專利名稱：含硫雜環(huán)并萘酰亞胺類化合物及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一類新的含硫雜環(huán)并萘酰亞胺化合物及其用途。
背景技術(shù)：
芳環(huán)上無并雜環(huán)的單萘酰亞胺類化合物是一類有很好抗癌活性的化合物，其中活性最好的amonafide(N-(β-二甲基胺基乙基)-3-胺基-1，8-萘酰亞胺)和mitonafide(N-(β-二甲基胺基乙基)-3-硝基-1，8-萘酰亞胺)已經(jīng)進(jìn)入二期臨床試驗(yàn)(BranaM.F.，Santos A.，Roldan C.M.，et al.Eur.J.Med.Chem.Chim.Ther.，1981，16，207)。這類化合物能夠嵌插入DNA的堿基對(duì)之間，抑制DNA和RNA的合成，并能夠抑制拓?fù)洚悩?gòu)酶II，從而達(dá)到抑制腫瘤的目的。
如能在芳環(huán)上并入雜環(huán)及硫雜原子，增大芳香環(huán)平面和增強(qiáng)芳香環(huán)的平面剛性，提高其對(duì)DNA的嵌插能力，從而提高它的抗腫瘤活性。據(jù)此，發(fā)明人設(shè)計(jì)合成了一類新型的含硫雜環(huán)并萘酰亞胺化合物，試驗(yàn)證明其對(duì)體外腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)表現(xiàn)出很強(qiáng)的抑制能力。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所說含硫雜環(huán)并萘酰亞胺化合物包括五元(取代)或六元(取代)雜環(huán)，具有以下的結(jié)構(gòu)通式 或 式中R2為烷基、N，N-二甲基胺基取代的烷基或含氮飽和雜環(huán)取代的烷基；當(dāng)X＝Y(jié)＝N時(shí)，無取代基R1；
當(dāng)X＝C，Y＝N時(shí)，R1為(雜)芳環(huán)或取代(雜)芳環(huán)，芳環(huán)上取代基如烷基，烷氧基，羥基，氨基，烷基取代的胺基，鹵素，硝基，腈基，酰基，酰氧基，磺酸基和/或三氟甲基；當(dāng)X＝Y(jié)＝C時(shí)，R1為并(稠)(雜)芳環(huán)或取代并(稠)(雜)芳環(huán)，芳環(huán)上取代基如烷基，烷氧基，羥基，氨基，烷基取代的胺基，鹵素，硝基，腈基，?；?，酰氧基，磺酸基和/或三氟甲基；R3為并(稠)(雜)芳環(huán)或取代并(稠)(雜)芳環(huán)，芳環(huán)上取代基如烷基烷氧基，羥基，氨基，烷基取代的胺基，鹵素，硝基，腈基，酰基，酰氧基，磺酸基和/或三氟甲基。
本發(fā)明所述的化合物與現(xiàn)有的化合物相比，由于其在芳香環(huán)上并入雜環(huán)及或引入硫雜原子，提高其對(duì)DNA的嵌插能力，從而增強(qiáng)它對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制能力。
具體實(shí)施方法下面通過實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說明，其目的是為更好理解本發(fā)明的內(nèi)容，但所舉的實(shí)施例并不限制本發(fā)明的保護(hù)范圍實(shí)施例1N-(N’，N’-二甲基胺基乙基)-4H，6H-9-間硝基苯基-苯并[de]噻唑并[5，4-g]異喹啉-4，6-二酮(化合物1)的合成(1)Na2S·9H2O(0.009摩爾)與硫磺(0.018摩爾)在水中混合，加熱(不超過40℃)，直至硫磺全部溶解，得到多硫化鈉的水溶液.然后加入4-溴-3-硝基-1，8萘酐(0.0025摩爾)(4)(J.Soc.Dyers Colourists 1974，90，153)，回流8小時(shí)，降至室溫后，用冰浴冰卻約30分鐘，然后過濾得暗紅色濾液。在冰醋酸中加入間硝基苯甲醛0.00275摩爾，于50℃保溫并通氬氣30分鐘，然后緩慢滴加上述濾液?；亓鞣磻?yīng)4個(gè)小時(shí)，降至室溫反應(yīng)4個(gè)小時(shí)，反應(yīng)液倒入冰水中，析出沉淀，過濾，濾餅用氫氧化鈉溶液溶解，過濾，濾去不溶物后，濾液加鹽酸酸析，所得固體抽干放置，稱量固體為0.520克，產(chǎn)率為55％。
