Schiglautone A衍生物的組合物用于制備升高白細(xì)胞藥物的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及有機(jī)合成和藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及組合物、制備方法及其在制備升高白細(xì)胞藥物上的用途。本發(fā)明公開(kāi)了一種組合物及其制備方法。藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明的組合物具有升高白細(xì)胞的作用，具有開(kāi)發(fā)升高白細(xì)胞藥物的價(jià)值。
【專(zhuān)利說(shuō)明】
Sch iglautone A衍生物的組合物用于制備升高白細(xì)胞藥物
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及有機(jī)合成和藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及組合物、制備方法及其用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 白細(xì)胞減少癥是由于原因不明和繼發(fā)于其他疾病之后而引起的疾病，分為原發(fā)性 和繼發(fā)性兩大類(lèi)。原發(fā)性者原因不明；繼發(fā)性者認(rèn)為其病因可由急性感染，物理、化學(xué)因素， 血液系統(tǒng)疾病，伴脾腫大的疾病，結(jié)締組織疾病，過(guò)敏性疾病，遺傳性疾病等，獲得性或原因 不明性粒細(xì)胞減少等。
[0003] 白細(xì)胞減少的治療目前已有的藥物存在毒性大、安全性低的問(wèn)題，從天然產(chǎn)物中 尋找化合物或先導(dǎo)化合物并進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾獲得其衍生物，從而得到高效低毒的潛在藥物有 重要價(jià)值。
[0004] 本發(fā)明涉及的化合物I是一個(gè)201 1年發(fā)表（Fan-Yu Meng et al .， 2011.Schiglautone A,a New Tricyclic Triterpenoid with a Unique 6/7/9-Fused Skeleton from the Stems of Schisandra glaucescens.Organic Letters 13(2011) 1502-1505)的化合物，我們對(duì)化合物I進(jìn)行了結(jié)構(gòu)修飾，獲得了兩個(gè)新的衍生物即化合物 III和化合物IV，并用化合物III和化合物IV制備了組合物并對(duì)該組合物升高白細(xì)胞活性進(jìn) 行了評(píng)價(jià)，其具有升高白細(xì)胞活性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明公開(kāi)了一個(gè)新的組合物，該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合物 中化合物III和化合物IV的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為20%和80%。
[0006]
[0007] 本發(fā)明公開(kāi)的組合物可以制成藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的載體。
[0008] 本發(fā)明的目的是提供組合物在制備升高白細(xì)胞藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明組合物可以 顯著升高失血和化學(xué)物品引起的白細(xì)胞降低。
[0009]以下通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說(shuō)明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不受具體實(shí) 施例的任何限制，而是由權(quán)利要求加以限定。
【具體實(shí)施方式】
[0010] 實(shí)施例1化合物Schiglautone A的制備
[0011] 化合物Schiglautone A(I)的制備方法參照Fan-Yu Meng等人發(fā)表的文獻(xiàn)(Fan-Yu Meng et al.,2011.Schiglautone A,a New Tricyclic Triterpenoid with a Unique 6/ 7/9-Fused Skeleton from the Stems of Schisandra glaucescens.Organic Letters 13(2011 )1502-1505)的方法。
[0012]
[0013] 實(shí)施例2Schiglautone A的0-溴乙基衍生物（II)的合成
[0014] 將化合物I(502mg，1.00mmol)溶于15mL苯，向溶液中加入四丁基溴化銨（TBAB) (0.088)，1，2-二溴乙烷(7.52(^，40.00111111〇1)和61^的50%氫氧化鈉溶液?；旌衔镌?5攝氏 度攪拌Shdh之后將反應(yīng)液倒入冰水中，立即用二氯甲烷萃取兩次，合并有機(jī)相溶液。然后 對(duì)有機(jī)相溶液依次用水和飽和食鹽水洗滌3次，再用無(wú)水硫酸鈉干燥，最后減壓濃縮去除溶 劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗品用硅膠柱層析純化(流動(dòng)相為:石油醚/丙酮=100:1. 〇，v/V)，收 集棕色集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物II的棕色粉末(508mg，71 % )。
[0015] ΧΗ NMR(500MHz,DMS0-d6)5l3.40(s,lH),6.10(s,lH),5.63(s,lH),5.53(s,lH), 3.85(d,J = 11.2Hz,4H) ,3.52(d,J=10.8Hz,4H) ,2.96(s,lH) ,2.20(s,lH) ,2.16(s,2H), 2.00(s,lH),1.84(d,J=13.9Hz,4H),1.69(s,lH),1.58(dd,J = 22.2,8.5Hz,4H) ,1.51(s, lH),1.47(s,lH),1.26(dd,J=9.1,4.4Hz,4H),1.21(s,lH),1.08-0.98(m,4H),0.96-0.94 (m,9H),0.94-0.85(m,6H).
