一種醫(yī)用多層復合防粘連膜及其制備方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物醫(yī)學技術領域，特別設及一種醫(yī)用多層復合防粘連膜及其制備方 法。
【背景技術】
[0002] 術后粘連是腹腔、盆腔、屯、臟等部位手術治療中最常見、最棘手的問題，它不僅會 引起嚴重的并發(fā)癥，同時也是二次手術后并發(fā)癥出現(xiàn)概率明顯上升的主要原因。通常，在手 術傷口縫合之前，外科醫(yī)生會將一層具有物理隔離作用的防粘連膜放在經(jīng)過手術的組織或 器官之間，從而防止組織與器官粘連的發(fā)生。
[0003] 目前已經(jīng)在手術治療中使用的防粘連材料主要包括不可降解吸收類材料及可降 解吸收類材料兩大類。不可降解吸收類材料，例如聚四氣乙締、纖維素類防粘連膜，雖然有 效抑制了粘連的發(fā)生及二次手術的風險，但此類不可降解材料的持續(xù)存在將導致周圍器官 和組織的炎性反應和纖維化，不利于二次手術的進行。因此，目前已經(jīng)實現(xiàn)商業(yè)化并在手術 中廣泛使用的是人體內(nèi)可降解吸收類防粘連膜，如聚乳酸防粘連膜、ETHICON公司開發(fā)的氧 化纖維素 INT邸CE抓防粘連膜、CENZY肥公司開的簇甲基纖維素鋼SEPARFILM防粘連膜等。但 是，運些防粘連膜仍然存在著一些缺點。聚乳酸防粘連膜與組織的粘附性差，在手術中需要 通過縫合才能將防粘連膜與組織固定，不利于較深病灶的手術操作;氧化纖維素膜在使用 前必須徹底止血，遇到局部出血則不能使用;簇甲基纖維素鋼膜吸收周期較快，且在濕態(tài)環(huán) 境下力學性能及可操作性較差(Dis Colon 1?6(3化111，2013,56，1174-1184.)。因此，制備出一 種新型防粘連膜，是生物醫(yī)學材料技術中亟待解決的問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 針對現(xiàn)有技術不足，本發(fā)明提供了一種醫(yī)用多層復合防粘連膜及其制備方法。
[0005] -種醫(yī)用多層復合防粘連膜，其具有多層膜結構，包括一層凝膠膜，凝膠膜的單面 或雙面為水溶性膜。
[0006] 所述凝膠膜的厚度為1~5000WI1，水溶性膜的厚度為1~500WI1。
[0007] 所述凝膠膜的組成包括質(zhì)量分數(shù)為2%~50%的聚乙締醇、質(zhì)量分數(shù)為0~50%的 簇甲基纖維素鋼、質(zhì)量分數(shù)為0~10%的助劑和質(zhì)量分數(shù)為60%~95%的去離子水；
[000引所述水溶性膜的組成包括聚乙締醇、簇甲基纖維素鋼、殼聚糖、透明質(zhì)酸和透明質(zhì) 酸的衍生物中的一種或多種聚合物，所述一種或多種聚合物的總質(zhì)量分數(shù)為60%~100%， 余量為助劑。
[0009] 所述助劑為可W與聚乙締醇、簇甲基纖維素鋼、殼聚糖、透明質(zhì)酸和透明質(zhì)酸的衍 生物中的一種或多種聚合物分子形成氨鍵或配位作用的物質(zhì)，包括氯化巧、硫酸鋒、硫酸鐵 或?qū)交郊姿帷?br>[0010] 所述聚乙締醇的醇解度為50%~99%、聚合度為500~2400;簇甲基纖維素鋼在 20g/L水溶液中粘度為50~1200CP、取代度為0~3;殼聚糖的分子量為10000~300000、脫乙 酷度為50 %~99 %;透明質(zhì)酸的分子量為50000~5000000。
[0011] -種醫(yī)用多層復合防粘連膜的制備方法，其是先流延制備一層凝膠膜，再在凝膠 膜的單面或雙面流延一層水溶性膜。
