含有氨基酸的益生元口腔護(hù)理組合物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種口腔護(hù)理組合物，其包含：(a)具有式Xaa1?Xaa2或Xaa2?Xaa1的二肽；其中Xaa1為具有極性不帶電荷的側(cè)鏈的氨基酸；并且Xaa2選自具有疏水性側(cè)鏈的氨基酸、具有極性不帶電荷的側(cè)鏈的氨基酸，和脯氨酸；或(b)具有式Xaa3?Xaa4或Xaa4?Xaa3的二肽；其中Xaa3為具有疏水性側(cè)鏈的氨基酸；并且Xaa4選自具有疏水性側(cè)鏈的氨基酸和具有帶電荷側(cè)鏈的氨基酸。
【專利說明】含有氨基酸的益生元口腔護(hù)理組合物
【背景技術(shù)】
[0001] 口腔含有許多不同種類的細(xì)菌。一些種類的口腔病原性細(xì)菌（例如牙齦卟啉單胞 菌(Porphyromonas gingivalis)、福賽斯坦納菌(Tannerella forsythia)和伴放線放線桿 菌(Aggregatibacter actinomycetemcomitans))已牽扯到牙周病(諸如牙周炎、牙銀炎、壞 死性牙周炎、壞死性齒銀炎和種植體周圍炎化61'；[-；[11^|]^111：；[1^8))的發(fā)展。某些種類的口腔 病原性細(xì)菌(例如變異鏈球菌(Streptococcus mutans))已牽涉到牙齒損壞。
[0002] 據(jù)信某些種類的口腔細(xì)菌有益于維持牙周組織的健康狀態(tài)。在不受任何理論限制 的情況下，據(jù)信這些有益口腔細(xì)菌可妨礙口腔上皮的病原性口腔細(xì)菌的定植 (colonization)。例如，研究已顯示血鏈球菌（51:代。1:〇(3〇(^118 831^1111^8)、緩癥鏈球菌 (Streptococcus mitis)和唾液鏈球菌對(duì)體外上皮細(xì)胞的伴放線放線桿菌定植具有抑制效 應(yīng)(W.Teughels等，J Dent Res 86(7)，611-617,2007)。使用犬科動(dòng)物模型也顯示，在根面 平整術(shù)之后將有益細(xì)菌施用至牙周袋延遲并減少了病原性細(xì)菌對(duì)牙周袋的定植 (W· Teughels等，J Dent Res，86(11 )，1078-1082，2007)。有益細(xì)菌血鏈球菌、緩癥鏈球菌和 唾液鏈球菌也已顯示出抑制伴放線放線桿菌誘導(dǎo)的人口腔角質(zhì)形成細(xì)胞系H0K-18A對(duì)炎癥 性細(xì)胞因子白介素-8(IL-8)的產(chǎn)生，所述炎癥性應(yīng)答牽涉到牙周炎相關(guān)的組織破壞 (I.Sliepen等，J Dent Res 88(11)，1026-1030,2009)〇
[0003] 據(jù)信有益口腔細(xì)菌的選擇性刺激可為口腔健康，例如在牙周炎的預(yù)防中提供有效 的預(yù)防性途徑。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 在一方面，本發(fā)明提供了一種口腔護(hù)理組合物，其包含：（a)具有式Xaal_Xaa2或 Xaa2_Xaal的二肽;其中Xaal為具有極性不帶電荷的側(cè)鏈的氨基酸;并且Xaa2選自具有疏水 性側(cè)鏈的氨基酸、具有極性不帶電荷的側(cè)鏈的氨基酸，和脯氨酸;或(b)具有式Xaa3_Xaa4或 Xaa4_Xaa3的二肽;其中Xaa3為具有疏水性側(cè)鏈的氨基酸;并且Xaa4選自具有疏水性側(cè)鏈的 氨基酸和具有帶電荷側(cè)鏈的氨基酸。
[0005] 任選地，Xaal、Xaa2、Xaa3 和 Xaa4 為 L-氨基酸。
[0006] 任選地，以口腔護(hù)理組合物的重量為基準(zhǔn)，所述組合物中的二肽存在量為0.01重 量％至10重量％。
[0007] 任選地，Xaa2為具有脂肪族疏水性側(cè)鏈的氨基酸。此外任選地，Xaa2為丙氨酸、異 亮氨酸、亮氨酸或纈氨酸。再此外任選地，Xaa2為亮氨酸或纈氨酸。
[0008] 可替代地，Xaa2為天冬酰胺、半胱氨酸、谷氨酰胺、甲硫氨酸、絲氨酸或蘇氨酸。任 選地，Xaa2為天冬酰胺或谷氨酰胺。
[0009] 可替代地，Xaa2為脯氨酸。
[0010] 任選地，Xaal為絲氨酸、甲硫氨酸、蘇氨酸、半胱氨酸、天冬酰胺或谷氨酰胺。此外 任選地，Xaal為絲氨酸。可替代地，Xaal為甲硫氨酸。
[0011] 任選地，Xaa3為具有芳族疏水性側(cè)鏈的氨基酸。此外任選地，Xaa3為色氨酸、苯丙 氨酸或酪氨酸。再此外任選地，Xaa3為色氨酸?？商娲?，Xaa3為苯丙氨酸。
[0012] 任選地，Xaa4為天冬氨酸、谷氨酸、精氨酸、組氨酸或賴氨酸。此外任選地，Xaa4為 谷氨酸或組氨酸。
[0013] 可替代地，Xaa4為具有脂肪族疏水性側(cè)鏈的氨基酸。任選地，Xaa4為丙氨酸、異亮 氨酸、亮氨酸或纈氨酸。
[0014] 任選地，組合物為潔齒劑、牙膏、凝膠、牙粉、漱□水、口腔清洗劑、錠劑、片劑、噴霧 劑、口香糖或膜劑。
[0015] 任選地，組合物還包含對(duì)口腔健康具有有益效應(yīng)的至少一個(gè)種類的細(xì)菌。此外任 選地，對(duì)口腔健康具有有益效應(yīng)的細(xì)菌種類選自緩癥鏈球菌、唾液鏈球菌、血鏈球菌、粘性 放線菌（Actmomyces viscosus)、小韋榮球菌（Veillonella parvula)、格氏鏈球菌 (Streptococcus gordonii)、生痰二氧化碳嗜纖維菌（Capnocytophaga sputigena)、內(nèi)氏 放線菌(Actmomyces naeslundii)以及其組合。
[0016] 在另一方面，本發(fā)明提供了一種本發(fā)明的口腔護(hù)理組合物，其用于在口腔中進(jìn)行 選擇性地促進(jìn):相對(duì)于病原性口腔細(xì)菌的生長(zhǎng)、代謝活性或定植，選擇性地促進(jìn)對(duì)口腔健康 具有有益效應(yīng)的細(xì)菌的生長(zhǎng)、代謝活性或定植。在另一方面，本發(fā)明提供了一種本發(fā)明的口 腔護(hù)理組合物，其用于在口腔中相對(duì)于病原性口腔細(xì)菌的生物膜形成，選擇性地促進(jìn)對(duì)口 腔健康具有有益效應(yīng)的細(xì)菌的生物膜形成。在另一方面，本發(fā)明提供了一種本發(fā)明的口腔 護(hù)理組合物，其用于維持和/或重新建立健康的口腔微生物群。在另一方面，本發(fā)明提供了 一種本發(fā)明的口腔護(hù)理組合物，其用于預(yù)防牙齦炎、牙周炎、種植體周圍炎、種植體周圍粘 膜炎、壞死性牙齦炎、壞死性牙周炎以及齲齒中的一種或多種。
[0017] 在另一方面，本發(fā)明提供了一種在受試者口腔中進(jìn)行選擇性地促進(jìn):相對(duì)于病原 性口腔細(xì)菌的生長(zhǎng)、代謝活性或定植，選擇性地促進(jìn)對(duì)口腔健康具有有益效應(yīng)的細(xì)菌的生 長(zhǎng)、代謝活性或定植的方法;所述方法包括使口腔與本發(fā)明的口腔護(hù)理組合物接觸。在另一 方面，本發(fā)明提供了一種在受試者口腔中相對(duì)于病原性口腔細(xì)菌的生物膜形成，選擇性地 促進(jìn)對(duì)口腔健康具有有益效應(yīng)的細(xì)菌的生物膜形成的方法;所述方法包括使口腔與本發(fā)明 的口腔護(hù)理組合物接觸。本發(fā)明還提供了一種在受試者中維持和/或重新建立健康的口腔 微生物群的方法，所述方法包括使受試者的口腔與本發(fā)明的口腔護(hù)理組合物接觸。本發(fā)明 還提供了一種預(yù)防受試者的牙齦炎、牙周炎、種植體周圍炎、種植體周圍粘膜炎、壞死性牙 齦炎、壞死性牙周炎以及齲齒中的一種或多種的方法，所述方法包括使受試者的口腔與本 發(fā)明的口腔護(hù)理組合物接觸。
[0018] 在另一方面，本發(fā)明提供了以下項(xiàng)在口腔護(hù)理組合物中的用途：（i)具有式Xaal-Xaa2或Xaa2_Xaal的二肽;其中Xaal為具有極性不帶電荷的側(cè)鏈的氨基酸;并且Xaa2選自具 有疏水性側(cè)鏈的氨基酸、具有極性不帶電荷的側(cè)鏈的氨基酸，和脯氨酸；或（ii )具有式 Xaa3_Xaa4或Xaa4_Xaa3的二肽;其中Xaa3為具有疏水性側(cè)鏈的氨基酸;并且Xaa4選自具有 疏水性側(cè)鏈的氨基酸和具有帶電荷側(cè)鏈的氨基酸;所述用途為：（a)相對(duì)于病原性口腔細(xì)菌 的生長(zhǎng)、代謝活性或定植，選擇性地促進(jìn)對(duì)口腔健康具有有益效應(yīng)的細(xì)菌的生長(zhǎng)、代謝活性 或定植；（b)相對(duì)于病原性口腔細(xì)菌的生物膜形成，選擇性地促進(jìn)對(duì)口腔健康具有有益效應(yīng) 的細(xì)菌的生物膜形成；（c)在受試者中維持和/或重新建立健康的口腔微生物群;或(d)預(yù)防 受試者的牙齦炎、牙周炎、種植體周圍炎、種植體周圍粘膜炎、壞死性牙齦炎、壞死性牙周炎 以及齲齒中的一種或多種。
