專利名稱：：用于硼中子俘獲治療的硼化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及新的含硼化合物，包含所述^^稱的藥物組^;，所述化合物的治療用途，以^J斤述^^7的制備方法。
背景技術(shù)：
：硼中子俘獲治療(BNCT)是一種放射治療的形式，其需要兩個要素'°B和低能量的熱中子。1QB是以在腫瘤中積聚的含硼^^勿的形M要治療的對^i^行給藥的。然后，使用來自核反應(yīng)器或回旋加速器的低能熱中子對要治療的對象進行輻射。當?shù)湍軣嶂凶幼矒?DB時，它們生成了oc粒子和7Li。熱中子具有相對低的能量。然而，當生成li和ot粒子時，就產(chǎn)生了足夠破壞細胞的能量。因為a粒子和li相對較大，它們在組織中僅能被傳送大約5-10ym，即相當于腫瘤細胞直徑的距離。因此，BNCT可以被用于選擇性照射肺瘤，同時最小化對非惡'^i且織的輻射損傷。BNCT中一個主要的問pllA為硼原子尋找無毒的栽體分子，使其在腫瘤細胞中聚集從而確保足夠的選擇性。為了獲得高治療比，這樣的^^/在腫瘤中應(yīng)當優(yōu)選#^文出15-30pg/g(ppm，即百萬分之一)的"B平均濃度，這樣具有高選擇性(腫瘤與血以Alt瘤與正常組織的比例理想地〉5)和低條f生。一種方法曾經(jīng)^^]含硼的核苷、核苷酸或寡核苷酸(EP1113020A2)。另一個方法曾經(jīng)使用包含硼^^J^磷酸酯的核苷和寡核苷酸(WO94/01440Al)。進一步地，碳硼烷基(carboranyl)嘧啶已經(jīng)被制備用于BNCT中。含有連接在嘌可以用于中子俘獲治療法中的巢型碳硼烷(nidocarborane)-鈷胺素共輒物的合成(H.P.C.Hogenkamp等人A^c/ear艇/c/;7ea/7fl^/o/柳(2000),27，89-92)。目前處于i/ii期臨床試驗的兩種硼中子俘獲劑是5i^-閉合式-十二，酸二鈉(BSH)和1-4-二羥基硼^丙氨酸(BPA)。雖然BSH和BPA已經(jīng)在動物模型中被證明是^^有效的，但是這兩種試劑僅具有對腫瘤細胞中等的選擇性以A^腫瘤中的低保留時間。而且，由于BSH有^皮空氣氧化的傾向，因此具有有限的化學(xué)穩(wěn)定性，而BPA雖然在化學(xué)方面是無毒的，M僅含有低重量百分比的硼(5%),以致于為了在腫瘤組織中獲得治療量的硼濃度時需要大量使用該藥物。Leamon,C，P.和Reddy，J.A.，jfi^a/ced"r〃g"e7/>er/Wer/ewy,56(2004)1127-1141,討論了用于治療目的的葉酸受體和葉酸藥物共輒物。W000/45857公開了由源于生物或合成的Gd^C/^物部^對腫瘤有特異性的部分組成的、生理學(xué)上可配伍的化合物用于制備用于中子俘獲和光子活化治療的制劑的用途。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的一個目的是提供用于硼中子俘獲治療(BNCT)的化合物。另一個目的是提供具有高重量水平的硼和/或?qū)δ[瘤細胞具有選擇性的這樣的^^物。另一個目的是提供穩(wěn)定和/或無毒的這樣的^^物。本發(fā)明的還一個目的是提供包含所述^^物的藥物組合物，以及提供所述4^物在治療中的用途。進一步的目的是提供由已知起始原m'j備所述^^的方法。上述提及的目的以及在研究了以下說明書后對本領(lǐng)域技術(shù)人員來說應(yīng)是顯而易見的本發(fā)明的其它目的，是通過根梧式(I)的化^7實現(xiàn)的<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>其中R'和R2中的一個是-NH—X-Y-Z、-O-X-Y-Z或-S-X-Y-Z，并且另一個是-OH、-NH-X+Z、-0-X-Y-Z或-S-X-Y-Z;這其中X是-亂-，其中m是0、1、2、3或4,或者-(CH2)p-0-(CH2)q-，其中p和q獨立地是l、2、3或4;Y是硼M碳硼烷，其中至少一個硼原子是"B;并且Z是H或親水基團，例如氨曱基、2-^乙基、3-M丙基、1，3-丙二醇-2-基一曱氡基、乙烯基乙醛絲(ethyleneglycoxyl)或二乙烯基乙酪St^(diethyleneglycoxyl)'，及其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物和立體異構(gòu)體。優(yōu)逸地，Y的硼M碳硼烷中的豐度高于ieB的天然同位素的豐度。例如，在Y的硼絲碳硼烷中，超過10%或者超過20%，優(yōu)￡^1過25%，更優(yōu)50%或者超過75%的硼原子可以是"B。根據(jù)式(I)的^^物可以是藥學(xué)上可接受的鹽的形式。