活性有益菌群有機(jī)基質(zhì);倒堆過(guò)程,將上述料堆表層的物料置于新建料堆的內(nèi)層,將上述料堆內(nèi)層物料置于新建料堆的外層,按上述方法進(jìn)行第2次堆積發(fā)酵,得性能更好的活性有益菌群有機(jī)基質(zhì)。
[0008]上述發(fā)酵后的活性有益菌群有機(jī)基質(zhì)可作為育苗基質(zhì)和有機(jī)肥直接使用,也可以進(jìn)一步加工成耐貯存的產(chǎn)品,加工方法為:對(duì)上述活性有益菌群有機(jī)基質(zhì)進(jìn)行脫水干燥,干燥后的含水量以12%~16%為宜,干燥方法宜選用常溫鼓風(fēng)干燥機(jī)或流化床干燥或攤成薄層自然晾曬,干燥后的物料適宜密封包裝后貯存、運(yùn)輸和銷售。
[0009]為適應(yīng)不同類別植物的育苗需要,可向上述發(fā)酵制備的活性有益菌群有機(jī)基質(zhì)中入適量的泥炭、草炭、木炭、蛭石、凹凸棒、腐殖酸、氮肥、鉀肥、磷肥等進(jìn)一步提高其透氣性能和營(yíng)養(yǎng)性能。
[0010]上述發(fā)酵后的活性有益菌群有機(jī)基質(zhì)可直接用于營(yíng)養(yǎng)缽育苗、穴盤育苗,或用于農(nóng)田土地有機(jī)肥,或用于改善因使用化肥而造成的土壤板結(jié)。
[0011]上述步驟I和步驟2所述的馬鈴薯麩皮汁培養(yǎng)液的組成成分及配制方法(以配制IL馬鈴薯麩皮汁培養(yǎng)液為例說(shuō)明)為:取馬鈴薯50g,切片或碎塊后與少量水混合,用膠體磨或勻漿機(jī)或豆?jié){機(jī)打碎研磨成漿液得馬鈴薯漿液;取麩皮25g,加水500mL充分?jǐn)嚢韬蠹訜嶂蠓?,?dāng)沸騰后改為小火加熱保持微沸狀態(tài)20min左右,用6~8層紗布過(guò)濾后取所有濾液得麩皮浸提液;將馬鈴薯漿液和麩皮浸提液混合,再向混合浸提液中加入葡萄糖或蔗糖20g、豆粉10g、玉米粉10g、磷酸二氫鉀I g,充分?jǐn)嚢韬蠹铀ㄈ葜?L。
[0012]上述步驟I和步驟2所述的加富綜合馬鈴薯培養(yǎng)液的組成成分及配制方法(以配制IL加富綜合馬鈴薯培養(yǎng)液為例說(shuō)明)為:取200 g馬鈴薯,切片或碎塊,加水IL后加熱煮沸,當(dāng)沸騰后改為小火加熱保持微沸狀態(tài)20min左右,用8層紗布過(guò)濾后取所有濾液得馬鈴薯浸提液,再向馬鈴薯浸提液中加入葡萄糖20 g、蛋白胨5 g、磷酸二氫鉀2 g、硫酸鎂0.5g,攪拌至全部溶解,加水定容至1L。
[0013]上述步驟2所述的查氏培養(yǎng)液的組成成分及配制方法(以配制IL查氏培養(yǎng)液為例說(shuō)明)為:分別稱取蔗糖或葡萄糖30g、硝酸鈉或硝酸鉀2g、磷酸氫二鉀或磷酸二羥鉀lg、氯化鉀0.5g、硫酸鎂0.5g、硫酸亞鐵0.0lg,依次加入到IL水中,攪拌至全部溶解。
[0014]上述步驟I中用耐熱芽孢桿菌作為菌種進(jìn)行持續(xù)高溫深層液體發(fā)酵,這是因?yàn)檫@些耐熱芽孢桿菌均能夠在50~53°C的高溫環(huán)境下快速繁殖,而空氣中的其它種類的細(xì)菌、病毒、霉菌等因?yàn)椴荒苣褪?0°C以上的高溫而死亡,因此,本發(fā)明所選用的菌種在50~53°C的高溫發(fā)酵培養(yǎng)條件下可以持續(xù)保持生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)和群體數(shù)量?jī)?yōu)勢(shì)。