[0019] 任選地，二肽在與對(duì)口腔健康具有有益效應(yīng)的細(xì)菌和病原性口腔細(xì)菌一起孵育24 小時(shí)后，相對(duì)于病原性口腔細(xì)菌的生長(zhǎng)、代謝活性或定植選擇性地促進(jìn)對(duì)口腔健康具有有 益效應(yīng)的細(xì)菌的生長(zhǎng)、代謝活性或定植。
[0020] 任選地，二肽在與對(duì)口腔健康具有有益效應(yīng)的細(xì)菌和病原性口腔細(xì)菌一起孵育48 小時(shí)后，相對(duì)于病原性口腔細(xì)菌的生長(zhǎng)、代謝活性或定植選擇性地促進(jìn)對(duì)口腔健康具有有 益效應(yīng)的細(xì)菌的生長(zhǎng)、代謝活性或定植。
[0021] 本發(fā)明的其他適用范圍將從下文提供的詳述變得顯而易見。應(yīng)理解，詳述和具體 實(shí)施例雖然指示了本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案，但是僅僅意圖用于說明目的而不是意圖限制本 發(fā)明的范圍。
[0022] 詳述
[0023] 以下優(yōu)選實(shí)施方案的說明實(shí)質(zhì)上只是示例性的并且決不意圖限制本發(fā)明、本發(fā)明 的應(yīng)用或用途。
[0024] 為了描述所述范圍之內(nèi)的各個(gè)和每個(gè)數(shù)值，貫穿全文使用的范圍是作為簡(jiǎn)寫形式 使用的。在所述范圍之內(nèi)的任何數(shù)值都可以被選為所述范圍的邊界。此外，本文中引用的所 有參考文獻(xiàn)均在此以引用方式整體并入。如果本公開中的定義和引用的參考文獻(xiàn)的定義出 現(xiàn)沖突，以本公開為準(zhǔn)。
[0025] 除非另外規(guī)定，否則本文和在本說明書中其他地方表達(dá)的所有百分比和量應(yīng)理解 為是指重量百分比。給出的量是以材料的有效重量為基準(zhǔn)。
[0026] 如本文所用，措辭"口腔"不僅包括口腔本身，而且還包括唾液、牙齒、牙齦、牙周 袋、臉頰、舌、粘膜、扁桃體、任何植入物以及置入口腔中的任何設(shè)備或結(jié)構(gòu)體。扁桃體為可 產(chǎn)生口臭的厭氧細(xì)菌生長(zhǎng)提供了儲(chǔ)藏所(reservoir)(扁桃體結(jié)石）。
[0027] 如本文所用，短語"健康的口腔微生物群"是指當(dāng)口腔處于非患病狀態(tài)時(shí)(例如，當(dāng) 不存在牙周病，例如牙齦炎、牙周炎、齲齒、種植體周圍炎、種植體周圍粘膜炎、壞死性牙齦 炎和/或壞死性牙周炎時(shí)）的口腔微生物群體，即健康相關(guān)聯(lián)的口腔微生物群。
[0028] 術(shù)語"有益細(xì)菌"涵蓋口腔中的在健康口腔中以較高數(shù)目或比例存在，但在口腔疾 病(諸如像牙齦炎、牙周炎、齲齒、種植體周圍炎、種植體周圍粘膜炎、壞死性牙齦炎和壞死 性牙周炎)狀態(tài)時(shí)以較低數(shù)目或比例存在的那些細(xì)菌。所述術(shù)語還包括來自口腔或非口腔 來源的已被確認(rèn)通過預(yù)防或治療口腔疾病而對(duì)口腔健康具有有益效應(yīng)的細(xì)菌，所述細(xì)菌可 本來存在于口腔中或者可有意地引入到口腔中（例如像益生菌）。有益細(xì)菌可通過其存在或 代謝活性來:降低病原性口腔細(xì)菌的數(shù)目或比例;減少炎癥和炎癥性過程;降低病原性物種 的代謝活性；降低病原性細(xì)菌對(duì)毒力因子的產(chǎn)生或抑制病原性細(xì)菌所產(chǎn)生的毒力因子;減 少或抑制生物膜形成；占據(jù)可以其他方式由病原體定植的適當(dāng)位置(niche);限制病原體附 著口腔表面的能力;影響病原體的生存力、代謝活性或生長(zhǎng);降低病原體產(chǎn)生毒性因子的能 力；降解由病原體或口腔生物群產(chǎn)生的毒性因子;和/或減弱寄主對(duì)病原性物種的應(yīng)答。如 上所論述，據(jù)信這些有益口腔細(xì)菌可妨礙病原性口腔細(xì)菌對(duì)口腔上皮的定植。據(jù)信有益口 腔細(xì)菌的選擇性刺激可為口腔健康，例如在牙周炎的預(yù)防中提供有效的預(yù)防性途徑。
[0029]細(xì)菌需要某些物質(zhì)以便能夠使它們生長(zhǎng)、繁殖、具有代謝活性并且能夠進(jìn)行定植。 某些物質(zhì)可被某些微生物（例如細(xì)菌)選擇性地利用以有利于所述微生物的生長(zhǎng)、代謝活 性、繁殖和定植，從而直接或間接地抑制其他微生物的生長(zhǎng)。本發(fā)明研究了通過以下方式修 飾受試者的口腔微生物群的可能性:通過選擇性地增加受試者所固有的有益口腔細(xì)菌群 體，通過為有益口腔細(xì)菌群體提供適當(dāng)?shù)挠糜谏L(zhǎng)/繁殖的物質(zhì)。
[0030] 有益細(xì)菌的實(shí)例包括緩癥鏈球菌、唾液鏈球菌、血鏈球菌、粘性放線菌、小韋榮球 菌、格氏鏈球菌、生痰二氧化碳嗜纖維菌和內(nèi)氏放線菌。病原性細(xì)菌的實(shí)例包括變異鏈球 菌、中間普雷沃菌（Prevotella intermedia)、牙銀卟啉單胞菌、核粒梭桿菌 (Fusobacterium nucleatum)、福賽斯坦納菌、伴放線放線桿菌和遠(yuǎn)緣鏈球菌 (Streptococcus sobrinus)。
[0031] 本發(fā)明已發(fā)現(xiàn)某些二肽能夠使得有益口腔細(xì)菌的生長(zhǎng)、代謝活性和生物膜形成增 加，而未使得病原性口腔細(xì)菌的生長(zhǎng)、代謝活性和生物膜形成增加。
[0032] 因此本發(fā)明提供了一種口腔護(hù)理組合物，其包含：（a)具有式Xaal_Xaa2或Xaa2-Xaal的二肽;其中Xaal為具有極性不帶電荷的側(cè)鏈的氨基酸;并且Xaa2選自具有疏水性側(cè) 鏈的氨基酸、具有極性不帶電荷的側(cè)鏈的氨基酸，和脯氨酸；或（b)具有式Xaa3_Xaa4或 Xaa4_Xaa3的二肽;其中Xaa3為具有疏水性側(cè)鏈的氨基酸;并且Xaa4選自具有疏水性側(cè)鏈的 氨基酸和具有帶電荷側(cè)鏈的氨基酸。
[0033] 在一些實(shí)施方案中，Xaal、Xaa2、Xaa3和Xaa4為L(zhǎng)-氨基酸。
[0034] 在一些實(shí)施方案中，氨基酸Xaal (具有極性不帶電荷的側(cè)鏈的氨基酸）為絲氨酸 (Ser)、甲硫氨酸(Met)、蘇氨酸(Thr)、半胱氨酸(Cys)、天冬酰胺(Asn)或谷氨酰胺(Gin)。在 某些實(shí)施方案中，Xaal為絲氨酸或蘇氨酸。在其他實(shí)施方案中，Xaal為甲硫氨酸或半胱氨 酸。在一些實(shí)施方案中，Xaal為絲氨酸。在其他實(shí)施方案中，Xaal為甲硫氨酸。
[0035] 當(dāng)Xaa2為具有疏水性側(cè)鏈的氨基酸時(shí)，Xaa2在某些實(shí)施方案中可以為具有脂肪族 疏水性側(cè)鏈的氨基酸。在這些實(shí)施方案中的一些中，Xaa2為丙氨酸(Ala)、異亮氨酸（lie)、 亮氨酸(Leu)或纈氨酸(Val)。在某些實(shí)施方案中，Xaa2為亮氨酸或纈氨酸。在某些實(shí)施方案 中，二肽為Ser-Leu、Ser_Val、Leu_Ser或Val-Ser。在一些實(shí)施方案中，二肽為Ser-Leu或 Ser-Val〇
[0036] 當(dāng)Xaa2為具有極性不帶電荷的側(cè)鏈的氨基酸時(shí)，Xaa2在某些實(shí)施方案中可以為天 冬酰胺(Asn)、半胱氨酸（Cys)、谷氨酰胺(Gln)、甲硫氨酸(Met)、絲氨酸（Ser)或蘇氨酸 (Thr)。在這些實(shí)施方案的一些中，Xaa2為天冬酰胺或谷氨酰胺。在其他實(shí)施方案中，Xaa2為 半胱氨酸或甲硫氨酸。在其他實(shí)施方案中，Xaa2為絲氨酸或蘇氨酸。在某些實(shí)施方案中，二 肽為一些實(shí)施方案中，二肽為Ser-Asn或Ser-Gln。