[0012] 另一種醫(yī)用多層復合防粘連膜的制備方法，其是分別流延制備凝膠膜和水溶性 膜，再在凝膠膜表面滴加去離子水，將凝膠膜和水溶性膜在去離子水環(huán)境下復合;復合的溫 度為10~80°C。滴加去離子水的量與凝膠膜的質(zhì)量比為1: (300~30)。
[0013] 所述凝膠膜的制備方法為：10~100°C下，將質(zhì)量分數(shù)為2%~50%的聚乙締醇、質(zhì) 量分數(shù)為0~50%的簇甲基纖維素鋼、質(zhì)量分數(shù)為0~10%的助劑和質(zhì)量分數(shù)為60%~95% 的去離子水形成混合溶液，混合溶液流延后，先在-100~-l〇°C冷凍0.1~48化，再在0~70 °C解凍0.1~48化，冷凍-解凍進行循環(huán)1~100次后形成凝膠膜。
[0014] 所述水溶性膜的制備方法為：10~100°C下將聚乙締醇、簇甲基纖維素鋼、殼聚糖、 透明質(zhì)酸和透明質(zhì)酸的衍生物中的一種或多種聚合物，按照聚合物的總質(zhì)量與助劑的質(zhì)量 之比為(60~100): (40~0)的比例加入助劑，形成混合溶液，混合溶液中聚合物的總質(zhì)量濃 度為1 %~50%，混合溶液流延后，10~120°C下?lián)]發(fā)溶劑形成水溶性膜。
[0015] 本發(fā)明的有益效果為:第一，由于多層復合防粘連膜中水溶性膜在水環(huán)境下可W 快速溶脹、并具有一定的溶解性，因此可W在防粘連膜和組織器官之間起到很強的粘附作 用;第二，由于多層復合防粘連膜中凝膠膜在水環(huán)境下具有較強的穩(wěn)定性，因此可W在植入 體內(nèi)后的較長時間內(nèi)（大于1個月）保持機械性能和物理隔離性能，從而起到防止組織器官 粘連的作用；第=，簇甲基纖維素鋼、聚乙締醇、殼聚糖、透明質(zhì)酸等聚合物均具有無毒、組 織相容性好的特點，且簇甲基纖維素鋼具有一定削弱成纖維細胞增殖、抑制炎性反應的特 點，有助于防止組織器官粘連的發(fā)生;第四，植入體內(nèi)前，凝膠膜表面的水溶性膜與凝膠膜 之間很難剝離開，即多層復合防粘連膜在植入體內(nèi)前具有良好的結構穩(wěn)定性。
【具體實施方式】
[0016] 下面結合【具體實施方式】對本發(fā)明做進一步說明。應該強調(diào)的是，下述說明僅僅是 示例性的，而不是為了限制本發(fā)明的范圍及其應用。
[0017]實施例1
[0018]步驟1:將15份聚乙締醇1799和1份簇甲基纖維素鋼(20g/L水溶液中粘度為800~ 1200CP，取代度為0.7)溶解于84份去離子水中（按質(zhì)量計，下同），得到混合溶液A。將混合溶 液A流延后，置于-20°C環(huán)境中冷凍12h，再在室溫下解凍化，上述冷凍-解凍過程共進行S 次，得到厚度為500WI1的凝膠膜。
[0019]步驟2:將8份聚乙締醇1788、4份簇甲基纖維素鋼（20g/L水溶液中粘度為800~ 1200邱，取代度為0.7)、4份屯水合硫酸鋒溶解于84份去離子水中，得到混合溶液B。將混合 溶液B流延于步驟1所得凝膠膜的一側表面，并在室溫下?lián)]發(fā)溶劑，得到凝膠膜表面含有一 層厚度為IOOMi的水溶性膜的雙層復合膜。
[0020] 步驟3:將步驟2得到的雙層復合膜用伽馬射線滅菌后進行細胞毒性試驗、皮下植 入試驗和防粘連動物試驗。
[0021] 細胞毒性試驗:試驗采用L929成纖維細胞，按照國標GB/T16886.5醫(yī)療器械生物學 評價第5部分，細胞毒性試驗中規(guī)定的間接接觸法(MTT法)進行。不同比例（100%、50%、 25%、10 % )雙層復合膜浸提液的平均細胞相對增殖率分別為88.7 %、91.5%、95.2%和 96.8%，屬于1級細胞毒性，表明該雙層復合膜的細胞毒性達到國頒標準對生物材料細胞毒 性所限定的要求。
