專利名稱：用于抑制蛋白質(zhì)酪氨酸激酶介導(dǎo)的細(xì)胞增殖的6－芳基吡啶并[2,3－d]嘧啶和1,5－二氮雜的制作方法
發(fā)明的所屬領(lǐng)域本發(fā)明涉及抑制蛋白質(zhì)酪氨酸激酶(RTK)介導(dǎo)的細(xì)胞增殖。更具體地說，本發(fā)明涉及吡啶并〔2，3-d〕嘧啶和1，5-二氮雜萘化合物在抑制細(xì)胞增殖和蛋白質(zhì)酪氨酸激酶酶促活性中的應(yīng)用。
發(fā)明的背景有許多疾病狀態(tài)是以細(xì)胞的不受控制的增殖和分化為特征的。這些疾病狀態(tài)牽涉到各種各樣的細(xì)胞類型和病癥，例如腫瘤、動(dòng)脈硬化及再狹窄。細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)底物的生長因子刺激作用、自磷酸化和磷酸化是增殖性疾病的病理機(jī)制中的重要生物學(xué)過程。
在正常細(xì)胞中，蛋白質(zhì)底物上酪氨酸殘基的磷酸化在通過受刺激的細(xì)胞外生長因子受體發(fā)動(dòng)的細(xì)胞內(nèi)生長信號(hào)傳遞途徑中具有重要功能。例如，血小板衍生的生長因子(PDGF)、成纖維細(xì)胞生長因子(FGF)及表皮生長因子(EGF)等生長因子與其各自的細(xì)胞外受體結(jié)合，將激活這些受體的細(xì)胞內(nèi)酪氨酸激酶區(qū)域，從而催化細(xì)胞內(nèi)底物或受體本身的磷酸化。在對配體結(jié)合反應(yīng)中生長因子受體的磷酸化稱為自身磷酸化。
例如，EGF受體具有其當(dāng)作最重要的配體EGF和轉(zhuǎn)化生長因子α(TGFα)。受體在正常成年人中似乎只有很小功能，但它們可卷入大部分腫瘤，特別是結(jié)腸癌和乳腺癌的疾病過程中。密切相關(guān)的Erb-B2和Erb-B3受體具有一個(gè)Heregulins家族作為它們的主要配體，并且受體過表達(dá)和成熟已明確地證明它們是預(yù)后不良的乳腺癌的主要危險(xiǎn)因子。
血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)的增殖和定向遷移是血管再建、再狹窄和動(dòng)脈硬化等過程中的重要構(gòu)成部分。已將血小板衍生的生長因子鑒定為最強(qiáng)有力的內(nèi)源性VSMC促分裂原和化學(xué)引誘物之一。已在氣球損傷的大鼠頸動(dòng)脈沖觀察到PDGF-A和-B鏈及PDGF受體的提高的血管mRNA表達(dá)(J.Cell.Biol.，1112149-2158(1990))。在該損傷模型中，灌注PDGF也大大增加內(nèi)膜增厚程度并加快VSMC的遷移(J.Clin.Invest.，89507-511(1992))。此外，PDGF中和抗體顯著減小氣球損傷后的內(nèi)膜增厚程度(Science，2531129-1132(1991))。
酸性成纖維細(xì)胞生長因子(aFGF)和堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)都具有許多生物學(xué)活性，包括促進(jìn)細(xì)胞增殖和分化的能力。已顯示阻斷PDGF信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的酪氨酸磷酸化抑制劑受體酪氨酸激酶抑制劑在氣球血管成形術(shù)大鼠模型體內(nèi)抑制PDGF刺激的受體酪氨酸激酶磷酸化作用(Drug Develop.Res.，29158-166(1993))。Lindner和Reidy(Proc.Natl.Acad.Sci.USA，883739-3743(1991))已報(bào)導(dǎo)了支持FGF參于VSMC的直接證據(jù)，他們證明當(dāng)在損傷后2天檢測時(shí)，在對大鼠頸動(dòng)脈進(jìn)行氣球血管成形術(shù)前全身注射抗bFGF中和抗體，抑制了損傷誘導(dǎo)的中度SMC增殖達(dá)80％以上。很可能是從受損的細(xì)胞中釋放的bFGF以旁分泌方式發(fā)揮作用，以誘導(dǎo)VSMC生長。最近，Lindner和Reidy(Cir.Res.，73589-595(1993))證明增加了氣球損傷之大鼠頸動(dòng)脈內(nèi)表制劑中復(fù)制VSMC和皮內(nèi)細(xì)胞內(nèi)bFGF及FGFR-2mRNA的表達(dá)。這些數(shù)據(jù)進(jìn)一步說明，在受損的動(dòng)脈中bFGF和FGFR-1的配體/受體系統(tǒng)可能參于VSMC的連續(xù)增殖反應(yīng)，以導(dǎo)致新生內(nèi)膜形成。
因此，EGF、PDGF、FGF及其他生長因子在腫瘤、動(dòng)脈硬化及再狹窄等細(xì)胞增殖性疾病的病理機(jī)制中起著關(guān)鍵性作用。在與其各自的受體結(jié)合之后，這些生長因子刺激酪氨酸激酶活性，作為最初的生化過程之一導(dǎo)致DNA合成和細(xì)胞分裂。從而抑制與細(xì)胞內(nèi)生長因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑相關(guān)之蛋白質(zhì)酪氨酸激酶的化合物可以用作治療細(xì)胞增殖性疾病的藥劑。我們現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，某些吡啶并〔2，3-d〕嘧啶和1，5-二氮雜萘可抑制蛋白質(zhì)酪氨酸激酶，并可用于治療和預(yù)防動(dòng)脈硬化，再狹窄及腫瘤。
幾種吡啶并〔2，3-d〕嘧啶和1，5-二氮雜萘是已知的。例如，美國專利No.3,534,039公開了一系列作為利尿劑的2，7-二氨基-6-芳基吡啶并〔2，3-d〕嘧啶化合物；美國專利No.3,639,401公開了一系列作為利尿劑的6-芳基-2，7-雙〔(三烷基甲硅烷基)氨基〕吡啶并〔2，3-d〕嘧啶化合物；美國專利No.4,271,164公開了一系列抗高血壓劑的6位取代的芳基吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-胺及衍生物；歐洲公開專利申請No.0537463 A2公開了一系列用作除草劑的取代的吡啶并〔2，3-d〕嘧啶；美國專利No.4,771,054公開了某些作為抗生素的1，5-二氮雜萘。上述參考文獻(xiàn)均沒有提到本發(fā)明的化合物，也沒有提示這些化合物可用于治療動(dòng)脈硬化，血管再狹窄和腫瘤。
發(fā)明的概要本發(fā)明提供用于抑制蛋白質(zhì)酪氨酸激酶，并因而可有效地治療動(dòng)脈硬化、血管再狹窄及腫瘤等細(xì)胞增殖性疾病的，有吡啶并〔2，3-d〕嘧啶和1，5-二氮雜萘特征的新化合物。本發(fā)明特別涉及由下列式I限定的化合物。
其中X是CH或N；B是鹵素、氫或NR3N4；R1、R2、R3和R4各自是氫、C1-C8烷基、C2-C8鏈烯基、C2-C8炔基、Ar’、氨基、C1-C8烷基氨基或二-C1-C8烷基氨基；其中烷基、鏈烯基和炔基基團(tuán)可被NR5R6取代，這里R5和R6獨(dú)自是氫、C1-C8烷基、C2-C8鏈烯基、C2-C8炔基、C3-C10環(huán)烷基或
并且其中上述任何烷基、鏈烯基和炔基基團(tuán)均可被羥基或含有1或2個(gè)選自氮、氧和硫的雜原子的5元或6元碳環(huán)或雜環(huán)取代，并且R9、R10、R11和R12各自是氫、硝基、三氟甲基、苯基、被取代的苯基、-C≡N、-COOR8、-COR8、
、SO2R8、鹵素、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、硫代、-S-C1-C8烷基、羥基、C1-C8鏈烷?；?、C1-C8鏈烷酰氧基，或-NR5R6，或者當(dāng)R9和R10相鄰時(shí)它們一起可以是亞甲二氧基；n是0、1、2或3；并且其中R5和R6與它們所連接的氮一起組成一個(gè)有3至6碳原子，并且可含有選自氮、氧和硫的雜原子的環(huán)。
R1和R2與它們所連接的氮一起，以及R3和R4與它們所連接的氮一起也可以是
或NH2)或者可構(gòu)成一個(gè)有3至6個(gè)碳原子，并可含有1或2個(gè)選自氮、氧及硫的雜原子的環(huán)，R1和R3還可以是選自
的?；愃莆铮渲蠷8是氫、C1-C8烷基、C2-C8鏈烯基、C2-C8炔基、C3-C10環(huán)烷基，并可含有氧、氮或硫原子，
以及-NR5R6，并且其中R8烷基、鏈烯基和炔基基團(tuán)可被NR5R6所取代；
Ar和AR’是選自苯基、咪唑基、吡咯基、吡啶基、嘧啶基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、吡嗪基、噻唑基、噁唑基、異噁唑基、呋喃基、噻吩基、萘基的未被取代或被取代的芳族或雜芳族基團(tuán)，其中取代基是如上文限定的R9、R10、R11和R12。
以及其醫(yī)藥上可接受的酸和堿加成鹽；條件是當(dāng)X是N且B是NR3R4時(shí)，R3和R4之一是氫以外的其他基團(tuán)。
優(yōu)選的化合物為其中Ar是苯基或式
之被取代苯基的式I化合物。
另外優(yōu)選的是其中B為～NR3R4的化合物。
再一種優(yōu)選的化合物是其中R1和R3中之一或兩者為
且R2和R4為氫的化合物。
進(jìn)一步優(yōu)選的化合物是其中B為NR3R4，R1和R3獨(dú)自為氫，
這里R8為C1-C8烷基或NR5R6的式I化合物。
一組特別優(yōu)選的化合物具有下列結(jié)構(gòu)式
其中R2和R4是氫，R1和R3獨(dú)自是氫、C1-C8烷基，
這里R8是C1-C8烷基或-NR5R6，R5是氫且R6是C1-C8烷基，R9和R10獨(dú)自是氫、鹵素、C1-C8烷基或C1-C8烷氧基。
另一組特別優(yōu)選的化合物具有下列結(jié)構(gòu)式
其中R1、R2、R9和R10定義同上。
再一組優(yōu)選的化合物是下列結(jié)構(gòu)式的化合物
再一組優(yōu)選的化合物是下列結(jié)構(gòu)式的化合物
特別是其中R5和R6與它們所連接的氮一起形成環(huán)，例如嗎啉代、哌嗪子基、4-烷基哌嗪子基等。
再一組優(yōu)選的化合物是下列結(jié)構(gòu)式的化合物
其中R2和R4是氫，R1和R3獨(dú)自是氫、C1-C6烷基，
這里R8、R9和R10是如上文所定義的。
再一組優(yōu)選的化合物是下列結(jié)構(gòu)式的化合物
特別是其中R5和R6與它們所連接的氮一起形成環(huán)，例如嗎啉代、哌嗪子基、4-烷基哌嗪子基等。
本發(fā)明的最優(yōu)選的化合物包括1-叔丁基-3-〔7-(3-叔丁基脲基)-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕脲；1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基脲；1-叔丁基-3-〔7-(3-叔丁基脲基)-6-鄰-甲苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕脲；1-〔2-氨基-6-鄰甲苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基脲；
1-〔2-氨基-6-(2，6-二甲基苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基脲；N-〔2-乙酰氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-乙酰胺；N7-丁基-6-苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺；3-鄰甲苯基-〔1，6〕-1，5-二氮雜萘-2，7-二胺；3-(2-氯苯基)-〔1，6〕-1，5-二氮雜萘-2，7-二胺；N2，N7-二甲基-6-苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺；7-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙基氨基-丙基氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶；1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕脲；1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙基脲；1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯(苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基)-3-(3-嗎啉代-4-基-丙基)-硫代脲；1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-咪唑啉-2-酮；N’-〔7-(3-叔丁基-脲基)-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕-N，N-二甲基-甲咪；N’-〔6-(2，6-二氯苯基)-7-(二甲基氨基亞甲基氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕-N，N-二甲基-甲咪；1-叔丁基-3-〔2-(3-二乙氨基-丙氨基)-6-(2，6-二甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲；1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲；1-〔2-氨基-6-(2，3-二氯-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；
1-〔2-氨基-6-(3-甲氧基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；1-〔2-氨基-6-(2，3-二甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲；N’-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-N，N-二甲基-甲脒；1-〔2-氨基-6-(2，3，6-三氯-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；1-〔2-氨基-6-(2-甲氧基-苯基)-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；1-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔(3-二甲基氨基-丙基)-甲基-氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲；1-(2-氨基-6-吡啶-3-基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基)-3-叔丁基-脲；1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-苯基脲；1-〔2-氨基-6-(2，3，5，6-四甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；1-〔2-氨基-6-(2-溴-6-氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基脲；1-(2-氨基-6-吡啶-4-基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基)-3-叔丁基-脲；1-〔2-氨基-6-(3，5-二甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；1-〔2-氨基-6-(2-溴-6-氯-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；
1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙基氨基-丁基氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙基-脲；丙烷-1-磺酸〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-酰胺；1-〔2-氨基-6-(2，6-二氟苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基脲；1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二溴苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲；1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二甲氨基-2，2-二甲基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲；1-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(2-甲基-哌啶-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲；1-〔2-氨基-6-(2，4，6-三甲苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；1-金剛烷-1-基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲；1-環(huán)己基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲；1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-(3-甲氧基-苯基)-脲；1-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯-苯基)-2-〔4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丁氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲；1-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯-苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-硫代脲；1-叔丁基-3-{2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-6-(2，3，5，6-四甲基苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲；1-烯丙基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲；6-(2，6-二氯苯基-N7-(5，6-二氫-4H-〔1，3〕噁嗪-2-基)-N2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺；以及3-{6-(2，6-二氯-苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-1，1-二乙基脲。
再一組優(yōu)選的化合物是有下列結(jié)構(gòu)式的酰胺
特別是其中R8為一NR5R6。
另一組優(yōu)選的化合物是其中Ar為苯基或被取代苯基以外基團(tuán)的式I化合物。這組化合物中典型的是有下列結(jié)構(gòu)式的吡啶
本發(fā)明還提供包含式I的化合物連同醫(yī)藥上可接受的載體、稀釋劑或其賦形劑的藥物配制品。
本發(fā)明范圍內(nèi)的化合物對EGF、FGF、PDGF、V-src和C-src之酪氨酸激酶區(qū)域的一個(gè)或多個(gè)底物位點(diǎn)具有特異親和性。本發(fā)明范圍內(nèi)的化合物有效地抑制受體的EGF和PDGF自身磷酸化作用，并抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖和遷移。
作為蛋白質(zhì)激酶的抑制劑，本發(fā)明的化合物可用于控制哺乳動(dòng)物的包括白血病、腫瘤、牛皮癬、與動(dòng)脈硬化相關(guān)的血管平滑肌增殖，以及手術(shù)后血管狹窄及再狹窄在內(nèi)的增殖性疾病。
本發(fā)明的再一個(gè)實(shí)施方案是治療患有由血管平滑肌增殖引起之疾病的治療對象的方法。該方法包括給需要治療的對象投用有效量的式I化合物，以抑制血管平滑肌增殖和/或遷移。
最后，本發(fā)明涉及制備式I化合物及合成的中間體的方法。
本發(fā)明的詳細(xì)描述本發(fā)明的化合物可以以未溶劑化的以及溶劑化的，包括水合的形式存在。一般說來，溶劑化的形式，包括水合的形式等同于未溶劑化的形式，并且意欲包括在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。在式I的化合物中，術(shù)語“C1-C8烷基”是指有1至8個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烴殘基，并包括例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、2，2-二甲基丙基、正己基、正庚基、正辛基等。優(yōu)選的是C1-C6烷基基團(tuán)。
“鹵素”包括氟、氯、溴和碘。
“ C2-C8鏈烯基”是指有2至8個(gè)碳原子并有1個(gè)雙鍵的直鏈和支鏈烴殘基，并包括乙烯基、3-丁烯-1-基、2-乙烯丁基、3-辛烯-1-基等。典型的C2-C8炔基基團(tuán)包括丙炔基、2-丁炔-1-基、3-戊炔-1-基等。其中C2-C6鏈烯基是優(yōu)選的。
“C3-C10環(huán)烷基”是指環(huán)或雙環(huán)烴基基團(tuán)，如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)己基、環(huán)戊基、金剛烷基、雙環(huán)〔3.2.1〕辛基、雙環(huán)〔2.2.1〕庚基等，以及雜環(huán)基團(tuán)例如哌嗪基、四氫吡喃基、吡咯烷基等。
“C1-C8烷氧基”是指通過氧結(jié)合的上述烷基基團(tuán)，其例子包括甲氧基、乙氧基、異丙氧基、叔丁氧基、正辛氧基等。優(yōu)選的是C1-C6烷氧基。
典型的“ C1-C8鏈烷酰基”基團(tuán)包括甲?；⒁阴；⒈；⒍□；爱惗□；??！癈1-C8鏈烷酰氧基”包括乙酰氧基、叔丁酰氧基、戊酰氧基等。
烷基鏈烯基和炔基均可被NR5R6和5元或6元碳環(huán)和含有1個(gè)或2個(gè)選自氮、氧和硫的雜環(huán)基團(tuán)取代。這樣環(huán)也可以是例如被1個(gè)或2個(gè)C1-C6烷基基團(tuán)取代的。其例子包括二甲氨基甲基、4-二乙氨基-3-丁烯-1-基，5-乙基甲氨基-3-戊烯-1-基-4-嗎啉代丁基、4-(4-甲基哌嗪-1-基)丁基，4-四氫吡啶基丁基-2-甲基四氫吡啶并甲基-、3-咪唑烷-1-基丙基、4-四氫噻唑-3-基-丁基、苯基甲基、3-氯苯基甲基等。
術(shù)語“Ar”和“Ar’”是指未被取代和被取代的芳族和雜芳族基團(tuán)，例如苯基、3-氯苯基、2，6-二溴苯基、吡啶基、3-甲基吡啶基、苯并噻吩基、2，4，6-三溴苯基、4-乙基苯并噻吩基、呋喃基、3，4-二乙基呋喃基、萘基、4，7-二氯萘基等。
優(yōu)選的Ar和Ar’基團(tuán)是苯基和被1、2或3個(gè)獨(dú)自選自鹵素、烷基、烷氧基、硫代、硫代烷基、羥基、烷?；?CN、-NO2、-COOR8、-CF3、烷酰氧基、或式-NR5-R6的氨基基團(tuán)取代的苯基。優(yōu)選的二取代的苯基，且特別優(yōu)選的是2，6-二取代的苯基。其他優(yōu)選的Ar和Ar’基團(tuán)包括吡啶基，例如2-吡啶基和4-吡啶基。
因此典型的Ar和Ar’取代的苯基基團(tuán)包括2-氨基苯基、3-氯-4-甲氧基苯基、2，6-二乙基苯基、2-正己基-3-氟苯基、3-羥苯基、3，4-二甲氧苯基、2，6-二氯苯基、2-氯-6-甲基苯基、2，4，6-三氯苯基、2，6-二甲氧苯基、2，6-二羥苯基、2，6-二溴苯基、2，6-二硝基苯基、2，6-二-(三氟甲基)苯基、2，6-二甲基苯基、2，3，6-三甲基苯基、2，6-二溴-4-甲基苯基等。
式I的化合物能夠進(jìn)一步形成醫(yī)藥上可接受酸加成鹽和/或堿性鹽。所有這些形式都包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。
式I化合物的醫(yī)藥上可接受的酸加成鹽包括衍生于無機(jī)酸例如鹽酸、硝酸、磷酸、硫酸、氫溴酸、氫碘酸、亞磷酸等的鹽，以及衍生于有機(jī)酸例如脂族單和二羧酸、苯基取代的鏈烷酸、羥基鏈烷酸、鏈烷雙酸、芳族酸、脂族和芳族磺酸等的鹽。因此這些鹽包括硫酸鹽、焦硫酸鹽、雙硫酸鹽、亞硫酸鹽、雙亞硫酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽、磷酸一氫鹽、磷酸二氫鹽、偏磷酸鹽、焦磷酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸鹽、丙酸鹽、辛酸鹽、異丁酸鹽、草酸鹽、丙二酸鹽、琥珀酸鹽、辛二酸鹽、癸二酸鹽、富馬酸鹽、馬來酸鹽、扁桃酸鹽、苯甲酸鹽、氯代苯甲酸鹽、甲基苯甲酸鹽、二硝基苯甲酸鹽、鄰苯二甲酸鹽、苯磺酸鹽、甲苯磺酸鹽、苯乙酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、酒石酸鹽、甲磺酸鹽等。另外，還可包括氨基酸的鹽，例如精氨酸鹽等，以及葡糖酸鹽和半乳糖醛酸鹽(例如參見Berge S.M.et al.，“Pharmaceutical Salts”，J.ofPharmaceutical Science，661-19(1977))。
