專利名稱:利用粉紅柱狀的乳節(jié)藻生產(chǎn)高吸光度藻紅素的裝置的制作方法
技術(shù)領域:
本實用新型是有關于用粉紅柱狀的乳節(jié)藻(Galaxauraoblongata)生產(chǎn)具有高吸光度(OD)比值藻紅素的裝置。利用粉紅柱狀的乳節(jié)藻生活史中具有的有性生殖、無性生殖與營養(yǎng)繁殖三個世代交替及果孢子絲狀體階段不含各種膠類的特征下,在控制的光線、溫度及營養(yǎng)條件下,延續(xù)其絲狀體階段,并進一步以其為材料,萃取高吸光度比值藻紅素。
目前市場已開發(fā)并應用的有藻藍素(phycocyanin)與藻紅素(phycoerythrin),其中,藻藍素生產(chǎn)的原料來源多為可予大量繁殖培養(yǎng)的藍綠藻,如螺旋藻(Spirulina)與銅銹微囊藻(Microcystis),且其培養(yǎng)與生產(chǎn)裝置多享有專利。
而藻紅素則因原料的缺乏,或因原物料不利于色素生產(chǎn),而存在產(chǎn)量少及價格昂貴的缺陷,對全球每年數(shù)萬磅食用紅色色素的需求,必須開發(fā)一種天然、安全、穩(wěn)定又具特殊熒光釋出的紅色色素,預估大量生產(chǎn)后,將使價格下降,更會擴大其應用范圍與市場供給。
目前藻紅色素蛋白大部分是分離自紅藻的大型葉狀體,如紫菜(Porphyra)或仙菜藻(Ceramium)等,少部分則萃取自可大量控制培養(yǎng)的紫球藻(Porphyridium)。其主要問題在于1、目前雖有野生大量紅藻資源及栽培的紫菜作為藻紅素原料,但因多數(shù)紅藻含豐富膠質(zhì)物(洋菜膠、鹿角菜膠、紅藻膠),導致色素的萃出不易,尤其是干燥后的藻類原料更是如此,再加上野生藻種的原料在品和產(chǎn)量上均有季節(jié)性差異,為人力所不易掌握。
2、目前紫球藻的培養(yǎng)于收集細胞時,亦有顯著的困難,因為單細胞藻體的收集一向是耗能而耗時的操作,影響生產(chǎn)成本甚大,而藻細胞于培養(yǎng)時所分泌的可溶性多醣類,除了阻礙細胞的收集外,亦影響到色素的抽取。
為了解決上述的問題,美國專利5,358,858提出了一種由頭發(fā)菜(Bangiaat ropurpurea)及狹葉紫菜(Porphyraangusta)絲狀體生產(chǎn)藻紅素的方法,利用頭發(fā)菜及狹葉紫菜生活史中的絲狀孢子體階段不含各種膠類的特征下,利用控制的光線、溫度及營養(yǎng)條件下,延續(xù)其絲狀體階段,并進一步以其為原料,萃取藻紅素,其步驟如下1、絲狀體的培養(yǎng)與繁殖,從野外采集成熟的頭發(fā)菜或狹葉紫菜配子體,以滅菌海水及毛筆清洗藻體干凈,稍陰干后投入含改良過的SWM-III(如表一所示)培養(yǎng)皿中,培養(yǎng)皿內(nèi)底部鋪有蓋玻片,待孢子釋放并附著于蓋玻片后,在室溫下、1000-4000lux的照度及每日10-16小時照光的培養(yǎng)箱中發(fā)芽成長,最后發(fā)育呈分歧多枝的絲狀孢子體。
表一SWM-III的組成NaNO38.5g/100ml 取2mlNa2HPO40.595g/100ml 取2mlNa2EDTA 0.5g/100ml 取2ml0.01625g/100ml 取2mlFeCl3(或FeCl3·7H2O) 0.02885g/100ml 取2ml*1PI-metal 取2ml*2S-3Vitamins 取2mlSoilextract 取50mlTris(10cc/l)取500mg
