專利名稱：維生素d類似物,包含所述類似物的組合物及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的維生素D類似物，它們?cè)谥委熤械挠猛?，包含所述類似物的藥物組合物，包括給需要治療的患者施用所述類似物的治療方法，和所述類似物在醫(yī)藥制造中的用途。
背景技術(shù)：
在過去幾十年中對(duì)維生素D的生物效應(yīng)已經(jīng)有了越來越多的了解。維生素D的經(jīng)典作用包括腸中鈣和磷的吸收，這對(duì)于礦物質(zhì)平衡以及骨形成和骨維持是極其重要的。維生素D的另一個(gè)主要作用是調(diào)節(jié)甲狀旁腺激素(PTH)從甲狀旁腺中的分泌。維生素D抑制甲狀旁腺激素的生成，因此血液中低水平的維生素D會(huì)引起高水平的甲狀旁腺激素，反之亦然。維生素D通過一種令人感興趣的機(jī)制發(fā)揮它的作用，即，抑制被翻譯成甲狀旁腺激素或其前體形式的mRNA的生成。然而，在生物系統(tǒng)中維生素D的作用并不止這些。維生素D顯示出對(duì)肌肉、免疫系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)、細(xì)胞增殖和分化有很深的影響。事實(shí)上，已經(jīng)在身體的許多部位發(fā)現(xiàn)了具有維生素D受體(VDR)的細(xì)胞，這些部位包括腸、腎、前列腺、骨、骨髓、甲狀旁腺、皮膚、肝、肌肉和淋巴組織。VDR的普遍存在已經(jīng)使得維生素D及其類似物成為治療多種疾病的有吸引力的化合物，這些疾病包括癌癥、皮膚病和骨病，以及自身免疫性疾病。
本發(fā)明涉及一組新的對(duì)甲狀旁腺激素分泌具有有效抑制作用的維生素D類似物，即，其能用于繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)癥(s-HPT)的治療。活性維生素D的決定性結(jié)構(gòu)單元是1位和25位的兩個(gè)羥基。與其相比，本發(fā)明化合物的特征在于25位的阻斷，因此它們?cè)谶@個(gè)位置沒有羥基，也不能在體內(nèi)被P450樣的酶羥基化。
以前已經(jīng)公開了與本發(fā)明化合物具有某些相似結(jié)構(gòu)的維生素D類似物。例如，WO95/02577教導(dǎo)了下式化合物 WO91/00855公開了下式化合物 Onisko，Tetrahedron Lett.，1107-1108，13，1977公開了下式化合物 該化合物可用于抑制負(fù)責(zé)將維生素D3羥基化成25-OH維生素D3的肝酶。
最后，Bogoslovsky等，維生素D-基礎(chǔ)研究及其臨床應(yīng)用，第4屆維生素D研討會(huì)會(huì)議錄，西德，柏林，1979，A.W.Norman等編，p1257-1259，Walter de Gruyter，Berlin 1979公開了一項(xiàng)合成研究，包括3(S)-羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯的制備。然而，這篇參考文獻(xiàn)沒有公開這種特定化合物的任何生物學(xué)數(shù)據(jù)。
維生素D和其類似物已經(jīng)用于s-HPT的治療。在美國已批準(zhǔn)了帕立骨化醇(19-去甲-1，25-二羥基-維生素D2)和度骨化醇(1α-羥基-維生素D2)用于s-HPT的治療，在日本已批準(zhǔn)了22-氧雜-鈣三醇(馬沙骨化醇)和六氟-鈣三醇(氟骨三醇)[Malluche，Kidney Int.，367-374，62，2002]。此外，鈣三醇本身和其前藥1α(OH)D3也用于s-HPT的治療和預(yù)防[Brandi，Nephrol DialTransplant，829-842，17，2002]。
所有包括施用維生素D和其類似物的治療干涉必須注意常與這種治療相伴隨的不良副作用，尤其是維生素D化合物的血鈣效應(yīng)。雖然具有其它的臨床積極作用，然而這些副作用可以嚴(yán)重限制甚至阻礙該化合物的使用。因此本發(fā)明尋求提供一種維生素D類似物，其具有降低的血鈣效應(yīng)同時(shí)保留對(duì)甲狀旁腺激素分泌的抑制作用。
發(fā)明概述因此，本發(fā)明提供了式I化合物及其前藥以及立體異構(gòu)體形式
其中R1和R2可以相同或不同，表示鹵素、(C1-C6)烴基，其任選地被一或兩個(gè)羥基或一個(gè)或多個(gè)氟原子取代，或者，R1和R2與它們共同連接的碳原子一起形成(C3-C6)碳環(huán)，或者，R1和R2其中之一與R3合在一起形成一個(gè)直連鍵，從而構(gòu)成一個(gè)三鍵，或者，R1和R2均表示氫；當(dāng)R3沒有與R1和R2其中之一形成直連鍵時(shí)，其表示氫或(C1-C3)烴基；X表示(E)-乙烯、(Z)-乙烯、亞乙炔基或一個(gè)鍵；Y和Z獨(dú)立地表示氫或甲基；C#16和C#17之間的鍵用虛線表示，表明所述的鍵可以是單鍵也可以是雙鍵，在單鍵的情況下環(huán)取代的投影是β；A表示羥基、氟或氫；B表示CH2或H2；3位的構(gòu)型與天然維生素D3具有相同的構(gòu)型(正常)，或3位的構(gòu)型與天然維生素D3相反(表)；條件是當(dāng)X表示(E)-乙烯或(Z)-乙烯時(shí)，R1和R2其中之一與R3一起不能形成直連鍵以構(gòu)成三鍵；進(jìn)一步的條件是當(dāng)X表示一個(gè)鍵時(shí)，R1和R2不為氫；進(jìn)一步的條件是式I化合物不為3(S)-羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯。
式I化合物中，#24碳原子和#25位碳原子之間的碳碳雙鍵或三鍵的存在實(shí)現(xiàn)了25位的阻斷。在這種方式下，25位不能被羥基化。如后面更全面的討論，最近的數(shù)據(jù)表明25位羥基化對(duì)甲狀旁腺激素抑制效應(yīng)的影響有限。因此，在25位被阻斷羥基化的維生素D類似物保留了它們的甲狀旁腺激素抑制效應(yīng)，同時(shí)喪失了其他的維生素D活性，例如完整的維生素D結(jié)構(gòu)所具有的血鈣效應(yīng)。
在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及式I化合物在治療中的用途。
在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及一種包含式I化合物的藥物組合物。
在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及包括給需要治療的患者施用式I化合物的步驟的治療方法。
在進(jìn)一步的方面，本發(fā)明涉及式I化合物在醫(yī)藥制造中的用途。
發(fā)明詳述在本發(fā)明一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，當(dāng)R1和R2分開時(shí)，分別表示溴、氯、甲基、乙基、三氟甲基、羥基甲基、(1-或2-)羥基乙基、正、異-或環(huán)丙基、2-羥基-2-丙基、2-甲基-2-丙基、3-戊基或3-羥基-3-戊基。
在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，R1和R2是相同的，均表示氫、甲基、乙基、溴、氯或三氟甲基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1和R2與它們共同連接的碳原子一起形成C3碳環(huán)、C4碳環(huán)、C5碳環(huán)或C6碳環(huán)。
在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，當(dāng)R1和R2連接在一起時(shí)，其包括亞乙基、亞丙基、亞環(huán)丁基或亞戊基，例如R1和R2與它們共同連接的碳原子一起形成C3碳環(huán)、C4碳環(huán)、C5碳環(huán)或C6碳環(huán)。
在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，當(dāng)R2構(gòu)成三鍵的一部分時(shí)，R1表示支鏈的(C1-C6)烴基，其任選地被一或兩個(gè)羥基取代。特別地，R1表示支鏈的(C1-C6)烴基，其任選地被一個(gè)羥基取代，例如-CMe3、-C(OH)Me2或-C(OH)Et2。
在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，當(dāng)R3不是三鍵的一部分時(shí)，其表示氫、甲基或環(huán)丙基。
在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，A是羥基或氟。
在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，R1和R2是通過從直鏈、支鏈或環(huán)狀飽和的C1-6烴除去一個(gè)氫原子得到的基團(tuán)。
特別地，式I化合物可選自下列化合物1(S)，3(R)-二羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物1)，1(S)，3(R)-二羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(Z)，24-五烯(化合物2)，
20(S)，1(S)，3(R)-二羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物3)，1(S)，3(R)-二羥基-9，10-斷-26，27-環(huán)-膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物4)，20(S)，1(S)，3(R)-二羥基-9，10-斷-26，27-環(huán)-膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物5)，1(S)，3(R)-二羥基-9，10-斷-26，27-橋亞甲基-膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物6)，20(S)，1(S)，3(R)-二羥基-9，10-斷-26，27-橋亞甲基-膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物7)，1(S)，3(R)-二羥基-20(S)-(4，4-二溴-1，3-丁二烯-1-基)-9，10-斷-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物8)，1(S)，3(R)，26-三羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24(E)-五烯(化合物9)，20(S)，1(S)，3(R)，26-三羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24(E)-五烯(化合物10)，1(S)，3(R)，26-三羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24(Z)-五烯(化合物11)，20(S)，1(S)，3(R)，26-三羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24(Z)-五烯(化合物12)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(4-甲基-5-乙基-5-羥基-1(E)，3(E)-庚二烯基)-9，10-斷孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物13)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(3-環(huán)丙基-1(E)，3-丁二烯基)-9，10-斷孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物14)，1(S)，3(R)-二羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，24-四烯-22-炔(化合物15)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(5-甲基-5-羥基-1，3-己二炔基)-9，10-斷孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物16)，
1(S)，3(R)-二羥基-20(S)-(5-乙基-5-羥基-1，3-庚二炔基)-9，10-斷孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物17)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(5-乙基-5-羥基-1，3-庚二炔基)-9，10-斷孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物18)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(5，5-二甲基-1，3-己二炔基)-9，10-斷孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物19)，1(S)，3(R)-二羥基-20(S)-(5，5-二甲基-1，3-己二炔基)-9，10-斷孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物20)，1(S)-氟-3(R)-羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物21)，1(S)，3(R)-二羥基-19-去甲-9，10-斷膽甾-5，7(E)，22(E)，24-四烯(化合物22)，1(S)，3(S)-二羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物23)，1(S)，3(R)-二羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，16，22(E)，24-六烯(化合物24)，1(S)，3(R)-二羥基-26，26，26，27，27，27-六氟-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物25)，3(S)，26-二羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24(E)-五烯(化合物26)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(4，4-二溴-1，3-丁二烯-1-基)-9，10-斷-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物27)，1(S)，3(R)-二羥基-26，27-二甲基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物28)，1(S)，3(S)-二羥基-26，27-二甲基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物29)，1(S)，3(R)-二羥基-24-甲基-26，27-橋亞甲基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物30)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(4，4-二氯-1，3-丁二烯-1-基)-9，10-斷-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物31)，1(S)，3(R)-二羥基-26，27-橋亞乙基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物32)，
1(S)，3(R)-二羥基-26，27-橋亞丙基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物33)，1(S)，3(R)-二羥基-20(S)-亞環(huán)丙基甲基-9，10-斷-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物34)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-亞環(huán)丙基甲基-9，10-斷-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物35)，20(S)，1(S)，3(R)-二羥基-26，26，26，27，27，27-六氟-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物36)。
式I化合物可包含手性中心，例如不對(duì)稱取代的碳原子，和碳碳雙鍵，從而可產(chǎn)生立體異構(gòu)體，例如對(duì)映體、非對(duì)映體和幾何異構(gòu)體(順/反)。本發(fā)明涉及所有這些形式，可以是純形式或其混合物。
例如式I的C-3或C-20的構(gòu)型(當(dāng)Y與Z不相同時(shí))可以是R或S，或當(dāng)X是亞乙烯基時(shí)，構(gòu)型可以是E或Z。
可通過直接從有機(jī)溶劑中濃縮得到結(jié)晶形式的式I化合物，或通過從有機(jī)溶劑或所述溶劑與共溶劑的混合物中結(jié)晶或重結(jié)晶得到結(jié)晶形式的式I化合物，共溶劑可以是有機(jī)或無機(jī)的，例如水。結(jié)晶可分離成基本不含溶劑的形式或溶劑化物，例如水合物。本發(fā)明包括所有結(jié)晶修飾物，結(jié)晶形式和它們的混合物。