[0016] 13C NMR(125MHz,DMS0-d6)S211.46(s),209.14(s),170.06(s),161.12(s),143.51 (s) ,132.01(s) ,127.77(s) ,85.96(s),82.40(s),70.19(s),69.10(s),57.14(s),52.73 (s),51.90(s),45.77(s),40.67(s),38.57(s),38.32(s),35.04(s),33.55(s), 33.27(s), 29.85(s),28.98(s),26.71(s),25.50(s),24.05(s),22.31(s),21.06(s),20.56(s),20.00 (s),18.69(s),18.11(s),15.07(s).
[0017] HRMS(ESI)m/z[M-H]_calcd for C34H5iBr2〇6:715.2032；found 715.2027.
[0018]
[0019] 實(shí)施例3Schiglautone A的0-(1Η-四氮唑基）乙基衍生物（III)的合成 [0020] 將化合物II(358mg，0.5mmo 1)溶于15mL乙腈當(dāng)中，向其中加入無(wú)水碳酸鉀(345mg， 2 · 5mmo 1)，碘化鉀（84mg，0 · 5mmo 1)和1H-四氮唑（140 lmg，20mmo 1)，混合物加熱回流5h。反應(yīng) 結(jié)束后將反應(yīng)液倒入20mL冰水中，用等量二氯甲烷萃取三次，合并有機(jī)相。依次用水和飽和 食鹽水洗滌合并之后的有機(jī)相，再用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗品。因 為互變異構(gòu)作用，在反應(yīng)條件下會(huì)生成1H-四氮唑基和2H-四氮唑基兩種取代產(chǎn)物。產(chǎn)物粗 品用硅膠柱層析純化(流動(dòng)相為:石油醚/丙酮= 100:1，v/v)，收集淡黃色集中洗脫帶，再將 淡黃色洗脫帶濃縮，用硅膠柱層析純化(流動(dòng)相為:石油醚/丙酮=100:0.5，v/v)，依次收集 兩個(gè)淡黃色的洗脫帶，濃縮前1個(gè)洗脫帶即得到化合物III的淡黃色固體(79.8mg，23%)。
[0021] ΧΗ NMR(500MHz,DMS0-d6)5l6.29(s,lH),9.99(s,lH),9.93(s,lH),6.25(s,lH), 5.76(s,lH),5.40(s,lH),4.57(s,1H),4.38(s,1H),4.32(s,1H),4.21(s,1H),3.96(d,J= 11.9Hz,4H),3.33(s,lH),2.55(s,lH),2.51(s,2H),2.39(s,lH),l.98(s,3H),1.82-1.76 (m,3H),1.73(s,lH),1.65(d,J=6.5Hz,2H),l.60(s,lH),1.53(s,1H),1.47-1.37(m,4H), 1.30(s,lH),1.19(s,lH),1.10(t,J=12.5Hz,3H),1.08(t,J=12.5Hz,9H),1.03(s,3H), 0.86(s,3H).
[0022] 13C NMR(125MHz,DMS0-d6)S211.72(s),209.42(s),170.36(s),161.38(s),145.37 (s) ,143.80(s),132.29(s),128.04(s),86.25(s),82.68(s),66.14(s),65.60(s), 57.33 (s),52.91(s),52.08(s),46.81(s),45.95(s),40.84(s),38.76(s),38.50(s),35.21(s), 33.74(s),30.01(s),29.16(s),26.91(s),25.66(s),24.23(s),22.51(s),21.22(s),20.74 (s),20.20(s),18.85(s),18.29(s),15.27(s).