Livere xtract取10mg海水pH=7、5 1升(調(diào)pH時先以濃HCl調(diào)至pH≤7,再以適當濃度的NaOH調(diào)至pH7、5,如此可免于消毒時產(chǎn)生白色沉淀)其中*1PI-metal為H3BO312.368gMnCl21.385gZnCl20.109g蒸餾水 2升CoCl2·6H2O4.479mgCuCl2·2H2O0.034mg其中*2S-3Vitamins為ThiaminHCl 0.5gCapantothenate 0.1gNicotinicacid0.1gP-aminobenzoicacid 10mgBiotin 1mg蒸餾水 2升Inositol 5gFolicacid2mgThymine 3mgB121mg(所有的Stock溶液均存于褐色瓶中,冷藏保存)2、絲狀體刮下后移至含培養(yǎng)液的三角瓶,在上述生長環(huán)境條件下培養(yǎng),育成絲狀體的聚集團。打碎絲狀體的聚集團,移至更大生長的量瓶繼續(xù)發(fā)育成更多的聚集團,并因此漸次擴大培養(yǎng)的體積,在較大體積的照光培養(yǎng)槽中,應予打氣(每分鐘300毫升干凈空氣)大量繁殖培養(yǎng)。通過100-400網(wǎng)目的網(wǎng)布過濾,濾除的培養(yǎng)液可回收再使用,對后續(xù)的培養(yǎng)并無妨礙。
3、藻體收獲后,因絲狀體結(jié)構(gòu)可經(jīng)真空或溫風迅速干燥,再研磨成粉后,以水或磷酸鹽溶液予以充分攪拌萃取、離心,可得澄清的深紅藻蛋白溶液;藻色素的濃縮與純化,可通過20%硫酸銨溶液去除部分雜質(zhì)蛋白沉淀,再于溶液中經(jīng)60-65%硫酸銨溶液沉淀出色素蛋白,為OD565/OD280=1.4-1.6的粗紅色色素,為食品級、化妝品可用的色素。
4、將沉淀的蛋白進一步通過膠濾層析純化(gelfiltration),使用Sephadex G200樹酯分離,第一道程序可得OD比為3.3-3.7的藻紅素產(chǎn)品,再次重復即可得OD比為5.1-5.2的藻紅素,再經(jīng)膠體電泳法(SDS)電泳所得的結(jié)果顯示純度約99%,可作為免疫檢驗用試劑。
上述的方法雖然可以避免傳統(tǒng)紫菜、仙菜藻萃取色素法需以加熱及分離膠值的復雜手續(xù),或是紫球藻等單細胞植物萃取法,由于其體積小,導致收集的困難與其分泌的多醣類影響色素的抽取的問題,其主要缺陷在于但是頭發(fā)菜及狹葉紫菜絲狀體直接形成的深紅藻蛋白溶液,其OD565/OD280只有1.4-1.6,仍需進行藻色素的濃縮與純化,來獲取高OD值的藻紅素,造成制程復雜及成本較高。因此我們需要開發(fā)其它藻種的絲狀體,使其初次形成的深紅藻蛋白溶液就具有高OD值的藻紅素。
鑒于上述的背景技術(shù)中,傳統(tǒng)利用頭發(fā)菜及狹葉紫菜絲狀體直接形成的深紅藻蛋白溶液,其吸光度比值偏低的問題。本實用新型人創(chuàng)造出利用粉紅柱狀的乳節(jié)藻生產(chǎn)藻紅素的裝置,避免上述情形產(chǎn)生。
本實用新型的又一個目的是提供一種用粉紅柱狀的乳節(jié)藻生產(chǎn)高吸光度藻紅素的裝置,通過其可萃取具有高吸光度比值藻紅素,達到減少藻紅素純化步驟的目的。
本實用新型的目的是這樣實現(xiàn)的一種利用粉紅柱狀的乳節(jié)藻生產(chǎn)高吸光度藻紅素的裝置,它是使用生活史具有有性生殖、無性生殖與營養(yǎng)繁殖三個世代交替的藻種的果孢子的絲狀體生產(chǎn)高吸光度比值的藻紅素的裝置,其特征是它包含有第一培養(yǎng)槽、第二培養(yǎng)槽、收集器、研磨器、攪拌器及沉淀器;具有培養(yǎng)液的第一培養(yǎng)槽培養(yǎng)粉紅柱狀的乳節(jié)藻含成熟果孢子囊的配子體,并得到果孢子;該第二培養(yǎng)槽臨近該第一培養(yǎng)槽,具有500-6000lux的照度、明暗比為10∶14以上,及15-30℃下的環(huán)境,培養(yǎng)該果孢子成長為絲狀體;收集該絲狀體的收集器置于該第二培養(yǎng)槽中;研磨該絲狀體的研磨器臨近該收集器;該攪拌器臨近該研磨器,加入酸堿緩沖液與研磨后的該絲狀體,得到一深色色素蛋白溶液;該沉淀器臨近該攪拌器,用以從該深色色素蛋白溶液沉淀出藻紅素。
