一種用于治療心血管疾病的復方地龍小肽組合物的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種具有治療心血管疾病作用的中藥有效部位組合物及其制備方法， 具體地說從地龍、鉤藤、川芎、黃芪中提取的中藥有效部位組合物及其制備方法，屬于中藥 領域。
【背景技術】
[0002] 心血管疾病，又稱為循環(huán)系統(tǒng)疾病，是一系列涉及循環(huán)系統(tǒng)的疾病，目前心血管疾 病已成為世界范圍內(nèi)的一個"現(xiàn)代流行病"，其發(fā)病率和病死率逐年升高的趨勢日益明顯， 嚴重威脅著人類的生產(chǎn)和生活。在治療心血管疾病的過程中往往顯得較為困難。為了能夠 控制心血管疾病，必須給患者服用各種抗心血管疾病藥物。由于藥物治療只能在一定程度 內(nèi)控制心血管疾病，治療心血管疾病只能長期靠藥物維持。一旦藥物失效或停藥，心血管疾 病可能再次發(fā)生，因此提高心血管疾病的防治水平勢在必行。
[0003] 目前，西醫(yī)對心血管疾病的治療主要是采用他汀類、β_受體阻滯劑類及血管緊張 素受體拮抗劑等藥物，盡管西藥在過去幾十年取得了非常大的進步，但西藥多為單靶點或 少數(shù)幾個靶點的藥物，長期用來治療這種復雜的慢性疾病會帶來嚴重的副作用。此外，心血 管疾病是一種復雜疾病，通路之間存在互補容易出現(xiàn)機體抗藥性，并且長期用藥容易發(fā)生 基因突變也容易形成機體的抗藥性。
[0004] 中醫(yī)認為，心血管疾病屬于中醫(yī)"心悸"、"郁病"的范疇，是由肝氣郁結(jié)、情志所傷 引起五臟氣機不和形成的，主要與肝、脾、心等臟器受累與氣血失調(diào)有關?；蛴捎谟襞粫?， 導致肝失調(diào)、氣失疏泄，使肝氣郁結(jié)導致血疲的形成，而肝郁可造成蘊濕生痰阻絡，因此心 煩易燥、心悸不寧?；蛴捎谇橹静凰鞂е滦钠商?、耗傷心氣、氣血不足及肝郁抑脾等，導致 失眠多夢、心悸膽怯及心煩善慮等。心血管疾病在發(fā)病初期由于氣滯出現(xiàn)痰濕血疲，主要為 實證，根據(jù)病情應以利濕行血、理氣化痰、鎮(zhèn)心安神治療為主。久病者的病癥由實轉(zhuǎn)虛，如辨 證為久郁傷神、陰虛火旺及心脾倶虧等，應以補血益氣、扶正安神治療為主。而從我國傳統(tǒng) 中草藥（中藥復方或單味藥）中提取得到治療心血管疾病藥物已經(jīng)成為當前國內(nèi)中醫(yī)藥現(xiàn) 代化研究的重要組成部分，中草藥來源廣泛，品種繁多，為新的治療心血管疾病藥物的研制 開發(fā)提供了良好的基礎。
[0005] 動物體內(nèi)存在大量的蛋白酶和肽酶，過去人們一直認為，動植物蛋白質(zhì)降解成小 肽后，再降解為游離氨基酸才能被動物吸收利用，所以人們一直把氨基酸作為研究、制作、 追求、服食的主要營養(yǎng)。在20世紀60年代，科學家才提出令人信服的證據(jù)證明小肽可以被完 整吸收和利用。由于這個重大的發(fā)現(xiàn)，人們才逐步接受了肽可以被動物直接吸收利用的觀 點。小肽和氨基酸的混合物在人體的吸收率和吸收速度都比單純氨基酸佳，不僅如此，小肽 還能在腸道內(nèi)保護易被破壞的氨基酸。此外，單純的氨基酸在體內(nèi)根據(jù)需要新組成肽和蛋 白質(zhì)，而小肽和氨基酸的混合物可省去一部分重新組合的過程，因此，它的生物效價更高。
[0006] 中藥飲片有效成分含量低，服用量大，不方便，藥味苦，不易被患者接受，但經(jīng)過現(xiàn) 代科學工藝的提取，使得有效成分含量提高，用量減少，服用方便，而且良藥不再苦口，增加 了接受的人群。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明的一個目的在于提供一種具有治療心血管疾病作用的中藥有效部位組合 物； 本發(fā)明的另一個目的在于提供上述中藥組合物的制備方法和用途。
[0008] 本發(fā)明的第一目的：以地龍小肽、川芎總生物堿、鉤藤總生物堿、黃芪總皂苷為原 料，加入適當藥用輔料，制成相關的劑型。
