專利名稱：：三烷基氧化膦反膠束溶液提取分離苦參堿和氧化苦參堿的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于天然藥物的生物堿
技術(shù)領(lǐng)域：
，特別涉及中藥活性成分苦參類生物堿的制備方法。二.
背景技術(shù)：
苦參堿在臨床上主要用于抗乙型和丙型肝炎，抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，抗肝的纖微化，抗菌和抗炎，對(duì)心血管系統(tǒng)和中樞系統(tǒng)的一些疾病也甚有療效，此外苦參堿在農(nóng)業(yè)上的運(yùn)用也越來越廣泛，被稱作綠色農(nóng)藥；氧化苦參堿則可用于抗乙肝和丙肝，改善肝細(xì)胞功能，調(diào)節(jié)免疫，抗炎，抗腫瘤，抗過敏，強(qiáng)心、抗心律失常和降壓，清除自由基及抗輻射等方面因此，隨著苦參堿和氧化苦參堿在臨床等方面的運(yùn)用越來越廣泛，其需求量也越來越大。目前，制備苦參堿的方法，主要是從中藥豆科植物苦參、苦豆子及廣豆根中提取分離并純化。一般是先對(duì)苦參粗粉，用溶劑法如用水、氯仿、甲醇、酸水及乙醇等作為提取劑，通過為浸漬、滲漉、煎煮、回流等經(jīng)典方法，如2005年8月第11巻第5期《中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)》的"苦參堿的提取工藝及測(cè)定方法的研究"一文，公開的是使用氯仿或者甲醇、酸水及乙醇等萃取劑通過反復(fù)萃取，提純苦參堿，但此方法不是根據(jù)生物堿特有性質(zhì)所進(jìn)行的，所制得的產(chǎn)品純度不高，且一般操作溫度高，很難保證苦參堿和氧化苦參堿的活性，氯仿和甲醇均為易揮發(fā)且含毒性的溶劑，大量使用，給操作帶來不便；也可通過強(qiáng)酸型陽(yáng)離子交換樹脂柱，使生物堿鹽陽(yáng)離子交換在樹脂上，而非生物堿化合物則流出柱外，將交換后的樹脂晾干，用氨水堿化。用氯仿提取的原理，得到苦參堿，但是操作煩瑣，同時(shí)產(chǎn)生大量廢液，不利于持續(xù)發(fā)展，且選擇性不高，生產(chǎn)成本高，不利于工業(yè)化生產(chǎn)。現(xiàn)有制備氧化苦參堿的方法，主要有溶劑萃取法和樹脂吸附。溶劑萃取法為，用乙醚，丙酮，氯仿等溶劑，在回流條件下，對(duì)苦參總堿通過反復(fù)多次萃取，達(dá)到提純氧化苦參堿的目的，但是由于氧化苦參堿在這些溶劑中的溶解性很好，很難將苦參堿很好地從溶劑中分離出來，故損失掉的氧化苦參堿較多，且同時(shí)一般苦參堿在這些溶劑中也會(huì)有一定的溶解度，分離程度低，最終所得的氧化苦參堿的純度低；并且步驟煩瑣，操作溫度高，很難保證氧化苦參堿和苦參堿的活性。也有用樹脂吸附的方法，如2006年11月第34巻第11期《西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)》的"大孔吸附樹脂分離苦參中氧化苦參堿的研究"一文，公開的是以豆科植物苦參的干燥根為原料，制備氧化苦參堿提取液后，用大孔樹脂吸附氧化苦參堿，該方法所用溶劑量大，產(chǎn)生和排放的費(fèi)液量大，對(duì)環(huán)境的污染嚴(yán)重，不利于大批量生產(chǎn)。