性材料如GB-A-2，134，869中所描述(碳水化合物或親水聚合體)，其中所述支持顆粒最終將溶解，固體的最后分離將變得不必要。另外在此案中，顆粒材料需要的話時(shí)可被選來最終作為穩(wěn)定劑或粘度增強(qiáng)劑。
在此方法的一個(gè)變種中也可從脫水脂質(zhì)體開始，即通過常規(guī)技術(shù)制備的水溶液形式的脂質(zhì)體，隨后通過普通方法脫水，如在US-A-4，229，360中公開的也在此結(jié)合作為參考。在此參考材料中推薦的脫水脂質(zhì)體的一個(gè)方法是凍干(冷凍干燥)，即在減壓下冷凍脂質(zhì)體溶液并蒸發(fā)干燥(升華)。在進(jìn)行凍干前，將親水性穩(wěn)定劑化合物溶解在溶液中，例如如乳糖或蔗糖的碳水化合物，或像右旋糖酐，淀粉，PVP(聚乙烯吡咯烷)，PVA(聚乙烯醇)及其類似物的親水聚合物。在本發(fā)明中這很有用，因?yàn)檫@種親水化合物也幫助均化微泡的大小分布及增強(qiáng)儲(chǔ)存下的穩(wěn)定性。實(shí)際上做成極稀的凍干脂質(zhì)體的水溶液(0.1-10重量百分?jǐn)?shù))，用例如5∶1到10∶1的乳糖對(duì)脂類的重量比穩(wěn)定，可產(chǎn)生達(dá)108-109微泡/毫升(大小分布主要是0.5-10μm)的含水微泡懸浮液，它們能穩(wěn)定至少一個(gè)月(可能更長)而無顯著的可觀察到的變化。通過將存儲(chǔ)有空氣的干燥脂質(zhì)體簡單溶解而不震搖或任何劇烈攪拌可獲得它。另外，在減壓下的凍干技術(shù)很有用，因?yàn)樗试S在干燥后，在干燥脂質(zhì)體上用任何可截留的氣體以重建壓力，即氮?dú)猓珻O2，氬，甲烷，氟利昂等，在此條件下處理過的脂質(zhì)體溶解后，獲得含上述氣體的微泡懸浮液。
通過在水中的多層脂類稀釋溶液(0.1-10重量百分?jǐn)?shù))上加氣體壓力，然后突然釋放壓力形成微泡懸浮液，具有甚至更高的氣泡濃度，如在級(jí)數(shù)1010-1011泡數(shù)/毫升。但是，平均汽泡大小一般在10μm以上，如在10-50μm范圍內(nèi)。在此情況下，氣泡大小分布輻度可通過離心和層傾析而減小。
適于在本發(fā)明中使用的表面活性劑可選自在水和氣體存在下能形成穩(wěn)定膜的所有兩親性化合物。較佳可成多層的表面活性劑包括卵磷脂(磷脂?；?膽堿)及其它磷脂，特別是磷脂酸(PA)，磷脂酰-肌醇，磷脂酰-乙醇胺(PE)，磷脂酰-絲氨酸(PS)，磷脂酰-丙三醇(PG)，心脂(CL)，神經(jīng)鞘磷脂，原漿，腦苷脂類等。合適脂類的例子總體上說是磷脂，如天然卵磷脂，如雞蛋卵磷脂或大豆卵磷脂，或合成卵磷脂如飽和合成卵磷脂，例如二一十四酰磷脂酰膽堿，二一十六酰磷脂酰膽堿或二一十八酰磷脂酰膽堿或不飽和合成卵磷脂，如二油酰磷脂酰膽堿或二亞油酰磷脂酰膽堿，較佳為雞蛋或大豆卵磷脂。象膽固醇及其它物質(zhì)(見以下)的添加劑可以從0到50重量百分比的范圍的比例加入一種或多種上述脂類中。
這些添加劑可包括其它可與成膜表面劑混合的表面活性劑，它們中的大多數(shù)已在本說明書介紹中討論的已有技術(shù)中得以描述。例如，可用游離脂肪酸，脂肪酸與聚氧化烯化合物的酯，如聚氧丙烯乙二醇和聚氧乙烯乙二醇的醚;脂肪醇與聚氧化烯乙二醇的醚;脂肪酸與聚氧烷化脫水山梨醇的酯;肥皂;丙三醇-聚鏈烯基硬脂酸脂，丙三醇-聚氧乙烯蓖麻醇酸酯;聚氧化烯乙二醇的齊聚物或共聚物;聚乙氧化大豆油及蓖麻油及其氫化衍生物，蔗糖或其它碳水化合物與脂肪酸，脂肪醇的酯及醚，這些可任意地是聚氧烷化的，不飽和或飽和脂肪酸的單，二及三甘油酯;大豆油及蔗糖的甘油酯。非膜形成表面活性劑的量可達(dá)組合物中表面活性劑總量的50重量百分比，但較佳在0和30之間。
