一種防治淡水魚真菌病的中草藥發(fā)酵提取液及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于水產(chǎn)用中醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體設(shè)及一種防治淡水魚真菌病的中草藥發(fā) 酵提取液及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 魚類由于真菌感染而患的病，叫魚類真菌病。真菌是具有細胞壁、真核的單細胞或 多細胞體。真菌性病原大都可腐生或寄生于各種魚類的魚卵、體表、罐部、觸部、肌肉，危害 魚類的主要是藻菌綱的一些種類，如水霉、綿霉、觸霉、魚醉菌、鏈壺菌、離壺菌、海壺菌等， 同時還有半知菌類的鑲刀菌，W及絲囊霉菌等。相對于細菌和病毒病害而言，真菌病害一 直沒有引起足夠的重視。近年來，隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展、生態(tài)環(huán)境的改變和一些抗真菌 性藥物的禁用，使得魚類真菌性病害日益獵獄，形勢嚴峻。所W，由于對真菌病尚無更理 想的治療方法，嚴重阻礙了水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。
[0003] 在我國，中草藥用于魚病防治有著悠久的歷史。中藥具有抗菌、抗病毒及促進免疫 功能，提高機體抗病能力等作用，中藥副作用少，毒性低，不產(chǎn)生抗藥性，所W無殘留、無污 染的中草藥越來越受到重視，應用也日益廣泛。各地養(yǎng)殖單位在實際應用中草藥后，已表 現(xiàn)出對水產(chǎn)動物的安神、鎮(zhèn)靜、健胃促消化、理氣、活血、養(yǎng)精補益、驅(qū)蟲、殺蟲、保健、解毒排 毒、抗腫瘤、治肝炎、收斂、抗創(chuàng)傷、抗菌、抑菌、殺滅病毒等多種藥理作用。由此可見應用中 草藥防治魚病的有效性已在生產(chǎn)實踐所證實，應用中草藥防治魚病也是我們發(fā)展綠色水產(chǎn) 業(yè)的需要，是人類自身健康的需要，因而有看美好的應用前景。益生菌可改善水產(chǎn)動物機體 內(nèi)外的微生態(tài)平衡，提高其飼料轉(zhuǎn)化量，抑制病原菌的種類和數(shù)量，控制水產(chǎn)養(yǎng)殖動物疾病 的發(fā)生。隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的不斷發(fā)展W及人們對環(huán)境保護意識的日漸提高，有益菌開始被 引入水產(chǎn)養(yǎng)殖之中。發(fā)酵過的中草藥一方面可W提高中草藥藥效，另一方面微生物也可W 起到促生長、促消化的作用，提高養(yǎng)殖效益。從而發(fā)展無公害水產(chǎn)飼料添加劑，生產(chǎn)綠色水 產(chǎn)品，增強我國水產(chǎn)品的國際市場競爭力。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種防治淡水魚真菌病的中草藥發(fā)酵提取液，該中草藥發(fā) 酵提取液屬于天然藥物，無毒副作用，主要用于治療淡水魚主要細菌性傳染病，治療成本 低、治愈率高、安全、無毒副作用、使用方便。
[0005] 為了達到上述目的，本發(fā)明采用W下技術(shù)方案： 本發(fā)明提供了一種防治淡水魚真菌病的中草藥發(fā)酵提取液，是由中藥的提取液加入芽 抱桿菌菌液密閉厭氧發(fā)酵而成，其中所述中藥由W下重量份的組分組成：五倍子2~4、±荊 芥2~3、苦穫皮5~8、苦參1~2、石惱皮1~2和大黃2~5。
[0006] 根據(jù)上述的防治淡水魚真菌病的中草藥發(fā)酵提取液，是由中藥的提取液加入芽抱 桿菌菌液密閉厭氧發(fā)酵而成，其中所述中藥由W下重量份的組分組成：五倍子2~3. 2、±荊 芥2. 8~3、苦穫皮5~7. 2、苦參1~1. 6、石惱皮1. 3~2和大黃2~4。