可以使游離堿形式的化合物與足夠量的所需酸接觸，以常規(guī)方法產(chǎn)生所說堿性化合物的酸加成鹽?？梢允果}形式的化合物與堿接觸，并以常規(guī)方法分離游離堿，從而再生游離堿形式的化合物。游離堿形式在某些物質(zhì)性質(zhì)方面，例如在極性溶劑中的溶解度稍微不同于它們各自的鹽，但從本發(fā)明目的考慮，鹽等同于它們各自的游離堿。
與金屬或胺，例如堿金屬和堿土金屬或有機(jī)胺形成醫(yī)學(xué)上可接受的堿加成鹽。作為陽離子使用的金屬可以是鈉、鉀、鎂、鈣等。適當(dāng)?shù)陌返睦邮荖，N’-二芐基乙二胺、氯代普普卡因、膽堿、二乙醇胺、乙二胺、N-甲基葡糖胺及普普卡因(例如參見Berge S.M.，et al.，“Pharmaceutical Salts”，J.of Pharmaceutical Science，661-19(1977))。
使游離酸形式的化合物與足夠量的所需堿接觸，以常規(guī)方法產(chǎn)生所說酸性化合物的堿加成鹽。也可以使鹽形式的化合物與酸接觸，并按常規(guī)方法分離游離酸以再生游離酸形式的化合物。游離酸形式在某些物理性質(zhì)，例如在極性溶劑中的溶解度方面稍不同于它們各自的鹽形式，但就本發(fā)明的目的來說鹽等于它們各自的游離酸。
雖然在本文中本發(fā)明是以優(yōu)選實(shí)施方案的形式給出的，但還可能有許多其他方案。本文中使用的術(shù)語只是描述性的，而不是用于限制本發(fā)明，所以可以在不背離本發(fā)明的精神和范圍的前提下對本發(fā)明作出各種改變。
可以按照路線I-VII簡述的合成方法制備式I的化合物。雖然這些路線常常指明確切結(jié)構(gòu)，但所說的方法可廣泛應(yīng)用于式I的類似化合物，其中包括使用有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域中已知的方法適當(dāng)?shù)乇Ｗo(hù)和去保護(hù)功能性反應(yīng)基團(tuán)。例如，為了防止不需要的付反應(yīng)，一般須在化學(xué)反應(yīng)期間，在分子的其他位點(diǎn)將羥基基團(tuán)轉(zhuǎn)變成醚或酯。可很容易地除去羥基保護(hù)基團(tuán)，以提供游離羥基基團(tuán)。同樣也可以衍化氨基基團(tuán)和羧酸基團(tuán)，以防止其發(fā)生不期望有的付反應(yīng)。Greene和Wuts在Protective Groups inOrganic Synthesis，John Wiley and Sons，New York(2nd Ed，1991)中，以及Mcomie在Protective Groups in Organic chemistry，Ple m Press，NewYork，1973中詳細(xì)描述了典型的保護(hù)基團(tuán)，及連接和除去它們的方法。
路線I描述了制備1-叔丁基-3-〔7-(3-叔丁基脲基)-6-(芳基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕脲和1-〔2-氨基-6-(芳基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基脲的典型方法，其中所使用關(guān)鍵性中間體2，7-二氨基-6-(芳基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶可按美國專利No.3,534,039中所述的方法制得。一般說來，可使2，7-二氨基-6-(芳基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶化合物與一當(dāng)量的?；瘎├绠惽杷嵬榛ァ惲蚯杷猁}、氨基甲酰氯、氨基甲酰溴、氨磺酰氯、氯甲酸酯、或其他活化的酸衍生物例如對稱酸酐、混合酸酐等反應(yīng)，以完成此反應(yīng)。反應(yīng)在凈異氰酸酯中進(jìn)行，或者在適當(dāng)?shù)姆欠磻?yīng)性溶劑如二甲基甲酰胺、二噁烷中，于堿特別是氫化鈉存在下進(jìn)行。可以使用兩倍過量或更大量的?；瘎┌瓷鲜鐾瑯臃绞脚c起始材料2，7-二氨基-6-(芳基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶反應(yīng)，主要得到二?；幕衔铮?-叔丁基-3-〔7-(3-叔丁基脲基)-6-(芳基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕脲。
一般在大約20℃至80℃的溫度下反應(yīng)1-3小時(shí)即可基本上完成?；饔??？砂闯Ｒ?guī)方法，例如過濾固體物并蒸發(fā)除去反應(yīng)溶劑而很容易地分離出產(chǎn)物。必要時(shí)可用常規(guī)方法，例如從乙酸乙酯、二氯甲烷、己烷等有機(jī)溶劑中結(jié)晶，以及在固相載體例如硅凝膠上層析等方法進(jìn)一步純化產(chǎn)物。本發(fā)明的化合物一般是很易于結(jié)晶的固體物。
路線II圖解顯示2，7-二氨基-6-(芳基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶的典型?；磻?yīng)，其中使用2倍過量或更大過量的乙酐，經(jīng)加熱制備二?；a(chǎn)物例如N-〔2-乙酰氨基-6-(芳基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-乙酰胺。更一般地說，可以用這種方法從適當(dāng)?shù)?，7-二氨基-6-(芳基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶化合物開始，用過量的?；瘎├缢狒?、混合酸酐，或活化的酰基衍生物如?；群突酋Ｂ忍幚碇?，以制得這種類型的二酰化化合物。反應(yīng)一般在大約20-200℃的溫度下進(jìn)行。為了清除反應(yīng)過程中產(chǎn)生的酸性付產(chǎn)物，可以進(jìn)行有機(jī)或無機(jī)堿例如三乙胺和氫氧化鈉的加成反應(yīng)?？捎萌缟纤龅膶游龊徒Y(jié)晶方法很容易地分離并純化二酰化產(chǎn)物。
路線III圖解說明從可按美國專利No.3,534,039中所述方法制備的2，7-二氨基-6-(芳基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶開始，以幾個(gè)步驟制備6-(芳基)-N7-烷基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺。在回流條件下用含水無機(jī)酸處理起始材料，以得到水解產(chǎn)物2-氨基-6-(芳基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-醇。在Vilsmeier-Haack條件下2-氨基-6-(芳基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-醇與亞硫酰氯反應(yīng)產(chǎn)生氯-甲脒產(chǎn)物N’-(7-氯-6-(芳基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基)-N，N-二甲基-甲脒。該反應(yīng)性中間體可直接與親核試劑如胺反應(yīng)，得到N7-烷基-6-(芳基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺?；蛘撸部梢越?jīng)醇化作用除去甲脒功能性，以提供7-氯衍生物，即2-氨基-7-氯-6-(芳基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶。7-氯中間產(chǎn)物與親核試劑如烷基胺反應(yīng)，得到相應(yīng)的6-(芳基)-N7-烷基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺。
路線IV描述3-(芳基)-〔1，6〕1，5-二氮雜萘-2，7-二胺的制備，并代表制備這些化合物的通用方法學(xué)。6-溴-2，4-二氨基-5-氰基吡啶氫解(JACS，802838-2840(1958))后得到中間體2，4-二氨基-5-氰基吡啶。氰基吡啶化合物例如在適用于阮氏鎳催化劑的甲酸-水混合物中氫化，得到關(guān)鍵性的多變中間體2，4-二氨基-5-吡啶-甲醛(carboxaldehyde)。然后該醛與路線IV中所述的芳基乙腈縮合，得到3-(芳基)-〔1，6〕1，5-二氮雜萘-2，7-二胺。在醇化物堿，例如乙醇鈉或2-乙氧基乙醇鈉(其可在原位自乙醇或2-乙氧基乙醇中加入鈉金屬或氫化鈉而產(chǎn)生)存在下完成縮合反應(yīng)。路線IV描述制備本發(fā)明3-(芳基)-(1，6)1，5-二氮雜萘-2，7-二胺的通用方法學(xué)。
路線V圖解說明在高溫度下高壓氣體貯罐中使用烷基胺對6-芳基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(美國專利No.3,534,039)進(jìn)行直接二烷基化，得到N2，N7-二烷基-6-芳基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺。一般地說，該反應(yīng)是使用凈的胺試劑例如異丁胺和正己胺，于約150-300℃溫度下在高壓氣體貯罐中完成的。
路線VI圖解顯示其中R1可以是氨基烷基基團(tuán)例如二乙氨基丙基的式I化合物的合成。6-(芳基)-2，7-二氨基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶可在高壓氣體貯罐中，于酸例如甲磺酸存在下與胺親核試劑，例如氨基烷胺(如H2N烷基-NR5R6)反應(yīng)，以產(chǎn)生本發(fā)明的氨基烷基取代的化合物。必要時(shí)可用常規(guī)方法進(jìn)一步?；摶衔?。很容易使用結(jié)晶和層析等常規(guī)方法學(xué)分離和純化所需化合物。
路線VII圖解說明其中R3和R4一它們所連接的氮一起形成環(huán)的式I化合物的合成。環(huán)上可包括另一個(gè)雜原子例如氮、氧或硫。在流程VII中，二氨基吡啶并嘧啶與異氰酸鹵代乙酯反應(yīng)，產(chǎn)生咪唑啉酮。反應(yīng)一般是在有機(jī)溶劑例如二甲基甲酰胺中，并于堿例如氫化鈉存在下進(jìn)行。當(dāng)反應(yīng)溫度為30℃時(shí)，反應(yīng)通常需8至16小時(shí)完成。可用常規(guī)方法很容易地分離和純化產(chǎn)物。
上述反應(yīng)還產(chǎn)生其中R1或R3是式
的?；愃莆锏氖絀化合物。
路線VIIa圖解顯示該反應(yīng)。可用層析、分級結(jié)晶等常規(guī)方法分離產(chǎn)物。
本發(fā)明提供的另一組化合物是脒，其中R1和R2連同它們所連接的氮一起，以及R3和R4連接它們所連接的氮一起可以是具有式
或NH2)之基團(tuán)的式I化合物。
路線VIII圖解說明典型的吡啶并嘧啶脒的合成，其可由氨基吡啶并嘧啶與酰胺或環(huán)酰胺的乙縮醛，例如N，N-二甲基甲酰胺的二甲基乙縮醛或N-甲基吡咯烷酮的二甲基乙縮醛反應(yīng)而生成。一般可在互溶劑例如二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、四氫呋喃等溶劑中，使氨基吡啶并嘧啶與大約等摩爾量的或過量的乙縮醛混合進(jìn)行該反應(yīng)。反應(yīng)一般在大約5-50℃溫度條件下進(jìn)行約3-6小時(shí)?？捎贸Ｒ?guī)方法很容易地分離產(chǎn)物，并在必要時(shí)可用層析、結(jié)晶等常規(guī)技術(shù)純化之。
本發(fā)明還提供其中氨基基團(tuán)被芳基Ar’，例如苯基、被取代苯基、吡啶基、噻唑基、嘧啶基等取代的氨基吡啶并嘧啶。優(yōu)選的N-芳基化合物具有下列結(jié)構(gòu)式
其中Ar、Ar’和B的定義如上文所述?？捎脦追N方法中的任何一種，例如流程IX和X中所述的方法制備這樣的化合物。
在路線IX中，使例如在2位上被烷基硫代、烷基亞砜或烷基砜取代的吡啶并嘧啶與芳基胺(例如Ar’NH2)反應(yīng)，進(jìn)行硫代亞砜或砜取代基的置換，以產(chǎn)生相應(yīng)的N-芳基氨基吡啶并嘧啶。置換反應(yīng)一般在例如二甲基甲酰胺等有機(jī)溶劑中，于大約20-80℃的溫度下進(jìn)行。反應(yīng)時(shí)間約為3-8小時(shí)，并可將反應(yīng)混合物加到水中，然后用溶劑例如二氯甲烷等提取產(chǎn)物而很容易地分離出所需產(chǎn)物。
路線X同樣說明從適當(dāng)?shù)谋蝗〈奏?，例?-氨基-2-氯嘧啶-5-腈開始合成N-芳基氨基吡啶并嘧啶的步驟。經(jīng)與芳胺(Ar’NH2)反應(yīng)置換鹵素基團(tuán)，得到在5位上有氰基基團(tuán)的相應(yīng)的L-N-芳基氨基嘧啶。經(jīng)與阮氏鎳在水和甲酸中反應(yīng)使氰基基團(tuán)轉(zhuǎn)變成醛，并按路線IV中所述方法使所得到的2-芳基氨基-4-氨基-嘧啶-5-羧醛與芳基乙腈(例如苯基乙腈、2-吡啶基乙腈等)反應(yīng)，以得到相應(yīng)的本發(fā)明的N-芳基-氨基-吡啶并嘧啶。
路線I
路線II
路線III
路線IV
路線V
路線VI
路線VII
路線VIIa
路線VIII
路線VIII(續(xù))
路線IX
路線X
式I的化合物是蛋白質(zhì)酪氨酸激酶的有價(jià)值的抑制物，作為治療增殖性疾病的細(xì)胞抗增殖劑。而具有治療價(jià)值。這些化合物是一種或多種蛋白質(zhì)激酶、PDGF、FGF、EGF、V-src和C-src的強(qiáng)有力抑制劑。因此本發(fā)明化合物可用于治療動(dòng)脈硬化、血管再狹窄和腫瘤?？捎眠@些化合物治療的特異性腫瘤包括例如An.Rev.Respir.Dis.，142554-556(1990)中描述的小細(xì)胞肺癌、Cancer Research，524773-4778(1992)中描述的人乳腺癌、Cancer Research，521457-1462(1992)中所述的這種類型的早期人膀胱癌、如J.Clin.Invest.，9153-60(1993)中以及J.Surg.Res.，54293-294(1993)中所述的人結(jié)腸癌。這類化合物還可用作對抗細(xì)菌例如肺炎球菌的抗生素。例如用標(biāo)準(zhǔn)的體外檢測法檢測時(shí)實(shí)施例9和18的化合物表現(xiàn)出抗這種革蘭氏陽性細(xì)菌的活性。這些化合物還可用作抗多種不希望有的植物例如寬葉雜草的除草劑。
可以以多種口服和胃腸道外給藥的劑型配制并服用(包括經(jīng)皮內(nèi)和直腸給藥)本發(fā)明的化合物。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解到，下述劑型中可包含作為活性成分的式I化合物或其醫(yī)藥上可接受的相應(yīng)的鹽，或式I化合物的溶劑化物。
本發(fā)明的再一個(gè)實(shí)施方案是包含式I化合物連同其醫(yī)藥上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑的藥物配制品。為了制備本發(fā)明化合物的藥物組合物，醫(yī)藥上可接受的載體可以是固體或液體的。固體形式的制劑包括粉末劑、片劑、藥丸、膠囊劑、扁囊劑、栓劑及可分散顆粒。固體載體可以是一種或多種也能用作稀釋劑、香味劑、粘合劑、防腐劑、藥片崩解劑或膠囊封裝材料的物質(zhì)。
在粉末劑中，載體是精細(xì)粉碎的固體，例如與精細(xì)粉碎的活性成分混合的滑石粉或淀粉。
在片劑中，活性成分與適當(dāng)比例的，有必要的粘結(jié)性質(zhì)的載體混合，并壓制成有所需形狀和大小的藥片。
本發(fā)明的藥物配制品較好含有大約5％至70％的活性化合物。適當(dāng)?shù)妮d體包括碳酸鎂、硬脂酸鎂、滑石粉、糖、乳糖、果膠、糊精、淀粉、明膠、黃耆膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、低溶點(diǎn)蠟、可可脂等?？诜盟幍膬?yōu)選劑型是膠囊劑，其包含活性化合物與作為載體的膠囊包裹材料的配制品，在其所提供的膠囊中加有或沒有其他載體的活性成分被載體所包繞，因而與之相聯(lián)系。同樣，也包括扁囊劑和錠劑。片劑、粉末劑、膠囊、藥丸、扁囊劑和錠劑可用作適于口服給藥的固體劑型。
為了制備栓劑，首先熔化低熔點(diǎn)蠟，例如脂肪酸甘油酯或可可脂的混合物，并于攪拌下將活性成分均勻地分散于其中。然后將熔化的物質(zhì)混合物倒入常規(guī)大小的模子中，使之冷卻并進(jìn)而固化成形。
液體制劑包括溶液、懸液和乳液，例如水溶液或水-丙二醇溶液。為了胃腸道外注射，可在聚乙二醇水溶液、等滲鹽水、5％葡萄糖溶液等溶液中配制液體制劑。
可以將活性成分溶解于水中并根據(jù)需要加入適當(dāng)?shù)闹珓⑾懔?、穩(wěn)定劑和增稠劑，以制得適于口服使用的水溶液。
可以將細(xì)微粉碎的活性成分分散于含粘性材料例如天然或合成樹膠，樹脂、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉，以及其他已知懸浮劑的水中，以制得適于口服使用的含水懸液。
另外還包括可在臨用前轉(zhuǎn)化成適于口服給藥之液體制劑的固體形式的制劑。這樣的液體劑型包括溶液、懸液和乳液。這些制劑除活性成分外，還可含有著色劑、香料、穩(wěn)定劑、緩沖劑、人工和天然甜味劑、分散劑、增稠劑、增溶劑等?？梢岳孟?、聚合物等制備緩釋劑型。另外，可利用滲透泵長時(shí)間均勻地釋放活性化合物。
本發(fā)明的藥物制劑較好是單位劑量形式的。在這種劑型中，制劑被再分成含有適當(dāng)量活性成分的單位劑量。單位劑量形式可以是包裝的制劑，含有不同量制劑的包裝，例如包裝的片劑、膠囊及在小瓶或安瓶中的粉末。另外，單位劑量形式可以是膠囊、片劑、扁囊劑或錠劑本身，或者是在包裝中的適當(dāng)數(shù)目的單位制劑。
治療有效劑量的式I化合物一般為大約每天每公斤體重1mg至100mg。典型的成人劑量約為每天50至800mg。根據(jù)活性化合物的特殊應(yīng)用和效力的不同，單位劑量制劑中活性成分的量可有所不同并可以從大約0.1mg到500mg，較好大約0.5mg到100mg。需要時(shí)，組合物還可含有其他相容性治療劑。需要用式I化合物治療的對象每天可服用大約1至500mg，并在24小時(shí)內(nèi)一次或多次服用。
已使用檢測對酪氨酸激酶抑制作用的標(biāo)準(zhǔn)檢測法估測了本發(fā)明的化合物。其中一種檢測法如下所示表皮生長因子受體酪氨酸激酶的純化按下述方法從A431表皮樣癌細(xì)胞中分離人EGF受體酪氨酸激酶。細(xì)胞生長于可加有50％Delbuco氏改良的Eagle培養(yǎng)基和50％含10％胎牛血清之HAM F-12營養(yǎng)培養(yǎng)基(Gibco)的轉(zhuǎn)瓶內(nèi)。使大約109個(gè)細(xì)胞在含有20mM2-(4N-〔2-羥乙基〕-哌嗪-1-基)乙磺酸(pH7.4)、5mM乙二醇雙(2-氨基乙基醚)N，N，N’，N’-四乙酸、1％Triton x-100、10％甘油、0.1mM原釩酸鈉、5mM氟化鈉、4mM焦磷酸鹽、4mM苯甲酰胺、1mM二硫蘇糖醇、80μg/mL抑蛋白酶肽、40μg/mL亮抑蛋白酶肽和1mM苯基甲基磺酰氯的2倍體積緩沖液中溶胞。25,000xg離心10分鐘后，用10mL預(yù)先在50mMHepes、10％甘油、0.1％Triton X-100和150mM NaCI(pH7.5)(平衡緩沖液)中平衡過的麥胚凝集素瓊脂糖將上清液4℃平衡2小時(shí)。用加在平衡緩沖液中的1M NaCl從樹脂上洗掉污染蛋白，并用加在平衡緩沖液中的0.5M N-乙酰-1-D-葡糖胺洗脫酶。
IC50值的測定在含有25mM Hepes(pH7.4)、5mM MgCl2、2mM MnCl2、50μm釩酸鈉、5-10ng EGF受體酪氨酸激酶、200μM底物肽，例如(Ac-Lys-His-Lys-Lys-Leu-Ala-Glu-Gly-Ser-Ala-Tyr472-Glu-Glu-Val-NH2)(Wahl M.I.，et aI.，J.Biol.Chem.，2653944-3948(1990))、10μM ATr(含1μCi〔32p〕ATP)的0.1mL總反應(yīng)體積中進(jìn)行IC50檢測的酶試驗(yàn)，并于室溫下保溫10分鐘。加入2mL 75mM磷酸終止反應(yīng)并通過2.5cm磷酸纖維素濾膜圓盤以結(jié)合肽。用75mM磷酸將濾膜洗5次并放在含5mL閃爍液(Ready gel Beckman)的小瓶內(nèi)。
PDGF和FGF受體酪氨酸激酶檢測法從J.Escobedo處得到并按J.Biol.Chem.，2621482-1487(1991)中所述方法制備小鼠PDGF-β和人FGF-1(flg)受體酪氨酸激酶的全長度cDNA，同時(shí)設(shè)計(jì)PCR引物用以擴(kuò)增編碼細(xì)胞內(nèi)酪氨酸激酶區(qū)域的DNA片段。將此片段并接到用AcMNPV DNA共轉(zhuǎn)染的桿狀病毒載體中，并分離重組體病毒。用病毒感染SF9昆蟲細(xì)胞以過表達(dá)蛋白質(zhì)，并用細(xì)胞溶胞物進(jìn)行檢測。檢測在96孔平板(100μl/保溫/孔)，所用條件應(yīng)最適于測定γ32P-ATP內(nèi)的32P向谷氨酸-酪氨酸共聚物底物中的摻入。簡單地說，向各孔內(nèi)加入82.5μl含有25mM Hepes(pH7.0)、150mM NaCl、0.1％Triton X-100、0.2mM PMSF、0.2mMNa3VO4、10mM MnCl2和750μg/mL聚(4∶1)谷氨酸-酪氨酸的保溫緩沖液，然后加入2.5μL抑制劑和5μL酶溶胞物(7.5μg/μLFGF-TK或6.0μg/μL PDGF-TK)以啟動(dòng)反應(yīng)。25℃保溫10分鐘后，向各孔內(nèi)加入10μL γ32P-ATP(0.4μCi加50μMATP)并將樣品繼續(xù)25℃保溫10分鐘。加入100μL含20mM焦磷酸鈉的30％三氯乙酸(TCA)終止反應(yīng)，并使材料沉淀在玻璃纖維濾膜簇(Wallac)上。用含有100mM焦磷酸鈉的15％TCA洗濾膜3次，并在Wallac1250 β平板讀數(shù)器中計(jì)數(shù)濾膜上保溫的放射活性。非特異活性定義為樣品單獨(dú)與緩沖液(無酶)保溫后留在濾膜上的放射活性。特異性酶促活性定義為總活性(酶加緩沖液)減去非特異活性的值?；谝种魄€確定抑制50％特異活性時(shí)化合物的濃度(IC50)。
V-srct和C-src激酶檢測法使用針對N末端2-17個(gè)氨基酸的抗肽單克隆抗體從桿狀病毒感染的昆蟲細(xì)胞溶胞產(chǎn)物中純化V-src或C-src激酶。向由150mMNaCl、50mM Tris pH7.5、1mM DTT、1％NP-40、2mMEGTA、1mM釩酸鈉、1mM PMSF、各1μg/ml亮抑蛋白酶肽、抑胃酶肽和抑蛋白酶肽組成昆蟲細(xì)胞溶胞緩沖液的懸液內(nèi)加入共價(jià)結(jié)合到0.65-μm膠乳小珠上的抗體。將含有C-src或V-src蛋白質(zhì)的昆蟲細(xì)胞溶胞物與這些小珠于4℃下旋轉(zhuǎn)保溫3-4小時(shí)。在保溫結(jié)束時(shí)，在溶胞緩沖液并洗小珠3次，再懸浮于含有10％甘油的溶胞緩沖液中并冷凍。融化這些乳膠小珠，在由40mM Tris pH7.5，5mg MgCl2組成的檢測緩沖液淋洗3次，并懸浮于同樣緩沖液中。在帶有聚亞乙烯膜底部的Millipore96孔平板上加入以下反應(yīng)成分10μL V-src或C-src小珠、10μL 2.5mg/mL聚Glu Tyr底物、含0.2μ Ci標(biāo)記的32P-ATP的5μM ATP、含有抑制劑或溶劑對照物的5μM DMSO，以及補(bǔ)足到終體積125μL緩沖液。在室溫下加入ATP開始反應(yīng)，10分鐘后加入125μL 30％TCA、0.1M焦磷酸鈉在冰上急冷5分鐘。然后過濾平板內(nèi)容物并用250μL等分的15％TCA，0.1M焦磷酸鹽洗各孔。濾膜打孔，在液體閃爍計(jì)算器中計(jì)數(shù)，并將用于檢查抑制活性的數(shù)據(jù)與已知抑制劑例如erbstatin相比較。J.Med.Chem.37598-609(1994)中充分描述了這一方法。
細(xì)胞培養(yǎng)從大鼠的胸主動(dòng)脈中分離大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(RASMC)并按照Ross，J.Cell.Biol.，30172-186(1971)的方法進(jìn)行體外細(xì)胞培養(yǎng)。使細(xì)胞生長于含有18％胎牛血清(FBS，Hyclone，Logan，Vtah)，1％谷氨酰胺(Gibco)和1％青霉素/鏈霉素(Gibco)的Bulbecco氏改善的Eagle氏培養(yǎng)基(DMEM，Gibco)中。根據(jù)其“坡和谷”(hill andvalley)生長特征并用SMC μ-肌動(dòng)蛋白特異性單克隆抗體(Sigma)進(jìn)行熒光染色來鑒定細(xì)胞。所有實(shí)驗(yàn)均使用5-20代的RASMC。在二甲基亞砜(DMSO)中制備試驗(yàn)化合物，以實(shí)現(xiàn)在載體中的一致性并保證化合物溶解性。同時(shí)用試驗(yàn)化合物估測適當(dāng)?shù)腄MSO對照。
