專利名稱：醫(yī)用天然水蛭素的提取方法
醫(yī)用天然水蛭素的提取方法涉及動物有效成份的提取。
近一百年來，人們從被水蛭叮吸后血流不止的現(xiàn)象中肯定了水蛭體內(nèi)含有抗凝血物質(zhì)。威爾士國家醫(yī)學院的JohnB、Haycrafft教授發(fā)現(xiàn)，醫(yī)蛭咽部具有抗熱的水溶性抗凝血活性物質(zhì)，1903年F.Frany分離了較純的類似活性物質(zhì)，1904年C、Jacoby將其命名為水蛭素(hirudin)。長期來，由于提取水蛭素的資源-水蛭，分布雖廣，但稀少不集中，又難以捕捉，因此無法投入生產(chǎn);可是水蛭素又是在醫(yī)學上有許多特殊作用的活性物質(zhì)，國外用水-丙酮混合溶液提取，乙醇分級沉淀，陽離子交換柱和凝膠過濾色譜純化法提取精制水蛭素，但是該法步驟繁瑣、試劑價格昂貴;還有一些大公司投入巨額資金，用基因工程方法重組天然水蛭素的類似物，因此每克試劑用的水蛭素價格高達8萬美元左右，而且，目前國內(nèi)、外沒有供醫(yī)藥用的水蛭素。
本發(fā)明研制的提取方法不僅方法簡便，試劑價格低廉，而且提高了水蛭素的收率。
達到上述發(fā)明目的的技術(shù)方案是將水蛭洗凈去除泥土等雜質(zhì)后整體搗碎成漿狀，水蛭漿加溫至60-80℃，并維持2-3分鐘，在加溫后的水蛭漿中加入10%的冰醋酸調(diào)整PH值在4.4-4.6，隨即冷卻至25-30℃，再加10%的Na2CO3調(diào)整PH值在6-7，將水蛭漿離心收集母液，殘渣加入0.9%的生理鹽水浸提2-3次，收集全部浸提液，將此母液透析36小時，每隔12小時換水一次，透析液用95%以上的乙醇沉淀，先加95%以上乙醇使其含量為61%，放置12小時，傾去上清液，再加同樣濃度的乙醇使其含量為85%，放置24小時，得到水蛭素沉淀，沉淀低溫干燥得粗品，粗品用適量二次蒸餾水溶解后再透析16小時，透析液抽濾滅菌，冷凍干燥制成精品。
一般提取水蛭素是取頭部半截搗碎后提取，而本發(fā)明采用的整體水蛭，這樣可以充分利用水蛭體內(nèi)的儲存食物的11對素囊中水蛭分必的水蛭素，從而可以大大提高水蛭素的得率。
將1公斤水蛭，全部搗碎為泥漿狀，水蛭漿加溫至75℃，維持3分鐘，用10%冰醋酸調(diào)PH值至4.5，然后加冰塊降溫至30℃，用10%Na2CO3調(diào)PH值至6.5，水蛭漿離心脫水，收集母液，殘渣用少量生理鹽水水洗、攪拌，離心脫水，重復洗渣一次，收集三次溶液，裝入透析袋，透析36小時，每12小時換水一次，透析液加入95%以上乙醇使?jié)舛冗_61%，沉淀12小時，收集上層清液，再加同樣濃度的乙醇使?jié)舛冗_85%，沉淀48小時，收集沉淀，30℃溫度條件下真空干燥，除去含有的乙醇，干燥的沉淀用100ml二次蒸餾水溶解后裝入透析袋，透析16小時，8小時換水一次，透析液用G6漏斗抽濾滅菌，濾液真空干燥得4.1克成品。
用本發(fā)明方法提取的醫(yī)用天然水蛭素工藝方法簡單，水蛭素的收率提高到千分之四，從而大大降低了天蛭素的生產(chǎn)成本。
權(quán)利要求
1.一種醫(yī)用天然水蛭素的提取方法，用生理鹽水浸提，本發(fā)明的特征在于(1)將水蛭洗凈去除泥土等雜質(zhì)后，整體搗碎成泥漿狀，(2)水蛭漿加溫至60-80℃，并維持2-3分鐘，(3)在加溫后的水蛭漿中加入10%的冰醋酸調(diào)整pH值在4.4-4.6，隨即冷卻至25-30℃，再加10%Na2CO3調(diào)整pH值在6-7，(4)水蛭漿經(jīng)離心收集母液，殘渣加入0.9%的生理鹽水先后浸提2-3次，收集全部浸提液，(5)母液透析36小時，每隔12小時換水一次，(6)透析液用95%以上乙醇沉淀，先加95%乙醇使其含量為61%，放置12小時，傾去上清液，再加同樣濃度的乙醇使其含量為85%，放置24小時，得到水蛭素沉淀，(7)將沉淀低溫干燥得粗制品，(8)粗制品用適量二次蒸餾水溶解，再透析16小時，透析液抽濾滅菌，溶液冷凍干燥得精品。
全文摘要
醫(yī)用天然水蛭素的提取方法，涉及動物有效成分的提取。本發(fā)明采用從整體水蛭中提取水蛭素，先把水蛭漿加溫后調(diào)節(jié)pH值至4.4—4.6，又降溫再調(diào)節(jié)pH值至6—7，然后離心脫水，殘渣用生理鹽水反復洗滌，母液透析后用95％以上乙醇分級沉淀，沉淀真空干燥后用水溶解，再次透析，最后真空干燥得到精品。用本發(fā)明提取的水蛭素工藝方法簡便，成品質(zhì)量合格，而且收率提高到千分之四，從而大大降低了產(chǎn)品成本。
文檔編號A61K35/62GK1082409SQ9210707
公開日1994年2月23日 申請日期1992年7月28日 優(yōu)先權(quán)日1992年7月28日
發(fā)明者胡維明 申請人:胡維明