相對(duì)于水液體載體的表面活性劑的總量在0.01到25重量百分?jǐn)?shù)之間，但在0.5到5范圍內(nèi)的量是較佳的，因?yàn)槿藗兛偸潜M其可能將在可注射溶液中的活性物質(zhì)的量壓低，這是為了減少向活體輸入外來物質(zhì)，即使當(dāng)它們是無害或生理學(xué)上可配伍時(shí)。
在表面活性劑中進(jìn)一步任意的添加劑包括(a)已知能在脂質(zhì)體上提供負(fù)電荷的物質(zhì)，例如磷脂酸，磷脂酰-丙三醇或二一十六烷基磷酸酯;
(b)已知能提供正電荷的物質(zhì)，例如十八烷胺或十八烷胺乙酸酯;
(c)已知能以更需要的形式影響脂類膜的物理性質(zhì)的物質(zhì);例如己內(nèi)酰胺和/或甾醇如膽固醇，麥角甾醇，植物甾醇，谷甾醇，谷甾醇焦谷氨酸脂，7-脫氫-膽固醇或羊毛甾醇，可以影響脂類膜的剛性;
(d)已知具有抗氧化性質(zhì)，能促進(jìn)懸浮液中組分化學(xué)穩(wěn)定性的物質(zhì)，如維生素E，棓酸丙酯，抗壞血酸棕櫚酸酯，或丁基羥基甲苯。
本發(fā)明中的水載體大部分是水，可能具有少量生理學(xué)上可相容的液體，如異丙醇，甘油，己醇及其類似物(例見EP-A-52，575)?？傮w上說，有機(jī)水可溶性液體的量不超過5到10重量百分比。
本發(fā)明組合物也可能含溶解的或懸浮在內(nèi)的一般稱為粘度增強(qiáng)劑或穩(wěn)定劑的親水化合物及聚合物。雖然這些化合物的存在并不是強(qiáng)迫的，以保證空氣或氣體在本分散液中隨時(shí)間的穩(wěn)定性，但它們是優(yōu)越的，能給溶液一些“稠度”。當(dāng)需要時(shí)，當(dāng)完全無毒時(shí)這些添加劑的上限濃度可以很高，例如對(duì)Iopamol和其它碘化X射線對(duì)比劑可高達(dá)溶液的80到90重量百分比。但是對(duì)其它粘度增強(qiáng)劑例如糖類，如乳糖，蔗糖，麥芽糖，半乳糖，葡萄糖等，或親水聚合物如淀粉，葡聚糖，糊精，黃原膠或部分水解纖維素寡聚體，以及蛋白質(zhì)和多肽，濃度最佳在1到40重量百分?jǐn)?shù)之間，較佳在約5-20范圍內(nèi)。
如已有技術(shù)中，本發(fā)明的可注射組合物也可含生理學(xué)上合格的電解質(zhì);一種例子是等滲鹽溶液。
本發(fā)明自然也包括干燥的可儲(chǔ)存的粉狀摻合物，當(dāng)它與水或含水載體相簡單混合時(shí)，能產(chǎn)生本發(fā)明的含微泡分散液。較佳地這些干燥摻合物或制劑將含有所需所有的當(dāng)僅加入水時(shí)會(huì)提供所需微泡懸浮液的固體組分，即實(shí)質(zhì)上多層型其中截留的或吸附了的微泡形成所需空氣或氣體的表面活性劑，以及需要地其它非形成膜的表面活性劑，粘度增強(qiáng)劑及穩(wěn)定劑以及可能地其它任意添加劑。如前所述，由多層型表面活性劑截留空氣或氣體可通過簡單地使所述表面活性劑在室壓或超大氣壓力下暴露在空氣(或氣體)中足夠長的時(shí)間，引起所述空氣或氣體截留在表面活性劑中而發(fā)生。這段時(shí)間可以非常短即幾秒鐘到幾分鐘，雖然過度暴露即在空氣或氣體環(huán)境下儲(chǔ)存也無害。重要的是空氣可以盡其可能很好地與層壓的表面活性劑的可能表面接觸，即干燥材料須較佳是處于“松軟的”輕度流動(dòng)狀態(tài)。這狀態(tài)精確地如此，是由于凍干脂質(zhì)體的水溶液和親水試劑的水溶液而形成的，如US-A-4，229，360中所描述。
總體上說，在干燥制劑中表面活性劑對(duì)親水粘度增強(qiáng)劑的重量比率在0.1∶10到10∶1級(jí)，如有進(jìn)一步任意組分，存在比率相對(duì)于表面活性劑加粘度增強(qiáng)劑的總量不超過50%。