[0009] 本發(fā)明藥物的組合物的原料藥的組成及配比為:地龍小肽6重量份、鉤藤總生物堿 8重量份、川考總生物堿3重量份、黃芪總皂苷6重量份。
[0010] 上述總生物堿有效部位中總生物堿的含量不低于提取物的50%，總皂苷有效部位 中總皂苷不低于提取物的60%，小肽有效部位中地龍小肽的含量不低于提取物的50% 該藥物組合物可以加入相應輔料，制成片劑、顆粒劑、硬膠囊劑中的任一種。然后可以 再加入其他具有治療心血管疾病藥物的有效部位、有效成分、化學合成品或者半合成品，然 后再加入相應輔料，制成片劑、顆粒劑、硬膠囊劑中的任一種。
[0011] 本發(fā)明中藥組合物的制備方法包括以下步驟： ① 地龍小肽的制備:取地龍，適當粉碎，加10倍量水勾衆(zhòng)15min，加熱煮沸30min，放冷至 室溫，采用鹽酸調(diào)pH至2.0,然后加入底物量5%的胃蛋白酶，在37°C條件下酶解3h，然后采用 氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至8，加入底物量5%的胰蛋白酶，在45°C條件下酶解6h，時時攪拌并調(diào) 節(jié)pH在8，酶解完畢后繼續(xù)升溫煮沸15min，放冷，離心，收集上清液，調(diào)節(jié)pH7.0，加入3%的活 性炭，攪拌均勻，濾過，濾液用截留相對分子質(zhì)量為3kD的中空纖維膜進行超濾，收集透過 液，再以截留相對分子質(zhì)量為150D~300D的陶瓷膜進行納濾，收集未透過液，減壓濃縮，干 燥，得水蛭小肽;其中地龍小肽的含量為50%~90%; ② 鉤藤總生物堿的制備:取鉤藤藥材，加入藥材重量10倍75%乙醇75°C回流提取3小時， 過濾，得濾液，濾渣重復操作兩次，合并三份濾液，減壓回收乙醇至相對密度為1:2，加入藥 材重量等重1%鹽酸20%乙醇溶液，以lml/min的流速通過732型強酸性苯乙烯系陽離子交換 樹脂，8BV水洗至中性，80%乙醇6BV除雜，10BV1%氨水80%乙醇洗脫，洗脫劑減壓回收溶劑，干 燥，得鉤藤總生物堿;其中鉤藤堿的含量為5%~9%; ③ 川芎總生物堿的制備:取川芎藥材，加入藥材重量8倍量90%乙醇70°C回流提取2次， 每次2小時，合并濾液合并減壓回收，干燥，得川芎總生物堿，其中川芎嗪的含量為0.23%~ 0.24%； ④ 黃芪總皂苷的制備：取黃芪藥材，加入藥材重量10倍量的70%乙醇80°C回流提取1小 時，過濾，得濾液，濾渣重復操作一次，合并兩份濾液，減壓回收乙醇至相對密度為1:2,加入 等量水飽和正丁醇萃取三次，合并正丁醇部分，回收正丁醇至相對密度為1:1，以lml/min的 流速通過D101大孔樹脂，先以4倍柱體積的蒸餾水洗脫，再以4倍柱體積的70%乙醇洗脫，收 集洗脫液，減壓回收，干燥得黃芪總皂苷，其中黃芪甲苷的含量為15%~20%; ⑤ 按照各有效部位的重量配比取上述四份有效部位，不加輔料或加入藥劑學常規(guī)輔 料，制成藥學上可以接受的劑型。
[0012] 鉤藤總生物堿的含量測定方法為:標準曲線的繪制:精密稱取對照品適量，加2%鹽 酸溶液制成含鉤藤堿lOOug/ml的溶液，作為對照品溶液。精密吸取對照品溶液O . 2、0.4、 0.6、0.8、1.0 ml分別置于10 ml量瓶中，用2%鹽酸溶液稀釋至刻度。以相應的溶劑為空白， 在250 nm波長處測定吸收度，以吸收度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線。取鉤藤總 生物堿有效部位25 mg，置于50 ml量瓶中，加2%鹽酸溶解并稀釋至刻度。精密吸取2 ml，置 100mL量瓶中，用2%鹽酸溶液稀釋至刻度，以相應的溶劑為空白，在250 nm波長處測定吸收 度，由標準曲線計算含量，即得。
[0013]川考總生物堿含量測定方法為:標準曲線的繪制：稱取鹽酸川芎嗪對照品25 mg， 精密稱定，置25 ml量瓶中，用氯仿溶解并稀釋至刻度，搖勻。即得I mg/ml的對照品溶 液.精密吸取鹽酸川芎嗪對照品溶液0、2、3、4、5、6、7、8 ml分置于分液漏斗中，加 入7