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      無患子在制備治療畜禽病毒性傳染病的藥物中的應用

      文檔序號:10632918閱讀:424來源:國知局
      無患子在制備治療畜禽病毒性傳染病的藥物中的應用
      【專利摘要】本發(fā)明公開了無患子在制備治療畜禽病毒性傳染病的藥物中的應用,本發(fā)明應用無患子治療畜禽病毒性傳染病時,療效高,副作用小,為臨床治療畜禽病毒性傳染病提供了一種新的選擇。
      【專利說明】
      無患子在制備治療畜禽病毒性傳染病的藥物中的應用
      技術領域
      [0001] 本發(fā)明屬于中藥領域,具體設及無患子及其提取物在制備治療畜禽病毒性傳染病 的藥物中的應用。
      【背景技術】
      [0002] 在畜禽傳染病中,病毒性傳染病對養(yǎng)殖業(yè)危害最大。在治療畜禽病毒性傳染病中, 抗生素、橫胺類藥物無治療作用,雖然金剛燒胺、利己韋林、阿昔洛韋、阿德福韋醋等少數(shù)藥 物,具有一定療效,但抗病毒譜窄、毒副作用大、價格高昂、且易產生耐藥毒株,而運些抗病 毒西藥都是人用的,動物是嚴禁使用的,目前,還沒有一種動物使用的抗病毒西藥,因此,尋 求新型抗病毒中藥迫在眉睫。
      [0003] 無患子為無患子科植物無患樹Sapindus Μ址orossi Gaertn的種子,產于華東、中 南至西南地區(qū),具有清熱、桂疲、消積、殺蟲的功效。常用于喉搏腫痛,肺熱咳嗽,音啞,食滯, 巧積,咖蟲腹痛,滴蟲性陰道炎,癖疾,腫毒。
      [0004] 迄今,尚未見有無患子防治畜禽病毒性傳染病的報道。

      【發(fā)明內容】

      [0005] 本發(fā)明所要解決的技術問題是提供無患子在制備治療畜禽病毒性傳染病的藥物 中的應用。
      [0006] 本發(fā)明的技術問題是通過W下技術方案實施的:
      [0007] 無患子在制備治療畜禽病毒性傳染病的藥物中的應用,所述的畜禽病毒性傳染病 為雞新城疫、偽狂犬病、雞法氏囊病、雞傳染性支氣管炎、豬藍耳病與圓環(huán)病毒混合感染。前 述無患子不僅僅指無患子生藥材本身,還包括無患子炮制品、無患子提取物,W無患子為活 性成分的制劑或W無患子為活性成分之一的制劑;優(yōu)選為無患子提取物或W無患子為活性 成分的制劑。
      [000引本發(fā)明無患子提取物為采用水或有機溶劑作為溶劑,采用二氧化碳超臨界萃取 法、滲漉、煎煮、加熱回流等常規(guī)技術的提取物。所述的有機溶劑是指乙醇、甲醇等不同極性 的溶劑,優(yōu)選采用質量百分比濃度為75%~85%的乙醇或甲醇。
      [0009]水提取物優(yōu)選按照如下方法制備得到:
      [0010]取無患子,娠碎,按藥材重量的5~20倍加水浸泡后,煎煮1~4次,每次1~化,合并 煎煮液,脫水濃縮至稠膏狀烘干即得無患子提取物。
      [0011] 有機溶劑提取物優(yōu)選按照如下方法制備得到:
      [0012] 取無患子,娠碎,按藥材重量的5~20倍重量的75%~85%乙醇或甲醇(質量百分 比濃度)浸泡1~4小時后,滲漉,回收乙醇或甲醇,濃縮至稠膏狀,低溫減壓烘干,得到提取 物。
      [0013] 無患子生藥材或其提取物可直接粉碎制成散劑,或加入藥學上可接受的輔料采用 常規(guī)方法制成口服制劑或注射劑。所述口服制劑優(yōu)選為合劑、片劑或口服液。