(2)稱取0.52克由步驟(1)合成的產(chǎn)物，加入無水乙醇中，再向加入0.239毫升N，N-二甲基乙二胺。升溫，回流，薄板層析跟蹤反應(yīng)，直至反應(yīng)完全，過濾，所得固體經(jīng)柱層析分離，得純品目標(biāo)產(chǎn)物(化合物1)0.17克，產(chǎn)率28％，熔點(diǎn)229-230℃(未校正)。
1H-NMR(d6-DMSO)δ(ppm)2.27(s，6H)，2.59(s，2H)，4.21(s，2H)，7.91(d，1H，J＝5.55)，8.00(m，1H)，8.44(m，1H)，8.53(m，2H)，8.62(m，1H)，8.80(m，1H)，8.89(m，1H)。
IR(KBr)2970，2800，2750，1700，1660，1525，1340，780cm-1。EI-MS；m/z(％)446.0(M+)(1.47)，388.0(1.05)，358.0(1.79)，342(1.10)，258.0(1.62)，157.0(1.98)，71.1(41.03)，58.1(100)。
元素分析C23H18N4O4S計(jì)算值C61.87，H4.06，N12.55；試驗(yàn)值C62.03，H4.31，N12.79。
實(shí)施例2N-(N’，N’-二甲基胺基乙基)-4H，6H-9-苯基-苯并[de]噻唑并[5，4-g]異喹啉-4，6-二酮(化合物2)的合成除用苯甲醛代替間硝基苯甲醛外，其它合成及提純方法同實(shí)施例1。所得產(chǎn)物(化合物2)，熔點(diǎn)220-221℃(未校正)。
1H-NMR(d6-DMSO)δ(ppm)2.25(s，8H)，4.20(s，2H)，7.66(d，J＝4.54Hz，3H)，8.03(t，J1＝7.79，J2＝7.57，1H)，8.21(m，2H)，8.56(d，J＝6.97，1H)，8.67(d，J＝7.49，1H)，8.95(s，1H)。
IR(KBr)2960，2800，1700，1660，1320，780cm-1。
HR-MS；C23H19N3O2S計(jì)算值401.1198；試驗(yàn)值401.1186；m/z(％)401(M+)(5.46)，343(5.73)，313(8.58)，285(9.97)，157(7.56)，71(41.4)，58(100)。
元素分析C23H19N3O2S計(jì)算值C68.81，H4.77，N10.47；試驗(yàn)值C68.54，H4.89，N10.51。
實(shí)施例3N-(N’，N’-二甲基胺基乙基)-4H，6H-9-對(duì)甲基苯基-苯并[de]噻唑并[5，4-g]異喹啉-4，6-二酮(化合物3)的合成除用對(duì)甲苯甲醛代替間硝基苯甲醛外，其它合成及提純方法同實(shí)施例1，所得產(chǎn)物(化合物3)，熔點(diǎn)202-203℃(未校正)。
1H-NMR(d6-DMSO)δ(ppm)2.31(s，6H)，2.43(s，5H)，4.22(s，2H)，7.46(d，J＝7.91Hz，2H)，8.03(t，J1＝7.81，J2＝7.83，1H)，8.10(d，J＝7.85Hz，2H)，8.57(d，J＝7.19，1H)，8.66(d，J＝8.11，1H)，8.94(s，1H)。
IR(KBr)2960，2820，1700，1660，1325，790cm-1。
EI-MSm/z(％)415.1(M+)(15.48)，371(3.51)，327(5.66)，299(6.45)，157(6.50)，71(71.0)，58(100)。
元素分析C24H21N3O2S計(jì)算值C69.38，H5.09，N10.11；試驗(yàn)值C69.30，H4.71，N10.25。
實(shí)施例4N-(N’，N’-二甲基胺基乙基)-4H，6H-9-對(duì)甲氧基苯基-苯并[de]噻唑并[5，4-g]異喹啉-4，6-二酮(化合物4)的合成除用對(duì)甲氧基苯甲醛代替間硝基苯甲醛外，其它合成及提純方法同實(shí)施例1，所得產(chǎn)物(化合物4)熔點(diǎn)216-217℃(未校正)。
1H-NMR(d6-DMSO)δ(ppm)2.27(s，6H)，2.61(s，2H)，3.89(s，3H)，4.21(t，2H，J1＝6.56，J2＝6.64)，7.19(d，J＝8.66Hz，2H)，8.01(t，J1＝7.77，J2＝7.77，1H)，8.15(d，J＝8.50Hz，2H)，8.55(d，J＝7.28，1H)，8.63(d，J＝8.18，1H)，8.91(s，1H)。IR(KBr)2970，2810，1700，1665，1330，780cm-1。
