一種消除妊娠紋的復合護膚膏及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于日化用品及美容用品領(lǐng)域，特別設(shè)及一種消除妊娠紋的復合護膚膏及 其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 妊娠紋，是萎縮紋的一種，常出現(xiàn)在產(chǎn)后媽媽腹壁、大腿內(nèi)外側(cè)、臀部、胸部、后腰 部及手臂等處，成為她們的苦惱，不僅影響女性的穿衣打扮和自信，還影響女性的社交和生 活。其主要是由于妊娠期荷爾蒙的影響，加之腹部膨隆使皮膚的彈力纖維與膠原纖維損傷 或斷裂，腹部皮膚變薄變細，出現(xiàn)一些寬窄不同、長短不一的粉紅色或紫紅色的波浪狀花 紋，分娩后，運些花紋逐漸消失，則留下白色或銀白色的有光澤的癒痕線紋，即妊娠紋，一旦 出現(xiàn)妊娠紋就不會自行消失，并伴隨皮膚松弛、乳房下墜、腹部脂肪堆積，嚴重影響了婦女 產(chǎn)后的體態(tài)和身屯、健康。
[0003]目前，常見的消除妊娠紋的方法主要包括：（1)精油或膏霜，按摩及儀器輔助治 療的方法，精油的滲透效果好，但是沒有很好的修復效果。通過一年的修復，效果能達到 40%左右，操作時間長，目前的霜膏只能淡化，且療程長，效果還不理想；（2)激光療法，運 種方法不適合大面積治療，且前期能看到效果，后期則沒有變化，還對操作技術(shù)要求很高， 成本高，效果不理想；（3)換膚法，使用化學脫皮劑，多使用酸性或腐蝕性物質(zhì)，過程中患者 痛苦，還易引發(fā)增殖瘤痕發(fā)生，皮膚薄且敏感的皮膚50%會引發(fā)增殖瘤痕，大面積使用對身 體有不良影響，皮膚細胞受損，影響新陳代謝，化學物質(zhì)產(chǎn)生沉淀后引發(fā)皮膚色素沉淀。（4) 注射堿性纖維生長因子，它是促進肉芽增生的過程（一般用于面部填充)，填充本身維持 時間短，技術(shù)不宜掌握，費用大，能修復到60%左右（5)磨削法，物理磨削皮膚過程痛苦且 易留瘤痕。
[0004] 綜上可見，目前修復、消除妊娠紋的日用護膚產(chǎn)品或方法效果都不理想，是人們愛 美之路上亟待解決的難題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種消除妊娠紋的復合護膚膏及其制備方法， 采用將肉毒桿菌破壁蛋白液、多種維生素、天然膠原蛋白、中草藥粉劑及天然植物萃取精油 W科學、合理配比復合，并將其制成方便使用的護膚膏的技術(shù)方案，通過其協(xié)同作用實現(xiàn)了 高效消除妊娠紋和皺紋、增強皮膚彈性、滋養(yǎng)美白肌膚，且其制備方法簡單，適合工業(yè)生產(chǎn)， 使用方便。
[0006] 本發(fā)明采用的技術(shù)方案是，一種消除妊娠紋的復合護膚膏，所述護膚膏包括均勻 混合的下述原料：60-100mL肉毒桿菌破壁蛋白液、5-15mL丙S醇、5-15mL維生素E、5-15mL 維生素A、10-20g維生素C、15-25g膠原蛋白、10-25gS屯粉、10-25g巧等粉、2-10血薰 衣草精油、0. 1-10g簇甲基纖維素鋼，所述肉毒桿菌破壁蛋白液為肉毒桿菌培養(yǎng)液經(jīng)破壁 處理后提取的蛋白溶液，其蛋白含量為0. 3-0. 5wt. %。
[0007] 所述護膚膏的原料還包括5-15g尿囊素和0. 1-0. 2g薄荷冰。
[000引優(yōu)選的，所述護膚膏由下述原料均勻混合而成：80-100mL肉毒桿菌破壁蛋白液、 10-15血丙S醇、10-15血維生素E、10-15血維生素A、15-20g維生素C、20-25g膠原蛋白、 22-25gS屯粉、22-25g巧等粉、10-15g尿囊素、0. 1-0. 15g薄荷冰、2-4mL薰衣草精油、 5-8g簇甲基纖維素鋼。