本發(fā)明的干燥摻合制劑可由很簡單的方法制備。如前所見，一個(gè)較佳的方法是先制備其中膜成形脂類是多層形的水溶液，例如通過聲波化，或用脂質(zhì)體領(lǐng)域中常用的任何常規(guī)技術(shù)，該溶液也可含其它所需添加劑，即粘度增強(qiáng)劑，非成膜表面活性劑，電解質(zhì)等，然后凍干成自由流動(dòng)的粉末，然后將它儲(chǔ)存在具有空氣或可截留氣體環(huán)境下。
干燥混合物可以干燥狀態(tài)保有任何長短時(shí)間，并且這樣售出。將它投入使用時(shí)，即制備超聲波成像氣體或空氣微泡懸浮液時(shí)，僅需將已知重量的干燥粉狀制劑溶解于無菌水相，如水或生理學(xué)上可接受的介質(zhì)中。粉末依賴于在可注射產(chǎn)品中氣泡所需濃度，約108-109汽泡/毫升一般需5-20重量百分比粉末在水中的溶液。但是自然地這數(shù)字僅是表示性的，氣泡量主要依賴于在制作干燥粉末時(shí)截留的空氣或氣體量。當(dāng)生產(chǎn)步驟處于控制下時(shí)，干燥制劑的溶解可以提供具有很好重復(fù)計(jì)數(shù)的微泡懸浮液。
所得微泡懸浮液(氣泡在0.5-10μm范圍內(nèi))隨時(shí)間特別穩(wěn)定，在起始原測量的計(jì)數(shù)可在幾周甚至幾月內(nèi)維持不變或只有少量變化，僅能觀察到的變化是分離現(xiàn)象，較大的氣泡(約10μm)傾向于比小的升得快。
還發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的微泡懸浮液稀釋時(shí)微泡數(shù)由于稀釋的損失非常小，即在高比率稀釋的情況下，即1/102到1/104，微泡計(jì)數(shù)的減少準(zhǔn)確地與稀釋比率相符。這表明氣泡的穩(wěn)定性更依賴于多層型的表面活性劑，而不是如已有技術(shù)中穩(wěn)定劑或粘度增強(qiáng)劑的存在?？紤]到成像測試重復(fù)性，這性質(zhì)是有利的，因?yàn)樵谧⑸淙氩∪藭r(shí)，氣泡并不受血液稀釋的影響。
與已有技術(shù)由具有剛性但可破的膜所包圍的在應(yīng)力下不可逆地破損的微囊相比，本發(fā)明的氣泡的另一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是當(dāng)本發(fā)明懸浮液經(jīng)受突然壓力變化時(shí)，本發(fā)明氣泡暫時(shí)性彈性收縮，當(dāng)壓力釋放時(shí)恢復(fù)原來的形狀。在臨床應(yīng)用上時(shí)這很重要，當(dāng)微泡泵出心臟，并且隨后暴露于可選擇壓力搏動(dòng)。
本發(fā)明中微泡如此穩(wěn)定的原因尚未徹底弄懂。因?yàn)榉乐箽馀萏右?，浮力?yīng)該與摩擦力即粘度引起的維持力平衡，推理氣泡可能被多層狀的表面活性劑所圍繞。這多層片狀的表面活性劑是否是連續(xù)的或不連續(xù)的膜，或者是否可能是作為封閉球體與微泡相連，目前還未知但正在研究中。但是對(duì)目前涉及的情況缺乏詳細(xì)的知識(shí)并不排除對(duì)本發(fā)明的完全工業(yè)上可操作性。
本發(fā)明的氣泡懸浮液在其它醫(yī)學(xué)/診斷應(yīng)用中也有用，在那些中在注射后需將穩(wěn)定微泡瞄準(zhǔn)體內(nèi)的特定位點(diǎn)，例如導(dǎo)向血管中的血栓，導(dǎo)向動(dòng)脈中的動(dòng)脈粥樣硬化損害處(空斑)，導(dǎo)向腫瘤細(xì)胞，以及用于診斷體腔的改變的表面積，如在胃中的潰瘍位點(diǎn)或膀胱中的腫瘤。為達(dá)到這目的，將通過基因工程得到的單克隆抗體，設(shè)計(jì)成模擬抗體的抗體片段或多肽，生物粘附性聚合體，卵磷脂和其它位點(diǎn)識(shí)別性分子與穩(wěn)定微泡的表面活性劑層結(jié)合。