專利名稱：氨基酸組合物及其在臨床營養(yǎng)中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及特殊氨基酸在藥物或營養(yǎng)制劑的制備中的應(yīng)用，這些藥物或營養(yǎng)制劑可治療性施用于患多種疾病和疾病狀態(tài)的病人。
現(xiàn)已出乎意料地發(fā)現(xiàn)，特別地，甘氨酸適合防止和/或?qū)⒍喾N疾病狀態(tài)和由TNF水平升高誘導(dǎo)的損傷性或其它疾病狀態(tài)的代謝性效應(yīng)降至最低。
鑒于上述效應(yīng)，提供了包含甘氨酸的藥物組合物，制劑和食物以及使用甘氨酸的方法。為在本發(fā)明的組合物、制劑、食物和方法中應(yīng)用，甘氨酸方便地以游離氨基酸形式，處于甘氨酸前體形式，特別是丙氨酸或絲氨酸，同樣也制成游離氨基酸形式，所述氨基酸的生理學(xué)上可接受鹽形式，或所述氨基酸和/或其生理學(xué)上可接受鹽的混合物形式使用。甘氨酸優(yōu)選以游離氨基酸形式，生理學(xué)可接受鹽形式或游離氨基酸形式的甘氨酸與生理學(xué)上可接受鹽形式的甘氨酸的混合物形式應(yīng)用，最優(yōu)選甘氨酸處于游離氨基酸形式使用。
后文使用的術(shù)語“本發(fā)明的氨基酸”指處于游離氨基酸形式和/或生理學(xué)上可接受鹽形式的甘氨酸，丙氨酸和/或絲氨酸。
本發(fā)明因此提供在藥物或營養(yǎng)制劑制備中選自包含甘氨酸、丙氨酸或絲氨酸的至少一種氨基酸或其生理學(xué)上可接受鹽的應(yīng)用。這種藥物或營養(yǎng)制劑用于在腫瘤壞死因子(TNF)水平高于調(diào)節(jié)生理體內(nèi)平衡和局部炎癥的水平的病人中降低TNF水平。這種TNF水平降低的獲得尤其可通過抑制或降低(i)巨噬型細(xì)胞類產(chǎn)生的腫瘤壞死因子(TNF)；(ii)TNF從巨噬型細(xì)胞類的釋放；和/或(iii)TNF被TNF受體的結(jié)合。
“高于調(diào)節(jié)生理體內(nèi)平衡和局部炎癥的水平”是指高于調(diào)節(jié)體溫、睡眠和食欲的生理節(jié)律最低所需或在產(chǎn)生或分泌TNF的并缺乏遠(yuǎn)離這些細(xì)胞的全身性炎癥效應(yīng)的，細(xì)胞的鄰近細(xì)胞中行使自分泌和旁分泌作用最低所需的TNF量。
本發(fā)明還提供選自包含甘氨酸、丙氨酸和絲氨酸的至少一種氨基酸或其生理學(xué)上可接受鹽在制備藥物或營養(yǎng)制劑中的應(yīng)用。這些藥物或營養(yǎng)制劑用于防止或降低巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)的-TNF介導(dǎo)的-至少一種蛋白的產(chǎn)生，這些蛋白選自白介素1，白介素2，白介素6，白介素8，白介素10，內(nèi)皮細(xì)胞，血小板和白細(xì)胞選擇蛋白，白細(xì)胞功能相關(guān)抗原1，極遲活化抗原4，細(xì)胞間粘附分子，血小板因子4，嗜中性細(xì)胞吸引/激活蛋白，Sialyl-Lewis-X，γ干擾素誘導(dǎo)的多肽，巨噬細(xì)胞炎性蛋白α和β，上皮細(xì)胞衍生的嗜中性細(xì)胞吸引劑，粒細(xì)胞趨化蛋白2，單核細(xì)胞趨化蛋白1，血管細(xì)胞粘附分子1，和淋巴細(xì)胞功能抗原3。
雖然按照本發(fā)明的應(yīng)用特別涉及血中的巨噬細(xì)胞類(單核細(xì)胞或單核吞噬細(xì)胞)，膽肝(庫否細(xì)胞)，神經(jīng)系統(tǒng)(星形膠原細(xì)胞)，消化系統(tǒng)(腸系膜/腸)，心臟，腎和骨(骨細(xì)胞衍生的巨噬細(xì)胞)，所有產(chǎn)生，結(jié)合或釋放TNF的細(xì)胞均為本發(fā)明的氨基酸的靶細(xì)胞。特別地設(shè)想到，TNF對肺衍生或定位于肺的巨噬細(xì)胞的產(chǎn)生，釋放或結(jié)合，將因施用按照本發(fā)明的藥物或制劑于病人而受影響。
本發(fā)明還提供一種方法，用于降低內(nèi)毒素性休克和/或缺氧性再灌注損傷，特別是創(chuàng)傷(多處創(chuàng)傷，燒傷和手術(shù)后病人以及敗血癥病人)后的死亡危險(xiǎn)，包括施用有效量的本發(fā)明的氨基酸。內(nèi)毒素性休克和缺氧性再灌注損傷均為可導(dǎo)致病人死亡并涉及TNF水平升高的疾病。
本發(fā)明還提供至少一種選自甘氨酸、丙氨酸和絲氨酸的氨基酸，或其生理學(xué)上可接受鹽在制備藥物或營養(yǎng)制劑中的應(yīng)用，這些藥物或營養(yǎng)制劑用于在需要這種治療的病人中防止或降低由于飲酒過多所致肝病和其所導(dǎo)致的腸或胰腺疾病的危險(xiǎn)。對于此適應(yīng)癥，甘氨酸和/或絲氨酸或其生理學(xué)上可接受鹽的應(yīng)用是優(yōu)選的，而甘氨酸或其生理學(xué)上可接受鹽的應(yīng)用是特別優(yōu)選的。
本發(fā)明還提供至少一種選自甘氨酸、丙氨酸和絲氨酸的氨基酸，或其生理學(xué)上可接受鹽在制備藥物或營養(yǎng)制劑中的應(yīng)用，這些藥物或營養(yǎng)制劑用于在需要這種治療的病人中防止或降低乙醇毒性。對于此適應(yīng)癥，甘氨酸和/或絲氨酸或其生理學(xué)上可接受鹽的應(yīng)用是優(yōu)選的，而甘氨酸或其生理學(xué)上可接受鹽的應(yīng)用是特別優(yōu)選的。
本發(fā)明也提供選自甘氨酸、丙氨酸和絲氨酸的至少一種氨基酸，或其生理學(xué)上可接受鹽在藥物或營養(yǎng)制劑制備中的應(yīng)用，這些藥物或營養(yǎng)制劑用于在需要這種治療的病人中在乙醇進(jìn)入全身血液循環(huán)前從胃中消除乙醇。
本發(fā)明還提供了本發(fā)明的氨基酸作為用于治療乙醇毒性的食物、軟飲料、維生素或藥物制劑的添加劑的應(yīng)用，以及采用有效量的本發(fā)明的氨基酸防止乙醇毒性的方法。
優(yōu)選將本藥物或制劑以使本發(fā)明的氨基酸降低循環(huán)系統(tǒng)中TNF水平至低于250pg/ml(±10％)的量施用于病人，特別適用于遭受嚴(yán)重(II或III度)燒傷的創(chuàng)傷病人，在這些病人中可能已有一些細(xì)菌內(nèi)毒素漏入體循環(huán)中但卻無明顯的敗血癥臨床表現(xiàn)。更優(yōu)選本發(fā)明的氨基酸降低循環(huán)系統(tǒng)中的TNF水平至低于80pg/ml(±10％)，還更優(yōu)選TNF水平被降低至20pg/ml(±10％)以下。技術(shù)人員熟知如何檢測TNF水平，特別是通過公知的酶聯(lián)免疫吸附或放射免疫測定法。