[0037] 在一些實(shí)施方案中，Xaa2為脯氨酸(Pro)。在一個(gè)實(shí)施方案中，二肽為Met-Pro。
[0038] 在一些實(shí)施方案中，氨基酸Xaa3(具有疏水性側(cè)鏈的氨基酸)為具有芳族疏水性側(cè) 鏈的氨基酸。在某些實(shí)施方案中，Xaa3為色氨酸(Trp)、苯丙氨酸(Phe)或酪氨酸(Tyr)。在一 些實(shí)施方案中，Xaa3為色氨酸。在其他實(shí)施方案中，Xaa3為苯丙氨酸。
[0039] 當(dāng)Xaa4為具有疏水性側(cè)鏈的氨基酸時(shí)，Xaa4在某些實(shí)施方案中可以為具有脂肪族 疏水性側(cè)鏈的氨基酸。在這些實(shí)施方案中的一些中，Xaa4為丙氨酸(Ala)、異亮氨酸（lie)、 亮氨酸(Leu)或纈氨酸(Val)。在某些實(shí)施方案中，Xaa4為亮氨酸或纈氨酸。在某些實(shí)施方案 中，Xaa4為亮氨酸。在某些實(shí)施方案中，二肽為Trp-Leu或Leu-Trp。
[0040] 當(dāng)Xaa4為具有帶電荷的側(cè)鏈的氨基酸時(shí)，Xaa4在某些實(shí)施方案中可以為天冬氨酸 (Asp)、谷氨酸(Glu)、精氨酸(Arg)、組氨酸(His)或賴氨酸(Lys)。在某些實(shí)施方案中，Xaa4 為天冬氨酸或谷氨酸。在其他實(shí)施方案中，Xaa4為精氨酸、組氨酸或賴氨酸。在其他實(shí)施方 案中，Xaa4為谷氨酸或組氨酸。在一些實(shí)施方案中，二肽為Trp-Glu、Trp-His、Glu-Trp、Glu-His、Phe_Glu或Glu-Phe。在一些實(shí)施方案中，二肽為Glu-Trp、His_Trp或Phe-Glu。在一些實(shí) 施方案中，二肽為Phe-Glu。
[0041 ]在一些實(shí)施方案中，二肽為561-1^11、361-\^1、361-厶811、361-6111、]\^1：-?1'〇、？116-6111、6111-1'印、1'印-1^11或]^8-1'印。在一些實(shí)施方案中，二肽為Ser-Leu或Ser-Val。在其他實(shí) 施方案中，二肽為 Ser-Asn、Ser-Gln、Met-Pro、Phe-Glu、Glu-Trp、Trp-LeuSHis_Trp〇 [0042]在一些實(shí)施方案中，以口腔護(hù)理組合物的重量為基準(zhǔn)，所述組合物中的二肽存在 量為0.01重量％至10重量％、0.05重量％至7.5重量％、0.1重量％至5重量％或1重量％至 2.5重量％。
[0043] 在任一以上實(shí)施方案中，組合物中的二肽存在量可以為lymol/ml至50ymol/ml、 2 · 5ymol/ml 至 35ymol/ml、5ymol/ml 至 25ymol/ml 或 10ymol/ml 至 20ymol/ml。在某些實(shí)施方 案中，組合物中的二肽存在量為5ymol/ml至ΙΟμ mol/ml或ΙΟμ mol/ml至25ymol/ml。
[0044] 如任一以上實(shí)施方案中所述的口腔護(hù)理組合物可以為潔齒劑、牙膏、凝膠、牙粉、 漱口水、口腔清洗劑、錠劑（其可以為可溶解的或可咀嚼的）、片劑、噴霧劑、口香糖或膜劑 (其可以為可全部或部分溶解的，或不可溶解的）。
[0045] 如任一以上實(shí)施方案中所述的口腔護(hù)理組合物還可包含對(duì)口腔健康具有有益效 應(yīng)的至少一個(gè)種類的細(xì)菌。在這些實(shí)施方案中，組合物可被稱之為共生型組合物 (synbiotic composition)，因?yàn)槠浜幸嫔?對(duì)口腔健康具有有益效應(yīng)的細(xì)菌)和益生 元(刺激益生菌的生長(zhǎng)、代謝活性和/或定植的二肽）。在某些實(shí)施方案中，對(duì)口腔健康具有 有益效應(yīng)的細(xì)菌種類選自緩癥鏈球菌、唾液鏈球菌、血鏈球菌、粘性放線菌、小韋榮球菌、格 氏鏈球菌、生痰二氧化碳嗜纖維菌、內(nèi)氏放線菌以及其組合。
[0046] 本發(fā)明還提供了一種根據(jù)任一上述實(shí)施方案的口腔護(hù)理組合物，其用于(a)在口 腔中進(jìn)行選擇性地促進(jìn):相對(duì)于病原性口腔細(xì)菌的生長(zhǎng)、代謝活性或定植，選擇性地促進(jìn)對(duì) 口腔健康具有有益效應(yīng)的細(xì)菌的生長(zhǎng)、代謝活性或定植；（b)在口腔中相對(duì)于病原性口腔細(xì) 菌的生物膜形成，選擇性地促進(jìn)對(duì)口腔健康具有有益效應(yīng)的細(xì)菌的生物膜形成；（c)維持 和/或重新建立健康的口腔微生物群;或(d)預(yù)防牙齦炎、牙周炎、種植體周圍炎、種植體周 圍粘膜炎、壞死性牙齦炎、壞死性牙周炎以及齲齒中的一種或多種。
[0047]本發(fā)明還提供了如任一以上實(shí)施方案中所述的二肽在口腔護(hù)理組合物中的用途， 所述用途為(a)相對(duì)于病原性口腔細(xì)菌的生長(zhǎng)、代謝活性或定植，選擇性地促進(jìn)對(duì)口腔健康 具有有益效應(yīng)的細(xì)菌的生長(zhǎng)、代謝活性或定植；（b)相對(duì)于病原性口腔細(xì)菌的生物膜形成， 選擇性地促進(jìn)對(duì)口腔健康具有有益效應(yīng)的細(xì)菌的生物膜形成；（c)在受試者中維持和/或重 新建立健康的口腔微生物群;或(d)預(yù)防受試者的牙齦炎、牙周炎、種植體周圍炎、種植體周 圍粘膜炎、壞死性牙齦炎、壞死性牙周炎以及齲齒中的一種或多種。
[0048]本發(fā)明還提供了進(jìn)行以下的方法：（a)在受試者口腔中進(jìn)行選擇性地促進(jìn):相對(duì)于 病原性口腔細(xì)菌的生長(zhǎng)、代謝活性或定植，選擇性地促進(jìn)對(duì)口腔健康具有有益效應(yīng)的細(xì)菌 的生長(zhǎng)、代謝活性或定植；（b)在受試者口腔中相對(duì)于病原性口腔細(xì)菌的生物膜形成，選擇 性地促進(jìn)對(duì)口腔健康具有有益效應(yīng)的細(xì)菌的生物膜形成；（c)在受試者中維持和/或重新建 立健康的口腔微生物群;或(d)預(yù)防受試者的牙齦炎、牙周炎、種植體周圍炎、種植體周圍粘 膜炎、壞死性牙齦炎、壞死性牙周炎以及齲齒中的一種或多種。這些方法中的每一種包括使 受試者的口腔與根據(jù)任一上述實(shí)施方案的口腔護(hù)理組合物接觸。
[0049] 在以上方法中，受試者可以為哺乳動(dòng)物。在一些實(shí)施方案中，受試者為人。在一些 實(shí)施方案中，受試者為動(dòng)物，例如伴侶動(dòng)物(例如貓或狗）。
[0050] 在某些實(shí)施方案中，口腔與口腔護(hù)理組合物的接觸包括使用刷將口腔護(hù)理組合物 施用至口腔，用呈漱口水形式的口腔護(hù)理組合物清洗口腔，或使用例如噴霧器將口腔護(hù)理 組合物噴入口腔中。
[0051] 在方法和用途的任一以上實(shí)施方案中，對(duì)口腔健康具有有益效應(yīng)的細(xì)菌可選自緩 癥鏈球菌、唾液鏈球菌、血鏈球菌、粘性放線菌、小韋榮球菌、格氏鏈球菌、生痰二氧化碳嗜 纖維菌、內(nèi)氏放線菌以及其組合。另外或可替代地，病原性細(xì)菌可選自變異鏈球菌、中間普 雷沃菌、牙齦卟啉單胞菌、核粒梭桿菌、福賽斯坦納菌、伴放線放線桿菌、遠(yuǎn)緣鏈球菌以及其 組合。
[0052] 在其中方法和用途涉及相對(duì)于病原性口腔細(xì)菌的生長(zhǎng)、代謝活性或定植選擇性促 進(jìn)(在受試者口腔中）對(duì)口腔健康具有有益效應(yīng)的細(xì)菌的生長(zhǎng)、代謝活性或定植的任一以上 實(shí)施方案中，具有口腔健康的有益效應(yīng)的細(xì)菌可選自緩癥鏈球菌、唾液鏈球菌、粘性放線 菌、小韋榮球菌、生痰二氧化碳嗜纖維菌以及其組合。另外或可替代地，病原性細(xì)菌可選自 變異鏈球菌、中間普雷沃菌、牙齦卟啉單胞菌、核粒梭桿菌、福賽斯坦納菌、伴放線放線桿 菌、遠(yuǎn)緣鏈球菌以及其組合，并且在某些實(shí)施方案中可選自中間普雷沃菌、牙齦卟啉單胞 菌、核粒梭桿菌、福賽斯坦納菌以及其組合。
[0053] 在其中方法和用途涉及相對(duì)于病原性口腔細(xì)菌的生物膜形成選擇性促進(jìn)對(duì)口腔 健康具有有益效應(yīng)的細(xì)菌的生物膜形成的任一以上實(shí)施方案中，病原性細(xì)菌可選自變異鏈 球菌、中間普雷沃菌、牙齦卟啉單胞菌、核粒梭桿菌、福賽斯坦納菌、伴放線放線桿菌以及其 組合。另外或可替代地，具有口腔健康的有益效應(yīng)的細(xì)菌可選自血鏈球菌、格氏鏈球菌以及 其組合。
