阿掏比克酸三唑基與1h?四氮唑基衍生物的組合物用于制備防治肝臟損傷藥物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種阿掏比克酸即Artalbic acid的O?(三唑基)乙基與O?(1H?四氮唑基)乙基衍生物的組合物在防治肝臟損傷藥物中的應用，本發(fā)明涉及有機合成和藥物化學領域，具體涉及阿掏比克酸即Artalbic acid的O?(三唑基)乙基與O?(1H?四氮唑基)乙基衍生物的組合物、制備方法及其在制備防治肝臟損傷藥物上的用途。本發(fā)明公開了一種阿掏比克酸即Artalbic acid的O?(三唑基)乙基與O?(1H?四氮唑基)乙基衍生物的組合物及其制備方法。藥理學實驗表明，本發(fā)明的阿掏比克酸即Artalbic acid的O?(三唑基)乙基與O?(1H?四氮唑基)乙基衍生物的組合物具有防治肝臟損傷的作用，具有開發(fā)防治肝臟損傷藥物的價值。
【專利說明】
阿掏比克酸三唑基與1H-四氮唑基衍生物的組合物用于制備 防治肝臟損傷藥物
技術領域
[0001] 本發(fā)明涉及有機合成和藥物化學領域，具體涉及組合物、制備方法及其用途。
【背景技術】
[0002] 引起肝損傷的原因有多個：1、病毒感染：由多種肝炎病毒引起，具有傳染性強，傳 播途徑復雜，流行面廣泛，發(fā)病率高等特點。2、藥物或化學毒物:許多藥物和化學毒物都可 引起肝臟損傷，發(fā)生藥物性肝炎或中毒性肝炎。3、酗酒:酒精對肝臟的損害是很嚴重的，損 害的后果包括酒精性肝炎、酒精性脂肪肝、酒精性肝硬化，主要是由于酒精（乙醇)及其代謝 產物乙醛的毒性對肝細胞直接損害造成的。4、其他原因：原發(fā)和繼發(fā)的肝臟腫瘤、心功能不 全導致肝臟淤血、某些先天性肝臟疾病、靜脈高價營養(yǎng)等，都可以造成不同程度的肝損害， 這些肝損害的早期表現往往是ALT(轉氨酶)或膽紅素的升高，不祛除病因，肝臟的損害會進 一步加重。目前在我國由于上述原因每年發(fā)生肝損傷的人數眾多，形勢不容樂觀。急需研發(fā) 高效低毒的防治肝臟損傷藥物。
[0003] 肝臟損傷的治療目前已有的藥物存在毒性大、安全性低的問題，從天然產物中尋 找化合物或先導化合物并進行結構修飾獲得其衍生物，從而得到高效低毒的潛在藥物具有 重要價值。
[0004] 本發(fā)明涉及的化合物I是一個2011年發(fā)表（Antonella Maggio et al ·， 2011.Artalbic acid，a sesquiterpene with an unusual skeleton from Artemisia alba( As teraceae) from Sicily .Tetrahedron Letters ,52(2011 )4543-4545)的化合物，我 們對化合物I進行了結構修飾，獲得了兩個新的衍生物即化合物III和化合物IV，并用化合 物III和化合物IV制備了組合物并對該組合物抗肝臟損傷活性進行了評價，其具有抗肝臟 損傷活性。

【發(fā)明內容】

[0005] 本發(fā)明公開了一個新的組合物，該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合物 中化合物III和化合物IV的質量百分數分別為5%和95%。
[0006]
[0007] 本發(fā)明公開的組合物可以制成藥學上可接受的鹽或藥學上可接受的載體。
[0008] 藥效學實驗表明，本發(fā)明的組合物具有較好的抗肝臟損傷作用。本發(fā)明的藥學上 可接受的鹽具有同樣的藥效。
[0009] 以下通過實施例對本發(fā)明作進一步詳細的說明，但本發(fā)明的保護范圍不受具體實 施例的任何限制，而是由權利要求加以限定。
【具體實施方式】
[0010] 實施例1化合物Artalbic acid的制備
[0011] 化合物Artalbic acid(I)的制備方法參照Antonella Maggio等人發(fā)表的文獻 (Antonella Maggio et al.,2011.Artalbic acid,a sesquiterpene with an unusual skeleton from Artemisia alba(Asteraceae)from Sicily. Tetrahedron Letters ,52 (2011 )4543-4545)的方法。
[0012]
[0013] 實施例2 Artalbic acid的0-溴乙基衍生物（II)的合成
[0014] 將化合物I(266mg，l .OOmmol)溶于IOmL苯，向溶液中加入四丁基溴化銨（TBAB) (0.088)，1，2-二溴乙燒(3.76(^，20.00_〇1)和61]1]^的50%氫氧化鈉溶液?；旌衔镌?0攝氏 度攪拌Iehieh之后將反應液倒入冰水中，立即用二氯甲烷萃取兩次，合并有機相溶液。然 后對有機相溶液依次用水和飽和食鹽水洗滌5次，再用無水硫酸鈉干燥，最后減壓濃縮去除 溶劑得到產物粗品。產物粗品用硅膠柱層析純化(流動相為:石油醚/丙酮= 100:1.0，v/V)， 收集棕色集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物II的棕色粉末(272mg，73% )。
[0015] 1H NMR(500MHz,DMS0-d6)5ll.41(s,lH),6.06(s,lH),5.76(s,lH),4.99(s,lH), 4.71(s,1H),4.56(s,1H),3.86(s,2H),3.54(s,2H),2.65(s,1H),2.43(s,2H),2.33(s,2H), 2.10(s,lH),1.64(s,3H),1.54(s,lH),1.44(s,2H),0.95(s,3H).