HR-MS；C24H21N3O3S計(jì)算值431.1304；試驗(yàn)值431.1311m/z(％)431.1311(M+)(3.39)，386.0719(2.49)，343.0533(1.70)，246.0349(1.69)，157.0111(1.75)，71.0732(73.67)，58.0622(100)。
元素分析C24H21N3O3S計(jì)算值C66.80，H4.91，N9.74；試驗(yàn)值C66.94，H4.73，N10.03。
實(shí)施例5N-(N’，N’-二甲基胺基乙基)-4H，6H-9-鄰氯苯基—苯并[de]噻唑并[5，4-g]異喹啉-4，6-二酮(化合物5)的合成除用鄰氯苯甲醛代替間硝基苯甲醛外，其它合成及提純方法同實(shí)施例1。所得產(chǎn)物(化合物5)熔點(diǎn)235-237℃(未校正)。
1H-NMR(d6-DMSO)δ(ppm)2.28(s，6H)，2.62(d，2H，J＝1.44)，4.19(t，2H，J1＝6.78，J2＝6.81)，7.63(m，2H)，7.76(m，1H)，7.99(t，J1＝7.74，J2＝7.75，1H)，8.38(dd，J1＝1.78，J2＝7.50，1H)，8.54(d，J＝7.32，1H)，8.70(d，J＝8.17，1H)，8.94(s，1H)。
IR(KBr)2980，2800，1700，1660，1340，780cm-1。
HR-MS；C23H18ClN3O2S計(jì)算值435.0808；試驗(yàn)值435.0792；m/z(％)435.0792(M+)(5.06)，377.0117(2.45)，347.0052(4.14)，319.0059(4.03)，259.0427(1.14)，157.0104(7.16)，71.0733(67.76)，58.0610(100)。
元素分析C23H18ClN3O2S計(jì)算值C63.37，H4.16，N9.64；試驗(yàn)值C63.42，H4.43，N9.35。
實(shí)施例6N-(N’，N’-二甲基胺基乙基)-4H，6H-9-鄰羥基苯基-苯并[de]噻唑并[5，4-g]異喹啉-4，6-二酮(化合物6)的合成除用鄰羥基苯甲醛代替間硝基苯甲醛外，其它合成及提純方法同實(shí)施例1。所得產(chǎn)物(化合物6)熔點(diǎn)240-241℃(未校正)。
1H-NMR(d6-DMSO)δ(ppm)2.27(s，6H)，2.60(s，2H)，4.21(t，2H，J1＝6.88，J2＝6.95，)，7.07(t，1H，J1＝7.39，J2＝7.32)，7.15(d，1H，J＝8.21)，7.47(m，1H)，7.99(t，J1＝7.76，J2＝7.81，1H)，8.30(dd，J1＝1.46，J2＝8.11，1H)，8.53(d，J＝7.25，1H，8.71(d，J＝8.10，1H)，8.94(s，1H)。
IR(KBr)2980，2800，2500(Br)，1700，1660，1330，780cm-1。
HR-MS；C23H19N3O3S計(jì)算值417.1147；試驗(yàn)值417.0342；m/z(％)417.0342(M+)(6.20)，372.9947(2.65)，358.9714(3.38)，300.9830(4.03)，259.0427(4.62)，156.9798(8.19)，71.0554(100)，58.0452(88.55)。
元素分析C23H19N3O3S計(jì)算值C66.17，H4.59，N10.07；試驗(yàn)值C66.34，H4.78，N9.89。
實(shí)施例75-(N’，N’-二甲基胺乙基)-4H，6H-苯并[de]-1，2，3，-噻二唑并[5，4-g]異喹啉-4，6-二酮(化合物7)的合成(1)4-芐巰基-3-硝基-1，8-萘酐4-溴-3-硝基-1，8-萘酐(0.0072摩爾)(4)于100毫升三口燒瓶中，加入45毫升DMF將其溶解，得黃色液體，再加入K2CO3(0.0036摩爾)，芐硫醇(0.0072摩爾)，80℃左右反應(yīng)8小時(shí)，TLC跟蹤至無原料，將反應(yīng)液倒入冰水中，加鹽鹽析，攪拌，析出黃色沉淀，抽濾，水洗，烘干得土黃色濾餅2.47克，產(chǎn)率93％，m.p.188～193℃(未校正)。
(2)4-芐巰基-3-氨基-1，8-萘酐100毫升三口燒瓶中加入4-芐巰基-3-硝基-1，8-萘酐(0.0068mol)，7.6克SnCl2·2H2O，31毫升濃鹽酸，90℃下攪拌反應(yīng)2小時(shí)，反應(yīng)中間補(bǔ)加10～20ml濃鹽酸，TLC跟蹤至原料消失，倒入冰水中，抽濾，烘干，得黃色固體2.85g，產(chǎn)率126％(可能產(chǎn)物中含有SnCl4)，m.p.171～185℃(未校正)。