本發(fā)明還提供選自甘氨酸、丙氨酸或絲氨酸的至少一種氨基酸或其生理學(xué)上可接受鹽在用于防止或減輕TNF誘導(dǎo)的(acturial)同種異體移植排異的藥物或營養(yǎng)制劑制備中的應(yīng)用。同種異體移植可涉及任何器官，但對病人最有意義的見于涉及肺、心臟、肝、腸/腸系膜和腎的移植或注射手術(shù)情況中。
在本藥物或制劑施用于移植病人的情況，適宜進(jìn)一步包含至少一種下列化合物針對TNF產(chǎn)生的中和抗體，TNF可溶性受體或其衍生物或一部分，和環(huán)狀多肽免疫抑制因子。適合包含在本藥物中的公知的環(huán)狀多肽免疫抑制因子的一個實(shí)例是環(huán)胞霉素，或其有效衍生物。一種特別適合的TNF可溶性受體包含一種合成二聚可溶性融合蛋白結(jié)構(gòu)，該結(jié)構(gòu)將兩個p60TNF受體用一個IgG分子的Fc片段結(jié)合在一起。此融合蛋白結(jié)構(gòu)具有更高的親合力，并且與天然單體TNF受體(p80或p60)或抗-TNF抗體兩者相比是TNF生物活性的更強(qiáng)抑制因子。
本營養(yǎng)制劑或藥物可預(yù)防性地，即術(shù)前，或在急性期，即術(shù)后，也可在兩種情況下都用藥。
本營養(yǎng)制劑或藥物可經(jīng)胃腸道或胃腸外向病人用藥。優(yōu)選經(jīng)胃腸用藥途徑，特別是隨后或預(yù)防性治療，特別考慮的經(jīng)胃腸用藥途徑是口服用藥，經(jīng)鼻用藥和/或管飼。該藥物或制劑方便地以水溶液形式用藥。因此，適合經(jīng)胃腸應(yīng)用的形式的藥物或制劑優(yōu)選為水性或?yàn)榉蹌┬问?，而粉劑方便地在使用前加入水中。特別地，對于在管飼中使用，加水總量取決于病人的液體需求和疾病。應(yīng)認(rèn)識到，對于緊急治療，優(yōu)選胃腸外應(yīng)用途徑。另外，例如當(dāng)目標(biāo)為控制慢性內(nèi)毒素血癥效應(yīng)時(shí)，也適合胃腸外應(yīng)用途徑。
該藥物或制劑也可配制為每24小時(shí)向病人輸送1至80g本氨基酸。應(yīng)用的藥物或制劑的量在很大程度上取決于病人的特殊需求。本發(fā)明的氨基酸的這種每日總量適合所希望的效應(yīng)的治療和預(yù)防/預(yù)治療。在該藥物或制劑包含本發(fā)明的一種氨基酸(L-構(gòu)型)時(shí)，可按照使病人血漿中該氨基酸濃度升至0.5和2.0mM，優(yōu)選1.0mM的劑量向病人用藥。當(dāng)期望比此更高濃度時(shí)，也期望如果氨基酸濃度提高將獲得顯著臨床效果，作為施用本制劑或藥物的后果，因此其范圍在1.2至1.5mM。在創(chuàng)傷，高分解代謝病人中，即使是將血漿甘氨酸、絲氨酸或丙氨酸水平升高至相當(dāng)于健康個體血漿甘氨酸水平的約0.2-0.3mM也是有益的。
最優(yōu)選的用于摻入供按照本發(fā)明使用的藥物或制劑的本發(fā)明氨基酸是甘氨酸或其生理學(xué)上可接受鹽。
通常，需要將本發(fā)明的氨基酸與一或多種下列成分合并使用(i)ω-3多不飽合脂肪酸(PUFAs)，希望與ω-6PUFAs混合在一起；(ii)L-精氨酸或其它與多胺合成相關(guān)的生理學(xué)上可接受化合物，或其混合物；和(iii)一種核堿基(nucleobase)來源。
使用包含本發(fā)明的氨基酸加上精氨酸或其它與多胺合成相關(guān)的生理學(xué)上可接受化合物如烏氨酸的藥物或營養(yǎng)制劑是優(yōu)選的。使用包含本發(fā)明的氨基酸，精氨酸或鳥氨酸以及ω-3多不飽合脂肪酸(PUFAs)的藥物或營養(yǎng)制劑也是優(yōu)選的。
適合與本發(fā)明的氨基酸一同使用的核堿基來源包含或包括天然核堿基、核苷、核苷酸、RNA、DNA，其等價(jià)物和/或包含一或多種這些化合物的混合物。
天然核堿基包括嘌呤腺嘌呤和烏嘌呤以及嘧啶胞嘧啶，胸腺嘧啶和尿嘧啶。當(dāng)核堿基來源為游離堿基形式時(shí)，尿嘧啶是優(yōu)選的。
天然核苷包括核糖核苷腺苷、烏苷、尿苷和胞苷以及脫氧核糖核苷脫氧腺苷，脫氧鳥苷、脫氧胸苷和脫氧胞苷。
天然核苷酸包括天然核苷的磷酸酯，如單磷酸腺苷酸(AMP)，鳥苷酸(GMP)，尿苷酸(UMP)，胞苷酸(CMP)，脫氧胸苷酸(dTMP)脫氧胞苷酸(dCMP)，和天然核苷的二磷酸和三磷酸酯，如ADP和ATP。
優(yōu)選經(jīng)提純的核堿基來源，如酵母。然而，其它來源如肉類等也可使用。優(yōu)選核堿基來源為RNA。
因而，本發(fā)明提供包含有效量的下述物質(zhì)的藥物或營養(yǎng)制劑(a)本發(fā)明的一種氨基酸(成分(a))以及一或多種下列成分(b)ω-3PUFAs，最好與ω-6PUFAs混合(成分(b))；(c)精氨酸或其它與多胺合成相關(guān)的生理學(xué)上可接受化合物，或其混合物(成分(c))；和(d)一種核堿基來源(成分(d))。
所述藥物和營養(yǎng)制劑在下文稱為“本發(fā)明的食物”。
劑量應(yīng)足以使該藥物或營養(yǎng)制劑降低病人中的腫瘤壞死因子(TNF)水平，在這些病人中TNF水平高于調(diào)節(jié)生理平衡和局部炎癥的水平。
這種藥物或營養(yǎng)制劑的單位劑量優(yōu)選包含1.5至80份重量的成分(a)以及選自(b)至(d)的下列量的一種或多種成分0.1至20份重量的成分(b)，3至40份重量的成分(c)和0.1至4.0份重量的成分(d)。特別優(yōu)選的單位劑量包含1.5至80份重量的成分(a)以及選自(b)至(d)的下列量的一或多種成分2至5份重量的成分(b)，7.5至20份重量的成分(c)和1.7至2.0份重量的成分(d)。
化合物(a)至(d)每日用藥量方便地對應(yīng)于成分(a)1.5至80g，成分(b)0.1至20g，優(yōu)選2至5g，成分(c)3至40g，優(yōu)選7.5至20g，和成分(d)0.1至4.0g，優(yōu)選1.7至2.0g。
對于成分(d)，上述劑量適用于RNA，DNA，核苷或核苷酸。對于核堿基，1重量單位的核堿基被認(rèn)為等價(jià)于2.5至3重量單位的RNA，DNA，核苷或核苷酸。
當(dāng)使用包含一種本發(fā)明的氨基酸以及上述成分(b)，(c)和(d)之一或多種的藥物或營養(yǎng)制劑時(shí)，這種藥物或營養(yǎng)制劑在1個單位劑量中方便地包含(a)1.5至80份重量的選自甘氨酸、丙氨酸或絲氨酸組的一或多種氨基酸，處于游離形式或生理學(xué)上可接受鹽形式，或其混合物，以及選自包含下列成分的組的一或多種化合物(b)2至5份重量的ω-3多不飽合脂肪酸；
(c)7.5至20份重量的L-精氨酸或L-鳥氨酸，或其混合物；和(d)1.7至2.0份重量的RNA。