本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有制備苦參堿和氧化苦參堿方法的不足之處，提供一種三烷基氧化膦反膠束溶液提取分離苦參堿和氧化苦參堿的方法，具有用一種方法同時(shí)制備出苦參堿和氧化苦參堿，且萃取條件溫和，在室溫下便可進(jìn)行萃取分離，降低了苦參堿的氧化速度，能保證苦參堿和氧化苦參堿的生物活性，此外反膠束無毒易于操作，回收率高，萃取后的反膠束可以回收利用，降低了生產(chǎn)成本，便于工業(yè)化生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明的原理苦參堿與氧化苦參堿的分子結(jié)構(gòu)相似，其差異在于苦參堿的15位氮上未絡(luò)合氧，而氧化苦參堿的15位氮上被氧絡(luò)合，本發(fā)明以三垸基氧化膦為萃取劑，環(huán)己垸為稀釋劑，制成反膠束體系，利用萃取劑三垸基氧化膦分子上的P-0與苦參堿15位氮形成絡(luò)合物，從而萃取苦參堿，而氧化苦參堿卻不能形成這樣的作用力，因此將苦參堿和氧化苦參堿分離。實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的的技術(shù)方案是一種三烷基氧化膦反膠束溶液提取分離苦參堿和氧化苦參堿的方法，以市購(gòu)苦參堿粗品為原料，用三烷基氧化膦為萃取劑、環(huán)己垸為稀釋劑制備三烷基氧化膦反膠束溶液，對(duì)市購(gòu)苦參堿粗品溶液進(jìn)行萃取分離，并對(duì)三烷基氧化膦反膠束溶液進(jìn)行再生利用。其具體的方法步驟如下(1)苦參堿粗品溶液的制備以市購(gòu)苦參堿粗品為原料，按苦參堿粗品蒸餾水的質(zhì)量比為i:10~20的比例，在苦參堿粗品中加入蒸餾水，攪拌溶解后，再過濾，收集濾液，制備出苦參堿粗品溶液。(2)三烷基氧化膦反膠束溶液的制備先按三垸基氧化膦萃取劑環(huán)己烷稀釋劑的質(zhì)量比為i:2550的比例，在三垸基氧化膦萃取劑中，加入環(huán)己垸稀釋劑，攪拌下混合溶解，待形成透明均勻的溶液后，再加入蒸餾水，攪拌溶解，至形成透明均勻的、濃度為24%的三垸基氧化膦反膠束溶液。其三垸基氧化膦蒸餾水的質(zhì)量比為l:0.050.2。(3)氧化苦參堿的制備在第(i)、(2)步完成后，按第(2)步制備出的三烷基氧化膦反膠束溶液第(i)步制備出的苦參堿粗品溶液的體積比為i:13的比例，在萃取器中，加入苦參堿粗品溶液和三垸基氧化膦反膠束溶液，在攪拌下進(jìn)行萃取，萃取時(shí)間為80120min，再在分液器中進(jìn)行分離，分別收集下層萃取液和上層萃取有苦參堿的三烷基氧化膦反膠束溶液。在對(duì)收集的下層萃取液中，再加入三烷基氧化膦反膠束溶液，再進(jìn)行萃取分離，再分別收集下層萃取液和上層萃取有苦參堿的三浣基氧化膦反膠束溶液，其三垸基氧化膦反膠束溶液下層萃取液的體積比為1:13,如此重復(fù)萃取23次。最后，將對(duì)所集的下層萃取液，放置在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中，在溫度為6070'C、真空度為0.060.08MPa的條件下，進(jìn)行真空濃縮，就制備出氧化苦參堿的濃縮液。(4)反萃取苦參堿溶液在第(3)步完成后，將第(3)步中所收集的上層萃取有苦參堿的三垸基氧化膦反膠束溶液，轉(zhuǎn)移至另一萃取器中，加入其15倍體積的蒸餾水，攪拌反萃取80120min，再在分液器中進(jìn)行分離，并分別收集下層反萃取液和上層三烷基氧化膦反膠束溶液。對(duì)收集的上層三烷基氧化膦反膠束溶液，再加入其15倍體積的蒸餾水，再進(jìn)行反萃取分離，再分別收集下層反萃取液和上層三垸基氧化膦反膠束溶液，如此重復(fù)反萃取23次，最后對(duì)所收集的下層反萃取溶液，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中，在溫度為607(TC、真空度為0.060.08MPa的條件下，進(jìn)行真空濃縮，就制備出苦參堿的濃縮液。