在本申請(qǐng)文本中，除非另有說明，術(shù)語“前藥”指的是將一個(gè)或多個(gè)羥基掩蔽成能在體內(nèi)重新轉(zhuǎn)化成羥基的取代基的化合物，從而當(dāng)對(duì)患者給藥時(shí)其可以提供式I化合物。所述取代基的實(shí)例是酯，例如羧酸酯和磷酸酯。已知維生素D的前體形式在肝和腎中羥基化以達(dá)到生物學(xué)活性狀態(tài)。與之相符，A是羥基的式I化合物是優(yōu)選的，但事實(shí)上，A是氫的化合物是另一種前藥，當(dāng)對(duì)患者給藥時(shí)其可以被羥基化成活性狀態(tài)。
在本申請(qǐng)文本中，術(shù)語“烴基”指的是通過從直鏈、支鏈和/或環(huán)狀的飽和或不飽和烴中除去一個(gè)氫原子得到的基團(tuán)。所述的直鏈、支鏈和/或環(huán)狀的飽和或不飽和烴包括但不限于甲基、乙基、1-丙基、2-丙基、1-丁基、2-丁基、1-戊基、2-戊基、3-戊基、1-己基、2-己基、3-己基、環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、2-甲基-2-丙基、2-甲基環(huán)丙基、2-甲基烯丙基、1-丙-2-炔基、1-丁-2-炔基、3-甲基-1-戊基、1-己-1-烯-3-炔基。
在本申請(qǐng)文本中，術(shù)語“鹵素”指的是來自元素周期表中第七主族的化合物，即氟、氯、溴和碘，尤其是氯和溴。
當(dāng)用于描述本發(fā)明化合物的絕對(duì)構(gòu)型時(shí)，術(shù)語“正?！焙汀氨怼鄙婕疤烊痪S生素D3自身的絕對(duì)構(gòu)型。因此，當(dāng)給定碳原子的構(gòu)型用“正常”表示時(shí)，它與維生素D3在該特定碳原子的構(gòu)型是一致的。類似的，如果給定碳原子的構(gòu)型用“表”表示，它與維生素D3在該特定碳原子的構(gòu)型是相反的。
本發(fā)明尤其涉及使用維生素D和其類似物來治療繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)癥(s-HPT)，例如，與腎衰竭有關(guān)的s-HPT。甲狀旁腺功能亢進(jìn)癥是一種特征為甲狀旁腺分泌的甲狀旁腺激素增多的疾病。在s-HPT中，分泌增多的原因不是腺體功能障礙，而是腺體以外的因素，例如腎衰。維生素D是從食物中吸收或在皮膚中以其前體形式產(chǎn)生的，它必須被活化以達(dá)到它的生物學(xué)活性狀態(tài)。這種活化作用一部分以前體羥基化的形式在腎中進(jìn)行。在腎衰患者，例如透析患者中，這種羥基化是受損的，從而導(dǎo)致了血液中活性維生素D水平較低。如上所述，低水平的維生素D導(dǎo)致產(chǎn)生了高水平的甲狀旁腺激素，這種病理狀態(tài)被稱為繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)癥。
甲狀旁腺激素對(duì)骨細(xì)胞具有強(qiáng)大的影響，使它們釋放鈣至血液中。在非病理狀態(tài)下，該過程是正常的從而確保骨中足夠的鈣水平。然而，當(dāng)甲狀旁腺激素水平增高較長(zhǎng)時(shí)間時(shí)，骨會(huì)失去過多的鈣而變得易碎，從而更易骨折。這種狀態(tài)被稱為骨營養(yǎng)不良和骨軟化癥，腎病患者常?；加羞@種疾病。還發(fā)現(xiàn)與甲狀旁腺激素的長(zhǎng)期接觸對(duì)許多重要器官具有毒性作用，例如心臟、骨骼肌、神經(jīng)系統(tǒng)和生殖系統(tǒng)[Malluche，Kidney Int.，367-374，62，2002]。
控制甲狀旁腺激素水平的一種方法是給予能夠抑制所述激素分泌的維生素D或其類似物。然而，維生素D療法常常伴隨著嚴(yán)重的不良副作用，它阻礙了這種治療方法。如上所述，維生素D和它的許多類似物可以導(dǎo)致鈣從腸中的攝取增加，這可能會(huì)導(dǎo)致高鈣血癥。這種效應(yīng)限制了維生素D類似物的應(yīng)用，而該類似物在其它方面是有益的。因此，正在進(jìn)行的維生素D研究工作的目標(biāo)是使這種血鈣效應(yīng)最小化，同時(shí)使臨床效果最大化。理想的是假如能夠確定維生素D分子中負(fù)責(zé)維生素D不同活性的結(jié)構(gòu)部分，那么將有可能利用這些結(jié)構(gòu)得到選擇性，例如，沒有血鈣活性但是具有很高的甲狀旁腺激素分泌抑制作用。不幸的是依然沒有確定這種明確的構(gòu)效關(guān)系。然而，Brandi在Nephrol Dial Transplant，829-842，17，2002中一項(xiàng)最新的研究也許在這方面是有用的。Brandi比較了鈣三醇(1，25(OH)2D3)和其前體1α(OH)D3的PTH抑制作用。1α(OH)D3在肝中被羥基化成1，25(OH)2D3，由于這兩種化合物不同的藥動(dòng)學(xué)特性，因此當(dāng)分別給予患者1，25(OH)2D3和1α(OH)D3時(shí)，1，25(OH)2D3的生物利用度明顯較低。盡管在這兩種給藥方案中1，25(OH)2D3的利用度不同，然而PTH的分泌抑制沒有顯著的區(qū)別。這導(dǎo)致了一種推測(cè)25-羥基對(duì)PTH抑制而言不是必要的。因此，實(shí)現(xiàn)所需選擇性的一種方法是阻斷維生素D結(jié)構(gòu)中的25位以使它不能被羥基化，這種方法維持甚至增強(qiáng)了PTH抑制作用，但是消除了其他維生素D分子的相關(guān)活性，尤其是它的血鈣效應(yīng)。
如文獻(xiàn)中所述，在大鼠體內(nèi)檢測(cè)本發(fā)明化合物的血鈣效應(yīng)(Binderup，L.，Bramm，E.，Biochem.Pharmacol.37，889-895(1988))。在體外牛甲狀旁腺細(xì)胞中測(cè)試本發(fā)明化合物的PTH抑制效果處死成年牛20分鐘內(nèi)，收集新鮮牛甲狀旁腺。如文獻(xiàn)中所述，從絞碎的甲狀旁腺組織中制備甲狀旁腺細(xì)胞(E.M.Brown，S.Hurwitz和G.D Aurbach；活的離體牛甲狀旁腺細(xì)胞的制備；Endocrinology，1976，vol 99，no 6，1582-1588)。在37℃下，用維生素D類似物處理細(xì)胞60小時(shí)，然后檢測(cè)PTH分泌。
表A列出了本發(fā)明化合物的PTH抑制效果和血鈣活性。使用鈣三醇(1，25(OH)2D3)作為對(duì)比化合物。
表A本發(fā)明化合物與鈣三醇(1，25(OH)2D3)相比，根據(jù)Binderup等，Biochem.Pharmacol.37，889-895(1988)的大鼠體內(nèi)血鈣活性和根據(jù)以上實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)測(cè)試的牛甲狀旁腺細(xì)胞PTH抑制作用。
表A中列出的數(shù)據(jù)表明本發(fā)明化合物與對(duì)比化合物鈣三醇(1，25(OH)2D3)相比具有同等的PTH抑制作用，同時(shí)具有令人驚訝的較低的血鈣效應(yīng)。
因此，本發(fā)明化合物令人驚訝地顯示了對(duì)例如甲狀旁腺激素的生成抑制的高選擇性，同時(shí)不具有維生素D類似物(例如1，25(OH)2D3)對(duì)生物體中鈣平衡的不利作用，包括血鈣和尿鈣活性。
因此，在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了一種治療、預(yù)防或改善s-HPT，尤其是與腎衰竭有關(guān)的s-HPT的方法，該方法包括給予需要這種治療的患者有效量的式I化合物。任選地，所述方法可包括使用常用于治療上述疾病的其他治療活性物質(zhì)進(jìn)行治療。所述化合物可與本發(fā)明化合物同時(shí)或依次給藥，它們尤其包括磷結(jié)合劑。
本發(fā)明化合物的用途不限于s-HPT的治療。已知由于維生素D和其類似物對(duì)某些細(xì)胞、包括皮膚細(xì)胞和癌細(xì)胞的誘導(dǎo)分化和抑制不良增殖具有很強(qiáng)的活性，同時(shí)還具有免疫調(diào)節(jié)作用以及骨形成和維持作用，因此維生素D和其類似物在多種疾病的治療中是有效的(Brown AJ維生素D類似物。Am J Kidney Dis 32(Suppl)S25-S39，1998；Brown AJ等維生素D。Am Physiol 277F157-F175，1999)。相應(yīng)地，本發(fā)明還提供了一種治療、預(yù)防或緩解以異常的細(xì)胞分化和/或細(xì)胞增殖為特征的疾病、癌癥、白血病、乳腺癌、腦神經(jīng)膠質(zhì)癌、骨肉瘤、黑素瘤、骨髓纖維化、牛皮癬、原發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)癥、糖尿病、盤狀和系統(tǒng)性紅斑狼瘡、自身免疫型慢性皮膚病、高血壓、痤瘡、脫發(fā)、皮膚老化、AIDS、神經(jīng)變性疾病、阿耳茨海默氏病、宿主對(duì)移植物的反應(yīng)和移植物對(duì)宿主的反應(yīng)、移植排異反應(yīng)、類固醇誘導(dǎo)的皮膚萎縮和骨質(zhì)疏松癥、以及誘導(dǎo)成骨作用的方法，該方法包括給予需要這種治療的患者有效量的式I化合物。任選地，所述方法可包括使用常用于治療上述疾病的其他治療活性物質(zhì)進(jìn)行治療。所述化合物可與本發(fā)明化合物同時(shí)或依次給藥，它們包括磷結(jié)合劑、類固醇和抗增殖劑。
在全身療法中，本發(fā)明使用的日劑量為每千克體重0.001-2μg式I化合物，優(yōu)選0.002-0.3μg式I化合物/kg哺乳動(dòng)物體重，例如0.003-0.3μg/kg式I化合物，典型地，成年人相應(yīng)的日劑量為0.1至200μg。然而，合適的給藥方案還包括更長(zhǎng)間隔給藥，例如每隔一天、每周，或甚至更長(zhǎng)間隔。在皮膚病的局部治療中，施用的軟膏、乳劑或洗劑包含0.1-1000μg/g，優(yōu)選0.1-500μg/g式I化合物，例如0.1-200μg/g式I化合物。在眼科的局部使用中，施用的軟膏、滴劑或凝膠劑包含0.1-1000μg/g，優(yōu)選0.1-500μg/g式I化合物，例如0.1-100μg/g式I化合物。優(yōu)選地，將口服組合物制備成片劑、膠囊或滴劑，每劑量單位包含0.07-100μg，優(yōu)選0.1-50μg式I化合物。
在進(jìn)一步優(yōu)選的方面，本發(fā)明涉及一種包含式I化合物的藥物組合物。本發(fā)明的制劑可用于獸醫(yī)和人類治療用途，包含活性成分和藥學(xué)上可接受的載體以及其他任選的治療成分。載體必須是“可接受的”，這指的是它與制劑的其他成分是相容的，并且對(duì)它的受體是無害的。
方便地，制劑的劑量單位包含0.05-100μg，優(yōu)選0.1-50μg式I化合物。
術(shù)語“劑量單位”指的是單一劑量，其能夠?qū)颊哌M(jìn)行給藥，并且易于處理和包裝，是物理上和化學(xué)上穩(wěn)定的單位劑量，包含活性物質(zhì)或其與固體或液體藥學(xué)稀釋劑或載體的混合物。
例如，制劑包括那些適于口服給藥(包括緩釋或定時(shí)釋放)、直腸給藥、非腸道給藥(包括皮下給藥、腹膜給藥、肌內(nèi)給藥、關(guān)節(jié)內(nèi)給藥和靜脈給藥)、經(jīng)皮給藥、眼部給藥、局部給藥、鼻給藥或口腔含化給藥的形式。
制劑可方便地以劑量單位形式呈現(xiàn)，并且可以使用藥學(xué)領(lǐng)域任何公知的方法制備，例如Remington，The Science and Practice of Pharmacy，第20版，2000中公開的內(nèi)容。所有的方法都包括將活性成分加入載體的步驟，所述載體包括一種或多種輔料。一般而言，通過將活性成分均勻緊密地加入液體載體或充分分散的固體載體或上述兩者中制備制劑，如果必要的話，接著將產(chǎn)品加工成所希望得到的制劑。
適合于口服給藥的本發(fā)明的制劑可以是不連續(xù)的形式，例如膠囊、袋劑、片劑或錠劑，每一種形式都包含了預(yù)設(shè)量的活性成分；可以是散劑或顆粒劑；可以是在水或非水液體(例如乙醇或甘油)中的溶液或混懸液形式；或可以是水包油乳劑或油包水乳劑。這些油可以是食用油，例如棉籽油，芝麻油，椰子油或花生油。適合的水混懸液分散劑或助懸劑包括合成樹膠或天然樹膠，例如黃蓍膠、藻酸鹽、阿拉伯膠、右旋糖酐、羧甲基纖維素鈉、明膠、甲基纖維素、羥丙甲基纖維素、羥丙基纖維素、卡波姆和聚乙烯吡咯烷酮。活性成分的給藥方式還可以為大丸劑、藥糖劑或糊劑。
通過將活性成分與任選的一種或多種輔料壓縮或模壓而制備片劑。通過在適當(dāng)?shù)臋C(jī)器中壓縮活性成分而制備壓縮片劑，活性成分是自由流動(dòng)的形式如粉末或顆粒，任選地與粘合劑、潤滑劑、崩解劑或分散劑混合，所述粘合劑為例如乳糖、葡萄糖、淀粉、明膠、阿拉伯膠、黃蓍膠、海藻酸鈉、羧甲基纖維素、甲基纖維素、羧丙甲基纖維素、聚乙二醇、蠟等；潤滑劑為例如油酸鈉、硬脂酸鈉、硬脂酸鎂、苯甲酸鈉、醋酸鈉、氯化鈉等；崩解劑為例如淀粉、甲基纖維素、瓊脂、膨潤土、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、淀粉羥乙酸鈉、交聯(lián)聚維酮等；分散劑為例如吐溫80。通過在適當(dāng)?shù)臋C(jī)器中模壓粉末狀活性成分與適當(dāng)載體的混合物而制備模壓片劑，其中所述混合物使用惰性液體稀釋劑濕潤。
直腸給藥制劑可以是栓劑形式，其中本發(fā)明化合物與低熔點(diǎn)的水溶性或水不溶性固體混合，這些固體為例如可可脂、氫化植物油、聚乙二醇或聚乙二醇的脂肪酸酯，同時(shí)可使用十四烷基棕櫚酸酯制備酏劑。
非腸道給藥制劑可包含活性成分的無菌油性或水性制劑，其優(yōu)選與受體血液等滲，例如等滲鹽水、等滲葡萄糖溶液或緩沖溶液。該制劑可通過例如細(xì)菌阻留過濾器過濾、添加滅菌劑至制劑中、輻射制劑或加熱制劑方便地滅菌。Encyclopedia of Pharmaceutical Technology，vol.9，1994中公開的脂質(zhì)體制劑也可適用于腸道給藥。
另外，式I化合物可以是無菌固體制劑，例如凍干粉末，其可在臨使用前溶于無菌溶劑中。
經(jīng)皮制劑可以是膏劑或片劑形式。
適合于眼部給藥的制劑可以是活性成分的無菌含水制劑形式，所述活性成分可以是微晶體形式，例如含水微晶體混懸液。Encyclopedia ofPharmaceutical Technology，vol.9，1994中公開的脂質(zhì)體制劑或生物可降解聚合物系統(tǒng)也可用于活性成分的眼部給藥。
適合于局部或眼部給藥的制劑包括液體或半液體制劑，例如搽劑、洗劑、凝膠劑、涂抹劑、水包油或油包水乳劑(例如霜?jiǎng)④浉鄤┗蚝齽?；或溶液劑或混懸液，例如滴劑。
適合于鼻內(nèi)給藥或口腔含化給藥的制劑包括粉劑、自推型噴霧劑，例如氣溶劑和噴霧劑。
也可以通過使用作為獨(dú)立載體的單克隆抗體輸送本發(fā)明的前體藥物，其中化合物分子與單克隆抗體偶聯(lián)。
除了上述成分之外，式I化合物的制劑可包含一種或多種附加成分，例如稀釋劑、緩沖劑、矯味劑、著色劑、表面活性劑、增稠劑、防腐劑如羥基苯甲酸甲酯(包括抗氧劑)、乳化劑等。
此外，所述的制劑還可以包含常用于治療上述疾病的其他治療活性化合物。這些化合物的實(shí)例包括磷結(jié)合劑、類固醇和抗增殖劑。
另一方面，本發(fā)明涉及式I化合物任選地與其他治療活性化合物一起在制備藥物中的用途，所述的藥物用于治療以異常的細(xì)胞分化和/或細(xì)胞增殖為特征的疾病、癌癥、白血病、乳腺癌、腦神經(jīng)膠質(zhì)癌、骨肉瘤、黑素瘤、骨髓纖維化、牛皮癬、原發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)癥、s-HPT、與腎衰竭有關(guān)的s-HPT、糖尿病、盤狀和系統(tǒng)性紅斑狼瘡、自身免疫型慢性皮膚病、高血壓、痤瘡、脫發(fā)、皮膚老化、AIDS、神經(jīng)變性疾病、阿耳茨海默氏病、宿主對(duì)移植物的反應(yīng)和移植物對(duì)宿主的反應(yīng)、移植排異反應(yīng)、類固醇誘導(dǎo)的皮膚萎縮和骨質(zhì)疏松癥，以及用于誘導(dǎo)成骨作用。所述的其他治療活性化合物可選自，例如磷結(jié)合劑、類固醇和抗增殖劑。
根據(jù)反應(yīng)路線1，可通過中間體1制備式I化合物。
路線1
該路線中的標(biāo)記*用于表示中間體化合物中的基團(tuán)A*可以與式I化合物中的基團(tuán)A相同(例如，NZ中的氟)，或作為選擇地，可以是能夠在合成的后續(xù)階段轉(zhuǎn)化成該基團(tuán)的基團(tuán)(例如，NZ中甲硅烷基醚保護(hù)的羥基)。盡管沒有以這種方式正式指出，但是同樣的情形還可應(yīng)用于路線1中的變量R1，R2，R3，Y和Z。此外，N(即NE，NZ或NCD)和/或一個(gè)或多個(gè)可變基團(tuán)可沿著反應(yīng)順序在中間體之間改變。然而，實(shí)際的性質(zhì)在具體上下文中是顯而易見的。注意，雖然Cl和Li是原子符號(hào)(C、H和O同樣如此)，但字母W卻是作為穩(wěn)定有機(jī)鋰元素類物質(zhì)的官能團(tuán)或元素的縮寫。在路線1中沒有指明雙鍵(在最終化合物I中變成X＝乙烯)的構(gòu)型(E或Z)(畫成了直線排列)，但是必要時(shí)是指明的。
1型原料和2、4、6、7、8型中間體的某些例子對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是公知的，并且記載于文獻(xiàn)例如G.-D.Zhu和W.H.Okamura，Chem.Rev.1995，95，1877-1952中。后綴a、b和c，N基團(tuán)的結(jié)構(gòu)如路線1頂端所定義。