優(yōu)選的藥物或營養(yǎng)制劑在單位劑量中包含(a)選自包含甘氨酸、丙氨酸和絲氨酸的組的1.5至80份重量的一種氨基酸，處于游離形式或生理學(xué)上可接受鹽形式，或其混合物，以及(c)3至40份重量，優(yōu)選7.5至20份重量的精氨酸或等當(dāng)量的與多胺合成相關(guān)的一或多種其它生理學(xué)上可接受化合物，或等當(dāng)量的精氨酸與這種化合物的混合物。
更優(yōu)選本發(fā)明的藥物或營養(yǎng)制劑以重量比為1∶2至4∶1包含成分(a)和成分(c)，特別優(yōu)選重量比為1∶1至2∶1。
更優(yōu)選的藥物或營養(yǎng)制劑在單位劑量中包含(a)1.5至80份重量的選自包含甘氨酸、丙氨酸和絲氨酸的一種氨基酸，處于游離形式或生理學(xué)上可接受鹽形式，或其混合物，以及(b)0.1至20份重量，優(yōu)選2至5份重量的ω-3PUFAs；和(c)3至40份重量，優(yōu)選7.5至20份重量的精氨酸或等當(dāng)量的與多胺合成相關(guān)的一或多種其它生理學(xué)上可接受化合物；或等當(dāng)量的精氨酸與這種化合物的混合物。
方便地保護(hù)ω-3PUFAs以防止過氧化作用。
保護(hù)ω-3PUFAs以防止過氧化作用的生理學(xué)上可接受方法在本領(lǐng)域中是公知的，這些方法包括生理學(xué)上可接受的對ω-3PUFAs的微包被和生理學(xué)上可接受的抗氧化劑的應(yīng)用。
適合用作生理學(xué)上可接受微膠囊劑的典型實(shí)例是淀粉。微膠囊包裝可按本來已知的方式起作用。微膠囊包裝可按本來已知的方法包被，通過生理學(xué)上可接受的包被劑如阿拉伯膠。
適合用于本發(fā)明方法中的抗氧化劑典型實(shí)例包括抗氧化劑維生素如維生素C，維生素E或其混合物。
加入的抗氧化劑量應(yīng)是以防止ω-3PUFAs的過氧化作用。這種量易于計(jì)算。通常，為方便起見，防止過氧化作用所使用的抗氧化劑以過量使用。應(yīng)認(rèn)識到任何其它與ω-3PUFAs一起施用的藥物的存在可能要求調(diào)整使用的抗氧化劑量。
ω-3PUFAs可以適合ω-3PUFAs生理應(yīng)用的形式采用，如，以游離酸形式，以甘油三酯形式，或以生理學(xué)上可接受的ω-3PUFAs天然來源形式。這種天然來源包括亞麻子油和魚油如步魚油，鮭魚油，鯖魚油，金槍魚油，鱈魚肝油和鳀油。所述天然來源，特別是魚油，包含大量的ω-3脂肪酸。在ω-3PUFAs以甘油三酯形式采用的情況，所述甘油三酯可包含與其它生理學(xué)上可接受脂肪酸的酯。優(yōu)選的ω-3PUFAs包括二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)，以游離酸形式，以甘油三酯形式或以具有高EPA和/或DHA含量的天然來源形式存在。
當(dāng)本發(fā)明的氨基酸以藥物形式施用時(shí)，這種藥物每100克包含1至99克本發(fā)明的氨基酸。
通常，以制劑食物形式施用本發(fā)明的食物可獲得有利的效果，這種制劑食物根據(jù)具體情況可為完全制劑飲食(即，食物補(bǔ)充基本所有需要的能量，氨基酸，維生素，礦物質(zhì)和微量元素)或食物補(bǔ)充。該食物方便地采用水溶液形式。一種制劑食物可包含一種碳水化合物源，脂質(zhì)脂肪(脂肪源)和蛋白質(zhì)(氮源)，和至少一種選自包含甘氨酸、L-丙氨酸和L-絲氨酸的氨基酸，或其生理學(xué)上可接受鹽，其特征在于該酸或鹽以約每100g 0.5至10g的量存在于制劑食物中。該配制食物優(yōu)選進(jìn)一步包含其它營養(yǎng)學(xué)上有利的成分如維生素，礦物質(zhì)，微量元素，纖維(優(yōu)選可溶性纖維)。
適當(dāng)?shù)吹膶?shí)例包括營養(yǎng)學(xué)上可接受的蛋白如大豆或乳清來源的蛋白，酪蛋白酸鹽(Caseinate)和/或蛋白水解產(chǎn)物。適當(dāng)?shù)奶妓衔镌窗ㄌ侨琨溠刻呛?。適當(dāng)?shù)闹緛碓磳?shí)例包括甘油三酯，以及二-和單甘油酯。
適合摻入本發(fā)明的藥物或制劑的維生素實(shí)例包括營養(yǎng)上可接受的維生素E，維生素A，維生素D，維生素K，葉酸，硫胺，核黃素，維生素B1、B2、B6和B12，煙堿酸，生物素和泠酸。
適合摻入本藥物或制劑的礦物元素和微量元素實(shí)例包括營養(yǎng)學(xué)上可接受形式的鈉、鉀、鈣、磷、鎂、錳、銅、鋅、鐵、硒、鉻和鉬。
特別地，本藥物或制劑優(yōu)選包含β-胡蘿卜素(維生素A)，維生素E，維生素C，硫胺，維生素B12，膽堿，硒和鋅的營養(yǎng)學(xué)上可接受形式。
本文使用的術(shù)語“可溶性纖維”是指能在結(jié)腸中基本被酵解最終產(chǎn)生短鏈脂肪酸的纖維。適當(dāng)可溶性纖維的實(shí)例包括果膠，瓜爾豆膠，刺槐豆膠，黃原增膠，可被或不被水解。對于成人，每日可溶性纖維量方便地在3至30g范圍內(nèi)。
應(yīng)認(rèn)識到ω-3PUFAs可以高于上述的劑量施用，并且這種更高的劑量一般不損害所期望的作用或產(chǎn)生不期望的副作用。
在本發(fā)明的制劑中特別適合用作成為(c)的化合物包括L-精氨酸和L-鳥氨酸，最優(yōu)選L-精氨酸。成分(c)可采取游離形式，生理學(xué)上可接受鹽形式，如磷酸，構(gòu)櫞酸，酒石酸，富馬酸，己二酸或乳酸鹽形式，或小肽形式。優(yōu)選采用游離形式的L-精氨酸。
本文使用的術(shù)語小肽指具有2至6，優(yōu)選2至4個氨基酸的肽。
如已指出的，ω-3PUFAs方便地以魚油形式用藥，針對過氧化作用保護(hù)或未保護(hù)。這種魚油也包含ω-6PUFAs。
ω-6PUFAs對于免疫反應(yīng)和對于在手術(shù)情況下對感染的抵抗也具有有利效應(yīng)。因而，本發(fā)明的食物將方便地進(jìn)一步包含ω-6PUFAs。
為本發(fā)明的目的，ω-6PUFAs可處于游離酸形式或適合ω-6PUFAs生理應(yīng)用的形式，如甘油三酯。特別適合按照本發(fā)明的應(yīng)用的ω-6PUFAs的實(shí)例包括亞油酸和花生四烯酸，亞由酸最為優(yōu)選。適當(dāng)ω-6PUFA來源的實(shí)例在本領(lǐng)域是公知的。它們包括魚油和植物油。具有高亞油酸含量的ω-6PUFA來源實(shí)例如紅花油，葵花油，大豆油，棉籽油和玉米油。
以1.5～5.0g的每日總量施用ω-6PUFAs通常足以維持有利作用。上述藥物或營養(yǎng)制劑的單位劑量因此可進(jìn)一步包含1.5至5份重量的ω-6PUFAs。
除成分(b)，(c)和(d)和ω-6PUFAs外，還可向本發(fā)明的食物加入其它成分并對本發(fā)明的氨基酸的活性具有有利效應(yīng)。這種有利成分的一個實(shí)例是ω-9PUFAs。這種脂肪酸混合物的一種優(yōu)選天然來源是魚油。在口服應(yīng)用形式中，為口味和其它原因，該魚油優(yōu)選以膠囊形式應(yīng)用。