      [0014] 中等家畜(如豬、羊等)每次服用無患子折合生藥材為3~6g,日服兩次,家禽用量 是中等家畜的1/10~1/5。
      [0015] 本發(fā)明的有益效果:發(fā)明人W無患子或其提取物治療雞新城疫、雞法氏囊病、雞傳 染性支氣管炎、豬偽狂犬病、豬藍耳病與圓環(huán)病毒混合感染,療效確實穩(wěn)定。本發(fā)明提供了 無患子用于制備治療畜禽病毒性傳染病的藥物中的應用,為臨床治療畜禽病毒性傳染病提 供了一種新的選擇。
      【具體實施方式】:
      [0016] W下通過實例形式的【具體實施方式】,對本發(fā)明的上述內容再作進一步的詳細說 明。但不應將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于W下的實例。凡基于本發(fā)明上述內容 所實現(xiàn)的技術均屬于本發(fā)明的范圍。
      [0017] 下面就本發(fā)明的臨床效果進一步說明本發(fā)明的療效:
      [0018] -、無患子雞胚接種抗新城疫病毒和偽狂犬病病毒試驗
      [0019] 1、藥品:
      [0020] (1)無患子樣品1:按照實施例1方法制備得到,用生理鹽水配成每mL藥液含Ig生藥 的濃度。
      [0021] (2)無患子樣品2:按照實施例2方法制備得到,用生理鹽水配成每mL藥液含Ig生藥 的濃度。
      [0022] (3)無患子樣品3:按照實施例10方法制備得到。
      [0023] (4)西藥對照藥:50mg/mL利己韋林溶液。
      [0024] 2、雞新城疫毒株由江蘇農牧科技職業(yè)學院提供,雞胚尿囊液的HA效價91og2,經測 定,最小致死量為1:3000萬倍稀釋。
      [0025] 3、偽狂犬病毒株容A株AV25偽狂犬病毒株,由中國獸醫(yī)監(jiān)察所提供,最小致死量為 1:50倍稀釋。
      [00%] 4、試驗雞胚10日齡非免雞胚,購自儀征市大儀雞場。
      [0027] 5、試驗分組10日齡雞胚120個,具體分組情況見表1、表2。
      [002引 6、試驗方法
      [0029] (1)藥物毒性實驗將無患子樣品1、無患子樣品2和無患子樣品3分別用生理鹽水稀 釋,將原液及不同濃度的藥液分別接種于3只10日齡雞胚的尿囊腔中,每只0.2mL,置37.8°C 溫箱解育72h,每天觀察存活情況,雞胚全部存活的最高藥液濃度為正式實驗起始濃度,同 時設生理鹽水對照組,藥物對雞胚毒性實驗結果見表3。
      [0030] 表1新城疫實驗組情況
      [0031]
      [0035] 表3中藥對雞胚毒性實驗結果(n = 4)
      [0036]
      [0037] *分母為接種胚數(shù),分子為存活胚數(shù)。
      [003引(2)具體方法:
      [0039] ①新城疫實驗組
      [0040] 試驗I組每個雞胚尿囊腔同時接種無患子樣品1原液0.2mL,新城疫病毒稀釋液 0.ImLo
      [0041] 試驗Π 組每個雞胚尿囊腔同時接種無患子樣品2原液0.2mL,新城疫病毒稀釋液 0.ImLo
      [0042] 試驗HI組每個雞胚尿囊腔同時接種無患子樣品3原液0.2mL,新城疫病毒稀釋液 0.ImLo
      [0043] 試驗IV組每個雞胚尿囊腔同時接種50mg/mL的利己韋林0.2mL,新城疫病毒稀釋 液0.ImL。