簡(jiǎn)而言之，如下進(jìn)行建議的反應(yīng)，這些反應(yīng)對(duì)維生素D化學(xué)領(lǐng)域的合成有機(jī)化學(xué)家而言是公如的。在本公開文本中使用的是標(biāo)準(zhǔn)縮寫，例如Ac＝乙酰基；aq.＝水；DCM＝二氯甲烷；Et＝乙基；醚＝乙醚；h＝小時(shí)；LDA＝二異丙基氨基鋰；Me＝甲基；PDC＝吡啶重鉻酸鹽；TBA＝四(正-)丁基胺；TBS＝叔丁基二甲基硅烷基；TMS＝三甲基硅烷基；Ts＝對(duì)甲苯基磺酰；DIBAL＝二異丁基氫化鋁；Ph＝苯基；THF＝四氫呋喃；v＝體積。
1→2Wittig或Wadsworth-Emmons反應(yīng)[例如，使用Ph3P＝CH-C(O)R3的Wittig反應(yīng)(對(duì)于R3＝H，經(jīng)過R3＝OMe的中間體通過連續(xù)的DIBAL還原和PDC或Dess-Martin periodinane氧化衍生得到)。]該反應(yīng)中確定的雙鍵構(gòu)型通常是E(然而常常能分離出少量的Z中間體)，但是能夠通過選擇反應(yīng)條件使Z中間體的比率增加，例如使用(CF3CH2O)2P(O)-CH2C(O)OMe的改良的Wadsworth-Emmons反應(yīng)?？蛇x擇地，E構(gòu)型能通過中間體2階段的光致異構(gòu)化轉(zhuǎn)換成Z構(gòu)型。在該階段或后續(xù)方便的階段通過例如色譜或結(jié)晶作用能夠從E和Z異構(gòu)體的混合物中分離所需的異構(gòu)體。
1→4對(duì)W＝S(O2)Ph或W＝SeMe的中間體而言，文獻(xiàn)中已經(jīng)描述了方法，例如M.J.Calverly，Tedrahedron Letters 1987，28，1337-1340。
1→5例如通過Ph3P＝CH-C(R3)＝CR1R2的Wittig反應(yīng)。在該反應(yīng)中形成的E和Z異構(gòu)體可任選地在該階段或合成中的任一后續(xù)階段通過例如色譜或結(jié)晶作用分離。
1→6→7→8→7在制備炔烴的這部分公知反應(yīng)序列中，可使用二溴中間體代替顯示的二氯-中間體(6)，如W.G.Salmond等，Tetrahedron Letters1977，14，1239-1240中所描述的。
2→3對(duì)于R3＝H(3中)連續(xù)的DIBAL還原[對(duì)于2中R3＝OMe(或H)(參見1→2)，將醇轉(zhuǎn)化成離去基團(tuán)(例如Cl或OTs)，然后進(jìn)行取代以引入W(例如-P(O)Ph2或-S(O2)Ph，可直接引入或通過氧化低氧化狀態(tài)的-PPh2或-SPh，均可以鹽的形式得到)，和鋰化(例如使用n-BuLi或LDA)。
2→5例如使用Ph3P＝CR1R2的Wittig反應(yīng)或例如使用(EtO)2P(O)-CR1R2的Wadsworth-Emmons反應(yīng)。在該反應(yīng)中形成的24-E和24-Z異構(gòu)體可任選地在該階段或合成中的任一后續(xù)階段通過例如色譜或結(jié)晶作用分離。
3→5與羰基化合物的偶聯(lián)反應(yīng)，例如通過W＝P(O)Ph2時(shí)的Horner反應(yīng)，或通過W＝S(O2)Ph的Julia反應(yīng)(接著在后續(xù)反應(yīng)中通過還原除去W和O)。形成的24-E和24-Z異構(gòu)體可任選地在該階段或合成中的任一后續(xù)階段通過例如色譜或結(jié)晶作用分離。
4→5與羰基化合物的偶聯(lián)反應(yīng)，接著除去W和O。在該階段或后續(xù)方便的階段從E和Z異構(gòu)體的混合物中分離所需的異構(gòu)體。
7→9與羰基化合物的偶聯(lián)反應(yīng)。
8→10鈀催化的與末端乙炔或與乙烯基或炔衍生物例如鹵代物(例如溴代物)的交叉偶聯(lián)。該反應(yīng)包括但不限于Heck、Suzuki、Cadiot-Chodkiewski、Negishi、Sonogashira和Stille型反應(yīng)。
9→10用Martin’s sulfurane試劑脫水。
5或10→I″N→M″參見以下內(nèi)容。此外A*、R1、R2、R3、Y和/或Z可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法和一般程序轉(zhuǎn)化或衍生，例如″Comprehensive Organic Transformations″，R.C.Larock，VCH1989中所描述的。
NCD→M 依次用HF進(jìn)行脫硅烷基化作用得到醇，用Dess-Martinperiodinane氧化得到酮，與必需的式II的已知A-環(huán)氧化膦的鋰衍生物進(jìn)行Horner-Wittig偶聯(lián)得到Nz。然后使用HF或TBA-氟化物進(jìn)行脫硅烷基化作用。
NE→M通過三線態(tài)敏感性光致異構(gòu)化轉(zhuǎn)換成Nz(B＝CH2)，然后使用HF或TBA-氟化物進(jìn)行脫硅烷基化作用。
NZ→M使用HF或TBA氟化物進(jìn)行脫硅烷基化作用。
以下制備例和實(shí)施例進(jìn)一步闡述了本發(fā)明表1中列出了式I化合物的例子，表2中列出了通式1-10的原料和中間體(路線1)。
表1
表2
制備例和實(shí)施例在氬氣氛中攪拌常規(guī)地進(jìn)行反應(yīng)(除非另有說明)，并經(jīng)注射器逐滴加入試劑(液體或溶液中)。作為常規(guī)后處理程序，分離有機(jī)相，相繼用水和飽和氯化鈉溶液洗滌，經(jīng)無水硫酸鎂干燥，并真空濃縮得到粗產(chǎn)品，然后經(jīng)色譜法分離。所有的制備和分析(TCL)色譜法均在硅膠上進(jìn)行，使用從1％至50％(v∶v)梯度的醚(即乙醚)的石油醚溶液作為洗脫劑，或使用從30％(v∶v)乙酸乙酯的石油醚溶液至純的乙酸乙酯作為洗脫劑。在一般方法中，可變的試劑在文字排版上縮進(jìn)(另起一行)并列于特定的制備例中，同時(shí)列出了實(shí)際應(yīng)用中所需的任何變化細(xì)節(jié)。但是，不變化的試劑和溶劑與各制備例中特定的摩爾量的比例是一定的，因此不需要明確的說明這一變化。
化合物經(jīng)光譜表征除非另有指明，對(duì)于1H核磁共振光譜(300MHz)和13C NMR(75.6MHz)提供了在氘代氯仿溶液中相對(duì)于內(nèi)標(biāo)四甲基硅烷(加入的，1H-NMRδ＝0.00ppm，13C-NMRδ＝0.00ppm)或氯仿(殘留的，1H-NMRδ＝7.25ppm)或氘代氯仿(13C-NMR＝76.81ppm)的化學(xué)位移值(δ)(單位ppm)。除非引用了范圍(s＝單峰，b＝寬峰)，否則對(duì)于確定的[雙重峰(d)、三重峰(t)、四重峰(q)]或不確定的(m)多重峰(1H-NMR)，給出了在近似的中點(diǎn)的峰值。有時(shí)，對(duì)于中間體化合物，即表2的化合物，只選擇報(bào)道了特征峰。
一般方法1(制備例1-7和27-28)[2→5](制備例29-30)[1→5]向保持在約-70℃下的烷基-三苯基鏻鹽(7mmol)的無水THF(50ml)的溶液或懸浮液中加入正丁基鋰(1.6M的己烷溶液，4.36ml，7mmol)。然后，將混合物的溫度升至0℃20分鐘，此后，重新冷卻至-70℃以加入溶解于無水THF(8ml)中的中間體1或2(4mmol)。保持相同溫度30分鐘后，緩慢升溫，并在室溫下保持70分鐘，將混合物在飽和氯化銨溶液和乙酸乙酯間分配，按照如上常規(guī)后處理程序進(jìn)行處理，得到中間體5。
制備例1化合物501烷基-三苯基鏻鹽異丙基-三苯基鏻碘化物(3.16g，7.3mmol)。
中間體2202(2.39g)。
通過從甲醇中直接結(jié)晶由粗產(chǎn)物純化化合物502，省略色譜步驟13C-NMRδ＝153.5，143.1，138.1，135.2，132.5，125.1，124.1，121.5，116.3，106.4，70.0，67.1，56.3，56.2，45.7，43.8，40.4，40.3，36.4，28.8，27.7，25.7，25.6，23.3，22.0，20.6，18.1，18.0，17.9，12.1，-4.9，-5.1ppm。
制備例2化合物522烷基-三苯基鏻鹽異丙基-三苯基鏻碘化物(1.55g，3.6mmol)。
中間體2206(按照WO9100855中由101制備202所述的制備方法，類似地由102制備)(0.7g，2mmol)。
化合物52213C-NMRδ＝1138.5，132.3，125.1，123.8，69.3，56.4，52.9，42.0，40.5，39.7，34.3，29.2，25.7，25.6，22.8，20.3，18.0，17.8，17.5，13.8，-5.0，-5.3ppm。
制備例3化合物503烷基-三苯基鏻鹽異丙基-三苯基鏻碘化物(1.47g，3.4mmol)。
中間體2203(1g，1.67mmol)。
色譜純化化合物503(2％v∶v，乙醚的石油醚溶液)。
化合物50313C-NMRδ＝153.4，143.3，138.5，135.1，132.3，125.1，124.0，121.6，116.1，106.4，70.1，67.0，56.7，56.1，45.8，43.8，40.6，39.6，36.4，28.8，27.1，25.7，25.7，25.6，23.3，21.9，21.3，18.1，17.9，12.1，-4.9，-5.1ppm。
制備例4化合物504烷基-三苯基鏻鹽環(huán)丙基-三苯基鏻溴化物(0.76g，2mmol)。
中間體2202(0.60g，1mmol)色譜純化化合物504(5％v∶v，乙醚的石油醚溶液)。
化合物5041H-NMRδ＝6.45(d，J＝12Hz，1H)，6.33(bd，J＝10Hz，1H)，6.12(dd，J＝15Hz，J＝10Hz，1H)，5.81(d，J＝12Hz，1H)，5.55(dd，J＝9Hz，J＝15Hz，1H)，4.97(m，1H)，4.93(m，1H)，4.53(m，1H)，4.23(m，1H)，2.86(m，1H)，2.55(dd，1H)，2.30(bd，1H)，2.20-1.15(m，14H)，1.15-1.0(m，14H)，1.07(d，J＝7Hz，3H)，0.89(s，9H)，0.86(s，9H)，0.57(s，3H)，0.05(m，12H)ppm。
制備例5化合物505烷基-三苯基鏻鹽環(huán)丙基-三苯基鏻溴化物(1.53g，4mmol)。
中間體2203(0.56g，0.93mmol)色譜純化化合物505(5％v∶v，乙醚的石油醚溶液)。
化合物5051H-NMRδ＝6.44(d，J＝11.4Hz，1H)，6.35(bd，J＝10.3Hz，1H)，6.08(dd，J＝10.3Hz，J＝15.3，1H)，5.81(d，J＝11.4Hz，1H)，5.55(dd，J＝9.5Hz，J＝15.3，1H)，4.97(bt，1H)，4.93(bt，1H)，4.52(m，1H)，4.21(m，1H)，2.84(m，1H)，2.54(dd，J＝5.3Hz，J＝14.5Hz，1H)，2.31(bd，J＝13.7Hz，1H)，2.2-1.0(m，18H)，0.97(d，J＝6.5Hz，3H)，0.89(s，9H)，0.86(s，9H)，0.52(s，3H)，0.05(s，12H)ppm。
制備例6化合物506烷基-三苯基鏻鹽環(huán)丁基-三苯基鏻溴化物(0.80g，2mmol)。
中間體2202(0.60g，1mmol)色譜純化化合物506(1％v∶v，乙醚的石油醚溶液)。
化合物50613C-NMRδ＝153.5，143.1，142.5，137.1，135.2，123.6，121.5，120.8，116.3，106.4，70.0，67.0，56.3，56.2，45.7，43.8，40.3，40.3，36.4，31.1，29.7，28.7，27.7，25.7，25.6，23.3，22.0，20.5，18.1，17.9，17.0，12.0，-4.9，-5.0，-5.1ppm。
制備例7化合物507烷基-三苯基鏻鹽環(huán)丁基-三苯基鏻溴化物(1.33g，3.34mmol)。
中間體2203(1g，1.67mmol)。
色譜純化化合物507(1％v∶v，乙醚的石油醚溶液)。
色譜1％乙醚的石油醚溶液。
化合物50713C-NMRδ＝153.4，143.3，142.4，137.4，135.1，123.6，121.6，120.9，116.1，106.4，70.1，67.0，56.8，56.1，45.8，43.8，40.6，39.6，36.4，31.1，29.7，28.8，27.1，25.7，25.6，23.3，21.9，21.3，18.1，17.9，16.9，12.1，-4.9，-5.1ppm。
制備例8化合物502[4→5]向保持在約-70℃的鋰-衍生物403(表2，條目14)(由0.75g，1mmol硒基-乙縮醛衍生物101的無水THF溶液(5ml)制備)的溶液中逐滴加入側(cè)鏈結(jié)構(gòu)單元3-甲基-巴豆醛(0.10g，1.2mmol)。在相同溫度下攪拌30分鐘后，使用濕的THF淬滅該反應(yīng)并在乙醚和水之間分配混合物，得到非對(duì)映異構(gòu)體混合物形式的中間體加成物。向保持在約5℃的該混合物的無水DCM(15ml)和三乙胺(2ml)溶液中加入甲磺酰氯(1.5mmol)。在相同溫度下攪拌30分鐘后，在乙醚和水之間分配反應(yīng)混合物。經(jīng)上述常規(guī)后處理程序得到化合物50213C-NMRδ＝153.5，143.1，136.0，135.2，134.4，121.7，121.5，120.4，116.3，106.4，70.0，67.0，56.5，56.3，45.7，43.8，40.4，40.3，36.4，28.8，27.3，25.7，25.6，23.4，22.0，20.6，18.0，17.9，12.2，-4.9，-5.0，-5.1ppm。
一般方法2(制備例9，10)[2→5]向保持在約20℃的中間體2(0.76mmol)的DCM(5ml)溶液中加入三乙基2-磷酰丙酸酯(0.45g，1.9mmol)、50％NaOH水液(5ml)和TBA硫酸氫鹽(0.11g)。劇烈攪拌105分鐘后，在水和乙酸乙酯之間分配反應(yīng)混合物。經(jīng)上述常規(guī)后處理程序(2％-5％v∶v乙酸乙酯的石油醚溶液作為洗脫劑的色譜法)得到中間體5。
制備例9化合物508和509中間體2202(0.46g)。
首選洗脫的產(chǎn)物化合物50913C-NMRδ＝167.6，153.5，147.6，142.8，141.1，135.3，125.3，123.8，121.5，116.4，106.3，70.0，67.0，59.9，56.2，55.8，45.8，43.8，40.3，40.3，36.4，28.7，27.5，25.7，25.6，23.3，22.1，20.4，20.0，18.1，17.9，14.1，12.1，-5.0，-5.1ppm；隨后洗脫的產(chǎn)物化合物50813C-NMRδ＝168.5，153.5，148.7，142.7，138.7，135.4，124.9，123.5，121.5，116.4，106.4，70.0，67.0，60.2，56.1，55.7，45.8，43.8，40.8，40.2，36.4，28.7，27.5，25.7，25.6，23.3，22.1，20.0，18.1，17.9，14.1，12.4，12.1，-5.0，-5.1ppm。
制備例10化合物512和513中間體2203(1g，1.68mmol)。
首選洗脫的產(chǎn)物化合物51313C-NMRδ＝167.6，153.4，148.1，143.0，140.8，135.2，125.2，123.8，121.5，116.2，106.4，70.0，67.0，59.9，56.6，56.0，45.8，43.8，40.7，39.6，36.4，28.7，27.0，25.7，25.6，23.2，21.8，20.6，20.5，18.1，17.9，14.1，12.1，-4.9，-5.1ppm；隨后洗脫的產(chǎn)物化合物51213C-NMRδ＝168.5，153.4，149.3，142.9，138.5，135.3，124.9，123.4，121.5，116.3，106.5，70.1，67.0，60.2，56.5，56.0，45.7，43.8，41.1，39.6，36.4，28.7，27.0，25.7，25.6，23.2，21.8，20.7，18.0，17.9，14.2，12.4，12.2，-5.0，-5.1，-5.1ppm。
一般方法3(制備例11至14)[5→5′]向保持在約-70℃的酯5(0.34mmol)的無水THF(5ml)溶液中加入DIBAL(1M的己烷溶液，1ml，1mmol)。保持同樣溫度30分鐘后，允許在20分鐘內(nèi)將該混合物的溫度提高至-20℃，隨后重新冷卻至-70℃，加入甲醇(0.5ml)淬滅該反應(yīng)。然后在水和乙酸乙酯之間分配混合物，根據(jù)上述常規(guī)后處理程序進(jìn)行處理得到醇5′。
制備例11化合物510中間體5508(0.23g)。
化合物51013C-NMRδ＝153.5，142.9，141.2，135.3，134.5，125.4，123.3，121.5，116.3，106.4，70.0，68.6，67.0，56.2，56.1，45.7，43.8，40.4，40.3，36.4，28.7，27.7，25.7，25.6，23.3，22.0，20.4，18.1，17.9，13.9，12.1，-4.9，-5.1ppm。
制備例12化合物511中間體5509(0.18g，0.26mmol)。
化合物51113C-NMRδ＝153.5，142.9，140.8，135.3，134.0，128.3，122.7，121.5，116.3，106.4，70.1，67.0，61.7，56.2，56.1，45.7，43.8，40.3，36.4，28.7，27.6，25.7，25.6，25.4，23.3，22.0，21.2，20.3，18.0，17.9，12.1，-5.0，-5.1ppm。
制備例13化合物514中間體5512(0.36g，0.53mmol)。