由于本發(fā)明的制劑食物意在用作營養(yǎng)補(bǔ)充(例如，手術(shù)前治療)，其提供的能量不應(yīng)過高以免不必要地抑制病人的食欲。該營養(yǎng)補(bǔ)充應(yīng)方便地包含提供總量為600至1000Kcal/日的能量來源。為用作完全制劑食物(如，術(shù)后治療，創(chuàng)傷治療)，本發(fā)明的食物方便地提供600至1500Kcal/日氮源，碳水化合物來源和脂質(zhì)來源對每日熱卡的供給可在很大范圍內(nèi)變動。在本發(fā)明的優(yōu)選制劑中，碳水化合物來源提供本制劑總能量供給的40～70％，氮和脂肪酸來源各提供總能量供給的15～40％。為用作完全食物，本發(fā)明的食物方便地以水溶液形式以500ml至3000ml的量給藥。為用作一種補(bǔ)充，可以粉末或液體形式給藥。
可按照本發(fā)明治療的病人具有升高的TNF水平的疾患或疾病包括下列骨質(zhì)疏松；關(guān)節(jié)炎；(癌)轉(zhuǎn)移；肺疾病如成人呼吸窘迫綜合癥(ARDS)；炎性腸病如潰瘍性結(jié)腸炎和克隆氏病；冠狀動脈疾病；肝硬化-不管是酒精性的還是病毒誘導(dǎo)的；敗血癥，包括內(nèi)毒素性休克；缺氧性再灌注損傷，在AIDS和癌癥病人中所見的消耗性綜合癥；肝炎；腎炎；病理性血管形成，損害骨髓的放療和化療等治療，器官排異；創(chuàng)傷，缺血后心臟損害；潰瘍癥；與神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)的退行性疾病如運(yùn)動神經(jīng)原疾病和多發(fā)性硬化；腦損傷和炎癥；胰腺炎；腎功能衰竭；糖尿?。恢酗L(fēng)；哮喘和感染。在敗血癥，內(nèi)毒素性休克；感染和缺氧性再灌注損傷的治療中獲得特別好的治療效果，特別是在內(nèi)毒素性休克和敗血癥中。在炎性腸病，敗血癥，慢性肝病。病理性血管形成，動脈粥樣硬化和創(chuàng)傷的治療中也獲得特別好的效果。感染可為損傷性感染，積膿，菌血癥，膿腫，敗血癥等。它們可由多種感染性因素引起，包括細(xì)菌、病毒、寄生蟲、真菌和內(nèi)毒素。
一般而言，本發(fā)明的氨基酸的治療適用于TNF水平可能會或確實(shí)至少短暫地高于調(diào)節(jié)生理平衡和局部炎癥所需水平的病人。這種病人包括如創(chuàng)傷性病人(多發(fā)創(chuàng)傷，燒傷，大手術(shù))；全身炎性反應(yīng)綜合征(SIRC)病人；敗血癥病人；成人呼吸窘迫綜合征(ARDS)病人；急性肝衰竭而不可能進(jìn)行預(yù)治療但卻期望急性效應(yīng)的病人；具感染危險(xiǎn)的病人如由于免疫抑制而抵抗力低下的病人，進(jìn)行放療和/或化療的病人，患糖尿病的病人，患蛋白營養(yǎng)不良的病人，胃腸癌手術(shù)病人，心血管手術(shù)病人，進(jìn)行移植的病人，由于攝入酒精過量而肝病危險(xiǎn)增加的病人和遭受人類免疫缺陷病毒相關(guān)感染的病人；和大手術(shù)過程，即任何需要全身麻醉的手術(shù)過程如心血管搭橋手術(shù)和大型上胃腸道手術(shù)，前后的病人。
含有本發(fā)明的氨基酸以及成分(c)的藥物或營養(yǎng)制劑的施用特別適用于骨質(zhì)疏松的治療。
甘氨酸或其它本發(fā)明的氨基酸在TNF水平高于調(diào)節(jié)生理平衡和局部炎癥所需的病人中對降低TNF水平的意外藥理學(xué)活性是有用的，在于它能夠減輕內(nèi)毒素血癥，缺氧性再灌注損傷和感染的效應(yīng)并降低內(nèi)毒素性休克和敗血癥的危險(xiǎn)，并從而降低或防止死亡的危險(xiǎn)。
上述本發(fā)明的氨基酸，特別是本發(fā)明的食物特別適用于擬行手術(shù)病人的治療。當(dāng)以營養(yǎng)補(bǔ)充的形式施用本發(fā)明的食物時(shí)，這種預(yù)治療最有效。該營養(yǎng)補(bǔ)充有利地施用3天或更長時(shí)間。通常，預(yù)治療開始于手術(shù)前3至6天，并且通過所述3-6天期間足以獲得期望的效果。為預(yù)治療或預(yù)防目的施用營養(yǎng)補(bǔ)充，這種營養(yǎng)補(bǔ)充含1.5g至80g本發(fā)明的氨基酸以及2至5g成分(b)(ω-3PUFAs)和/或成分(c)，補(bǔ)充每日7.5至20g L-精氨酸或L-鳥氨酸，通常將產(chǎn)生期望的效果。
這種營養(yǎng)補(bǔ)充可以并優(yōu)選也包含有效量的成分(d)，ω-6PUFAs或上述其它成分。
本營養(yǎng)補(bǔ)充可方便地以適合每日用藥3至4次的單位劑量形式用藥。由于本發(fā)明的食物包含能量來源，提供不超過1500Kcal/日是適當(dāng)?shù)?。除能量補(bǔ)充方面的限制外，用于降低TNF水平的本發(fā)明的食物補(bǔ)充可以方便地以上述完全制劑食物形式施用。
在大量酒精攝入的病人需要緊急治療的情況下，本發(fā)明的氨基酸可方便地經(jīng)胃腸道外施用。適合這種緊急治療的典型用藥形式為例如下文所公開的水溶液。
在期望通過甘氨酸誘導(dǎo)的胃中酒精消除作用而減少酒精攝入血液的情況下，本發(fā)明的氨基酸可方便地以常規(guī)口服用藥形式，如顆粒、片劑、膠囊，液體(包括湯和飲料如軟飲料，止渴飲料)、粉劑、制劑食物等形式提供。當(dāng)以生理學(xué)上可接受制劑形式如膠囊或片劑形式制劑時(shí)，這種制劑優(yōu)選包含按重量為0.2至90％，優(yōu)選按重量為30至50％的本發(fā)明氨基酸。通常，以每kg體重游離形式和/或生理學(xué)上可接受鹽形式施用選自甘氨酸、丙氨酸和絲氨酸的1或多種氨基酸0.01至5.0g，可獲得酒精(乙醇)從胃中的滿意消除。用藥方便地為口服，并在酒精攝入前。
典型的供口服用藥的藥物學(xué)可接受制劑形式將進(jìn)一步包含生理學(xué)上可接受的稀釋劑，載體，維生素，調(diào)味劑，色素和/或技術(shù)人員公知的適合摻入這種制劑的其它輔藥。
本發(fā)明的食物和制劑可以已知的方法，如混合各種成分，而獲得。
適合按照本發(fā)明的應(yīng)用特別是適合治療由于過量攝入酒精而肝病危險(xiǎn)增加的病人的典型制劑包括多種水溶液，這些水溶液主要包含按重量為0.1％至90％的至少一種選自甘氨酸、丙氨酸和絲氨酸的氨基酸，和藥物學(xué)可接受的鹽，用蒸餾水配衡。本發(fā)明的氨基酸可以溶液的濃縮形式存在，量為15至90％(按溶液的重量)。濃縮溶液適合稀釋為應(yīng)用形式或用于緊急治療。具有低含量(如0.1至5％)的本發(fā)明氨基酸的應(yīng)用形式通常適合預(yù)防性目的；溶液的濃縮形式具有較高含量(如5％至40％，按重量)的本發(fā)明氨基酸，通常更適合緊急治療。