例如，這樣的鹽是與無機酸形成的鹽，如鹽酸；與胺形成的銨鹽，例如三乙胺或堿性藥；堿金屬鹽，例如鈉或鉀鹽；或堿土金屬鹽，例如釣或鎂鹽。根據(jù)式(I)的化合物可以是藥學(xué)上可接受的溶劑化物形式，例如水*，以及非溶劑化物的形式。當M中存在一個或多個立體中心時，才式(I)的^^7可以是藥學(xué)上可接受的立體異構(gòu)的混合物，例如非對映異構(gòu)體混合物和/或?qū)τ钞悩?gòu)體混合物。非對映異構(gòu)體是其分子不互為鏡像的立體異構(gòu)體。對映異構(gòu)體是其W互為鏡像的立體異構(gòu)體。進一步地，才娘式(I)的化洽物可以是藥學(xué)上可接受的單一立體異構(gòu)體的形式，即單一對映異構(gòu)體和/或非對映異構(gòu)體。才!l^式(I)的化合物還可以是藥學(xué)上可接受的外消旋》V^物的形式，即對映異構(gòu)體的等摩爾^^;。硼烷在這里凈皮定義為一種多面體硼烷，參見C邁e/i/^2/c^ooio尸T/2or卵/72.ca/cTOr卵/2o邁e"/7/cC力咖/"r/(第8版，1991)。碳硼;^^E被定義為至少一個碳原子被納入到多面體硼烷中的化合物。碳硼烷可以根據(jù)Car6orfl77e51(R.Grimesed.1970)、C邁e///2/fe/2C^ooi:ofZnorga"/a/dOrga/7o邁e"/7/c0e邁/Wr/(第8版，1991)和5We/ce1972，78，462中的描iiii行合成。根據(jù)式(I)的^^適用于BNCT中。根據(jù)式(I)的^^/包含一個葉酸部分，即葉酸分子的有效部分。所迷^^進一步包^—個含硼的部分，并JWi^地包含一個連接部分。該連接部^f皮定義為位于葉酸部^p含硼部分之間的一轉(zhuǎn)分。含硼部分被定義為一個含硼基團，并且可以是硼烷或碳硼烷?？焖偕L的細胞例如肺瘤細胞顯示出增加攝取葉酸以W目關(guān)結(jié)構(gòu)的4^物。BNCT可以#細于治療許多腫瘤。腫瘤可以#:界衛(wèi)生組織定義的規(guī)則(世界衛(wèi)生組織，/ofer"s〃<ms/77/Wo/og/cfl/C/flss7'/7cao尸7kro"r5;1967-1978)在組織學(xué)上進行分類。利用才上述式(I)^^^JUBNCT所能治療的腫瘤類型包括，源于中才^f申經(jīng)系統(tǒng)的腫瘤，優(yōu)選神經(jīng)自瘤，例如膠質(zhì)母細胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)肉瘤、間變性星形細胞瘤、^^別星形細胞瘤、毛細胞形星形細胞瘤、少突神經(jīng)膠質(zhì)瘤或腦干神經(jīng)膠質(zhì)瘤；腦膜瘤；外周神經(jīng)上皮瘤；原始神經(jīng)夕卜胚層瘤；神經(jīng)母細胞瘤；生殖細胞瘤；垂體瘤；腦轉(zhuǎn)移瘤；或動靜脈畸形。也可以在BNCT中偵月根據(jù)式(I)的化合物治療i.a.惡性腫瘤或轉(zhuǎn)移性腫瘤進程，優(yōu)選黑色素瘤、前列腺癌、肝癌、肺癌、乳腺癌或肉瘤。這里所用的詞語"硼中子俘獲治療"(BNCT)被定義為一種腫瘤治療方法，其包括將含硼化合物給藥于需要進行治療的對象和用熱中子輻射所M象的這里所用的術(shù)語"腫瘤"依照"or/a/2^;y///w/^a^cT^ecT/ca/歷'c"'o/aiy，第26版，1985，Saunders中的定義，即被定義為細胞繁殖不受控制的并且累進的組織的生長。不受控制的繁殖被定義為一種不同于正常細胞繁殖的狀態(tài)，例如一種細胞繁殖率明顯增加的狀態(tài)。上下文中的術(shù)語"累進的"被定義為強烈itk^i^或增加。腫瘤細l^皮定義為所述組織學(xué)中的細胞。如這里所使用的術(shù)語"治療"依照Zw7aj7cTJ7/w"a^/#^//c<3/"/c〃0朋i7;第26版，1985，Saunders中的定義，即^X義為對疾病的治療。術(shù)語"治療性"和"治療"應(yīng)當據(jù)此，。因此，i^E所用的詞語"腫瘤治療"凈iut義為對由胂瘤引起或與腫瘤相關(guān)的疾病的治療。式(I)中的構(gòu)成Y的硼M碳硼烷可以是<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>其中*表示連接到X或Z的鍵的位置；M是鈷，鈷-57或鐵；并且X如上所定義。根據(jù)式(I)的^^物的例子是(4-{[(2-#J-4-氧代-3，4-二t^呤-6-基)曱基]絲}苯曱?；?