化合物51413C-NMRδ＝153.4，143.1，141.6，135.1，134.3，125.4，123.2，121.5，116.2，106.5，70.1，68.6，67.0，56.7，56.1，45.8，43.8，40.7，39.6，36.4，28.8，27.1，25.7，25.6，23.2，21.9，21.1，18.0，17.9，13.9，12.1，-5.0，-5.1ppm。
制備例14化合物515中間體5513(0.23g)。
化合物51513C-NMRδ＝153.4，143.1，141.3，135.2，133.9，128.3，122.6，121.5，116.2，106.5，70.1，67.0，61.7，56.7，56.1，45.8，43.8，40.6，39.6，36.4，28.8，27.1，25.7，25.6，23.2，21.9，21.2，21.0，18.0，17.9，12.1，-4.9，-5.1ppm。
一般方法4(制備例15)[5→5′]向保持在約-70℃的酯5(0.6mmol)的無水THF(5ml)溶液中加入烷基鋰。保持同樣溫度1小時(shí)后，加入甲醇(0.5ml)淬滅該反應(yīng)，然后在水和乙酸乙酯之間分配混合物，根據(jù)上述常規(guī)后處理程序進(jìn)行處理得到醇5。
制備例15化合物516[5→5′]中間體5508(0.4g)。
烷基鋰乙基鋰(0.8M的乙醚溶液，2ml)。
化合物51613C-NMRδ＝153.5，143.0，140.1，137.3，135.2，124.4，123.8，121.5，116.3，106.4，78.2，70.1，67.0，56.3，56.2，45.8，43.8，40.4，40.3，36.4，31.6，28.8，27.6，25.7，25.6，23.3，22.0，20.4，18.1，17.9，13.3，12.1，7.4，-4.9，-5.1ppm。
制備例16化合物517[2→5]向保持在約5℃的化合物204(0.32g，0.5mmol)和甲基-三苯基鏻溴化物(0.59g，1.57mmol)的無水THF(5ml)溶液/懸浮液中加入叔丁醇鉀(1M的THF溶液，1.4ml)。保持同樣溫度2小時(shí)后，在水和乙醚之間分配混合物，根據(jù)上述常規(guī)后處理程序進(jìn)行處理得到醇517，在乙醚-甲醇中重結(jié)晶13C-NMRδ＝153.5，147.6，143.0，136.8，135.3，129.6，121.5，116.3，110.3，106.4，70.0，67.0，56.3，45.8，43.8，40.3，40.2，36.4，28.8，27.5，25.7，25.6，23.3，22.0，20.4，18.1，17.9，12.6，12.1，5.3，5.2，-5.0，-5.1ppm。
制備例17化合物518[2→5]將四溴甲烷(288mg，0.87mmol)溶解于干燥的THF(3.6ml)。加入三苯基膦(456mg，1.74mmol)并在室溫下攪拌該反應(yīng)混合物30分鐘。加入化合物203(261mg；0.435mmol)和三乙胺(0.06ml；0.43mmol)的THF(3.2ml)溶液。室溫下攪拌該反應(yīng)混合物90分鐘，使用水淬滅并經(jīng)Decalite助濾器過濾。使用戊烷(2×25ml)洗滌濾器。濾液經(jīng)水(3×15ml)和飽和氯化鈉水溶液(15ml)萃取，干燥并真空濃縮。色譜純化殘余物(0.5％乙醚的石油醚溶液)。51813C-NMRδ153.4，145.7，142.8，137.0，135.3，124.6，121.5，116.3，106.5，88.1，70.1，67.0，56.4，56.0，45.7，43.8，40.8，39.6，36.4，29.5，28.7，27.0，25.7，25.6，25.4，23.1，21.8，20.5，18.1，17.9，12.1，-5.0，-5.1ppm。
一般方法5(制備例18、19、20)[6→7→9→10，包括6→7→8]向保持在約-70℃的二氯中間體6(1mmol)的無水THF(5ml)溶液中加入正丁基鋰(1.33ml，1.5M的己烷溶液，2摩爾當(dāng)量)。然后允許該混合物的溫度短時(shí)間升高至0℃以保證有效地轉(zhuǎn)化為中間體鋰-衍生物7。通過在飽和氯化銨溶液和乙醚之間分配而淬滅反應(yīng)，對(duì)該階段的混合物進(jìn)行處理得到中間體8。可選擇地，重新冷卻7的溶液至-70℃并加入羰基化合物(1.5mmol)。保持同樣溫度30分鐘后，緩慢升溫至室溫，然后在飽和氯化銨溶液和乙醚之間分配，并經(jīng)常規(guī)后處理得到化合物9。
向保持在約5℃的中間體醇9(約0.4mmol)的干燥二氯甲烷(8ml)溶液中加入Martin′s sulfurane(0.54g，2摩爾當(dāng)量)。在相同溫度下攪拌1小時(shí)后，將該反應(yīng)混合物在乙醚和20％氫氧化鈉溶液之間分配。經(jīng)常規(guī)后處理得到產(chǎn)物10。
制備例18由中間體701和化合物901制備化合物1001中間體6601(0.62g，0.97mmol)。
羰基化合物異丁醛(0.13ml)。
化合物90113C-NMRδ＝153.5，142.6，135.4，121.4，116.4，106.4，90.4，80.3，70.0，68.0，67.0，55.9，55.8，45.6，43.8，39.5，36.4，34.5，28.7，27.6，26.3，25.7，25.6，23.1，22.0，21.4，18.1，18.0，17.9，17.2，12.4，-5.0，-5.1ppm。
中間體9901(0.27g)。
產(chǎn)物10經(jīng)乙醚-甲醇結(jié)晶進(jìn)一步純化。
化合物100113C-NMRδ＝153.4，146.0，142.8，135.3，121.5，116.4，106.5，105.4，96.5，78.9，70.1，67.0，56.1，56.0，45.6，43.8，39.6，36.4，28.7，28.4，26.4，25.7，25.6，24.4，23.1，22.1，21.6，20.6，18.1，17.9，12.3，-5.0，-5.1，-5.1ppm。
制備例19由中間體701制備化合物801中間體6601(0.64g)。
化合物80113C-NMRδ＝153.4，142.6，135.4，121.4，116.5，106.5，89.0，70.1，68.4，67.0，55.9，55.5，45.6，43.8，39.6，36.4，28.7，27.6，26.4，25.7，25.6，23.1，22.0，21.2，18.1，17.9，12.1，-4.9，-5.1，-5.1ppm。
制備例20由中間體702制備化合物802中間體6602(0.66g)。
化合物80213C-NMRδ＝153.4，142.9，135.3，121.5，116.3，106.5，89.1，70.1，69.0，67.1，56.0，55.4，45.8，43.8，39.5，36.4，28.8，27.3，25.7，25.6，23.2，21.7，20.8，18.1，17.9，12.1，-4.9，-5.1，-5.1ppm。
1-溴-3-羥基-3-乙基-戊炔室溫下，在10分鐘內(nèi)向3-羥基-3-乙基-1-戊炔(20mmol)的無水THF(40ml)溶液中加入正丁基鋰(42mmol，1.6M的己烷溶液)。攪拌30分鐘后，冷卻該溶液至-40℃并在20分鐘內(nèi)加入同樣冷卻至-40℃的溴(1.13ml，3.52g，22mmol)的無水THF(20ml)溶液，隨后在1小時(shí)內(nèi)重新加熱至25℃。加入乙醚和水后經(jīng)常規(guī)后處理(色譜法0％至10％乙醚的石油醚溶液)得到標(biāo)題化合物。
1-溴-3-羥基-3-甲基-1-丁炔當(dāng)3-羥基-3-甲基-1-丁炔用作上述制備例的起始原料時(shí)，產(chǎn)物為1-溴-3-羥基-3-甲基-1-丁炔。還可以由3-羥基-3-甲基-1-丁炔作為原料，在室溫下用硝酸銀(0.3當(dāng)量)的丙酮溶液處理，然后在20分鐘后用N-溴代琥珀酰亞胺(1摩爾當(dāng)量)處理。12小時(shí)后加入乙醚，過濾溶液，濾液經(jīng)常規(guī)后處理后蒸餾得到油狀物。(b.p.67℃/18mmHg)13C-NMRδ＝31.0，31.0，42.6，66.1，84.3ppm。
一般方法6(制備例21至23)[8→10]向保持在約25℃的中間體8(0.2mmol)的干燥吡咯烷(5ml)溶液中加入側(cè)鏈結(jié)構(gòu)單元(0.8mmol；4摩爾當(dāng)量)、CuI(4mg；0.1摩爾當(dāng)量)和二-三苯基膦-鈀二氯化物(7mg；0.05摩爾當(dāng)量)。在相同溫度下攪拌17小時(shí)后，在乙醚和飽和氯化銨溶液之間分配該反應(yīng)混合物，經(jīng)常規(guī)后處理得到10。
制備例21化合物1003中間體8802(66mg，0.11mmol)。
側(cè)鏈結(jié)構(gòu)單元1-溴-3-羥基-3-甲基-1-丁炔(75mg)。
化合物100313C-NMRδ＝153.4，142.7，135.4，121.4，116.3，106.5，85.6，80.4，70.1，67.2，67.0，65.4，65.2，55.8，55.4，45.7，43.8，39.2，36.4，31.0，28.8，28.0，27.2，25.7，25.6，23.3，21.7，20.3，18.1，17.9，12.2，-5.0，-5.1，-5.1ppm。
制備例22化合物1005中間體8801(114mg)。
側(cè)鏈結(jié)構(gòu)單元1-溴-3-羥基-3-乙基-1-戊炔。
化合物100513C-NMRδ＝153.4，142.4，135.5，121.4，116.5，106.5，85.0，78.5，72.5，70.1，69.3，67.0，64.9，55.8，55.6，45.7，43.7，39.5，36.4，34.1，28.6，28.3，26.3，25.7，25.6，23.1，22.0，20.7，18.1，17.9，12.2，8.3，-5.0，-5.1，-5.1ppm。
制備例23化合物1007中間體8802(118mg)。
側(cè)鏈結(jié)構(gòu)單元1-溴-3-羥基-3-乙基-1-戊炔。
化合物100713C-NMRδ＝153.4，142.7，135.4，121.4，116.3，106.5，85.0，78.8，72.5，70.1，69.2，67.0，65.4，55.8，55.4，45.7，43.8，39.2，36.4，34.1，28.8，27.9，27.1，25.7，25.6，23.3，21.7，20.2，18.1，17.9，12.2，8.3，-5.0，-5.1，-5.1ppm。
制備例24化合物536[2→5]將四溴甲烷(8789mg，2.65mmol)溶解于無水THF(9ml)中。加入三苯基膦(1800mg，6.8mmol)且在室溫下攪拌該反應(yīng)混合物30分鐘。加入化合物202(794mg，1.32mmol)和三乙胺(0.18ml；1.4mmol)的THF(8ml)溶液。在室溫下攪拌該反應(yīng)混合物90分鐘，用飽和碳酸氫鈉水溶液(15ml)淬滅該反應(yīng)并通過Decalite助濾器過濾。使用戊烷(2×25ml)洗滌濾器。濾液經(jīng)水(3×15ml)和飽和氯化鈉水溶液(15ml)萃取，干燥并真空濃縮。經(jīng)色譜法(1.5％乙醚的石油醚溶液)純化殘余物并由乙醚-甲醇結(jié)晶。
化合物5361H-NMRδ＝6.86(d，1H，J＝9.9Hz)，6.45(d，1H)，6.02(dd，1H，J＝9.9Hz和15.3Hz)，5.82(d，1H)，5.76(dd，1H，J＝8.8Hz和15.3Hz)，4.98(m，1H)，4.94(m，1H)，4.53(m，1H)，4.21(m，1H)，2.87(m，1H)，2.55(dd，1H)，2.30(bd，1H)，2.18(m，1H)，2.10-1.00(m，13H)，1.07(d，3H)，0.89(s，9H)，0.86(s，9H)，0.56(s，3H)，0.08-0.01(m，12H)ppm。
制備例25化合物538[2→5]將化合物202(599mg，1mmol)和溴代三氯代甲烷(0.095ml，1mmol)溶解于DCM(30ml)中并冷卻至-20℃。保持-20℃至-10℃，逐滴加入三(二甲基氨基)膦(0.40ml，2.2mmol)的DCM(30ml)溶液。室溫?cái)嚢?0分鐘后加入戊烷(150ml)和水(30ml)。分離有機(jī)相，用水(3x25ml)和飽和氯化鈉水溶液(25ml)洗滌，干燥，真空濃縮并經(jīng)色譜法(1％乙醚的石油醚溶液)純化。
化合物5381H-NMRδ＝6.45(d，1H)，6.34(d，1H，J＝10.3Hz)，6.10(dd，1H，J＝10.3Hz和15.0Hz)，5.82(d，1H)，5.69(dd，1H，J＝8.8Hz和15.0Hz)，4.98(m，1H)，4.94(m，1H)，4.53(m，1H)，4.21(m，1H)，2.87(m，1H)，2.55(dd，1H)，2.30(bd，1H)，2.19(m，1H)，2.10-1.13(m，13H)，1.07(d，3H)，0.89(s，9H)，0.86(s，9H)，0.56(s，3H)，0.08-0.02(m，12H)ppm。
制備例26化合物540[2→5]將環(huán)丁基三苯基鏻溴化物(516mg，1.3mmol)懸浮于無水THF(4.5ml)中并冷卻至-6℃。加入正丁基鋰(1.6M的己烷溶液，1.0ml，1.6mmol)，室溫下攪拌該反應(yīng)混合物20分鐘，然后再次冷卻至-6℃。加入化合物205(400mg，0.65mmol)和三(2-(2-甲氧基乙氧基)乙基)胺(42μl，0.13mmol)的溶液并在室溫下攪拌混合物3小時(shí)。加入水(20ml)和石油醚(100ml)。分離有機(jī)相，使用水(3×20ml)和飽和氯化鈉水溶液(20ml)洗滌，干燥，真空濃縮并經(jīng)色譜法(0.5％乙醚的石油醚溶液)純化。
化合物5401H-NMRδ＝6.46(d，1H)，6.00(d，1H，J＝15.7Hz)，5.81(d，1H)，5.33(dd，1H，J＝8.8Hz和15.7Hz)，4.98(t，1H)，4.93(t，1H)，4.53(m，1H)，4.21(m，1H)，2.87(m，1H)，2.73(m，4H)，2.55(dd，1H)，2.30(m，1H)，2.22-1.00(m，16H)，1.56(bs，3H)，1.05(d，3H)，0.89(s，9H)，0.86(s，9H)，0.56(s，3H)，0.10-0.02(m，12H)ppm。
制備例27化合物542烷基-三苯基鏻鹽環(huán)戊基-三苯基鏻溴化物(1.40g，3.4mmol)。
中間體2202(1g，1.67mmol)。
色譜純化化合物542(2％v∶v，乙醚的石油醚溶液)。
化合物5421H-NMRδ＝6.45(d，1H)，6.02(dd，1H，J＝11.1Hz和14.9Hz)，5.87(m，1H)，5.81(d，1H)，5.37(dd，1H，J＝8.8Hz和11.1Hz)，4.98(t，1H)，4.94(t，1H)，4.53(m，1H)，4.21(m，1H)，2.87(m，1H)，2.55(dd，1H)，2.37-2.24(m，5H)，2.20-1.86(m，4H)，1.83-0.80(m，14H)，1.05(d，3H)，0.90(s，9H)，0.86(s，9H)，0.56(s，3H)，0.08-0.03(m，12H)ppm。
制備例28化合物544烷基-三苯基鏻鹽環(huán)己基-三苯基鏻溴化物(1.44g，3.4mmol)。
中間體2202(1g，1.67mmol)。
色譜純化化合物544(2％v∶v，乙醚的石油醚溶液)。
化合物5441H-NMRδ＝6.45(d，1H)，6.20(dd，1H，J＝10.7Hz和14.9Hz)，5.81(d，1H)，5.70(d，1H，J＝10.7Hz)，5.43(dd，1H，J＝8.4Hz和14.9Hz)，4.97(m，1H)，4.93(m，1H)，4.53(m，1H)，4.21(m，1H)，2.86(m，1H)，2.56(dd，1H)，2.35-0.80(m，25H)，1.04(d，3H)，0.89(s，9H)，0.86(s，9H)，0.56(s，3H)，0.08-0.02(m，12H)ppm。
制備例29化合物546烷基-三苯基鏻鹽環(huán)丙基-三苯基鏻溴化物(766mg，2mmol)。
中間體1化合物103(573g，1mmol)。
經(jīng)色譜法純化(2％v∶v，乙醚的石油醚溶液)得到1(S)，3(R)-二(叔丁基二甲基硅氧基)-20(R)-亞環(huán)丙基甲基-9，10-斷-孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯(化合物546)。
化合物54613C-NMRδ＝153.4，143.3，135.0，125.0，121.6，117.7，116.1，106.4，70.1，67.0，56.8，56.0，45.7，43.8，39.7，39.6，36.4，28.8，27.1，25.7，25.6，23.3，21.9，20.7，18.0，17.9，12.2，1.8，1.7，-4.9，-5.0，-5.1，-5.1ppm。
制備例30化合物548烷基-三苯基鏻鹽環(huán)丙基-三苯基鏻溴化物(606mg，1.6mmol)。
中間體1化合物101(458g，0.8mmol)。
經(jīng)色譜法純化(2％v∶v，乙醚的石油醚溶液)得到1(S)，3(R)-二(叔丁基二甲基硅氧基)-20(S)-亞環(huán)丙基甲基-9，10-斷-孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯(化合物548)。
化合物54813C-NMRδ＝153.4，143.2，135.1，124.4，121.6，118.2，116.2，106.4，70.1，67.0，56.6，56.3，45.7，43.8，40.2，39.6，36.4，28.8，27.4，25.7，25.6，23.4，22.1，20.3，18.1，17.9，12.0，2.2，1.7，-4.9，-5.0，-5.1ppm。