(3)1，2，3-噻二唑并-1，8-萘二甲酸酐在250毫升三口燒瓶中加入4-芐巰基-3-氨基-1，8-萘酐(0.0044摩爾)，57毫升冰醋酸，7毫升水，8.5毫升濃鹽酸，室溫下攪拌30分鐘，得黃綠色液體，冰鹽浴冷卻至-10℃左右，滴加10毫升的NaNO2水溶液，劇烈攪拌，溶液變?yōu)榧t色，維持此溫度攪拌30分鐘，然后在冰水浴中反應(yīng)3.5小時(shí)，接著在15～20℃水浴中反應(yīng)3.5小時(shí)左右，TLC跟蹤顯示原料已消耗完，抽濾，濾餅用1％NaHCO3溶液洗至中性，抽干，得黃綠色固體0.97g，產(chǎn)率86％。
(4)5-(N’，N’-二甲基胺乙基)-4H，6H-苯并[de]-1，2，3，-噻二唑并[5，4-g]異喹啉-4，6-二酮的合成將0.28克1，2，3-噻二唑并-1，8-萘二甲酸酐放入50毫升單口燒瓶中，加入20毫升無水乙醇，加入0.189毫升N，N-二甲基乙二胺，回流2小時(shí)左右，TLC跟蹤至無原料，降溫，蒸干溶劑得固體，經(jīng)柱層析分離，得到淡黃色目標(biāo)化合物(化合物7)0.25克，產(chǎn)率70％。熔點(diǎn)178～179℃(未校正)。
1H NMR(d6-DMSO)δ(ppm)2.25(s，6H)，2.57(t，J1＝6.87Hz，J2＝6.97Hz，2H)，4.19(t，J1＝6.86Hz，J2＝6.99Hz，2H)，8.06(t，J1＝8.06Hz，J2＝7.72Hz，1H)，8.64(d，J＝7.44Hz，1H)，8.85(d，J＝8.04Hz，1H)，9.38(d，J＝1.52Hz，1H)IR(KBr壓片)2940，2870，1700，1660，1300cm-1HR-MSC16H14N4O2S計(jì)算值326.0837，試驗(yàn)值326.0788。MSm/z(％)326.0788(M+)(25.29)，254.0261(14.92)，209.9968(39.54)，182.0024(45.43)，155.9992(42.73)，71.0683(84.29)，58.0493(82.70)。
元素分析C16H14N4O2S計(jì)算值C58.88，H4.32，N17.17；實(shí)驗(yàn)值C58.69，H4.17，N17.05。
實(shí)施例85-(N’，N’-二甲基胺丙基)-4H，6H-苯并[de]-1，2，3，-噻二唑并[5，4-g]異喹啉-4，6-二酮(化合物8)的合成除用N，N-二甲基丙二胺替代N，N-二甲基乙二胺外，其它合成及提純方法同實(shí)施例7，得目標(biāo)化合物8，熔點(diǎn)101～102℃(未校正)。
1H NMR(CDCl3)δ(ppm)1.9(m，2H)，2.22(s，6H)，2.43(t，J1＝7.16，J2＝7.27，2H)，4.23(t，J1＝7.49，J2＝7.66，2H)，7.91(t，J1＝7.74，J2＝7.75，1H)，8.4(t，J1＝7.86，J2＝0.86，1H)，8.73(t，J1＝7.16，J2＝0.81，1H)，9.58(s，1H)。
IR(KBr)2960，2870，1710，1670，1300cm-1。
HR-MS(m/z，％)C17H16N4O2S計(jì)算值340.0994；實(shí)驗(yàn)值340.0991。MSm/z(％)340.0991(M+)(10.41)，240.0145(2.96)，210.0064(10.85)，157.0130(5.39)，84.0832(71.88)，58.0655(100)。
元素分析C17H16N4O2S計(jì)算值C59.98，H4.74，N16.46；實(shí)驗(yàn)值C59.74，H4.48，N16.65。
實(shí)施例95-丁基-4H，6H-苯并[de]-1，2，3，-噻二唑并[5，4-g]異喹啉-4，6-二酮(化合物9)的合成除用正丁胺替代N，N-二甲基乙二胺外，其它合成及提純方法同實(shí)施例7，得目標(biāo)化合物9，其熔點(diǎn)177～179℃(未校正)。
1H NMR(d6-DMSO)δ(ppm)0.94(t，J1＝7.33，J2＝7.39，3H)，1.38(m，2H)，1.64(m，2H)，4.05(t，J1＝7.44，J2＝7.54，2H)，8.03(t，J1＝7.78，J2＝7.75，1H)，8.62(d，J＝7.11，1H)，8.82(t，J1＝0.70，J2＝7.97，1H)，9.32(s，1H)。
