專利名稱：：用于預(yù)防和/或治療病毒感染和各種炎癥的藥物組合物及其治療方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種用于預(yù)防和治療病毒感染以及病毒感染所伴隨的各種炎癥的藥物組合物。更具體地講，本發(fā)明涉及含有β-羽扇醇作為抗病毒活性成分的藥物組合物。本發(fā)明另外還涉及通過(guò)給所需治療的患者口服施用本發(fā)明的藥物組合物來(lái)預(yù)防和治療病毒感染及各種炎癥的方法。
背景技術(shù)：
：到目前為止，仍然不能提供一種用于預(yù)防和/或治療由感冒病毒(例如流感病毒、鼻病毒、冠狀病毒等)或其它上呼吸道內(nèi)的病毒所引起的病毒感染的有效的組合物。幾乎所有人都時(shí)?；忌虾粑栏腥?，例如感冒和流感。這些感染的癥狀包括咽喉疼痛、耳痛(耳炎)、流鼻涕、眼睛酸癢、肌肉和關(guān)節(jié)疼痛。這些感染是由各種不同的病毒所引起，這些病毒合在一起稱為“感冒病毒”。雖然對(duì)于有限的一些流感毒株有疫苗，但對(duì)于大多數(shù)上呼吸道感染卻沒(méi)有有效的預(yù)防或治療方法。這些病毒感染(例如由與全部上呼吸道病毒感染的大約50％有關(guān)的鼻病毒所引起的感染)流傳廣泛，對(duì)于易感人群，例如兒童、老人、以及患有免疫缺陷的病人(例如AIDS病人、癌癥病人等)可以引起疾病或直接產(chǎn)生致命的影響。用于治療這些癥狀以及引起這些癥狀的感染的方法非常重要。英國(guó)專利申請(qǐng)2198041A公開(kāi)了一種主要含有羽扇醇的組合物。據(jù)稱該組合物對(duì)治療酒精成癮有效，但似乎并不能將該效果歸因于羽扇醇。EP-A-0287000公開(kāi)了一種制備主要含有羽扇醇的植物提取物的方法。據(jù)稱該提取物可用于治療前列腺肥大，但并不清楚該效果是否與羽扇醇有關(guān)。WO90/14764公開(kāi)了多種具有抗病毒效果的萜臭氧化物。但這些化合物與β-羽扇醇完全不同，它們含有三個(gè)氧原子，形成了一個(gè)三氧環(huán)戊烷的環(huán)?？共《拘Чc該三氧環(huán)戊烷的環(huán)系有關(guān)。在中國(guó)，通過(guò)口服未純化的苦參水提取物來(lái)治療慢性肝炎已延用年。但上述治療中的活性化合物并不清楚。因而不能預(yù)見(jiàn)可以從苦參中提取出特殊的部分，即β-羽扇醇，它具有本說(shuō)明書中所述的預(yù)想不到的有用效果。發(fā)明概述本發(fā)明首先涉及一種用于預(yù)防和/或治療病毒感染的藥物組合物，所述組合物的特征在于含有一種或多種下式的β-羽扇醇衍生物其中R代表氫原子；直鏈或支鏈的脂肪族C1-6-烴基，它可以是飽和的或含有一個(gè)或多個(gè)選自雙鍵和三鍵的不飽和鍵；C1-6-?；?，它可以是直鏈或支鏈的，并且可以含有一個(gè)或多個(gè)選自雙鍵和三鍵的不飽和鍵；或易于在人或動(dòng)物體內(nèi)的正常條件下分解釋放出β-羽扇醇衍生物的基團(tuán)，以及常用的可藥用輔助劑、添加劑和載體。脂肪族C1-6-烴基包括甲基、乙基、支鏈和直鏈的丙基、丁基、戊基和己基、乙烯基、支鏈和直鏈的丙烯基、丁烯基、戊烯基和己烯基、乙炔基、支鏈和直鏈的丙炔基、丁炔基和己炔基；以及含有兩個(gè)或多個(gè)雙鍵和三鍵的相應(yīng)的化合物。C1-6-?；柞；?、乙?；⒅ф満椭辨湹谋；?、丁?；⑽祯；图乎；⒁蚁；⒅ф満椭辨湹谋；?、丁烯?；?、戊烯?；图合；⒍∪蝉；⒅ф満椭辨湹谋蝉；?、丁炔?；?、戊炔?；图喝蝉；灰约昂袃蓚€(gè)或多個(gè)雙鍵和三鍵的相應(yīng)的化合物。應(yīng)當(dāng)理解，易于在人或動(dòng)物體內(nèi)的正常條件下分解的基團(tuán)包括任何可以在生理?xiàng)l件下轉(zhuǎn)變?yōu)棣?羽扇醇衍生物的基團(tuán)。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案，R是氫。另外，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)銨離子的存在可以對(duì)多種實(shí)驗(yàn)室病毒，例如VSV(＝水皰性口炎病毒)和塞姆利基(Semliki)病毒、以及鼻病毒產(chǎn)生抗病毒效果。通過(guò)銨離子介導(dǎo)的抗病毒效果的最可能的機(jī)制被認(rèn)為是與銨離子可以干擾銨離子敏感的病毒與靶細(xì)胞上的病毒受體結(jié)合從而增強(qiáng)宿主或環(huán)境通過(guò)非特異性細(xì)胞過(guò)程、或通過(guò)適當(dāng)?shù)目贵w進(jìn)行中和來(lái)消除病毒的能力這一事實(shí)有關(guān)。這些病毒包括，例如HIV-病毒、肝炎病毒、普通感冒病毒(例如鼻病毒、流感病毒等)或其它傳染性的銨離子敏感病毒。初步實(shí)驗(yàn)表明，銨離子只通過(guò)膜樣的相互作用在受體水平產(chǎn)生效果，因此所述的銨離子必須在將病毒引入細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)持續(xù)地存在以產(chǎn)生最佳的抗病毒效果。因此，本發(fā)明另一個(gè)目的是提供一種含有上述分子式I的β-羽扇醇衍生物以及可釋放銨離子的化合物的藥物組合物。