[0023] HRMS(ESI):m/z[M+H]+calcd for C36H55N8〇6:695.4245;found:695.4248〇
[0024]
[0025] 實(shí)施例4Schiglautone A的0-(苯并咪唑基）乙基衍生物的合成
[0026] 將化合物II(358mg，0.5mmo 1)溶于15mL乙腈當(dāng)中，向其中加入無(wú)水碳酸鉀(345mg， 2 · 5mmol)，鵬化鉀(84mg，0 · 5mmol)和苯并咪唑（1180mg，lOmmol)，混合物加熱回流6h。反應(yīng) 結(jié)束后將反應(yīng)液倒入冰水中，用等量二氯甲烷萃取三次，合并有機(jī)相。依次用水和飽和食鹽 水洗滌合并之后的有機(jī)相，再用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗 品用硅膠柱層析純化(流動(dòng)相為:石油醚/丙酮= 100:1.5，v/v)，收集棕色集中洗脫帶，濃縮 即得到化合物IV的棕色固體（169.9mg，43 % )。
[0027] ΧΗ NMR(500MHz,DMS0-d6)5l3.32(s,lH) ,8.38(s,2H) ,7.66(d,J = 25.0Hz,4H), 7.39(s,2H),7.32(s,2H),6.25(s,1H),5.64(d,J=18.7Hz,2H),4.34(s,1H),4.28(s,lH), 4.18(d,J=13.7Hz,2H),4.04(s,2H),3.99(s,2H),3.13(s,1H),2.65(s,2H),2.26(s,1H), 2.17(s,lH) ,2.06(s,lH),l.98(s,3H) ,1.87(d,J= 16.4Hz,2H) ,1.66(dd,J = 8.0,6.6Hz, 4H),1.62(s,lH),1.49(s,lH),1.41(dd J=19.6,10.4Hz,2H),1.37(d,2H),1.20-l.ll(m, 4H) ,1.07(d,J = 20.0Hz,6H),103(d,J = 20.0Hz,3H),1.01(d,J = 20.0Hz,3H) ,0.95(d,J = 20.0Hz,3H).
[0028] 13C NMR(125MHz,DMS0-d6)δ211·30(s),208·98(s),169·90(s),160·96(s),146·28 (s),143.34(s),139.64(s),133.48(s),131.85(s),127.61(s),123.92(s),123.35(s), 118.55(s),110.85(s),85.79(s),82.26(s),67.74(s),67.20(s),57.00(s),52.56(s), 51.73(s),45.63(s),44.94(s),40.49(s),38.42(s),38.17(s),34.86(s),33.40(s),29.68 (s),28.81(s),26.57(s),25.33(s),23.88(s),22.17(s),20.89(s),20.39(s),19.86(s), 18.52(s),17.87(s),14.93(s).
[0029] HRMS(ESI):m/z[M+H]+calcd for C48H63N4〇6:791.4748;found:791.4744。
[0030]
[0031] 實(shí)施例5組合物升高白細(xì)胞活性
[0032] 一、組合物對(duì)失血小鼠的治療作用
[0033] 對(duì)失血小鼠的影響ICR小鼠50只，罕d各半，均分成5組(η = 10)。除生理鹽水組外， 其它組每只小鼠從眼眶靜脈放血0.5ml，24h后再取血測(cè)全部各組白細(xì)胞指標(biāo)，然后連續(xù)灌 胃給藥1周，末次給藥lh后，從眼眶靜脈叢取血用F-800全血小板分析儀測(cè)白細(xì)胞指標(biāo)。 [0034] 組合物的制備：將研磨之后過(guò)200目網(wǎng)的20mg化合物III的粉末和研磨之后過(guò)200 目網(wǎng)的80mg化合物IV的粉末裝入帶蓋的小管中并用渦輪攪拌儀混合即得到100mg組合物， 使用時(shí)用水溶解這l〇〇mg的組合物即得到組合物的溶液。
[0035] 表1組合物對(duì)因失血所致白細(xì)胞減少的治療作用（109/L)
[0036]