[0007] 根據(jù)上述的防治淡水魚真菌病的中草藥發(fā)酵提取液，是由中藥的提取液加入芽抱 桿菌菌液密閉厭氧發(fā)酵而成，其中所述中藥由W下重量份的組分組成：五倍子3. 2~4、±荊 芥2~2. 8、苦穫皮7. 2~8、苦參1. 6~2、石惱皮1~1. 3和大黃4~5。
[0008] 根據(jù)上述的防治淡水魚真菌病的中草藥發(fā)酵提取液，是由中藥的提取液加入芽抱 桿菌菌液密閉厭氧發(fā)酵而成，其中所述中藥由W下重量份的組分組成：五倍子3、±荊芥2、 苦穫皮5、苦參2、石惱皮1和大黃3。
[0009] 所述的防治淡水魚真菌病的中草藥發(fā)酵提取液的制備方法，具體步驟如下： (1) 將中藥五倍子、±荊芥、苦穫皮、苦參、石惱皮和大黃烘干、粉碎為40~80目粉末備 用； (2) 按照上述配方取步驟（1)中藥粉末加入8~10倍量中藥粉末量的水煎煮提取，煎 煮1~2小時過濾得濾液；藥渣加入8~10倍藥渣量的水煎煮提取，煎煮1~2小時過濾 得濾液，合并濾液備用； (3) 按重量比取芽抱桿菌菌液加入步驟（2)所得濾液中，芽抱桿菌菌液與中藥液的重量 比1: (40~60)，密閉厭氧發(fā)酵，分裝，即得防治淡水魚病毒性疾病的中草藥發(fā)酵提取液。
[0010] 所述芽抱桿菌菌液的制備方法如下：取芽抱桿菌菌種進行斜面菌種培養(yǎng)，將 斜面培養(yǎng)產(chǎn)生的懸浮液在對應的培養(yǎng)基內(nèi)厭氧擴大培養(yǎng)，至對數(shù)生長期菌落數(shù)高于 1. 0XlOlOCFU/mL時止，得對應的菌液。
[0011] 步驟（1)烘干溫度為60~80°C。
[0012] 步驟（3)中發(fā)酵溫度為30°C~37°C，發(fā)酵時間為24~48h。
[0013] 芽抱桿菌的培養(yǎng)基為營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。
[0014] 本發(fā)明中各原料功效簡述如下： 五倍子：又名倍子、百藥煎、百蟲倉等。為漆科植物鹽膚本的葉上的干燥蟲瘦，由五倍子 的曬蟲寄生而成。殺菌能力強，用于防治白頭白嘴病、白皮病、赤皮病、巧瘡病等。
[0015] ±荊芥：為獲科植物±荊芥的帶有果穗的全草，俗稱臭草，一年生草本，全草入藥， 有桂風殺蟲、燥濕解毒之功。對霉菌、致病性皮膚真菌、巧蛾、風圣、鉤蟲、線蟲有抑制和殺滅 作用。
[0016] 苦穫皮：苦，寒；有毒。歸肝、脾、胃經(jīng)。具驅(qū)腸蟲作用；用水或酒精浸泡本品后的 浸泡液對常見致病性皮膚真菌有較明顯的抑制作用。
[0017] 苦參：為豆科落葉小灌木，廣布房前屋后山坡濕地。根、葉入藥，有燥濕、止癢、殺蟲 之功，能抗原蟲，對致病性皮膚真菌有抑制作用。主治巧癖、皮膚病和體內(nèi)外寄生蟲病。臨 床上治黃錯皮膚打印?。t斑?。┖徒?jīng)魚豎鱗病，可用苦參煎水潑灑，也可和上荊芥等同用； 治療甲魚巧癖、毛霉病等可與百部煎汁共用。石惱皮：為石惱的干燥果皮，主要含較質(zhì)、生物 堿等，具有收斂止瀉、殺蟲和抑菌作用。對水產(chǎn)動物的原生蟲、蠕蟲病及水霉病有較好效果。 可有效防治波豆蟲病、車輪蟲病、=代蟲病、線蟲病、緣蟲病等。
[0018] 大黃：又名錦紋、黃良，別名將軍、生軍、馬蹄黃等，多年生草本植物。W根、根莖入 藥，抗菌作用強，抗菌譜廣，可防治腸炎病、爛觸病、白頭白嘴病等。
[0019] 芽抱桿菌：芽抱桿菌是一種好氧的革蘭氏陽性菌，是對人畜無毒害的細菌，在自然 界分布廣泛，國內(nèi)均允許將其用于飼料添加劑。其具有減少病害發(fā)生、促進養(yǎng)殖動物生長、 改善養(yǎng)殖環(huán)境等特點。
[0020] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明取得的有益效果： 1.本發(fā)明中草藥發(fā)酵提取液屬于天然藥物，無毒副作用，藥物中各個營養(yǎng)成分相互協(xié) 同、互為補充，具有抗微生物、抗病毒、抗寄生蟲、抗真菌和提高免疫力的作用，能有效促進 魚類的生長發(fā)育。