這樣通過由L.D.Leserman，P.Machy及J.Barbet描述的方法(“Lipsome Technology Vol.Ⅲ”p.29ed by G.Gregoriadis，CRC Press 1984)，單克隆抗體可與磷脂雙分子層結(jié)合。在另一個(gè)方法中，先合成十六烷?；贵w，然后根據(jù)L.Huang，A.Huang及Kennel(“Liposome Technology Vol.Ⅲ”p51 ed.by Gregoriadis，CRC 1984)與磷脂雙分子層結(jié)合。可選擇地，可仔細(xì)選擇一些本發(fā)明中用的某些磷脂以獲得在器官或組織中較佳的吸收，或在血中增加的半衰期。因此，含GM1神經(jīng)節(jié)苷脂或磷脂酰肌醇的脂質(zhì)體，優(yōu)先除膽固醇外，在靜脈內(nèi)給藥后將導(dǎo)致在血中增加半衰期，類似于A.Gabizon，D，Papahadjopoulos，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 85(1988)6949。
在本發(fā)明中微泡中的氣體可包括，除現(xiàn)在的無害生理學(xué)上合格的氣體如CO2，氮?dú)?，N2O，甲烷，丁烷，氟利昂及其混合物外，在核醫(yī)學(xué)中尤感興趣的放射性氣體如133Xe或81Kr，用于血液循環(huán)測量，肺閃爍法等。
以下的實(shí)施例從實(shí)踐角度出發(fā)進(jìn)一步說明本發(fā)明。
回波測量回波測量在脈沖-回聲系統(tǒng)上進(jìn)行，該系統(tǒng)包括有膠質(zhì)玻璃樣品架(直徑30mm)，及浸在恒溫水浴中的傳感器，在接收部分有脈沖接收器(Accutron M 30105)，用于接收部分外部預(yù)放大器具有固定的放大系數(shù)為40dB，內(nèi)部放大器具有可調(diào)節(jié)的從-40到+40dB的放大系數(shù)。在接收部分中安插入一個(gè)10MHz的低通濾波器以使信號(hào)增強(qiáng)到噪音比率。在IBM PC中的A/D板是Sonotek STR 832。在2.25，3.5，5和7.5MHz進(jìn)行測量。
實(shí)施例1通過REV方法(見F.Szoka Jr.及D.Papahadjopoulos，Proc.Natl.Acad，Sci USA 75(1987)4194)用氫化大豆卵磷脂(NC 95H，Naffermann Chemie，K
ln，W.Germany)及二一十六烷(三十二烷)磷酸酯，摩爾比為9/1在蒸餾水中制備脂質(zhì)體溶液(50毫克脂類每升)。在65℃脂質(zhì)體制劑擠壓(以較準(zhǔn)囊的大小)通過1μm聚碳酸酯濾器(Nucleopore)。2毫升該溶液與5毫升75%在水中的Ipamidol溶液及0.4毫升空氣混合，加力該混合物來回通過一個(gè)二注射器系統(tǒng)，如DE-A-3529195中所描述，同時(shí)連續(xù)維持略微的過壓。這結(jié)果是在液體中形成空氣微泡的懸浮液(每毫升105-106氣泡，如光學(xué)顯微鏡檢查估計(jì)氣泡大小為1-20μm)，在室溫穩(wěn)定幾小時(shí)。在7.5，5，3.5和2.25MHz用超聲波回波描記術(shù)測試時(shí)，此懸浮液給出強(qiáng)回聲信號(hào)。
實(shí)施例2含2%(重量)氫化大豆磷脂及二一十六烷磷酸脂摩爾比為9/1的蒸餾水溶液(100毫升)在60-65℃用Bransom探針聲波器(250型)聲波化15分鐘。
冷卻后，在10，000g將溶液離心15分鐘，回收上清液，加入乳糖使成7.5%b.w的溶液。溶液置于緊閉密的容器中，其中震搖容器時(shí)在幾分鐘內(nèi)使壓力為4巴的氮?dú)鈮?。接著，突然釋放壓力，這樣獲得高濃度的氣泡懸浮液(1010-1011氣泡/毫升)。氣泡大小分布比實(shí)施例1中的大，即約1到50μm。溶液很穩(wěn)定，但幾天后，在固定相中發(fā)生分離現(xiàn)象，較大的氣泡趨向于在懸浮液的上層濃集。