12345 與模型組比較:*ρ〈0·05 2 結(jié)果表明，放血小鼠經(jīng)服用組合物治療7天后，組合物給藥組與模型組比較，白細(xì) 胞顯著高于模型組，接近生理鹽水組。而化合物III和化合物IV不具有此活性。 3 二、組合物對(duì)環(huán)磷酰胺致白細(xì)胞減少的治療作用 4 對(duì)小鼠骨髓造血功能損傷的防治作用ICR小鼠50只，??用，均分成5組(η=10)， 即生理鹽水組、造模組、組合物1.2mg/kg組、化合物III 1.2mg/kg組和化合物IV 1.2mg/kg 組，口服給藥，每天1次。第0、5、10日除生理鹽水組外，其它各組小鼠分別腹腔注射環(huán)磷酸胺 80mg/kg，然后繼續(xù)給藥3天。于末次給藥后lh，從眼眶靜脈叢取血，測(cè)白細(xì)胞。 5 表2組合物對(duì)環(huán)磷酰胺所致白細(xì)胞減少的治療作用（109/L)
[0042]
[0043] 與模型組比較:*ρ〈0·05
[0044] 結(jié)果表明，與生理鹽水組比較，環(huán)磷酸胺能使小鼠骨髓損傷，造成外周血細(xì)胞下 降，組合物組與模型組比較，均可明顯對(duì)抗環(huán)磷酸胺所致小鼠白細(xì)胞下降。而化合物III和 化合物IV不具有此活性。
[0045]三、組合物對(duì)苯所致白細(xì)胞減少的治療作用
[0046] 對(duì)再生障礙性貧血小鼠的影響：昆明種小鼠50只，罕c?兼用，均分成5組(η = 10)，除 生理鹽水組外，其它組小鼠皮下注射苯0.5ml/kg，連續(xù)12天，造模的當(dāng)日，同時(shí)口服給藥，每 天1次，共18天，末次給藥后lh，眼眶靜脈叢取血，測(cè)白細(xì)胞。
[0047] 表3組合物對(duì)苯所致血細(xì)胞減少的治療作用（109/L)
[0048]
[0050] 與模型組比較:*ρ〈0·05
[0051] 結(jié)果表明，組合物組與模型組比較，可明顯對(duì)抗苯所致再生障礙性貧血小鼠白細(xì) 胞的下降。而化合物III和化合物IV不具有此活性。
[0052] 結(jié)論：組合物能夠顯著升高白細(xì)胞，可以用來(lái)制備抗白細(xì)胞降低藥物。而化合物 III和化合物IV不具有顯著升高白細(xì)胞的活性，不可以用來(lái)制備抗白細(xì)胞降低藥物。
[0053] 實(shí)施例6本發(fā)明所涉及組合物片劑的制備
[0054] 取2克組合物，加入制備片劑的常規(guī)輔料18克，混勻，常規(guī)壓片機(jī)制成100片。
[0055] 實(shí)施例7本發(fā)明所涉及組合物膠囊的制備
[0056] 取2克組合物，加入制備膠囊劑的常規(guī)輔料如淀粉18克，混勻，裝膠囊制成100粒。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種組合物，其特征為該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合物中化合物 III和化合物IV的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為20%和80%，2. 如權(quán)利要求1所述的組合物的制備方法，其特征為:將化合物III的粉末和化合物IV 的粉末按照質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為20%和80%充分混合。3. -種如權(quán)利要求1所述的組合物在升高白細(xì)胞藥物中的應(yīng)用。4. 如權(quán)利要求3所述的組合物在升高白細(xì)胞藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述組合物升 高失血所致白細(xì)胞的降低。5. 如權(quán)利要求3所述的組合物在升高白細(xì)胞藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述組合物升 高化學(xué)品所致白細(xì)胞的降低。6. 如權(quán)利要求5所述的組合物在升高白細(xì)胞藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述化學(xué)品為 環(huán)磷酰胺。7.如權(quán)利要求5所述的組合物在升高白細(xì)胞藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述化學(xué)品為 苯D
【文檔編號(hào)】A61P7/00GK106038549SQ201610414833
【公開(kāi)日】2016年10月26日
【申請(qǐng)日】2016年6月13日
【發(fā)明人】陸賢
【申請(qǐng)人】南京廣康協(xié)生物醫(yī)藥技術(shù)有限公司