適合包含在本發(fā)明的藥物或制劑中，特別是供胃腸道外應(yīng)用的其它制劑，包括輸注溶液如林格氏注射液，乳酸林格氏注射液，類晶體類，膠體類，或其它血漿替代物，以及或用每升輸注溶液約0.1至5.0g甘氨酸、絲氨酸和/或丙氨酸增強(qiáng)。林格氏液是一種滅菌溶液，含3.23～3.54g鈉(相當(dāng)于8.2～9.0g氯化鈉)，0.149～0.165g鉀(相當(dāng)于0.285～0.315g氯化鉀)，0.082～0.098g鈣(相當(dāng)于0.3～0.36g氯化鈣，以CaCl2·2H2O形式)，5.23～5.80g氯(作為NaCl、KCl和CaCl2·2H2O)，和足夠量的水以得到1000ml溶液。乳酸林格氏注射液是一種滅菌溶液，含2.85g～3.15g鈉(作為氯化物和乳酸)，0.141～0.173g鉀(相當(dāng)于0.27g～0.33g氯化鉀)，0.049～0.060g鈣(相當(dāng)于0.18g～0.22g CaCl2·2H2O)，2.31g～2.61g乳酸，3.68～4.08g氯化物(作為NaCl、KCl和CaCl2·2H2O)，以及足夠量的水以得到1000ml溶液。
與液體治療相關(guān)的術(shù)語類晶體類和膠體在本領(lǐng)域中是公知的。它們包含血漿替代物如Haemaccel(基于polygeline)和Gelofusine(基于明膠)。
通過參照下列特殊描述，本發(fā)明將被進(jìn)一步理解。實(shí)施例1.食物甘氨酸對大鼠中存活和肝損害的作用在注射LPS前3天雄性Sprague-Dawley大鼠(200-250g)被自由喂以按重量含酪蛋白為20％(對照食物)或按重量含5％甘氨酸和15％酪蛋白(甘氨酸食物)的粉狀食物。通過尾靜脈對這些大鼠注射脂多糖(分別為LPS；10，20和30mg/kg)，并在注射后24小時(shí)評價(jià)死亡率。如果大鼠存活24小時(shí)，則認(rèn)為是安全的，因?yàn)槲从^察到過晚期死亡。結(jié)果a)對于10mg/kg的LPS劑量，5％甘氨酸食物提供100％的保護(hù)，與對照組50％死亡率相比有顯著差異，P＜0.05。在20mg/kg的LPS劑量，5％甘氨酸食物組觀察到30％的死亡率而對照組觀察到70％的死亡率。在30mg/kg LPS劑量，甘氨酸治療組動物中死亡率增加至90％，對照組中為100％。b)對于存活者，測定肝酶AST(天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶；一種轉(zhuǎn)氨酶)作為肝損害的指標(biāo)。在喂以甘氨酸的大鼠中AST水平顯著降低(用10mg/kg LPS劑量處理的未治療喂養(yǎng)大鼠中為2000IU/L)。c)在平行實(shí)驗(yàn)系列中，甘氨酸食物對腫瘤壞死因子(TNF)的作用被測定。血清TNF通過ELISA測定。在注射10mg/kg LPS后，在用對照食物喂養(yǎng)的大鼠中血清TNF在注射后60分鐘迅速增加至超過6000pg/ml隨后再降至對照值。在用5％甘氨酸食物喂養(yǎng)的大鼠中這種增加被顯著抑制(至少50％；P＜0.05)，而且峰值在注射后150分鐘達(dá)得。d)供組織學(xué)檢查的肝和肺標(biāo)本在注射LPS(10mg/kg)后24小時(shí)采取并進(jìn)行蘇木精-伊紅染色。喂以對照食物的大鼠在肝中顯示很多壞死區(qū)和嗜中性細(xì)胞浸潤并在肺中顯示顯著的間質(zhì)水腫伴嗜中性細(xì)胞浸潤。喂以甘氨酸食物的大鼠與喂以對照食物的大鼠相比，在肝中顯示較少的壞死并顯示較輕的肺水腫。e)對于分別喂以對照食物和甘氨酸食物，并各自給予LPS注射(10mg/kg，通過尾靜脈靜脈內(nèi)注射)的兩組大鼠，通過HPLC測定血清甘氨酸濃度。用甘氨酸食物喂養(yǎng)而不進(jìn)行LPS處理的大鼠與用對照食物喂養(yǎng)而不進(jìn)行LPS處理的大鼠(150μM)相比顯示顯著更高的甘氨酸濃度(1892μM)。在LPS注射后6小時(shí)，用甘氨酸食物喂養(yǎng)的大鼠保持高濃度甘氨酸(1727±515μM)；在LPS注射后6小時(shí)，用對照食物喂養(yǎng)的大鼠血清甘氨酸濃度為278μM。實(shí)施例2.甘氨酸對低流-回流肝灌注模型中再灌注損傷的作用方法使用的動物雄性Sprague-Dawleg大鼠，體重180-210g，喂以Purina食物。大鼠在手術(shù)前禁食24小時(shí)。肝灌注在手術(shù)前用戊巴比妥鈉麻醉大鼠(50mg)，并手術(shù)取肝，在非再循環(huán)系統(tǒng)(Krebs-Henseleit，1932)中使用用氧氣-二氧化碳(95∶5)混合物飽和的Krebs-Henseleit碳酸氫鹽緩沖液(pH7.4，37℃)，通過插入門靜脈的導(dǎo)管進(jìn)行灌注。手術(shù)后，以約1ml/g/分的流速對肝灌注75分鐘(低流)。隨后，以正常流速(4ml/g/分)對肝灌注40分鐘(再流)。將甘氨酸溶于Krebs-Henseleit碳酸氫鈉緩沖液(pH7.4，37℃)中并在再流前10分鐘開始以使終濃度為0.06～2mM的速度連續(xù)灌注入肝中。乳酸脫氫酶(LDH)。在灌注液中的LDH活性使用標(biāo)準(zhǔn)酶技術(shù)(Bergmeyer，1988)檢測。將3ml灌注液與含15％三氯乙酸，0.375％硫巴比土酸和0.25N鹽酸的試劑徹底混合并在沸水浴中加熱15分鐘。冷卻后，以1000g離心樣本10分鐘并在535nm處測定上清液的吸光率。LDH釋放率以每小時(shí)每克肝濕重表達(dá)。臺盼藍(lán)分布時(shí)間和組織學(xué)方法為評價(jià)肝中的微循環(huán)和細(xì)胞死亡，在所有實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)將臺盼藍(lán)以0.2mM的終濃度輸注入肝(Belinsky等，1984)。記錄肝表面變?yōu)榫鶆蛏钏{(lán)色的時(shí)間。通過用Krebs-Henseleit緩沖液灌注額外的10分鐘去除過量染料。隨后，用1％聚甲醛灌注肝10分鐘，并將固定的組織埋入石蠟和加工供光鏡檢查。切片只用伊紅，即一種胞漿染料染色，以便臺盼藍(lán)能在破碎細(xì)胞的核中被鑒別出來。
在從肝門周圍或中央周圍區(qū)放射5個細(xì)胞的區(qū)中的所有間質(zhì)細(xì)胞核被鑒定為臺盼藍(lán)陽性或陰性。在任何給定區(qū)中著染的百分比通過著染的核數(shù)除以總細(xì)胞數(shù)來計(jì)算。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，根據(jù)需要使用Student’s-t-檢驗(yàn)或ANOVA。當(dāng)P＜0.05時(shí)認(rèn)為有顯著差異。結(jié)果在低流，再流灌注模型中甘氨酸對肝細(xì)胞損害的效應(yīng)。