IR(KBr)2950，2870，1710，1660，1300cm-1。
HR-MSC16H13N3O2S計(jì)算值311.0728；實(shí)驗(yàn)值311.0728。MSm/z(％)311.0728(M+)(17.00)，283.0705(100.00)，266.0659(27.86)，241.0200(28.75)，227.0069(89.84)，157.0128(23.66)。
元素分析C16H13N3O2S計(jì)算值C61.72，H4.21，N13.50；實(shí)驗(yàn)值C61.59，H4.41，N13.62。
實(shí)施例105-(2’-哌嗪基乙基)-4H，6H-苯并[de]-1，2，3，-噻二唑并[5，4-g]異喹啉-4，6-二酮(化合物10)的合成除用1-(2-氨基乙基)哌嗪替代N，N-二甲基乙二胺外，其它合成及提純方法同實(shí)施例7，得化合物10，其熔點(diǎn)145～146℃(未校正)。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm)2.54(s，4H)，2.67(t，J1＝6.95，J2＝6.94，2H)，2.81(t，J1＝4.76，J2＝4.79，4H)，4.34(t，J1＝6.93，J2＝7.01，2H)，7.92(t，J1＝7.8，J2＝7.840，1H)，8.41(d，J＝7.96，1H)，8.73(d，J＝7.35，1H)，9.58(s，1H)。
IR(KBr)3310，1710，1670，1300cm-1。
HR-MSC18H17N5O2S計(jì)算值367.1103；實(shí)驗(yàn)值367.1095。MS(m/z，％)367.1095(M+，5.33)，325.0751(6.87)，282.0327(4.27)，254.0289(8.85)，182.0091(4.53)，157.0128(2.36)99.0940(100)。
元素分析C18H17N5O2S計(jì)算值C58.84，H4.66，N19.06；實(shí)驗(yàn)值C58.75，H4.92，N18.86。
實(shí)施例11N-(N’，N’-二甲基胺乙基)苯并[b]噻吩并[2，1-c]萘酰亞胺(化合物11)的合成將0.1123克苯并[b]噻吩并[2，1-c]萘二甲酸酐(Tetrahedron Lett.2002，43，2995-2998)放入50毫升單口燒瓶，加入20毫升無水乙醇，加入0.05毫升N，N-二甲基乙二胺，回流2小時(shí)左右，TLC跟蹤至無原料，降溫，過濾得產(chǎn)品(化合物11)0.1257克，產(chǎn)率91％。熔點(diǎn)171～173℃(未校正)。
1H NMR(d6-DMSO)δ(ppm)2.3(s，6H)，2.6(m，2H，)，4.21(t，J1＝6.55Hz，J2＝6.62Hz，2H)，7.65(m，2H)，7.96(t，J1＝7.74Hz，J2＝7.82Hz，1H)，8.23(m，1H)，8.64(d，J＝7.27Hz，1H)，8.66(m，2H)，9.28(s，1H)IR(KBr壓片)2940，2870，1700，1660，1330cm-1HR-MSC22H18N2O2S計(jì)算值374.1089，實(shí)驗(yàn)值374.1081。MSm/z(％)374.1081(M+)(21.50)，330.0558(6.48)，260.0351(4.55)，232.0327(14.95)，71.0696(47.90)，58.0623(100)元素分析C22H18N2O2S計(jì)算值C70.57，H4.85，N7.48；實(shí)驗(yàn)值C70.41，H4.97，N7.68。
實(shí)施例12N-(N’，N’-二甲基胺丙基)苯并[b]噻吩并[2，1-c]萘酰亞胺(化合物12)的合成除用N，N-二甲基丙二胺替代N，N-二甲基乙二胺外，其它合成及分離方法同實(shí)施例11，的目標(biāo)化合物12，熔點(diǎn)168-170℃(未校正)。
1H NMR(d6-DMSO)δ(ppm)1.95(m，2H)，2.24(s，6H)，2.45(m，2H)，4.2(t，J1＝7.38，J2＝7.69，2H)，7.54(m，2H)，7.81(dd，J1＝7.86，J2＝7.82，1H)，7.96(m，1H)，8.33(m，1H)，8.44(d，J＝7.99，1H)，8.59(d，J＝6.96，1H)，9.35(s，1H)。IR(KBr壓片)2940，2880，1700，1665，1330cm-1。