      [0044] 陽性對照組每個雞胚尿囊腔同時接種生理鹽水0.2mL,新城疫病毒稀釋液0.1 mL。
      [0045] 空白對照組不接種病毒,不給藥。
      [0046] ②偽狂犬病實驗組
      [0047] 試驗I組每個雞胚尿囊腔同時接種無患子樣品1原液0.2mL,偽狂犬病毒稀釋液 0.ImL。
      [004引試驗Π 組每個雞胚尿囊腔同時接種無患子樣品2原液0.2mL,偽狂犬病毒稀釋液 0.ImL。
      [0049] 試驗HI組每個雞胚尿囊腔同時接種無患子樣品3原液0.2mL,偽狂犬病毒稀釋液 0.ImL。
      [0050]試驗IV組每個雞胚尿囊腔同時接種50mg/mL的利己韋林0.2mL,偽狂犬病毒稀釋 液0.ImL。
      [0化1 ] 陽性對照組每個雞胚尿囊腔同時接種生理鹽水0.2mL,偽狂犬病毒稀釋液0.1 mL。 [0052]空白對照組不接種病毒,不給藥。
      [0化3] 上述雞胚在37.8 °C恒溫箱中繼續(xù)解化,每天照蛋2~3次,棄去2地內死胚,收取24 ~7化死胚和7化活胚的尿囊液,低溫保存?zhèn)溆?。W血凝化A)實驗檢測雞胚尿囊液的病毒效 價。
      [0054] (3)無患子對雞新城疫病毒和偽狂犬病病毒增殖的影響,結果見表4、表5。
      [0055] 表4無患子對雞新城疫病毒增殖的抑制作用測定結果
      [0化6]
      [0化引與陽性對照組比較:沖<0.05,*沖<0.01
      [0059] 表5無患子對偽狂犬病毒增殖的抑制作用測定結果
      [0060]
      [0061 ] 與陽性對照組比較:沖<0.05,*沖<0.01
      [0062] 二、本發(fā)明對實驗性雞新城疫的治療試驗
      [0063] 1、試驗動物:本試驗用35日齡艾維茵肉雞200只,隨機分為10組,每組20只,即無患 子樣品1(按實施例3方法制備)預防組與治療組,無患子樣品2(按實施例4方法制備)預防組 與治療組,無患子樣品3(按實施例10方法制備)預防組與治療組,西藥預防組與治療組,感 染對照組,空白對照組。
      [0064] 2、雞新城疫毒株由江蘇農牧科技職業(yè)學院提供,雞胚尿囊液的HA效價為91〇邑2。 [00化]3、試驗方法:
      [0066] (1)先測定尿囊液最小致死量,經測定尿囊液的最小致死量為200倍稀釋,每只雞 滴鼻與點眼稀釋后的尿囊液0.2mL。
      [0067] (2)操作空白對照組的雞不用藥,不接種尿囊液,其余7組的雞在同一時間里每只 滴鼻點眼稀釋后的尿囊液0.2mL。
      [0068] (3)用藥方法與療效無患子樣品1預防組在接種尿囊液的同時,開始用無患子樣品 1 口服,每只雞每次ImL,每天用藥2次,連用4d。無患子樣品1治療組在接種尿囊液4d后(出現(xiàn) 病狀)用藥,每只雞每次ImL,每天用藥2次,連用4d。無患子樣品2預防組在接種尿囊液的同 時,用無患子樣品2 口服,每只雞每次ImL,每天用藥2次,連用4d;無患子樣品2治療組在接種 尿囊液4d后(出現(xiàn)病狀)用藥,每只雞每次ImL,每天用藥2次,連用4d。無患子樣品3預防組在 接種尿囊液的同時,開始用無患子樣品3 口服,每只雞每次ImL,每天用藥2次,連用4d。無患 子樣品3治療組在接種尿囊液4d后(出現(xiàn)病狀)用藥,每只雞每次ImL,每天用藥2次,連用4d。 西藥預防組在接種尿囊液的同時,開始用50mg/mL的利己韋林口服,每只雞每次ImL,每日2 次,連用4d。西藥治療組用50mg/mL的利己韋林,在接種尿囊液4d后(出現(xiàn)癥狀)用藥,每只雞 每次ImL 口服,每天用藥2次,連用4d。感染對照組的雞只接種尿囊液,不用任何藥物,結果見 表6。