銨離子優(yōu)選由可藥用的無(wú)機(jī)或有機(jī)酸的鹽產(chǎn)生?？梢允褂萌魏慰伤幱玫乃幔琨}酸、硫酸、磷酸、碳酸、乙酸和酒石酸。優(yōu)選使用氯化銨、硫酸銨、碳酸氫銨或磷酸二氫銨。銨離子還可以從通式II的化合物產(chǎn)生其中X1-X4可以相同或不同，選自氫；C1-6烷基，它可以是直鏈或支鏈的、飽和或不飽和的，并可以任意含有一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基、C1-4烷氧基或氨基的取代基；芳基，它被可以C1-4烷基、鹵素、羥基、C1-4烷氧基或氨基任意取代，并且Y是可藥用的成鹽陰離子，優(yōu)選選自F-、Cl-、Br-和I-。已發(fā)現(xiàn)β-羽扇醇與銨離子的組合可以對(duì)多種病毒(例如VSV、鼻病毒、可能還有流感病毒)產(chǎn)生增效的抗病毒效果。本發(fā)明的第三個(gè)方面涉及一種如上所定義的藥物組合物，該組合物還進(jìn)一步含有一種或多種單、寡或多聚糖或類似物的一或多硫酸酯和/或其衍生物，包括具有肝素或類肝素的結(jié)構(gòu)但不具有抗凝性質(zhì)的化合物。已知病毒感染可以引起炎癥，這可能是由于中性粒細(xì)胞在感染區(qū)域聚集并通過(guò)釋放各種物質(zhì)，例如細(xì)胞活素和其它介質(zhì)而引起進(jìn)一步的炎癥所造成。此外，還認(rèn)為鄰接于中性粒細(xì)胞或位于中性粒細(xì)胞內(nèi)的陽(yáng)離子蛋白配合物起重要的作用，因?yàn)樗鼈兛梢源龠M(jìn)炎癥反應(yīng)，造成已知的感冒癥狀(咽喉疼、關(guān)節(jié)疼、發(fā)燒等)。初步實(shí)驗(yàn)表明，少量存在與肝素的結(jié)構(gòu)有關(guān)但不具有肝素的抗凝效果的富陰離子物質(zhì)〔例如蔗糖八硫酸酯(SOS)，或其它SOS樣物質(zhì)的鈉鹽〕可以消除該過(guò)程，因?yàn)楹笳呖梢浴爸泻汀贝嬖谟诰奂闹行粤＜?xì)胞中的陽(yáng)離子蛋白的電荷。被中和了電荷的粒細(xì)胞通過(guò)ICAM-1-標(biāo)記物與病毒感染的細(xì)胞結(jié)合，從而使通常的炎癥反應(yīng)大大減弱或徹底抑制炎癥反應(yīng)。已知使用硫酸酯化的糖，包括蔗糖八硫酸酯的鋁配合物(硫糖鋁)來(lái)治療胃腸部位的炎癥或在皮膚上局部應(yīng)用來(lái)預(yù)防或治療炎癥，參見(jiàn)，例如DK公開(kāi)申請(qǐng)165357和DK-PS169018。另外，歐洲專利申請(qǐng)0230023A2公開(kāi)了用于促進(jìn)潰瘍愈合的含有硫酸酯化的寡糖(包括蔗糖八硫酸酯)的藥物組合物。因此推測(cè)，SOS與局部生長(zhǎng)因子一起形成一種生物活性配合物，該配合物可以分別引發(fā)和穩(wěn)定生長(zhǎng)因子從而加速潰瘍愈合過(guò)程。在上呼吸道內(nèi)或其周圍存在硫酸酯化的糖被認(rèn)為是有利的，因?yàn)檫@些物質(zhì)可以在微生物感染較輕的期間內(nèi)，特別是在病毒感染引起炎癥的期間內(nèi)加速咽喉或口腔內(nèi)的潰瘍愈合(例如通過(guò)陽(yáng)離子物質(zhì)的存在)。硫酸酯化的糖將保留在炎癥區(qū)域從而減弱感染區(qū)域的炎癥過(guò)程。本發(fā)明的一個(gè)特殊方面是分別用作口腔和淋巴性咽環(huán)內(nèi)、下呼吸道(鼻咽以下)周圍的抗炎物質(zhì)的硫酸酯化的糖，以及治療該區(qū)域內(nèi)炎癥的方法。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案，糖是一或多硫酸酯化的單、二、三或四糖。根據(jù)一個(gè)具體的實(shí)施方案，糖是選自木糖、果糖和葡萄糖的單糖或選自蔗糖、乳糖、麥芽糖和纖維素二糖的二糖。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，糖與銨離子或與選自Al、Na、K、Ca、Mg、Ba、Zn、Cu、Zr、Ti、Bi、Mn和Os的金屬或與氨基酸形成配合物或鹽。根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案，硫酸酯化的二糖是蔗糖八硫酸酯或蔗糖八硫酸酯與銨離子或與選自Al、Na、K、Ca、Mg、Ba、Zn、Cu、Zr、Ti、Bi、Mn和Os的金屬的配合物或鹽，或蔗糖八硫酸酯與氨基酸的鹽。在這些蔗糖八硫酸酯或其鈉、鉀或NH4+鹽或蔗糖八硫酸酯的鋁配合物中，硫糖鋁為優(yōu)選。干擾素通常在普通的病毒感染、特別是與感冒有關(guān)的病毒感染中出現(xiàn)，已證實(shí)它可以加強(qiáng)β-羽扇醇和銨離子的抗病毒效果。發(fā)現(xiàn)干擾素在0.1-2單位/ml的相對(duì)低的濃度下加強(qiáng)抗病毒效果。此外，使用針對(duì)使感冒加重的物質(zhì)〔例如微生物(病毒)等〕的人類或非人類的免疫球蛋白作為藥物組合物的進(jìn)一步成分是有利的。根據(jù)發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案，藥物組合物含有人類或非人類的免疫球蛋白作為進(jìn)一步的成分。