HR-MSC23H20N2O2S計(jì)算值388.1246，實(shí)驗(yàn)值388.1253。MSm/z(％)388.1253(M+)(20.62)，330.0517(7.80)，317.0350(10.03)，303.0277(34.29)，277.0735(50.50)，246.0314(20.90)，84.0779(100)，58.0644(69.84)。
元素分析C23H20N2O2S計(jì)算值C71.11，H5.19，N7.21；實(shí)驗(yàn)值C71.01，H5.45，N7.46。
實(shí)施例13N-(2’-哌嗪基乙基)苯并[b]噻吩并[2，1-c]萘酰亞胺(化合物13)的合成除用1-(2-氨基乙基)哌嗪替代N，N-二甲基乙二胺外，其它合成及分離方法同實(shí)施例11，得化合物13，熔點(diǎn)226-228℃(未校正)。
1H NMR(d6-DMSO)δ(ppm)2.6(m，6H)，3.34(s，4H)，4.2(t，J1＝6.47，J2＝6.51，2H)，7.65(m，2H)，7.96(t，J1＝7.75，J2＝7.82，1H)，8.2(m，1H)，8.54(d，J＝7.27，1H)，8.64(m，2H)，9.25(s，1H)。
IR(KBr壓片)2950，2820，1700，1670，1330cm-1。
HR-MSC24H21N3O2S計(jì)算值415.1354，實(shí)驗(yàn)值415.1349。MSm/z(％)415.1349(M+)(8.30)，373.1020(81.83)，330.0602(44.08)，304.0417(17.40)，286.0309(19.16)，259.0407(16.70)，99.0890(100.0)，70.0631(8.10)。
元素分析C24H21N3O2S計(jì)算值C69.38，H5.09，N10.11；實(shí)驗(yàn)值C69.49，H5.37，N10.32。
實(shí)施例14N-丁基苯并[b]噻吩并[2，1-c]萘酰亞胺(化合物14)的合成除用正丁胺替代N，N-二甲基乙二胺外，其它合成及分離方法同實(shí)施例11，得化合物14，熔點(diǎn)226-228℃(未校正)。
1H NMR(d6-DMSO)δ(ppm)0.94(t，J1＝7.36，J2＝7.36，3H)，1.43(m，2H)，1.71(m，2H)，4.18(t，J1＝7.57，J2＝7.62，2H)，7.54(m，2H)，7.79(t，J1＝7.78，J2＝7.66，1H)，7.95(m，1H)，8.31(m，1H)，8.42(m，1H)，8.59(dd，J1＝6.43，J2＝0.89，1H)9.22(s，1H)。
IR(KBr壓片)2990，2830，1700，1650，1330cm-1。
HR-MSC22H17NO2S計(jì)算值359.0980，實(shí)驗(yàn)值359.0992。MSm/z(％)359.0992(M+)(85.25)，342.1040(45.10)，317.0563(65.21)，303.0304(100.0)，286.0356(18.72)，259.0480(19.09)，232.0359(16.20)。
元素分析C22H17NO2S計(jì)算值C73.51，H4.77，N3.90；實(shí)驗(yàn)值C73.46，H5.01，N3.18。
實(shí)施例15N-(N’，N’-二甲基胺乙基)苯并[k，l]噻噸-3，4-二甲酰亞胺(化合物15)的合成將0.3克苯并[k，l]噻噸-3，4-二甲酸酐(Tetrahedron Lett.2002，43，2995-2998)放入50毫升單口燒瓶中，加入20毫升無水乙醇，加入0.162毫升N，N-二甲基乙二胺，回流2小時(shí)，TLC跟蹤至無原料，降溫，蒸干溶劑得固體，經(jīng)柱層析分離(洗脫液為三氯甲烷∶丙酮＝1∶1)，得到目標(biāo)化合物(化合物15)0.314克，產(chǎn)率85％。熔點(diǎn)212-213℃(未校正)。