制備例31化合物550向保持在約-70℃的鋰-衍生物302(由前體24-二苯基氧膦基-1(S)，3(R)-二-TBS-氧-9，10-斷-膽-5(E)，7(E)，10(19)，22(E)-四烯(0.21g，0.27mmol)和正丁基鋰(0.55ml)制備)的無水THF(2ml)溶液中逐滴加入二乙酮(0.03ml)的無水THF(0.3ml)溶液。在相同溫度下攪拌30分鐘后，在室溫下保持該反應(yīng)混合物2小時(shí)，使用濕的THF淬滅反應(yīng)后在乙醚和水之間分配，并經(jīng)常規(guī)后處理得到化合物5501H-NMRδ(CDCl3)＝6.45(d，1H)，6.18(dd，1H)，5.81(d，1H)，5.71(d，1H)，5.43(dd，1H)，4.98(m，1H)，4.93(m，1H)，4.53(m，1H)，4.21(m，1H)，2.87(d，1H)，2.54(dd，1H)，2.30(bd，1H)，2.20-1.10(m，18H)，1.05(d，3H)，1.00(m，6H)，0.88(s，9H)，0.86(s，9H)，0.56(s，3H)，0.05(bs，12H)ppm。
制備例32化合物303向24-二苯基氧膦基-1(S)，3(R)-二-TBS-氧-9，10-斷-膽-5(E)，7(E)，10(19)，22(E)-四烯(參見制備例33)(2.4g，3.1mmol)的DCM(5ml)溶液中加入液態(tài)二氧化硫(10ml)并在干冰浴中快速冷卻?；亓鲾嚢柙摶旌衔?0分鐘(干冰指形冷凝管冷凝)，無需進(jìn)一步冷卻，真空除去溶劑后由乙醚結(jié)晶產(chǎn)物得到主要的異構(gòu)體24-二苯基氧膦基-1(S)，3(R)-二-TBS-氧-9，10-斷-膽-5(E)，7(E)，10(19)，22(E)-四烯的二氧化硫加成物1H-NMRδ(CDCl3)＝7.80-7.65(m，4H)，7.55-7.40(m，6H)，5.34(m，2H)，4.60(m，2H)，4.36(m，1H)，4.18(m，1H)，3.92(m，1H)，3.58(bd，1H)，3.04(m，2H)，2.56(m，1H)，2.14(bd，1H)，2.05-1.00(m，15H)，0.88(d，3H)，0.87(bs，18H)，0.55(s，3H)，0.05(bs，12H)ppm。
向攪拌中的保持在約5℃的該加成物(1.8g，2.1mmol)的干燥DCM(30ml)溶液中逐滴加入三氟化硼乙醚化物(1.2ml)。保持3-5℃16小時(shí)后，加入5％碳酸氫鈉水溶液，隨后用乙醚稀釋并進(jìn)行常規(guī)后處理(色譜法25％v∶v丙酮的DCM溶液)得到作為主要產(chǎn)物的一種異構(gòu)體24-二苯基氧膦基-3(R)-羥基-1(S)-TBS-氧-9，10-斷-膽-5(E)，7(E)，10(19)，22(E)-四烯二氧化硫加成物1H-NMRδ(CDCl3)＝7.75-7.67(m，4H)，7.48-7.42(m，6H)，5.34(m，2H)，4.68(m，2H)，4.36(bt，1H)，4.21(m，1H)，3.92(bd，1H)，3.58(bd，1H)，3.04(m，2H)，2.57(m，1H)，2.24(bd，1H)，2.00-0.95(m，16H)，0.89(d，3H)，0.87(s，9H)，0.54(s，3H)，0.08(s，3H)，0.07(s，3H)ppm。
攪拌中，于約5℃，使用Dess-Martin periodinane(0.5g)處理該醇(0.61g，0.84mmol)的干燥DCM(10ml)溶液。30分鐘后加入5％碳酸氫鈉水溶液和10％硫代硫酸鈉水溶液并持續(xù)攪拌10分鐘，隨后用乙醚稀釋并進(jìn)行常規(guī)后處理(色譜法25％v∶v丙酮的DCM溶液)得到24-二苯基氧膦基-3-氧代-1(S)-TBS-氧-9，10-斷-膽-5(E)，7(E)，10(19)，22(E)-四烯二氧化硫加成物的一種異構(gòu)體。將該酮(0.53g，0.72mmol)溶解于THF-甲醇(2+5ml)中并在冰浴上、在攪拌的條件下用硼氫化鈉(43mg)處理。還原完全(15分鐘)后，在乙酸乙酯和水之間分配該反應(yīng)混合物。
經(jīng)常規(guī)后處理(不進(jìn)行色譜處理)得到3(S)-羥基化合物與少量已描述的3(R)-羥基化合物的混合物。將該產(chǎn)物在包含懸浮的碳酸氫鈉(1.2g)的甲苯(10ml)/水(10ml)中加熱回流。冷卻后，在乙醚和水之間分配，隨后經(jīng)常規(guī)后處理(不進(jìn)行色譜處理)得到24-二苯基氧膦基-3(S)-羥基-1(S)-TBS-氧-9，10-斷-膽-5(E)，7(E)，10(19)，22(E)-四烯與少量3(R)-羥基化合物的混合物。用9-乙酰基-蒽(0.02g)和DCM經(jīng)一般方法7(不進(jìn)行色譜處理)處理該產(chǎn)物生成5(Z)-異構(gòu)體。向攪拌中的冰冷卻的該產(chǎn)物的干燥DCM(10ml)溶液和2，6-二甲基吡啶(0.2ml)的溶液中加入TBS三氟甲磺酸酯(0.3ml)，反應(yīng)1小時(shí)后，在水和乙醚之間分配該混合物，并經(jīng)常規(guī)后處理(色譜法25％v∶v丙酮的DCM溶液)得到24-二苯基氧膦基-1(S)，3(S)-二-TBS-氧-9，10-斷-膽-5(E)，7(E)，10(19)，22(E)-四烯1H-NMRδ(CDCl3)＝7.80-7.65(m，4H)，7.50-7.40(m，6H)，6.23(d，1H)，5.94(d，1H)，5.37(bt，1H)，5.34(m，2H)，4.91(bt，1H)，3.93(m，1H)，3.68(m，1H)，3.05(m，2H)，2.78(dd，1H)，2.41(bd，1H)，2.25-0.90(m，15H)，0.93(s，9H)，0.87(s，9H)，0.86(d，3H)，0.46(s，3H)，0.10(s，3H)，0.07(s，3H)，0.06(s，3H)，0.05(s，3H)ppm。
需要時(shí)，通過將正丁基鋰(1.6M的己烷溶液，1摩爾當(dāng)量)滴加到攪拌中的保持在約-70℃的無水THF溶液中并在相同的溫度下保持15分鐘由該前體制備鋰-衍生物303。
制備例33化合物302室溫下，向攪拌的1(S)，3(R)-二-TBS-氧-9，10-斷-膽-5(E)，7(E)，10(19)，22(E)-四烯-24-醇(1.17g，1.94mmol)的無水THF(15ml)溶液中加入三光氣(0.43g)且隨后逐滴加入吡啶(0.5ml)。在相同的溫度下90分鐘后，在水和乙醚之間分配該混合物并經(jīng)常規(guī)后處理(色譜法1％v∶v乙醚的石油醚溶液)得到24-氯-1(S)，3(R)-二-TBS-氧-9，10-斷-膽-5(E)，7(E)，10(19)，22(E)-四烯13C-NMRδ(CDCl3)＝153.5，142.8，141.8，135.4，123.5，121.5，116.4，106.4，70.0，67.0，56.2，55.7，45.7，45.5，43.8，40.2，39.6，36.4，28.7，27.4，25.7，25.6，23.3，22.0，19.9，18.1，17.9，12.1，-5.0，-5.1ppm。
向攪拌的、保持在約-70℃的該氯化物(0.81g)的無水THF(7ml)溶液中逐滴加入二苯基磷化鋰(0.4M的無水THF溶液，3.5ml)溶液。然后加入數(shù)滴水，隨后升至室溫并真空濃縮得到油狀物。將其置于DCM(15ml)中并與5％過氧化氫(水溶液，12ml)一起劇烈攪拌30分鐘。在水和乙醚之間分配該混合物并經(jīng)常規(guī)后處理(色譜法66％v∶v乙酸乙酯的石油醚溶液)得到24-二苯基氧膦基-1(S)，3(R)-二-TBS-氧-9，10-斷-膽-5(E)，7(E)，10(19)，22(E)-四烯1H-NMRδ(CDCl3)＝7.8-7.6(m，4H)，7.5-7.4(m，6H)，6.42(d，1H)，5.77(d，1H)，5.45-5.25(m，2H)，4.96(bs，1H)，4.92(bs，1H)，4.52(m，1H)，4.20(m，1H)，3.07(d，1H)，3.02(d，1H)，2.84(bd，1H)，2.55(dd，1H)，2.27(bd，1H)，2.05-0.90(m，14H)，0.88(s，9H)，0.87(d，3H)，0.86(s，9H)，0.47(s，3H)，0.05(s，12H)ppm。
需要時(shí)，通過將正丁基鋰(1.6M的己烷溶液，1摩爾當(dāng)量)滴加到攪拌中的保持在約-70℃的無水THF溶液中并在相同的溫度下保持15分鐘由該前體制備鋰-衍生物302。
制備例34化合物534向保持在約-70℃的鋰-衍生物302(由前體24-二苯基氧膦基-1(S)，3(R)-二-TBS-氧-9，10-斷-膽-5(E)，7(E)，10(19)，22(E)-四烯(0.71g，0.88mmol)和正丁基鋰(0.55ml)制備)的無水THF(8ml)溶液中逐滴加入六氟丙酮(1ml約1M的無水THF溶液)。在相同溫度下攪拌30分鐘后，在室溫下保持該反應(yīng)混合物4小時(shí)，隨后使用濕的THF淬滅反應(yīng)，在水和乙醚之間分配該混合物并經(jīng)常規(guī)后處理(色譜法5％v∶v乙醚的石油醚溶液)得到化合物53413C-NMRδ(CDCl3)＝157.3，153.5，142.3，142.2，135.6，121.5，121.4，121.3，120.5，116.6，106.5，70.0，67.0，56.0，55.3，46.0，43.8，40.9，40.2，36.4，28.7，27.4，25.7，25.6，23.2，22.1，19.4，18.1，17.9，12.1，-4.9，-5.0，-5.1，-5.1ppm。
制備例35化合物205[1→2]將化合物101(5.00g，8.7mmol)、1-(三苯基亞膦基(phosphoranylidene))-2-丙酮(8.32g，26.1mmol)和甲苯(100ml)的混合物在110℃下攪拌18小時(shí)。冷卻該反應(yīng)混合物至室溫，過濾并真空濃縮。將殘余物溶解于戊烷(75ml)中，室溫?cái)嚢?5分鐘并經(jīng)Decalite助濾器過濾。真空濃縮濾液并經(jīng)色譜法(0-5％v∶v乙醚的石油醚溶液)純化。
化合物2051H-NMRδ＝6.66(dd，1H，J＝8.8Hz和16.1Hz)，6.44(d，1H)，6.00(d，1H，J＝16.1Hz)，5.81(d，1H)，4.98(m，1H)，4.93(m，1H)，4.53(m，1H)，4.21(m，1H)，2.88(m，1H)，2.54(dd，1H)，2.38-2.16(m，2H)，2.22(s，3H)，2.10-1.85(m，3H)，1.82-1.18(m，10H)，1.11(d，3H)，0.89(s，9H)，0.86(s，9H)，0.57(s，3H)，0.08-0.02(m，12H)。
一般方法7(制備例101→126，128)[a→b(B＝CH2)]將a型5E-維生素D中間體(0.1mmol)、三線態(tài)敏化劑(0.01g)和三乙胺(0.05ml)在5ml溶劑中的溶液置于Pyrex燒瓶中，在約20℃下經(jīng)高壓紫外燈(TQ180Z2型(Hanau))的光線照射30分鐘(根據(jù)中間體a的量按比例增減時(shí)間)。真空部分濃縮反應(yīng)混合物(使用蒽時(shí)，先過濾)并經(jīng)色譜法純化得到b型中間體。
制備例101化合物519a型中間體501(1.29g，2.06mmol)。
敏化劑蒽(0.65g)。
溶劑DCM(100ml)。
照射使用TQ718Z2燈照射35分鐘。
化合物5191H-NMRδ＝6.23(d，1H)，6.13(dd，1H，J＝11.1Hz和14.9Hz)，6.00(d，1H)，5.75(d，1H，＝11.1Hz)，5.40(dd，1H，J＝8.8Hz和14.9Hz)，5.17(m，1H)，4.85(m，1H)，4.36(m，1H)，4.18(m，1H)，2.82(m，1H)，2.44(dd，1H)，2.21(dd，1H)，2.11(m，1H)，1.74(bs，3H)，1.73(bs，3H)，2.03-1.14(m，13H)，1.04(d，3H)，0.87(s，18H)，0.55(s，3H)，0.05(m，12H)ppm。
制備例102化合物521a型中間體502(63mg)。
敏化劑9-乙酰基-蒽。
溶劑DCM。
化合物5211H-NMR與結(jié)構(gòu)相符。
制備例103化合物523a型中間體503(0.38g)。
敏化劑蒽(0.32g)。
溶劑DCM。
經(jīng)色譜法(0.5％v∶v，乙醚的石油醚溶液)純化化合物523。
化合物5231H-NMRδ＝6.22(d，J＝11.2Hz，1H)，6.11(dd，J＝14.9Hz，J＝10.7Hz，1H)，6.00(d，J＝11.2Hz，1H)，5.76(d，J＝10.7Hz，1H)，5.41(dd，J＝9.6Hz，J＝14.9Hz，1H)，5.17(m，1H)，4.86(m，1H)，4.36(m，1H)，4.18(m，1H)，2.80(m，1H)，2.43(dd，J＝3.8Hz，J＝13.0Hz，1H)，2.20(dd，J＝7.5Hz，J＝13.0Hz，1H)，2.15-1.0(m，14H)，1.75(bs，3H)，1.72(bs，3H)，0.93(d，J＝6.5Hz，3H)，0.87(s，9H)，0.86(s，9H)，0.49(s，3H)，0.05(bs，12H)ppm。
制備例104化合物524a型中間體504(61mg)。
敏化劑蒽(0.05g)。
溶劑DCM。
經(jīng)色譜法(0-2％v∶v，乙醚的石油醚溶液)純化化合物524。
化合物5241H-NMRδ＝6.33(bd，J＝10.3Hz，1H)，6.22(d，J＝11.2Hz，1H)，6.11(dd，J＝10.3Hz，J＝15.3Hz，1H)，6.01(d，J＝11.2Hz，1H)，5.55(dd，J＝15.3Hz，J＝8.8Hz，1H)，5.17(bs，1H)，4.86(bs，1H)，4.18(m，1H)，2.81(m，1H)，2.44(m，1H)，2.25-1.0(m，20H)，1.06(d，J＝6.8Hz，3H)，0.87(s，18H)，0.55(s，3H)，0.05(bs，12H)ppm。
制備例105化合物525a型中間體505(0.24g)。
敏化劑蒽(0.23g)。
溶劑DCM。
經(jīng)色譜法(0-2％v∶v，乙醚的石油醚溶液)純化化合物525。
化合物5251H-NMRδ＝6.35(bd，J＝10.3Hz，1H)，6.22(bd，J＝11.5Hz，1H)，6.08(dd，J＝10.3Hz，J＝15.4Hz，1H)，6.00(d，J＝11.5Hz，1H)，5.55(dd，J＝9.4Hz，J＝15.4Hz，1H)，5.17(bd，1H)，4.86(bd，1H)，4.36(m，1H)，4.18(m，1H)，2.80(bd，J＝12.2Hz，1H)，2.43(dd，J＝3.6，J＝13.0Hz，1H)，2.20(dd，J＝7.3Hz，J＝13.0Hz，1H)，2.15-1.0(m，18H)，0.97(d，J＝6.8Hz，3H)，0.87(s，9H)，0.87(s，9H)，0.50(s，3H)，0.05(bs，12H)ppm。
制備例106化合物526a型中間體506(0.4g)。
敏化劑蒽(0.34g)。
溶劑DCM。
經(jīng)色譜法(0.5％v∶v，乙醚的石油醚溶液)純化化合物526。
化合物5261H-NMRδ＝6.22(d，J＝11.2Hz，1H)，6.00(d，J＝11.2Hz，1H)，5.84(dd，J＝15Hz，3＝10.7Hz，1H)，5.65(m，1H)，5.34(dd，J＝15Hz，J＝8.7Hz，1H)，5.17(bs，1H)，4.85(bs，1H)，4.36(m，1H)，4.18(m，1H)，2.69(m，5H)，2.44(m，1H)，2.25-1.10(m，17H)，1.03(d，J＝6.7Hz，3H)，0.87(s，18H)，0.54(s，3H)，0.05(bs，12H)ppm。
制備例107化合物527a型中間體507(0.38g)。
敏化劑蒽(0.32g)。
溶劑DCM。
經(jīng)色譜法(0.5％v∶v，乙醚的石油醚溶液)純化化合物527。
化合物52713C-NMRδ＝148.2，142.3，140.9，137.5，134.7，123.5，123.0，120.9，117.6，110.9，71.9，67.3，56.7，56.0，45.8，45.7，44.6，40.6，39.7，31.0，29.7，28.7，27.1，25.7，25.6，23.2，21.8，21.3，18.0，17.9，16.9，12.0，-4.9，-5.0，-5.3ppm。
制備例108化合物528a型中間體510(0.15g)。
敏化劑9-乙酰基-蒽(0.02g)。
溶劑DCM。
化合物5281H-NMR與結(jié)構(gòu)相符。
制備例109化合物529a型中間體511(24mg，0.04mmol)。
敏化劑9-乙酰基-蒽。
溶劑甲苯。
化合物5291H-NMR與結(jié)構(gòu)相符。
制備例110化合物530a型中間體514(125mg，0.2mmol)。
敏化劑9-乙酰基-蒽。
溶劑DCM。
化合物5301H-NMR與結(jié)構(gòu)相符。
制備例111化合物531a型中間體515(17mg)。
敏化劑蒽(0.01g)。
溶劑甲苯(2ml)。
化合物5311H-NMR與結(jié)構(gòu)相符。
制備例112化合物532a型中間體516(90mg)。
敏化劑9-乙?；?蒽。
溶劑DCM。
化合物5321H-NMR與結(jié)構(gòu)相符。
制備例113化合物533a型中間體517(0.10g，0.16mmol)。
敏化劑9-乙?；?蒽。
溶劑DCM。
化合物5331H-NMRδ＝6.23(d，1H)，6.03(d，1H，J＝15.6Hz)，6.01(d，1H)，5.88(dd，1H，J＝8.4Hz和15.6Hz)，5.17(m，1H)，4.86(m，1H)，4.78(m，1H)，4.72(m，1H)，4.37(m，1H)，4.18(m，1H)，2.83(m，1H)，2.45(dd，1H)，2.30-2.06(m，2H)，2.05-1.95(m，2H)，1.07(d，3H)，0.87(s，18H)，1.93-0.80(m，12H)，0.67(m，2H)，0.56(s，3H)，0.41(m，2H)，0.05(m，6H)，0.04(m，6H)ppm。
制備例114化合物520a型中間體518(57mg)。