-7H3-[(lv，9》-2，3，4，5,6，7，8,10,11，12-十硼二環(huán)[7.2.1]十二烷-l-基]丙基}-a-谷酰胺和(4-{[(2-氨基-4-氧代-3,4-二氫蝶呤-6-基)甲基]氨基}苯曱酰基)-vH3-(2，3，4,5，6，7，8，10，11，12-十硼二環(huán)[7.2.1]十二烷-l-基)丙基]-L-谷^t^。在一個實施方式中，在根據(jù)式(I)的4^物中，R'是-NH-X-Y-Z、-O-X-Y-Z或-S-X-Y-Z，并且R2是0H。這樣的化合物非常近似于葉酸的結(jié)構(gòu)，并且因此能夠保射^^斤顯示的所有或部分的生物活性。在一個實施方式中，在根據(jù)式(I)的^^物中，至少一個碳原子是HC。這樣的實施方式允^Hiiti電子;l射斷層掃描(PET)技^(M^測^^?；蛘撸?I)4^物中的Y部分可以是^4L的實體。本發(fā)明目的進一步通過根據(jù)式(I)^^物的制備方法而實現(xiàn)，其中將式NH廠X-Y-Z、0H-X-Y-Z或SH-X-Y-Z的^^物與葉g應(yīng)，其中X、Y和Z如式(I)中所定義。藥物制劑本發(fā)明的目的還通過包含根椐式(I)的化*和藥學(xué)上可接受的載體、稀釋劑或輔助劑的藥物組合物而實現(xiàn)。為了臨床^JD，才M居式(I)的含硼^^依照本發(fā)明適當i^皮配制成用于腸胃外給藥的藥物組合物。并且，直腸、口mi^S可其它的給藥途徑也是制劑領(lǐng)域技^Pv員可以預(yù)期的。因此，將根塘式(i)的含硼^^物與至少一種藥學(xué)和藥理學(xué)上可接受的栽體或輔助劑"^配制。所述載體可以是固體、半固體或液^#釋劑的形式。腸胃外給藥的溶液可以制備成一種本發(fā)明的^^物在藥學(xué)上可接受的溶劑中的溶液。這些溶液還可以含有穩(wěn);tA射口/或緩沖成分，并且分配成^f立計量的"^或藥瓶。腸胃外給藥的溶液也可以制備成一種在使用前臨時用適當?shù)膇^劑重制的干;^制品。在才緣本發(fā)明的口服藥物組合物的制備中，將需要配制的#^式(1)的含硼^^物與固體、粉末成分(例如孚Ut、蔗糖、山梨醇、甘露醇、淀粉、支鏈淀粉、纖維素衍生物、明膠或另外適當?shù)某煞?，以及與崩解劑和潤滑劑(例如石W旨酸鎂、石^旨酸4丐、石W旨富馬酸鈉和聚乙二醇蠟)混和。然后將該〉V^^加工成顆?；驂褐瞥善＼浢髅擆▏翱梢杂煤谢钚曰衔锘虮景l(fā)明化^稱、植物油、脂肪或者其它適于軟明皿嚢的賦形劑的混合物的膠囊制備。硬明im嚢可以含有與固^^末成分(例如IUI、蔗糖、山梨醇、甘露醇、馬鈴薯淀粉、玉米淀粉、支^yt粉、維生素衍生物或明膠)",的活性^^勿。用于iLM給藥的劑量^f立可以(i)以栓劑的形式制備，其含有與中性月旨肪基混和的活性物質(zhì)；(U)以明膠直腸膠嚢的形式制備，其含有與植物油、石蠟油或其它適于明膠，膠ltl^形劑混合的活性物質(zhì)；(iii)以預(yù)先制成的微型灌腸劑的形式制備；或者(iv)以在給藥前在適當溶劑中重制的千燥的微型灌腸劑制劑的形式制備。用于口月峰藥的液體制劑可以以糖漿或混懸劑(例如溶液或混懸劑)，以及與乙醇、水、甘油、丙二醇和聚乙二醇的混合物的形式制備，所，漿或混懸劑含有活性^^并且制劑的剩輛分由糖或糖醇組成。如果需要，這樣的液體制劑可以含有著色劑、調(diào)味劑、^it和羧曱基纖維素或其它增稠劑。用于口月,藥的液體制劑還可以以在使用前用適當溶劑重制的干;^^末的形式制備。在本發(fā)明的一個方面中，4M居式(I)的含硼^^稱可以^t要治療的對^i行中子,之前的24小時內(nèi)給藥，典型的在中子,之前30-60^!中。在本發(fā)明的進一步方面中，含硼^^物的劑量可以是波動的。根椐式(I)的舍硼^^4勿的典型劑量在每公斤體重0,O卜IOOmg范圍內(nèi)。治療本發(fā)明的目的iiif過用于治療的4Mt式(I)的^^而實現(xiàn)，或者通過才M居式(I)的^^在制備用于治療腫瘤的藥物方面的用途而實現(xiàn)。在一個實施方式中，所述藥物可以用于治療源于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的腫瘤，優(yōu)選神經(jīng)M瘤，例如^t母細胞瘤、神經(jīng)自肉瘤、間變性星形細胞瘤、低級別星形細胞瘤、毛細胞形星形細胞瘤、少突神纟ll^質(zhì)瘤或腦干神經(jīng)膠質(zhì)瘤；腦膜瘤；外周神經(jīng)上皮瘤；原始神經(jīng)外胚層瘤；神經(jīng)母細胞瘤；生殖細胞瘤；垂體瘤；腦轉(zhuǎn)移瘤；或動靜樂h畸形?；蛘?，該藥物可以用于治療惡性胂瘤或轉(zhuǎn)移性腫瘤進程，優(yōu)選黑色素瘤、前列腺癌、肝癌、肺癌、乳腺癌或肉瘤。本發(fā)明一個有效的實施方式i^it過用于診斷的、其中至少一個碳原子是UC的4式(I)的^^物而實現(xiàn)，或者通過其中至少一個碳原子是的根據(jù)式(I)的化洽物在制備用于正電子發(fā)射斷層掃描(PET)中的藥物方面的用途而實現(xiàn)。