[0016] 13C NMR(125MHz,DMS0-d6)S201.95(s),175.93(s),149.13(s),148.15(s),117.05 (s),109.43(s),81.86(s),70.27(s),57.68(s),41.26(s),39.07(s),38.86(s),35.69(s), 33.36(s),30.72(s),20.44(s),18.42(s).
[0017] HRMS(ESI)m/z[M+H]+calcd for Ci7H26BrO4:373.1014；found 373.1017.
[0018]
[0019] 實施例3 Artalbic acid的0_(三唑基）乙基衍生物（III)的合成 [0020] 將化合物II(187mg，0.5mmo 1)溶于25mL乙腈當中，向其中加入無水碳酸鉀(345mg， 2 · 5mmol)，鵬化鉀（84mg，0 · 5mmol)和 1，2，3-三氮挫（2760mg，40mmol)，混合物加熱回流3h。 反應結束后將反應液倒入冰水中，用等量二氯甲烷萃取三次，合并有機相。依次用水和飽和 食鹽水洗滌合并之后的有機相，再用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產物粗品。產 物粗品用硅膠柱層析純化(流動相為:石油醚/丙酮= 100: ι.ο，v/v)，收集淡黃色集中洗脫 帶即得到化合物III的淡黃色膠狀固體(124.5mg，69% )。
[0021] 1H NMR(500MHz,DMS0-d6)5l6.23(s,lH) ,7.99(d,J = 29.4Hz,2H) ,6.11(s,lH), 5.82(s,lH),4.76(d J=17.3Hz,2H),4.62(s,1H),4.24(s,1H),4.18(s,1H),3.84(s,2H), 2.70(s,lH),2.52(d J=16.3Hz,4H),2.02(s,lH),1.69(s,3H),1.62(s,2H),1.51(s,lH), 1.02(s,3H).
[0022] 13C NMR(125MHz,DMS0-d6)S201.95(s),175.95(s),149.17(s),148.18(s),136.99 (s),120.76(s),117.09(s),109.44(s),81.89(s),65.54(s),57.72(s),46.43(s),41.30 (s),39.08(s),38.89(s),35.71(s),30.77(s),20.46(s),18.43(s).
[0023] HRMS(ESI) :m/z[M+H].calcd for Ci9H28N3〇4:362.2080;found:362.2085〇
[0024]
[0025] 頭她例4 Artalbic acid的四風嘩乙衍王物的甘成
[0026] 將化合物II(187mg，0.5mmo 1)溶于20mL乙腈當中，向其中加入無水碳酸鉀(345mg， 2 · 5mmo 1)，碘化鉀（84mg，0 · 5mmo 1)和IH-四氮唑（140 Img，20mmo 1)，混合物加熱回流5h。反應 結束后將反應液倒入冰水中，用等量二氯甲烷萃取三次，合并有機相。依次用水和飽和食鹽 水洗滌合并之后的有機相，再用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產物粗品。因為互 變異構作用，在反應條件下會生成IH-四氮唑基和2H-四氮唑基兩種取代產物。產物粗品用 硅膠柱層析純化(流動相為:石油醚/丙酮= 100:1.5，v/v)，收集黃色集中洗脫帶，再將洗脫 帶濃縮，用硅膠柱層析純化(流動相為:石油醚/丙酮=100: 〇. 5，v/v)，依次收集兩個淡黃色 的洗脫帶，濃縮前1個洗脫帶即得到化合物IV的淡黃色固體(41.6mg，23%)。
[0027] 1H NMR(500MHz，DMS0-d6)Sll.50(s，lH)，10.04(s，lH)，6.07(s，lH)，5.78(s，lH)， 4.69(d ,J=11.0Hz,2H) ,4.58(s, 1H) ,4.22(s , 1H) ,4.15(s, 1H), 3.84(s , 2H), 2.66(s, 1H), 2.52(s,2H),2.45(s,2H),2.20(s,lH),1.65(d,J=8.0Hz,5H),1.44(s,lH),0.98(s,3H).