[0009] 所述肉毒桿菌破壁蛋白液是按照如下方法制備的：（1)取肉毒桿菌菌種按接種量 1環(huán)/1L或體積比0. 01-0. 1%接種至LB液體培養(yǎng)基中，37°C恒溫培養(yǎng)48-9化，得肉毒桿菌 發(fā)酵液；（2)將（1)中的肉毒桿菌發(fā)酵液進行細胞破碎，100°C水浴脫毒處理后離屯、棄沉淀， 保留上清液；（3)向（2)中的上清液加入硫酸錠，離屯、收集沉淀，將收集的沉淀W憐酸鹽緩 沖液透析18-3化，調(diào)整蛋白含量為0. 3-0. 5wt. %，得肉毒桿菌破壁蛋白液。
[0010] 本發(fā)明還提供上述消除妊娠紋的復合護膚膏的制備方法，所述制備方法包括W下 步驟： (1) 按上述方法制備肉毒桿菌破壁蛋白液； (2) 取（1)中的肉毒桿菌破壁蛋白液60-100血，邊攬拌邊依次加入5-15血丙S醇、 5-15血維生素E、5-15血維生素A、10-20g維生素C、15-25g膠原蛋白、10-25gS屯粉、 10-25g巧等粉、2-10血薰衣草精油和0.1-10g簇甲基纖維素鋼，得混合漿體； (3 )將（2 )中的混合漿體攬拌20-40分鐘，得復合護膚膏。
[0011] 優(yōu)選的，所述肉毒桿菌菌種為從變質(zhì)腐爛臘肉中分離純化獲得，其分離純化過程 如下：挑取臘肉腐爛表面的細菌接種于LB固體培養(yǎng)基37°C恒溫培養(yǎng)24-7化，挑取單菌落接 種至新的LB固體培養(yǎng)基上，37°C恒溫培養(yǎng)24-7化，顯微鏡下觀察，反復進行挑取單菌落接 種至新的LB固體培養(yǎng)基恒溫培養(yǎng)，至顯微鏡下觀察菌落為純?nèi)舛緱U菌，即篩選得到純化的 肉毒桿困困種。
[0012] 優(yōu)選的，所述肉毒桿菌發(fā)酵液進行細胞破碎、100°C水浴脫毒處理后的離屯、條件為 4500-5500;r/min、8-15min;所述加入硫酸錠后進行離屯、的條件為SOOOr/min-lOOOOr/min、 8-15min。
[0013] 優(yōu)選的，制備肉毒桿菌破壁蛋白液的過程中所述透析過程為：W1L肉毒桿菌發(fā)酵 液所得沉淀加70-90mL憐酸鹽緩沖液計，將溶有沉淀的緩沖液放入透析袋中，再將透析袋 放入憐酸透析緩沖液中，維持攬拌，每4-化更換一次透析緩沖液，透析18-3化。
[0014] 優(yōu)選的，所述步驟（2)中=屯粉和/或巧等粉在加入前進行預處理，所述預處理包 括滅菌、干燥、粉碎，粉碎后的S屯粉和/或巧等粉粒度為200-300目。
[0015] 優(yōu)選的，所述步驟（2)中薰衣草精油純度為99%W上。
[0016] 上述技術(shù)方案中，肉毒桿菌破壁蛋白液是肉毒桿菌發(fā)酵液經(jīng)細胞破碎處理后提取 的富含蛋白的溶液液，含有純度高、均一性好的小分子蛋白，高效無毒，可W增強皮膚彈性、 刺激細胞分裂和生長；加入丙=醇能夠使溶液具備溶解脂溶性和水溶性的物質(zhì)，W便添加 有效成分；膠原蛋白，優(yōu)選天然膠原蛋白，可W改善皮膚纖維的彈力與肌肉的張力和伸縮 度，增強細胞壁厚度，膠原蛋白與提取的肉毒素蛋白液聯(lián)合作用起到控制肌肉松弛，保持肌 肉彈性和張力的作用；維生素E、維生素A、維生素C化合理配比可W改善和促進皮膚代謝， 增加皮膚活性，具有顯著的抗衰老和抗氧化作用；中藥成分=屯粉、巧等粉是天然的舒經(jīng)活 血素，與純天然植物萃取的薰衣草精油共同作用可W有效的抗衰老和增加肌肉彈性，可W 對肉毒桿菌破壁蛋白液和膠原蛋白起到增效的作用；尿囊素是一種兩性化合物，能結(jié)合多 種物質(zhì)形成復鹽，具有避光、殺菌、防腐、止痛、促進細胞生長和抗氧化作用，能加快傷口愈 合，軟化角質(zhì)蛋白、緩解和治療皮膚干燥，使皮膚滋潤、柔軟；薄荷冰作用于皮膚或粘膜，有 清涼止癢作用；簇甲基纖維素鋼用作增稠劑，有利于產(chǎn)品成為方便使用的膏體狀；本產(chǎn)品 能夠迅速滲透肌膚細胞，促進表皮的微循環(huán)，刺激細胞新生，提升細胞含氧量，增加皮膚修 復和皺紋間隙的修補。