實(shí)施例3將20克玻璃珠(直徑約1毫米)浸在含100毫克二一十六酰磷脂酰膽堿(Fluka A.G.Buchs)的10毫升氯仿溶液中。珠在減壓情況下在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，直到所有CHCl3逃逸掉。然后將珠在大氣壓下進(jìn)一步旋轉(zhuǎn)幾分鐘，加入10毫升蒸餾水。移去珠子，獲得空氣微泡的懸浮液，在顯微鏡下檢查后發(fā)現(xiàn)含106氣泡/毫升。氣泡的平均大小約3-5μm。懸浮液至少幾天內(nèi)穩(wěn)定。
實(shí)施例4用如實(shí)施例1中所描述的REV技術(shù)使在水中的氫化大豆卵磷脂二一十六烷磷酸脂懸浮液成多層狀。將2毫升脂質(zhì)體制劑加入含15%麥芽糖的蒸餾水溶液8ml中。所得溶液在-30℃冰凍，然后在0.1托下冷凍干燥。在幾小時(shí)后冰完全升華。然后，在抽空容器中恢復(fù)空氣壓力，這樣幾分鐘后，凍干粉末使空氣飽和。
然后在溫和攪拌下，使干燥粉末溶解于10毫升無菌水中，獲得微泡懸浮液(108-109微泡每毫升，動(dòng)態(tài)粘度＜20mpa.s)。這懸浮液含多數(shù)氣泡在1-5μm范圍之內(nèi)，在很長時(shí)間內(nèi)穩(wěn)定，因?yàn)樵谥梅?個(gè)月后仍可測到無數(shù)的氣泡。此微泡懸浮液在超聲波回波描記術(shù)中給出很強(qiáng)的應(yīng)答。如果在此實(shí)施例中溶液通過在空氣中在-30℃到-70℃噴射以獲得冰凍雪花而不是整塊，并且雪花在真空中蒸發(fā)，這樣獲得卓越的結(jié)果。
實(shí)施例5如實(shí)施例4中所述獲得的脂質(zhì)體溶液取2毫升樣品與10毫升5%明膠水溶液(樣品5A)，人白蛋白(樣品5B)，葡聚糖(樣品5C)及Iopamidol(樣品5D)的含水溶液混合。所有樣品均經(jīng)冷凍干燥。在冷凍干燥和引入空氣后，各種樣品與20毫升無菌水溫和混合。在所有情況下，氣泡濃度在108氣泡每毫升以上，幾乎所有氣泡小于10μm。前面實(shí)施例的步驟用9毫升脂質(zhì)體制劑(450毫克脂類)及僅1毫升5%人白蛋白溶液重復(fù)。在冷凍干燥后，暴露于空氣，及加入無菌水(20毫升)后，所得溶液含2×108氣泡每毫升，它們中的大多數(shù)小于10μm。
實(shí)施例6乳糖(500毫克)精細(xì)地研磨到顆粒大小為1-3μm，用含100毫克二一十四酰磷脂酰膽堿/膽固醇/二一十六酰磷脂酸(來自Fluka)，摩爾比為4∶1∶1的氯仿溶液(5毫升)濕潤，然后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中在真空下蒸發(fā)。所得自由流動(dòng)性白色粉末在氮?dú)庀鲁合滦D(zhuǎn)幾分鐘，然后溶解于20毫升無菌水中。獲得約105-106微泡每毫升，微泡在1-10μm大小范圍內(nèi)，如在顯微鏡下觀察到。在此實(shí)施例中，包覆了的表面活性劑對(duì)水溶性載體的重量比為1∶5。當(dāng)將此比率降到較低值如1∶20時(shí)，也獲得卓越的結(jié)果(107-108微泡/毫升)，這實(shí)際上增加了表面活性攝取空氣的效率，即這鈄減少產(chǎn)生同樣氣泡計(jì)數(shù)的需要的表面活性劑重量。
實(shí)施例7
