羥基氯喹在治療或預(yù)防腫瘤中的用圖
【專利摘要】本發(fā)明涉及羥基氯喹或其藥用鹽在制備用于治療和/或預(yù)防腫瘤的藥物中的用途，特別是在制備用于治療和/或預(yù)防肺癌、肝癌、紅白血病、腸癌、結(jié)腸腺癌、宮頸癌或黑色素瘤的藥物中的應(yīng)用。
【專利說明】
羥基氯喹在治療或預(yù)防腫瘤中的用途
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及羥基氯喹羥基氯喹在治療或預(yù)防腫瘤中的用途，特別是在治療或預(yù)防 肺癌、肝癌、紅白血病、腸癌、宮頸癌或黑色素瘤中的用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 羥基氯喹（Hydroxychloroquine，HCQ)的結(jié)構(gòu)式如下：
[0003]
[0004] 最初羥基氯喹是用來治療瘧疾的，隨著研究深入，發(fā)現(xiàn)它具有穩(wěn)定細(xì)胞的作用，能 降低自身抗體對人細(xì)胞的破壞，因此被用來治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、原發(fā)性干 燥綜合征以及其他一些風(fēng)濕免疫科疾病，另外也被用于治療一些光線過敏類的疾病。
[0005] 本發(fā)明人令人驚訝地發(fā)現(xiàn)羥基氯喹具有良好的抗腫瘤作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 基于上述發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明涉及羥基氯喹或其藥用鹽在制備用于治療和/或預(yù)防腫瘤 的藥物中的用途。
[0007] 本發(fā)明中，所述的腫瘤為癌癥，包括但不限于肺癌、肝癌、紅白血病、腸癌、結(jié)腸腺 癌、宮頸癌或黑色素瘤。
[0008] 本發(fā)明中，所述的羥基氯喹的藥用鹽為硫酸羥基氯喹。
[0009] 本發(fā)明中，所述的羥基氯喹或其藥用鹽可以單獨作為活性成分用于治療和/或預(yù) 防腫瘤，也可以與其他活性成分聯(lián)合用于治療和/或預(yù)防腫瘤。
【具體實施方式】
[0010] 下面將結(jié)合實施例對本發(fā)明的實施方案進(jìn)行詳細(xì)描述，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員將會 理解，下列實施例僅用于說明本發(fā)明，而不應(yīng)視為限定本發(fā)明的范圍。實施例中未注明具體 條件者，按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為 可以通過市購獲得的常規(guī)產(chǎn)品。
[0011] 下面實施例中用到的試劑和方法如下：
[0012] 細(xì)胞株：A549 (肺癌細(xì)胞株，廣州中醫(yī)藥大學(xué)青蒿研究中心提供）、！fepG2 (肝 癌細(xì)胞株）、K562(紅白血病細(xì)胞株）、HT-29(結(jié)腸腺癌細(xì)胞株，廣州中醫(yī)藥大學(xué)生化實 驗室提供）、Hela(宮頸癌細(xì)胞株）和B16 (小鼠黑色素瘤細(xì)胞株），除了肺癌細(xì)胞株和 結(jié)腸腺癌細(xì)胞株，其它腫瘤細(xì)胞株均購自美國菌種保藏中心（American Type Culture Collection, ATCC)〇
[0013] 藥品：硫酸羥基氯喹（HCQ，重慶康樂制藥有限公司，純度98. 7%，堿基含量 77.4%);順鉑（DDP，齊魯制藥有限公司，批號307023CF);紫杉醇（TAX0L，上海龍翔生物醫(yī) 藥開發(fā)有限公司，批號120703)。
[0014] 方法：準(zhǔn)確稱量硫酸羥基氯喹，將硫酸羥基氯喹溶于水直接用RPMI-1640培養(yǎng)基 溶解，配成20000 μ g/mL的母液于-20°C保存，使用時用新鮮的RPMI-1640培養(yǎng)基稀釋到相 應(yīng)濃度。