藥物組合物優(yōu)選為咀嚼膠、糖錠、咀嚼片、resoriblets、滴劑、錠劑、凝膠、口腔用軟膏、溶液的形式或粘附制劑的形式，優(yōu)選為儲(chǔ)存制劑的形式。在本文中，儲(chǔ)存制劑應(yīng)理解為可以控釋和緩釋活性成分的制劑。藥物組合物優(yōu)選為咀嚼膠的形式，每片咀嚼膠的重量為500到3000mg，優(yōu)選大約1000mg，其中含有a)0.01到2000，優(yōu)選0.15-1000，特別優(yōu)選1-800，例如20-600μg的β-羽扇醇衍生物/片，以β-羽扇醇計(jì)算，b)0到100，優(yōu)選1-50，特別優(yōu)選2-40，例如5-30mg的NH4+/片，以氯化銨計(jì)算，c)0到1000，優(yōu)選10-500，特別優(yōu)選25-250mg硫酸酯化的糖/片，以SOS計(jì)算，以及常用的咀嚼膠成分。咀嚼膠用常用的咀嚼膠基和常用的咀嚼膠添加劑例如甜味劑、矯味劑、著色劑、軟化劑、和texturizing物質(zhì)來(lái)制備?？赡苓€需要使用加溶劑或其它控制釋放的方法以便從咀嚼膠中釋放在此公開(kāi)的藥物活性成分。關(guān)于加溶劑的進(jìn)一步說(shuō)明可以在例如EP0486563B1中見(jiàn)到，在其中可以發(fā)現(xiàn)制備咀嚼膠的概述以及可應(yīng)用的咀嚼膠成分的例子。本發(fā)明進(jìn)一步涉及一種或多種通式I的β-羽扇醇衍生物在制備預(yù)防和/或治療病毒感染的藥物中的用途，其中R代表氫原子；直鏈或支鏈的脂肪族C1-6-烴基，它可以是飽和的或可含有一個(gè)或多個(gè)選自雙鍵和三鍵的不飽和鍵；C1-6-酰基，它可以是直鏈或支鏈的，并且可以含有一個(gè)或多個(gè)選自雙鍵和三鍵的不飽和鍵；或易于在人或動(dòng)物體內(nèi)的正常條件下分解釋放出β-羽扇醇衍生物的基團(tuán)。此外，本發(fā)明還涉及一種或多種通式I的β-羽扇醇衍生物以及一種或多種可釋放銨離子的化合物在制備預(yù)防或治療病毒感染的藥物中的用途，其中R代表氫原子；直鏈或支鏈的脂肪族C1-6-烴基，它可以是飽和的或可含有一個(gè)或多個(gè)選自雙鍵和三鍵的不飽和鍵；C1-6-酰基，它可以是直鏈或支鏈的，并且可以含有一個(gè)或多個(gè)選自雙鍵和三鍵的不飽和鍵；或易于在人或動(dòng)物體內(nèi)的正常條件下分解釋放出β-羽扇醇衍生物的基團(tuán)。此外，本發(fā)明還涉及一種或多種通式I的β-羽扇醇衍生物以及一種或多種單、寡或多糖或類似物的一或多硫酸酯或其衍生物在制備預(yù)防和/或治療病毒感染及相關(guān)炎癥的藥物這中的用途，其中R代表氫原子；直鏈或支鏈的脂肪族C1-6-烴基，它可以是飽和的或可含有一個(gè)或多個(gè)選自雙鍵和三鍵的不飽和鍵；C1-6-酰基，它可以是直鏈或支鏈的，并且可以含有一個(gè)或多個(gè)選自雙鍵和三鍵的不飽和鍵；或易于在人或動(dòng)物體內(nèi)的正常條件下分解釋放出β-羽扇醇衍生物的基團(tuán)。最后，本發(fā)明涉及一種或多種通式I的β-羽扇醇衍生物、一種或多種可釋放銨離子的化合物，以及一種或多種單、寡或多糖的一或多硫酸酯在制備預(yù)防和/或治療病毒感染及相關(guān)炎癥的藥物中的用途，其中R代表氫原子；直鏈或支鏈的脂肪族C1-6-烴基，它可以是飽和的或可含有一個(gè)或多個(gè)選自雙鍵和三鍵的不飽和鍵；C1-6-?；?，它可以是直鏈或支鏈的，含有一個(gè)或多個(gè)選自雙鍵和三鍵的不飽和鍵；或易于在人或動(dòng)物體內(nèi)的正常條件下分解釋放出β-羽扇醇衍生物的基團(tuán)。因此，本發(fā)明在治療上呼吸道感染，尤其是感冒病毒例如鼻病毒、流感病毒、腸道病毒、柯薩奇病毒以及其它感冒病毒的感染時(shí)特別有用。另外，本發(fā)明涉及一種或多種上述活性成分用于療HIV、肝炎病毒、細(xì)胞肥大病毒、皰疹病毒和其它病毒感染，以及用于治療動(dòng)脈粥樣硬化和抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的用途。抗病毒活性物質(zhì)可以通過(guò)多種方式起作用(i)作為可以保護(hù)靶細(xì)胞的物質(zhì)(條件是它與病毒同時(shí)存在)。如果與病毒同時(shí)存在是產(chǎn)生抗病毒活性的條件，很可能該抗病毒效果涉及抗病毒物質(zhì)與病毒或其受體或二者組合的直接結(jié)合。許多植物提取物會(huì)顯示這種類型的“非特異性”、受體依賴的抗病毒活性。最常見(jiàn)的是，只有當(dāng)該物質(zhì)在所有時(shí)間，尤其是從加入病毒開(kāi)始一直存在，才可能產(chǎn)生這種類型的抗病毒活性，(ii)或者作為不用在實(shí)際的病毒感染期間(例如與靶細(xì)胞的預(yù)接觸，或在病毒感染之后但在病毒大量產(chǎn)生之前)存在就能夠顯示效果的物質(zhì)。通過(guò)這種類型的抗病毒物質(zhì)，很可能在細(xì)胞內(nèi)通過(guò)細(xì)胞內(nèi)蛋白/酶的合成引起了更基本的改變，該細(xì)胞內(nèi)蛋白/酶隨后引起對(duì)病毒的轉(zhuǎn)錄和/或翻譯的相對(duì)特異性的抑制，由這種方式，這種新的細(xì)胞內(nèi)蛋白導(dǎo)致所謂細(xì)胞的“抗病毒階段”。