含2%氫化大豆卵磷脂和0.4%PluronicRF68(一種非離子型聚氯乙烯一聚氧丙烯共聚物表面活性劑)如實(shí)施例2所述聲波化。冷卻和離心后，將5毫升此溶液加入到5毫升含15%麥芽糖的水中。所得溶液在-30℃冰凍，在0.1托蒸發(fā)。然后在含干燥粉末的容器中恢復(fù)空氣壓力。它在空氣中置放幾秒鐘，然后它被用來制做10重量百分比的水溶液，在顯微鏡下檢查表現(xiàn)出是微小氣泡(小于10μm)的懸浮液;氣泡濃度在107氣泡每毫升范圍內(nèi)。這制劑在2.25，3.5，5和7MHz下在超聲波回波描記術(shù)中給出很強(qiáng)應(yīng)答。
實(shí)施例8在實(shí)驗(yàn)狗上往外周靜脈內(nèi)注入0.1到2毫升實(shí)施例4中獲得的制劑后，進(jìn)行二維心回波描記術(shù)測量。看到左心渾濁化，具有清楚的心內(nèi)膜輪廓，這樣確定了微泡(或至少它們的顯著部分)能通過肺毛細(xì)管循環(huán)。
實(shí)施例9如實(shí)施例4所述制備磷脂/麥芽糖凍干粉末。但是，在凍干步驟的末期，將含133Xe的氣體混合物代替空氣引入抽空容器中。幾分鐘后，引入無菌水，溫和攪拌后，產(chǎn)生在氣相中含133Xe的微泡懸浮液。將此微泡懸浮液注入活體以進(jìn)行需要用133Xe作為追蹤劑的研究。獲得卓越的結(jié)果。
實(shí)施例10(對(duì)照)在US-A-4，900，540中，Ryan等人描述用裝有氣體的脂質(zhì)體進(jìn)行超聲波測試，根據(jù)文獻(xiàn)，脂質(zhì)體是通過常規(guī)方法制備的，但在水質(zhì)組合物中加入氣體或氣體前體以形成脂質(zhì)核芯(卷2，15-27行)。
在參考文獻(xiàn)中的實(shí)施例1和2中詳細(xì)描述了使用氣體前體(碳酸氫鹽)。用加入氣體的水載體將氣體包裹在脂質(zhì)體中(未被Ryan等人舉例描述過)需要該氣體是很小的氣泡形式，即相似或小于脂質(zhì)體囊的大小。
在M.W.Keller等人，J.Ultrasound Med，5(1986)，413-498中揭示了其中空氣能以很小的氣泡(2.5-5μm)被截留的水介質(zhì)。
在20毫升圓底燒瓶中，將126毫克卵磷脂和27毫克膽固醇溶解在9毫升氯仿中。脂類溶液在Rotavapor上蒸發(fā)到干燥，這樣在燒瓶壁上形成脂類膜。根據(jù)M.W.Keller等人(ibid)將10毫升50重量百分?jǐn)?shù)葡萄糖溶液聲波化5分鐘以在其中產(chǎn)生空氣微泡，然后將聲波化溶液倒入含脂類膜的燒瓶中，這樣通過手工搖動(dòng)容器，結(jié)果在含氣泡的載體液體中磷脂發(fā)生水合作用，形成多層的脂質(zhì)體。
置放一會(huì)兒后，所得脂質(zhì)體懸浮液在5000g離心15分鐘以從載體中去除未封存入囊中的空氣。在離心中，也可見裝有空氣的脂質(zhì)體由于浮力而分離到表面上。
離心后檢查試管，顯示在底部殘余物包括附聚葡萄糖填裝的脂質(zhì)體，上清液中基本上已無剩下的氣泡，由浮力上升的裝有空氣的脂質(zhì)體的數(shù)量小得可以忽略，不能被觀察到。
實(shí)施例11(對(duì)照)根據(jù)Ryan(US-A-4，900，540，col.3，Example 1)制備注射對(duì)照組合物。將126毫克蛋卵磷脂和27毫克膽固醇溶解在9毫升二乙醚中。在溶液中加入3毫升0.2摩爾含水碳酸氫鹽，使所得兩相系統(tǒng)聲波化直至均勻。混合物在Rotavapor Apparatus中蒸發(fā)并加入3毫升0.2摩爾含水碳酸氫鹽。
將1毫升脂質(zhì)體懸浮液部分注入實(shí)驗(yàn)兔的頸靜脈中，該動(dòng)物處于用Acuson 125-XP5超聲波成像機(jī)(7.5傳感器探針以使心臟成像)進(jìn)行心臟超聲波成像情況下。探針提供左右心室的截面像(乳頭中間肌)。注射后，可觀察到右心室輪廓的光度和瞬間增加(幾秒鐘)。這效果與用實(shí)施例4的制劑觀察到的效果相比要差很多。未觀察到左心室成像的改進(jìn)現(xiàn)象，很可能表明裝有CO2的脂質(zhì)體不能越過肺毛細(xì)管屏障。