[0015]上述步驟3中用氫氧化鈣或氫氧化鉀粉末調(diào)節(jié)pH值至9.0-10.0得到pH為9.0-10.0的微堿性復(fù)合營(yíng)養(yǎng)稀釋液的目的是中和食用菌廢料中的酸性物質(zhì),并為土壤中的放線菌提供微堿性環(huán)境,從而有利于固體發(fā)酵過(guò)程中提高放線菌的數(shù)量,特別是耐高溫放線菌的數(shù)量。
[0016]上述步驟5中固體發(fā)酵采用的物料的堆積發(fā)酵方式的優(yōu)勢(shì)作用是有利于熱量的產(chǎn)生和積累,從而實(shí)現(xiàn)僅依靠微生物自身的呼吸代謝作用而不斷產(chǎn)熱升溫至50~60°C的高溫,從而殺滅不耐高溫的土傳病原微生物和害蟲卵,但仍保留耐熱芽孢桿菌、耐熱放線菌等有益菌的活性,所述的不耐高溫的土傳病原微生物及病害包括:(I)腐霉菌、立枯菌、鐮刀菌、蕓苔根腫菌、灰霉菌、單絲殼白粉菌、立枯絲核菌、灰葡萄孢菌、柱孢霉、刺盤孢菌導(dǎo)致的幼苗猝倒病、根腐病、根腫病、灰霉病、霜霉病、早疫病、炭疽病等土傳真菌性病害;(2)黃單胞桿菌、假單胞桿菌、歐氏桿菌等細(xì)菌導(dǎo)致的水稻白葉枯病、水稻基腐病、細(xì)菌性角斑病、細(xì)菌性葉枯病、細(xì)菌性斑瘆病、細(xì)菌性軟腐病、青枯病等土傳細(xì)菌性病害;(3)植物彈狀病毒、水稻矮縮病毒、水稻瘤矮病毒、水稻簇矮病毒、水稻黑條矮縮病毒、水稻草狀矮化病毒、水稻齒葉矮縮病毒、水稻條紋病毒、水稻黃葉病毒、小麥花葉病毒、煙草花葉病毒、甘薯羽狀斑駁病毒、馬鈴薯X病毒、馬鈴薯A病毒、馬鈴薯S病毒等植物病毒引起的病毒性植物病害。
[0017]本發(fā)明的優(yōu)勢(shì)效果表現(xiàn)在以下幾點(diǎn):
1、以食用菌產(chǎn)業(yè)中產(chǎn)生的大量的、廉價(jià)的廢料為對(duì)象,加工成應(yīng)用價(jià)值很高的育苗基質(zhì)和有機(jī)肥,有利于節(jié)約資源和環(huán)境保護(hù),實(shí)現(xiàn)了廢物回收利用和生態(tài)循環(huán)。
[0018]2、所選用的耐熱芽孢桿菌可在50~53°C的高溫條件下持續(xù)保持快速生長(zhǎng)繁殖狀態(tài),因此,在深層液體發(fā)酵階段可快速獲得生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì),而不用擔(dān)心由于無(wú)菌操作不嚴(yán)格、器具滅菌不徹底造成的雜菌生長(zhǎng),培養(yǎng)液中養(yǎng)分不會(huì)被雜菌徒耗,可快速、高效獲取高濃度耐熱芽孢桿菌培養(yǎng)液。
[0019]3、在固體發(fā)酵階段,定向加入的耐熱芽孢桿菌、有益性真菌等多種微生物菌群起到三個(gè)方面的積極作用:第一,初始的有益菌群體數(shù)量?jī)?yōu)勢(shì)不僅可以壓制土壤中其它細(xì)菌和真菌的生長(zhǎng)和繁殖,還可使有益菌群在固體物料中繼續(xù)增殖其數(shù)量;第二,定向接入的菌群有利于加速呼吸代謝并快速產(chǎn)熱,在不要外界供熱的情況下,微生物自身的呼吸熱在堆積的固體物料中積累就可實(shí)現(xiàn)自然升溫,升溫至50~60°C的過(guò)程中起到殺滅真菌性致病菌、細(xì)菌性致病菌、蟲卵和病毒,從而起到防治病蟲害的作用;第三,協(xié)同降解廢料中的蛋白質(zhì)、纖維素、半纖維素、木質(zhì)素、葡聚糖、甘露聚糖等大分子物質(zhì)的作用得到富含氨基酸、黃腐酸、檸檬酸、蘋果酸、乙酸、抗菌多肽、抗菌素等有機(jī)物質(zhì),同時(shí)也降解掉大部分殘留在土壤中的除草劑,起到抑制有害菌生長(zhǎng)繁殖、促進(jìn)植物根系發(fā)育的作用。