      [0069] 表6雞新城疫預防與治療結果 Γ00701
      [0071 ] Ξ、本發(fā)明對雞新城疫治療的臨床觀察
      [0072]雞新城疫由新城疫病毒引起的一種急性高度接觸性傳染病,各種日齡的雞均可發(fā) 病,常呈敗血癥經過,主要特征是呼吸困難,下頻,神經機能素亂,粘膜和漿膜出血,死亡率 高,可造成很大經濟損失。用無患子樣品1(按實施例3方法制備)、無患子樣品2(按實施例4 方法制備),無患子樣品3(按實施例9方法制備),每只雞每次口服ImL,每天用藥兩次,連用4 天。在廣東省新豐、連平、掲西、廣寧等縣對發(fā)病雞進行藥物治療試驗,治愈數(shù)通過用藥3~ 4d后存活數(shù)進行評價,結果見表7、表8、表9。
      [0073] 表7無患子樣品1對雞新城疫臨床療效結果單位:只· %
      [0074]
      '[0080]可見,本發(fā)明所制作的藥物治療雞新城疫一千余例,均取得較好療效,治療2d后停 止死亡,3~4d后可治愈,治愈后一般不復發(fā),表明本發(fā)明治療雞新城疫有甚高療效。
      [0081 ]四、本發(fā)明對雞法氏囊病的臨床治療結果
      [0082] 2014年6月9日,江蘇沐陽某雞場,有23日齡維雞200只,出現(xiàn)精神萎頓,羽毛松亂, 采食減少,畏寒,常聚堆。隨后病雞出現(xiàn)腹瀉,排出白色粘稠或水樣稀糞。剖檢4只雞,在腿部 和胸部肌肉有出血;法氏囊水腫和出血,體積增大。用瓊脂凝膠沉淀試驗診斷為法氏囊病。 立即用本發(fā)明藥物治療組1(按實施例3方法制備得到)、藥物治療組2(按實施例4方法制備 得到)、藥物治療組3(按照實施例9方法制備得到),并用黃巧多糖為對照藥物,共治療3天, 每只維雞每次口服ImL,每天用藥2次;治療結果見表10。
      [0083] 五、本發(fā)明對雞傳染性支氣管炎的臨床治療結果
      [0084] 2015年5月19日,江蘇灑洪某雞場,有35日齡維雞220只,突然出現(xiàn)伸頸、張口呼吸、 咳嗽、打噴曖,有特殊的喫音,昏睡、翅下垂,下頻。剖檢3只雞,支氣管有卡他性滲出物,氣囊 混濁,腎腫大、蒼白,呈斑駁狀的"花斑腎"。用血球凝集抑制試驗,診斷為雞傳染性支氣管 炎。用本發(fā)明藥物治療組1(按實施例3方法制備得到)、藥物治療組2(按實施例4方法制備得 到)、藥物治療組3(按照實施例9方法制備得到),并用黃巧多糖為對照藥物,共治療4天,每 只維雞每次口服ImL,每天用藥2次;治療結果見表11。
      [0085] 六、本發(fā)明對豬藍耳病與圓環(huán)病毒病的臨床治療結果
      [0086] 2015年11月6日,江蘇宜興某規(guī)模豬場,有50日齡仔豬131頭,出現(xiàn)精神沉郁,食欲 減退或廢絕。11月7日,體溫上升到40.8°C左右,呼吸困難,全身皮膚發(fā)紅,腹瀉,腹股溝淋己 結腫大。剖檢3頭,剖檢變化:喉頭充血腫脹,肺呈點狀和斑塊狀出血,切面呈大理石樣變化, 腎水腫、出血,呈±黃色。屯、包膜和胸腔存在大量積液,屯、臟有大量出血斑。腸系膜淋己結、 腹股溝淋己結出血。取病料送江蘇農科院檢查,用RT-PCR(反轉錄聚合酶鏈式反應)檢測,診 斷為豬藍耳病病毒與圓環(huán)病毒混合感染。立即用本發(fā)明藥物治療組1(按照實施例5方法制 備得到)、本發(fā)明藥物治療組2(按照實施例6方法制備得到)和本發(fā)明藥物治療組3(按照實 施例7方法制備得到)治療,并用黃巧多糖為對照藥物,共治療4天,每頭仔豬每次5mL,每天 用藥2次,治療結果見表12。