[0054]在一些實(shí)施方案中，二肽在與對(duì)口腔健康具有有益效應(yīng)的細(xì)菌和病原性口腔細(xì)菌 一起孵育24小時(shí)后，相對(duì)于病原性口腔細(xì)菌的生長(zhǎng)、代謝活性或定植選擇性地促進(jìn)對(duì)口腔 健康具有有益效應(yīng)的細(xì)菌的生長(zhǎng)、代謝活性或定植。
[0055] 在一些實(shí)施方案中，二肽在與對(duì)口腔健康具有有益效應(yīng)的細(xì)菌和病原性口腔細(xì)菌 一起孵育48小時(shí)后，相對(duì)于病原性口腔細(xì)菌的生長(zhǎng)、代謝活性或定植選擇性地促進(jìn)對(duì)口腔 健康具有有益效應(yīng)的細(xì)菌的生長(zhǎng)、代謝活性或定植。
[0056] 在包含二肽的本發(fā)明組合物中，二肽的氨基酸序列被從N端末端（含有游離的氨 基)報(bào)告至C端末端(含有游離的羧基）。因此，以"Ser-Val"為例，結(jié)構(gòu)如式I所示;并且對(duì)于 "His-Trp"，結(jié)構(gòu)如式II所示。
[0057]
[0058] 本發(fā)明的口腔護(hù)理組合物還可以包含額外的成分。這些額外的成分可包括但不限 于研磨劑、稀釋劑、碳酸氫鹽、pH改性劑、表面活性劑、泡沫調(diào)節(jié)劑、增稠劑、濕潤(rùn)劑、甜味劑、 調(diào)味劑、顏料、抗菌劑、防齲劑、防牙垢劑或牙石控制劑以及其混合物。
[0059]在一些實(shí)施方案，特別是(但不限于)其中口腔護(hù)理組合物為牙膏的那些實(shí)施方案 中，本發(fā)明的組合物還可包含研磨劑。可使用的研磨劑包括二氧化硅研磨劑，諸如具有高達(dá) 約20微米平均粒徑的沉淀或水合的二氧化娃，諸如由J.M.Huber化學(xué)部(Havre de Grace， Md. 21078)市售的Zeodent 105和Zeodent 114,或由W.R.Grace&Company的Davison化學(xué)部 市售的Sylodent 783。還可包括諸如來自PQ公司的Sorbosil AC 43的研磨劑。其他可用的 潔齒劑研磨劑包括氧化鋁、硅酸鋁、煅燒氧化鋁、膨潤(rùn)土或其他硅質(zhì)材料、不溶性磷酸鹽以 及其混合物。研磨劑的存在量可以為以組合物重量為基準(zhǔn)的5至30重量％，任選地以組合物 重量為基準(zhǔn)的10至20重量％。在某些實(shí)施方案，特別是(但不限于）其中口腔護(hù)理組合物為 漱口水或口腔清洗劑的那些實(shí)施方案中，組合物可不含研磨劑。
[0060]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的口腔護(hù)理組合物包含至少一種碳酸氫鹽，所述碳酸 氫鹽由于起泡和釋放二氧化碳而可用于例如賦予牙齒和膠"清潔感"。可使用任何口服可接 受的碳酸氫鹽，包括(不限于)堿金屬碳酸氫鹽諸如碳酸氫鈉和碳酸氫鉀、碳酸氫銨等。以組 合物的總重量計(jì)，一種或多種額外的碳酸氫鹽任選的存在總量為約0.1重量％至約50重 量％，例如約1重量％至20重量％。
[0061 ]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的口腔護(hù)理組合物包含至少一種pH改性劑。所述改性 劑包括降低pH的酸化劑、升高pH的堿化劑以及將pH控制在需要范圍內(nèi)的緩沖劑。例如，可包 含選自酸化劑、堿化劑和緩沖劑的一種或多種化合物以提供2至10,或在各種例示性實(shí)施方 案中，2至8、3至9、4至8、5至7、6至10、7至9等的pH?？墒褂萌魏慰诜山邮艿膒H改性劑，包括 (不限于)羧酸、磷酸和磺酸、酸鹽(例如，檸檬酸一鈉、檸檬酸二鈉、蘋果酸一鈉等）、堿金屬 氫氧化物諸如氫氧化鈉、碳酸鹽諸如碳酸鈉、碳酸氫鹽、倍半碳酸鹽、硼酸鹽、硅酸鹽、磷酸 鹽(例如，磷酸二氫鈉、磷酸三鈉）、咪唑等。一種或多種pH改性劑任選地以有效維持組合物 在口服可接受的pH范圍內(nèi)的總量存在。
[0062]本發(fā)明的口腔護(hù)理組合物還可包含至少一種表面活性劑。可使用任何口服可接受 的表面活性劑，它們大部分是陰離子型、非離子型或兩性離子型的。合適的陰離子型表面活 性劑包括(不限于)C8- 2Q烷基硫酸酯、磺化的C8-2Q脂肪酸甘油單酯的水溶性鹽、肌氨酸鹽、牛 磺酸鹽等。這些和其他種類的例示性實(shí)例包括十二烷基硫酸鈉、椰子甘油單酯磺酸鈉、月桂 基肌氨酸鈉、月桂基輕乙基磺酸鈉 （sodium lauryl isoethionate)、月桂醇聚醚羰酸鈉 (sodium laureth carboxylate)和十二烷基苯磺酸鈉。合適的非離子型表面活性劑包括 (不限于）泊洛沙姆、聚氧乙烯失水山梨醇酯、脂肪醇聚氧乙烯醚、烷基酚聚氧乙烯醚、叔胺 氧化物、叔膦氧化物、二烷基亞砜等。合適的兩性型表面活性劑包括(不限于)具有陰離子基 團(tuán)（諸如羰酸根、硫酸根、磺酸根、磷酸根或膦酸根）的C 8-2Q脂肪族仲胺和叔胺的衍生物。還 可以使用甜菜堿，其合適的實(shí)例是椰油酰胺丙基甜菜堿。以組合物的總重量計(jì)，一種或多種 表面活性劑任選的存在總量為約0.01重量％至約10重量％，例如，約0.05重量％至約5重 量％或約0.1重量％至約2重量％。
[0063] 本發(fā)明的口腔護(hù)理組合物可包含至少一種泡沫調(diào)節(jié)劑，所述調(diào)節(jié)劑可用于例如增 加組合物在攪拌時(shí)所形成的泡沫的量、稠度或穩(wěn)定性?？墒褂萌魏慰诜山邮艿呐菽{(diào)節(jié) 劑，包括(不限于）聚乙二醇(PEG)，也稱為聚氧乙烯。高分子量PEG是合適的，包括平均分子 量為200,000至7，000,000,例如500,000至5，000,000或 1,000,000至2,500,000的那些。以 組合物的總重量計(jì)，一種或多種PEG任選的存在總量為約0.1重量％至約10重量％，例如約 0.2重量％至約5重量％，或約0.25重量％至約2重量％。
[0064] 本發(fā)明的口腔護(hù)理組合物可包含至少一種增稠劑，所述增稠劑可用于例如賦予組 合物所需要的稠度和/或口感?？墒褂萌魏慰谇豢山邮艿脑龀韯?，包括(不限于)卡波姆(也 稱為羧乙烯基聚合物）、角叉菜膠（也稱為愛爾蘭蘚)且更具體地t-角叉菜膠G-角叉菜膠 (iota-carrageenan))、纖維素聚合物(諸如羥乙基纖維素、羧甲基纖維素(CMC)及其鹽例如 CMC鈉）、天然樹膠(諸如刺梧桐膠、黃原膠、阿拉伯膠和黃蓍膠）、膠體硅酸鎂鋁、膠體二氧化 硅等。優(yōu)選的增稠劑或膠凝劑種類包括丙烯酸與季戊四醇的烷基醚或蔗糖的烷基醚交聯(lián)的 一類均聚物，或卡波姆?？ú房蓮腂. F. Goodrich以Carbopol?系列商購獲得。特別優(yōu)選 的卡波姆包括Carbopol 934、940、941、956、974P以及其混合物。也可使用二氧化硅增稠劑 諸如DT 267(來自PPG工業(yè)）。以組合物的總重量計(jì)，一種或多種增稠劑任選的存在總量為約 0.01重量％至15重量％，例如約0.1重量％至約10重量％，或約0.2重量％至約5重量％。
[0065]本發(fā)明的組合物可包含至少一種粘度調(diào)節(jié)劑，所述調(diào)節(jié)劑可用于例如幫助抑制成 分的沉淀或分離或者促進(jìn)液體組合物在攪拌時(shí)的重新分散性。可使用任何口服可接受的粘 度調(diào)節(jié)劑，包括(不限于)礦物油、凡士林、粘土和有機(jī)改性的粘土、二氧化硅等。以組合物的 總重量計(jì)，一種或多種粘度調(diào)節(jié)劑任選的存在總量為約0.01重量％至約10重量％，例如約 0.1重量％至約5重量％。
[0066] 本發(fā)明的組合物還可包含至少一種濕潤(rùn)劑。可使用任何口服可接受的濕潤(rùn)劑，包 括(不限于）多元醇諸如甘油、山梨醇(任選地為70重量％的水溶液）、木糖醇或低分子量的 聚乙二醇(PEG)。大多數(shù)濕潤(rùn)劑還充當(dāng)甜味劑。以組合物的總重量計(jì)，一種或多種濕潤(rùn)劑任 選的存在總量為約1重量％至約70重量％，例如，約1重量％至約50重量％，約2重量％至約 25重量％，或約5重量％至約15重量％。