在細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生了抗病毒階段后，在理論上該物質(zhì)無(wú)需繼續(xù)存在，因?yàn)橐呀?jīng)將細(xì)胞保護(hù)了一段時(shí)間，盡管該保護(hù)必須逐漸消除。銨離子在作用機(jī)制上被認(rèn)為是屬于類型(i)，盡管在感染2到4小時(shí)后向細(xì)胞培養(yǎng)基中加入NH4+可以測(cè)得確切、但很微弱的抗病毒活性。β-羽扇醇在作用機(jī)制上被認(rèn)為是屬于類型(ii)。β-羽扇醇存在于許多植物中，例如羽扇豆種子的殼中、chiccle橡膠中、無(wú)花果和橡膠植物的膠漿中、以及各種藥用植物中，例如苦參的提取物中。β-羽扇醇可以購(gòu)買到，可以從例如Sigma公司得到。參照以下附圖和實(shí)施例可以清楚本發(fā)明的應(yīng)用范圍。然而，應(yīng)當(dāng)理解詳細(xì)的說(shuō)明和具體的實(shí)施例僅僅是為了說(shuō)明優(yōu)選實(shí)施方案，根據(jù)本申請(qǐng)的詳細(xì)描述，在保護(hù)范圍內(nèi)做出的各種改變和修飾對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員是顯而易見(jiàn)的。附圖概述參考附圖對(duì)發(fā)明進(jìn)行更詳細(xì)的說(shuō)明，其中圖1說(shuō)明β-羽扇醇(亦稱為Bl-g)對(duì)鼻病毒的抗病毒活性，圖2干擾素-α(HulFN-α)對(duì)鼻病毒的抗病毒活性，圖3Bl-g對(duì)EMC病毒的抗病毒活性，圖4ABl-g在各種濃度下對(duì)鼻病毒的抗病毒活性，圖4BBl-g+干擾素-α對(duì)鼻病毒的抗病毒活性，圖5NH4+離子對(duì)VSV、塞姆利基病毒和EMCIII病毒的抗病毒活性，圖6NH4Cl對(duì)鼻病毒的抗病毒活性，圖7ABl-g、Bl-g+NH4Cl以及Bl-g、NH4Cl+SOS(20％SOS儲(chǔ)備液水水溶液的1∶100SOS稀釋液)對(duì)鼻病毒的抗病毒活性，圖7B同前，使用1∶200的SOS稀釋液，圖7C同前，使用1∶400的SOS稀釋液，圖8Bl-g、NH4Cl、SOS以及干擾素-α對(duì)鼻病毒的抗病毒活性，圖9誘導(dǎo)抗病毒階段的動(dòng)力學(xué)。發(fā)明詳述用于測(cè)定抗病毒活性的方法如下所述。使用的細(xì)胞培養(yǎng)基為VERO細(xì)胞、WISH細(xì)胞、MDBK細(xì)胞和HEP細(xì)胞，這些細(xì)胞培養(yǎng)基均是普通的實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)基，對(duì)其更詳細(xì)的描述見(jiàn)于Berg，K.鼠和人干擾素的純化和鑒別?！?970年文獻(xiàn)的綜述(論文)。ActaPathol.Microbiol.Scand.，C部，279補(bǔ)編1-136頁(yè)，1982?！呈褂玫牟《臼荲SV病毒、EMC病毒、塞姆利基病毒、流感病毒和鼻病毒。在微盤中建立單層細(xì)胞培養(yǎng)基。將一定劑量的適當(dāng)稀釋的抗病毒活性物質(zhì)與適當(dāng)量的病毒(“攻擊性(challenge)病毒”)一起或先后加入到細(xì)胞培養(yǎng)基中。對(duì)照培養(yǎng)基中除攻擊性病毒外不加任何物質(zhì)。將病毒感染的培養(yǎng)基進(jìn)行孵育直至病毒對(duì)照培養(yǎng)基中的病毒產(chǎn)生已經(jīng)很明顯(對(duì)于鼻病毒為4至5天)。加入含有1.0mlMTS儲(chǔ)備液(110μgMTS+39.2mlPBS，pH值5.6，+4℃下黑暗中保存)、2.3ml培養(yǎng)液和30μlPMS儲(chǔ)備液〔13mgPMS(Sigma，H5004，Lot13，P.9625)+6.5ml蒸餾水，4℃下黑暗中保存，在頂部有一層石蠟油〕的MTS/PMS溶液，依據(jù)在OD掃描儀上的OD(光密度)讀數(shù)可以計(jì)算出防止病毒對(duì)細(xì)胞攻擊的相對(duì)保護(hù)作用。高的OD讀數(shù)表明細(xì)胞受到了保護(hù)，低的OD讀數(shù)表明細(xì)胞已被病毒殺死。因此，病毒對(duì)照培養(yǎng)基的OD值一般＜0.100，而未感染的對(duì)照培養(yǎng)基的OD值＞1.000。因此，抗病毒活性物質(zhì)是可以在細(xì)胞培養(yǎng)基中、在培養(yǎng)液和攻擊性病毒的存在下具有對(duì)抗試驗(yàn)病毒的保護(hù)作用的物質(zhì)。關(guān)于MTS方法，可進(jìn)一步參考Berg，K.，B.H.Simonsen，M.B.Hansen，和S.Nielsen一種用于分析樣品中生物物質(zhì)、特別是病毒的存在的方法，用于定量測(cè)定生物物質(zhì)的方法的用途以及用該方法檢測(cè)到的用作新型物質(zhì)的藥物。PCT/DK/89/00010.1至32，1989。HansenM.B.，S.E.Nielsen，和K.Berg一種用于測(cè)定細(xì)胞生長(zhǎng)/細(xì)胞殺傷的準(zhǔn)確、迅速的染色方法的再實(shí)驗(yàn)和進(jìn)一步發(fā)展，J.Immunol.Methods.119203-210，1989。