所述目的進一步通過將藥學(xué)和藥理學(xué)有效量的^i&式(i)的4^物給藥于需要這種與硼中子俘獲治療相結(jié)合的處理的治療的對象的腫瘤的治療方法而實現(xiàn)。所^y中瘤治療可以是治療源于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的腫瘤，優(yōu)選神經(jīng)膠質(zhì)瘤，例如自母細胞瘤、神經(jīng)M肉瘤、間變性星形細胞瘤、^tou星形細胞瘤、毛細胞形星形細胞瘤、少突神經(jīng)膠質(zhì)瘤或腦干神經(jīng)膠質(zhì)瘤；腦膜瘤；外周神經(jīng)上皮瘤；原始神經(jīng)外胚層瘤；神經(jīng)母細胞瘤；生殖細胞瘤；垂體瘤；腦轉(zhuǎn)移瘤；或動靜脈，?；蛘?，所述肺瘤治療可以是治療惡性腫瘤或轉(zhuǎn)移性腫瘤進程，優(yōu)選黑色素瘤、前列腺癌、肝癌、肺癌、乳腺癌或肉瘤。本發(fā)明一個有用的實施方式進一步通過將藥學(xué)和藥理學(xué)有效量的、其中至少一個碳原子是"C的才財居式(I)的化#給藥于需要診斷的對象并與正電子發(fā)射斷層掃描相結(jié)合的腫瘤診斷方法而實現(xiàn)。以上所提到的治療可以作為單獨的治療而應(yīng)用，或者除了硼中子俘獲治療"卜可以包括常規(guī)的手術(shù)或化學(xué)療法。這樣的化學(xué)療法可以包括一種或多種以下種類的抗腫瘤劑(i)用于內(nèi)科肺瘤學(xué)的^i曾殖/抗肺瘤藥物及其組，，例如烷化劑(例如順鉑、卡鉑、環(huán)磷,、氮芥、苯丙氨酸氮芥、，苯丁酸氮芥、白消安和亞硝M);;抗代謝藥(例如抗葉酸劑，比如氟代嗜咬類如5-WL嘧咬^^^加氟、雷替曲塞、氨曱蝶呤、阿糖胞苷和羥);抗腫瘤抗生素(例如蒽環(huán)類如阿霉素(adriamycin)、博萊霉素、阿霉素(doxorubicin)、道諾霉素、表阿霉素、依達比星、絲裂霉素-C、更生霉素和^中霉素)；抗有絲分裂劑(例如M花生物堿類如長春新堿、*喊、^4^辛和^4瑞濱，以及紫杉)^:如紫杉醇和泰素帝)；和拓樸異構(gòu)酶抑制劑(例如表鬼臼毒素類如依托泊苷和替尼泊苦、胺苯吖啶、拓樸替康和^g^"堿)；(ii)細胞生長抑制劑例如M激素類(例如三苯l^、托瑞米芬、雷洛昔芬、屈洛昔芬和iodoxyfene),雌激素受體衰減調(diào)節(jié)劑(例如氟維司群)，M激素類(例如比卡魯胺、氟他胺、尼魯米特和醋酸環(huán)丙孕酮)，LHRH拮抗劑或L服H激動劑(例如戈舍瑞林、亮丙瑞林和布舍瑞林)，孕激素類(例如醋酸甲地孕酮)，芳^ft酶抑制劑(例如阿那曲唑、來曲唑、伏氯哇和依西美坦)以及5ct-還原酶抑制劑例如非那iW;(iii)癌細胞^/v抑制劑(例如金屬蛋白酶抑制劑如馬立馬司他，以及尿激酶型纖^S^原激活物功能受體)；(iv)生長因子功能抑制劑，例如如下抑制劑，其包4舌生長因子抗體，生長因子受^體(例如抗-erbb2抗體曲妥珠單抗[Herc印Un"]和抗-erbbl抗體西妥昔單抗)，法M轉(zhuǎn)移酶抑制劑，酪氨,酶抑制劑和絲氨酸/蘇氨酸、激S^抑制劑，例如M生長因子類抑制劑(例如EGFR類酪氨M酶抑制劑例如2-(3-氯-4-氟代苯基)-7-甲攀基-6-(3-嗎啉基丙氧基)《|^啉-4-胺(吉非替尼(gefitinib))，p-(3-乙;fe&^基)—6，7—二(2-甲M乙^JJ查哇啉一4一胺(埃洛替尼(erlotinib))和6-丙烯酰胺基,-(3-氯-4-氟代苯基)-7-(3-嗎啉基丙氧基)奮哇啉-4-胺)，例如血小板衍生的生長因子類抑制劑以及例如肝細^fe生長因子類抑制劑；(v)抗血管增生劑例如抑制血管內(nèi)皮細胞生長因子作用的那些(例如抗血管內(nèi)皮細胞生長因子抗體貝伐單抗[Avastin]，例如公開在國際專利申請WO97/22596，WO97/30035，WO97/32856和WO98/13354中的那些^^;)以;SJt過其它積理作用的化合物(例如利諾胺，*素0^33功能抑制劑和血管抑素)；(vi)血管損傷劑例如康普立停A-4(CombretastatinA4)和/>開在國際專利申請柳99/02166，柳00/40529，TO00/41669，W001/92224，柳02/04434和W002/08213中的那些化合物；(vii)反義治療,例如針對以上所列萆巴點的那些，比如ISIS2503，抗-ras反義物質(zhì)；(viii)基因治療方法，包括例如取代異常基因的方法，所述異常基因例如是異常的p53或異常的BRCA1或BRCA2，GDEPT(基因?qū)虻拿盖八幹委?