      [0087] 表10雞法氏囊病臨床療效結果單位:只.% rm只只1
      [0092]表12豬藍耳病與圓環(huán)病毒混合感染臨床療效結果單位:頭· %
      [0093]
      [0094] 通過本次臨床應用結果看,本發(fā)明無患子注射液,治療豬藍耳病和圓環(huán)病毒混合 感染,口服液治療雞新城疫、雞法氏囊病、雞傳染性支氣管炎,療效比黃巧多糖效果明顯。表 明本發(fā)明中藥制劑,治療畜禽病毒性傳染病有顯著療效。
      [00巧]屯、安全性評價
      [0096] 為了明確本發(fā)明制劑的毒副作用,并對其安全性做出準確、客觀的評價,為臨床用 藥提供科學依據,確保用藥安全,進行了本發(fā)明的毒性試驗。
      [0097] 急性毒性試驗:通過對ICR小鼠進行本發(fā)明的(按實施例3制備得到化化0和最大耐 受量試驗表明,按設計劑量經口服后,8日內各組小鼠行為體征正常,均未出現(xiàn)中毒癥狀和 死亡。故無法測定出LDso,而只好W最大給藥量60g/kg為最高劑量。第10天撲殺后,各組小鼠 的肝、腎、脾、肺等臟器均無病變。
      [009引長期毒性試驗:選用SD大鼠30只,分成3個組,每組10只,雌雄各半,給予不同劑量 (20.0、10.0、5.0邑生藥/1^)的本發(fā)明的中藥制劑(按實施例4制備得到),每天灌藥一次,連 續(xù)30天。本發(fā)明的Ξ個劑量組動物生活狀態(tài)良好,外觀體征、行為活動、進食量和體重增長 均無異常變化。各組大鼠的肝、腎、脾、肺等臟器均無病變。表明本發(fā)明無毒副作用和不良反 應,臨床應用安全可靠。
      [0099] 實施例1本發(fā)明提取物1的制備
      [0100] 無患子500g,娠碎,按藥材重量的10倍加蒸饋水浸泡化后,置煎煮罐熬化,濾出藥 液,再加藥材重量的10倍蒸饋水煎化,濾出藥液,合并兩次藥液,脫水濃縮至稠膏狀,低溫減 壓烘干,共得41g提取物。
      [0101] 實施例2本發(fā)明提取物2的制備
      [0102] 取無患子500g,娠碎,用無患子粉末重量10倍量,質量百分濃度為80%乙醇浸泡4 小時后,滲漉,回收乙醇,濃縮至稠膏狀,低溫減壓烘干,共得3?提取物。
      [0103] 實施例3本發(fā)明口服液1的制備
      [0104] 無患子500g,娠碎,按藥材重量的8倍加水浸泡化,置煎煮罐熬化,濾出藥液,再加 藥材重量的8倍水煎化,濾出藥液,合并兩次藥液,濃縮至500mL,裝瓶,封口、滅菌即可。
      [010引實施例4本發(fā)明口服液2的制備
      [0106] 取無患子500g,娠碎,溶于無患子藥材重量10倍量80%乙醇浸泡4小時后,滲漉,回 收乙醇,濃縮至500mL,裝瓶,封口、滅菌即可。
      [0107] 實施例5本發(fā)明注射劑1的制備
      [0108] 無患子lOOOg,娠碎,按藥材重量的12倍加蒸饋水浸泡化,置煎煮罐熬化,濾出藥 液,再加10倍水煎比,濾出藥液,合并兩次藥液,脫水濃縮至稠狀,加入質量百分濃度為95% 的乙醇,使含醇量達60 %,放置24h后,抽濾,回收乙醇。濾液再加入質量百分濃度為95%的 乙醇,使含醇量達70%,放置24h后,抽濾,回收乙醇。將濾液加蒸饋水至800mL。加入8克的活 性炭,煮沸恒溫30min,濾液加蒸饋水至lOOOmL,加熱至80°C,加入20mL苯甲醇,反復抽濾至 澄明,調抑至7.0,灌封,滅菌30min,備用。