BergK.，M.B.Hansen和S.E.Nielsen一種通過(guò)細(xì)胞內(nèi)線粒體脫氫酶的功能進(jìn)行測(cè)定的、用于準(zhǔn)確定量干擾素活性的靈敏的生物分析(MTT方法)。AMPIS98156至162，1990。實(shí)施例實(shí)施例1通過(guò)MTS-系統(tǒng)測(cè)定β-羽扇醇的抗病毒活性將含有500至1000個(gè)WISH細(xì)胞的100μl培養(yǎng)液接種到微盤上的小孔中，在34℃及含有5％CO2的氣氛下孵育24小時(shí)。將培養(yǎng)液用含有β-羽扇醇稀釋液(25至1.6μg/ml，參見(jiàn)圖1)的新鮮培養(yǎng)液替換并在34℃及含有5％CO2的氣氛下繼續(xù)孵育24小時(shí)。第二天加入攻擊性鼻病毒，在34℃及含有5％CO2的氣氛下4至5天后用2小時(shí)加入MTS，然后將微盤在OD掃描儀上進(jìn)行測(cè)定。3μg/mlβ-羽扇醇(＝Bl-g)可產(chǎn)生抵抗鼻病毒的完全的保護(hù)作用。然而，在高的β-羽扇醇濃度下出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)量的減少，這一定與β-羽扇醇在這樣的濃度下的某些毒性有關(guān)。實(shí)施例2干擾素-α(rHulFN-α-2b，“intronA”)的對(duì)鼻病毒的抗病毒活性將10000個(gè)WISH細(xì)胞接種到微盤中，第二天早晨將培養(yǎng)液用HulFN-α-2b(“intronA”)在含有2％血清的新鮮培養(yǎng)液中的兩倍稀釋液替換(參見(jiàn)圖2)。次日早晨將培養(yǎng)液用含有鼻病毒的新鮮培養(yǎng)液替換。圖2中的結(jié)果清楚地表明鼻病毒對(duì)HulFN-α-2b較敏感，在大約8單位IFN/ml獲得大約90％的保護(hù)。此外，intronA的毒性似乎可以忽略不計(jì)。實(shí)施例3Bl-g的抗病毒活性如實(shí)施例2中所述接種10000個(gè)WISH細(xì)胞并在37℃孵育24小時(shí)，向培養(yǎng)基中加入Bl-g稀釋液，稀釋液的濃度與實(shí)施例1給出的濃度范圍相同。24小時(shí)后將培養(yǎng)液用加有攻擊性病毒的新鮮培養(yǎng)液替換并同時(shí)開(kāi)始培養(yǎng)攻擊性病毒對(duì)照培養(yǎng)基和未感染的對(duì)照培養(yǎng)基。24小時(shí)后，將培養(yǎng)基與MTS一起在37℃孵育2小時(shí)，如上所述將微盤進(jìn)行掃描。結(jié)果表明(圖3)Bl-g具有中等強(qiáng)度的抗EMC病毒的活性。對(duì)VSV和塞姆利基病毒獲得了相似的結(jié)果。加入少量的干擾素-α可以顯著增強(qiáng)抗病毒活性。因此，少至0.5單位的干擾素就可引起幾乎80％的保護(hù)作用，而不加干擾素時(shí)為30％的保護(hù)作用。應(yīng)當(dāng)注意，在患有中度病毒感染(例如普通的感冒等)的患者體內(nèi)經(jīng)常存在有這些數(shù)量的干擾素(0.2至0.6單位/ml)。實(shí)施例4Bl-g的抗鼻病毒活性用鼻病毒進(jìn)行如上所述的相同實(shí)驗(yàn)。如圖4A所示，在1∶100-1∶200的稀釋液中(從1mg/ml的Bl-g儲(chǔ)備液稀釋)鼻病毒對(duì)Bl-g似乎要比VSV和EMC敏感多，因?yàn)榭梢砸种撇《靖腥?0％到90％以上?？梢灶A(yù)期流感病毒必然產(chǎn)生相同的結(jié)果。因此，與對(duì)VSV和EMC的效果相比，Bl-g似乎對(duì)鼻病毒具有非常強(qiáng)的活性。這種差別是不能預(yù)見(jiàn)的。加入0.5單位/ml的干擾素-α使抗病毒活性顯著加強(qiáng)，參見(jiàn)圖4B。實(shí)施例5NH4+的抗病毒活性將10000個(gè)WISH細(xì)胞接種到微盤上的小孔中24小時(shí)并在37℃及含有5％CO2的氣氛下孵育24小時(shí)。將培養(yǎng)液用含有NH4+稀釋液和病毒的新鮮培養(yǎng)液替換，在37℃及含有5％CO2的大氣下孵育24小時(shí)后，在37℃及5％的CO2下將MTS在2小時(shí)之內(nèi)加入，然后將微盤在OD掃描儀上進(jìn)行測(cè)定。如圖5所示，NH4+離子可以抑制VSV，對(duì)塞姆利基病毒作用很小，而對(duì)EMC沒(méi)有表現(xiàn)出保護(hù)作用。實(shí)施例6NH4+的抗鼻病毒活性如實(shí)施例5所述測(cè)定NH4+對(duì)鼻病毒的抗鼻病毒活性，在37℃及含有5％CO2的氣氛下孵育24小時(shí)后，將MTS在37℃及5％的CO2下于2小時(shí)之內(nèi)加入，然后將微盤在OD掃描儀上進(jìn)行測(cè)定。如圖6的結(jié)果所示，飽和NH4Cl溶液的1∶900稀釋液具有強(qiáng)的抗病毒效果。而在更高的NH4+濃度下則表現(xiàn)出對(duì)所用的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基的毒性效果。然而，正如眾所周知的，其對(duì)于人的體內(nèi)毒性是微不足道的，氯化銨是甘草的一種成分。