〔3H〕胸苷摻入試驗(yàn)將懸浮于含10％FBS之DMEM中的RASMC鋪敷于24孔平板中(30,000細(xì)胞/孔)。4天后，細(xì)胞達(dá)到匯合狀態(tài)并經(jīng)在含有0.2％FBS的DMEM/F12培養(yǎng)基(Gibco)中繼續(xù)保溫2天而進(jìn)入靜止?fàn)顟B(tài)。將細(xì)胞與加在0.5mL/孔血清替代培養(yǎng)基(DMEM/F12+1％CPSR，Sigma)中的PDGF-BB、bFGF或FBS加上試驗(yàn)化合物保溫22小時(shí)，以誘導(dǎo)DNA合成。18小時(shí)后，加入0.25μ Ci/孔〔3H〕-胸苷。4小時(shí)后，除去放射活性培養(yǎng)基終止保溫，用1mL冷磷酸鹽緩沖鹽洗細(xì)胞兩次，然后再用冷5％三氯乙酸洗兩次。在0.75mL 0.25N NaOH中裂解酸不溶性部分并用液體閃爍計(jì)數(shù)法測定放射活性。作圖確定IC50值。
PDGF受體自磷酸化使RASMC在100mm平皿中生長至細(xì)胞匯合。除去生長培養(yǎng)基改換無血清培養(yǎng)基，并將細(xì)胞于37℃繼續(xù)保溫24小時(shí)。然后向培養(yǎng)基內(nèi)直接加入試驗(yàn)化合物并再將細(xì)胞保溫2小時(shí)。2小時(shí)后，以30ng/mL的終濃度加入PDGF-BB，于37℃處理5分鐘以刺激PDGF受體的自身磷酸化。經(jīng)生長因子處理后除去培養(yǎng)基，用冷磷酸鹽緩沖鹽水洗細(xì)胞并直即用1mL溶胞緩沖液(50mM HEPES(pH7.5)、150mM NaCl、10％甘油、1％Triton X-100、1mMEDTA、1mM EGTA、50mMNaF、1mM原釩酸鈉、30mM磷酸對硝基苯酯、10mM焦磷酸鈉、1mM苯基甲基磺酰氯、10μg/mL抑蛋白酶肽和10μg/mL亮抑蛋白酶肽)裂解細(xì)胞。將溶胞產(chǎn)物以10,000xg離心10分鐘。將上清液與10μL兔抗人PDGF-A受體抗體(1∶1000)一起保溫2小時(shí)。保溫后，加入蛋白A-瓊脂糖凝膠小珠持續(xù)混合2小時(shí)，并用1mL溶胞洗滌緩沖液將與小珠結(jié)合的免疫復(fù)合物洗4次。將免疫復(fù)合物溶解于40μL Laemmli樣品緩沖液中并在4-20％SDS聚丙烯酰胺凝膠中電泳。電泳后，將分離的蛋白轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上并用抗磷酸酪氨酸抗血清進(jìn)行免疫印跡分析。與〔125I〕-蛋白A保溫后，用磷影象分析法檢測酪氨酸磷酸化蛋白質(zhì)的水平，并以光密度分析法定量蛋白質(zhì)帶。根據(jù)光密度檢測數(shù)據(jù)得出IC50值。
下列表I和II中給出前述檢測試驗(yàn)中測得的本發(fā)明有代表性化合物的生物學(xué)數(shù)據(jù)。表I.對蛋白質(zhì)酪氨酸激酶的抑制作用(IC50的μm數(shù)或在50μm時(shí)的(百分抑制率))實(shí)施例PDGFFGFEGFV-src C-src1 21.22.99 (-2.4％) 0.212 10.21.60 (52.3％)(27.4％) 19.53 1.250.140 1.17(46.8％) 0.224 (31.9％)(21.5％) (36.65％) (3.1％) (33.6％)5 0.466 1.40 0.928 (23.3％) 0.4076 0.340.397 0.457 (39.8％) 0.117 (33.5％)17.9 (25.15％) (7.6％) 2.39 25.110.56 18.313 (18.2％)30.3 (21.2％) (15.9％)16 10.72 9.21 7.08(10.3％) 1.3817 27.04.50 7.22(5.3％) 2.7618 21.31.19 18.2(21.4％) 0.51419 (47.7％)16.93 (26.1％)(5.2％) (52.8％)20 46.12.38 (51.7％) 0.74821 0.660.08246.97(49.4％) 0.07322 1.3 0.128 (90.4％)(46.9％) 0.07723 4.510.291 (104.8％) (10.2％) 0.61324 11.38 7.29 (58.3％)(15.6％) 0.21425 6.0411.82 (57.55％) (0.0％) 0.20726 1.080.116 0.039528 0.676 0.075 0.11730 1.780.264 (46.8％)32 0.415 0.0739 5.034 0.349 0.0552 0.01135 2.08(97.9％)36 22.88 0.523 0.18437 0.263 0.0401 (106.5％)38 0.360 0.047 0.01939 1.980.125 0.02140 0.697 0.057441 0.793 0.139 0.08642 0.624 0.108 0.03243 0.405 0.091 0.01144 1.550.196 0.02345 1.850.198 0.0447 6.170.637 0.16148 5.320.613 0.2649 0.420 0.0535 0.02450 2.600.30551 0.573 0.084 0.1052 0.468 0.051 0.03253 7.080.693 0.15354 0.231 0.095458 19.03.46(109.8％)59 0.838 0.072 0.085表I續(xù).對蛋白質(zhì)酪氨酸激酶的抑制作用(IC50的μm數(shù)或在50μm時(shí)的(百分抑制率))實(shí)施例 PDGFFGFEGFV-src C-src60 35.913.0 1.5761 45.67.85 0.76463 7.010.5431.7864 (13.0％)(23.8％) (0.0％)65 (29.6％)17.0 (95.0％)66 5.191.28 3.4267 12.05 1.39 1.5669 15.55 1.96 4.6670 31.35 2.59 0.92978 32.94.01 3.9979 17.78 8.09 (60.93％)80 (22.9％)10.281 (-20.3％) (67.5％)82 4.673.71 (77.6％)83 42.51.98 (-9.8％) (53.6％)84 2.260.1623.8285 7.630.1294.4686 2.960.1141.4187 1.880.118(92.7％)88 0.711 0.148 (34.4％) 0.21389 0.857 0.1110.03690 8.0111.46 22.75 (16.8％) 1.6392 (33.1％)2.01 (-10.1％) (44.5％)93 6.050.3434.1794 (11.5％)17.695 41.60.605(0.0％)96 27.43.8497 1.730.34 (28.9％)98 (34.3％)1.80 (0.5％)99 (15.5％)0.708(17.1％)100(22.3％)(27.1％) (6.0％) (46.6％)1014.4811.2219.3102(44.4％)3.11 (-8.2％) (0.8％)10319.60.30036.410436.75.321050.618 0.1810.2141064.8 0.3610.236107(20.5％)(37.2％) (1.4％) (37.0％)10813.74.48 5.66109(23.6％)(10.3％)11011.512.8 (27.5％)11123.3(47.7％) (-26.4％) (15.7％)1121.260.1280.0771131.090.0770.07811423.919.2表I(續(xù)).對蛋白質(zhì)酪氨酸激酶的抑制作用(IC50的μm數(shù)或在50μm時(shí)的(百分抑制率))實(shí)施例 PDGF FGF EGF V-srcC-src115 2.63 1.24 0.024116 0.804 0.335 0.098117 2.79 0.135 (100％)118 1.92 0.126119 62.4 7.71120 3.84 3.27 42.7121 (21.8％) 0.142122 1.46 0.171123 0.26 0.045 0.029124 0.253 0.059 0.026表II.細(xì)胞試驗(yàn)(IC50＝μm)實(shí)施例 對PDGF刺激的受體 對生長因子刺激的[3H]自身磷酸化的抑制作用胸苷攝入的抑制作用(IC50＝μM) (IC50＝μM)3 0.97 2.7(PDGF)，0.9(FGF)124 0.2450.55(PDGF)，0.93(FGF)51 0.365123 0.296＜0.30(PDGF)，0.32(FGF)52 0.2410.45(PDGF)，0.40(FGF)69 6.46113 1.189 1.6359 1.1967 9.42115 5.1366 5.29116 0.9128 1.38114 15.86112 1.0822 3.7321 1.86 0.3590 ＞10(PDGF)，20.0(FGF)
本發(fā)明的化合物特別適用于治療閉合的動(dòng)脈氣球血管成形術(shù)后的再狹窄。進(jìn)行已鈣化動(dòng)脈之血管成形術(shù)的病人約有40％發(fā)生再狹窄，而且是用這種方法治療心臟病人所造成的一個(gè)主要問題。用下述常規(guī)試驗(yàn)證明本發(fā)明的化合物具有良好的活性。
大鼠頸動(dòng)脈的氣球血管成形術(shù)將雄性Spragul-Dawley大鼠(350-450g)分成兩個(gè)治療組一組大鼠用藥物處理(100mg/kg口服，每日兩次)(n＝10)，第二組接受載體(2mL/kg口服，每日兩次)(n＝10)。外科手術(shù)前所有動(dòng)物都預(yù)處理2天，并在損傷后直到處死前每日接受藥物處理。
按照下述方法造成大鼠頸動(dòng)脈中的氣球損傷。用Telazol(0.1mL/100g肌肉注射)麻醉大鼠，通過在頸部前正中線切開以暴露頸動(dòng)脈。在頸內(nèi)和外動(dòng)脈的分叉處分離頸動(dòng)脈。將2F栓塞切除導(dǎo)管插入頸外動(dòng)脈并向下通過總頸達(dá)到動(dòng)脈拱的水平。吹脹氣球并將導(dǎo)管拉回到進(jìn)入點(diǎn)，然后放氣。將此過程重復(fù)2次以上。然后移出栓塞切除導(dǎo)管并結(jié)扎頸外動(dòng)脈，留下完整無損的頸內(nèi)動(dòng)脈血琉通道。封閉手術(shù)切口，使動(dòng)物甦醒后仍放回籠內(nèi)。
在損傷后的不同時(shí)間點(diǎn)，經(jīng)CO2吸入使動(dòng)物無痛致死。灌注固定并加壓頸動(dòng)脈，用于組織學(xué)檢查。測量頸動(dòng)脈的面積(以個(gè)別動(dòng)物的平均比例表示)，得出損傷的形態(tài)學(xué)檢測結(jié)果。每只動(dòng)物制備多達(dá)16個(gè)切片，求出沿著頸動(dòng)脈長度的平均損傷大小。使用Princeton GammaTech(Princeton，New Jersey)的影象分析程度定量血管的橫截面積。
下列實(shí)施例舉例說明制備本發(fā)明中間體和終產(chǎn)物的方法。它們不是用于限制本發(fā)明的范圍。溶劑的混合物是以體積/體積表示。
實(shí)施例12-7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(按照美國專利No.3,534,039的方法制備的)。向用0.14g鈉和60mL 2-乙氧基乙醇制備的2-乙氧基乙醇鈉溶液中加入2.07g 2，4-二氨基-5-嘧啶羧醛和2.79g 2，6-二氯基乙腈。將混合物加熱回流4小時(shí)，冷卻，并用二乙醚洗可溶性產(chǎn)物得到2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶，mp 325-332℃(MS)。
實(shí)施例21-叔丁基-3-〔7-(3-叔丁基脲基)-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕脲向3.0g如上制得的2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶在45mL DMF中形成的漿液內(nèi)分幾次加入0.48g氫化鈉(50％，加在礦物油中)。將混合物攪拌1小時(shí)，加入1.0g叔丁基異氰酸鹽并將反應(yīng)混合物室溫?cái)嚢?6小時(shí)。過濾反應(yīng)混合物以除去小量不溶性材料并用500mL水稀釋濾液。過濾收集不溶性產(chǎn)物，先用水，然后再用醚洗，并在濾膜上風(fēng)干。經(jīng)硅凝膠層析(用溶于氮仿的0-1％甲醇梯度洗脫)純化產(chǎn)物，從乙醇中結(jié)晶后得到0.7g 1-叔丁基-3-〔7-(3-叔丁基脲基)-6-(二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕脲，mp.200℃(分解)。C23H22Cl2N7O2·0.1H2O的元素分析理論值C，54.57；H，5.42；N，19.37；H2O，0.36。實(shí)測值C，54.05；H，5.43；N，19.08；H2O，0.37。
實(shí)施例31-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基脲繼續(xù)上述實(shí)施例2的洗脫，從乙醇中結(jié)晶后得到1.5g 1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基脲，mp335℃。C18H18Cl2N6O0.5H2O的元素分析理論值C，52.18；H，4.62；N，20.28；H2O，2.17。實(shí)測值C，51.90；H，4.56；N，20.01；H2O，2.39。
實(shí)施例41-叔丁基-3-〔7-(3-叔丁基脲基)-6-鄰甲苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕脲使0.5g按上文實(shí)施例1中所述方法制備的2，7-二氨基-6-鄰甲苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶在10mL二甲基甲酰胺中的懸液與0.16g 60％氫化鈉反應(yīng)，并于室溫?cái)嚢?.5小時(shí)。向懸液內(nèi)加入0.49mL叔丁基異氰酸并將混合物室溫?cái)嚢柽^夜。過濾反應(yīng)混合物以除去不溶性鹽，并于減壓下蒸發(fā)濾液。用水稀釋殘留物，過濾收集不溶性粗產(chǎn)物并真空干燥。從己烷∶乙酸乙酯∶二氯甲烷混合物(3∶2∶5v/v/v)中結(jié)晶后得到標(biāo)題化合物，mp.209-212℃(分解)。C24H31N7O2·0.3H2O的分析計(jì)算值理論值C，63.36；H，7.00；N，21.55。實(shí)測值C，63.37；H，6.92；N，21.16。
實(shí)施例51-〔2-氨基-6-鄰甲苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基脲按上述實(shí)施例2所述，從2，7-二氨基-6-鄰甲苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶開始制備，得到標(biāo)題化合物1-〔2-氨基-6-鄰甲苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基脲，mp.285-290℃(分解)；MS(CI)。
實(shí)施例61-〔2-氨基-6-(2，6-二甲基苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基脲從2，7-二氨基-6-(2，6-二甲基苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶開始，按上述實(shí)施例2的方法制備，得到標(biāo)題化合物1-〔2-氨基-6-(2，6-二甲基苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基脲，mp.203-205℃(分解)；CIMS(溶于甲醇的1％氨水)365(M+1，50)，366(M+2，10)，84(100)。
實(shí)施例7N-〔2-乙酰氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕-嘧啶-7-基〕-乙酰胺將10g實(shí)施例1中所述方法制備的2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶在100mL乙酸酐中的混合物回流2小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫并于真空下除去過量的乙酸酐。將殘留物溶解于乙醇中，活性碳吸附，過濾并于0℃冷卻過夜。過濾收集不溶性粗產(chǎn)物，用二乙醚洗并真空干燥。使用活性碳從煮沸乙酸乙酯中結(jié)晶出粗產(chǎn)物，得到2.7g不純產(chǎn)物，然后在熱乙酸乙酯中制成淤漿進(jìn)一步純化并收集不溶性純產(chǎn)物(1.2g)，mp.223-225℃。C17H13Cl2N5O2的元素分析計(jì)算結(jié)果理論值C，52.32；H，3.36；N，17.95。實(shí)測值C，51.92；H，3.43；N，17.78。
實(shí)施例82-氨基-6-苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-醇向2L濃HCl和1L水的溶液內(nèi)加入300g 2，7-二氨基-6-苯基吡啶并〔2，3-d〕嘧啶的焦硫酸鹽，并將所得混合物回流攪拌過夜。在冰浴中冷卻反應(yīng)混合物，過濾，并用水再用乙醇洗可溶性產(chǎn)物，得到149g標(biāo)題化合物2-氨基-6-苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-醇，mp.390-395℃(350℃以上慢慢變暗)。
實(shí)施例9N7-丁基-6-苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺向23.8g如上實(shí)施例8中制備的2-氨基-6-苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-醇、250mL二氯甲烷和77.5mL二甲基甲酰胺的混合物中逐滴加入冷卻的36mL亞硫酰氯以使溫度保持在15℃以下。加完之后，攪拌下將懸液加熱回流5小時(shí)。在保持低于60℃的溫度下真空除去溶劑。冷卻下將所得固體物加到250mL正丁胺中，并在攪拌下將懸液回流6小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，過濾，并在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上真空除去濾液的揮發(fā)成分。使粘稠油分配于二乙醚和水之間，分離各層，并用水洗醚層。在無水硫酸鎂上方干燥有機(jī)層，過濾并蒸發(fā)。將殘留物分配于二乙醚和1N稀鹽酸之間。用二乙醚將水層洗3次，并加入氫氧化鈉使之堿化至pH12。過濾收集固體產(chǎn)物并真空干燥，得到6.5g標(biāo)題化合物N7-丁基-6-苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺，mp.174-181℃(分解)。C17H19N5的元素分析理論值C，69.60；H，6.53；N，23.87。實(shí)測值C，69.53；H，6.63；N，24.37。
實(shí)施例102-氨基-6-(4-甲氧基苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-醇按實(shí)施例8中所述方法從2，7-二氨基-6-(4-甲氧基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(美國專利No.3,534,039)制備標(biāo)題化合物，mp.380-385℃(分解)。C14H12N4O2·0.75H2O的元素分析理論值C，59.90；H，4.42；N，19.88。實(shí)測值C，60.10；H，4.32；N，19.64。
實(shí)施例11N’-(7-氯-6-(4-甲氧基苯基)-吡啶并〔2，3-d〕-嘧啶-2-基)-N，N-二甲基-甲脒冷卻下向67.0g實(shí)施例10的2-氨基-6-(4-甲氧基-苯基)吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-醇、1L二氯甲烷和135mL二甲基甲酰胺的混合物中滴加72mL溫度保持在15℃以下的亞硫酰氯。攪拌下將懸液加熱回流6小時(shí)。過濾反應(yīng)混合物并在保持溫度低于60℃的真空條件下蒸發(fā)濾液。將所得殘留物溶解在冰水中并加入帶冰的氫氧化鈉水溶液。使產(chǎn)物溶解于氯仿，用水洗，在無水碳酸鉀上干燥并蒸發(fā)。用乙腈將殘留物制成漿液并過濾收集不溶性產(chǎn)物，得到31g標(biāo)題化合物N’-(7-氯-6-(4-甲氧基苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基)-N，N-二甲基-甲脒。產(chǎn)物不經(jīng)進(jìn)一步純化即用于下一步驟。
實(shí)施例122-氨基-7-氯-6-(4-甲氧基苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶將10g實(shí)施例11中得到的N’-(7-氯-6-(4-甲氧基苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基)-N，N-二甲基甲脒和500mL95％乙醇的混合物回流3小時(shí)。在真空中濃縮溶液并過濾收集沉淀物。從乙醇中結(jié)晶后得到2.7g標(biāo)題化合物2-氨基-7-氯-6-(4-甲氧基苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶，mp.275-280℃(分解)。C14H11N4ClO的元素分析理論值C，58.64；H，3.87；N，19.54。實(shí)測值C，58.70；H，3.94；N，19.51。
實(shí)施例136-(4-甲氧基苯基)-N7-甲基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺在氣流浴上的高壓氣體貯罐中，將3.4g 2-氨基-7-氯-6-(4-甲氧基苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自實(shí)施例12)、10mL無水甲胺和10mL甲醇的混合物加熱4小時(shí)。冷卻后，用50mL甲醇/水(50∶50)將懸液洗出高壓氣體貯罐，并在真空下蒸發(fā)溶劑。固體殘留物加50mL水制成漿液，過濾并從甲醇中結(jié)晶得到2.2g標(biāo)題化合物6-(4-甲氧基苯基)-N7-甲基-吡啶并〔2，3-d〕嘧淀-2，7-二胺，mp.270-275℃(分解)。C15H15N5O的元素分析理論值C，64.03；H，5.37；N，24.90。實(shí)測值C，63.82；H，5.17；N，24.94。
實(shí)施例142，4-二氨基-5-氰基吡啶在氫氣環(huán)境下，于Parr裝置中振盛21.3g 6-溴-2，4-二氨基-5-氰基吡啶(JACS，802838-2840(1958))和1g 20％鈀/活性碳在250mL四氫呋喃中形成的懸液。2小時(shí)后，停止反應(yīng)并加入10g乙酸鉀和50mL甲醇。向反應(yīng)混合物中再次充入氫氣并振盛18小時(shí)。減壓下除去溶劑并從異丙醇中結(jié)晶出殘留物，得到標(biāo)題化合物2，4-二氨基-5-氰基吡啶，mp.201-202℃。C6H6N4的元素分析理論值C，53.73；H，4.51；N，41.78。實(shí)測值C，53，69；H，4.18；N，41.40。
實(shí)施例152，4-二氨基煙堿醛在氮?dú)猸h(huán)境下，于Parr裝置中振盛13.4g 2，4-二氨基-5-氰基吡啶(實(shí)施例14)、2g阮氏鎳催化劑、40mL 97-100％甲酸和80mL水的懸液、直到消耗一定量的氫。減壓下除去溶劑并用17mL濃HCl處理殘留物。將所得粉色固體物在小量水中制成漿液，過濾，用異丙醇再用二乙醚洗，并干燥。從甲醇中結(jié)晶得到6.5g標(biāo)題化合物2，4-二氨基煙堿醛。C6H8N3ClO的元素分析理論值C，41.52；H，4.65；N，24.21。實(shí)測值C，41.47；H，4.63；N，24.05。
實(shí)施例163-鄰甲苯基-〔1，6〕1，5-二氮雜萘-2，7-二胺向溶于50mL 2-乙氧基乙醇的0.55g鈉的溶液中加入2.3g 2-甲基苯基乙腈和3.0g 2，4-二氨基煙堿醛(得自實(shí)施例15)。將反應(yīng)混合物加熱回流6小時(shí)。過濾除去不溶性鹽并用2-乙氧基乙醇洗。用活性碳處理濾液，過濾并蒸發(fā)至干。在florosil上層析(用溶于氯仿的0-8％甲醇梯度洗脫)純化殘留物，得到0.7g標(biāo)題化合物3-鄰甲苯基-〔1，6〕二氮雜萘-2，7-二胺，mp.200-201.5℃(分解)。C15H14N4的元素分析理論值C，72.03；H，5.63；N，22.38。實(shí)測值C，71.79；H，5.45；N，22.18。
實(shí)施例173-(2-氯苯基)-〔1，6〕二氮雜萘-2，7-二胺用2-氯苯基乙腈代替2-甲基苯基乙腈，按實(shí)施例16的方法制備3-(2-氯苯基)-〔1，6〕二氮雜萘-2，7-二胺，mp.175℃(MS)。
實(shí)施例183-(2，6-二氯苯基)-〔1，6〕-二氮雜萘-2，7-二胺用2，6-二氯苯基乙腈代替2-甲基苯基乙腈，按實(shí)施例16的方法制備3-(2，6-二氯苯基)-〔1，6〕-二氮雜萘-2，7-二胺，mp.235-237℃(分解)。C14H10N4Cl2的元素分析理論值C，55.10；H，3.30；N，18.36；Cl，23.24。實(shí)測值C，54.87；H，3.21；N，18.45；Cl，23.04。