敏化劑蒽(0.05g)。
溶劑DCM。
經(jīng)色譜法(0.5％v∶v，乙醚的石油醚溶液)純化化合物520。
化合物5201H-NMRδ＝6.87(d，J＝9.9Hz，1H)，6.22(d，J＝11.2Hz，1H)，6.00(d，J＝11.2Hz，1H)，6.01(dd，J＝9.9Hz，J＝15.3Hz，1H)，5.81(dd，J＝15.3Hz，J＝9.5Hz，1H)，5.17(bm，1H)，4.85(bm，1H)，4.36(m，1H)，4.19(m，1H)，2.81(bm，1H)，2.44(dd，1H)，2.2-1.0(m，15H)，0.95(d，J＝6.6Hz，3H)，0.87(bs，18H)，0.50(s，3H)，0.05(bs，12H)ppm。
制備例115化合物1002a型中間體1001(104mg，0.17mmol)。
敏化劑9-乙?；?蒽。
溶劑叔丁基甲基醚。
化合物10021H-NMR與結(jié)構(gòu)相符。
制備例116化合物1004a型中間體1003(41mg)。
敏化劑9-乙?；?蒽(10mg)。
溶劑甲苯(4ml)。
化合物10041H-NMRδ＝6.23(d，1H)，6.00(d，1H)，5.17(m，1H)，4.85(m，1H)，4.37(m，1H)，4.18(m，1H)，2.82(m，1H)，2.44(dd，1H)，1.52(s，6H)，1.17(d，3H)，0.87(s，18H)，2.38-0.80(m，16H)，0.56(s，3H)，0.05(s，6H)，0.04(s，6H)ppm。
制備例117化合物1006a型中間體1005(70mg，0.1mmol)。
敏化劑蒽(80mg)。
溶劑DCM。
化合物100613C-NMRδ＝148.1，140.0，135.2，122.8，118.0，111.0，85.1，78.4，72.5，71.7，69.3，67.3，64.8，55.7，55.5，45.8，45.5，44.6，39.5，34.1，28.6，28.3，26.4，25.6，25.6，23.0，21.9，20.7，18.0，17.9，12.2，8.3，-4.9，-5.0，-5.3ppm。
制備例118化合物1008a型中間體1007(68mg，0.1mmol)。
敏化劑9-乙?；?蒽。
溶劑DCM。
化合物10081H-NMRδ＝6.23(d，1H)，6.00(d，1H)，5.17(m，1H)，4.85(m，1H)，4.37(m，1H)，4.18(m，1H)，2.83(m，1H)，2.44(dd，1H)，1.17(d，3H)，1.03(t，6H)，0.87(s，18H)，2.38-0.80(m，20H)，0.56(s，3H)，0.05(m，6H)，0.04(m，6H)ppm。
制備例119化合物537a型中間體536(150mg)。
敏化劑蒽(0.112g)。
溶劑DCM。
經(jīng)色譜法(0-2％v∶v，乙醚的石油醚溶液)純化化合物537。
化合物5371H-NMR與結(jié)構(gòu)相符。
制備例120化合物539a型中間體538(76mg)。
敏化劑蒽(60mg)。
溶劑DCM。
經(jīng)色譜法(0-2％v∶v，乙醚的石油醚溶液)純化化合物539。
化合物5391H-NMRδ＝6.34(d，1H，J＝10.3Hz)，6.22(d，1H)，6.09(dd，1H，J＝10.3Hz和14.9Hz)，6.01(d，1H)，5.69(dd，1H，＝8.8Hz和14.9Hz)，5.17(m，1H)，4.85(d，1H)，4.36(m，1H)，4.18(m，1H)，2.82(m，1H)，2.44(dd，1H)，2.25-2.10(m，2H)，2.05-1.10(m，13H)，1.06(d，3H)，0.87(s，9H)，0.87(s，9H)，0.55(s，3H)，0.07-0.03(m，12H)ppm。
制備例121化合物541a型中間體540(120mg)。
敏化劑蒽(115mg)。
溶劑DCM。
經(jīng)色譜法(0-2％v∶v，乙醚的石油醚溶液)純化化合物541。
化合物5411H-NMRδ＝6.23(d，1H)，6.00(d，1H)，5.99(d，1H，J＝15.6Hz)，5.33(dd，1H，J＝8.8Hz和15.6Hz)，5.17(m，1H)，4.85(bd，1H)，4.36(m，1H)，4.18(m，1H)，2.87-2.60(m，5H)，2.44(dd，1H)，2.21(dd，1H)，2.16-1.10(m，16H)，1.55(bs，3H)，1.04(d，3H)，0.87(bs，18H)，0.55(s，3H)，0.07-0.03(m，12H)ppm。
制備例122化合物543a型中間體542(300mg)。
敏化劑蒽(200mg)。
溶劑DCM。
經(jīng)色譜法(0-2％v∶v，乙醚的石油醚溶液)純化化合物543。
化合物5431H-NMRδ＝6.23(d，1H)，6.01(d，1H)，6.01(dd，1H，J＝1.1Hz和14.9Hz)，5.86(m，1H)，5.36(dd，1H，J＝8.8Hz和14.9Hz)，5.16(m，1H)，4.85(d，1H)，4.36(m，1H)，4.18(m，1H)，2.82(m，1H)，2.44(dd，1H)，2.37-0.80(m，23H)，1.04(d，3H)，0.87(s，18H)，0.55(s，3H)，0.07-0.03(m，12H)ppm。
制備例123化合物545a型中間體544(214mg)。
敏化劑蒽(150mg)。
溶劑DCM。
經(jīng)色譜法(0-2％v∶v，乙醚的石油醚溶液)純化化合物543。
化合物5451H-NMRδ＝6.23(d，1H)，6.19(dd，1H，J＝10.7Hz和14.9Hz)，6.00(d，1H)，5.69(d，1H，J＝10.7Hz)，5.43(dd，1H，J＝8.4Hz和14.9Hz)，5.17(m，1H)，4.85(d，1H)，4.36(m，1H)，4.18(m，1H)，2.81(m，1H)，2.44(dd，1H)，2.32-0.80(m，25H)，1.04(d，3H)，0.87(s，18H)，0.54(s，3H)，0.07-0.03(m，12H)ppm。
制備例124化合物547a型中間體546(217mg)。
敏化劑蒽(214mg)。
溶劑DCM。
經(jīng)色譜法(0-2％v∶v，乙醚的石油醚溶液)純化得到1(S)，3(R)-二(叔-丁基二甲基硅氧基)-20(R)-亞環(huán)丙基甲基-9，10-斷-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物547)。
化合物547；1H-NMRδ＝6.22(d，1H)，6.00(d，1H)，5.62(m，1H)，5.17(m，1H)，4.86(bd，1H)，4.36(m，1H)，4.18(m，1H)，2.79(m，1H)，2.44(dd，1H)，2.28(m，1H)，2.20(dd，1H)，2.02-0.80(m，17H)，0.96(d，3H)，0.87(s，9H)，0.87(s，9H)，0.45(s，3H)，0.09-0.02(m，12H)ppm。
制備例125化合物549a型中間體546(175mg)。
敏化劑蒽(157mg)。
溶劑DCM。
經(jīng)色譜法(0-2％v∶v，乙醚的石油醚溶液)純化得到1(S)，3(R)-二(叔丁基二甲基硅氧基)-20(S)-亞環(huán)丙基甲基-9，10-斷-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物549)。
化合物5491H-NMRδ＝6.23(d，1H)，6.01(d，1H)，5.61(m，1H)，5.17(m，1H)，4.86(bd，1H)，4.37(m，2H)，4.19(m，1H)，2.82(m，1H)，2.44(dd，1H)，2.32(m，1H)，2.21(dd，1H)，2.06-0.80(m，17H)，1.07(d，3H)，0.87(s，9H)，0.87(s，9H)，0.56(s，3H)，0.07-0.03(m，12H)ppm。
制備例126化合物551a型中間體550(0.07g)。
敏化劑9-乙?；?蒽(0.01g)。
溶劑DCM(7ml)。
化合物5511H-NMR(CDCl3)δ＝6.22(d，1H)，6.17(dd，1H)，6.00(d，1H)，5.70(d，1H)，5.43(dd，1H)，5.16(bd，1H)，4.85(bd，1H)，4.36(m，1H)，4.18(m，1H)，2.79(dd，1H)，2.43(dd，1H)，2.25-1.15(m，19H)，1.04(d，3H)，1.00(m，6H)，0.86(bs，18H)，0.54(s，3H)，0.05(bs，12H)ppm。
制備例127化合物552向保持在約-70℃的鋰-衍生物303(由前體24-二苯基氧膦基-1(S)，3(S)-二-TBS-氧-9，10-斷-膽-5(E)，7(E)，10(19)，22(E)-四烯(0.13g，0.16mmol)和正丁基鋰(0.1ml)制備)的無水THF(2ml)溶液中逐滴加入二乙基酮(0.025ml)的無水THF(0.25ml)溶液。在相同溫度下攪拌30分鐘后，該反應(yīng)混合物在室溫下保持2小時(shí)，然后在40℃保持1小時(shí)，隨后使用濕的THF淬滅反應(yīng)，在水和乙醚之間分配并經(jīng)常規(guī)后處理(色譜法20％v∶v甲苯的石油醚溶液)得到化合物5521H-NMR與結(jié)構(gòu)相符。
制備例128化合物535a型中間體534(0.09g)。
敏化劑9-乙?；?蒽(0.01g)。
溶劑DCM(7ml)。
化合物5351H-NMR(CDCl3)δ＝6.96(d，1H)，6.43(t，1H)，6.22(d，1H)，6.19(dd，1H)，6.01(d，1H)，5.15(m，1H)，4.84(d，1H)，4.36(m，1H)，4.18(m，1H)，2.82(d，1H)，2.41(dd，1H)，2.40-2.15(m，2H)，2.0-1.15(m，13H)，1.15(d，3H)，0.87(s，9H)，0.86(s，9H)，0.57(s，3H)，0.05(s，6H)，0.04(s，6H)ppm。
一般方法8(實(shí)施例4、14-18、23、25-27、29和36)向保持在約25℃的適當(dāng)甲硅烷基保護(hù)的中間體(約0.1mmol)的乙酸乙酯溶液(約0.3ml)和乙腈(4ml)的混合物中加入(通過塑料滴管)40％氫氟酸水溶液(0.5ml，約10mmol)。在相同溫度下劇烈攪拌1小時(shí)后，將反應(yīng)混合物在乙酸乙酯和3N氫氧化鈉(與pH試紙呈堿性反應(yīng))溶液之間分配，然后經(jīng)常規(guī)后處理得到化合物I。
一般方法9(實(shí)施例1-3、5-13、28、30-33)向適當(dāng)甲硅烷基保護(hù)的中間體(0.1mmol)的THF(4ml)溶液中加入固體TBA-氟化物三水合物(0.13g，約0.4mmol)，并加熱該溶液至60℃保持1小時(shí)。冷卻后(當(dāng)在放大工藝中THF體積超過30ml時(shí)，真空部分濃縮)，加入0.2M碳酸氫鈉水溶液和乙酸乙酯。經(jīng)常規(guī)后處理得到混合物I。
實(shí)施例11(S)，3(R)-二羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物1)在氬氣中，于60℃加熱519(2.1g，3.36mmol)和四正丁基氟化銨三水合物(5.42g，17.2mmol)的四氫呋喃(70ml)溶液60分鐘。冷卻并真空濃縮后，在乙酸乙酯和碳酸氫鈉水溶液之間分配該反應(yīng)混合物。有機(jī)相經(jīng)水和鹽水洗滌，干燥并濃縮。殘余物經(jīng)色譜法(50％乙酸乙酯的石油醚溶液)純化。真空濃縮包含標(biāo)題化合物的級(jí)分得到油狀物，在甲酸甲酯中得無色結(jié)晶。化合物113C-NMRδ＝147.7，143.1，138.2，132.9，132.8，125.3，125.0，124.3，17.1，111.8，70.8，66.9，56.4，45.9，45.3，42.9，40.5，40.4，29.1，27.8，25.9，23.6，22.3，20.8，18.2，12.3ppm。
實(shí)施例21(S)，3(R)-二羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(Z)，24-五烯(化合物2)甲硅烷基保護(hù)的中間體521(32mg，0.05mmol)。
化合物213C-NMRδ＝147.7，143.1，136.0，134.8，132.9，125.0，121.9，120.6，117.1，111.7，70.8，66.9，56.6，56.4，45.9，45.3，42.9，40.5，34.7，29.1，27.4，26.4，23.6，22.3，20.8，18.1，12.4ppm。
實(shí)施例31(S)，3(R)-二羥基-9，10-斷-20(S)-膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物3)甲硅烷基保護(hù)的中間體523(135mg，0.22mmol)。
經(jīng)色譜法(40％v∶v，乙酸乙酯的石油醚溶液)純化化合物3。
化合物313C-NMRδ＝147.7，143.4，138.6，132.8，132.5，125.3，125.0，124.3，116.9，111.8，70.9，66.9，56.9，56.2，46.0，45.3，42.9，40.9，39.7，29.1，27.3，25.9，23.5，22.1，21.5，18.3，12.2ppm。
實(shí)施例41(S)，3(R)-二羥基-9，10-斷-26，27-環(huán)-膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物4)甲硅烷基保護(hù)的中間體524(36mg)。
經(jīng)色譜法(50％v∶v，乙酸乙酯的石油醚溶液)純化化合物4。
化合物41H-NMRδ＝6.37(d，J＝11Hz，1H)，6.34(bd，J＝10Hz，1H)，6.11(dd，J＝10Hz，J＝15Hz，1H)，6.01(d，J＝11Hz，1H)，5.56(dd，J＝9Hz，J＝15Hz，1H)，5.32(bs，1H)，5.00(bs，1H)，4.43(m，1H)，4.23(m，1H)，2.83(dd，J＝4Hz，J＝11Hz，1H)，2.59(dd，J＝4Hz，J＝13Hz 1H)，2.31(dd，J＝6Hz，J＝13Hz，1H)，2.2-1.2(m，16H)，1.10(m，4H)，1.07(d，J＝7Hz，3H)，0.58(s，3H)ppm。
實(shí)施例51(S)，3(R)-二羥基-9，10-斷-26，27-環(huán)-20(S)-膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)24-五烯(化合物5)甲硅烷基保護(hù)的中間體525(165mg，0.26mmol)。
經(jīng)色譜法(50％v∶v，乙酸乙酯的石油醚溶液)純化化合物5。
化合物513C-NMRδ＝147.7，143.2，139.5，132.9，127.1，125.0，123.9，119.1，117.0，111.8，70.8，66.8，56.9，56.2，46.0，45.3，42.9，40.7，39.8，29.1，27.3，23.5，22.1，21.3，12.3，2.4，2.2ppm。
實(shí)施例61(S)，3(R)-二羥基-9，10-斷-26，27-橋亞甲基-膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物6)甲硅烷基保護(hù)的中間體526(348mg，0.55mmol)。
用甲酸甲酯從粗產(chǎn)物中直接結(jié)晶分離，省略色譜法步驟。
化合物613C-NMRδ＝147.6，143.1，142.8，137.2，133.0，125.0，123.9，121.0，117.1，111.8，70.8，66.9，56.4，56.4，45.9，45.3，42.9，40.4，40.4，31.3，29.9，29.1，27.8，23.6，22.2，20.8，17.2，12.3ppm。
實(shí)施例71(S)，3(R)-二羥基-9，10-斷-26，27-橋亞甲基-20(S)-膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物7)甲硅烷基保護(hù)的中間體527(150mg，0.23mmol)。
經(jīng)色譜法(40％v∶v，乙酸乙酯的石油醚溶液)純化化合物7。
化合物713C-NMRδ＝147.7，143.3，142.6，137.6，132.8，125.0，123.8，121.1，116.9，111.8，70.9，66.9，56.9，56.2，46.0，45.3，42.9，40.8，39.8，31.3，29.9，29.1，27.3，23.5，22.1，21.5，17.1，12.2ppm。
實(shí)施例81(S)，3(R)，26-三羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24(E)-五烯(化合物9)甲硅烷基保護(hù)的中間體528(148mg，0.23mmol)。
用甲酸甲酯結(jié)晶純化化合物9
化合物91H-NMR(在六氘代丙酮中)δ＝6.29(d，1H)，6.25(dd，1H，J＝11.1Hz和15.1Hz)，6.09(d，1H)，5.99(d，1H，J＝11.1Hz)，5.52(dd，1H，J＝8.8Hz和15.1Hz)，5.31(m，1H)，4.86(m，1H)，4.39(m，1H)，4.17(m，1H)，3.96(d，2H)，3.86(d，OH)，3.68(t，OH)，3.62(d，OH)，2.87(m，1H)，2.50(dd，1H)，2.29(dd，1H)，2.20(m，1H)，1.72(bs，3H)，2.10-1.20(m，13H)，1.08(d，3H)，0.60(s，3H)ppm。
實(shí)施例91(S)，3(R)，26-三羥基-9，10-斷-20(S)-膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24(E)-五烯(化合物10)甲硅烷基保護(hù)的中間體529(0.126g，0.2mmol)。