如圖5和圖6所示，NH4+對(duì)不同的病毒具有不同的抗病毒強(qiáng)度，并且在各個(gè)具體的病例中提供最佳抗病毒效果的NH4+濃度會(huì)發(fā)生改變。實(shí)施例7Bl-g，Bl-g+NH4Cl以及Bl-g+NH4Cl+SOS的抗鼻病毒活性試驗(yàn)如實(shí)施例5中所述的進(jìn)行，然而，在此的溫度為34℃并且孵育進(jìn)行4至5天。結(jié)果見(jiàn)圖7A、7B和7C。單獨(dú)使用SOS的1∶100、1∶200或1∶400稀釋液；單獨(dú)使用NH4Cl的1∶1000或1∶2000稀釋液或NH4Cl與SOS組合均沒(méi)有顯著的抗病毒效果。單獨(dú)使用Bl-g表現(xiàn)出良好的效果，同時(shí)使用NH4Cl(其本身僅在34℃產(chǎn)生很弱的保護(hù)作用)將使效果加強(qiáng)。然而增加NH4+濃度會(huì)產(chǎn)生增強(qiáng)的效果。同時(shí)使用SOS的1∶100稀釋液只引起效果的中等強(qiáng)度的增加。將圖7A、7B和7C相比較時(shí)表明，Bl-g、NH4Cl和SOS的組合的最佳效果在SOS的1∶400稀釋液時(shí)最顯著(圖7C)，此時(shí)的保護(hù)作用幾乎為95％，相應(yīng)的Bl-g濃度明顯低于1μg/ml。在最低的SOS試驗(yàn)濃度下產(chǎn)生最佳效果這一事實(shí)可能是由于SOS對(duì)所用的實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞的某些毒性所造成。然而，已知SOS在各種實(shí)驗(yàn)濃度下均對(duì)人是完全無(wú)毒的。實(shí)施例8Bl-g，NH4Cl，SOS和干擾素-α的抗鼻病毒活性試驗(yàn)如實(shí)施例5中所述的進(jìn)行，在此所有的物質(zhì)均與病毒同時(shí)加入。結(jié)果見(jiàn)圖8。如圖所示，0.5單位/ml劑量的干擾素-α可以進(jìn)一步加強(qiáng)通過(guò)NH4Cl、Bl-g和SOS的組合產(chǎn)生的最佳效果，在此，通過(guò)使用Bl-g、NH4+離子和干擾素-α可以產(chǎn)生幾乎完全的保護(hù)作用。因此，可以預(yù)期在病毒感染期間自然存在于人體內(nèi)的干擾素必然會(huì)加強(qiáng)Bl-g和NH4+的效果。使用1∶200和1∶400的SOS稀釋液時(shí)表現(xiàn)出類似的結(jié)果(未示出)。用0.25到0.125單位干擾素/ml得到同樣的結(jié)果。實(shí)施例9Bl-g，NH4+，SOS.干擾素及其組合的抗病毒活性抗病毒活性根據(jù)上述方法進(jìn)行測(cè)定。使用四種不同的病毒(EMC、VSV、塞姆利基森林病毒以及鼻病毒)和三種不同的細(xì)胞系(A-549、WISH、VERO)進(jìn)行試驗(yàn)。結(jié)果見(jiàn)下表。表1對(duì)不同病毒在不同細(xì)胞系上的抗病毒活性<tablesid="table1"num="001"><tablewidth="1237">靶細(xì)胞WISH細(xì)胞A-549細(xì)胞VERO細(xì)胞WISH細(xì)胞病毒VSVSemlikiEMCVSVSemlikiEMC流感病毒A流感病毒B鼻病毒抗病毒成分SOS--+--+---(NH4)2SO4++-++-+++NH4Cl+--+--+++SOS+(NH4)2SO4++++++NDND+HuIFN-α+++++++++++++NDND++Bl-g+-/+++++NDND++Bl-g+HuIFN-α++++++NDND+++Bl-g+NH4ClNDNDNDNDNDNDNDND+++Bl-g+SOSNDNDNDNDNDNDNDND++Bl-g+NH4Cl+SOSNDNDNDNDNDNDND++++Bl-g+NH4Cl+HuIFN-αNDNDNDNDNDNDND++++</table></tables>VSV病毒、塞姆利基森林病毒和流感病毒屬于包膜病毒；EMC和鼻病毒屬于無(wú)包膜病毒。ND＝未測(cè)定。如上所示，鼻病毒受銨離子、Bl-g以及干擾素-α的抑制。流感病毒也可以推定受銨離子的抑制。SOS表現(xiàn)出對(duì)EMC有一些抗病毒活性，但是對(duì)鼻病毒沒(méi)有可測(cè)到的抗病毒活性。很明顯，鼻病毒(代表一種感冒病毒)受Bl-g、NH4+、干擾素+SOS的組合的抑制。實(shí)施例10動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)進(jìn)行以下試驗(yàn)，測(cè)定抗病毒活性隨抗病毒開(kāi)始的時(shí)間(相對(duì)于病毒感染確定的時(shí)間)可能產(chǎn)生的差別。將500至1000個(gè)WISH細(xì)胞在負(fù)一天接種于微盤上的小孔中并分成3組。向第一組的細(xì)胞(-24小時(shí)組)中加入從25到1.6μg/ml范圍內(nèi)的各種濃度的Bl-g，然后將所有細(xì)胞37℃及含有5％CO2的氣氛下孵育24小時(shí)。在零天向所有的孔中加入鼻-攻擊性病毒，同時(shí)向另一組細(xì)胞(0小時(shí)組)中加入Bl-g。在34℃及5％的CO2下繼續(xù)孵育24小時(shí)。