實(shí)施例19N2，N7-二甲基-6-苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺在高壓氣體貯罐中將45g 6-苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(美國專利No.3,534,039)的二氨基磺酸鹽和500g甲胺的混合物于205-210℃加熱10小時(shí)。用甲醇洗高壓氣體貯罐，并與反應(yīng)混合物合并。將混合物加熱至沸，過濾并用200mL水稀釋。真空除去濾液并將殘留物在冰-水中制成漿液。過濾不溶性材料并用冷水洗。將固體物溶解在氯仿中，過濾除去雜質(zhì)，并用水洗幾次。干燥(碳酸鉀)有機(jī)層并蒸發(fā)之。產(chǎn)物從異丙醇中結(jié)晶后得到15g標(biāo)題化合物N2，N7-二甲基-6-苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺，mp.204-205℃。C15H15N5的元素分析理論值C，67.90；H，5.70；N，26.90。實(shí)測值C，67.89；H，5.62；n，26.66。
實(shí)施例207-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d 〕嘧啶攪拌下將2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(3.0g)(得自實(shí)施例1)、氨基磺酸(2g)和3-(二乙氨基)丙胺(30mL)的混合物加熱回流18小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻到室溫并倒入冰-水(500mL)中。過濾不溶性產(chǎn)物，用水洗，在溫異丙醚中制成漿液并過濾得到白色固體物。從乙酸乙酯中結(jié)晶得到1.5g 7-氨基-6-(2，6-二氯苯基-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶，mp.220-230℃。
實(shí)施例21
1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲向溶于DMF(5mL)的7-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(0.48g)(得自實(shí)施例10)的溶液中加入60％氫化鈉懸液(46mg)，并在室溫下將混合物攪拌1小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入異氰酸正丁酯(0.113g)并將混合物攪拌18小時(shí)。用水稀釋反應(yīng)混合物并過濾收集不溶性材料。將固體物懸浮于水(20mL)中并用1.0N HCl酸化形成溶液。向溶液內(nèi)加入活性碳，通過硅藻土過濾懸液并用水洗。用1.0N NaOH將濾液制成堿性，過濾收集不溶性產(chǎn)物并用水洗。進(jìn)一步在C18反相柱上經(jīng)反相制備性HPLC純化產(chǎn)物，其中使用從加在水/14％乙腈中的86％的0.1％三氟乙酸到加在水/86％乙腈中的14％的0.1％三氟乙酸，于22分鐘時(shí)間內(nèi)進(jìn)行梯度洗脫，得到165mg 1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕脲，mp.＞80℃(分解)。
C25H33N7O1Cl2·0.22CF3CO2H的元素分析理論值C，56.21；H，6.16；N，18.04。
實(shí)測值C，56.13；H，6.02；N，18.14。
實(shí)施例221-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙基脲按照實(shí)施例2的一般方法使2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕-嘧啶與異氰酸乙酯反應(yīng)。經(jīng)經(jīng)向?qū)游黾兓之a(chǎn)物，其中用70％乙酸乙酯/30％氯仿到100％氯仿的梯度洗脫后得到標(biāo)題化合物，即1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙脲，mp.185-187℃。
C16H14N6O1Cl2·0.15EtOAc的元素分析理論值C，51.07；H，3.92；N，21.52。
實(shí)測值C，50.74；H，3.75；N，21.50。
實(shí)施例23
1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-(3-嗎啉-4-基-丙基)-硫脲按照實(shí)施例21的通用方法，使2，7-二氨基-6-(2，6-二甲苯基)-吡啶并〔2，3-d〕-嘧啶與3-嗎啉代丙基異硫氰酸酯反應(yīng)。以經(jīng)向?qū)游龇兓之a(chǎn)物，用溶于二氯甲烷的2-8％甲醇梯度洗脫后得到1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-(3-嗎啉-4-基-丙基)-硫脲，mp.178-181℃(分解)。
C21H23N7O1Cl2的元素分析理論值C，51.22；H，4.71；N，79.91。
實(shí)測值C，50.95；H，4.63；N，19.74。
實(shí)施例242-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-氨基-4，5-二氫-噁唑向溶于DMF(50mL)中的2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(5.0g)(得自實(shí)施例1)的懸液內(nèi)分幾次加入0.65g NaH(60％)。將混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，然后加入2-氯代乙基異氰酸酯(1.72g)，再次將混合物室溫?cái)嚢?8小時(shí)。用100mL水稀釋反應(yīng)混合物，過濾得到不溶性粗產(chǎn)物。經(jīng)步驟層析純化粗產(chǎn)物，用溶于二氯甲烷的2-3％甲醇梯度洗脫后得到1.0g白色固體物。從氯仿-乙酸乙酯中重結(jié)晶進(jìn)一步純化該固體物，得到標(biāo)題化合物2-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-氨基-4，5-二氫-噁唑。進(jìn)一步分析反應(yīng)混合物也顯示存在1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-咪唑啉-2-酮，MS(FAB)。
C16H13N6O1Cl2·0.12CHCl3·0.04H2O的元素分析理論值C，51.22；H，4.71；N，19.91；實(shí)測值C，50.95；H，4.63；N，19.74。
實(shí)施例251-丁基-3-〔7-(3-丁基-脲基)-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕-脲將0.5g 2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自實(shí)施例1)和15mL異氰酸正丁酯的混合物回流2小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻到室溫并濾出不溶性材料。固體物從乙醇中重結(jié)晶幾次后得到標(biāo)題化合物；mp.200-202℃。
C23H27Cl12N7O2·0.35H2O的元素分析理論值C，54.09；H，5.47；N，19.20；實(shí)測值C，54.09；H，5.27；N，19.14。
實(shí)施例261-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-丙基脲使1.0g 2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自實(shí)施例1)和0.339g異氰酸正丙酯反應(yīng)，按實(shí)施例2中所述方法制備標(biāo)題化合物。用10-100％乙酸乙酯/己烷梯度洗脫，經(jīng)經(jīng)向?qū)游黾兓a(chǎn)物。MS(Cl)。
C17H16Cl2N6O1·0.43H2O的元素分析理論值C，51.17；H，4.26；N，21.06；實(shí)測值C，51.15；H，3.90；N，20.80。
實(shí)施例277-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二甲氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶按照實(shí)施例20中所述方法，由3.0g 2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自實(shí)施例1)與60mL 3-(二甲氨基)丙胺反應(yīng)，制備并得到標(biāo)題化合物。
實(shí)施例281-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二甲氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲按照實(shí)施例21的方法，由1.62g 7-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二甲氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自實(shí)施例27)與0.48g異氰酸異丁酯反應(yīng)，制得標(biāo)題化合物，熔點(diǎn)＞130℃(逐漸分解)。
C23H29C12N7O1·1.45H2O的元素分析理論值C，53，48；H，6.22；N，18.98；實(shí)測值C，53.50； H，5.84；N，18.73。
實(shí)施例297-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二甲基氨基-2，2-二甲基-丙基氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶按照實(shí)施例20中所述，使2.0g 2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自實(shí)施例1)與16mL N，N，2，2-四甲基-1，3-丙二胺反應(yīng)，以制得標(biāo)題化合物。
實(shí)施例301-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-( 3-二甲氨基-2，2-二甲基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲按照實(shí)施例21的方法，使7-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二甲氨基-2，2-二甲基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自實(shí)施例29)與0.26g異氰酸叔丁酯反應(yīng)，得到標(biāo)題化合物；mp.161-170℃。
C25H33Cl2N7O1·0.74H2O的元素分析理論值C，56.46；H，6.54；N，18.44；實(shí)測值C，56.47；H，6.24；N，18.41。
實(shí)施例317-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-(2-甲基吡啶)-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶按照實(shí)施例20中所述的方法，從2.0g 2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自實(shí)施例1)和15mL1-(3-氨基丙基)-2-甲基吡啶開始制備并得到標(biāo)題化合物。
實(shí)施例321-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(2-甲基-哌啶-1-基)-丙基氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲按照實(shí)施例21的方法，使1.54g 7-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-(2-甲基吡啶)-丙基氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自實(shí)施例31)與0.377g異氰酸叔丁酯反應(yīng)，得到標(biāo)題化合物。
C27H35Cl2N7O1的元素分析理論值C，59.56；H，6.48；N，18.01；實(shí)測值C，59.71；H，6.53；N，17.62。
實(shí)施例337-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶按照實(shí)施例20的方法，使2.0g 2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自實(shí)施例1)與15mL 1-(4-氨基丁基)-4-甲基-哌嗪反應(yīng)，得到標(biāo)題化合物。
實(shí)施例341-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔4-(4-甲基-哌嗪-1-1基)-丁氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲按照實(shí)施例21的方法，使1.07g 7-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-(4-甲基哌嗪)-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自上述實(shí)施例33)與0.253g異氰酸叔丁酯反應(yīng)，得到標(biāo)題化合物。
ESMS m/z(相對強(qiáng)度)559(M+，100)C27H36Cl2N8O1·0.6H2O的元素分析理論值C，56.86；H，6.57；N，19.65；實(shí)測值C，56.87；H，6.31；N，19.57。
實(shí)施例356-(2，6-二氯苯基)-N7-(5，6-二氫-4H-〔1，3〕噁嗪-2-基)-N2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺向1.0g 6-(2，6-二氯苯基)-N2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〔2，3-d〕-嘧啶-2，7-二胺(得自實(shí)施例36)在10mL二甲基甲酰胺中形成的溶液內(nèi)加入氫化鈉(在油中60％，0.094mg)，并將混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)。向該反應(yīng)混合物中加入0.268g3-氯丙基異氰酸酯，并將混合物室溫?cái)嚢?8小時(shí)。用水稀釋此反應(yīng)混合物并用乙酸乙酯提取兩次。干燥(MgSO4)、過濾并蒸發(fā)合并的有機(jī)層。用乙酸乙酯/甲醇/三乙胺(89∶10∶1v/v/v)洗脫，經(jīng)經(jīng)向?qū)游黾兓之a(chǎn)物后得到標(biāo)題化合物。
ESMSm/z(相對強(qiáng)度)529.4(M+，100)實(shí)施例36N2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺將2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(3.0g)(得自實(shí)施例1)、氨磺酸1.9g)和1-(3-氨基丙基)-4-甲基哌嗪(15mL)的混合物于大約150℃加熱24小時(shí)。冷卻后將殘留物溶解在水中。用飽和碳酸氫鈉溶液使該水溶液成為堿性并用二氯甲烷提取幾次。合并二氯甲烷層，在硫酸鎂上方干燥并真空濃縮。從乙酸乙酯中重結(jié)晶殘留物后得到2.0g 6-(2，6-二氯苯基)-N2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺，CIMS(加在CH4中的1％NH3)474＝M++C2H5，446＝M+H(Base)；mp.208-211℃。
C22H25N7Cl2·0.25H2O的元素分析理論值C，55.94；H，5.70；N，21.75；實(shí)測值C，55.85；H，5.55；N，21.65。
實(shí)施例371-環(huán)己基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲向溶于DMF(15mL)的6-(2，6-二氯苯基)-N2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(1.0g)(得自實(shí)施例36)的溶液中加入1當(dāng)量的60％氫化鈉懸液(0.90g)。室溫下攪拌約1小時(shí)后加入1當(dāng)量的異氰酸環(huán)己酯(0.19g)，并以薄層層析法監(jiān)測反應(yīng)。約24小時(shí)之后，真空除去溶劑。將殘留物溶解于乙酸乙酯中，并先用水然后用飽和氯化鈉溶液將該溶液洗幾次。用硫酸鎂干燥并在真空中蒸發(fā)濃縮乙酸乙酯層。使用乙酸乙酯/甲醇/三乙胺(9∶2∶1v/v/v)洗脫，在硅凝膠上層析純化殘留物后得到0.75g 1-環(huán)己基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡淀并〔2，3-d〕嘧定-7-基}-脲，ESMS(20/80MeOH/CH3CN+0.1％AcOH)M++H＝571；mp.101-106.5℃。
C28H36N8Cl2O·0.50H2O的元素分析；理論值C，57.93；H，6.42；N，19.30；Cl，12.21；H2O，1.55。
實(shí)測值C，58.06；H，6.32；N，18.91；Cl，12.11；H2O，1.68。
實(shí)施例381-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-異丙基脲按照實(shí)施例37的通用方法，使6-(2，6-二氯苯基)-N2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(1.09g)(得自實(shí)施例36)與0.19g異氰酸異丙酯反應(yīng)8小時(shí)，得到l-{6-(2，6二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-異丙基脲，MS(ES+20/80 MeOH/CH3CN+0.1％AcOH)M++H＝531；mp.94-98℃。
C25H32N8Cl2O·0.75H2O/0.10 EtOAc的元素分析理論值C，55.09；H，6.24；N，20.23；Cl，12.80；H2O，2.44。
實(shí)測值C，55.14；H，6.19；N，20.03；Cl，13.17；H2O，2.14。
實(shí)施例391-芐基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲按照實(shí)施例37的通用方法使6-(2，6-二氯苯基)-N2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(1.08g)與0.298g異氰酸芐酯反應(yīng)，得到0.822g 1-芐基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲，ESMS(20/80 MeOH/CH3CN+0.1％AcOH)M++H＝579；mp.144-148.5℃。
C29H32N8Cl2O·0.10H2O·0.10Et2O的元素分析理論值C，59，98；H，5.68；N，19.03；Cl，12.04；H2O，0.31。
實(shí)測值C，59.60；H，5.63；N，18.87；Cl，12.25；H2O，0.49。
實(shí)施例401-烯丙基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-1-基}-脲使6-(2，6-二氯苯基)-N2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自實(shí)施例36)按照實(shí)施例37的一般方法與0.186g異氰酸烯丙酯反應(yīng)。產(chǎn)物經(jīng)層析純化并從乙酸乙酯中結(jié)晶后得到0.31g 1-烯丙基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲，ESMS(20/80MeOH/CH3CN+0.1％AcOH)M++H＝529(Base)，472，446；mp.104-108℃。
C25H30N8Cl2O·1.00H2O的元素分析理論值 C，54.85；H，5.89；N，20.47；Cl，12.95；H2O，3.29。
實(shí)測值，55.08；H，5.68；N，20.33；Cl，12.65；H2O，3.60。
實(shí)施例411-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-(4-甲氧基-苯基)-脲按照實(shí)施例37的一般方法，使6-(2，6-二氯苯基)-N2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(1.0g)(得自實(shí)施例36)與4-甲氧基苯基異氰酸酯(0.334)反應(yīng)，得到1.16g 1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-(4-甲氧基-苯基)-脲，ESMS(20/80MeOH/CH3CM+0.1％AcOH)M++H＝595；mp.93.5-100.5℃。
C29H32N8Cl2O2·0.40H2O·0.10EtOAc的元素分析理論值C，57.74；H，5.54；N，18.32；Cl，11.59；H2O，1.18。
實(shí)測值C，58.04；H，5.51；N，18.15；Cl，11.25；H2O，1.38。
實(shí)施例421-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-(3-甲氧基-苯基)-脲按照實(shí)施例37的一般方法，使6-(2，6-二氯苯基)-N2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(1.0g)(得自實(shí)施例36)與0.334g 3-甲氧基苯基異氰酸酯反應(yīng)，得到0.920g 1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-(3-甲氧基苯基)-脲，ESMS(20/80MeOH/CH3CN+0.1％AcOH)M++H＝595；mp.87.5-92.5℃。
C29H32N8Cl2O2·0.50H2O的元素分析理論值C，57.62；H，5.50；N，18.54；Cl，11.73；H2O，1.49。
實(shí)測值C，57.93；H，5.62；N，18.47；Cl，11.66；H2O，1.10。
實(shí)施例431-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-(2-甲氧基-苯基)-脲按照實(shí)施例37的一般方法，使6-(2，6-二氯苯基)-N2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(1.0g)(得自實(shí)施例36)與0.334g 2-甲氧基異氰酸酯反應(yīng)，得到0.9232g 1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-(2-甲氧基-苯基)-脲，ESMS(20/80MeOH/CH3CN+0.1％AcOH)M++H＝595；mp.152.5-154℃。
C29H32N8Cl2O2的元素分析理論值C，58.49；H，5.42；N，18.82；Cl，11.91。
實(shí)測值C，58.42；H，5.56；N，18.59；Cl，11.82。
實(shí)施例441-(4-溴-苯基)-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕-嘧啶-7-基}-脲按照實(shí)施例37的一般方法，使6-(2，6-二氯苯基)-N2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(1.0g)(得自實(shí)施例36)與0.344g 4-氯苯基異氰酸酯反應(yīng)，得到0.8424g 1-(4-氯-苯基)-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲，ESMS(20/80MeOH/CH3CN+0.1％AcOH+DMSO)M++H＝645；mp171-175℃。
C28H29N8Cl2OBr的元素分析理論值C，52.19；H，4.54；N，17.39；Cl，11.00；Br，12.40。
實(shí)測值C，51.93；H，4.71；N，17.14；Cl，10.81；Br，12.18實(shí)施例451-(4-氯-苯基)-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕-嘧啶-7-基}-腺按實(shí)施例37的一般方法，將實(shí)施例36的6-(2，6-二氯苯基)-N2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(1.0g)與0.344g異氰酸4-氯苯酯反應(yīng)得到0.842g 1-(4-氯-苯基)-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲，ESMS(20/80 MeOH/CH3CN+0.1％AcOH+DMSO)M+H+＝601；mp.175.5-181℃。