[0020]4、利用多種類型的有益菌群聯(lián)合呼吸產(chǎn)熱作用,在不需要提高額外的加熱措施的情況下,就可使食用菌廢料和土壤的混合物達(dá)到在較短的時(shí)間內(nèi)升溫到50°C以上的溫度,而常規(guī)自然堆積腐熟方法無(wú)法使食用菌廢料和土壤的混合物達(dá)到50°C以上的溫度,與高溫烘箱的烘烤處理方法相比具有無(wú)排放、低能耗、成本低的優(yōu)勢(shì)。
[0021]5、食用菌廢料和土壤等原料往往帶有大量植物病原微生物,經(jīng)過(guò)發(fā)酵后幾乎滅除了其中的植物致病菌、病毒、蟲卵,從根源上杜絕各種土傳病害的傳播及發(fā)生,由于發(fā)酵后基質(zhì)中植物有益微生物已經(jīng)占據(jù)絕地優(yōu)勢(shì),有害微生物很難生長(zhǎng)繁殖,整個(gè)育苗過(guò)程無(wú)需再反復(fù)噴施化學(xué)合成殺菌藥、殺蟲藥就可保障幼苗的成活率,從而減少了毒性農(nóng)藥對(duì)環(huán)境的污染,提高了食品的安全性,節(jié)約了生產(chǎn)成本,生態(tài)效益明顯。
【具體實(shí)施方式】
[0022]實(shí)施例1
以食用菌栽培過(guò)程產(chǎn)生的培養(yǎng)基或菌糠廢料為主要原料發(fā)酵制備育苗基質(zhì)和有機(jī)肥,其具體的步驟如下:
深層液體發(fā)酵制備高濃度枯草芽孢桿菌液:(1)高溫下富集培養(yǎng)枯草芽孢桿菌種子液,具體步驟包括:配制馬鈴薯麩皮汁培養(yǎng)液lOOOmL,平均分裝入到5個(gè)規(guī)格為500mL的三角瓶中并用棉塞、雙層紙、線繩封口包扎,采用常壓間歇滅菌2次,SP 100°C第一次滅菌30min,冷卻至30°C,保持6h后,再用100°C滅菌30min ;待培養(yǎng)液冷卻到50°C左右接入枯草芽孢桿菌,培養(yǎng)溫度為49°C,振蕩速度為120r/min,培養(yǎng)22h,三角瓶中菌體濃度為
1.5X 108cfu/mL,得到枯草芽孢桿菌種子液;(2)高溫深層液體發(fā)酵獲取高濃度枯草芽孢桿菌液,具體步驟包括:配制馬鈴薯麩皮汁培養(yǎng)液70L裝入容積為100L的發(fā)酵罐內(nèi),再加入10g泡敵作為消泡劑,采用常壓間歇滅菌2次,即100°C第一次滅菌30min,冷卻至35°C,保持5h后,再用100°C滅菌30min ;開啟空氣壓縮機(jī),向發(fā)酵罐發(fā)酵液中通入無(wú)菌空氣,控制發(fā)酵罐壓力在0.04-0.06MPa,將上述培養(yǎng)好的5瓶三角瓶枯草芽孢桿菌種子液接種到發(fā)酵罐,整個(gè)發(fā)酵過(guò)程持續(xù)通入無(wú)菌空氣,控制通氣比為1~1.5,發(fā)酵溫度為51 °C,培養(yǎng)36h停止發(fā)酵,冷卻至室溫,待用;
深層液體發(fā)酵法制備高濃度木霉菌液:(I)富集培養(yǎng)木霉菌絲體種子液,具體步驟包括:配制加富綜合馬鈴薯培養(yǎng)液2200mL,平均分裝入到10個(gè)規(guī)格為500mL的三角瓶中并用棉塞、雙層紙、線繩封口包扎,采用121°C的高壓滅菌30min ;滅菌后待培養(yǎng)液冷卻到28°C左右用接種鏟接入3鏟木霉菌孢子,培養(yǎng)溫度為30°C,振蕩速度為160r/min,培養(yǎng)72h,三角瓶中有大量白色菌絲體且菌絲體體積分?jǐn)?shù)達(dá)60%,得到木霉菌絲體種子液;(2)深層液態(tài)發(fā)酵獲取高濃度木霉菌絲體液,具體步驟包括:配制加富綜合馬鈴薯培養(yǎng)液7