隨后向第三組細(xì)胞(+24小時(shí)組)中加入Bl-g，所有的細(xì)胞在34℃及5％的CO2下進(jìn)一步孵育4至5天，隨后如上所述用MTS進(jìn)行處理并在OD掃描儀上進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果見(jiàn)圖9。如圖所示，無(wú)論是在病毒感染之前24小時(shí)或是在所述的病毒感染的同時(shí)加入Bl-g，抗病毒效果幾乎是相同的。此外可以看到，即使直至病毒感染24小時(shí)后，即病毒感染本身已經(jīng)很明顯的時(shí)候才開(kāi)始用Bl-g處理，仍然可以得到明顯的抗病毒效果。盡管通過(guò)具體實(shí)施方案對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了描述，但很明顯它可以通過(guò)許多方式進(jìn)行變化。不能認(rèn)為這些變化是在發(fā)明范圍之外，所有這些對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見(jiàn)的修改均應(yīng)看作是包括在如下的權(quán)利要求的范圍之內(nèi)。權(quán)利要求1.一種用于預(yù)防和/或治療病毒感染的藥物組合物，其特征在于含有一種或多種下式的β-羽扇醇衍生物其中R代表氫原子；直鏈或支鏈的脂肪族C1-6-烴基，它可以是飽和的或可含有一個(gè)或多個(gè)選自雙鍵和三鍵的不飽和鍵；C1-6-酰基，它可以是直鏈或支鏈的，并且可以含有一個(gè)或多個(gè)選自雙鍵和三鍵的不飽和鍵；或易于在人或動(dòng)物體內(nèi)的正常條件下分解釋放出β-羽扇醇衍生物的基團(tuán)，以及常用的可藥用輔助劑、添加劑和載體。2.一種權(quán)利要求1的藥物組合物，其特征在于R代表氫原子。3.一種權(quán)利要求1或2的藥物組合物，其特征在于還進(jìn)一步含有可釋放銨離子的化合物。4.一種權(quán)利要求3的藥物組合物，其特征在于銨離子由優(yōu)選選自鹽酸、硫酸、磷酸、碳酸、乙酸、和酒石酸的可藥用無(wú)機(jī)或有機(jī)酸的鹽產(chǎn)生。5.一種權(quán)利要求3的藥物組合物，其特征在于銨離子由通式II的化合物產(chǎn)生其中X1-X4可以相同或不同，它們選自氫；C1-6烷基，它可以是直鏈或支鏈的、飽和或不飽和的，并可以任意含有一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基、C1-4烷氧基或氨基的取代基；芳基，它可以被C1-4烷基、鹵素、羥基、C1-4烷氧基或氨基任意取代，并且Y是可藥用的成鹽陰離子，優(yōu)選選自F-、Cl-、Br-和I-。6.一種前述權(quán)利要求之一所述的藥物組合物，其特征在于還進(jìn)一步含有一種或多種單、寡或多糖或類似物的一或多硫酸酯和/或其衍生物。7.一種權(quán)利要求6的藥物組合物，其特征在于糖是一或多硫酸酯化的一、二、三或四糖。8.一種權(quán)利要求6的藥物組合物，其特征在于糖是選自木糖、果糖和葡萄糖的單糖。9.一種權(quán)利要求6的藥物組合物，其特征在于糖是選自蔗糖、乳糖、麥芽糖和纖維素二糖的二糖。10.一種前述權(quán)利要求之一的藥物組合物，其特征在于糖與銨離子或選自Al、Na、K、Ca、Mg、Ba、Zn、Cu、Zr、Ti、Bi、Mn和Os的金屬或與氨基酸形成配合物或鹽。11.一種權(quán)利要求9的藥物組合物，其特征在于硫酸酯化的二糖是蔗糖八硫酸酯，蔗糖八硫酸酯與銨離子或選自Al、Na、K、Ca、Mg、Ba、Zn、Cu、Zr、Ti、Bi、Mn和Os的金屬的配合物或鹽，或是蔗糖八硫酸酯與氨基酸的鹽。12.一種權(quán)利要求11的藥物組合物，其特征在于硫酸酯化的二糖是蔗糖八硫酸酯或其鈉、鉀或NH4+鹽或蔗糖八硫酸酯的鋁配合物，硫糖鋁。13.一種前述權(quán)利要求之一的藥物組合物，其特征在于還進(jìn)一步含有一種或多種人類的或非人類的免疫球蛋白。14.一種前述權(quán)利要求之一的藥物組合物，其特征在于藥物組合物為咀嚼膠、糖錠、咀嚼片、resoriblets、滴劑、錠劑、凝膠、口腔用軟膏、溶液，粘附制劑和儲(chǔ)存制劑的形式。15.一種權(quán)利要求14的藥物組合物，為咀嚼膠的形式，其特征在于每片咀嚼膠含有a)0.01到2000，優(yōu)選0.15到1000，特別優(yōu)選1到800，例如20到600μg的β-羽扇醇衍生物/片，以β-羽扇醇計(jì)算，b)0到100，優(yōu)選1到50，特別優(yōu)選2到40，例如5到30mg的NH4+/片，以氯化銨計(jì)算，c)0到1000，優(yōu)選10到500，特別優(yōu)選25到250mg硫酸酯化的糖/片，以SOS計(jì)算，以及常用的咀嚼膠成分。16.一種或多種通式I的β-羽扇醇衍生物在制備預(yù)防和/或治療病毒感染的藥物中的用途，其中R代表氫原子；直鏈或支鏈的脂肪族C1-6-烴基，它可以是飽和的或可含有一個(gè)或多個(gè)選自雙鍵和三鍵的不飽和鍵；C1-6-?；梢允侵辨溁蛑ф湹?，并且可以含有一個(gè)或多個(gè)選自雙鍵和三鍵的不飽和鍵；或易于在人或動(dòng)物體內(nèi)的正常條件下分解釋放出β-羽扇醇衍生物的基團(tuán)。17.