，例如^JD胞嘧11^^、胸苷激酶或細菌硝JJi^酶的方法，以及增加病Ajft化療或放療耐受性的方法例如多重耐藥性基因治療；和(ix)免疫治療方法，包括例如增加病人腫瘤細胞免疫原性的離體和體內(nèi)方法，例如用細胞因子進行的轉(zhuǎn)染，所述細胞因子例如是白*2、白^H:4或粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子，減小T細胞功能低下的方法，使用轉(zhuǎn)染的免疫細胞例如細胞因子轉(zhuǎn)染的樹突狀細胞的方法，侵月細胞因子轉(zhuǎn)染的腫瘤細胞淋的方法以;^^JD^^蟲特型松沐的方法。實施例才艮據(jù)^~發(fā)明的^S^的制備所有^^)的溶劑都是分析級的，并JLMl中常規(guī)4M的是市售無7K溶劑。典型地，反應(yīng)在氮氣或氬氣的惰性氣氛下進行。^雨R語是在裝有具有Z-梯度的5咖BBO探頭的VarianUnity+400腿光"i務(wù)(義，或裝有5咖BBH笨頭的VarianGemini300腿光i制義，或裝有具有Z-梯度的60y1雙回流探頭的BrukerAvance400腿光if^義，或裝有具有Z-梯度的4-核探頭的BrukerDPX400腿光i^fiUi記錄的。除非在實施例中特別指明，波譜都是在400MHz下對質(zhì)子進fri己錄的。使用了以下參比信號CDCl3的中線在57.26CH)。質(zhì)譜是在由Alliance2795(LC)、WatersPDA2996和ZQ單四補"^f義組成的WatersLCMS上記錄的。該質(zhì)ifO^有以陽離子或陰離子方式操作的電噴射離子源(ESI)。毛細管電壓為3kV,錐孔電壓為30V。所i^t"^fiC^邁A100-700之間進行掃描，掃描時間為0.3s。分離是在WatersX-TerraMSC8(3.5jam,50或100咖x2.1mm直》圣)或由ScantecLab|^得的ACE3AQ(100mmx2.1mm直徑)上進行的。流速分別調(diào)節(jié)到1.0或0.3ml/min。柱溫設(shè)置在40。C。^jI中性或酸性流動相系統(tǒng)的線寸錄度，該梯度由100%A(A:5%MeCN中的10mMNH,OAc，或者5%MeCN中的8mMHCOOH)起始，在100%B(MeCN)下結(jié)束?；蛘?，質(zhì)譜是在由Alliance2690分離模塊、Waters2487二元1吸收檢測器(220和254nm)和WatersZQ單四^tf"^fi(i且成的WatersLCMS上記錄的。該質(zhì)"^^^有以陽離子或陰離子方式操作的電噴射離子源(ESI)。毛細管電壓為3kV，錐孔電壓為30V。所贈"il^Ufc邁A97-800之間進行掃描，掃描時間為0.3s或0.8s。分離是在ChromolithPerformanceRP-18e(100x4.6mm)上進行的。采用線'f錫度，在5^l中內(nèi)，由95。/。A(A:0.1%HCOOH(水溶液))起始，在100。/。B(MeCN)下結(jié)束。流速2.0ml/min。HPLC分析是在由G1379A揭:型真空脫猛置、G1312A二元泵、G1367A孔盤自動進樣器、G1316A柱溫箱和G1315B^L管陣列檢測器組成的AgilentHP1000系統(tǒng)上i^f亍的。柱X-TerraMS,Waters,3.0x100mm,3.5ym。柱溫i殳置為40。C，流速為1.Oml/min。J^l管陣列始r測器在210-300皿下掃描，步幅辯寬分別設(shè)置為2nm和O.05min。采用線')^#度，在4^4中內(nèi)，由1000/。A(A:5%MeCN中的10mMNH,OAc)起始，在10()o/oB(B:MeCN)下結(jié)束。反應(yīng)之后典型的操作程序是由使用例如乙酸乙酯的溶劑對產(chǎn)物進行萃取、水洗、接著通過MgS(^或Na2Sa對有才M目進行干燥、過濾和真空下對溶液進行,所組成。薄層色鐠(TLC)是在MerckTLC板(硅膠60F254)上進行的，并JUt斑點進行紫外顯色?？焖偕V是在使用RediSepMjE4目快速柱的CombiFlashCompanion上進行的。用于快速色i瞽的典型的溶劑是氯仿/曱醇、二氯甲烷/曱醇、M/乙酸乙酯、氯仿/曱醇/NH3(水溶液)、以及二氯曱烷/曱醇NH3(水溶液)制備色鐠是在具有^管陣列檢測器的Waters自動純化HPLC上進行的。柱XTerraMSC8，19>O00mm，10pm。在具有5。/。MeCN的MilliQ水中，MeCN/0.1MNH,Oac的梯度在13min內(nèi)從2()o/。MeCN變到60%MeCN。^tii20ml/min?