      [0109] 實施例6本發(fā)明注射劑2的制備
      [0110] 取無患子lOOOg,娠碎,溶于無患子藥材重量10倍量,濃度為85%乙醇中,浸泡4h后 過濾,殘渣再用85%乙醇浸泡4h過濾,合并兩次濾液,回收乙醇至無醇味,將藥液濃縮至 800mL,加入8克活性炭,煮沸恒溫30min,抽濾,濾液加蒸饋水至lOOOmL,加熱至80°C,加入 20mL苯甲醇,反復抽濾至澄明,灌封,滅菌30min,備用。
      [0111] 實施例7本發(fā)明注射劑3的制備
      [0112] 取無患子lOOOg,娠碎,溶于無患子藥材重量8倍量,濃度為75%甲醇中,浸泡化后 過濾,殘渣再用75%甲醇浸泡化過濾,合并兩次濾液,回收甲醇至無醇味,將藥液濃縮至 800mL,加入8克活性炭,煮沸恒溫30min,抽濾,濾液加蒸饋水至lOOOmL,加熱至80°C,加入 20mL苯甲醇,反復抽濾至澄明,灌封,滅菌30min,備用。
      [0113] 實施例8本發(fā)明提取物3的制備
      [0114] 取無患子500g,娠碎,用無患子粉末重量10倍量,質量百分濃度為75 %乙醇浸泡4 小時后,滲漉,回收乙醇,濃縮至稠膏狀,低溫減壓烘干,共得31g提取物。
      [011引實施例9本發(fā)明口服液3的制備
      [0116] 取無患子500g,娠碎,溶于無患子藥材重量20倍量85%甲醇浸泡4小時后,滲漉,回 收甲醇,濃縮至500mL,裝瓶,封口、滅菌即可。
      [0117] 實施例10
      [0118] 取無患子生藥材,粉碎過200目,用蒸饋水配成每mL藥液含Ig生藥的濃度。
      [0119] 實施例11本發(fā)明片劑的制備
      [0120] 將按照實施例1方法制備得到的無患子提取物加糊精,混勻制粒,6(TC烘干,過20 目篩整粒,壓片。
      【主權項】
      1. 無患子在制備治療畜禽病毒性傳染病的藥物中的應用,所述的畜禽病毒性傳染病為 雞新城疫、偽狂犬病、雞法氏囊病、雞傳染性支氣管炎、豬藍耳病與圓環(huán)病毒混合感染。2. 根據權利要求1所述的應用,其特征在于所述的無患子包括無患子生藥材、無患子提 取物、無患子炮制品或以無患子為活性成分的制劑。3. 根據權利要求2所述的應用,其特征在于所述的無患子提取物為水或有機溶劑提取 物。4. 根據權利要求3所述的應用,其特征在于所述的有機溶劑為乙醇或甲醇。5. 根據權利要求4所述的應用,其特征在于所述的有機溶劑為質量百分比濃度為75% ~85%乙醇或甲醇。6. 根據權利要求2所述的應用,其特征在于所述的制劑為無患子生藥材或其提取物直 接粉碎制成散劑或加入藥學上可接受的輔料制成口服制劑或注射劑。7. 根據權利要求6所述的應用,其特征在于所述口服制劑為合劑、片劑或口服液。
      【文檔編號】A61P31/22GK105998319SQ201610440551
      【公開日】2016年10月12日
      【申請日】2016年6月17日
      【發(fā)明人】張響英, 陳章言, 卞桂華, 夏軍, 陳家生, 許琴瑟, 張偉
      【申請人】江蘇農牧科技職業(yè)學院
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