[0017]本發(fā)明的有益效果是：（1)本發(fā)明W小分子蛋白和天然的維生素、膠原蛋白及中 草藥粉劑、植物精油為主要成分，配比合理，制備工藝科學，通過其協(xié)同作用多種有效成分 互為增效，護膚防皺效果加倍呈現(xiàn)，有效消除及減輕妊娠紋，預防皮膚老化和增強皮膚彈 性，對皮膚具有滋潤、白暫、抗皺等效果，同時還具有減輕皮膚痊癢等作用，且生物相容性 好，安全性高；（2)本發(fā)明提供的護膚膏制備方法簡單，適宜工業(yè)生產(chǎn)。
[001引下面結(jié)合附圖對本發(fā)明進行詳細說明。
【附圖說明】
[0019] 圖1是分離純化的肉毒桿菌的菌落圖； 圖2是顯微鏡下肉毒桿菌發(fā)酵液中的菌體形態(tài)圖； 圖3是對肉毒桿菌破壁蛋白液進行SDS-page分析后的凝膠電泳圖，其中，最右側(cè)一列 為作為參照的蛋白質(zhì)分子量標準的條帶圖，左側(cè)=列為不同濃度(從左到右濃度依次為1/6 濃度、1/3濃度、透析后蛋白液原液）的肉毒桿菌破壁蛋白液樣品的條帶圖； 圖4為蛋白質(zhì)分子量標準的條帶-分子量對應圖。
【具體實施方式】
[0020] W下通過具體實施例對本發(fā)明作詳細說明，其中所使用的實驗方法如無特殊說 明，均為常規(guī)方法；所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。本發(fā)明利用 小分子蛋白和天然的維生素、膠原蛋白及中草藥粉劑、植物精油為主要成分，并合理配伍制 成護膚膏，用于減輕及消除妊娠紋，其配伍示例如下表1所示，其中的肉毒桿菌破壁蛋白液 是經(jīng)過如下過程獲得的，（1)取肉毒桿菌菌種經(jīng)LB固體培養(yǎng)基平板培養(yǎng)、搖瓶LB液體培 養(yǎng)基37°C恒溫培養(yǎng)48-9化，得肉毒桿菌發(fā)酵液；（2)將（1)中的肉毒桿菌發(fā)酵液經(jīng)細胞破 碎、100°C水浴脫毒處理后，離屯、棄細胞壁沉淀，保留上清液；（3)向（2)中的上清液加入硫 酸錠，離屯、收集沉淀，將收集的沉淀W憐酸鹽緩沖液（pH6. 8)透析18-3化，調(diào)整蛋白含量 為0. 3-0. 5wt. %，得肉毒桿菌破壁蛋白液。所用的憐酸鹽緩沖液為抑6. 8,其配制方法為取 0. 2mol/L憐酸二氨鐘溶液250血，加入0. 2mol/L氨氧化鋼溶液118血，用水定容至1L，搖 勻。
[00川表1消除妊娠紋的復合護膚膏的組成示例_

上述成分中，=屯粉和/或巧等粉使用前先經(jīng)過預處理，預處理步驟包括滅菌、干燥、 粉碎，粉碎后的粒度為200-300目，薰衣草精油為純天然植物萃取獲得，純度為99%W上。 [00過制備實施例 W上述實施例1為例說明本發(fā)明的消除妊娠紋的復合護膚膏的制備方法： (1)分離純化肉毒桿菌菌種： 挑取臘肉腐爛表面的細菌接種于LB固體培養(yǎng)基表面，在37°C恒溫條件下培養(yǎng)48h，W接種環(huán)挑取單菌落接種至另一新的LB固體培養(yǎng)基上，37°C恒溫培養(yǎng)24-7化，顯微鏡下觀察 菌落形態(tài)，反復進行接種環(huán)挑取單菌落接種至新的LB固體培養(yǎng)基上恒溫培養(yǎng)的過程，至顯 微鏡下觀察菌落為純?nèi)舛緱U菌，即篩選得到了純化的肉毒桿菌菌種。
[0023] (2)制備肉毒桿菌破壁蛋白液： ①W接種環(huán)挑取1環(huán)肉毒桿菌菌種接種至盛有1LLB液體培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，37°C恒 溫培養(yǎng)72h，得肉毒桿菌發(fā)酵液；其中，LB液體培養(yǎng)基的配制過程為：950mL去離子水中加 入膜蛋白腺10克、酵母提取物5克、氯化鋼10克，搖動至溶質(zhì)溶解，用5mol/L的化0H調(diào) pH至7. 0,用去離子水定容至1L，最后在12TC蒸汽滅菌20分鐘； ② 將①中的肉毒桿菌發(fā)酵液進行超聲波細胞