該粉紅柱狀的乳節(jié)藻從其果孢子絲狀體中萃取的藻紅素,經(jīng)液相層析儀所得出的565nm的層析光譜圖。該培養(yǎng)液為SWM-III培養(yǎng)液。該SWM-III培養(yǎng)液為去除有機物的SWM-III培養(yǎng)液。培養(yǎng)該果孢子絲狀體的方法為旋浮培養(yǎng)法。該培養(yǎng)的環(huán)境為20℃,2000lux的照度與明暗比為12∶12。收集該絲狀體的收集器是網(wǎng)布。該網(wǎng)布為20-400網(wǎng)目的網(wǎng)布。該研磨器更包含有干燥器。該干燥器為真空干燥器。該干燥器為溫風干燥器。沉淀該藻紅素的沉淀器為鹽析裝置。該鹽析裝置中設有60-65%的硫酸銨溶液。它還包含有純化器,該純化器為膠濾層析裝置。該膠濾層析裝置為使用Sephadex G200的膠濾層析裝置。它還包含有純化器,該純化器為超過濾裝置。
下面結(jié)合較佳實施例和附圖詳細說明。
圖1是利用高效能液相層析儀(HPLC)得出的藻紅素UV吸收及熒光發(fā)散層析光譜圖;圖2是頭發(fā)菜生活史的示意圖;圖3是狹葉紫菜生活史的示意圖;圖4是海面生活史的示意圖;圖5-圖7是傳統(tǒng)的頭發(fā)菜萃取出的純質(zhì)藻紅素經(jīng)高效能液相層析儀所得出的280nm、565nm、615nm的層析光譜圖。
圖8-
圖10是傳統(tǒng)的狹葉紫菜萃取出的純質(zhì)藻紅素經(jīng)高效能液相層析儀所得出的280nm、565nm、615nm的層析光譜圖。
圖11-
圖13是本實用新型的粉紅柱狀的乳節(jié)藻萃取出的純質(zhì)藻紅素經(jīng)高效能液相層析儀所得出的280nm、565nm、615nm的層析光譜圖。
圖14-
圖18是本實用新型利用粉紅柱狀的乳節(jié)藻生產(chǎn)高吸光度藻紅素的裝置及其使用方法示意圖。
眾所周知,藻膽蛋白是來自藻類體內(nèi)的一種水溶性熒光蛋白色素。因其具有特殊的熒光性質(zhì),目前主要被廣泛的運用于流動細胞儀的熒光試劑上。各種藻膽蛋白中,藻紅素是其中的一種,亦是天然物中熒光強度最高的一種,因此有許多熒光檢測裝置采用此類色素。
圖1為藻紅素利用高效能液相層析儀(HPLC)得出的UV吸收及熒光發(fā)散層析光譜圖,其層析條件如下所述HPLC columnHYDROCELL DEAE NP10Column size50*4.6mmBuffer A10mMK-PBS pH6.0
Buffer B10mMk-PBS,0.5M NaCl pH6.0Gradient0%Buffer B→12min→50%Buffer BDetection565nmFlow rate1ml/min而高效能液相層析儀主要由高精密度高壓泵體、分離管、偵測儀和記錄器所組成。
參閱圖2所示,觀察頭發(fā)菜生活史,有性生殖為產(chǎn)生造果器6(即雌性配偶體5)與精子囊2(即雄性配偶體1)釋放的精子3受精4之后,在果孢子囊7會發(fā)育成果孢子8,里面的果孢子8成熟后,即會散出,變成絲狀孢子體9,在側(cè)腰狀色素體b作用下,成長為胞子體10和殼胞子囊11,其放出殼胞子12在單胞子形成部位15進一步成長為幼體13、單列藻體14,在星狀色素體a作用下,形成單胞子16,單胞子16進一步形成直立體(配偶體)18、多列藻體17成長為雄性配偶體1。
無性生殖則是由單孢子16直接發(fā)育成萌發(fā)成幼體13、單列藻體14及小型藻體,等到一定時候又可產(chǎn)生單孢子16,單孢子16又萌發(fā)成單列藻體14及小型藻體,如此循環(huán)一直到適當?shù)沫h(huán)境條件下,單列藻體14及小型藻體所產(chǎn)生的單孢子16就可萌發(fā)成大型藻體17。同時,單列藻體14及小型藻體也能轉(zhuǎn)變成大型藻體17,再進入有性生殖世代。