[0067] 本發(fā)明的組合物還可包含至少一種甜味劑，所述甜味劑可用于例如增強(qiáng)組合物的 味道。一種或多種甜味劑任選的存在總量密切取決于選擇的特定甜味劑，但是通常為以組 合物的總重量計(jì)的0.005重量％至5重量％，任選地0.005重量％至0.2重量％，還任選地以 組合物的總重量計(jì)的0.05重量％至0.1重量％。
[0068] 本發(fā)明的組合物還可包含至少一種調(diào)味劑，所述調(diào)味劑可用于例如增強(qiáng)組合物的 味道?？墒褂萌魏慰诜山邮艿奶烊换蚝铣傻恼{(diào)味劑，包括(不限于)茶調(diào)味劑、香草醛、鼠 尾草、馬郁蘭、歐序油、留蘭香油、肉桂油、冬青油（水楊酸甲酯(11161：1171831；^713七6))、薄荷 油、丁香油、月桂油、茴香油、桉樹油、柑橘油、水果油和水果香精(包括源自檸檬、桔子、酸 橙、葡萄柚、杏子、香蕉、葡萄、蘋果、草莓、櫻桃、菠蘿等的那些）、源自豆類和堅(jiān)果的調(diào)味劑 (諸如咖啡、可可、可樂果、花生、杏仁)等，吸附的和包封的調(diào)味劑等。還涵蓋在本文的調(diào)味 劑之內(nèi)的是在口腔中提供芳香和/或其他感官效果(包括涼爽或溫?zé)嵝Ч┑某煞帧Ｋ龀?分例示性地包括薄荷醇、乙酸薄荷酯、乳酸薄荷酯、樟腦、桉樹油、桉油醇、茴香腦、丁香酚、 肉桂（cassia)、覆盆子酮（oxanone)、a-紫羅蘭酮、丙烯基乙基愈創(chuàng)木酸（propenyl guaiethol)、麝香草酸、里哪醇、苯甲醛、肉桂醛、N-乙基-對(duì)-薄荷燒-3-甲酰胺⑴飛!：]!}^^-menthan-3-carboxamine)、N，2，3-三甲基-2-異丙基丁酰胺、3-( 1-薄荷氧基）-丙烷-1，2-二 醇、肉桂醛甘油縮醛(CGA)、薄荷酮甘油縮醛(MGA)等。以組合物的總重量計(jì)，一種或多種調(diào) 味劑任選的存在總量為約0.01重量％至約5重量％，例如，約0.03重量％至約2.5重量％，任 選約0.05重量％至約1.5重量％，還任選約0.1重量％至約0.3重量％。
[0069] 本發(fā)明的組合物可包含至少一種著色劑。本文中的著色劑包括顏料、染料、色淀和 賦予特定光澤或反射率的試劑諸如珠光劑?？墒褂萌魏慰诜山邮艿闹珓?不限 于）滑石、云母、碳酸鎂、碳酸鈣、硅酸鎂、硅酸鎂鋁、二氧化硅、二氧化鈦、氧化鋅、紅色、黃 色、褐色和黑色鐵氧化物、氰亞鐵酸鐵銨（ferric ammonium ferrocyanide)、猛紫 (manganese violet)、群青、鈦酸化云母(titaniated mica)、氯氧化祕(mì)等。以組合物的總重 量計(jì)，一種或多種著色劑任選的存在總量為約0.001重量％至約20重量％，例如，約0.01重 量％至約10重量％，或約0.1重量％至約5重量％。
[0070] 本發(fā)明的組合物還可包含抗菌劑或防腐劑，諸如氯己定、三氯生、季銨化合物（例 如苯扎氯銨)或?qū)αu基苯甲酸酯(paraben)(諸如對(duì)羥基苯甲酸甲酯或?qū)αu基苯甲酸丙酯）。 以組合物的總重量計(jì)，組合物中的一種或多種抗菌劑或防腐劑任選的存在總量為約0.01重 量％至約0.5重量％，任選約0.05重量％至約0.1重量％。
[0071] 口腔護(hù)理組合物還可包含氟化物離子源。氟化物離子源包括但不限于:氟化亞錫、 氟化鈉、氟化鉀、單氟磷酸鉀、單氟磷酸鈉、單氟磷酸銨、氟硅酸鈉、氟硅酸銨、氟化胺諸如奧 拉氣（Ν'-十八烷基二乙稀二胺-Ν,Ν，# -二（2_乙醇）-二氫氣化物丨#-octadecyltrimethylendiamine-Ν,Ν,Ν' -tris(2-ethanol)-dihydrofluoride))、氣化銨以 及其組合。在某些實(shí)施方案中，氟化物離子源包括氟化亞錫、氟化鈉、氟化胺、單氟磷酸鈉以 及其混合物。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的口腔護(hù)理組合物還可含有氟化物離子源或提供 氟的成分，所述提供氟的成分的量足以提供約50至約5000ppm的氟化物離子，例如，約100至 約1000、約200至約500,或約250ppm氟化物離子?？上虮景l(fā)明組合物添加的氟化物離子源的 水平為約0.001重量％至約10重量％，例如，約0.003重量％至約5重量％、0.01重量％至約1 重量％，或約0.05重量％。然而，應(yīng)理解提供適當(dāng)水平氟化物離子的氟化物鹽的重量將基于 鹽中的反離子的重量而明顯不同，本領(lǐng)域技術(shù)人員可容易地測(cè)定這些量。優(yōu)選的氟化物鹽 可以為氟化鈉。
[0072] 本發(fā)明的組合物可包含可用于例如改善口腔干燥的唾液刺激劑?？墒褂萌魏慰诜?可接受的唾液刺激劑，包括不限于食用酸，如檸檬酸、乳酸、蘋果酸、琥珀酸、抗壞血酸、己二 酸、富馬酸和酒石酸，以及其混合物。一種或多種唾液刺激劑任選地以有效刺激唾液的總量 存在。
[0073] 本發(fā)明的組合物可包含抗敏感劑，例如，鉀鹽諸如硝酸鉀、碳酸氫鉀、氯化鉀、檸檬 酸鉀和草酸鉀;辣椒素；丁香酚;鍶鹽;氯化物鹽以及其組合。所述試劑可添加的有效量為 (例如）以組合物的總重量為基準(zhǔn)的約1重量％至約20重量％，這取決于選擇的試劑。
[0074] 本發(fā)明的組合物還可包含抗氧化劑?？墒褂萌魏慰谇豢山邮艿目寡趸瘎?，包括丁 基化羥基苯甲醚(BHA)、丁基化羥基甲苯(BHT)、維生素 A、類胡蘿卜素、維生素 E、類黃酮、多 酚、抗壞血酸、草本抗氧化劑、葉綠素、褪黑激素及其混合物。
[0075] 本發(fā)明的組合物此外可任選地包含如下面提供的牙石控制（防牙垢)劑。本文可用 的那些牙石控制劑包含特定試劑的鹽，包括堿金屬鹽和銨鹽。所述試劑包括:磷酸鹽和多磷 酸鹽、聚氨基丙烷磺酸(AMPS)、聚烯烴磺酸鹽、聚烯烴磷酸鹽、二磷酸鹽諸如氮雜環(huán)烷-2,2-二磷酸鹽(例如，氮雜環(huán)庚烷-2，2-二磷酸）、N-甲基氮雜環(huán)戊烷-2，3-二磷酸、乙烷-1-羥基-1，1-二磷酸(EHDP)和乙烷-1-氨基-1，1-二磷酸鹽、膦酰基烷烴羧酸和?？捎玫臒o機(jī)磷酸鹽 和多磷酸鹽包括磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉和磷酸鈉、三聚磷酸鈉、四聚磷酸鹽、三偏磷酸鈉、 六偏磷酸鈉以及其混合物。其他可用的牙石控制劑包括多羧酸鹽聚合物和聚乙烯甲醚/馬 來酸酐(PVM/MA)共聚物，諸如GANTREZ?。
[0076] 實(shí)例
[0077] 實(shí)施例1
[0078] 研究了各種有益口腔細(xì)菌和病原性口腔細(xì)菌在二肽Ser-Leu、Ser-Val、Ser-Asn、 Ser-Gln、Met-Pro、Phe-Glu、Glu_Trp、Trp-Leu 或 His-Trp 存在下的代謝活性。在實(shí)施例中， 二肽中存在的氨基酸殘基為L(zhǎng)-氨基酸殘基。
[0079] 測(cè)試的有益口腔細(xì)菌是緩癥鏈球菌、唾液鏈球菌、血鏈球菌、粘性放線菌、格氏鏈 球菌、生痰二氧化碳嗜纖維菌、內(nèi)氏放線菌和小韋榮球菌。測(cè)試的病原性口腔細(xì)菌是變異鏈 球菌、中間普雷沃菌、牙齦卟啉單胞菌、核粒梭桿菌、福賽斯坦納菌、伴放線放線桿菌和遠(yuǎn)緣 鏈球菌。
[0080] 能夠增加以上有益細(xì)菌中的至少一種的代謝活性而不或僅極小程度地增加病原 性細(xì)菌的生長(zhǎng)的底物被認(rèn)為是益生元底物。
[0081] 通過針對(duì)微生物細(xì)胞(Biolog Inc.)的高通量表型微陣列系統(tǒng)(PM)研究了所測(cè)試 細(xì)菌在以上提到的二肽存在下的24小時(shí)和48小時(shí)之后的代謝活性程度。每個(gè)PM可含有可充 當(dāng)細(xì)菌底物的高達(dá)95種不同的生物化學(xué)化合物(例如，二肽）以及不含有底物的一種陰性對(duì) 照。使用了微陣列板，其中每個(gè)板的不同孔預(yù)加載有(通過制造商Biolog Inc.)待測(cè)試的不 同二肽。使用單獨(dú)的微陣列板來測(cè)試每種細(xì)菌物種。因此，在每個(gè)特定板上使用多種二肽測(cè) 試了單一細(xì)菌物種。所述微陣列基于氧化還原技術(shù)，使用細(xì)胞呼吸作為通用的報(bào)告因子 (reporter)。活性細(xì)胞呼吸引起四唑染料的減少以及濃顏色的形成-例如，當(dāng)使用四唑染料 "Biolog Redox Dye Mix D"時(shí)，當(dāng)染料減少時(shí)顏色從透明/無色變成紫色。所述顏色變化的 觀察結(jié)果指示了哪種底物改善細(xì)胞的代謝活性和健康。