1H NMR(CDCl3)δ(ppm)1.27(m，8H)，4.42(t，J1＝6.78Hz，J2＝6.65Hz，2H)，7.39(m，3H)，7.48(d，J＝7.99，1H)，8.18(m，2H)，8.40(d，J＝7.98Hz，1H)，8.59(d，J＝8.12，1H)IR(KBr壓片)2950，2870，1695，1660，1560，1380cm-1MSm/z(％)374(M+)(1.62)，304(23.30)，303(29.64)，71(29.58)，58(100)，56(9.81)，43(12.49)元素分析C22H18N2O2S計(jì)算值C70.57，H4.85，N7.48，S8.56；實(shí)驗(yàn)值C70.46，H4.98，N7.35，S8.83。
實(shí)施例16N-(2’-哌嗪基乙基)苯并[k，l]噻噸-3，4-二甲酰亞胺(化合物16)的合成除用1-(2-氨基乙基)哌嗪替代N，N-二甲基乙二胺外，其它合成及提純方法同實(shí)施例15，得化合物16，熔點(diǎn)286-287℃(未校正)。
1H NMR(d6-DMSO)δ(ppm)2.80(t，J1＝5.96，J2＝6.00，2H)，2.89(s，4H)，3.14(s，4H)4.32(t，J1＝6.08，J2＝5.88，2H)，7.41(m，3H)，7.54(d，J＝8.06，1H)，8.24(m，2H)，8.42(d，J＝8.01，1H)，8.62(d，J＝8.18，1H)。
IR(KBr壓片)3410，2970，2840，1690，1640，1330cm-1。
MSm/z(％)415(M+)(5.45)，373(39.42)，330(35.98)，303(27.95)，99(100.0)，70(27.95)，56(42.09)，42(21.07)。
元素分析C24H21N3O2S計(jì)算值C69.38，H5.09，N10.11；實(shí)驗(yàn)值C69.56，H5.23，N9.96。
體外抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)活性測(cè)定分別用四氮唑鹽(microculture tetrozolium，MTT)還原法對(duì)P388小鼠白血病細(xì)胞和磺酰羅丹明B(Sulforhodamine B，SRB)蛋白染色法對(duì)A-549人肺腺癌細(xì)胞進(jìn)行抑制試驗(yàn)。
四氮唑鹽(MTT)還原法的具體操作是按不同腫瘤生長(zhǎng)速率，將一定數(shù)量處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的腫瘤細(xì)胞90μl/孔接種于96孔微量培養(yǎng)板內(nèi)，培養(yǎng)24h后加入藥液10μl/孔，對(duì)每個(gè)細(xì)胞株，每個(gè)濃度均為三個(gè)復(fù)孔。另設(shè)無細(xì)胞調(diào)零孔、如果藥物有顏色要做相應(yīng)藥物濃度無細(xì)胞調(diào)零孔。腫瘤細(xì)胞在37℃、5％CO2條件下培養(yǎng)48小時(shí)后，加MTT(Sigma)液5mg/ml用生理鹽水配制20μl/孔；繼續(xù)培養(yǎng)4小時(shí)后，加入三聯(lián)液(10％SDS-5％異丁醇-0.01mol/lHCl)50μl/孔，于CO2培養(yǎng)箱中過夜。然后用酶標(biāo)儀測(cè)OD570值。按下列公式計(jì)算被測(cè)物對(duì)癌細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制率腫瘤抑制率＝(對(duì)照組OD值-治療組OD值)/對(duì)照組OD值×100％。
磺酰羅丹明B(Sulforhodamine B，SRB)蛋白染色法的具體操作如下根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)速率，將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的腫瘤細(xì)胞以90μl/孔接種于96孔培養(yǎng)板，貼壁生長(zhǎng)24小時(shí)再加藥10μl/孔。每個(gè)濃度設(shè)三復(fù)孔。并設(shè)相應(yīng)濃度的生理鹽水溶媒對(duì)照及無細(xì)胞調(diào)零孔。腫瘤細(xì)胞在37℃、5％CO2條件下培養(yǎng)72小時(shí)，然后傾去培養(yǎng)液，用10％冷TCA固定細(xì)胞，4℃放置1小時(shí)后用蒸餾水洗滌5次，空氣中自然干燥。然后加入由1％冰醋酸配制的SRB(Sigma)4mg/ml溶液100μl/孔，室溫中染色15分鐘，去上清液，用1％醋酸洗滌5次，空氣干燥。最后加入150μl/孔的Tris溶液，酶標(biāo)儀520nm波長(zhǎng)下測(cè)定A值。按下列公式計(jì)算被測(cè)物對(duì)癌細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制率腫瘤抑制率＝(A540對(duì)照孔-A540 給藥孔)/A540對(duì)照孔×100％。