(5)制備苦參堿和氧化苦參堿凍干粉在第(4)步完成后，分別對(duì)第(4)步制備出的苦參堿濃縮液及第(3)步制備出的氧化苦參堿濃縮液放置在冷凍干燥機(jī)中，在壓強(qiáng)為2550Pa、干燥溫度為-50-60°C、冷凍干燥時(shí)間為2436h,就分別制備出純度為8593.6%的苦參堿及純度為73.875.6%%的氧化苦參堿凍干粉。(6)三垸基氧化膦反膠束溶液的再生最后對(duì)第(4)步所收集的上層三烷基氧化膦反膠束溶液，因水量及雜質(zhì)過多而渾濁，就在其中加入干燥劑，如分子篩或Na2S04或CaCL2等干燥劑，靜置12天后收集上層清夜，即為反膠束再生液，可再次使用。本發(fā)明采用以上技術(shù)方案后主要有以下特點(diǎn)1.本發(fā)明技術(shù)方案中主要步驟是從苦參堿粗品溶液中萃取出苦參堿，在余液中得氧化苦參堿，再反萃取苦參堿即可，制備方法簡(jiǎn)便，所需的勞動(dòng)量少，且制備的時(shí)間短，便于工業(yè)化規(guī)模生產(chǎn)。2.本發(fā)明方法的制備條件容易實(shí)現(xiàn)，所用的設(shè)備少，并且通過多次反萃取后的反膠束溶液可以再生利用，節(jié)約了生產(chǎn)原料，反萃取劑為蒸餾水，易得對(duì)有利于對(duì)環(huán)境的保護(hù)，從而有效降低了生產(chǎn)成本。3.本發(fā)明的操作條件溫和，萃取和反萃取均在室溫下進(jìn)行不僅保證苦參堿和氧化苦參堿的生物活性，且操作簡(jiǎn)便。4.本發(fā)明方法的效率高，對(duì)苦參堿和氧化苦參堿的選擇性好，采用本發(fā)明方法后，苦參堿的純度可達(dá)85~93.6%，萃余液中氧化苦參堿的純度可達(dá)73.875.6%。采用本發(fā)明方法制備出的參堿在臨床上主要有①抗病毒作用②抗心律失常作用③抗動(dòng)脈粥樣硬化作用④抗高血壓血管重構(gòu)作用⑤抗胃黏膜損傷作用⑥利膽作用⑦抗肝損傷作用⑧抗炎作用⑨抗皮膚纖維化作用⑩抗腫瘤作用等，此外苦參堿在農(nóng)藥上的運(yùn)用也越來越多，被稱作綠色農(nóng)藥。制備出的氧化苦參堿則可用于抗癌、抗炎、免疫調(diào)節(jié)、保肝、鎮(zhèn)痛解熱降溫、強(qiáng)心、降壓、抗菌、殺蟲、治療心律不齊等多方面。四.具體實(shí)施方式下面結(jié)合具體實(shí)施方式來進(jìn)一步說明本發(fā)明。實(shí)施例l一種三垸基氧化膦反膠束溶液提取分離苦參堿和氧化苦參堿的方法的具體歩驟如下(1)苦參堿粗品溶液的制備以市購(gòu)苦參堿粗品為原料，按苦參堿粗品蒸餾水的質(zhì)量比為i:io的比例，在苦參堿粗品中加入蒸餾水，攪拌溶解后，再過濾，收集濾液，制備出苦參堿粗品溶液。(2)三垸基氧化膦反膠束溶液的制備先按三垸基氧化膦萃取劑環(huán)己烷稀釋劑的質(zhì)量比為i:25的比例，在三烷基氧化膦萃取劑中，加入環(huán)己烷稀釋劑，攪拌下混合溶解，待形成透明均勻的溶液后，再加入蒸餾水，攪拌溶解，至形成透明均勻的、濃度為2%的三烷基氧化膦反膠束溶液。其三烷基氧化膦蒸餾水的質(zhì)量比為i:0.05。(3)氧化苦參堿的制備在第(i)、(2)步完成后，按第(2)步制備出的三烷基氧化膦反膠束溶液第(i)步制備出的苦參堿粗品溶液體積比為i:l比例，在萃取器中加入苦參堿粗品溶液和三烷基氧化膦反膠束溶液，在攪拌下進(jìn)行萃取，萃取時(shí)間為80min，再在分液器中進(jìn)行分離，分別收集下層萃取液和上層萃取有苦參堿的三烷基氧化膦反膠束溶液。在收集的下層萃取液中，再加入三垸基氧化膦反膠束溶液，再進(jìn)行萃取分離，再分別收集下層萃取液和上層萃取有苦參堿的三垸基氧化膦反膠束溶液，其三垸基氧化膦反膠束溶液下層萃取液的體積比為l:l，如此重復(fù)萃取2次。