一種或多種通式I的β-羽扇醇衍生物以及一種或多種可釋放銨離子的化合物在制備預(yù)防和/或治療病毒感染的藥物中的用途，其中R代表氫原子；直鏈或支鏈的脂肪族C1-6-烴基，它可以是飽和的或可含有一個(gè)或多個(gè)選自雙鍵和三鍵的不飽和鍵；C1-6-?；?，它可以是直鏈或支鏈的，并且可以含有一個(gè)或多個(gè)選自雙鍵和三鍵的不飽和鍵；或易于在人或動(dòng)物體內(nèi)的正常條件下分解釋放出β-羽扇醇衍生物的基團(tuán)。18.一種或多種通式I的β-羽扇醇衍生物以及一種或多種單、寡或多糖或類似物的一或多硫酸酯和/或其衍生物在制備預(yù)防和/或治療病毒感染及相關(guān)炎癥的藥物中的用途，其中R代表氫原子；直鏈或支鏈的脂肪族C1-6-烴基，它可以是飽和的或可含有一個(gè)或多個(gè)選自雙鍵和三鍵的不飽和鍵；C1-6-酰基，它可以是直鏈或支鏈的，并且可以含有一個(gè)或多個(gè)選自雙鍵和三鍵的不飽和鍵；或易于在人或動(dòng)物體內(nèi)的正常條件下分解釋放出β-羽扇醇衍生物的基團(tuán)。19.一種或多種通式I的β-羽扇醇衍生物一種或多種可釋放銨離子的化合物，以及一種或多種單、寡或多糖或類似物的一或多硫酸酯和/或其衍生物在制備預(yù)防和/或治療病毒感染及相關(guān)炎癥的藥物中的用途，其中R代表氫原子；直鏈或支鏈的脂肪族C1-6-烴基，它可以是飽和的或可含有一個(gè)或多個(gè)選自雙鍵和三鍵的不飽和鍵；C1-6-酰基，它可以是直鏈或支鏈的，并且可以含有一個(gè)或多個(gè)選自雙鍵和三鍵的不飽和鍵；或易于在人或動(dòng)物體內(nèi)的正常條件下分解釋放出β-羽扇醇衍生物的基團(tuán)。20.一種前述權(quán)利要求16至19之一的用途，用于治療上呼吸道感染、特別是感冒病毒例如鼻病毒、流感病毒感染。21.一種用于預(yù)防和治療病毒感染的方法，其特征在于該方法包括口服在可藥用載體中的藥理學(xué)抗病毒劑量的一種或多種式I的β-羽扇醇衍生物其中R代表氫原子；直鏈或支鏈的脂肪族C1-6-烴基，它可以是飽和的或可含有一個(gè)或多個(gè)選自雙鍵和三鍵的不飽和鍵；C1-6-?；?，它可以是直鏈或支鏈的，并且可以含有一個(gè)或多個(gè)選自雙鍵和三鍵的不飽和鍵；或易于在人或動(dòng)物體內(nèi)的正常條件下分解釋放出β-羽扇醇衍生物的基團(tuán)。22.一種用于預(yù)防和治療病毒感染的方法，其特征在于該方法包括口服在可藥用載體中的藥理學(xué)抗病毒劑量的一種或多種式I的β-羽扇醇衍生物以及一種或多種可釋放銨離子的化合物，其中R代表氫原子；直鏈或支鏈的脂肪族C1-6-烴基，它可以是飽和的或可含有一個(gè)或多個(gè)選自雙鍵和三鍵的不飽和鍵；C1-6-酰基，它可以是直鏈或支鏈的，并且可以含有一個(gè)或多個(gè)選自雙鍵和三鍵的不飽和鍵；或易于在人或動(dòng)物體內(nèi)的正常條件下分解釋放出β-羽扇醇衍生物的基團(tuán)。23.一種用于預(yù)防和治療病毒感染及相關(guān)炎癥的方法，其特征在于該方法包括口服在可藥用載體中的藥理學(xué)抗病毒劑量的一種或多種式I的β-羽扇醇衍生物，以及一種或多種單、寡或多糖或類似物的一或多硫酸酯和/或其衍生物，其中R代表氫原子；直鏈或支鏈的脂肪族C1-6-烴基，它可以是飽和的或可含有一個(gè)或多個(gè)選自雙鍵和三鍵的不飽和鍵；C1-6-?；?，它可以是直鏈或支鏈的，并且可以含有一個(gè)或多個(gè)選自雙鍵和三鍵的不飽和鍵；或易于在人或動(dòng)物體內(nèi)的正常條件下分解釋放出β-羽扇醇衍生物的基團(tuán)。24.一種用于預(yù)防和治療病毒感染及相關(guān)炎癥的方法，其特征在于該方法包括口服在可藥用載體中的藥理學(xué)抗病毒劑量的一種或多種式I的β-羽扇醇衍生物，一種或多種可釋放銨離子的化合物，以及一種或多種單、寡或多糖的一或多硫酸酯，其中R代表氫原子；直鏈或支鏈的脂肪族C1-6-烴基，它可以是飽和的或可含有一個(gè)或多個(gè)選自雙鍵和三鍵的不飽和鍵；C1-6-酰基，它可以是直鏈或支鏈的，并且可以含有一個(gè)或多個(gè)選自雙鍵和三鍵的不飽和鍵；或易于在人或動(dòng)物體內(nèi)的正常條件下分解釋放出β-羽扇醇衍生物的基團(tuán)。25.一種用于治療口腔和淋巴環(huán)內(nèi)、下呼吸道周圍的炎癥的藥物組合物，其特征在于含有一種或多種單、寡或多糖或類似物的一或多硫酸酯和/或其衍生物。26.一種通過(guò)服用一種或多種單、寡或多糖或類似物的一或多硫酸酯和/或其衍生物治療口腔和淋巴環(huán)內(nèi)、下呼吸道周圍的炎癥的方法。全文摘要一種用于預(yù)防和/或治療病毒感染和各種炎癥的藥物組合物，包括一種或多種β-羽扇醇衍生物，可與一種或多種可釋放銨離子的化合物、和/或一種或多種單、寡或多糖或類似物的一或多硫酸酯和/或其衍生物任意組合。所述藥物組合物可以是嘴嚼膠、糖錠、嘴嚼片、resoriblets、滴劑、錠劑、凝膠、口腔用軟膏、溶液，粘附制劑和儲(chǔ)存制劑的形式。此外，還包括通過(guò)口服該藥物組合物預(yù)防和治療病毒感染和各種炎癥的方法。文檔編號(hào)A61KGK1158566SQ9519443公開(kāi)日1997年9月3日申請(qǐng)日期1995年6月20日優(yōu)先權(quán)日1994年6月20日發(fā)明者庫(kù)特·伯格,S·B·克里斯滕森,C·波耶-克努森,C·明,B·西蒙森申請(qǐng)人:庫(kù)特·伯格