在低流階段，LDH釋放很低(在75分鐘時(shí)約1IU/g/h)。然而，當(dāng)流速增加至4ml/g/分時(shí)，LDH釋放逐漸增加，在約30分鐘時(shí)達(dá)到新的穩(wěn)態(tài)。在對照組中在再灌注期間最大LDH釋放在35IU/g/h左右，但經(jīng)甘氨酸治療以劑量依賴方式顯著下降。當(dāng)甘氨酸濃度增加至2mM時(shí)，LDH釋放降至約5IU/g/h左右，半最大下降劑量為180μM甘氨酸。
臺盼藍(lán)攝取表明肝葉中細(xì)胞活性的不可逆喪失。在75分鐘的低流缺氧后再流40分鐘引起中央周圍區(qū)實(shí)質(zhì)細(xì)胞約30％的死亡，但僅影響預(yù)先為正常氧的肝門周圍區(qū)細(xì)胞的約2％。甘氨酸(2mM)的輸注降低中央周圍區(qū)中細(xì)胞死亡至9％?？傊l(fā)生于氧氣再導(dǎo)入預(yù)先缺氧的肝葉中央周圍區(qū)時(shí)的再灌注損傷可以劑量依賴方式通過緊急甘氨酸輸注而明顯降低。甘氨酸對臺盼藍(lán)分布的效應(yīng)當(dāng)在再灌注5分鐘后將臺盼藍(lán)輸注入肝時(shí)，臺盼藍(lán)分布時(shí)間(一種肝微循環(huán)的指標(biāo))在甘氨酸輸注肝中稍微但有顯著差異地低于對照組(在甘氨酸處理肝中約190秒而在對照中為225秒，P＜0.05，n＝5)。然而，當(dāng)臺盼藍(lán)在再灌注40分鐘結(jié)束時(shí)輸注時(shí)，這些值以劑量依賴方式被甘氨酸顯著降低。在對照組中臺盼藍(lán)均勻分布需要約460秒，而當(dāng)輸注2mM甘氨酸時(shí)該值降至約250秒。引起臺盼藍(lán)分布時(shí)間半最大下降的濃度也在約180μM。
在再灌注期間甘氨酸以劑量依賴方式使LDH釋放和細(xì)胞死亡幾乎完全最小化。因此，對于大鼠中低流，再流肝灌注模型中的再灌注損傷，甘氨酸具有強(qiáng)的細(xì)胞保護(hù)效應(yīng)。
臺盼藍(lán)分布時(shí)間以劑量依賴方式被甘氨酸降低，其半最大效應(yīng)類似于甘氨酸的細(xì)胞保護(hù)效應(yīng)(180μM)。由于臺盼藍(lán)分布時(shí)間不僅受肝微循環(huán)紊亂的影響，而且也受肝細(xì)胞損傷的影響，因此在再流僅5分鐘后測定臺盼藍(lán)分布時(shí)間，此時(shí)再灌注損傷很小。此值也被甘氨酸有顯著意義的降低，但程度較小，表明肝微循環(huán)改善。
與缺氧和再灌注損傷相關(guān)的其它可能機(jī)制如ATP耗竭和線粒體功能改變也得到了研究。膽汁產(chǎn)生，一種高能量依賴的步驟，不受甘氨酸影響，表明甘氨酸不減輕ATP耗竭，另外，氧攝取，即線粒體功能的一種指標(biāo)，也不被甘氨酸改變?？傊拾彼岣纳聘挝⒀h(huán)和防止依賴氧的再灌注損傷。實(shí)施例3.甘氨酸預(yù)處理對部分性肝缺血/再灌注和LPS注射后死亡率的作用在分別用對照食物和甘氨酸食物喂養(yǎng)3天后，使大鼠部分性缺血達(dá)90分鐘，在甲氧氟乙烷麻醉下。再灌注后6小時(shí)經(jīng)尾靜脈注射亞致死劑量的LPS(5mg/kg)。結(jié)果所有未注射LPS的對照組大鼠在90分鐘部分性肝缺血/再灌注后存活24小時(shí)(n＝4)。所有喂以對照食物并予以90分鐘部分性肝缺血/再灌注的大鼠在(亞致死量)LPS注射后24小時(shí)內(nèi)死亡(n＝4)。
用甘氨酸食物預(yù)處理顯著提高在相同條件下(90分鐘部分性肝缺血/再灌注并給予LPS注射)在觀察期間(注射后24小時(shí))的存活率(6只大鼠中5只存活)；P＜0.05，F(xiàn)isher’s檢驗(yàn))。實(shí)施例4.食物甘氨酸對酒精誘導(dǎo)的肝損害的作用4.1材料和方法a.動物在每只體重300至320g的雄性Wistar大鼠中，按Tsukamoto和French所述插入胃管。胃管經(jīng)皮下通至頸部背側(cè)并通過彈性系鏈裝置和旋轉(zhuǎn)接頭方式連接于輸入泵，使大鼠在代謝籠中能夠自由活動。用含乙醇的高脂肪液體食物對這些動物連續(xù)輸注4周。所有動物都受到符合慣例準(zhǔn)則的人道照管。b.食物使用Thompson和Reitz描述的液體食物。它含有玉米油作為脂肪(總卡路里的37％)，蛋白質(zhì)(23％)，碳水化合物(5％)，礦物質(zhì)和維生素，加上乙醇或等卡路里的麥芽糖-環(huán)糊精(35％)，下文中稱為液體對照食物。甘氨酸(按重量2或5％)被加至液體對照食物中；這種食物在下文分別稱為液體2％甘氨酸食物和液體5％甘氨酸食物。c.尿的收集和乙醇測定每日測定代表血中乙醇水平的尿中乙醇濃度。大鼠在能將尿與糞便分離的代謝籠中飼養(yǎng)，將24小時(shí)尿收集在含礦物油以防止蒸發(fā)的瓶中。每天上午9點(diǎn)更換尿液收集瓶并將1ml樣本于-20℃貯存于微管中供以后進(jìn)行乙醇測定。通過測定乙醇脫氫引起的NAD+向NADH的還原所致360nm處吸光率來確定乙醇濃度。d.血液收集和天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)通過尾靜脈每周收集血液并離心。血清置于微管中貯存于-20℃，直至通過標(biāo)準(zhǔn)酶方法測定AST。全血(100μl)也如下述測定乙醇，另外，當(dāng)在乙醇處理后第2和4周進(jìn)行肝活檢時(shí)也收集肝門脈血。e.呼吸，外周和門脈血，糞便和胃內(nèi)容物中的乙醇測定為測定呼吸中的乙醇濃度，強(qiáng)迫大鼠向密閉加熱室(37℃)中呼吸20秒，并用氣密閉注射器收集1ml呼吸氣。乙醇濃度通過氣相色譜(GC)測定。外周和門脈血中的乙醇也通過GC測定。將血液(100μl)與900μl蒸餾水在封閉燒瓶中混合37℃溫育30分鐘，收集1ml氣相并通過GC測定。大鼠糞便直接從肛門收集，在蒸餾水中勻漿并如上對血液所述溫育和測定。當(dāng)用乙醇處理后4周處死大鼠時(shí)也收集胃內(nèi)容物，并如對于血液所述進(jìn)行測定。f.血中甘氨酸濃度的測定在乙醇處理4周后，收集500μl血漿并貯存于-80℃，供通過HPLC測定血中甘氨酸濃度。在肝素化的血漿中甘氨酸的定量測定使用PICP-TAG(Waters，Milford，MA)方法進(jìn)行。血漿樣本首先用HCl水解，然后用異硫氰酸苯酯(PITC)衍生以產(chǎn)生苯硫代氨基甲?；?PTC)氨基酸。包括甘氨酸在內(nèi)的氨基酸通過自動化梯度反相高壓液相色譜法(HPLC)測定。