[0022] 生物相容性試驗:試驗組選取新西蘭白兔9只（雌雄不限，體重2.0-3.0kg)，將雙層 復合膜置入背部皮下組織內(nèi)，分別在2、4、12周處死(3只/次），觀察局部反應，取出材料及周 圍組織，10%甲醒固定2地，石蠟包埋切片，做肥染色觀察，進一步觀察雙層復合膜組織周圍 的炎癥反應，評價雙層復合膜的組織相容性。對照組選用新西蘭白兔9只（雌雄不限，體重 2.0-3.0kg)，采用手術縫合線直接縫合背部傷口，分別在2、4、12周處死(3只/次)并觀察局 部反應。實驗組和對照組新西蘭兔全部成活，傷口愈合均達到甲級愈合，置入雙層復合膜部 位組織均無化脈、水腫、充血、壞死，說明共混膜材料均對兔子無害且無毒性。在免疫應答反 應中，雙層復合膜周圍組織炎癥細胞逐漸減少，纖維包囊逐漸變薄。2周、4周后的實驗組新 西蘭兔炎癥反應均比對照組輕，12周后實驗組皮下部位炎癥反應完全消失，周圍形成非常 薄的纖維囊腔，說明該膜的組織相容性良好。
[0023] 防粘連動物試驗：16只新西蘭兔隨機分為實驗組及對照組，分別接受正中開胸，切 開屯、包，紗布塊反復擦拭屯、包臟壁兩層，造成屯、包粘連模型。實驗組植入聚乙締醇-簇甲基 纖維素鋼雙層復合膜，植入后雙層復合膜中的水溶性膜部分溶解形成粘稠表面，不需縫合 固定即可使雙層復合膜與組織粘附。對照組不植入材料。逐層關閉胸腔。術后1個月處死動 物，打開胸腔肉眼觀察屯、包壁層與臟層粘連的程度和范圍。按文獻4級分類法確定粘連分級 標準并評分。0級:無粘連;1級:輕度，粘連較薄，純性分離不易出血;2級：中度，粘連較緊密， 需要一些銳性分離，運個過程會中量出血;3級：重度，粘連緊密，需大量銳性分離，極易出 血。肉眼觀察實驗組所使用的防粘連膜在1個月內(nèi)部分吸收，兩組兔屯、包粘連分級情況見表 Io
[0024] 表 1
[00%] 實施例2
[0027]步驟1:將15份聚乙締醇1799、1份簇甲基纖維素鋼（20g/L水溶液中粘度為800-1200CP，取代度0.7)、1份對徑基苯甲酸溶解于83份去離子水中，得到混合溶液A。將混合溶 液A流延后，置于-20°C環(huán)境中冷凍12h，再在室溫下解凍化，上述冷凍-解凍過程共進行S 次，得到厚度為500WI1的凝膠膜。
[00%]步驟2:將8份聚乙締醇1788和4份簇甲基纖維素鋼（20g/L水溶液中粘度為800-1200CP，取代度0.7)溶解于88份去離子水中，得到混合溶液B。將混合溶液B流延于步驟1所 得凝膠膜的一側表面，并在室溫下?lián)]發(fā)溶劑，得到凝膠膜表面含有一層厚度為IOOwii的水溶 性膜的雙層復合膜。
[0029] 步驟3:將步驟2得到的雙層復合膜用伽馬射線滅菌后進行細胞毒性試驗、皮下植 入試驗和防粘連動物試驗。
[0030] 細胞毒性試驗：細胞毒性試驗的操作與實施例1的方法相同。不同比例（100%、 50 %、25 %、10 % )雙層復合膜浸提液的平均細胞相對增殖率分別為92.6%、94.5 %、95.9% 和98.2%，屬于1級細胞毒性，表明聚乙締醇-簇甲基纖維素雙層復合膜的細胞毒性達到國 頒標準對生物材料細胞毒性所限定的要求。
[0031] 生物相容性試驗:采用與實施例1相同的方法觀察雙層復合膜組織周圍的炎癥反 應，評價復合膜的組織相容性。實驗組和對照組新西蘭兔全部成活，傷口愈合均達到甲級愈 合，置入復合膜部位組織均無化脈、水腫、充血、壞死，說明共混膜材料均對兔無害且無毒 性。在免疫應答反應中，復合膜周圍組織炎癥細胞逐漸減少，纖維包囊逐漸變薄。2周、4周后 的實驗組新西蘭兔炎癥反應均比對照組輕，12周后實驗組皮下部位炎癥反應完全消失，周 圍形成非常薄的纖維囊腔，說明該膜的組織相容性良好。
[0032] 防粘連動物試驗:采用與實施例1相同的方法進行防粘連動