參閱圖3所示,觀察狹葉紫菜生活史中,由于其與圖2的頭發(fā)菜生活史大體相同,故不詳述。我們可以得知上述兩種藻類的生活史一般是有性生殖及無性生殖兩個世代交替,傳統(tǒng)技術(shù)就是利用絲狀孢子體階段不含各種膠類的特征,在控制的光線、溫度及營養(yǎng)條件下,延續(xù)其絲狀體階段,并進一步以其為原料,萃取藻紅素。
參閱圖4所示,觀察海面(Nemalion)生活史,由于其與圖2的頭發(fā)菜生活史大體相同,故不詳述。藻類的生活史除了是以有性生殖及無性生殖兩個世代交替外,另外部分藻類還多出一個營養(yǎng)繁殖世代,即產(chǎn)生四分孢子的孢子體(即四分孢子體),其過程為造果器受精后形成果孢子體(carposporephyte)、果孢子(carpospore)、四分孢子體(tetrasporophyte)、四分孢子囊(tetrasporangium)、最后是四分孢子(tetraspore),其中果孢子與四分孢子都會萌發(fā)成絲狀體,但此兩種絲狀體的特性不同。
本實用新型就是利用具有營養(yǎng)繁殖世代的粉紅柱狀的乳節(jié)藻,其果孢子絲狀體階段不含各種膠類的特征,在控制的光線、溫度及營養(yǎng)條件下,延續(xù)其絲狀體階段,并進一步以其為原料,萃取出具有高OD值的藻紅素。
參閱
圖14-
圖18所示,本實用新型的裝置及其使用方法如下1、絲狀體的培養(yǎng)與繁殖,將成熟的粉紅柱狀的乳節(jié)藻含成熟果孢子囊的配子體,以滅菌海水及毛筆清洗藻體干凈,稍陰干后,投入不含有機物的SWM-III培養(yǎng)液102的第一培養(yǎng)器100中,第一培養(yǎng)器100內(nèi)底部鋪有玻璃片103,待果孢子101(carpospore)釋放并附著于玻璃片103后,在15-30℃下,500-60001ux的照度,明暗比為10∶14以上,及每日10以上照光的第一培養(yǎng)器100中發(fā)芽成長,最后發(fā)育呈分歧多枝的絲狀體,如
圖14所示。
2、絲狀體201刮下后,移至含培養(yǎng)液的大型培養(yǎng)槽200,在上述相同生長環(huán)境條件下培養(yǎng),可育成絲狀體的疏松小聚集團,并因此漸次擴大培養(yǎng)的體積,在較大體積的照光培養(yǎng)槽中,應予打氣器202打氣,使該小聚集團懸浮于培養(yǎng)液204中(稱為旋浮培養(yǎng))大量繁殖培養(yǎng)。通過20-400網(wǎng)目的網(wǎng)布203過濾,濾除的培養(yǎng)液可回收再使用,對后續(xù)的培養(yǎng)并無妨礙,如
圖15所示。
3、藻體303收獲后,因絲狀體結(jié)構(gòu)可經(jīng)真空器或溫風器301迅速干燥,再經(jīng)自動磨粉機302研磨成粉后,取2.4克重的粉末,加入70毫升、10mm的磷酸鉀溶液或其它酸堿緩沖液304,用攪拌器303予以充分攪拌,以維持溶液pH值在5-10之間,予以充分攪拌、再以6000rpm、10min、4℃的狀態(tài)下使用離心機305,可得澄清的深紅藻蛋白溶液306。藻色素的濃縮與純化,可通過20%硫酸銨溶液307去除部分雜質(zhì)蛋白沉淀308,再于溶液中經(jīng)60%-65%硫酸銨溶液309沉淀出色素蛋白,其為OD565/OD280=2.66的粗紅色色素310,其為食品級或化妝品可用的色素。上述澄清的深紅藻蛋白溶液,也可以用直接收獲的濕藻體磨碎,加磷酸鉀溶液后,再以離心機離心取得,而藻色素的濃縮與純化可通過超過濾法(ultrafiltration)來進行,如
圖16-
圖18所示。