[0082]從血瓊脂板(在37 °C下厭氧孵育48小時(shí)）收集每種細(xì)菌物種并且將其轉(zhuǎn)移至為營(yíng) 養(yǎng)缺乏型培養(yǎng)基的IF-0基礎(chǔ)接種液（Biolog Inc.)。使用BioRad SmartSpec 3000?11〇1:〇1116丨61'在492111]1下將所得細(xì)胞懸浮液調(diào)節(jié)至42%的透射率（相對(duì)于不存在細(xì)菌物 種的基礎(chǔ)接種液的透射率）（通過添加其他接種液或其他細(xì)菌來進(jìn)行調(diào)節(jié)，直到獲得42 %的 透射率）。通過將3mL 42 %透射率細(xì)胞懸浮液與15mL接種液(所述接種液通過將11.6mL無菌 水、62.5mL IF-0基礎(chǔ)接種液和0.9mL四唑染料"Biolog Redox Dye mix D"混合來形成)混 合來制備所述懸浮液的1: 5稀釋液，從而產(chǎn)生等于85 %透射率（使用BioRad SmartSpec 3000Ph〇t〇meter)的最終細(xì)胞密度。將680yL的2M琥珀酸鈉/200μΜ檸檬酸鐵的蒸餾水溶液添 加到68mL的85%透射率細(xì)胞懸浮液并且將100yL所述混合液添加到每個(gè)孔(各種二肽已以 粉末形式存在于如從供應(yīng)商即Biolog Inc.獲得的板的相關(guān)孔中）。
[0083]在37°C下在厭氧性氣氛中孵育所有板。使用同一板在兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)24小時(shí)處和48小 時(shí)處通過分光光度法(Thermo Scientific Multiskan Ascent)在492nm下測(cè)定顏色變化。 對(duì)于每種所測(cè)試的細(xì)菌，還使用了相應(yīng)的對(duì)照，對(duì)照是板中含有特定細(xì)菌(細(xì)胞懸浮液)但 不含任何二肽的孔。在Multiscan微板讀數(shù)器中處于連續(xù)振動(dòng)24小時(shí)和48小時(shí)之后，針對(duì)每 種細(xì)菌/二肽組合并且針對(duì)每種其相應(yīng)對(duì)照（即其含有特定細(xì)菌但不含二肽)在492nm波長(zhǎng) 下測(cè)定(使用微板讀數(shù)器)24小時(shí)和48小時(shí)處的合成培養(yǎng)基的光密度(0D)。對(duì)于每種細(xì)菌， 將在24小時(shí)處和在48小時(shí)處獲得的0D值除以相應(yīng)對(duì)照在24小時(shí)處和在48小時(shí)處(分別地） 獲得的0D值，由此使得對(duì)照具有為1的值。因此，針對(duì)細(xì)菌與二肽的特定組合的大于1的值表 明24小時(shí)或48小時(shí)之后的細(xì)菌代謝活性的增加大于針對(duì)對(duì)照所觀察到的增加。
[0084]針對(duì)細(xì)菌與二肽的每種組合進(jìn)行三次實(shí)驗(yàn)，其中每次重復(fù)在不同的天數(shù)時(shí)進(jìn)行 (因此提供了三個(gè)生物復(fù)制品）。對(duì)照也如上所述進(jìn)行三次。所示的值是針對(duì)細(xì)菌與二肽的 每種組合在24小時(shí)處和在48小時(shí)處所獲得(如以上詳述的）的三個(gè)單一值的平均值(均值）。 結(jié)果顯示于下表1至4中：
[0085]
[0086] 表1:24小時(shí)處的病原性細(xì)菌[0087] μ伴放線放線桿菌
[0088]
[0089]
[0090] 表2:24小時(shí)處的有益細(xì)菌
[0091]
[0092] 表3:48小時(shí)處的病原性細(xì)菌 [0093] μ伴放線放線桿菌
[0094]
[0095] 表4:48小時(shí)處的有益細(xì)菌
[0096]在以上數(shù)據(jù)中，將值2作為閾值，在所述閾值之上二肽使得細(xì)菌的代謝活性顯著地 增加。選擇所述值以便排除低刺激的代謝物并且避免假陽性的結(jié)果。
[0097] 如可從以上數(shù)據(jù)看出的，Ser-Leu、Ser-Val、Met-Pro、Phe-Glu、Ser-Asr^PSe;r-Gln 在 24 小時(shí)處表現(xiàn)出益生元效應(yīng)，并且 Met-Pro、Phe-Glu、Ser-Asn、Ser-Gln、Glu_Trp、Trp-Leu和Hi s-Trp在48小時(shí)處表現(xiàn)出益生元效應(yīng)。在不受任何理論限制的情況下，據(jù)信在48小 時(shí)處表現(xiàn)出益生元效應(yīng)的那些物質(zhì)可在長(zhǎng)時(shí)間使用后向口腔提供有益效應(yīng)。
[0098] 因?yàn)镾er-Leu和Ser-Val被有益細(xì)菌代謝的速度比被病原性細(xì)菌代謝的速度更快 (通過以上的在24小時(shí)處所達(dá)到的數(shù)據(jù)組中的值2所顯示的），所以預(yù)期Ser-Leu或Ser-Val 的存在使得有益細(xì)菌在短時(shí)間范圍內(nèi)抑制病原性細(xì)菌的生長(zhǎng)，從而維持健康的口腔微生物 群。因?yàn)镾er-Leu和Ser-Val被有益細(xì)菌代謝的速度比被病原性細(xì)菌代謝的速度更快，所以 在病原性細(xì)菌可開始利用這些二肽之前，這些二肽被有益細(xì)菌所消耗/代謝掉（由此被從環(huán) 境中除去）。在不受任何理論限制的情況下，據(jù)信當(dāng)(諸如在口腔中）存在有益細(xì)菌和病原性 細(xì)菌的混合物時(shí)，可消除Ser-Leu和Ser-Val對(duì)病原性細(xì)菌的刺激效應(yīng)(如在48小時(shí)處所看 到的），因?yàn)樗龆奈镔|(zhì)已被有益細(xì)菌代謝掉，因此未被病原性細(xì)菌獲得來利用。因此，如 果在病原性細(xì)菌的生長(zhǎng)/代謝活性/定植被刺激之前，有益細(xì)菌的生長(zhǎng)/代謝活性/定植得以 刺激，那么在病原性細(xì)菌有機(jī)會(huì)生長(zhǎng)/繁殖之前，有益細(xì)菌可進(jìn)行繁殖并且對(duì)病原性細(xì)菌產(chǎn) 生抑制效應(yīng)。
[0099] 實(shí)施例2
[0100] 研究了各種有益口腔細(xì)菌和病原性口腔細(xì)菌在二肽Met-Pro和Phe-Glu(作為實(shí) 例)存在下的生長(zhǎng)程度。二肽中存在的氨基酸殘基為L(zhǎng)-氨基酸殘基。
[0101 ]測(cè)試的有益口腔細(xì)菌是緩癥鏈球菌、唾液鏈球菌、血鏈球菌、粘性放線菌、格氏鏈 球菌、生痰二氧化碳嗜纖維菌、內(nèi)氏放線菌和小韋榮球菌。測(cè)試的病原性口腔細(xì)菌是變異鏈 球菌、中間普雷沃菌、牙齦卟啉單胞菌、核粒梭桿菌、福賽斯坦納菌、伴放線放線桿菌和遠(yuǎn)緣 鏈球菌。
[0102] 能夠增加以上有益細(xì)菌中的至少一種的生長(zhǎng)(或最大生長(zhǎng)密度或生長(zhǎng)程度)而不 或僅極小程度地增加病原性細(xì)菌的生長(zhǎng)(或最大生長(zhǎng)密度)的底物被認(rèn)為是益生元化合物。
[0103] 通過在富營(yíng)養(yǎng)型培養(yǎng)基(腦心浸液肉湯(BHI)，0xoid)中經(jīng)48小時(shí)建立生長(zhǎng)曲線研 究了所測(cè)試的細(xì)菌響應(yīng)于選擇的化合物(Met-Pr 〇、Phe-Glu)的生長(zhǎng)程度。通過將相應(yīng)的細(xì) 菌從血瓊脂板轉(zhuǎn)移至BHI制備了晚指數(shù)生長(zhǎng)期液體培養(yǎng)物并且將所述培養(yǎng)物在37 °C下在厭 氧性氣氛中針對(duì)粘性放線菌、小韋榮球菌、核粒梭桿菌、牙齦卟啉單胞菌、中間普雷沃菌、福 賽斯坦納菌、內(nèi)氏放線菌和生痰二氧化碳嗜纖維菌進(jìn)行過夜孵育，并且在5 %C02環(huán)境中針 對(duì)唾液鏈球菌、血鏈球菌、緩癥鏈球菌、伴放線放線桿菌、變異鏈球菌、遠(yuǎn)緣鏈球菌和格氏鏈 球菌進(jìn)行過夜孵育。將過夜培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移至BHI并且通過在600nm下測(cè)定(BioRad SmartSpec 3000)光密度(0D6QQ)將其調(diào)節(jié)至1 X 107CFU/ml (菌落形成單位數(shù)/ml)的濃度。對(duì)于每種菌 株，將200μ1細(xì)菌懸浮液添加至含有20μ1相應(yīng)二肽的96孔板中。將二肽的最終濃度設(shè)定為5、 10、20和25ymol/ml。對(duì)于每種所測(cè)試的細(xì)菌，還使用了不含有二肽的相應(yīng)對(duì)照。如先前所述 來孵育板。