C28H29N8Cl3O的元素分析理論值C，56.06；H，4.87；N，18.68；Cl，17.73。
實(shí)測值C，56.11；H，5.14；N，18.47；Cl，17.67。
實(shí)施例461-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-對甲苯基-脲按照實(shí)施例37的一般方法，使6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自實(shí)施例36)與0.29g 4-甲苯基異氰酸酯反應(yīng)，得到0.9492g標(biāo)題化合物。ESMS(20/80MeOH/CH3CN+0.1％AcOH)M++H＝579；C29H32N8Cl2O·0.30H2O+0.20EtOAc的元素分析理論值C，59.40；H，5.72；N，18.60；Cl，11.77；H2O，0.90。
實(shí)測值C，59.69；H，5.61；N，18.41；Cl，11.50；H2O，1.30。
實(shí)施例471-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-辛基-脲按照實(shí)施例21的一般方法使6-(2，6-二氯苯基)-N2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自實(shí)施例36)與0.348g異氰酸辛酯反應(yīng)。層析純化所得產(chǎn)物，先用乙酸乙酯/甲醇/三乙胺(90∶10∶1)，然后轉(zhuǎn)換成乙酸乙酯/乙醇/三乙胺(9∶2∶1)進(jìn)行洗脫，得到1.011g標(biāo)題化合物1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-辛基-脲，ESMS(20/80 MeOH/CH3CN+0.1AcOH)M++H＝601mp.54.5-57.5℃。
C30H42N8Cl2O·0.75H2O的元素分析理論值C，58.58；H，7.13；N，18.22；Cl，11.53；H2O，2.20。
實(shí)測值C，58.51；H，7.13；N，18.13；Cl，11.55；H2O，2.32。
實(shí)施例481-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-(4-三氟甲基-苯基)-脲按照實(shí)施例37的一般方法，使6-(2，6-二氯苯基)-N2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自實(shí)施例36)與異氰酸三氟對甲苯酯反應(yīng)。層析純化產(chǎn)物，先用乙酸乙酯/甲醇/三乙胺(90∶10∶1)然后轉(zhuǎn)換成乙酸乙酯/乙醇/三乙胺(9∶2∶1)進(jìn)行洗脫，得到0.8650g標(biāo)題化合物1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-(4-三氟甲基-苯基)-脲，ESMS(20/80 MeOH/CH3CN+0.1％AcOH)M++H＝633；mp.145.5-151℃。
C29H29N8Cl2F3O·0.50H2O的元素分析理論值C，54.21；H，4.71；N，117.44；Cl，11.04；F，8.87；H2O，1.40。
實(shí)測值C，54.39；H，4.59；N，17.28；Cl，11.00；F，9.17；H2O，1.61。
實(shí)施例491-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-乙基-腺按照實(shí)施例37的一般方法，使6-(2，6-二氯苯基)-N2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(1.0g)(得自實(shí)施例36)與0.159g異氰酸乙酯反應(yīng)，得到0.86g 1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-乙基脲，MS(ES+20/80 MeOH/CH3CN+0.1％AcOH)M++H＝517；mp.82-90℃。
C24H30N8Cl2O·1.00H2O的元素分析理論值C，53.83；H，6.02；N，20.93；Cl，13.24；H2O，3.26。
實(shí)測值C，53，94；H，6.07；N，20.53；Cl，13.14；H2O，3.28。
實(shí)施列501-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-萘-1-基-腺按照實(shí)施例37的一般方法，使6-(2，6-二氯苯基)-N2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(1.0g)(得自實(shí)施例36)與0.378g 1-萘基異氰酸酯反應(yīng)。層析純化反應(yīng)產(chǎn)物先用乙酸乙酯/甲醇/三乙胺(90∶10∶1)然后轉(zhuǎn)換為乙酸乙酯/乙醇/三乙胺(9∶2∶1)洗脫，得到0.97g標(biāo)題化合物1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-萘-1-基脲，ESMS(20/80MeOH/CH3CN+0.1％AcOH)M++H＝615(Base)，446；mp.186.5-189℃。
C32H32N8Cl2O·0.10H2O的元素分析理論值C，62.26；H，5.26；N，18.15；Cl，11.49；H2O，0.29。
實(shí)測值C，62.25；H，5.26；N，18.38；Cl，11.39；H2O，0.51。
實(shí)施例511-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-苯基-脲按照實(shí)施例37的一般方法，使溶于DMF(10mL)中的得自實(shí)施例36的6-(2，6-二氯苯基)-N2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(13.0g)與60％氫化鈉懸浮液(1.16g)和異氰酸苯酯(3.47g)反應(yīng)。從乙酸乙酯中重結(jié)晶出經(jīng)過層析的產(chǎn)物，得到10.78g標(biāo)題化合物1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-苯基-脲，ESMS(20/80MeOH/CH3CN+0.1％AcOHM++H＝565。
C28H30N8Cl2O·0.30H2O·0.20EtOAc的元素分析理論值C，58.78；H，5.51；N，19.04；Cl，12.05；H2O，0.92。
實(shí)測值C，58.72；H，5.55；N，18.84；Cl，11.98；H2O，1.01。
實(shí)施例521-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲按照實(shí)施例21的一般方法，使得自實(shí)施例36的6-(2，6-二氯苯基)-N2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺與0.22g異氰酸叔丁酯反應(yīng)1.5小時(shí)，得到0.85g標(biāo)題化合物1-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲，CIMS(加在CH4中的1％NH3)545＝M++H，544＝M+，446，84(Base)；mp.97.5℃(分解)，熔融106-109℃。
C26H34N8Cl2O的元素分析理論值C，57.25； H，6.28；N，20.25。
實(shí)測值C，56，91；H，6.31；N，20.30。
實(shí)施例536-(2，6-二氯苯基)-N2-(4-二乙氧基-丁基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺將2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(40g，得自實(shí)施例1)、氨磺酸(25.4g)和二乙氨基丁胺(205mL)的混合物于150℃加熱28小時(shí)。將反應(yīng)溫度降至50℃，并在真空中除去過量的二乙氨基丁胺。冷卻至25℃后將殘留物懸浮于水中。用飽和碳酸氫鈉溶液將此水溶液調(diào)成堿性并用二氯甲烷提到幾次。合并二氯甲烷層，先用飽和碳酸氫鈉溶液，再用飽和氯化鈉溶液洗幾次，在硫酸鎂上方干燥并在真空中濃縮。反復(fù)用二乙醚洗殘留物，然后從乙酸乙酯中結(jié)晶之。經(jīng)柱層析進(jìn)一步純化重結(jié)晶的產(chǎn)物，先用乙酸乙酯/甲醇/三乙胺(85∶14∶1)，然后用乙酸乙酯/乙醇/三乙胺(9∶2∶1)洗脫得到36.2g標(biāo)題化合物6-(2，6-二氯苯基)-N2-(4-二乙氨基-丁基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺，CIMS(溶于CH4的1％N3)461＝M++C2H5，433＝M++H(Base)，417，403，360。
C21H26N6Cl2的元素分析理論值C，58.20；H，6.05；N，19.39；Cl，16.36。
實(shí)測值C，58.11；H，6.21；N，19.09；Cl，16.55。
實(shí)施例541-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-苯基-脲向溶于DMF(15mL)的6-(2，6-二氯苯基)-N2-(4-二乙氨基-丁基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自實(shí)施例53)的溶液中加入1當(dāng)量的60％氫化鈉懸液(0.93g)。室溫?cái)嚢杓s1小時(shí)后加入1當(dāng)量的異氰酸苯酯(0.275g)，并用薄層層析法監(jiān)測反應(yīng)情況。約24小時(shí)后真空除去溶劑。將殘留物溶解于乙酸乙酯中，先用水再用飽和氯化鈉溶液將該溶液洗幾次。用硫酸鎂干燥乙酸乙酯層并真空濃縮。在硅凝膠上層析殘留物，先用乙酸乙酯/甲醇/三乙胺(90∶10∶1)，然后用乙酸乙酯/乙醇/三乙胺(9∶2∶1)洗脫得到0.8461g標(biāo)題化合物1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-苯基-脲，ESMS(20/80 MeOH/CH3CN+0.1％AcOH)M++H＝552(Base)，433；mp.81-87.5℃。
C28H31N7Cl2O·0.25H2O的元素分析理論值C，60.38；H，5.70；N，17.60；Cl，12.73；H2O，0.81。
實(shí)測值C，60.24；H，5.61；N，17.42；Cl，12.61；H2O，0.54。
實(shí)施例551-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙基-脲按照實(shí)施例54的一般方法，使溶于DMF(75mL)的6-(2，6-二氯苯基)-N2-(4-二乙氨基-丁基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(5.0g，得自實(shí)施例53)與60％氫化鈉懸液(0.461g)和異氰酸乙酯(0.820g)反應(yīng)。層析并用乙酸乙酯/乙醇/三乙胺(9∶2∶1)洗脫得到4.26g標(biāo)題化合物1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙基-脲，ESMS(20/80 MeOH/CH3CN+0.1％AcOH)M++H＝504(Base)，433。
實(shí)施例561-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙基-脲，鹽酸鹽向得自實(shí)施例55的1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙基-脲(3.253g)的水溶液中加入1當(dāng)量1N鹽酸(6.44mL)。室溫下攪拌溶液直到固體物溶解，過濾并冷凍。凍干后得到3.63g1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙基-脲，ESMS(20/80 MeOH/CH3CN+1％AcOH)M++H＝504；mp.(分解)＞50℃。
C24H31N7Cl2O·1.10HCl·2.20H2的元素分析理論值C，49.34；H，6.30；N，16.78；Cl總，18.81；Cl離子，6.67；H2O，6.78。
實(shí)測值C，49.61；H，6.21；N，16.75；Cl總，18.70；Cl離子，6.68；水，6.88。
實(shí)施例571-環(huán)己基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕脲按照實(shí)施例54的一般方法，使溶于DMF(15mL)的實(shí)施例53的6-(2，6-二氯苯基)-N2-(4-二乙氨基-丁基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(1.0g)與60％氫化鈉懸液(0.092g)和異氰酸環(huán)己酯(0.289g)反應(yīng)，產(chǎn)生0.927g標(biāo)題化合物，ESMS(20/80 MeOH/CH3CN+0.1％AcOH)M++H＝558，433。
C28H37N7Cl2O·0.10H2O的元素分析理論值C，60.02；H，6.69；N，17.50；Cl，12.65；H2O，0.32。
實(shí)測值C，59.75；H，6.69；N，17.41；Cl，12.71；H2O，0.40。
實(shí)施例586-(2，6-二氯苯基)-N2-(3-嗎啉-4-基-丙基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺。
使2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(4.00g，得自實(shí)施例1)、氨磺酸(2.53g) 和氨丙基嗎啉(30mL)的混合物發(fā)生反應(yīng)。在這種情況下，用熱乙酸乙酯，然后再用二乙醚治粗殘留物，以得到3.95g標(biāo)題化合物6-(2，6-二氯苯基)-N2-(3-嗎啉-4-基-丙基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺，CIMS(溶于CH4的1％NH3)461＝M++C2H5，433＝M++H(Base)，346，332；mp.224-230.5℃。
C20H22N6Cl2O的元素分析理論值C，55.43；H，5.12；N，19.39。
實(shí)測值C，55.12；H，5.12；N，19.14。
實(shí)施例591-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-嗎啉-4-基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲向溶于DMF(15mL)的6-(2，6-二氯苯基)-N2-(3-嗎啉-4-基-丙基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(1.0g，得自實(shí)施例58)的溶液中加入1當(dāng)量的60％氫化鈉懸液(0.92g)。室溫下攪拌約1小時(shí)后加入1當(dāng)量異氰酸叔丁酯(0.230g)，并以薄層層析法監(jiān)測反應(yīng)。約4小時(shí)后，真空下除去溶劑。使殘留物分配于乙酸乙酯和水之間。用乙酸乙酯將含水層洗幾次。合并乙酸乙酯層，用硫酸鎂干燥并真空濃縮。在硅凝膠上層析純化殘留物，使用乙酸乙酯再用乙酸-乙酯/乙醇/三乙胺(18∶2∶1)洗脫得到0.98g標(biāo)題化合物1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-嗎啉-4-基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲，CIMS(溶于CH4的1％NH3)532＝M++H，531＝M+，433，84(Base)；mp.236-240℃。
C25H31N7Cl2O2·0.25EtOAc的元素分析理論值C，56.32；H，6.00；N，17.68。
實(shí)測值C，56.48；H，6.06；N，17.63。
實(shí)施例606-(2，6-二溴-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺向溶于11.0mL 2-乙氧基乙醇中的0.23g 60％氫化鈉懸液的溶液內(nèi)加入4.18g 2，6-二溴苯基乙腈和2.00g 2，4-二氨基嘧啶-5-羧醛。將反應(yīng)混合物回流4小時(shí)，冷卻，并倒入冰水中。先用乙腈，再用乙酸乙酯充分洗殘物，得到3.62g 6-(2，6-二溴苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺，CIMS(加于CH4中的1％NH3)422＝M++C2H5，396(Base)，394M++H，393＝M+；mp.284-289℃。
C13H9N5Br2的元素分析理論值C，39.52；H，2.30；N，17.73。
實(shí)測值C，39.20；H，2.27；N，17.77。
實(shí)施例616-(2，6-二溴-苯基)-N2-(3-二乙氨基-丙基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺使得自實(shí)施例60的6-(2，6-二溴-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(1.0g)、氨磺酸(0.49g)和二乙氨基丙胺(8.0ml)的混合物反應(yīng)5小時(shí)，并按實(shí)施例53中所述方法處理得到0.79g標(biāo)題化合物6-(2，6-二溴-苯基)-N2-(3-二乙氨基-丙基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺，CIMS(加于CH4中的1％NH3)507＝M++H，506＝M+，112(Base)；mp.226-230℃。
C20H24N6Br2的元素分析理論值C，47.26；H，4.76；N，16.53。
實(shí)測值C，47.61；H，4.69；N，16.40。
實(shí)施例621-叔丁基-3-〔6-(2，6-二溴-苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲按照實(shí)施例54的一般方法使得自實(shí)施例61的6-(2，6-二溴苯基)-N2-(3-二乙氨基-丙基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(0.34g)與0.066g異氰酸叔丁酯反應(yīng)。用乙酸乙酯/乙醇/三乙胺(9∶2∶1)洗脫，以薄層層析法純化粗產(chǎn)物，然后使用Vydac218TP 1022反相柱進(jìn)行制備性HPLC層析，用0.1％三氟乙酸/水和0.1％二氟乙酸/乙腈梯度洗脫，得到0.214g標(biāo)題化合物，ESMS(20/80MEOH/CH3CN+0.1％AcOH)606＝M++H；mp.(分解)＞45℃。
C25H33N7Br2O·2.50TFA·H2O的元素分析理論值C，39.58；H，4.15；N，10.77。
實(shí)測值C，39.54；H，3.82；N，10.49。
實(shí)施例636-(2，6-二氟-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺按實(shí)施例60中所述方法，使用4.65g 2，6-二氟苯基乙腈制備6-(2，6-二氟-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺，CIMS(加于CH4中的1％NH3)414＝M++C3H5，302＝M++C2H5，274＝M++H(Base)，273＝M+，254＝M+-F；mp.＞300℃。
實(shí)施例646-(2，6-二甲氧基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺按照實(shí)施例60所述的方法，用2，6-二甲氧基苯基乙腈代替2，6-二溴苯基乙腈，反應(yīng)3小時(shí)并從乙醇中結(jié)晶制得6-(2，6-二甲氧基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺，CIMS(加于CH4中的1％NH3)326＝M++C2H5，298＝M++H(Base)，297＝M+，266＝M+-OMe；mp.＞300℃。
C15H15N5O2·0.50H2O的元素分析理論值 C，58.82；H，5.26；N，22.86。
實(shí)測值，58.81；H，5.04；N，22.54。
實(shí)施例656-(2，6-二氯苯基)-N2-(2-二乙氨基-乙基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺將2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(4.0g，得自實(shí)施例1)、氨磺酸(2.53g)和二乙氨基乙胺(40mL)的混合物于大約150℃加熱29小時(shí)。真空下除去過量的二乙氨基乙胺。將所得油狀物溶解于二乙醚中，用水稀釋，然后過濾。將所得固體物溶解于二氯甲烷中，用水洗幾次，用硫酸鎂干燥并真空濃縮。從乙酸乙酯中結(jié)晶殘留物后得到標(biāo)題化合物6-(2，6-二氯苯基)-N2-(2-二乙氨基-乙基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺，CIMS(加在CH4中的1％NH3)433＝M++C2H5，405＝M++H，389＝M+-Et，360；mp.216-219.5℃。
C19H22N6Cl2的元素分析理論值C，56.30；H，5.47；N，20.73。
實(shí)測值C，56.31；H，5.39；N，20.46。
實(shí)施例661-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(2-二乙氨基-乙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲按照實(shí)施例54的一般方法，使溶于DMF(10mL)的6-(2，6-二氯苯基)-N2-(2-二乙氨基-乙基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(1.0g，得自實(shí)施例65)與60％氫化鈉懸液(0.099g)和異氰酸叔丁酯(0.244g)反應(yīng)1小時(shí)。層析純化并用乙酸乙酯/乙醇/三乙胺(18∶2∶1)洗脫得到0.76g標(biāo)題化合物1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(2-二乙氨基-乙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲，CIMS(加于CH4中的1％NH3)504＝M++H，84(Base)；mp.94.5-96.5℃。
C24H31N7Cl2O的元素分析
實(shí)測值C，56.94；H，6.18；N，19.22。
實(shí)施例671-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(2-二乙氨基-乙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙基-脲按照實(shí)施例54的一般方法，以溶于DME(10mL)的6-(2，6-二氯苯基)-N2-(2-二乙氨基-乙基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(1.0g，得自實(shí)施例65)與60％氫化鈉懸液(0.099g)和異氰酸乙酯(0.175g)反應(yīng)，得到0.86g標(biāo)題化合物1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(2-二乙氨基-乙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙基-脲，CIMS(加于CH4中的1％NH3)476＝M++H，86(Base)；mp.86.5-89.5℃。
C22H23N7Cl2O的元素分析理論值C，55.47；H，5.71；N，20.58。
實(shí)測值C，55.18；H，5.74；N.20.20。
實(shí)施例686-(2，6-二氯苯基)-N2-(3-二甲氨基-丙基)-N2-甲基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺將得自實(shí)施例1的2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(4.0g)，與氨磺酸(2.53g)和N，N，N’-三甲基-1，3-丙二胺(20mL)的混合物在高壓氣體貯罐中于165℃加熱16小時(shí)，然后再于225℃加熱16小時(shí)。冷卻后，真空濃縮反應(yīng)混合物。將殘留物分配于稀碳酸氫鈉和二氯甲烷之間。用二氯甲烷將水溶液提取幾次。合并二氯甲烷層，過濾，并真空濃縮。層析純化殘留物，用乙酸乙酯/乙醇/三乙胺(9；3∶1)洗脫得到標(biāo)題化合物6-(2，6-二氯苯基)-N2-(3-二甲氨基-丙基)-N2-甲基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺。