最后，將所集的下層萃取液，放置在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中，在溫度為60'C、真空度為0.06MPa的條件下，進(jìn)行真空濃縮，就制備出氧化苦參堿的濃縮液。(4)反萃取苦參堿溶液在第(3)步完成后，將第(3)步中所收集的上層萃取有苦參堿的三垸基氧化膦反膠束溶液，轉(zhuǎn)移至另一萃取器中，加入其l倍體積的蒸餾水，攪拌反萃取80min，再在分液器中進(jìn)行分離，并分別收集下層反萃取液和上層三垸基氧化膦反膠束溶液。對(duì)收集的上層三垸基氧化膦反膠束溶液，再加入其l倍體積的蒸餾水，再進(jìn)行反萃取分離，再分別收集下層反萃取液和上層三烷基氧化膦反膠束溶液，如此重復(fù)反萃取2次，最后對(duì)所收集的下層反萃取溶液，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中，在溫度為6(TC、真空度為0.06MPa的條件下，進(jìn)行真空濃縮，就制備出苦參堿的濃縮液。(5)制備苦參堿和氧化苦參堿凍干粉在第(4)步完成后，分別對(duì)第(4)步制備出的苦參堿濃縮液及第(3)步制備出的氧化苦參堿濃縮液放置在冷凍干燥機(jī)中，在壓強(qiáng)為25Pa、干燥溫度為-50°C、冷凍干燥時(shí)間為24小時(shí)，就分別制備出純度為85%的苦參堿及純度為73.8%的氧化苦參堿凍干粉。(6)三烷基氧化膦反膠束溶液的再生最后對(duì)第(4)步所收集的上層三垸基氧化膦反膠束溶液，因水量及雜質(zhì)過多而渾濁，就在其中加入分子篩干燥劑，靜置1天，收集上層清夜，即為反膠束再生液，可再次使用。實(shí)施例2一種三烷基氧化膦反膠束溶液提取分離苦參堿和氧化苦參堿的方法的具體步驟如下(1)苦參堿粗品溶液的制備以市購(gòu)苦參堿粗品為原料，按苦參堿粗品蒸餾水的質(zhì)量比為i:13的比例，在苦參堿粗品中加入蒸餾水，攪拌溶解后，再過濾，收集濾液，制備出苦參堿粗品溶液。(2)三烷基氧化膦反膠束溶液的制備先按三垸基氧化膦萃取劑環(huán)己烷稀釋劑的質(zhì)量比為i:35的比例，在三垸基氧化膦萃取劑中，加入環(huán)己垸稀釋劑，攪拌下混合溶解，待形成透明均勻的溶液后，再加入蒸餾水，攪拌溶解，至形成透明均勻的、濃度為3%的三烷基氧化膦反膠束溶液。其三垸基氧化膦蒸餾水的質(zhì)量比為i:o.8。(3)氧化苦參堿的制備在第(i)、(2)步完成后，按第(2)步制備出的三烷基氧化膦反膠束溶液第(i)步制備出的苦參堿粗品溶液體積比為i:2比例，在萃取器中加入苦參堿粗品溶液和三烷基氧化膦反膠束溶液，在攪拌下進(jìn)行萃取，萃取時(shí)間為100min，再在分液器中進(jìn)行分離，分別收集下層萃取液和上層萃取有苦參堿的三烷基氧化膦反膠束溶液。在對(duì)收集的下層萃取液中，再加入三垸基氧化膦反膠束溶液，再進(jìn)行萃取分離，再分別收集下層萃取液和上層萃取有苦參堿的三烷基氧化膦反膠束溶液，其三垸基氧化膦反膠束溶液下層萃取液的體積比為1:2，如此重復(fù)萃取2次。最后，將所集的下層萃取液，放置在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中，在溫度為65'C、真空度為0.07MPa的條件下，進(jìn)行真空濃縮，就制備出氧化苦參堿的濃縮液。(4)反萃取苦參堿溶液在第(3)步完成后，將第(3)步中所收集的上層萃取有苦參堿的三烷基氧化膦反膠束溶液，轉(zhuǎn)移至另一萃取器中，加入其3倍體積的蒸餾水，攪拌反萃取100min，再在分液器中進(jìn)行分離，并分別收集下層反萃取液和上層三垸基氧化膦反膠束溶液。