；蛘撸兓窃诰哂杏蒞atersSymmetry⑧柱(C18,5jum,100mmx19ram)裝備的ShimadzuSPD-10AUV-vis-檢測器和半制備ShimadzuLC-8AHPLC上完成的。在MilliQ水中，MeCN/0.1%三氟乙酸的梯度在15min內(nèi)從50/oMeCN變到100%MeCN。流速10ml/min。醒PDMF《y^二甲基甲st^;EDCl-乙基-3-(3-二曱^tJ^丙基)碳^^亞胺;E惹乙酸乙酯；HC1鹽酸；CH2C12二氯曱烷；CDC13氖代氯仿；Ether二乙醚；MeCN乙腈；Na2C03碳酸鈉；NaOH氬氧化鈉；Na2S04硫酸鈉Q跳疏酸氬四丁銨；r.t.室溫。所使用的起始原料是從商業(yè)來源可以獲得的，或者是根據(jù)文獻步驟制備并具有與所報導(dǎo)相符的^l^數(shù)據(jù)的。實施例1、[3-(2，3，4，5，6，7,8，10，11，12-十硼二環(huán)[7.2.1]十二烷一l一^jQ丙基]亞胺1酸二叔丁酯的制備向攪拌的QHS04(3.04g，8,96咖ol)和NaOH1M7jc溶液(18ml)的混^f勿中加入CH2Cl2(20ml)，接著逐滴加入在CH2Cl2(15ml)中的l-(3-澳丙10—2，3，4，5，6，7，8，10,11，12-十硼二環(huán)[7.2.1]十二烷(7b^a力ecTro/71996,37(38)，6905—6908)(2.16g，8.15咖ol)。所得溶、絲回流下加熱2h并冷卻到r.t.。加入水(10ml)。用CH2C12(30ml)萃^17K層?；旌系挠袡C層用水(10ml)洗滌、通過Na2S(X干燥并棘。剩絲用醚(30ml)進行攪拌。將沉淀物用干醚(2x20ml)進行萃取，并且在真空下,混合的萃取物。粗品通過快速色譜進行純化。產(chǎn)率62%(2.21g)。腿(400MHz,CDC13):5ppm3.35(t，2H，J=7.07Hz)，2.62(s，1H)，1.68-1.56(m，4H)，1.49-1.44(m，18H)。LC/MS(ESI)邁/z402(M+l)。實施例2、3-(2，3，4，5，6，7，8，10，11，12-十硼二環(huán)[7.2.l]十二烷-l-基)-丙烷-1-胺的制備<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>將來自實施例1的[3-(2'3,4，5，6，7，8,10，11，12-十硼二環(huán)[7.2.l]十二烷-l-基)丙基]亞胺4酸二叔丁酯(2.21g，5.50mol)溶于在EtOAc(100ml)中的HC1#溶液。將溶液在r.t.下?lián)璋柽^夜，然后蒸發(fā)。用干醚洗涂白色絮狀沉淀。然后將沉淀溶于水，溶';M^20)3的#水溶液(40ml)進行堿化。水層用^ii行萃取并將^給的有機萃取物用鹽水(3x10ml)洗涂。在真空下除去溶劑從而得到游離的胺。產(chǎn)率76%(841mg)丄H腿(400MHz,CDC13):5ppm2.62(s，1H)，2.54-2.42(m，2H)，1.69-1.58(m,2H),1.44-1.33(m，2H)。LC/MS咖/n々202(M+l)。實施例3、(4-{[(2-M-4-氧代-3，4-二錄咬-6-基)曱基]募JJ苯曱醋){3-[(1A95)-2，3，4，5，6，7，8，10，11，12-十硼二環(huán)[7.2.1]十二烷-l-基]丙基)-cc-谷鵬和(4-{[(2-絲-4-氧代-3，4-二JL^—6-基)甲基〗苯曱喊)[3-(2，3，4，5，6，7，8，10，11，12-十硼二環(huán)[7.2.1]十二烷-l-基)丙基]-L-谷,的制備和將葉酸(1.84g，4.17咖ol)，EDC(799mg，4.17咖ol)和DMAP(509mg,4.17mmol)溶于干燥的DMF(200ml)中。溶液在20'C和氬氣氣氛下攪拌3h。然后加入在DMF(40ml)中的來自實施例2的3-(2，3，4，5，6，7，8，10,11，12-十硼二環(huán)[7.2.1]十二烷-l-基)丙烷-l-胺(839mg,4.17mmo1),并將〉'^^攪拌1天。溶劑在真空下除去。剩絲用醚/CH2Cl2混合物洗滌兩次。粗產(chǎn)品用制備色譜進行純化。產(chǎn)率7.5%(190mg)。兩個異構(gòu)體都具有LC/MS(ESI)邁/z623(M-1)。保留時間在12min。方法8.48和8.78min。(在該情況下使用具有2.5mM的乙酸水溶液的等濃度、冼脫方法)。才M居本發(fā)明的^^的體外研究對來自實施例3的純化材料(以下稱作BF)進行的體外^f吏用四種不同的來源于人的腫瘤細胞昧，包括人的神經(jīng)膠質(zhì)瘤細gU343mga、人的肝癌細月沐Hep3B、人的乳腺癌細gMCF7和人的肉瘤細員4SS。