篩選方法磺酰羅丹明B(Sulforhodamine B，SRB)蛋白染色法四氮唑鹽(microculture tetrozolium，MTT)還原法*細(xì)胞株P(guān)388小鼠白血病*MOLT-4人白血病*A-549人肺腺癌SGC-7901人胃癌BEL-7402人肝癌WI-38人胚胎成纖維細(xì)胞作用時(shí)間48h*-72h對(duì)化合物1-16以及N-(N’，N’-二甲基胺丙基)苯并[k，l]噻噸-3，4-二甲酰亞胺(化合物17)、N-丁基苯并[k，l]噻噸-3，4-二甲酰亞胺(化合物18)的體外生測(cè)結(jié)果如下
化合物對(duì)A-549生長(zhǎng)的抑制率％
化合物對(duì)MOLt-4的生長(zhǎng)抑制率％ 化合物對(duì)SGC-7901生長(zhǎng)的抑制率％ 化合物對(duì)BEL-7402生長(zhǎng)的抑制率％
化合物對(duì)P388生長(zhǎng)的抑制率％
以上化合物具有廣泛的抗腫瘤活性，尤其是對(duì)人肺癌、胃癌、肝癌和白血病等多種不同組織來源的腫瘤細(xì)胞的增殖顯示出明顯的抑制活性，且作用效果呈明顯的量效關(guān)系。
權(quán)利要求
1.一種含硫雜環(huán)并萘酰亞胺類化合物，其特征在于，所述的化合物具有以下的結(jié)構(gòu)通式 或 式中R2為烷基、N，N-二甲基胺基取代的烷基或含氮飽和雜環(huán)取代的烷基；當(dāng)X＝Y(jié)＝N時(shí)，無取代基R1；當(dāng)X＝C，Y＝N時(shí)，R1為(雜)芳環(huán)或取代(雜)芳環(huán)，芳環(huán)上取代基如烷基，烷氧基，羥基，氨基，烷基取代的胺基，鹵素，硝基，腈基，?；?，酰氧基，磺酸基和/或三氟甲基；當(dāng)X＝Y(jié)＝C時(shí)，R1為并(稠)(雜)芳環(huán)或取代并(稠)(雜)芳環(huán)，芳環(huán)上取代基如烷基，烷氧基，羥基，氨基，烷基取代的胺基，鹵素，硝基，腈基，?；?，酰氧基，磺酸基和/或三氟甲基；R3為并(稠)(雜)芳環(huán)或取代并(稠)(雜)芳環(huán)，芳環(huán)上取代基如烷基烷氧基，羥基，氨基，烷基取代的胺基，鹵素，硝基，腈基，?；Ｑ趸?，磺酸基和/或三氟甲基。
2.如權(quán)利要求1所述的化合物，其特征在于，其中X，Y均為氮。
3.如權(quán)利要求2所述的化合物，其特征在于，R2為烷基、N，N-二甲基胺基取代的烷基或2’-哌嗪基乙基。
4.如權(quán)利要求1所述的化合物，其特征在于，其中X為碳，Y為氮。
5.如權(quán)利要求4所述的化合物，其特征在于，R1為苯、甲苯、硝基苯、甲氧基苯、氯苯或鄰羥基苯；R2為烷基、N，N-二甲基胺基取代的烷基或2’-哌嗪基乙基。
6.如權(quán)利要求1所述的化合物，其特征在于，其中X，Y均為碳。
7.如權(quán)利要求6所述的化合物，其特征在于，R1為并苯，R2為烷基、N，N-二甲基胺基取代的烷基或2’-哌嗪基乙基。
8.權(quán)利要求1-7所述的任意一種化合物具有抑制體外腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)功能。
全文摘要
本發(fā)明公開一類新的含硫雜環(huán)并萘酰亞胺化合物的結(jié)構(gòu)及其用途，本發(fā)明所說的化合物的特征是萘酰亞胺的共軛平面通過并入的五元(或六元)芳雜環(huán)得以擴(kuò)大，并引入含硫雜原子。這些化合物具有廣泛的抗腫瘤活性，尤其是對(duì)人肺癌、胃癌、肝癌和白血病等多種不同組織來源的腫瘤細(xì)胞的增殖顯示出明顯的抑制活性，且作用效果呈明顯的量效關(guān)系。
文檔編號(hào)C07D221/06GK1542011SQ03116709
公開日2004年11月3日 申請(qǐng)日期2003年4月30日 優(yōu)先權(quán)日2003年4月30日
發(fā)明者錢旭紅, 李永剛, 徐玉芳, 丁健, 林莉萍, 曲寶源 申請(qǐng)人:華東理工大學(xué), 中國(guó)科學(xué)院上海藥物研究所, 大連理工大學(xué)