權(quán)利要求
1.一種適用于注射進(jìn)活體血管和體腔內(nèi)的組合物，如用于超聲波回波描記術(shù)的目的，包括在生理學(xué)上可接受的水質(zhì)載體相中的空氣或氣體微泡懸浮液，含有約0.01到20百分重量的一種或多種溶解的或分散的表面活性劑，其特征在于至少一種在組合物中的膜形成表面活性劑至少部分是薄片狀的或多層形。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于多層狀的表面活性劑是單或多分子膜層形式。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于多層狀表面活性劑是脂質(zhì)體囊形式。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于它主要包括其中形成空氣或氣體微泡的脂質(zhì)體溶液。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的組合物，其特征在于多數(shù)脂質(zhì)體和微泡的大小小于50μm，較佳小于10μm。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，含約108-109的0.5-10μm大小/毫升的氣泡，所述濃度在儲(chǔ)存下至少一個(gè)月只有很少或基本無變化。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于表面活性劑選自包括卵磷脂的磷脂，如磷脂酸，磷脂酰-膽堿，磷脂酰-乙醇胺，磷脂酰-絲氨酸，磷脂酰甘油磷脂酰肌醇，心脂及神經(jīng)鞘磷脂。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的組合物，其特征在于其進(jìn)一步含影響脂質(zhì)體性質(zhì)的物質(zhì)，選自磷脂酰-甘油，二-十六烷-磷酸酯，膽固醇，麥角甾醇，植物甾醇，谷甾醇，羊毛甾醇，維生素E，棓酸丙酯，抗壞血酸酰棕櫚酸酯及丁化羥基甲苯。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，進(jìn)一步包含溶解的粘度增強(qiáng)劑或穩(wěn)定劑，選自線性的或交聯(lián)的聚或寡多糖，糖，親水聚合物及如Iopamidol的碘化化合物，含量與表面活性劑比重量比率在1∶5到100∶1之間。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中表面活性劑含高達(dá)50百分重量的非多層型表面活性劑，選自脂肪酸，脂肪酸的酯和醚，以及具有多元醇的醇，如聚鏈烯乙二醇，聚鏈烯化糖及其它碳?xì)浠衔?，以及聚鏈烯化乙二醇?br> 11.制備權(quán)利要求1所述的懸浮液的方法，其特征在于下列步驟(a)選擇至少一種能形成膜的表面活性劑并將它轉(zhuǎn)變成多層型;(b)使多層型表面活性劑與空氣或可吸收或可截留氣體接觸足夠長的時(shí)間，使該空氣或氣體被所述表面活性劑結(jié)合;及(c)將多層型表面活性劑與水質(zhì)載體混合，這樣將得到在所述液體載體中空氣或氣體微泡的穩(wěn)定分布。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中步驟(c)系置于步驟(b)前，后者是通過向液體載體引入加壓空氣或氣體，然后釋放壓力而形成的。
13.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中步驟(c)是通過溫和混合組分而完成的，不需要震搖，這樣在步驟(b)中與多層狀表面活性劑結(jié)合的空氣或氣體在懸浮液中形成穩(wěn)定微泡。