將細胞平鋪在^i^覆的組織培養(yǎng)塑料亞上，并JL^37。C下在具有用5°/。C02平衡的濕潤空氣的溫育器中進行培養(yǎng)。它們在推薦的組織培養(yǎng)基中生長，所述培養(yǎng)基添加了1(T/。的FCS和PEST(青霉素IOOIU/ml和鏈霉素100mg/ml)。為了細胞的通過，將細胞用胰蛋白條EDTA(具有0.25%的胰蛋白酶和0.02%的EDTA、不^丐和鎂的磷緩沖鹽水(PBS))進行胰蛋白斷匕?？傊?，正如以下實施例4-6中將顯示的，BF已經(jīng)在體外試瞼中顯示出預(yù)期的結(jié)杲，其在腫瘤細月&聶取、積累和保留方面都優(yōu)于BPA，并沒有出規(guī)/f^f可毒f生的跡象。實施例4、BF的細I^聶取將U343mga細胞以75%細胞密度平鋪在Petri培#上，并且用溶于組織培養(yǎng)基的硼酸(BA)、與維生素Bi,共輒的硼(BB)、1-4-二羥基硼基苯丙氨酸(BPA)或BF中的一種溫育6小時。全部四種含硼^^物以相對于硼含量(5xl(TM硼)的等摩爾濃JL^口入并溶解在組織培養(yǎng)基中。通過除去含硼組織培養(yǎng)基以及為了從細^Ji洗去過量的培養(yǎng)基而加入冷PBS緩沖液來結(jié)束溫育。通過^^J,淀帚從塑料亞上刮鏟下來而立刻M細胞。它們在冷的PBS中收集并ilit過離心形成沉淀。才,Bradford標^^1^對細J^羊品進行總蛋白分析。通過直Wu^生質(zhì)原子發(fā)射光譜(DCP-AES)對沉淀細胞進行硼分析。在60匸下用硫^/硝酸(1/1)對樣品(50-130mg)消化。加入TritonX-100和水從而得到50mg組織/ml、15%總酸v/v和5%TritonX-100v/v的濃度。硼濃^1基于已知對照樣品的。結(jié)a下表l中給出。葉酸與BF形式的硼之間的^i^^致了人的惡寸級質(zhì)瘤細胞抹U343mga的活性攝取，也就是說其優(yōu)于對作為硼酸(BA)、硼苯丙氨酸(BPA)或與維生素Bu共軛的硼(BB)的硼的攝取。表l不同的硼^^的細胞^聶取。對于兩個平行"(1和#2)中的不同的硼^^#來說，硼^f:表示為U343mga細胞中總細胞蛋白的函數(shù)(ug硼/g細胞蛋白)(在#1和微2中分別為7.2和7.7mg硼/ml培養(yǎng)基)。<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>實施例5、不同腫瘤細fefBF的攝取將四種來源于人的不同肺瘤細胞林:U343mga、H印3B、MCF7和4SS以40-50%(低)以及90-100%(高)細胞密度(匯合)平鋪在Petri培^jm上，并且如上所述用溶于組織培養(yǎng)基的BF溫育6小時。通*去含硼培養(yǎng)基以及為了從細^Ji洗去過量的培養(yǎng)基而加入冷的PBS緩沖液來結(jié)束溫育。通過佳月橡膠淀帚從塑料亞上刮伊下來而立刻收獲細胞，它們在冷的PBS中收集并且通過離心形成沉淀。才標>^1^進行總蛋白和硼分析(如上)。結(jié)n下表2中給出。對于以^^高細胞密度測試的所有四種人的胂瘤細麟(W母細胞瘤(U343mga)、肝癌(H印3B)、乳腺癌(MCF7)、肉瘤(4SS))中，發(fā)現(xiàn)BF^1—種高效的硼載體。表2BF的細l^t聶取。硼^J:表示為總細胞蛋白的函數(shù)(lig硼/g細胞蛋<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>實施例6BF的細胞內(nèi)保留將U343mga細胞以75%細胞密度平鋪在Petri培一上，并且用于組織培養(yǎng)基中的l-4-二羥基硼M丙氨酸(BPA)或BF中的一種溫育18小時。全部兩種硼^^物以相對于硼含量(5x10-4M硼)的等摩爾的濃>^>入組織培養(yǎng)基中。通過用沒有硼的培養(yǎng)基代^^硼培養(yǎng)基而結(jié)^J顯育。細麟品在時間點0、2和7小時進行Mf，其中0時間點4、表剛好用硼^^物溫育18小時之后。細胞用冷的PBS洗滌，并通過^^],淀帚從塑料jni上刮鏟下來而將其收獲，它們在冷的PBS中收集并JIii過離心形成沉淀。如上所iW細胞沉淀進行總蛋白和硼#的分析。結(jié)絲下表3中給出。絲細胞內(nèi)的攝取，在培養(yǎng)基中的BF完^1^后7小時時，保留在肺瘤細胞中的BF為總攝取的40%。表3在清除含硼培養(yǎng)基之后的0、2和7小時時U343mga細胞中的硼含量(jug硼/g細胞沉淀)。<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>權(quán)利要求1.