g.病理學(xué)評價(jià)在用乙醇處理2和4周后對大鼠進(jìn)行肝活檢和尸檢。肝用福爾馬林固定，石蠟包埋并用蘇木精和伊紅染色以評價(jià)脂肪變性，炎癥和壞死。肝病理學(xué)按照Nanji等人所述進(jìn)行評價(jià)。如下脂肪變性(含脂肪的肝細(xì)胞百分比)＜25％＝1+；＜50％＝2+；＜75％＝3+；＞75％＝4+；炎癥和壞死每低倍視野1個灶＝1+；2或多個＝2+。h.統(tǒng)計(jì)學(xué)根據(jù)需要使用ANOVA或Student’s t-檢驗(yàn)確定統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。為病理學(xué)評分的比較，使用用于分級的Kruskal-Wallis ANOVA。在研究前選擇P＜0.05作為顯著差異的水平。4.2結(jié)果觀察到在此研究過程中，用液體對照食物，液體/甘氨酸食物和液體5％甘氨酸食物喂養(yǎng)的大鼠體重在第一周有一個下降的趨勢。在用酒精處理的隨后3周中體重穩(wěn)定不變。在不同研究組間體重?zé)o顯著差異。
在手術(shù)后第1周乙醇攝入逐漸增加至9～10g/kg/日。在2-4周攝入在10～13g/kg/日，各組間無顯著差異。在接受含5％甘氨酸的液體食物的大鼠中4周處理后血漿中甘氨酸濃度為779±66μmol/L，在用乙醇喂養(yǎng)的大鼠中為198±16μmol/L。
測定用液體對照食物和液體甘氨酸食物喂養(yǎng)的大鼠中每日尿乙醇濃度的代表性散點(diǎn)圖。在用液體對照食物喂養(yǎng)的大鼠中，即使乙醇輸注是連續(xù)的，乙醇水平仍以循環(huán)形式從0至大于300mg/dl波動。在用一種液體甘氨酸食物喂養(yǎng)的大鼠中，乙醇濃度很低但仍是循環(huán)的。平均尿乙醇濃度以劑量依賴方式顯著降低；通過用液體2％甘氨酸食物喂養(yǎng)獲得平均尿乙醇濃度下降50％，用液體5％甘氨酸食物獲得下降70％。
用液體對照食物喂養(yǎng)的大鼠中血清AST隨暴露時(shí)間而逐漸增加并在4周后達(dá)到183IU/L的水平(對照值70IU/L)。兩種甘氨酸治療在研究的每個點(diǎn)均顯著減弱這種增加。治療4周后，在用液體2％甘氨酸食物喂養(yǎng)的2％甘氨酸治療大鼠中血清AST水平為66IU/L，而在用液體5％甘氨酸食物喂養(yǎng)的組中為100’IU/L。
在用液體對照食物喂養(yǎng)的大鼠中，只在處理后2周觀察到輕度脂肪變性。在用所述液體對照食物處理4周后，在未用乙醇處理的對照大鼠中未出現(xiàn)明顯的脂肪變性。在用液體2％甘氨酸和液體5％甘氨酸食物喂養(yǎng)的大鼠中，脂肪變性減輕并且?guī)缀跬耆珱]有壞死和炎癥。用液體甘氨酸食物喂養(yǎng)后脂肪變性和壞死的減輕有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；由于變化性，在用液體甘氨酸食物喂養(yǎng)后只觀察到炎癥減輕的趨勢。
最后，在甘氨酸治療的大鼠中胃內(nèi)容物中的乙醇也明顯下降。因此，很明顯甘氨酸降低了胃中的乙醇濃度，可能是通過對乙醇代謝的作用。
表1在Tsukamoto-French模型中甘氨酸對大鼠中乙醇濃度的作用處理 呼吸氣 糞便尿 血液 胃上午24hr 尾 門靜脈乙醇 108±1282+21 184+12 211±16 199+45 357+65 761+625乙醇+ 5±4***15±11*26+25**24+8***21±13**10±7***26+41*5％甘氨酸從大鼠收集呼吸氣、糞便、血液和胃內(nèi)容物并通過液上氣相色譜測定。尿樣本用酶學(xué)法測定。從總共6只大鼠采取樣本。結(jié)果表達(dá)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差通過Student’s t-檢驗(yàn)比較乙醇與乙醇+甘氨酸喂養(yǎng)組大鼠的值。*P＜0.05，**P＜0.01；***P＜0.001。實(shí)施例5.胃腸道組合物在下列組合物中MM代表“礦物質(zhì)混合物”，SM代表“微量元素混合物”而VM代表“維生素混合物”。這三種混合物的成分如下MM成分g/100g麥芽糖糊精 34.40枸櫞酸/磷酸鉀 34.60二枸櫞酸鎂 8.20氯化鈣 8.00枸櫞酸/氯化鈉9.00枸櫞酸 3.50酒石酸膽堿 2.30VM成分g/100g麥芽糖糊精 43.44抗壞血酸鈉 35.00維生素E-Ac.50％ 16.00尼克酰胺 1.55乙酸維生素A 1.20Ca-D-泠酸(Panthothenat) 0.98維生素K1 1％ 0.71維生素B120.1％ 0.30維生素D30.28維生素B60.20維生素B10.17維生素B20.15葉酸 0.02生物素 0.01SM成分g/100g麥芽糖糊精 47.79鉬-酵母 18.00鉻-酵母9.20硫酸鋅 7.00硒-酵母7.00硫酸亞鐵(II) 6.92葡萄糖酸銅(II) 2.24硫酸鎂(II) 1.12氟化鈉 0.70碘化鉀 0.03包含甘氨酸的組合物成分 g/100g水77.40麥芽糖糊精10.10酪蛋白酸(Caseinates)鈉/鈣 4.60甘氨酸 3.00MM 2.00SM 0.05VM 0.10β-胡蘿卜素(Carotine) 0.03脂類棕櫚油 2.33葵花油 0.26乳化劑Nathin E 0.13100.00包含甘氨酸和精氨酸的組合物成分 g/100g水77.40麥芽糖糊精 8.93酪蛋白酸鈉/鈣 4.60甘氨酸 3.00精氨酸 1.17MM 2.00SM 0.05VM 0.10β-胡蘿卜素 0.03脂類棕櫚油 2.36葵花油 0.23乳化劑Nathin E 0.13100.00包含甘氨酸和魚油(ω-3脂肪酸)的組合物成分 g/100g水 77.40麥芽糖糊精 10.10酪蛋白酸鈉/鈣 4.60甘氨酸 3.00MM 2.00SM 0.05VM 0.10β-胡蘿卜素 0.03脂類棕櫚油 1.32葵花油 0.23乳化劑Nathin E 0.13魚油EPAX 3000TG 1.04100.00包含甘氨酸和RNA的組合物成分 g/100g水 77.40麥芽糖糊精 9.96酪蛋白酸鈉/鈣 4.60甘氨酸 3.00酵母提取RNA 0.14MM 2.00SM 0.05VM 0.10β-胡蘿卜素 0.03棕櫚油 2.33葵花油 0.26乳化劑Nathin E 0.13100.00包含甘氨酸，精氨酸和魚油(ω-3脂肪酸)的組合物成分 g/100g水 77.40麥芽糖糊精 8.93酪蛋白酸鈉/鈣 4.60甘氨酸 3.00精氨酸 1.17MM 2.00SM 0.05VM 0.10β-胡蘿卜素 0.03脂類棕櫚油 1.32葵花油 0.23乳化劑Nathin E 0.13魚油EPAX 3000TG 1.04100.00包含甘氨酸，精氨酸和RNA的組合物成分 