[0015] 取對數(shù)生長期的細(xì)胞接種到96孔板中，細(xì)胞接種密度約為LOX 105/mL，每孔 90 μ L，置于37°C、5 % CO2培養(yǎng)箱中連續(xù)培養(yǎng)24小時。然后取出培養(yǎng)板，將前述配制好的 羥基氯喹母液用新鮮的RPMI-1640培養(yǎng)基稀釋到工作濃度后加入各孔，每孔加10 μ L藥液。 羥基氯喹的終濃度分別為76. 40、38. 20、19. 10、9. 55、4. 78 μ g/mL，具體濃度見表1至表6， 各濃度設(shè)3個復(fù)孔，并設(shè)置陽性對照組（DDP或TAXOL藥液）、對照組（含有細(xì)胞的培養(yǎng)液） 和空白組（空白培養(yǎng)液），置于37°C、5% CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)48小時。
[0016] 羥基氯喹藥物處理后，每孔加入Cell Counting Kits-8(CCK-8, D0JIND0,批號： EQ829)試劑10 yL，置于37°C、5% CO2培養(yǎng)箱中溫育4小時，在酶標(biāo)儀檢測波長為450nm， 參考波長為630nm的條件下檢測吸光度OD值。
[0017] 計算腫瘤細(xì)胞生長抑制率（％)時，公式如下：
[0018] 抑制率IR( % )=(對照組平均OD值-給藥組平均OD值）/對照組平均OD 值 X 100% 〇
[0019] 應(yīng)用SPSS19. 0軟件，采用Logit法計算半數(shù)抑制濃度（ICJ。
[0020] 實施例1
[0021] 羥基氯喹對A549細(xì)胞作用48小時的抑制性試驗（η = 5)，結(jié)果見表1。 「00221 衷 1
[0024] 實施例2
[0025] 羥基氯喹對HEPG2細(xì)胞作用48小時的抑制性試驗（η = 3)，結(jié)果見表2。
[0026]表 2
[0028] 實施例3
[0029] 羥基氯喹對K562細(xì)胞作用48小時的抑制性試驗（η = 3)，結(jié)果見表3。
[0030] 表 3
[0032] 實施例4
[0033] 羥基氯喹對ΗΤ-29結(jié)腸腺癌細(xì)胞作用48小時的抑制性試驗（η = 3)，結(jié)果見表4。
[0034]表 4
[0036] 實施例5
[0037] 羥基氯喹對Hela宮頸癌細(xì)胞作用48小時的抑制性試驗（η = 3)，結(jié)果見表5。
[0038] 表 5
[0040] 實施例6
[0041] 羥基氯喹對Β16細(xì)胞作用48小時的抑制性試驗（η = 3)，結(jié)果見表6。
[0042] 表 6
[0043]
[0044] 由以上表1~6可知，羥基氯喹對A549(肺癌細(xì)胞株）、！fepG2(肝癌細(xì)胞株）、 K562(紅白血病細(xì)胞株）、HT-29(結(jié)腸腺癌細(xì)胞株）、Hela(宮頸癌細(xì)胞株）和B16(小鼠 黑色素瘤細(xì)胞株）均有一定的抑制作用，其半數(shù)抑制率（ICJ分別為26. 70、27.47、6.80、 5. 72、20. 21、13. 62 μ g/mL。其中羥基氯喹對紅白血病細(xì)胞株和結(jié)腸腺癌細(xì)胞株的抑制作用 最為明顯。
[0045] 上述實驗結(jié)果表明：羥基氯喹能夠有效治療或預(yù)防腫瘤疾病，特別是在治療和/ 或預(yù)防肺癌、肝癌、紅白血病、腸癌、結(jié)腸腺癌、宮頸癌或黑色素瘤等癌癥方面具有較好的應(yīng) 用前景。
【主權(quán)項】
1. 羥基氯喹或其藥用鹽在制備用于治療和/或預(yù)防腫瘤的藥物中的用途。2. 權(quán)利要求1的用途，其中所述的腫瘤為癌癥。3. 權(quán)利要求2的用途，其中所述的癌癥為肺癌、肝癌、紅白血病、腸癌、結(jié)腸腺癌、宮頸 癌或黑色素瘤。4. 權(quán)利要求1至3任一項的用途，其中所述的羥基氯喹的藥用鹽為硫酸羥基氯喹。5. 權(quán)利要求1至3任一項的用途，其中所述的羥基氯喹或其藥用鹽單獨作為活性成分， 或者，所述的羥基氯喹或其藥用鹽與其他活性成分聯(lián)合應(yīng)用。
【文檔編號】A61P35/02GK105982896SQ201510084787
【公開日】2016年10月5日
【申請日】2015年2月15日
【發(fā)明人】宋健平, 徐勤, 李國銘, 鄧長生, 王振華, 周玖瑤, 關(guān)業(yè)枝, 王琪, 張紅英, 鄭紹琴, 高巖, 胡艷山, 黃博
【申請人】廣州中醫(yī)藥大學(xué)科技產(chǎn)業(yè)園有限公司