化合物1013C-NMRδ＝147.7，143.2，141.8，134.5，132.9，125.5，125.0，123.4，117.0，111.8，70.9，68.7，66.8，56.8，56.2，46.0，45.3，42.9，41.0，39.8，29.1，27.2，23.5，22.1，21.3，14.2，12.3ppm。
實(shí)施例101(S)，3(R)，26-三羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24(Z)-五烯(化合物11)甲硅烷基保護(hù)的中間體530(24mg，0.04mmol)。
化合物111H-NMRδ＝6.38(d，1H)，6.22(dd，1H，J＝11.1Hz和14.9Hz)，6.01(d，1H)，5.88(d，1H，J＝11.1Hz)，5.51(dd，1H，3＝8.8Hz和14.9Hz)，5.32(m，1H)，5.00(m，1H)，4.43(m，1H)，4.24(s，2H)，4.22(m，1H)，2.83(m，1H)，2.60(dd，1H)，2.31(dd，1H)，2.13(m，1H)，1.85(bs，3H)，1.05(d，3H)，2.08-0.80(m，16H)，0.56(s，3H)ppm。
實(shí)施例111(S)，3(R)，26-三羥基-9，10-斷-20(S)-膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24(Z)-五烯(化合物12)甲硅烷基保護(hù)的中間體531(17mg，0.03mmol)。
化合物121H-NMRδ＝6.37(d，1H)，6.20(dd，1H，J＝11.1Hz和14.9Hz)，6.01(d，1H)，5.89(d，1H，J＝11.1Hz)，5.52(dd，1H，J＝9.5Hz和14.9Hz)，5.33(m，1H)，5.00(m，1H)，4.43(m，1H)，4.24(s，2H)，4.22(m，1H)，2.81(m，1H)，2.60(dd，1H)，2.31(dd，1H)，1.86(bs，3H)，0.94(d，3H)，2.20-0.80(m，17H)，0.50(s，3H)ppm。
實(shí)施例121(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(4-甲基-5-乙基-5-羥基-1(E)，3(E)-庚二烯基)-9，10-斷孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物13)甲硅烷基保護(hù)的中間體532(90mg，0.13mmol)。
化合物1313C-NMRδ＝147.7，143.0，140.2，137.5，133.0，125.0，124.6，124.0，117.1，111.8，78.4，70.8，66.8，56.4，56.4，46.0，45.3，42.9，40.5，40.4，31.8，29.1，27.7，23.6，22.3，20.6，14.2，13.5，12.3，7.7ppm。
實(shí)施例131(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(3-環(huán)丙基-1(E)，3-丁二烯基)-9，10-斷孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物14)甲硅烷基保護(hù)的中間體533(0.10mg，0.16mmol)。
用甲酸甲酯結(jié)晶純化化合物14。
化合物1413C-NMRδ＝147.8，147.7，143.1，137.0，133.0，129.9，125.0，117.1，111.8，110.5，70.8，66.9，56.5，56.4，46.0，45.3，42.9，40.4，40.3，29.1，27.6，23.6，22.2，20.6，12.8，12.3，5.5ppm。
實(shí)施例141(S)，3(R)-二羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，24-四烯-22-炔(化合物15)甲硅烷基保護(hù)的中間體1002(100mg，0.16mmol)。
經(jīng)色譜法(50％v∶v，乙酸乙酯的石油醚溶液)純化化合物15。
化合物1513C-NMRδ＝147.4，146.1，142.6，132.9，124.7，117.0，111.6，105.4，96.4，78.9，70.6，66.6，56.1，55.8，45.6，45.1，42.7，39.5，28.8，28.3，26.3，24.4，23.2，22.1，21.6，20.5，12.3ppm。
實(shí)施例151(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(5-甲基-5-羥基-1，3-己二炔基)-9，10-斷孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物16)甲硅烷基保護(hù)的中間體1004(41mg，0.06mmol)。
化合物1613C-NMRδ＝147.7，142.7，133.2，124.9，117.1，111.8，85.8，80.6，70.8，67.4，66.8，65.6，65.4，55.9，55.6，45.9，45.2，42.9，39.3，31.2，29.1，28.2，27.3，23.5，21.9，20.5，12.4ppm。
實(shí)施例161(S)，3(R)-二羥基-20(S)-(5-乙基-5-羥基-1，3-庚二炔基)-9，10-斷孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物17)甲硅烷基保護(hù)的中間體1006(66mg，0.1mmol)化合物1713C-NMRδ＝147.6，142.4，133.4，124.8，117.4，111.9，85.1，78.8，72.7，70.9，69.4，66.9，65.3，55.9，55.8，45.9，45.3，42.9，39.6，34.3，29.0，28.4，26.3，23.3，22.2，21.0，12.5，8.5ppm。
實(shí)施例171(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(5-乙基-5-羥基-1，3-庚二炔基)-9，10-斷孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物18)甲硅烷基保護(hù)的中間體1008(69mg，0.1mmol)化合物1813C-NMRδ＝147.7，142.7，133.2，124.9，117.1，111.8，85.2，79.0，72.7，70.8，69.4，66.9，65.6，55.9，55.6，45.9，45.3，42.9，39.3，34.3，29.1，28.2，27.3，23.5，22.0，20.4，12.4，8.5ppm。
實(shí)施例181(S)，3(R)-二羥基-20(S)-(4，4-二溴-1，3-丁二烯-1-基)-9，10-斷-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物8)甲硅烷基保護(hù)的中間體520(75mg，0.1mmol)色譜純化化合物8(50％v∶v，乙酸乙酯的石油醚溶液)。
化合物813C-NMRδ＝147.4，145.7，142.6，137.0，132.9，124.7，124.7，116.9，111.6，88.1，70.6，66.6，56.4，55.9，45.7，45.0，42.7，40.7，39.5，28.8，26.9，23.2，21.8，20.5，12.1ppm。
實(shí)施例191(S)-氟-3(R)-羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物21)經(jīng)一般方法8(但是將反應(yīng)時(shí)間延長(zhǎng)至5小時(shí))，將化合物522(0.8g，2.1mmol)脫甲硅烷化成相應(yīng)的醇，8-β-羥基-desAB-膽甾-22(E)，24-二烯。使用Dess-Martin periodinane(0.7g)處理保持在約5℃的攪拌的該醇(0.39g，1.5mmol)的干燥DCM(10ml)溶液。30分鐘后加入5％碳酸氫鈉水溶液和10％硫代硫酸鈉水溶液并持續(xù)攪拌10分鐘，隨后用乙醚稀釋并進(jìn)行常規(guī)后處理得到相應(yīng)的酮，8-氧代-desAB-膽甾-22(E)，24-二烯。將該酮(67mg，0.25mmol)的THF(3ml)溶液緩慢地加入保持在約-70℃的膦氧化物II(A＝F，B＝CH2)(0.5mmol)的鋰-衍生物(用1當(dāng)量正丁基鋰就地生成)的無水THF(4ml)溶液中。在相同溫度下攪拌2小時(shí)并升至室溫后，使用濕的乙醚淬滅反應(yīng)并經(jīng)常規(guī)后處理(色譜法2％v∶v乙醚的石油醚溶液)得到化合物21的TBS衍生物。用一般方法9脫甲硅烷化生成化合物21。
化合物211H-NMR與結(jié)構(gòu)相符。
實(shí)施例201(S)，3(R)-二羥基-19-去甲-9，10-斷膽甾-5，7(E)，22(E)，24-四烯(化合物22)經(jīng)一般方法8(但是將反應(yīng)時(shí)間延長(zhǎng)至5小時(shí))，將化合物522(0.8g，2.1mmol)脫甲硅烷化成相應(yīng)的醇，8-β-羥基-desAB-膽甾-22(E)，24-二烯。使用Dess-Martin periodinane(0.7g)處理保持在約5℃的攪拌的該醇(0.39g，1.5mmol)的干燥DCM(10ml)溶液。30分鐘后加入5％碳酸氫鈉水溶液和10％硫代硫酸鈉水溶液并持續(xù)攪拌10分鐘，隨后用乙醚稀釋并進(jìn)行常規(guī)后處理得到相應(yīng)的酮，8-氧代-desAB-膽甾-22(E)，24-二烯。將該酮(67mg，0.25mmol)的THF(3ml)溶液緩慢地加入保持在約-70℃的膦氧化物II(A＝O-TBS，B＝H2)(0.5mmol)的鋰新生物(用1當(dāng)量正丁基鋰就地生成)的無水THF(4ml)溶液中。在相同溫度下攪拌2小時(shí)并升至室溫后，使用濕的乙醚淬滅反應(yīng)并經(jīng)常規(guī)后處理(色譜法2％v∶v乙醚的石油醚溶液)得到化合物22的二-TBS衍生物。用一般方法9脫甲硅烷化生成化合物22。
化合物221H-NMR與結(jié)構(gòu)相符。
實(shí)施例211(S)，3(S)-二羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物23)該化合物按照與化合物29類似的方式用5型中間體制備，所述中間體是通過用丙酮代替二乙基酮按照類似于化合物552的方法獲得的。
化合物231H-NMR與結(jié)構(gòu)相符。
實(shí)施例221(S)，3(R)-二羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，16，22(E)，24-六烯(化合物24)該化合物與化合物1(實(shí)施例1)的制備類似，但使用2a型中間體開始進(jìn)行反應(yīng)(制備例1和101)，該中間體按照與W09100855中由101制備202所述類似的方式由104制備。
化合物241H-NMR與結(jié)構(gòu)相符。
實(shí)施例231(S)，3(R)-二羥基-26，26，26，27，27，27-六氟-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物25)甲硅烷基保護(hù)的中間體535(55mg)。
色譜法50％v∶v乙酸乙酯的石油醚溶液。
化合物251H-NMR(CDCl3)δ＝6.96(d，1H)，6.43(t，1H)，6.35(d，1H)，6.18(dd，1H)，6.01(d，1H)，5.31(bs，1H)，4.98(bs，1H)，4.41(m，1H)，4.22(m，1H)，2.80(dd，1H)，2.57(dd，1H)，2.30(m，2H)，2.05-1.20(m，8H)，1.10(d，3H)，0.58(s，3H)ppm。
實(shí)施例24包含化合物1的膠囊將化合物1溶解于花生油中形成終濃度10μg化合物1/ml油的溶液。將10重量份的明膠、5重量份的甘油，0.08重量份的山梨酸鉀和14重量份的蒸餾水混合并加熱形成軟明膠膠囊。然后向其中填充100μl化合物1的油溶液，從而使每粒膠囊包含1μg的化合物1。
實(shí)施例251(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(4，4-二溴-1，3-丁二烯-1-基)-9，10-斷-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物27)甲硅烷基保護(hù)的中間體537(101mg，0.13mmol)。
經(jīng)色譜法(50％v∶v，乙酸乙酯的石油醚溶液)純化化合物27。
化合物2713C-NMRδ＝147.7，145.3，142.7，137.3，133.2，125.0，124.9，117.3，111.8，88.3，70.8，66.9，56.2，55.8，46.0，45.3，42.9，40.6，40.3，29.0，27.6，23.5，22.3，20.0，12.3ppm。
實(shí)施例261(S)，3(R)-二羥基-26，27-二甲基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物28)甲硅烷基保護(hù)的中間體551(70mg)。
經(jīng)色譜法純化化合物2850％v∶v乙酸乙酯的石油醚溶液。
化合物2813C-NMR(CDCl3)δ＝147.4，143.9，142.9，138.4，132.7，124.8，123.9，122.7，116.9，111.6，70.6，66.7，56.2，56.2，45.7，45.1，42.7，40.3，40.2，29.3，28.9，27.6，23.6，23.4，22.1，20.6，13.2，12.4，12.1ppm。
實(shí)施例271(S)，3(S)-二羥基-26，27-二甲基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物29)甲硅烷基保護(hù)的中間體552(25mg)。
經(jīng)色譜法純化化合物3050％v∶v乙酸乙酯的石油醚溶液。
化合物291H-NMRδ＝6.42(d，1H)，6.17(dd，1H)，6.00(d，1H)，5.70(d，1H)，5.43(dd，1H)，5.28(bd，1H)，4.98(d，1H)，4.29(m，1H)，4.03(m，1H)，2.84(dd，1H)，2.64(bd，1H)，2.55(dd，1H)，2.43(dd，1H)，2.20-1.15(m，19H)，1.04(d，3H)，1.00(m，6H)，0.56(s，3H)ppm。
實(shí)施例281(S)，3(R)-二羥基-24-甲基-26，27-橋亞甲基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物30)甲硅烷基保護(hù)的中間體541(47mg，0.072mmol)。
經(jīng)色譜法(50％v∶v，乙酸乙酯的石油醚溶液)純化化合物30。
化合物301H-NMRδ＝6.38(d，1H)，6.01(d，1H)，5.99(d，1H，J＝15.7Hz)，5.33(m，1H)，5.32(m，1H)，5.00(m，1H)，4.43(m，1H)，4.23(m，1H)，2.83(dd，1H)，2.79-2.65(m，4H)，2.60(dd，1H)，2.31(dd，1H)，2.22-1.16(m，18H)，1.56(bs，3H)，1.05(d，3H)，0.57(s，3H)ppm。
實(shí)施例291(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(4，4-二氯-1，3-丁二烯-1-基)-9，10-斷-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物31)甲硅烷基保護(hù)的中間體539(70mg，0.10mmol)。
經(jīng)色譜法(50％v∶v，乙酸乙酯的石油醚溶液)純化化合物31。
化合物3113C-NMRδ＝147.7，144.6，142.6，133.2，129.2，124.9，122.4，118.9，117.3，111.8，70.8，66.9，56.3，55.9，46.0，45.3，42.9，40.6，40.3，29.0，27.6，23.5，22.3，20.2，12.3ppm。
實(shí)施例301(S)，3(R)-二羥基-26，27-橋亞乙基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物32)甲硅烷基保護(hù)的中間體543(300mg，0.46mmol)。
經(jīng)色譜法(50％v∶v，乙酸乙酯的石油醚溶液)純化化合物32。
化合物3213C-NMRδ＝147.6，145.1，143.1，137.6，132.9，125.7，125.0，120.4，117.1，111.8，70.8，66.8，56.4，45.9，45.2，42.8，40.5，40.4，33.9，29.3，29.1，27.8，26.4，26.3，23.6，22.2，20.8，12.3ppm。
實(shí)施例311(S)，3(R)-二羥基-26，27-橋亞丙基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物33)甲硅烷基保護(hù)的中間體545(200mg，0.30mmol)。
經(jīng)色譜法(50％v∶v，乙酸乙酯的石油醚溶液)純化化合物22。
化合物3313C-NMRδ＝147.6，143.1，140.9，138.5，132.9，125.0，123.6，122.1，117.1，111.8，70.8，66.9，56.5，56.4，46.0，45.3，42.9，40.4，37.2，29.2，29.1，28.4，27.8，27.7，26.9，23.6，22.3，20.7，12.3ppm。