g/100g水 77.40麥芽糖糊精 8.79酪蛋白酸鈉/鈣 4.60甘氨酸 3.00精氨酸 1.17酵母提取RNA 0.14MM 2.00SM 0.05VM 0.10β-胡蘿卜素 0.03脂類棕櫚油 2.33葵花油 0.26乳化劑Nathin E 0.13100.00包含甘氨酸，RNA和魚油(ω-3脂肪酸)的組合物成分 g/100g水 77.40麥芽糖糊精 9.96酪蛋白酸鈉/鈣 4.60甘氨酸 3.00酵母提取RNA 0.14MM 2.00SM 0.05VM 0.10β-胡蘿卜素 0.03脂類棕櫚油 1.32葵花油 0.23乳化劑Nathin E 0.13魚油EPAX 3000TG 1.04100.00包含甘氨酸，精氨酸，RNA和魚油(ω-3脂肪酸)的組合物成分 g/100g水 77.40麥芽糖糊精 8.79酪蛋白酸鈉/鈣 4.60甘氨酸 3.00精氨酸 1.17酵母提取RNA 0.14MM 2.00SM 0.05VM 0.10β-胡蘿卜素 0.03脂類棕櫚油 1.32葵花油 0.23乳化劑Nathin E 0.13魚油EPAX 3000TG 1.04100.00如上文所述，魚油是ω-3PUFAs的天然來源而葵花油是ω-6PUFAs的天然來源。
本發(fā)明以關(guān)于甘氨酸抑制TNF的增加從而使大鼠中內(nèi)毒素性休克和缺血性再灌注損傷作用降至最低的能力為例進(jìn)行闡述，但利用本公開的技術(shù)人員會認(rèn)識到本發(fā)明包括所特別公開的以外的其它方面。例如，本發(fā)明還提供了選自包含甘氨酸、丙氨酸和絲氨酸的組的至少一種氨基酸或其前體，或其生理學(xué)上可接受鹽的應(yīng)用，用于協(xié)同加強(qiáng)針對TNF或可溶性TNF受體產(chǎn)生的環(huán)狀多肽免疫抑制劑，中和抗體的免疫抑制效應(yīng)。這種應(yīng)用還提供了關(guān)于免疫抑制劑，如環(huán)胞霉素或FK-506的安全效應(yīng)。而且，患有許多種疾病和/或病癥的病人可得益于向他們施用本發(fā)明的藥物或制劑。這種疾病和病癥包括，骨質(zhì)疏松；關(guān)節(jié)炎；癌轉(zhuǎn)移；ARDS/肺?。谎装Y性腸病如潰瘍性結(jié)腸炎和克隆氏?。还跔顒用}疾??；肝硬化-不管是酒精還是病毒誘導(dǎo)的；敗血癥，包括內(nèi)毒素性休克；在AIDS和癌癥病人中觀察到的消耗性綜合癥；肝炎；腎炎；病理性血管形成，抑制骨髓的治療如放療和化療；器官排異；創(chuàng)傷；缺血后心臟損害；潰瘍??；退行性疾病；如與神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)的運(yùn)動神經(jīng)原疾病和多發(fā)性硬化；大腦損傷和炎癥；胰腺炎；腎功能衰竭；糖尿??；中風(fēng)和哮喘。
權(quán)利要求
1.選自甘氨酸、丙氨酸和絲氨酸的至少一種氨基酸或其生理 上可接受的鹽在制備用于減低病人中的腫瘤壞死因子(TNF)水平的藥物或營養(yǎng)制劑中的應(yīng)用，其中所說TNF的水平超過了其介導(dǎo)生理平衡和局部炎癥的水平。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中TNF水平的減低可通過對如下各項(xiàng)抑制或減低進(jìn)行；(i)吞噬細(xì)胞型細(xì)胞腫瘤壞死因子(TNF)的產(chǎn)生；(ii)吞噬細(xì)胞型細(xì)胞TNF的釋放；和/或(iii)TNF受體對TNF的結(jié)合。
3.選自甘氨酸、丙氨酸和絲氨酸的至少一種氨基酸或其前體，或者它們生理上可接受的鹽，在制備用于在需要此類治療的病人中抑制或減輕由于酒精攝入過量而引起的肝病及由此而導(dǎo)致的腸和胰腺疾病中的應(yīng)用。
4.選自甘氨酸、丙氨酸和絲氨酸的至少一種氨基酸或其前體，或者它們生理上可接受的鹽在制備用于在需要此類治療的病人中抑制或減輕酒精毒性的藥物或營養(yǎng)制劑中的應(yīng)用。
5.選自甘氨酸、丙氨酸和絲氨酸的至少一種氨基酸或其前體，或者它們生理上可接受的鹽在制備用于在需要此類治療的病人中在酒精進(jìn)入血液循環(huán)之前從胃中去除酒精的藥物或營養(yǎng)制劑中的應(yīng)用。
6.一種基本上由蒸餾水和0.1～90％重量份的選自甘氨酸、丙氨酸和絲氨酸的一種或多種氨基酸組成的藥物，其游離形式或其藥學(xué)上可接受的鹽形式或者它們的混合物。
7.一種輸注液，它包含每升所述輸注液0.1至5.0g的選自甘氨酸、丙氨酸和絲氨酸的一種或多種氨基酸，以游離形式或藥學(xué)上可接受鹽形式或其混合物形式存在。
8.一種藥物或營養(yǎng)制劑，它包含有效量的(a)選自包含甘氨酸、丙氨酸和絲氨酸的一或多種氨基酸，以游離形式或生理學(xué)上可接受鹽形式，或其混合物形式存在(成分(a))以及一或多種下列成分(b)ω-3PUFAs，最好與ω-6PUFAs混合(成分(b))；(c)L-精氨酸或與多胺合成有關(guān)的其它生理學(xué)上可接受化合物；或其混合物(成分(c))；(d)一種核堿基來源(成分(d))。
9.按照權(quán)利要求8的藥物或營養(yǎng)制劑，它以單位劑量形式包含，(a)按重量1.5至80份的選自甘氨酸、丙氨酸和絲氨酸的一或多種氨基酸，以游離形式或生理學(xué)上可接受鹽形式，或其混合物形式存在，以及一或多種下列化合物(b)按重量2至5份ω-3多不飽和脂肪酸；(c)按重量7.5至20份L-精氨酸或L-鳥氨酸或其混合物，和(d)按重量1.7至2.0份RNA。
10.按照權(quán)利要求8或9的藥物或營養(yǎng)制劑，它包含成分(a)和成分(c)。
11.按照權(quán)利要求8或9的藥物或營養(yǎng)制劑，它包含成分(a)和成分(b)及(c)。
12.按照權(quán)利要求8或9的藥物或營養(yǎng)制劑，它包含成分(a)和成分(b)，(c)及(d)。
全文摘要
本發(fā)明提供選自包含甘氨酸,丙氨酸和絲氨酸的組的至少一種氨基酸,或其生理學(xué)上可接受鹽的應(yīng)用,用于制備供在腫瘤壞死因子(TNF)水平升高到超出調(diào)節(jié)生理平衡和局部炎癥的水平的病人中降低TNF水平的藥物或營養(yǎng)制劑。這種TNF水平的下降的獲得尤其是通過抑制或降低:(i)巨噬型細(xì)胞產(chǎn)生腫瘤壞死因子(TNF);(ii)TNF從巨噬型細(xì)胞釋放;和/或(iii)TNF被TNF受體結(jié)合。
文檔編號A61K31/198GK1175887SQ96192066
公開日1998年3月11日 申請日期1996年2月22日 優(yōu)先權(quán)日1995年2月23日
發(fā)明者H·施內(nèi)德爾, R·G·舒爾曼 申請人:諾瓦蒂斯?fàn)I養(yǎng)有限公司