實(shí)施例691-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔(3-二甲氨基-丙基)-甲基-氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲按照實(shí)施例54的一般方法，由溶于DMF(7.0mL)的6-(2，6-二氯苯基)-N2-(3-二甲氨基-丙基)-N2-甲基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(0.38g，得自實(shí)施例68)與60％氫化鈉懸液(0.022g)和異氰酸叔丁酯(0.093g)反應(yīng)，得到0.25g標(biāo)題化合物1-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔(3-二甲氨基-丙基)-甲基-氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲，CIMS(加于CH4中的1％NH3)504＝M++H，84(Base)；mp.(分解)76℃，然后(熔融)87.5-91℃。
C24H31N7Cl2O·0.25H2O的元素分析理論值C，56.64；H，6.24；N，19.26。
實(shí)測值C，56.55；H，6.07；N，18.94。
實(shí)施例702-({3-〔7-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-苯基〕-丙基}-乙基-氨基)-乙醇按照實(shí)施例36的一般方法，使2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(3.0g，得自實(shí)施例1)、氨磺酸(1.9g)和N’-乙基-N’-(2-羧乙基)-丙二胺(10.0g)(J.Med.Chem.，11(3)583-591(1968))的混合物反應(yīng)18小時(shí)。在這種情況下，使用乙酸乙酯/乙醇/三乙胺(9；3；1)洗脫，層析純化殘留物，得到2.71g標(biāo)題化合物2-({3-〔7-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基氨基〕-丙基}-乙基-氨基)-乙醇，CIMS(加于CH4中的1％NH3)463＝M++C2H5，435＝M++H，346(Base)mp.201-204℃。
C20H24N6Cl2O的元素分析理論值C，55.18；H，5.56；N，19.30。
實(shí)測值C，55.11；H，5.53；N，19.09。
實(shí)施例714-氨基-2-苯氨基-嘧啶-5-腈將溶于四氫呋喃(40.0mL)和二異丙基乙胺(4.60g)中的苯胺(3.31g)溶液加到4-氨基-2-氯代嘧啶-5-腈(5.00g)在四氫呋喃(50.0mL)中制成的溶液內(nèi)。加熱回流反應(yīng)混合物。3天后，向反應(yīng)中加入另一份苯胺(6.02g)和二異丙基乙胺(8.36g)。24小時(shí)后，真空濃縮反應(yīng)混合物，并使殘留物分配于乙酸乙酯和水之間。用水洗乙酸乙酯層，然后通過玻璃纖維濾器過濾以分散原存在的乳液。用水再用飽和氯化鈉洗濾液用硫酸鎂干燥并真空濃縮。用二乙醚洗殘留物得到6.00g標(biāo)題化合物，CIMS(加于CH4中的1％NH3)252＝M++C3H5，240＝M++C2H5，212＝M++H(Base)，211＝M+。
C11H9N5的元素分析理論值C，62.55；H，4.29；N，33.16。
實(shí)測值C，62.85；H，4.47；N，33.18。
實(shí)施例724-氨基-2-苯氨基-嘧啶-5-羧醛在Parr振蕩器中，將得自實(shí)施例71的4-氨基-2-苯氨基-嘧啶-5-腈(2.00g)與濕阮氏鎳(2.00g)、98％甲酸(60mL)和水(40mL)合并。在氫氣環(huán)境下(42psi)發(fā)生反應(yīng)并振蕩20分鐘。過濾反應(yīng)物并真空濃縮濾液。將殘留物懸浮于水中，用飽和碳酸氫鈉調(diào)成堿性，并用乙酸乙酯提取3次。通過玻璃纖維濾膜過濾水層以分散原有的乳液。用乙酸乙酯洗含水濾液。合并乙酸乙酯洗出液，過濾，用飽和氯化鈉洗，用硫酸鎂干燥并真空濃縮。用硅凝膠層析用乙酸乙酯/己烷(2∶1)洗脫得到0.73g標(biāo)題化合物，CIMS(加于CH4中的1％NH3)243＝M++C2H5，215＝M++H(Base)，214＝M+。
C11H10N4O的元素分析理論值C，61.67；H，4.71；N，26.15。
實(shí)測值C，61.79；H，4.71；N，26.11。
實(shí)施例736-(2，6-二氯苯基)-N2-苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺向0.022g 60％氫化鈉懸液在2.00mL 2-乙氧基乙醇中制成的溶液中加入0.46g 2，6-二氯苯基乙腈和0.50g 4-氨基-2-苯氨基-嘧啶-5-羧醛(得自實(shí)施例72)。將反應(yīng)混合物回流4小時(shí)，冷卻，倒入水中并用二氯甲烷提取幾次。合并二氯甲烷洗出液，用飽和氯化鈉洗，用硫酸鎂干燥并真空濃縮。用二乙醚洗殘留物，得到0.61g標(biāo)題化合物，CIMS(加于CH4中的1％NH3)410＝M++C2H5，382＝M++H，381＝M+。
按照實(shí)施例52的方法，可在上述化合物與異氰酸叔丁酯反應(yīng)得到1-叔丁基-3-{〔6-(2，6-二氯苯基)-2-苯氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲。
實(shí)施例744-氨基-2-甲磺?；?嘧啶-5-羧酸乙酯向4-氯-2-甲基硫代-5-嘧啶羧酸乙酯(25g)在乙醇(200mL)中制成的懸液內(nèi)加入30％氫氧化銨(38mL)。室溫?cái)嚢?小時(shí)后，于真空下濃縮反應(yīng)混合物。將殘留物懸浮于水中并過濾。用水再用二乙醚洗過濾墊，得到17.68g標(biāo)題化合物，CIMS(加于CH4中的1％NH3)242＝M++C2H5，214＝M++H(Base)，213＝M+，168＝M+-OEt。
C8H11N3SO2的元素分析理論值C，45.06；H，5.20；N，19.70。
實(shí)測值C，44.84；H，5.14；N，19.64。
實(shí)施例754-氨基-2-甲磺?；?嘧啶-5-基-甲醇向氫化鋁鋰(1.45g)在四氫呋喃(50mL)中制成的懸液內(nèi)滴加4-氨基-2-甲磺酰基-嘧啶-5-基-甲醇(5.00g)(得自實(shí)施例74)在四氫呋喃(120mL)中形成的溶液。室溫?cái)嚢?小時(shí)后，用水(1.5mL)、15％氫氧化鈉(1.5mL)，最后再用水(4.5mL)驟冷反應(yīng)混合物。過濾后用四氫呋喃洗濾墊。真空濃縮濾液得到3.83g標(biāo)題化合物，CIMS(加于CH4中的1％NH3)200＝M++C2H5，172＝M++H(Base)，171＝M+，154＝M+-OH。
實(shí)施例764-氨基-2-甲磺酰-嘧啶-5-羧醛經(jīng)3分鐘時(shí)間，向粗制4-氨基-2-甲磺酰-嘧啶-5-基)-甲醇(1.5g)(得自實(shí)施例76)在氯仿(150mL)中形成的溶液內(nèi)分幾次加入二氧化錳。室溫反應(yīng)6小時(shí)后，通過硅藻土過濾反應(yīng)混合物。用氯仿再用乙酸乙酯洗濾墊。合并濾液并真空濃縮，得到1.40g標(biāo)題化合物。
實(shí)施例776-(2，6-二氯苯基)-2-甲磺酰-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基胺向2，6-二氯苯基乙腈(0.55g)在二甲基甲酰胺(5mL)中制成的溶液內(nèi)加入1當(dāng)量60％氫化鈉懸液(0.12g)。10分鐘后，加入得自實(shí)施例76的4-氨基-2-甲磺酰-嘧啶-5-羧醛。室溫?cái)嚢柽^夜后，用水驟冷反應(yīng)混合物。用1N鹽酸酸化水溶液至pH7，并用二氯甲烷提取幾次。用飽和氯化鈉洗合并的二氯甲烷層，用硫酸鎂干燥，并真空下濃縮。用硅凝膠層析純化殘留物，用乙酸乙酯/己烷(2∶1)洗脫得到0.32g標(biāo)題化合物，CIMS(加于CH4中的1％NH3)365＝M++C2H5；337＝M++H(Base)，336＝M+。
實(shí)施例78N’-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-{3-(二乙氨基)丙氨基}吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-N，N-二甲基甲脒向210mg(1毫摩爾)7-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(二乙氨基)丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自實(shí)施例20)在0.8mL DMF中制成的懸液內(nèi)加入0.8mL DMF二甲基乙縮醛。將混合物室溫?cái)嚢?.5小時(shí)，然后于真空下濃縮。使殘留的油狀物分配于二氯甲烷和水之間。在硫酸鎂上方干燥有機(jī)相，然后濃縮并從乙腈中結(jié)晶得到160mg(68％)N’-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-{3-(二乙氨基)丙氨基}-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-N，N-二甲基甲脒；mp.100-104℃。CIMS(加在甲烷中的1％氨)m/z(相對強(qiáng)度)476(MH++2，60)，474(MH+，94)，361(100)。
C23H29Cl2N7·0.4H2O的元素分析理論值C，57.36；H，6.24；N，20.36。
實(shí)測值C，57.28；H，6.05；N，20.07。
實(shí)施例79N’-〔7-(3-叔丁基脲基)-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕-N，N-二甲基甲脒按實(shí)施例78所述方法，使1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕-嘧啶-7-基〕-3-叔丁基脲(得自實(shí)施例3)與DMF二甲基乙縮醛反應(yīng)13.5小時(shí)。按上述方法處理，然后經(jīng)急驟硅凝膠層析純化，依次用100∶10、3∶1、1∶1和0∶100二氯甲烷∶乙酸乙酯洗脫。在2-丙醇中研制洗脫得到的固體物后，最終生產(chǎn)出標(biāo)題化合物N’-〔7-(3-叔丁基脲基)-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕-N，N-二甲基甲脒，mp.190-193℃。
CIMS(加在甲烷中的1％氨)m/z(相對強(qiáng)度)462(MH++2，0.78)，460(MH+，0.93)。
C21H23Cl2N7O·0.20C3H8O·0.2C3H7NO的元素分析理論值C，54.75；H，5.38；N，20.17。
實(shí)測值C，54.73；H，5.31；N，20.65。
實(shí)施例80N’-〔6-(2，6-二氯苯基)-7-〔(二甲氨基)亞甲基-氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕-N，N-二甲基甲脒按實(shí)施例78所述，使2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自實(shí)施例1)與DMF二甲基乙縮醛反應(yīng)23小時(shí)。按上述方法分離后經(jīng)急驟硅凝膠層析法純化，依次用100∶0、9∶1、4∶1和7∶3乙酸乙酯/甲醇梯度洗脫得到油狀物，從乙酸乙酯中結(jié)晶產(chǎn)生N’-〔6-(2，6-二氯苯基)-7-〔(二甲氨基)-亞甲氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕-N，N-二甲基甲脒，mp.269-272℃。CIMS(加在甲烷中的1％氨)m/z(相對強(qiáng)度)418(MH++2，60)，416(MH+，100)。
C19H19Cl2N7·0.3H2O的元素分析理論值C，54.11；H，4.68；N，23.25。
實(shí)測值C，54.21；H，4.58；N，22.89。
實(shí)施例816-苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺按照實(shí)施例1的方法，由苯乙腈與2，4-二氨基-5-嘧啶-羧醛反應(yīng)，得到標(biāo)題化合物；mp.317-318℃。
實(shí)施例821-(2-氨基-6-苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基)-3-叔丁基-脲按照實(shí)施例2的方法，由0.246g得自實(shí)施例81的6-苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺與0.128mL異氰酸叔丁酯反應(yīng)。使用硅凝膠以中等壓力層析法純化產(chǎn)物，經(jīng)1∶1 CHCl3/EtOAc梯度洗脫得到標(biāo)題化合物；mp.＞250℃，CIMS(加于甲烷中的1％氨)m/z(相對強(qiáng)度)337(MH++1，64)，338(MH++2，11)，236(100)。
實(shí)施例836-(2，3-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺按照實(shí)施例1的方法，由2，3-二氯苯基乙腈與2，4-二氨基-5-嘧啶羧醛反應(yīng)，產(chǎn)生標(biāo)題化合物；mp.366-369℃(分解)。
實(shí)施例841-〔2-氨基-6-(2，3-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲按照實(shí)施例2的一般方法，由0.502g 6-(2，3-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自實(shí)施例83)與0.206mL異氰酸叔丁酯反應(yīng)。經(jīng)硅凝膠層析純化產(chǎn)物，用CHCl3∶EtOAc(98∶2)至CHCl3∶EtOAc(1∶2)的梯度洗脫，產(chǎn)生標(biāo)題化合物；mp.356-358℃。
C18H18Cl2N6O1·0.05H2O的元素分析理論值C，53.34；H，4.48；N，20.74。
實(shí)測值C，53.44；H，4.47；N，20.29。
實(shí)施例856-(2，3，6-三氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺按照實(shí)施例1的方法，從1.0g(2，3，6-三氯)-苯基-乙腈和0.6g 2，4-二氨基-5-嘧啶-羧醛開始制備標(biāo)題化合物；mp.320-322℃。
C13H8Cl3N5的元素分析理論值C，45.84；H，2.37；N，20.56。
實(shí)測值C，46.22；H，2.57；N，20.54。
實(shí)施例861-〔2-氨基-6-(2，3，6-三氯-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲按照實(shí)施例2的方法，以0.30g 6-(2，3，6-三氯-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自實(shí)施例85)與異氰酸叔丁酯(0.108mL)反應(yīng)。使用硅凝膠以中等壓力層析法純化產(chǎn)物，用CHCl3∶EtOAc(1∶1)洗脫得到標(biāo)題化合物；mp.329-330℃，CIMS(加于甲烷中的1％氨)m/z(相對強(qiáng)度)439(MH+-1，3)，441(MH++1，3)，84(100)。
實(shí)施例871-〔2-氨基-6-(2，6-二氟苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲按照實(shí)施例2的方法，從0.25g 6-(2，6-二氟苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自實(shí)施例63)和0.112mL異氰酸叔丁酯制備標(biāo)題化合物。經(jīng)MPLC純化產(chǎn)物，用CHCl3∶EtOAc(1∶1)至EtOAc的梯度洗脫得到純產(chǎn)物；mp.＞300℃，CIMS(加于甲烷中的1％氨)m/z(相對強(qiáng)度)373(MH++1，60)，374(MH++2，10)，274(100)。
實(shí)施例881-〔2-氨基-6-(2，6-二溴苯基)-吡啶并〔2，3-d〕-嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲按照實(shí)施例2的方法，從0.25g 6-(2，6-二溴-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自實(shí)施例60)和0.077mL異氰酸叔丁酯制備標(biāo)題化合物。經(jīng)MPLC純化產(chǎn)物，用CHCl3∶EtOAc(1∶1)至EtOAc的梯度洗脫得到純產(chǎn)物mp.＞300℃(分解)。
C18H18Br2N6O1·0.35H2O的元素分析理論值C，43.20；H，3.77；N，16.79；Br，31.93。
實(shí)測值C，43.53；H，3.64；N，16.41；Br，31.79。
實(shí)施例891-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕-嘧啶-7-基〕-3-異丙基-脲按照實(shí)施例2的方法，從0.5g 6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自實(shí)施例1)和0.172mL異氰酸異丙酯制備標(biāo)題化合物。經(jīng)MPLC純化產(chǎn)物，用CHCl3∶EtOAc(1∶1)的梯度洗脫得到純產(chǎn)物；mp.184-188℃，CIMS(加于甲烷中的1％氨)m/z(相對強(qiáng)度)391(MH+，16)，393(MH++2，11)，306(100)。
實(shí)施例906-鄰甲苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺按照實(shí)施例1的方法，從2-甲基芐基氰和2，4-二氨基-5-嘧啶-羧醛制備標(biāo)題化合物；mp.300-302℃。
C14H13N5的元素分析理論值C，66.92；H，5.21；N，27.87。
實(shí)測值C，66.4；H，5.2；N，27.9。
實(shí)施例911-(2-氨基-6-鄰甲苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基)-3-叔丁基-脲按照實(shí)施例2的方法，從6-鄰甲苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自實(shí)施例90)和異氰酸叔丁酯制備標(biāo)題化合物。經(jīng)MPLC純化產(chǎn)物，用CHCl3∶EtOAc(1∶1)洗脫得到純產(chǎn)物；mp.195-197℃，CIMS(加于甲烷中的1％氨)m/z(相對強(qiáng)度)351(MH+1，55)，352(MH++2，12)，84(100)。
實(shí)施例926-(2，3-二甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺從2，3-二甲苯基乙腈和2，4-二氨基-5-嘧啶-羧醛開始制備標(biāo)題化合物；mp.330-333℃。
實(shí)施例931-〔2-氨基-6-(2，3-二甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲按照實(shí)施例2的方法從0.5007g 6-(2，3-二甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自實(shí)施例92)和0.23mL異氰酸叔丁酯制備標(biāo)題化合物。經(jīng)MPLC純化產(chǎn)物，用CHCl3∶EtOAc(2∶1)CHCl3∶EtOAc(1∶1)的梯度洗脫得到終產(chǎn)物；mp.326-333℃，MS(CI)。
C20H24N6O1·0.81H2O的元素分析理論值C，63.38；H，6.81；N，22.17。
實(shí)測值C，63.54；H，6.47；N，21.77。
實(shí)施例946-(3，5-二甲基苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺從2.0g3，5-二甲苯基乙腈和1.81g 2，4-二氨基-5-嘧啶-羧醛開始，按實(shí)施例1的方法制備標(biāo)題化合物；mp.298-302℃，MS(CI)。
C15H15N5的元素分析理論值C，67.91；H，5.70；N，26.40。
實(shí)測值C67.87；H，5.75；N，26.38。
實(shí)施例951-〔2-氨基-6-(3，5-二甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲按照實(shí)施例2的方法，從0.30g 6-(3，5-二甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自實(shí)施例94)和0.14mL異氰酸叔丁酯制備標(biāo)題化合物。經(jīng)MPLC純化產(chǎn)物，用1∶1 CHCl3∶EtOAc洗脫得到純產(chǎn)物；mp.180-182℃；CIMS(加在甲烷中的1％氨)m/z(相對強(qiáng)度)365(MH++1，16)，366(MH++2，3)，84(100)。
實(shí)施例966-(2，4，6-三甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺從0.915g 2，4，6-三甲基芐氰和0.76g 2，4-二氨基-5-嘧啶-羧醛開始，按實(shí)施例1所述方法制備標(biāo)題化合物；mp.276-282℃；CIMS(加于甲烷中的1％氨)m/z(相對強(qiáng)度)279(MH+，54)，280(MH++1，100)。
實(shí)施例971-〔2-氨基-6-(2，4，6-三甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲由0.25g得自實(shí)施例96的6-(2，4，6-三甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺和0.109mL異氰酸叔丁酯制備標(biāo)題化合物。用1∶1CHCl3∶EtOAc洗脫經(jīng)中壓液相層析法純化產(chǎn)物；mp.281-297℃；CIMS(加于甲烷中的1％氨)m/z(相對強(qiáng)度)379(MH++1，100)，380(MH++2，23)。
實(shí)施例986-(2，3，5，6-四甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺從1.999g 2，3，5，6-四甲基芐基氰和1.52g 2，4-二氨基-5-嘧啶-羧醛開始，按實(shí)施例1所述方法制備標(biāo)題化合物；mp.327-331℃；CIMS(溶于CH4中的1％氨)m/z(相對強(qiáng)度)293(MH+，65)，294(MH++1，100)。
實(shí)施例991-〔2-氨基-6-(2，3，5，6-四甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧淀-7-其〕-3-叔丁基-脲按照實(shí)施例2的方法從0.3g 6-(2，3，5，6-四甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自實(shí)施例98)和0.125mL異氰酸叔丁酯制備標(biāo)題化合物。用1∶1 CHCl3∶EtOAc洗脫，以中壓液相層析法純化產(chǎn)物；mp.＞300℃；CIMS(加于甲烷中的1％氨)m/z(相對強(qiáng)度)393(MH+，55)，394(MH++1，13)，84(100)。
實(shí)施例1006-(2-甲氧基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺按照實(shí)施例1的方法，從2-乙氧基芐基氰和2，4-二氨基-5-嘧啶-羧醛制備標(biāo)題化合物；mp.304-306℃(分解)。
C14H13N5O1的元素分析理論值C，62.91；H，4.90；N，26.20。
實(shí)測值C，63.16；H，5.13；N，26.42。
實(shí)施例1011-〔2-氨基-6-(2-甲氧基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲按照實(shí)施例2的方法，由0.203g 6-(2-甲氧基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自實(shí)施例100)和0.093mL異氰酸叔丁酯制備標(biāo)題化合物。用1∶1CHCl3∶EtOAc洗脫，以中壓液相層析法純化產(chǎn)物；mp.300-301℃；CIMS(加于甲烷于中的1％氨)m/z(相對強(qiáng)度)367(MH++1，67)，368(MH++2，14)，236(100)。