[0021] 2.本發(fā)明通過芽抱桿菌的加入可W與養(yǎng)殖環(huán)境中的有害藻類及水產(chǎn)致病菌競 爭，形成優(yōu)勢種群，抑制有害藻類及水產(chǎn)致病菌，有利于水產(chǎn)養(yǎng)殖，改善養(yǎng)殖環(huán)境，同時對水 溶性有機物分解也有重要的作用。
[0022] 3.本發(fā)明采用中藥與益生菌的結(jié)合有顯著的經(jīng)濟效益和社會效益。
[002引用法用量:潑灑法，預防用藥，本品每瓶1000ml潑灑范圍為lOOOml/lOm2,連用2~3 天。治療量加倍，連用5~8天。
【具體實施方式】
[0024] 下面結(jié)合實施例對本發(fā)明進一步的描述，但并不限制本發(fā)明的內(nèi)容。
[0025] 實施例1 一種防治淡水魚真菌病的中草藥發(fā)酵提取液，是由中藥的提取液加入芽抱桿菌菌液密 閉厭氧發(fā)酵而成，其中所述中藥由W下重量份的組分組成：五倍子2~4、±荊芥2~3、苦穫皮 5~8、苦參1~2、石惱皮1~2和大黃2~5。
[0026] 所述的防治淡水魚真菌病的中草藥發(fā)酵提取液的制備方法，具體步驟如下： (1) 將中藥五倍子、±荊芥、苦穫皮、苦參、石惱皮和大黃烘干、粉碎為40~80目粉末備 用； (2) 按照上述配方取步驟（1)中藥粉末加入8~10倍量中藥粉末量的水煎煮提取，煎 煮1~2小時過濾得濾液；藥渣加入8~10倍藥渣量的水煎煮提取，煎煮1~2小時過濾 得濾液，合并濾液備用； (3) 按重量比取芽抱桿菌菌液加入步驟（2)所得濾液中，芽抱桿菌菌液與中藥液的重量 比1: (40~60)，密閉厭氧發(fā)酵，分裝，即得防治淡水魚病毒性疾病的中草藥發(fā)酵提取液。
[0027] 所述芽抱桿菌菌液的制備方法如下：取芽抱桿菌菌種進行斜面菌種培養(yǎng)，將 斜面培養(yǎng)產(chǎn)生的懸浮液在對應的培養(yǎng)基內(nèi)厭氧擴大培養(yǎng)，至對數(shù)生長期菌落數(shù)高于 1. 0Xl〇i°CFU/mL時止，得對應的菌液。
[002引實施例2 一種防治淡水魚真菌病的中草藥發(fā)酵提取液，是由中藥的提取液加入芽抱桿菌菌液密 閉厭氧發(fā)酵而成，其中所述中藥由W下重量份的組分組成：五倍子3、±荊芥2、苦穫皮5、苦 參2、石惱皮1和大黃3。
[0029] 本實施例的制備方法與實施例1相同。
[0030] 實施例3 一種防治淡水魚真菌病的中草藥發(fā)酵提取液，是由中藥的提取液加入芽抱桿菌菌液密 閉厭氧發(fā)酵而成，其中所述中藥由W下重量份的組分組成：五倍子2、±荊芥3、苦穫皮7、苦 參2、石惱皮2和大黃5。
[0031] 本實施例的制備方法與實施例1相同。
[00礎(chǔ)實施例4 一種防治淡水魚真菌病的中草藥發(fā)酵提取液，是由中藥的提取液加入芽抱桿菌菌液密 閉厭氧發(fā)酵而成，其中所述中藥由W下重量份的組分組成：五倍子4、±荊芥3、苦穫皮6、苦 參2、石惱皮1和大黃4。
[0033] 本實施例的制備方法與實施例1相同。
[0034] 實施例5 一種防治淡水魚真菌病的中草藥發(fā)酵提取液，是由中藥的提取液加入芽抱桿菌菌液密 閉厭氧發(fā)酵而成，其中所述中藥由W下重量份的組分組成：五倍子4、±荊芥3、苦穫皮8、苦 參2、石惱皮1和大黃2。
[0035] 本實施例的制備方法與實施例1相同。
[003引 實施例6 一種防治淡水魚真菌病的中草藥發(fā)酵提取液，是由中藥的提取液加入芽抱桿菌菌液密 閉厭氧發(fā)酵而成，其中所述中藥由W下重量份的組分組成：五倍子2、±荊芥2. 5、苦穫皮 6. 5、苦參1. 6、石惱皮1. 8和大黃3. 2。
[0037] 本實施例的制備方法與實施例1相同。
[00測實施例7 一種防治淡水魚真菌病的中草藥發(fā)酵提取液，是由中藥的提取液加入芽抱桿菌菌液密 閉厭氧發(fā)酵而成，其中所述中藥由W下重量份的組分組成：五倍子3. 2、±荊芥2. 8、苦穫皮 7. 2、苦參1. 1、石惱皮1. 8和大黃2. 2。
[0039] 本實施例的制備方法與實施例1相同。
[0040] 實施例8 一種防治淡水魚真菌病的中草藥發(fā)酵提取液，是由中藥的提取液加入芽抱桿菌菌液密 閉厭氧發(fā)酵而成，其中所述中藥由W下重量份的組分組成：五倍子2. 4、±荊芥2. 4、