[0104] 針對(duì)細(xì)菌/二肽的每種組合并且針對(duì)每種其相應(yīng)對(duì)照（即在沒有二肽的富營(yíng)養(yǎng)型 培養(yǎng)基中的特定細(xì)菌），在〇h、24h和48h處在630nm下測(cè)定（Thermo Scientif ic Multiskan Ascent)光密度(0D63Q)。另外，還在Oh和9h之間每隔一小時(shí)測(cè)定了在5%⑶2環(huán)境中生長(zhǎng)的細(xì) 菌/二肽的組合的〇D 63q。對(duì)于細(xì)菌/二肽的每種組合，將經(jīng)48小時(shí)時(shí)間段獲得的最大0D值除 以相應(yīng)對(duì)照經(jīng)48小時(shí)時(shí)間獲得的最大0D值，由此使得對(duì)照具有為1的值。因此，針對(duì)細(xì)菌與 二肽的特定組合的大于1的值表明經(jīng)48小時(shí)的細(xì)菌生長(zhǎng)程度大于針對(duì)對(duì)照的經(jīng)48小時(shí)的細(xì) 菌生長(zhǎng)程度。
[0105] 針對(duì)細(xì)菌與二肽的每種組合并且針對(duì)每種對(duì)照，在不同的3天進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)（因此提 供了 3個(gè)生物復(fù)制品）并且在每天時(shí)進(jìn)行四次實(shí)驗(yàn)（因此提供了 4個(gè)技術(shù)復(fù)制品）。針對(duì)每天 并且針對(duì)每種組合，計(jì)算針對(duì)四次技術(shù)復(fù)制品所獲得的值(如以上詳述的）的平均值(均值） 以提供針對(duì)每天的每種組合的單一值。下面表5至6中示出的值是針對(duì)細(xì)菌與二肽的每種組 合所獲得的三個(gè)單一值的平均值(均值）。結(jié)果顯示于下表5至6中：
[0106]
[0107] 表5:經(jīng)48小時(shí)的病原性細(xì)菌
[0108] *伴放線放線桿菌
[0109]
[0110]
[0111] 表6:經(jīng)48小時(shí)的有益細(xì)菌
[0112] 在以上數(shù)據(jù)中，將值1.25作為閾值，在所述閾值之上二肽使得細(xì)菌的生長(zhǎng)程度相 對(duì)于對(duì)照顯著地增加。選擇所述值以便排除低刺激的代謝物并且避免假陽性的結(jié)果。
[0113] 如可從以上數(shù)據(jù)看到的，Phe-Glu在5和ΙΟμ mol/ml濃度下表現(xiàn)出益生元效應(yīng)，并且 Met-Pro在25、20和1(^111〇1/1111濃度下表現(xiàn)出益生元效應(yīng)。
[0114] 實(shí)施例3
[0115] 還研究了二肽Met-Pro和Phe-Glu (作為實(shí)例)對(duì)各種有益口腔細(xì)菌和病原性口腔 細(xì)菌的生物膜生長(zhǎng)的效應(yīng)。二肽中存在的氨基酸殘基為L(zhǎng)-氨基酸殘基。
[0116] 能夠增加以上有益細(xì)菌中的至少一種的生物膜量而不或僅極小程度地增加病原 性細(xì)菌的生物膜量的底物被認(rèn)為是益生元化合物。
[0117] 通過在富營(yíng)養(yǎng)型培養(yǎng)基(腦心浸液肉湯(BHI)，0xoid)中經(jīng)48小時(shí)建立生物膜生長(zhǎng) 試驗(yàn)研究了所測(cè)試的細(xì)菌響應(yīng)于選擇的化合物(Met-Pro、Phe-Glu)的生物膜形成的增加。 通過將相應(yīng)的細(xì)菌從血瓊脂板轉(zhuǎn)移至BHI制備了晚指數(shù)生長(zhǎng)期液體培養(yǎng)物并且將所述培養(yǎng) 物在37°C下在厭氧性氣氛中針對(duì)粘性放線菌、小韋榮球菌、核粒梭桿菌、牙齦卟啉單胞菌、 中間普雷沃菌、福賽斯坦納菌、內(nèi)氏放線菌和生痰二氧化碳嗜纖維菌進(jìn)行過夜孵育，并且在 5 % C02環(huán)境中針對(duì)唾液鏈球菌、血鏈球菌、緩癥鏈球菌、伴放線放線桿菌、變異鏈球菌和格 氏鏈球菌進(jìn)行過夜孵育。將過夜培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移至BHI并且通過在600nm下測(cè)定（BioRad SmartSpec 3000)光密度(OD·)將其調(diào)節(jié)至1 X 107CFU/ml的濃度。對(duì)于每種菌株，將200μ1 細(xì)菌懸浮液添加至含有20μ1相應(yīng)二肽的96孔板中。將二肽的最終濃度設(shè)定為5、10、20和25μ mol/ml。對(duì)于每種所測(cè)試的細(xì)菌，還使用了不含有二肽的相應(yīng)對(duì)照。另外，對(duì)于每種所測(cè)試 的細(xì)菌，添加了背景對(duì)照以校正背景染色。所述背景對(duì)照含有所測(cè)試的細(xì)菌和0.03重量％ 氯己定(作為防腐劑）。如先前所述來孵育板。在48小時(shí)之后將上清液從板的孔中除去。用1 X 100yL PBS (磷酸鹽緩沖鹽水)將孔洗滌兩次，用96 %體積乙醇（96 %體積水溶液）固定20 分鐘，并且用1重量％結(jié)晶紫（1重量％水溶液)將保留在孔底部的生物膜染色。用5%體積乙 酸（5%體積水溶液）溶解結(jié)合的染料。通過使用Multiskan Ascent微板讀數(shù)器（Thermo Scientific)在630nm下測(cè)定吸光度來進(jìn)行對(duì)染色生物膜的定量。
[0118] 在扣除背景對(duì)照0D值之后，對(duì)于細(xì)菌/二肽的每種組合，將在48小時(shí)處獲得的最大 0D值除以針對(duì)相應(yīng)對(duì)照所獲得的0D值，由此使得對(duì)照具有為1的值。因此，針對(duì)細(xì)菌與二肽 的特定組合的大于1的值表明經(jīng)48小時(shí)的生物膜生長(zhǎng)大于針對(duì)對(duì)照的經(jīng)48小時(shí)的生物膜生 長(zhǎng)。
[0119] 針對(duì)細(xì)菌與二肽的每種組合并且針對(duì)每種對(duì)照，在不同的3天進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)（因此提 供了 3個(gè)生物復(fù)制品）并且每天進(jìn)行四次實(shí)驗(yàn)（因此提供了 4個(gè)技術(shù)復(fù)制品）。針對(duì)每天并且 針對(duì)每種組合，計(jì)算針對(duì)四次技術(shù)復(fù)制品所獲得的值(如以上詳述的）的平均值(均值）以提 供針對(duì)每天的每種組合的單一值。下面表7至8中示出的值是針對(duì)細(xì)菌與二肽的每種組合所 獲得的三個(gè)單一值的平均值(均值）。結(jié)果顯示于下表7至8中：
[0120]
[0121] 表7:48小時(shí)處的病原性細(xì)菌
[0122] *伴放線放線桿菌
[0123]
[0124]
[0125] 表8:經(jīng)48小時(shí)的有益細(xì)菌
[0126] 在以上數(shù)據(jù)中，將值1.6作為閾值，在所述閾值之上二肽使得細(xì)菌的生物膜生長(zhǎng)相 對(duì)于對(duì)照顯著地增加。選擇所述值以便排除低刺激的代謝物并且避免假陽性的結(jié)果。