實(shí)施例1026-(3-甲氧基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺按照實(shí)施例1所述方法，從3-甲氧基芐氰和2，4-二氨基-5-嘧啶-羧醛制備標(biāo)題化合物；mp.284-286℃。
C14H13N5O1的元素分析理論值C，62.9；H，4.9；N，26.2。
實(shí)測值C，62.8；H，5.0；N，26.3。
實(shí)施例1031-〔2-氨基-6-(3-甲氧基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲按照實(shí)施例2的方法，從0.50g6-(3-甲氧基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自實(shí)施例102)和0.23mL異氰酸叔丁酯制備標(biāo)題化合物。用CHCl3∶EtOAc(2∶1)至CHCl3∶EtOAc(1∶1)的梯度洗脫，以中壓液相層析法純化產(chǎn)物；mp.275-280℃；MS(CI)。
C19H22N6O2·0.45H2O的元素分析理論值C，60.93；H，6.19；N，22.44。
實(shí)測值C，61.22；H，5.89；N，22.09。
實(shí)施例1046-(2-溴-6-氯-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺按照實(shí)施例1中所述方法，從1.0g 2-溴-6-氯苯基乙腈和0.57g2，4-二氨基-5-嘧啶-羧醛制備標(biāo)題化合物；mp.264-280℃；MS(CI)。
C13H9Cl1、Br1N5的元素分析理論值C，44.53；H，2.59；N，19.97。
實(shí)測值C44.48；H，2.87；N，20.10。
實(shí)施例1051-〔2-氨基-6-(2-溴-6-氯-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕-嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲按照實(shí)施例2的方法，使用0.30g 6-(2-溴-6-氯-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自實(shí)施例104)和0.105mL異氰酸叔丁酯制備標(biāo)題化物。經(jīng)MPLC純化產(chǎn)物并用1∶1 CHCl3∶EtOAc洗脫；mp.314℃(分解)MS(CI)。
C18H18Br1Cl1N6O1·0.43CHCl3·0.27C4H8O2的元素分析理論值C，44.65；H，3.95；N，16.01；Br，15.22；Cl，15.47。
實(shí)測值C，44.39；H，3.96；N，15.82；Br，14.83；Cl，15.39。
實(shí)施例106丙烷-1-磺酸〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-酰胺向1.00g 2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自實(shí)施例1)在15mLDMF中制成的漿液內(nèi)分幾次加入0.15g氫化鈉(60％在礦物油中)，并將混合物攪拌1小時(shí)。逐滴加入丙基磺酰氯并將反應(yīng)混合物室溫?cái)嚢?6小時(shí)。過濾反應(yīng)混合物以除去小量不溶性材料并于真空下蒸發(fā)濾液。使用硅凝膠進(jìn)行中壓液相層析法(MPLC)純化產(chǎn)物并用CHCl3∶EtOAc(2∶1)至CHCl3∶EtOAc(1∶1)梯度洗脫，得到標(biāo)題化合物。
C16H15Cl2N5O2S1·0.25CHCl3的元素分析理論值C，44.14；H，3.48；N，15.84；S，7.25。
實(shí)測值C，43.92；H，3.38；N，15.54；S，7.04。
實(shí)施例1076-吡啶-3-基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺按照實(shí)施例1的方法，由3-吡啶基乙腈和2，4-二氨基-5-嘧啶-羧醛反應(yīng)得到標(biāo)題化合物；mp.317-319℃(分解)。
C12H10N6的元素分析理論值C，60.50；H，4.23；N，35.27。
實(shí)測值C，60.5；H，4.3；N，35.6。
實(shí)施例1081-(2-氨基-6-吡啶-3-基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基)-3-叔丁基-脲按照實(shí)施例2的方法，由0.30g 2，7-二氨基-6-(3-吡啶基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自實(shí)施例107)與0.16mL異氰酸-叔丁酯反應(yīng)。使用硅凝膠以中壓液相層析法純化產(chǎn)物，并用90∶10∶1EtOAc∶MeOH∶TEA洗脫得到標(biāo)題化合物；mp.＞300℃；CIMS(甲烷中的1％氮)m/z(相對強(qiáng)度)338(MH++1，8)，339(MH++2，1)，84(100)。
實(shí)施例1096-吡啶-4-基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺向冷卻的(0℃)2-乙氧基乙醇(13mL)中分次加入0.30g氫化鈉(在礦物油中60％濃度)，并將懸液攪拌10分鐘。向該懸液內(nèi)加入1.06g 4-鹽酸吡啶基乙腈，并將混合物室溫?cái)嚢?0分鐘。將4-吡啶基乙腈在2-乙氧基乙醇中形成的中和的溶液加入到含有2-乙氧基乙醇鈉(由0.11g氫化鈉和4.76mL 2-乙氧基乙醇制得)和0.9g 2，4-二氨基-5-嘧啶羧醛的反應(yīng)混合物中。將所得到的反應(yīng)混合物加熱回流2小時(shí)，冷卻并用二乙醚和乙酸乙酯洗不溶性產(chǎn)物得到標(biāo)題化合物；mp.＞340℃；MS(Cl)。
C12H10N6·0.05H2O的元素分析理論值C，60.27；H，4.26；N，35.14。
實(shí)測值C，60.35；H，4.31；N，34.75。
實(shí)施例1101-(2-氨基-6-吡啶-4-基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基)-3-叔丁基-脲按照實(shí)施例2的方法，用0.30g 2，7-二氨基-6-(4-吡啶基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自實(shí)施例109)與0.154mL異氰酸叔丁酯反應(yīng)。使用硅凝膠以中壓層析法純化產(chǎn)物，用90∶10∶1EtOAc∶MeOH∶TEA洗脫得到標(biāo)題化合物，mp.＞350℃；CIMS(甲烷中的1％氨)m/z(相對強(qiáng)度)338(MH++1，6)，339(MH++2，1)，84(100)。
實(shí)施例1116-吡啶-2-基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺按照實(shí)施例1的方法，使0.84g 2-吡啶基乙腈與1.0g 2，4-二氨基-5-嘧啶羧醛反應(yīng)，得到標(biāo)題化合物；mp.312-321℃。
C12H10N6·0.07H2O的元素分析理論值C，60.18；H，4.27；N，35.09。
實(shí)測值C，60.46；H，4.34；N，34.70。
實(shí)施例112
1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙基-脲按照實(shí)施例21的一般方法，使0.85g 7-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自實(shí)施例20)與0.176mL異氰酸乙酯反應(yīng)。在C18反相柱上以反相制備性HPLC純化產(chǎn)物，用從90％加在水中的0.1％三氟乙酸/10％加在乙腈中的0.1％三氟乙酸到60％加在水中的0.1％三氟乙酸/40％加在乙腈中的0.1％三氟乙酸的溶劑梯度進(jìn)行洗脫得到標(biāo)題化合物，mp.92-108℃。
C23H29Cl2N7O1·0.25H2O的元素分析理論值C，55.82；H，6.01；N，19.81。
實(shí)測值C，55.84；h，6.02；N，19.68。
實(shí)施例1131-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-異丙基-脲按照實(shí)施例21的方法，由0.30g 7-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自實(shí)施例20)與0.071g異氰酸異丙酯反應(yīng)。在硅凝膠上的中壓層析法純化產(chǎn)物，用90∶10∶1EtOAc∶MeOH∶TEA洗脫得到標(biāo)題化合物；mp.88-100℃；CIMS(甲烷中的1％氨)；m/z(相對強(qiáng)度)504(MH+，3)，506(MH++2，2，)，86(100)。
實(shí)施例114N2-(3-二乙氨基-丙基)-6-(2，6-二乙基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺按照實(shí)施例20的方法，使3.0g 2，7-二氨基-6-(2，6-二甲基苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自實(shí)施例6)與30mL 1-氨基-3-(N，N-二乙氨基)丙烷反應(yīng)得到標(biāo)題化合物；mp.216-219℃。
C22H30N6·0.15H2O的元素分析理論值C，69.31；H，8.01；N，22.04。
實(shí)測值C，69.29；H，7.89；N，22.04。
實(shí)施例1151-〔2-(3-二甲氨基-丙氨基)-6-(2，6-二甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙基-脲按照實(shí)施例21所述的方法，從得自實(shí)施例114的7-氨基-6-(2，6-二甲苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶和異氰酸乙酯開始制備。在C18反相柱上以反相制備性HPLC法純化產(chǎn)物，用從100％加在水中的0.1％三氟乙酸/0％加在乙腈中的0.1％三氟乙酸到70％加在水中的0.1％三氟乙酸/30％加在乙腈中的0.1％三氟乙酸的溶劑梯度洗脫得到純產(chǎn)物；mp.64-70℃。
C25H35N7O1·0.35H2O的元素分析理論值C，65.86；H，7.89；N，21.51。
實(shí)測值C，65.78；H，7.63；N，21.39。
實(shí)施例1161-叔丁基-3-〔2-(3-二乙氨基-丙氨基)-6-(2，6-二甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲從0.50g 7-氨基-6-(2，6-二甲基苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自實(shí)施例114)和0.17mL異氰酸叔丁酯開始，按實(shí)施例21中所述方法制備。在C18反相柱上以反相制備性HPLC法純化產(chǎn)物，用從95％溶于水中的0.1％三氟乙酸/5％溶于乙腈的0.1％三氟乙酸開始到65％溶于水中的0.1％三氟乙酸/35％溶于乙腈的0.1％三氟乙酸的溶劑梯度洗脫，mp.86-91℃。
C27H39N7O1的元素分析理論值C，67.89；H，8.23；N，20.53。
實(shí)測值C，67.70；H，8.24；N，20.43。
實(shí)施例1171-金鋼烷-1-基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲按照實(shí)施例37中所述方法，從0.5g N2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自實(shí)施例36)和0.218g 1-金鋼烷異氰酸酯開始制備。使用硅凝膠以中壓層析法純化產(chǎn)物，用90∶10∶1EtOAcMeOH∶TEA洗脫得到標(biāo)題化合物；mp.＞200℃(分解)ESMS(20/80MeOH/CH3CN+0.1％AcOH)m/z(相對強(qiáng)度)623.4(MH+，100)，625.5(MH++2，48)。
C32H40Cl2N8O1·0.52H2O的元素分析理論值C，60.72；H，6.54；N，17.70。
實(shí)測值C，61.06；H，6.58；N，17.30。
實(shí)施例1181-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-硫脲按照實(shí)施例37中所述方法，從0.5g N2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自實(shí)施例36)和0.142g異硫氰酸叔丁酯開始制備。使用硅凝膠以中壓層析法純化產(chǎn)物，用90∶10∶1EtOAc∶MeOH∶TEA洗脫得到兩種產(chǎn)物的混合物。進(jìn)一步在C18反相柱上以反相制備性HPLC法純化，用從95％溶于水中的0.1％三氟乙酸/5％溶于乙腈的0.1％三氟乙酸到65％溶于水中的0.1％三氟乙酸/35％溶于乙腈的0.1％三氟乙酸的溶劑梯度進(jìn)行洗脫、得到標(biāo)題化合物；mp.＞200℃(分解)。
實(shí)施例1193-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-1，1-二乙基-脲向0.50g N2〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自實(shí)施例36)在5mL DMF中制成的溶液內(nèi)加入0.10g 60％氫化鈉，并將混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)。將懸液冷卻到0℃并逐漸加入0.15mL二乙基氨基甲酰氯。加完之后，使反應(yīng)混合物升至室溫并在室溫下攪拌18小時(shí)。真空濃縮該混合物并在硅凝膠上以中壓層析法純化產(chǎn)物，用90∶10∶1EtOAc∶MeOH∶TEA洗脫得到標(biāo)題化合物；mp.＞200℃(分解)；MS(ES)。
實(shí)施例120N2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-6-(2，3，5，6-四甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺攪拌下將1.00g 6-(2，3，5，6-四甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自實(shí)施例98)，0.66g氨磺酸和10mL 1-(3-氨丙基)-4-甲基哌嗪的混合物加熱回流34小時(shí)。將反應(yīng)瓶配以短經(jīng)蒸餾柱并在高真空下蒸餾除去過量的胺。用40mL二氯甲烷稀釋殘留物，用10mL水再用飽和15mL飽和碳酸氫鈉洗。用二氯甲烷(3×25mL)提取堿性含水層，并反過來用鹽水(3×25mL)洗合并的有機(jī)層。在硫酸鎂上方干燥有機(jī)層，過濾并真空濃縮。使用硅凝膠以中壓層析法純化產(chǎn)物，用90∶10∶1EtOAc∶MeOH∶TEA洗脫得到標(biāo)題化合物；mp.218-223℃；MS(APCI)。
C25H35N7·0.30C4H8O2的元素分析理論值C，68.41；H，8.19；N，21.31。
實(shí)測值C，68.05；H，7.95；N，21.70。
實(shí)施例1211-叔丁基-3-{2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-6-(2，3，5，6-四甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲按照實(shí)施例37的方法，由0.41g N2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-6-(2，3，5，6-四甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自實(shí)施例120)和0.12mL異氰酸叔丁酯開始制備。使用硅凝膠以中壓層析法純化產(chǎn)物，用90∶10∶1EtOAc∶MeOH∶TEA洗脫得到標(biāo)題化合物；mp.185-198℃。
C30H44N8O1的元素分析理論值C，67.64；H，8.33；N，21.03。
實(shí)測值C，67.3 1；H，8.23；N，20.87。
實(shí)施例1221-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-(3-嗎啉-4-基-丙基)-硫脲接照實(shí)施例37中所述方法，從0.3926g N2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自實(shí)施例53)和0.18g 3-嗎啉代丙基異硫氰酸酯開始制備。在硅凝膠上以中壓層析法純化產(chǎn)物，用90∶10∶1EtOAc∶MeOH∶TEA的溶劑混合物純化得到標(biāo)題化合物；mp.＞200℃(分解)；ESMS(20/80MeOH/CH3CN+0.1％AcOH)m/z(相對強(qiáng)度)619.4(MH+，100)，621.5(MH+，77)。
實(shí)施例1231-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲向6-(2，6-二氯苯基)-N2-(4-二乙氨基-丁基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(25.0g)(得自實(shí)施例53)在DMF(300mL)中制成的溶液內(nèi)加入1當(dāng)量60％氫化鈉懸液(2.31g)。室溫下攪拌約2小時(shí)后，加入1當(dāng)量異氰酸苯基酯(5.72g)并用薄層層析法監(jiān)測反應(yīng)。約24小時(shí)后，真空除去溶劑。將殘留物溶解于二氯甲烷中并首先用水，然后用飽和氯化鈉溶液將該溶液洗幾次。用硫酸鎂干燥二氯甲烷層并真空濃縮之。在硅凝膠上層析純化殘留物并用乙酸乙酯∶乙醇∶三乙胺(9∶2∶1)洗脫，然后從叔丁基甲酯中結(jié)晶出21.58g標(biāo)題化合物1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲，ESMS(20/80MeOH/CH3CN+0.1％AcOH)M++H＝532；mp.157℃(分解)。
C26H35N7Cl2O·0.10H2O的元素分析理論值C，58.45；H，6.64；N，18.35；Cl，13.27；H2O，0.34。
實(shí)測值C，58.51；H，6.75；N，18.37；Cl，13.17；H2O，0.57。
實(shí)施例1241-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙基-脲向冷卻的6-(2，6-二氯苯基)-N2-(4-二乙氨基-丁基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(0.61g)(得自實(shí)施例53)在THF(6mL)中制成的溶液內(nèi)分幾份加入六甲基硅氮烷鉀(0.308g)。使反應(yīng)混合物升至室溫并攪拌30分鐘。然后加入異氰酸乙酯，并于室溫下將反應(yīng)混合物繼續(xù)攪拌18小時(shí)。將反應(yīng)混合物倒入約200mL 0.25N含水HCl加并過濾所得溶液以分離產(chǎn)物。用50％氫氧化鈉水溶液將濾液調(diào)成堿性，并用乙酸乙酯提取含水層。干燥(MgSO4)合并的有機(jī)提取物，過濾并在真空下濃縮濾液。用經(jīng)向?qū)游龇兓a(chǎn)物，以90∶10∶1EtOAc∶MeOH∶TEA的溶劑混合物洗脫得到標(biāo)題化合物。
C24H31Cl2N7O1·0.78H2O的元素分析理論值C，55.59；H，6.33；N，18.91。
測定值C，55.59；H，5.93；N，18.62。
實(shí)施例125N-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基-N”-乙基-胍向7-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(42mg)(得自實(shí)施例20)在DMF(1mL)制成的溶液內(nèi)加入60％氫化鈉懸液(5mg)，并將反應(yīng)混合物攪拌0.5小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入N，N’-雙(叔丁氧基-羧基)-N-(乙基)-5-(乙基)異硫脲(37mg)，并將混合物攪拌18小時(shí)。用二氯甲烷(50mL)稀釋反應(yīng)混合物并用水(2×15mL)洗。用硫酸鈉干燥有機(jī)層并濃縮之。在硅凝膠上層析純化所得到的油狀物，用甲醇/乙酸乙酯/三乙胺(8.5/1.5/0.3)洗脫得到7-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(40mg)和[[[6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基]亞氨基[[1，1-二甲基乙氨基)羰基]氨基]甲基]-乙氨基]氨基甲酸-1，1-二甲基乙基酯的混合物。將混合物溶解在含有2，6-二甲基吡啶的無水二氯甲烷(0.5mL)中。加入三氟甲基磺酸三甲基甲硅烷基酯(6mg)，并將混合物室溫下攪拌30小時(shí)。將混合物倒入飽和碳酸氫鈉水溶液中，用二氯甲烷提取，在硫酸鈉上方干燥并濃縮。在硅凝膠上層析所得到的油，用甲醇∶乙酸乙酯∶三乙胺(8.5∶1.5∶0.3)洗脫得到標(biāo)題化合物(7mg)，ESMS(1/4MeOH/CH3CN+0.1％AcOH)m/z(相對強(qiáng)度)490.5(MH+，100)，491.5(MH++1，27)，492.5(MH++2，64)。
以下實(shí)施例進(jìn)一步舉例描述本發(fā)明提供的典型物配方。
實(shí)施例126使用下列成分配制用于口服給藥的硬明膠膠囊制劑量(mg/膠囊)活性化合物250淀粉粉末 200硬脂酸鎂 10總計(jì) 260混合上述成分并以460mg的量加入硬明膠膠囊中。典型的活性成分是N-〔2-甲酰氨基-6-(3，5-二甲苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-正丁酰胺。用于治療外科手術(shù)后血管再狹窄時(shí)每天投用2-4次組合物。
實(shí)施例127口服懸液配方成分 量3-(4，5-二溴苯基)-[1，6]-1，5-500mg二氫雜萘-2，7-二胺山梨醇溶液(70％N.F.) 40mL苯甲酸鈉 150mg糖精 10mg櫻桃香料 50mg蒸餾水加至100mL在40mL蒸餾水中加入山梨醇溶液并將1，5-二氮雜萘加入其中。加入糖精、苯甲酸鈉和香料劑并溶解之。用蒸餾水將體積調(diào)到100mL。每毫升糖漿含有5mg活性成分。
實(shí)施例128每片含60mg活性成分的片劑活性成分 60g淀粉 45mg微晶纖維素35mg聚乙烯吡咯烷酮(在水中的10％溶液) 4mg羧甲基淀粉鈉 4.5mg硬脂酸鎂 0.5mg滑石 1.0mg總計(jì) 150mg使活性成分、淀粉和纖維素通過45號(hào)目美國篩網(wǎng)并徹底混合。將聚乙烯吡咯烷酮的溶液與所得粉末混合，然后通過14號(hào)目美國篩網(wǎng)。于50-60℃干燥所得顆粒并通過18號(hào)目美國篩網(wǎng)。然后將預(yù)先已通過60號(hào)目美國篩網(wǎng)的羧甲基纖維素鈉、硬脂酸鎂和滑石加到顆粒中，混合后在壓片機(jī)上壓制得到每片重150mg的片劑。
上述制劑中使用的典型活性成分是實(shí)施例21中所述的化合物。
實(shí)施例129將100mg 1-〔2-氨基-6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-(3-嗎啉-4-基-丙基)-硫脲溶解在250mL0.9％氯化鈉水溶液中并將溶液的pH調(diào)到大約7.0。該制劑特別適于治療乳腺癌。
實(shí)施例130栓劑的制備將500mg 1-(2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-咪唑烷-2-酮和1500mg可可油的混合物于60℃摻和均勻。在加善模中將混合物冷卻到24℃。每個(gè)藥栓重約2g，用于處理細(xì)菌感染時(shí)每天使用1-2次。
實(shí)施例131局部制劑成分量(mg)N7-(3-甲基氨基基)-6-(3，5-二甲氧基苯基)-吡啶并 20〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺丙二醇 100白礦脂 500Cetearyl Alcohol 50硬脂酸甘油酯 100PEG 100硬脂酸酯 100Ceteth-20 50磷酸氫鈉 80總計(jì)1000
權(quán)利要求
1.式I的化合物
其中X是CH或N；B是鹵素、氫或NR3N4；R1、R2、R3和R4各自是氫、C1-C8烷基、C2-C8鏈烯基、C2-C8炔基、Ar’、氨基、C1-C8烷基氨基或二-C1-C8烷基氨基；其中烷基、鏈烯基和炔基基團(tuán)可被NR5R6取代，這里R5和R6獨(dú)自是氫、C1-C8烷基、C2-C8鏈烯基、C2-C8炔基、C3-C10環(huán)烷基或
并且其中上述任何烷基、鏈烯基和炔基基團(tuán)均可被羥基或含有1或2個(gè)選自氮、氧和硫的雜原子的5元或6元碳環(huán)或雜環(huán)取代，并且R9、R10、R11和R12各自是氫、硝基、三氟甲基、苯基、被取代的苯基、-C≡N、-COOR8、-COR8、