4.將沉淀的蛋白進一步通過膠濾層析純化(gel filtration),使用120公分長的Sephadex G200樹酯分離,第一道程序可得OD比為4.5以上的藻紅素產(chǎn)品,再次重復,即可得OD比為5.3以上藻紅素,再經(jīng)膠體電泳法(SDS)電泳,所得的結(jié)果顯示純度約99%,可作為免疫檢驗用試劑。
參閱圖5-圖7所示,為傳統(tǒng)從頭發(fā)菜萃取出的純質(zhì)藻紅素經(jīng)高效能液相層析儀(HPLC)所得出的280nm、565nm、615nm的層析光譜圖,參閱圖8-
圖10所示,為傳統(tǒng)從狹葉紫菜萃取出的純質(zhì)藻紅素經(jīng)高效能液相層析儀所得出的280nm、565nm、615nm的層析光譜圖。實際上,從不同的藻種中所萃取出的藻紅素,其經(jīng)高效能液相層析儀所得出層析光譜圖亦有所差異,就像人類的手指指紋一般。因此,我們可以通過此一特性來分辨出藻紅素是由何種藻種所生產(chǎn)。
參閱
圖11-
圖13所示,是本實用新型從粉紅柱狀的乳節(jié)藻取出的純質(zhì)藻紅素經(jīng)高效能液相層析儀所得出的280nm、565nm、615nm的層析光譜圖。
表二為傳統(tǒng)的頭發(fā)菜、狹葉紫菜與本實用新型的粉紅柱狀的乳節(jié)藻萃取藻紅素的比較表。
第一列為單位藻類重量(克)含藻紅素重量(毫克)的比值,代表在相同的藻類重量下可以產(chǎn)出的藻紅素,我們可以清楚得知本實用新型的粉紅柱狀的乳節(jié)藻,其含藻紅素的比值為最高。
第二、三列為從藻種中萃取出藻紅素的吸光度比值(OD565/OD280)及(OD615/OD565),前者表示藻紅素和其它蛋白質(zhì)純度的比例,后者表示藻藍素和藻紅素的純度比,(OD565/OD280)比值越高表示藻紅素純度越高,其附加價值越高,越具有食品或化妝品色素利用價值,也越有利后端制成純化,因可應用于醫(yī)療的免疫檢驗用試劑上;而因為藻藍素會吸收藻紅素所發(fā)出的熒光,造成作為在食品或化妝品色素用途時熒光顏色不佳,因此(OD615/OD565)越低表示藻藍素含量越少,在熒光顏色效果上更佳。同樣地,我們可以明顯看出本實用新型的粉紅柱狀的乳節(jié)藻,其萃取出藻紅素具有最高的吸光度比值。因此,利用本實用新型的粉紅柱狀的乳節(jié)藻絲狀體來萃取藻紅素,其較傳統(tǒng)頭發(fā)菜和狹葉紫菜的絲狀體,具有高藻紅素含量與高吸光度比值的優(yōu)點。
表二各藻種藻粉色素成份分析
其中RPE一種藻紅蛋白,具有親水性并在水與形成穩(wěn)定性水溶液,其最大UV吸收波長及熒光發(fā)散波長各為566nm及575nm。
Ba傳統(tǒng)頭發(fā)菜(Bangia atropurpurea)Pa傳統(tǒng)狹葉紫菜(Porphyra angusta)Go本實用新型的粉紅柱狀的乳節(jié)藻(Galaxaura oblongata)本實用新型是通過舉出一個較佳實施例來描述,但是本實用新型并不限定于所舉出的實施例,顯而易見地,其它未脫離本實用新型所揭示的精神下,所完成的等效改變或修飾,均應包含在本實用新型的保護范圍之內(nèi)。
綜上所述,本實用新型的實施例能達到所預期的功效,又其所揭露的具體構(gòu)造,不僅未曾見諸于同類產(chǎn)品中,亦未曾公開于申請前,具有新穎性、創(chuàng)造性和實用性。
權(quán)利要求1.一種利用粉紅柱狀的乳節(jié)藻生產(chǎn)高吸光度藻紅素的裝置,其特征是它包含有第一培養(yǎng)槽、第二培養(yǎng)槽、收集器、研磨器、攪拌器及沉淀器;具有培養(yǎng)液的第一培養(yǎng)槽培養(yǎng)粉紅柱狀的乳節(jié)藻含成熟果孢子囊的配子體,并得到果孢子;該第二培養(yǎng)槽臨近該第一培養(yǎng)槽,具有500-6000lux的照度、明暗比為10∶14以上,及15-30℃下的環(huán)境,培養(yǎng)該果孢子成長為絲狀體;收集該絲狀體的收集器置于該第二培養(yǎng)槽中;研磨該絲狀體的研磨器臨近該收集器;該攪拌器臨近該研磨器,加入酸堿緩沖液與研磨后的該絲狀體,得到一深色色素蛋白溶液;該沉淀器臨近該攪拌器,用以從該深色色素蛋白溶液沉淀出藻紅素。