14.根據(jù)權(quán)利要求11或12所述的方法，其中液體載體含有溶解在其中的穩(wěn)定劑化合物，選自水溶性蛋白質(zhì)，多肽，糖，多糖類或寡糖類及親水性聚合體。
15.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中步驟(a)中的轉(zhuǎn)變是通過將表面活性劑包覆在可溶性或不溶性材料顆粒上完成的;步驟(b)是通過使包覆了的顆粒在空氣或氣體下置放一會(huì)兒而完成的;及步驟(c)是通過混合包覆了的顆粒與含水液體載體。
16.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中步驟(a)中的轉(zhuǎn)變是通過在高壓下使膜形成脂類的含水溶液聲波化或均化，這個(gè)方法至少部分導(dǎo)致形成脂質(zhì)體。
17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的方法，其中步驟(b)是通過冷凍干燥含脂質(zhì)體的溶液并使所述冷凍干燥產(chǎn)物與空氣或氣體接觸一段時(shí)間而進(jìn)行的，所述溶液含親水穩(wěn)定劑。
18.根據(jù)權(quán)利要求16和17所述的方法，其中膜形成脂類的水溶液還含粘度增強(qiáng)劑或穩(wěn)定劑，它們選自親水聚合物及碳水化合物，其重量比相對(duì)于脂類在1∶5到100∶1之間。
19.一種干燥粉狀制劑，當(dāng)溶解于水中時(shí)，將形成水質(zhì)微泡懸浮液用于超聲波回波描記術(shù)，其特征在于含一種或多種多層形的膜形成表面活性劑及水溶性穩(wěn)定劑。
20.根據(jù)權(quán)利要求19的干燥制劑，其中多層形的表面活性劑是細(xì)小層形沉積在可溶性或不溶性固體顆粒材料的表面。
21.根據(jù)權(quán)利要求20所述的干燥制劑，其中不溶性固體顆粒是玻璃或聚合物珠。
22.根據(jù)權(quán)利要求20所述的干燥制劑，其中可溶性顆粒包括水溶性碳水化合物，多糖，合成聚合物，白蛋白，明膠或Iopamidol。
23.根據(jù)權(quán)利要求19的干燥制劑，它包括冷凍干燥的脂質(zhì)體。
24.根據(jù)權(quán)利要求1的可注射組合物用于超聲波回波描記術(shù)。
25.根據(jù)權(quán)利要求1-10的可注射的組合物的應(yīng)用，用于在血液或體腔中運(yùn)送治療上或診斷上有活性的外來氣體的氣泡。
26.根據(jù)權(quán)利要求4所述的組合物，其中表面活性劑包含與此結(jié)合的生物活性品種，它們是為特定定向目的，如在循環(huán)系統(tǒng)，或在器官中或在組織中在特定位置固定化氣泡而設(shè)計(jì)的。
27.根據(jù)權(quán)利要求4所述的組合物，其中表面活性劑包含與此結(jié)合的生物活性品種，這些生物活性品種選自單克隆抗體，抗體片段或多肽設(shè)計(jì)成模擬抗體，生物粘著性聚合體，卵磷脂及其它受體識(shí)別分子。
全文摘要
在水相中的氣體或空氣填裝的微泡懸浮液，在超聲波回波描記術(shù)中用作成像對(duì)比劑。它們含有多層狀的表面活性劑及任意地親水穩(wěn)定劑。多層狀的表面活性劑可以是脂質(zhì)體形式。懸浮液是通過在與水相混合前或后使多層狀的表面活性劑暴露于空氣或氣體中而獲得的。
文檔編號(hào)A61B5/055GK1055298SQ9110216
公開日1991年10月16日 申請(qǐng)日期1991年4月2日 優(yōu)先權(quán)日1990年4月2日
發(fā)明者米切爾·施奈德, 丹尼爾·比雄, 菲利普·布塞, 杰羅姆·皮杰尼爾, 伊娃·海比 申請(qǐng)人:辛苔蒂加股份有限公司