SO2R8、鹵素、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、硫代、-S-C1-C8烷基、羥基、C1-C8鏈烷酰基、C1-C8鏈烷酰氧基，或-NR5R6，或者當(dāng)R9和R10相鄰時(shí)它們一起可以是亞甲二氧基；n是0、1、2或3；并且其中R5和R6與它們所連接的氮一起組成一個(gè)有3至6碳原子，并且可含有選自氮、氧和硫的雜原子的環(huán)；R1和R2與它們所連接的氮一起，以及R3和R4與它們所連接的氮一起也可以是
或NH2)或者可構(gòu)成一個(gè)有3至6個(gè)碳原子，并可含有1或2個(gè)選自氮、氧及硫的雜原子的環(huán)，R1和R3還可以是選自
的?；愃莆?，其中R8是氫、C1-C8烷基、C2-C8鏈烯基、C2-C8炔基、C3-C10環(huán)烷基，并可含有氧、氮或硫原子，
以及-NR5R6，并且其中R8烷基、鏈烯基和炔基基團(tuán)可被NR5R6所取代；Ar和AR’是選自苯基、咪唑基、吡咯基、吡啶基、嘧啶基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、吡嗪基、噻唑基、噁唑基、異噁唑基、呋喃基、噻吩基、萘基的未被取代或被取代的芳族或雜芳族基團(tuán)，其中取代基是如上文限定的R9、R10、R11和R12；以及其醫(yī)藥上可接受的酸和堿加成鹽；條件是當(dāng)X是N且B是NR3R4時(shí)，R3和R4之一是氫以外的其他基團(tuán)。
2.有下列結(jié)構(gòu)式的化合物
其中X是CH或N；B是鹵素、氫或NR3N4；R1、R2、R3和R4各自是氫、C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-C6炔基、Ar’、氨基、C1-C6烷基氨基或二-C1-C6烷基氨基；其中烷基、鏈烯基和炔基基團(tuán)可被NR5R6取代，這里R5和R6獨(dú)自是氫、C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-C6炔基、C3-C10環(huán)烷基式
并且其中上述任何烷基、鏈烯基和炔基基團(tuán)均可被羥基或含有1或2個(gè)選自氮、氧和硫的雜原子的5元或6元碳環(huán)或雜環(huán)取代，并且R9、R10、R11和R12各自是氫、硝基、三氟甲基、苯基、被取代的苯基、-C≡N、-COOR8、-COR8、
、SO2R8、鹵素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、硫代、-S-C1-C6烷基、羥基、C1-C6鏈烷酰基、C1-C6鏈烷酰氧基，或-NR5R6，或者當(dāng)R9和R10相鄰時(shí)它們一起可以是亞甲二氧基；n是0、1、2或3；并且其中R5和R6與它們所連接的氮一起組成一個(gè)有3至6碳原子，并且可含有選自氮、氧和硫的雜原子的環(huán)；R1和R2與它們所連接的氮一起，以及R3和R4與它們所連接的氮一起可構(gòu)成一個(gè)有3至6個(gè)碳原子，并可含有1或2個(gè)選自氮、氧及硫的雜原子的環(huán)，R1和R3還可以是選自
的?；愃莆铮渲蠷8是氫、C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-C6炔基、C3-C6環(huán)烷基，
以及-NR5R6，并且其中烷基、鏈烯基和炔基基團(tuán)可被NR5R6所取代；Ar是選自苯基、咪唑基、吡咯基、吡啶基、嘧啶基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、吡嗪基、噻唑基、噁唑基、異噁唑基、呋喃基、噻吩基、萘基的未被取代或被取代的芳族或雜芳族基團(tuán)，其中取代基是如上文限定的R9、R10、R11；以及其醫(yī)藥上可接受的和堿加成鹽；條件是當(dāng)X是N且B是NR3R4時(shí)，R3和R4之一是氫以外的其他基團(tuán)。
3.權(quán)利要求1的化合物，其中B是鹵素或氫。
4.權(quán)利要求1的化合物，其中B是NR3R4。
5.權(quán)利要求4的化合物，其中X是CH。
6.權(quán)利要求5的化合物，其中Ar可以是式
的被取代的苯環(huán)。
7.權(quán)利要求6的化合物，其中R2和R4是氫。
8.權(quán)利要求7的化合物，其中R1和R3獨(dú)自是氫、C1-C6烷基、
9.權(quán)利要求8的化合物，其中R8是C1-C6烷基、-NR5R6或C1-C6烷基-NR5R6。
10.權(quán)利要求9的化合物，其中R5和R6獨(dú)自是氫、C1-C6烷基或C1-C6烷基或C1-C6烷基-NR5R6。
11.權(quán)利要求8的化合物，其為3-鄰甲苯基-〔1，6〕-1，5-二氮雜萘-2，7-二胺。
12.權(quán)利要求8的化合物，其為3-(2-氯-苯基)-〔1，6〕-1，5-二氮雜萘-2，7-二胺。
13.權(quán)利要求5的化合物，其中Ar是可以被取代的雜芳環(huán)。
14.權(quán)利要求4的化合物，其中X是N。
15.權(quán)利要求14的化合物，其中Ar是式
的可被取代的苯環(huán)。
16.權(quán)利要求15的化合物，其中R2和R4是氫。
17.權(quán)利要求16的化合物，其中R1和R3獨(dú)自是氫、C1-C6烷基、
18.權(quán)利要求17的化合物，其中R8是C1-C6烷基、-NR5R6或-C1-C6烷基-NR5R6。
19.權(quán)利要求18的化合物，其中R5是氫，R6是C1-C6烷基或C1-C6烷基NR5R6。
20.權(quán)利要求19的化合物選自1-叔丁基-3-〔7-(3-叔丁基脲基)-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕脲；1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基脲；1-叔丁基-3-〔7-(3-叔丁基脲基)-6-鄰-甲苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕脲；1-〔2-氨基-6-鄰甲苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基脲；1-〔2-氨基-6-(2，6-二甲基苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基脲；N-〔2-乙酰氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d 〕嘧啶-7-基〕-乙酰胺；N7-丁基-6-苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺；1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙脲；N2，N7-二甲基-6-苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺；1-〔2-氨基-6-(2，3-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；1-〔2-氨基-6-(2，6-二氟苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；1-〔2-氨基-6-(2，6-二溴苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-異丙基-脲；1-〔2-氨基-6-苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；1-〔2-氨基-6-(2，3-二甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；1-〔2-氨基-6-(3，5-二甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；1-〔2-氨基-6-(2-甲氧基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；1-〔2-氨基-6-(3-甲氧基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；和1-〔2-氨基-6-(2-溴-6-氯-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；
21.有下列結(jié)構(gòu)式的權(quán)利要求1的化合物，
其中R1、R2、R9和R10是如權(quán)利要求1中限定的。
22.權(quán)利要求21的化合物，其中R9和R20都是鹵素或甲基。
23.權(quán)利要求22的化合物，其中R1和R2都是氫。
24.權(quán)利要求23的化合物，其為1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-咪唑烷-2-酮。
25.具有下列結(jié)構(gòu)式的權(quán)利要求1的化合物
其中R1、R2、R5、R6、R9和R10是如權(quán)利要求1中限定的。
26.具有下列結(jié)構(gòu)式的權(quán)利要求1的化合物
27.權(quán)利要求26的化合物，其中R3是
且R4是氫。
28.權(quán)利要求27的化合物，其為1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲；1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二甲氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲；1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二甲氨基-2，2-二甲基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲；1-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(2-甲基-哌啶-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲；1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-苯基-脲；1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙基脲；1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙基脲；鹽酸鹽；1-環(huán)己基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲；1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二溴-苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲；1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(2-二乙氨基-乙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲；1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(2-二乙氨基-乙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶并-7-基〕-3-乙基脲；1-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔(3-二甲氨基-丙基)-甲基-氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕-嘧啶-7-基}-脲；1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙基脲；1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-異丙基脲；1-〔2-(3-二甲氨基-丙氨基)-6-(2，6-二甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d 〕嘧啶-7-基〕-3-乙基脲；1-叔丁基-3-〔2-(3-二乙氨基-丙氨基)-6-(2，6-二甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲；1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲；和1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙基脲；
29.具有下列結(jié)構(gòu)式的權(quán)利要求27的化合物
30.權(quán)利要求29的化合物，其為1-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丁氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲；1-環(huán)己基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲；1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-異丙基-脲；1-芐基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲；1-烯丙基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲；1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d 〕嘧啶-7-基}-3-(4-甲氧基-苯基)-脲；1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-(3-甲氧基-苯基)-脲；1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d 〕嘧啶-7-基}-3-(2-甲氧基-苯基)脲；1-(4-溴-苯基)-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲；1-(4-氯-苯基)-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲；1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d 〕嘧啶-7-基}-3-對甲苯基-脲；1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-辛基-脲；1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-(4-三氟甲基-苯基)-脲；1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-乙基-脲；1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3，3-二乙基-脲；1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-萘-1-基-脲；1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-苯基-脲；1-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲；1-金剛烷-1-基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲；和1-叔丁基-3-{2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-6-(2，3，5，6-四甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲。
31.具有下列結(jié)構(gòu)式的權(quán)利要求1的化合物
32.權(quán)利要求31的化合物，其為6-(4-甲氧基苯基)-N7甲基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺。
33.具有下列結(jié)構(gòu)式的權(quán)利要求1的化合物
34.權(quán)利要求33的化合物，其為2-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-氨基-4，5-二氫噁唑；和6-(2，6-二氯苯基)-N2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-N7-(5，6-二氫-4H-〔1，3〕噁嗪-2-基)吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺。
35.具有下列結(jié)構(gòu)式的權(quán)利要求1的化合物
36.權(quán)利要求35的化合物，其為1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-(3-嗎啉-4-基-丙基)-硫脲；1-丁基-3-〔7-(3-丁基-脲基)-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕-脲；1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-丙基-脲；1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-嗎啉-4-基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲；1-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-硫脲；1-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔N-(3-二甲氨基丙基)-N-甲氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲；1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-(3-嗎啉-4-基-丙基)-硫脲；及1-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔N-(3-二甲氨基丙基)-N-甲氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲。
37.具有下列結(jié)構(gòu)式的權(quán)利要求1的化合物
38.權(quán)利要求3 7的化合物，其為1-〔2-氨基-6-(吡啶-2-基)-吡啶并〔2，3-d〕-嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；1-〔2-氨基-6-(吡啶-3-基)-吡啶并〔2，3-d〕-嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；以及1-〔2-氨基-6-(吡啶-4-基)-吡啶并〔2，3-d〕-嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲。
39.具有下列結(jié)構(gòu)式的權(quán)利要求1的化合物
40.權(quán)利要求39的化合物，其為N-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基-N”-乙基-胍；N’-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-{3-(二乙氨基)-丙氨基}-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-N，N-二甲基-甲脒；N’-〔6-(2，6-二氯苯基)-7-(二甲氨基)甲氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕-N，N-二甲基甲脒；和N’-〔7-(3-叔丁基脲基)-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕-N，N-二甲基甲脒。
41.具有下列結(jié)構(gòu)式的權(quán)利要求1的化合物
42.權(quán)利要求41的化合物，其為1-叔丁基-3-〔〔6-(2，6-二氯苯基)-2-苯氨基〕-吡啶并〔2，3-d 〕嘧啶-7-基〕-脲。
43.具有下列結(jié)構(gòu)式的權(quán)利要求1的化合物
44.權(quán)利要求43的化合物，其為1-〔2-氨基-6-(2，3，5，6-四甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；1-〔2-氨基-6-(2，4，6-三甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；和1-〔2-氨基-6-(2，3，6-三氯-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲。
45.權(quán)利要求1的化合物，其為丙烷-1-磺酸〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-酰胺。
46.包含權(quán)利要求1的化合物連同其醫(yī)藥上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑的藥物制劑。
47.權(quán)利要求46的制劑，其中使用B是NR3R4的化合物。
48.權(quán)利要求47的制劑，其中應(yīng)用X是CH的化合物。
49.權(quán)利要求48的制劑，其中應(yīng)用Ar是有下列結(jié)構(gòu)式的可被取代的苯環(huán)的化合物
50.權(quán)利要求49的制劑，其中應(yīng)用R2和R4是氫，并且R1和R3獨(dú)自是氫、C1-C6烷基，
而R8是C1-C6烷基或-NR5R6的化合物。
51.權(quán)利要求47的制劑，其中利用X是N的化合物。
52.權(quán)利要求51的制劑，其中利用Ar為下式任意取代的苯環(huán)的化合物
53.權(quán)利要求52的制劑，其中利用R2和R4是氫，R1和R3各自是氫、C1-C6烷基、
而R8是C1-C6烷基或-NR5R6的化合物。
54.治療包括動(dòng)脈粥樣硬化和外科手術(shù)后再狹窄在內(nèi)的血管平滑肌增殖性疾病的方法，其包括給患有這些疾病的宿主投用單位劑量形式的治療有效量的權(quán)利要求1的化合物。
55.抑制細(xì)胞增殖和遷移的方法，其包括給患有這些病狀的宿主投用單位劑量形式的治療有效量的權(quán)利要求1的化合物。
56.治療牛皮癬的方法，其包括給患有牛皮癬的宿主投用治療有效量的權(quán)利要求1的化合物。
57.抑制表皮生長因子受體酪氨酸激酶的方法，其包括給需要這種處理的哺乳動(dòng)物投用有效抑制量的權(quán)利要求1的化合物。
58.抑制Erb-B2或Erb-B3或Erb-B4酪氨酸激酶的方法，其包括給有需要的哺乳動(dòng)物投用有效抑制量的權(quán)利要求1的化合物。
59.抑制蛋白質(zhì)酪氨酸激酶的方法，其包括給有需要的哺乳動(dòng)物投用有效抑制量的權(quán)利要求1的化合物。
60.抑制C-src酪氨酸激酶的方法，其包括給有需要的哺乳動(dòng)物投用有效抑制量的權(quán)利要求1的化合物。
61.抑制V-src酪氨酸激酶的方法，其包括給有需要的哺乳動(dòng)物投用有效抑制量的權(quán)利要求1的化合物。
62.抑制堿性成纖維細(xì)胞生長因子和/或酸性成纖維細(xì)胞生長因子受體酪氨酸激酶的方法，其包括給有需要的哺乳動(dòng)物投用有效抑制量的權(quán)利要求1的化合物。
63.治療哺乳動(dòng)物的細(xì)菌感染的方法，其包括投用抗細(xì)菌有效量的權(quán)利要求1的化合物。
64.治療哺乳動(dòng)物的血管再狹窄的方法，其包括投用有效量的權(quán)利要求1的化合物。
65.治療氣球血管成形術(shù)后冠狀動(dòng)脈再狹窄的方法，其包括給需要治療的病人投用有效量的權(quán)利要求1的化合物。
66.抑制正常器官移植后血管狹窄的方法，其包括投用有效量的權(quán)利要求1的化合物。
67.抑制旁路移植物狹窄的方法，其包括給需要治療的病人投用有效量的權(quán)利要求1的化合物。
68.抑制靜脈移植后狹窄的方法，其包括投用有效抑制量的權(quán)利要求1的化合物。
69.抑制血管成形術(shù)后外周血管狹窄的方法，其包括投用有效量的權(quán)利要求1的化合物。
70.抑制血小板衍生的生長因子受體酪氨酸激酶的方法，其包括給有其需要的哺乳動(dòng)物投用權(quán)利要求1的化合物。
全文摘要
6－芳基吡啶并[2,3－d]嘧啶和1,5－二氮雜萘是蛋白質(zhì)酪氨酸激酶的抑制劑,因此可用于治療由之介導(dǎo)的細(xì)胞增殖。這些化合物特別適用于治療動(dòng)脈粥樣硬化、再狹窄、牛皮癬,以及細(xì)菌感染。
文檔編號(hào)A61K31/505GK1169726SQ95196230
公開日1998年1月7日 申請日期1995年11月13日 優(yōu)先權(quán)日1994年11月14日
發(fā)明者C·J·布蘭克雷, A·M·朵和提, J·M·哈姆比, R·L·帕內(nèi)克, M·C·施洛德, H·D·H·朔瓦勒特, C·闊諾里 申請人:沃尼爾·朗伯公司