[0127] 如可從以上數(shù)據(jù)看到的，Phe-Glu在5和ΙΟμ mol/ml濃度下表現(xiàn)出益生元效應(yīng)，并且 Met-Pro在25、20和1(^111〇1/1111濃度下表現(xiàn)出益生元效應(yīng)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種口腔護(hù)理組合物，其包含： (a) 具有式Xaal-Xaa2或Xaa2-Xaal的二肽;其中Xaal為具有極性不帶電荷的側(cè)鏈的氨 基酸;并且Xaa2選自具有疏水性側(cè)鏈的氨基酸、具有極性不帶電荷的側(cè)鏈的氨基酸，和脯氨 酸;或 (b) 具有式Xaa3_Xaa4或Xaa4_Xaa3的二肽;其中Xaa3為具有疏水性側(cè)鏈的氨基酸;并且 Xaa4選自具有疏水性側(cè)鏈的氨基酸和具有帶電荷的側(cè)鏈的氨基酸。2. 如權(quán)利要求1所述的口腔護(hù)理組合物，其中Xaal、Xaa2、Xaa3和Xaa4為L(zhǎng)-氨基酸。3. 如任一前述權(quán)利要求所述的口腔護(hù)理組合物，其中以所述口腔護(hù)理組合物的重量為 基準(zhǔn)，所述組合物中的所述二肽存在量為0.01重量％至10重量％。4. 如任一前述權(quán)利要求所述的口腔護(hù)理組合物，其中Xaa2為具有脂肪族疏水性側(cè)鏈的 氨基酸。5. 如權(quán)利要求4所述的口腔護(hù)理組合物，其中Xaa2為丙氨酸、異亮氨酸、亮氨酸或纈氨 酸。6. 如權(quán)利要求5所述的口腔護(hù)理組合物，其中Xaa2為亮氨酸或纈氨酸。7. 如權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的口腔護(hù)理組合物，其中Xaa2為天冬酰胺、半胱氨酸、 谷氨酰胺、甲硫氨酸、絲氨酸或蘇氨酸。8. 如權(quán)利要求7所述的口腔護(hù)理組合物，其中Xaa2為天冬酰胺或谷氨酰胺。9. 如權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的口腔護(hù)理組合物，其中Xaa2為脯氨酸。10. 如任一前述權(quán)利要求所述的口腔護(hù)理組合物，其中Xaal為絲氨酸、甲硫氨酸、蘇氨 酸、半胱氨酸、天冬酰胺或谷氨酰胺。11. 如權(quán)利要求10所述的口腔護(hù)理組合物，其中Xaal為絲氨酸。12. 如權(quán)利要求10所述的口腔護(hù)理組合物，其中Xaal為甲硫氨酸。13. 如權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的口腔護(hù)理組合物，其中Xaa3為具有芳族疏水性側(cè) 鏈的氨基酸。14. 如權(quán)利要求13所述的口腔護(hù)理組合物，其中Xaa3為色氨酸、苯丙氨酸或酪氨酸。15. 如權(quán)利要求14所述的口腔護(hù)理組合物，其中Xaa3為色氨酸。16. 如權(quán)利要求14所述的口腔護(hù)理組合物，其中Xaa3為苯丙氨酸。17. 如權(quán)利要求13至16中任一項(xiàng)所述的口腔護(hù)理組合物，其中Xaa4為天冬氨酸、谷氨 酸、精氨酸、組氨酸或賴氨酸。18. 如權(quán)利要求15所述的口腔護(hù)理組合物，其中Xaa4為谷氨酸或組氨酸。19. 如權(quán)利要求13至16中任一項(xiàng)所述的口腔護(hù)理組合物，其中Xaa4為具有脂肪族疏水 性側(cè)鏈的氨基酸。20. 如權(quán)利要求19所述的口腔護(hù)理組合物，其中Xaa4為丙氨酸、異亮氨酸、亮氨酸或纈 氨酸。21. 如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的口腔護(hù)理組合物，其中所述組合物為潔齒劑、牙 膏、凝膠、牙粉、漱□水、口腔清洗劑、錠劑、片劑、噴霧劑、□香糖或膜劑。22. 如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的口腔護(hù)理組合物，其中所述組合物還包含對(duì)口腔 健康具有有益效應(yīng)的至少一種細(xì)菌物種。23. 如權(quán)利要求22所述的口腔護(hù)理組合物，其中對(duì)口腔健康具有有益效應(yīng)的所述細(xì)菌 物種選自緩癥鏈球菌、唾液鏈球菌、血鏈球菌、粘性放線菌、小韋榮球菌、格氏鏈球菌、生痰 二氧化碳嗜纖維菌、內(nèi)氏放線菌以及其組合。24. 根據(jù)權(quán)利要求1至23中任一項(xiàng)所述的組合物，所述組合物用于在口腔中進(jìn)行選擇性 地促進(jìn):相對(duì)于病原性口腔細(xì)菌的生長(zhǎng)、代謝活性或定植，選擇性地促進(jìn)對(duì)口腔健康具有有 益效應(yīng)的細(xì)菌的生長(zhǎng)、代謝活性或定植。25. 根據(jù)權(quán)利要求1至23中任一項(xiàng)所述的組合物，所述組合物用于在口腔中相對(duì)于病原 性口腔細(xì)菌的生物膜形成，選擇性地促進(jìn)對(duì)口腔健康具有有益效應(yīng)的生物膜形成。26. 根據(jù)權(quán)利要求1至23中任一項(xiàng)所述的組合物，所述組合物用于維持和/或重新建立 健康的口腔微生物群。27. 根據(jù)權(quán)利要求1至23中任一項(xiàng)所述的組合物，所述組合物用于預(yù)防牙齦炎、牙周炎、 種植體周圍炎、種植體周圍粘膜炎、壞死性牙齦炎、壞死性牙周炎以及齲齒中的一種或多 種。28. -種在受試者口腔中進(jìn)行選擇性地促進(jìn):相對(duì)于病原性口腔細(xì)菌的生長(zhǎng)、代謝活性 或定植，選擇性地促進(jìn)對(duì)口腔健康具有有益效應(yīng)的細(xì)菌的生長(zhǎng)、代謝活性或定植的方法;所 述方法包括使所述口腔與如權(quán)利要求1至23中任一項(xiàng)所述的口腔護(hù)理組合物接觸。29. -種在受試者口腔中相對(duì)于病原性口腔細(xì)菌的生物膜形成，選擇性地促進(jìn)對(duì)口腔 健康具有有益效應(yīng)的生物膜形成的方法;所述方法包括使所述口腔與如權(quán)利要求1至23中 任一項(xiàng)所述的口腔護(hù)理組合物接觸。30. -種在受試者中維持和/或重新建立健康的口腔微生物群的方法，所述方法包括使 所述受試者的口腔與如權(quán)利要求1至23中任一項(xiàng)所述的口腔護(hù)理組合物接觸。31. -種預(yù)防受試者的牙齦炎、牙周炎、種植體周圍炎、種植體周圍粘膜炎、壞死性牙齦 炎、壞死性牙周炎以及齲齒中的一種或多種的方法，所述方法包括使所述受試者的口腔與 如權(quán)利要求1至23中任一項(xiàng)所述的口腔護(hù)理組合物接觸。32. 以下項(xiàng)在口腔護(hù)理組合物中的用途： (i)具有式Xaal_Xaa2或Xaa2_Xaal的二肽;其中Xaal為具有極性不帶電荷的側(cè)鏈的氨 基酸;并且Xaa2選自具有疏水性側(cè)鏈的氨基酸、具有極性不帶電荷的側(cè)鏈的氨基酸，和脯氨 酸;或 (i i)具有式Xaa3_Xaa4或Xaa4_Xaa3的二肽;其中Xaa3為具有疏水性側(cè)鏈的氨基酸;并 且Xaa4選自具有疏水性側(cè)鏈的氨基酸和具有帶電荷的側(cè)鏈的氨基酸； 所述用途為： (a) 相對(duì)于病原性口腔細(xì)菌的生長(zhǎng)、代謝活性或定植，選擇性地促進(jìn)對(duì)口腔健康具有有 益效應(yīng)的細(xì)菌的生長(zhǎng)、代謝活性或定植； (b) 相對(duì)于病原性口腔細(xì)菌的生物膜形成，選擇性地促進(jìn)對(duì)口腔健康具有有益效應(yīng)的 細(xì)菌的生物膜形成； (c) 在受試者中維持和/或重新建立健康的口腔微生物群;或 (d) 預(yù)防受試者的牙齦炎、牙周炎、種植體周圍炎、種植體周圍粘膜炎、壞死性牙齦炎、 壞死性牙周炎以及齲齒中的一種或多種。33. 如權(quán)利要求32所述的用途，其中所述二肽在與對(duì)口腔健康具有有益效應(yīng)的細(xì)菌和 病原性口腔細(xì)菌一起孵育24小時(shí)后，相對(duì)于所述病原性口腔細(xì)菌的生長(zhǎng)、代謝活性或定植 選擇性地促進(jìn)對(duì)口腔健康具有有益效應(yīng)的所述細(xì)菌的生長(zhǎng)、代謝活性或定植。34.如權(quán)利要求32所述的用途，其中所述二肽在與對(duì)口腔健康具有有益效應(yīng)的細(xì)菌和 病原性口腔細(xì)菌一起孵育48小時(shí)后，相對(duì)于所述病原性口腔細(xì)菌的生長(zhǎng)、代謝活性或定植 選擇性地促進(jìn)對(duì)口腔健康具有有益效應(yīng)的所述細(xì)菌的生長(zhǎng)、代謝活性或定植。
【文檔編號(hào)】A61K8/64GK106061492SQ201380081842
【公開日】2016年10月26日
【申請(qǐng)日】2013年12月27日
【發(fā)明人】漢斯·施泰特勒, 維姆·特日赫爾斯, 馬克·奎爾瑞嫩, 尼科·博恩
【申請(qǐng)人】高露潔-棕欖公司, 魯汶天主教大學(xué), 根特大學(xué)