一種根據(jù)式(I)的化合物id="icf0001"file="S2006800301784C00011.gif"wi="102"he="36"top="59"left="46"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="no"/>其中R1和R2中的一個是-NH-X-Y-Z、-O-X-Y-Z或-S-X-Y-Z，并且另一個是-OH、-NH-X-Y-Z、-O-X-Y-Z或-S-X-Y-Z；其中X是-(CH2)m-，其中m是0、1、2、3或4，或者-(CH2)p-O-(CH2)q-，其中p和q獨立地是1、2、3或4；Y是硼烷或碳硼烷，其中至少一個硼原子是10B；并且Z是H或親水基團，例如氨甲基、2-氨基乙基、3-氨基丙基、1，3-丙二醇-2-基-甲氧基、乙烯基乙醛?；蚨蚁┗胰；患捌渌帉W(xué)上可接受的鹽、溶劑化物和立體異構(gòu)體。2、根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中Y是<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>*表示連接到X或Z的鍵的位置；M是鈷，鈷-57或鐵；并且X如權(quán)利要求l中所定義。3、根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其是N-(4-{[(2-4-氧代-3，4-二氬蝶呤-6-基)甲基]氨基}苯曱?；?WH3-[(17，9》-2，3，4，5，6，7，8，10，11，12-十硼二環(huán)[7.2.1]十二烷-l-基]丙基}-ct-谷纖或(4-{[(2-M-4-氧代-3，4-二i^—6-基)甲基]絲}苯甲?；?WH3-(2，3，4，5，6，7，8，10，11，12-十硼二環(huán)[7.2.1]十二烷-l-基)丙基]-L-谷,。4、才權(quán)利要求1或2的化合物，其中！^是-NH-X-Y-Z、-0-X-Y-Z或-S-X+Z，并且R2是0H。5、才緣權(quán)利要求1到4任意一項的^^#，其中至少一個^^子是HC。6、用于治療的祁換權(quán)利要求1到5任意一項的化合物。7.用于診斷學(xué)的才M居權(quán)利要求5的^^>。8、一種藥物組合物，其包含根據(jù)權(quán)利要求1到5任意一項的^^物和藥學(xué)上可接受的載體、稀釋劑或輔助劑。9、才M居權(quán)利要求1到5任意一項所定義的式(I)^^物用于制"^腫瘤治療所用的藥物的用途。10、才財居權(quán)利要求9的用途，其中所述的腫瘤治療;Ut瘤的硼中子俘獲治療。11、#^權(quán)利要求9或10的用途，其中所i^Jt瘤源于中fef申經(jīng)系統(tǒng)，優(yōu)選神經(jīng)M:瘤，例如自母細胞瘤、神鄉(xiāng)^t肉瘤、間變性星形細胞瘤、別星形細胞瘤、毛細胞形星形細胞瘤、少突神經(jīng)膠質(zhì)瘤或腦干神經(jīng)膠質(zhì)瘤；腦膜瘤；外周神經(jīng)上皮瘤；原始神經(jīng)外胚層瘤；神經(jīng)母細胞瘤；生殖細胞瘤；垂體瘤；腦轉(zhuǎn)移瘤；或動^^脈畸形。12、才Mt權(quán)利要求9或10的用途，其中所iilt瘤是惡性腫瘤或轉(zhuǎn)移性腫瘤進程，優(yōu)選黑色素瘤、前列腺癌、肝癌、肺癌、乳腺癌或肉瘤。13、才M居權(quán)利要求5所定義的式(I)化合物用于制備正電子發(fā)射斷層掃描中所用的藥物的用途。14、才Mt權(quán)利要求1到5任意一項所定義的式(I)化a的制備方法，其中將式NH廣X-Y-Z、OH-X-Y-Z或SH-X-Y-Z的^^與葉^JS,其中的X、Y和Z如權(quán)利要求1到5任意一項所定義。15、一種腫瘤的治療方法，其中將藥學(xué)和藥理學(xué)有效量的4M^權(quán)利要求1到5任意一項所定義的式(I)^^物給藥于需要用這種與硼中子俘獲治療相結(jié)合的處理的對象。16、才,權(quán)利要求15要求的腫瘤治療的方法，其中所iilt瘤如權(quán)利要求11或12中所定義。17、一種腫瘤診斷的方法，其中將藥學(xué)和藥理學(xué)有效量的才權(quán)利要求5所定義的式(I)化合物給藥于要用正電子發(fā)射斷層掃描進行診斷的對象。全文摘要本發(fā)明涉及新的含硼化合物，包含所述化合物的藥物組合物、所述化合物的治療用途，以及所述化合物的制備方法。該化合物是用于硼中子俘獲治療(BNCT)的。文檔編號C07F5/02GK101268085SQ200680030178公開日2008年9月17日申請日期2006年8月17日優(yōu)先權(quán)日2005年8月19日發(fā)明者A·?？?E·阿澤爾,L-I·奧爾松申請人:海默爾凱普股份公司