實(shí)施例321(S)，3(R)-二羥基-20(S)-亞環(huán)丙基甲基-9，10-斷-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物34)甲硅烷基保護(hù)的中間體547(143mg，0.24mmol)。
經(jīng)色譜法(50％v∶v，乙酸乙酯的石油醚溶液)純化化合物34。
化合物3413C-NMRδ＝147.7，143.4，132.8，125.1，125.0，118.0，116.9，111.8，70.9，66.9，56.9，56.1，46.0，45.3，42.9，39.9，39.8，29.2，27.3，23.6，22.1，20.9，12.4，2.1，1.9ppm。
實(shí)施例331(S)，3(R)-二羥基-20(R)-亞環(huán)丙基甲基-9，10-斷-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物35)甲硅烷基保護(hù)的中間體549(111mg，0.18mmol)。
經(jīng)色譜法(50％v∶v，乙酸乙酯的石油醚溶液)純化化合物35。
化合物3513C-NMRδ＝147.7，143.2，132.9，125.0，124.5，118.5，117.0，111.7，70.8，66.9，56.8，56.4，45.9，45.3，42.9，40.4，39.7，29.1，27.5，23.6，22.3，20.5，12.2，2.3，1.9ppm。
實(shí)施例3620-表-1(S)，3(R)-二羥基-26，26，26，27，27，27-六氟-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物36)該化合物的制備類似于化合物25(實(shí)施例23)，但使用20-表-1(S)，3(R)-二-TBS-氧-9，10-斷-膽-5(E)，7(E)，10(19)，22(E)-四烯-24-醇開始反應(yīng)。
化合物361H-NMR與結(jié)構(gòu)相符。
權(quán)利要求
1.式I化合物及其前藥以及立體異構(gòu)體形式 其中R1和R2可以相同或不同，表示鹵素、(C1-C6)烴基，其任選地被一或兩個(gè)羥基或一個(gè)或多個(gè)氟原子取代，或者，R1和R2與它們共同連接的碳原子一起形成(C3-C6)碳環(huán)，或者，R1和R2其中之一與R3合在一起形成一個(gè)直連鍵，從而構(gòu)成一個(gè)三鍵，或者，R1和R2均表示氫；當(dāng)R3沒有與R1和R2其中之一形成直連鍵時(shí)，其表示氫或(C1-C3)烴基；X表示(E)-乙烯、(Z)-乙烯、亞乙炔基或一個(gè)鍵；Y和Z獨(dú)立地表示氫或甲基；C#16和C#17之間的鍵用虛線表示，表明所述的鍵可以是單鍵也可以是雙鍵，在單鍵的情況下環(huán)取代的投影是β；A表示羥基、氟或氫；B表示CH2或H2；3位的構(gòu)型與天然維生素D3具有相同的構(gòu)型(正常)，或3位的構(gòu)型與天然維生素D3相反(表)；條件是當(dāng)X表示(E)-乙烯或(Z)-乙烯時(shí)，R1和R2其中之一與R3一起不能形成直連鍵以構(gòu)成三鍵；進(jìn)一步的條件是當(dāng)X表示一個(gè)鍵時(shí)，R1和R2不為氫；進(jìn)一步的條件是式I化合物不為3(S)-羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中當(dāng)R1和R2分開時(shí)，分別表示溴、氯、甲基、乙基、三氟甲基、羥基甲基、1-羥基乙基、2-羥基乙基、1-丙基、2-丙基、環(huán)丙基、2-羥基-2-丙基、2-甲基-2-丙基、3-戊基或3-羥基-3-戊基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R1和R2是相同的，均表示氫、甲基、乙基、溴、氯或三氟甲基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R1和R2與它們共同連接的碳原子一起形成C3碳環(huán)、C4碳環(huán)、C5碳環(huán)或C6碳環(huán)。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的化合物，其中R1和R2合在一起是亞乙基、亞丙基、亞丁基或亞戊基，例如R1和R2與它們共同連接的碳原子一起形成C3碳環(huán)、C4碳環(huán)、C5碳環(huán)或C6碳環(huán)。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R1和R2是通過從直鏈、支鏈或環(huán)狀飽和的C1-6烴除去一個(gè)氫原子得到的基團(tuán)。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6的化合物，其中A是羥基或氟。
8.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R2構(gòu)成三鍵的一部分，R1表示支鏈的(C1-C6)烴基，其任選地被一或兩個(gè)羥基取代。
9.根據(jù)權(quán)利要求7的化合物，其中R1表示-CMe3、-C(OH)Me2或-C(OH)Et2。
10.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R3表示氫、甲基或環(huán)丙基。
11.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R1和R2其中之一與R3合在一起形成一個(gè)直連鍵，從而構(gòu)成一個(gè)三鍵。
12.根據(jù)權(quán)利要求1-11的化合物，其中3位的構(gòu)型與天然維生素D3的構(gòu)型相同(正常)。
13.根據(jù)權(quán)利要求1-11的化合物，其中3位的構(gòu)型與天然維生素D3相反(表)。
14.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其選自1(S)，3(R)-二羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物1)，1(S)，3(R)-二羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(Z)，24-五烯(化合物2)，20(S)，1(S)，3(R)-二羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物3)，1(S)，3(R)-二羥基-9，10-斷-26，27-環(huán)-膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物4)，20(S)，1(S)，3(R)-二羥基-9，10-斷-26，27-環(huán)-膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物5)，1(S)，3(R)-二羥基-9，10-斷-26，27-橋亞甲基-膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物6)，20(S)，1(S)，3(R)-二羥基-9，10-斷-26，27-橋亞甲基-膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物7)，1(S)，3(R)-二羥基-20(S)-(4，4-二溴-1，3-丁二烯-1-基)-9，10-斷-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物8)，1(S)，3(R)，26-三羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24(E)-五烯(化合物9)，20(S)，1(S)，3(R)，26-三羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24(E)-五烯(化合物10)，1(S)，3(R)，26-三羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24(Z)-五烯(化合物11)，20(S)，1(S)，3(R)，26-三羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24(Z)-五烯(化合物12)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(4-甲基-5-乙基-5-羥基-1(E)，3(E)-庚二烯基)-9，10-斷孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物13)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(3-環(huán)丙基-1(E)，3-丁二烯基)-9，10-斷孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物14)，1(S)，3(R)-二羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，24-四烯-22-炔(化合物15)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(5-甲基-5-羥基-1，3-己二炔基)-9，10-斷孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物16)，1(S)，3(R)-二羥基-20(S)-(5-乙基-5-羥基-1，3-庚二炔基)-9，10-斷孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物17)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(5-乙基-5-羥基-1，3-庚二炔基)-9，10-斷孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物18)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(5，5-二甲基-1，3-己二炔基)-9，10-斷孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物19)，1(S)，3(R)-二羥基-20(S)-(5，5-二甲基-1，3-己二炔基)-9，10-斷孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物20)，1(S)-氟-3(R)-羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物21)，1(S)，3(R)-二羥基-19-去甲-9，10-斷膽甾-5，7(E)，22(E)，24-四烯(化合物22)，1(S)，3(S)-二羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物23)，1(S)，3(R)-二羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，16，22(E)，24-六烯(化合物24)，1(S)，3(R)-二羥基-26，26，26，27，27，27-六氟-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物25)，3(S)，26-二羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24(E)-五烯(化合物26)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(4，4-二溴-1，3-丁二烯-1-基)-9，10-斷-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物27)，1(S)，3(R)-二羥基-26，27-二甲基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物28)，1(S)，3(S)-二羥基-26，27-二甲基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物29)，1(S)，3(R)-二羥基-24-甲基-26，27-橋亞甲基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物30)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(4，4-二氯-1，3-丁二烯-1-基)-9，10-斷-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物31)，1(S)，3(R)-二羥基-26，27-橋亞乙基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物32)，1(S)，3(R)-二羥基-26，27-橋亞丙基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物33)，1(S)，3(R)-二羥基-20(S)-亞環(huán)丙基甲基-9，10-斷-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物34)，1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-亞環(huán)丙基甲基-9，10-斷-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物35)，20(S)，1(S)，3(R)-二羥基-26，26，26，27，27，27-六氟-9，10-斷膽甾-5(Z)，7(E)，10(19)，22(E)，24-五烯(化合物36)。
15.用于治療的權(quán)利要求1-14任一項(xiàng)所述的化合物。
16.一種藥物組合物，包含權(quán)利要求1-14任一項(xiàng)所述的化合物，并任選地包含其他治療活性化合物以及藥學(xué)上可接受的載體。
17.根據(jù)權(quán)利要求16的藥物組合物，其中所述的其他治療活性化合物選自磷結(jié)合劑、類固醇和抗增殖劑。
18.一種治療或預(yù)防以異常的細(xì)胞分化和/或細(xì)胞增殖為特征的疾病、癌癥、白血病、乳腺癌、腦神經(jīng)膠質(zhì)癌、骨肉瘤、黑素瘤、骨髓纖維化、牛皮癬、原發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)癥、糖尿病、盤狀和系統(tǒng)性紅斑狼瘡、自身免疫型慢性皮膚病、高血壓、痤瘡、脫發(fā)、皮膚老化、AIDS、神經(jīng)變性疾病、阿耳茨海默氏病、宿主對(duì)移植物的反應(yīng)和移植物對(duì)宿主的反應(yīng)、移植排異反應(yīng)、類固醇誘導(dǎo)的皮膚萎縮和骨質(zhì)疏松癥、以及誘導(dǎo)成骨作用的方法，該方法包括任選地與其他治療活性成分一起給予需要這種治療的患者有效量的權(quán)利要求1-14任一項(xiàng)所述的化合物。
19.一種治療或預(yù)防繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)癥的方法，該方法包括任選地與其他治療活性成分一起給予需要這種治療的患者有效量的權(quán)利要求1-14任一項(xiàng)所述的化合物。
20.根據(jù)權(quán)利要求18的方法，其中繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)癥與腎衰竭有關(guān)。
21.根據(jù)權(quán)利要求18-20任一項(xiàng)的方法，其中，所述的其他治療活性化合物選自磷結(jié)合劑、類固醇和抗增殖劑。
22.權(quán)利要求1-14任一項(xiàng)所述的化合物任選地與其他治療活性化合物一起在制備藥物中的用途，所述的藥物用于治療或改善選自下述的疾病以異常的細(xì)胞分化和/或細(xì)胞增殖為特征的疾病、癌癥、白血病、乳腺癌、腦神經(jīng)膠質(zhì)癌、骨肉瘤、黑素瘤、骨髓纖維化、牛皮癬、原發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)癥、繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)癥、與腎衰竭有關(guān)的繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)癥、糖尿病、盤狀和系統(tǒng)性紅斑狼瘡、自身免疫型慢性皮膚病、高血壓、痤瘡、脫發(fā)、皮膚老化、AIDS、神經(jīng)變性疾病、阿耳茨海默氏病、宿主對(duì)移植物的反應(yīng)和移植物對(duì)宿主的反應(yīng)、移植排異反應(yīng)、類固醇誘導(dǎo)的皮膚萎縮和骨質(zhì)疏松癥，以及用于誘導(dǎo)成骨作用。
23.根據(jù)權(quán)利要求22的用途，其中所述的其他治療活性化合物選自磷結(jié)合劑、類固醇和抗增殖劑。
全文摘要
本發(fā)明提供了式I化合物及其前藥以及立體異構(gòu)體形式，其中R
文檔編號(hào)C07C401/00GK1705643SQ200380101931
公開日2005年12月7日 申請(qǐng)日期2003年10月23日 優(yōu)先權(quán)日2002年10月23日
發(fā)明者E·T·賓德拉普, K·H·汗森, C·A·S·布雷丁, M·J·卡爾弗利 申請(qǐng)人:利奧制藥有限公司