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的裝置,其特征是該粉紅柱狀的乳節(jié)藻從其果孢子絲狀體中萃取的藻紅素,經(jīng)液相層析儀所得出的565nm的層析光譜圖。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的裝置,其特征是該培養(yǎng)液為SWM-III培養(yǎng)液。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的裝置,其特征是該SWM-III培養(yǎng)液為去除有機物的SWM-III培養(yǎng)液。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的裝置,其特征是培養(yǎng)該果孢子絲狀體的方法為旋浮培養(yǎng)法。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的裝置,其特征是該培養(yǎng)的環(huán)境為20℃,2000lux的照度與明暗比為12∶12。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的裝置,其特征是收集該絲狀體的收集器是網(wǎng)布。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的裝置,其特征是該網(wǎng)布為20-400網(wǎng)目的網(wǎng)布。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的裝置,其特征是該研磨器更包含有干燥器。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的裝置,其特征是該干燥器為真空干燥器。
11.根據(jù)權(quán)利要求9所述的裝置,其特征是該干燥器為溫風干燥器。
12.據(jù)權(quán)利要求1所述的裝置,其特征是沉淀該藻紅素的沉淀器為鹽析裝置。
13.據(jù)權(quán)利要求12所述的裝置,其特征是該鹽析裝置中設有60-65%的硫酸銨溶液。
14.根據(jù)權(quán)利要求1所述的裝置,其特征是它還包含有純化器,該純化器為膠濾層析裝置。
15.據(jù)權(quán)利要求14所述的裝置,其特征是該膠濾層析裝置為使用SephadexG200的膠濾層析裝置。
16.據(jù)權(quán)利要求1所述的裝置,其特征是它還包含有純化器,該純化器為超過濾裝置。
專利摘要一種利用粉紅柱狀的乳節(jié)藻生產(chǎn)高吸光度藻紅素的裝置,它包含有第一培養(yǎng)槽、第二培養(yǎng)槽、收集器、研磨器、攪拌器及沉淀器;具有培養(yǎng)液培養(yǎng)粉紅柱狀的乳節(jié)藻含成熟利用粉紅柱狀的乳節(jié)藻生活史中具有的有性生殖、無性生殖與營養(yǎng)繁殖三個世代交替及果孢子絲狀體階段不含各種膠類的特征下,在控制的光線、溫度及營養(yǎng)條件下,延續(xù)其絲狀體階段,并進一步以其為原料,萃取高吸光度比值藻紅素的裝置。通過其單位重量含有藻紅素的高重量比值,達到降低單位成本和減少藻紅素純化步驟的功效。
文檔編號C07K14/405GK2602031SQ0323685
公開日2004年2月4日 申請日期2003年1月27日 優(yōu)先權(quán)日2003年1月27日
發(fā)明者江永棉, 周宏農(nóng), 鄭俊明, 呂志翼 申請人:人宇生物科技股份有限公司, 呂志翼