[0028] 13C NMR(125MHz,DMS0-d6)5201.92(s),175.93(s),149.14(s),148.15(s),145.18 (s) ,117.08(s) ,109.40(s),81.85(s),65.53(s),57.68(s),46.71(s),41.29(s),39.04 (s),38.85(s),35.70(s),30.73(s),20.42(s),18.42(s).
[0029] HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcd for Ci8H27N4〇4:363.2032;found:363.2029〇
[0030]
[0031] 實施例5組合物防治肝損傷的作用
[0032]( -）組合物對D-氨基半乳糖胺(D-galactosamine，D-GalN)誘導的小鼠急性肝損 傷的防護作用
[0033] 組合物的制備:將研磨之后過200目網的5mg化合物III的粉末和研磨之后過200目 網的95mg化合物IV的粉末裝入帶蓋的小管中并用渦輪攪拌儀混合即得到IOOmg組合物，使 用時用水溶解這IOOmg的組合物即得到組合物的溶液。
[0034] 小鼠分5組。對照組以生理鹽水灌胃（0.3mL · Cf1)，連續(xù)7d;且于第7d還要腹腔注射 生理鹽水（〇.15mL · log+1)，腹腔注射16h后取血，測AST及ALT活力。D-GalN組、組合物 3.Omg · kg+1組、化合物III組和化合物IV組分別以生理鹽水、組合物、化合物III和化合物IV 灌胃（0.3mL · d-連續(xù)7d;且于第7d還要腹腔注射D-GalN(800mg · kg-So.lSmL · 10g-4， 腹腔注射16h后取血，測AST及ALT活力。
[0035]表1組合物對D-GalN誘導的急性肝損傷的防護作用
[0037]注：DpW.Olvs對照組，2)p〈〇.Olvs D-GalN組
[0038]由表1可知，組合物能有效抑制D-GalN引起的小鼠 AST及ALT活性的顯著上升?；?物III和化合物IV無此作用。
[0039] (二)組合物對CCl4誘導的小鼠急性肝損傷的防護作用
[0040] 小鼠分5組，對照組以生理鹽水灌胃（0.3mL · Cf1)，連續(xù)5d，第6d腹腔注射植物油每 只0.1 mL · IOgH;CCl4組及組合物、化合物III和化合物IV給藥組(3.Omg · kg+1)分別以生理 鹽水及組合物、化合物111和化合物1卩灌胃（〇.31111^(^)，連續(xù)5(1，于第6(1腹腔注射().1% CCl4 O.lmL· 10g-'2411后處死動物，取血清測AST及ALT活力。
[0041 ]表2組合物對CCl4誘導的急性肝損傷的防護作用
[0043] 注，p〈〇.〇lvs對照組，z，p〈〇.〇lvs CC14組
[0044] 由表2可知，組合物能抑制CCl4引起的小鼠 AST及ALT活性的顯著上升?；衔颕II 和化合物IV無此作用。
[0045] 結論:組合物能有效保護D-GalN引起的小鼠肝損傷，組合物能有效保護CCU引起 的小鼠肝損傷，可以用來制備抗肝損傷藥物。化合物III和化合物IV不能有效保護D-GalN引 起的小鼠肝損傷，不能有效保護CCl 4引起的小鼠肝損傷，不可以用來制備抗肝損傷藥物。
[0046] 實施例6本發(fā)明所涉及組合物片劑的制備
[0047] 取2克組合物，加入制備片劑的常規(guī)輔料18克，混勻，常規(guī)壓片機制成100片。
[0048] 實施例7本發(fā)明所涉及組合物膠囊的制備
[0049] 取2克組合物，加入制備膠囊劑的常規(guī)輔料如淀粉18克，混勻，裝膠囊制成100粒。
【主權項】
1. 一種組合物，其特征為該組合物由化合物HI和化合物IV組成，該組合物中化合物 III和化合物IV的質量百分數分別為5%和95%，2. 如權利要求1所述的組合物的制備方法，其特征為:將化合物III的粉末和化合物IV 的粉末按照質量百分數分別為5%和95%充分混合。3. -種如權利要求1所述的組合物在防治肝臟損傷藥物中的應用。4. 如權利要求3所述的組合物在防治肝臟損傷藥物中的應用，其特征為:所述肝臟損傷 為化學物質誘導所致的肝臟損傷。5. 如權利要求4所述的組合物在防治肝臟損傷藥物中的應用，其特征為:所述化學物質 為D-氨基半乳糖胺。6. 如權利要求4所述的組合物在防治肝臟損傷藥物中的應用，其特征為:所述化學物質 為四氯化碳。
【文檔編號】A61K31/4192GK106074537SQ201610348632
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年5月24日
【發(fā)明人】丁秋菊
【申請人】南京海澳斯生物醫(yī)藥科技有限公司