對(duì)收集的上層三烷基氧化膦反膠束溶液，再加入其3倍體積的蒸餾水，再進(jìn)行反萃取分離，再分別收集下層反萃取液和上層三烷基氧化膦反膠束溶液，如此重復(fù)反萃取2次，最后對(duì)所收集的下層反萃取溶液，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中，在溫度為65'C、真空度為0.07MPa的條件下，進(jìn)行真空濃縮，就制備出苦參堿的濃縮液。(5)制備苦參堿和氧化苦參堿凍干粉在第(4)步完成后，分別對(duì)第(4)步制備出的苦參堿濃縮液及第(3)步制備出的氧化苦參堿濃縮液放置在冷凍干燥機(jī)中，在壓強(qiáng)為40Pa、干燥溫度為-57°C、冷凍干燥時(shí)間為30h,就分別制備出純度為87.2%的苦參堿及純度為74.2%的氧化苦參堿凍千粉。(6)三垸基氧化膦反膠束溶液的再生最后對(duì)第(4)步所收集的上層三烷基氧化膦反膠束溶液，因水量及雜質(zhì)過多而渾濁，就在其中加入Na2S04干燥劑，靜置1天，收集上層清夜，即為反膠束再生液，可再次使用。實(shí)施例3一種三烷基氧化膦反膠束溶液提取分離苦參堿和氧化苦參堿的方法的具體步驟如下(1)苦參堿粗品溶液的制備以市購(gòu)苦參堿粗品為原料，按苦參堿粗品蒸餾水的質(zhì)量比為i:20的比例，在苦參堿粗品中加入蒸餾水，攪拌溶解后，再過濾，收集濾液，制備出苦參堿粗品溶液。(2)三烷基氧化膦反膠束溶液的制備先按三烷基氧化膦萃取劑環(huán)己烷稀釋劑的質(zhì)量比為l:50的比例，在三烷基氧化膦萃取劑中，加入環(huán)己垸稀釋劑，攪拌下混合溶解，待形成透明均勻的溶液后，再加入蒸餾水，攪拌溶解，至形成透明均勻的、濃度為4%的三烷基氧化膦反膠束溶液。其三垸基氧化膦蒸餾水的質(zhì)量比為i:0.2。(3)氧化苦參堿的制備在第(i)、(2)步完成后，按第(2)步制備出的三烷基氧化膦反膠束溶液第(i)歩制備出的苦參堿粗品溶液體積比為i:3比例，在萃取器中加入苦參堿粗品溶液和三烷基氧化膦反膠束溶液，在攪拌下進(jìn)行萃取，萃取時(shí)間為120rain，再在分液器中進(jìn)行分離，分別收集下層萃取液和上層萃取有苦參堿的三垸基氧化膦反膠束溶液。在收集的下層萃取液再加入三垸基氧化膦反膠束溶液，再進(jìn)行萃取分離，再分別收集下層萃取液和上層萃取有苦參堿的三烷基氧化膦反膠束溶液，其三垸基氧化膦反膠束溶液下層萃取液的體積比為1:3，如此重復(fù)萃取3次。最后，將所集的下層萃取液，放置在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中，在溫度為70'C、真空度為0.08MPa的條件下，進(jìn)行真空濃縮，就制備出氧化苦參堿的濃縮液。(4)反萃取苦參堿溶液在第(3)步完成后，將第(3)步中所收集的上層萃取有苦參堿的三垸基氧化膦反膠束溶液，轉(zhuǎn)移至另一萃取器中，加入其5倍體積的蒸餾水，攪拌反萃取120min，再在分液器中進(jìn)行分離，并分別收集下層反萃取液和上層三垸基氧化膦反膠束溶液。對(duì)收集的上層三垸基氧化膦反膠束溶液，再加入其5倍體積的蒸餾水，再進(jìn)行反萃取分離，再分別收集下層反萃取液和上層三烷基氧化膦反膠束溶液，如此重復(fù)反萃取3次，最后對(duì)所收集的下層反萃取溶液，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中，在溫度為70'C、真空度為O.OSMPa的條件下，進(jìn)行真空濃縮，就制備出苦參堿的濃縮液。(5)制備苦參堿和氧化苦參堿凍干粉在第(4)步完成后，分別對(duì)第(4)步制備出的苦參堿濃縮液及第(3)步制備出的氧化苦參堿濃縮液放置在冷凍干燥機(jī)中，在壓強(qiáng)為50Pa、干燥溫度為-6(TC、冷凍干燥時(shí)間為36h，就分別制備出純度為93.6%的苦參堿及純度為75.6%的氧化苦參堿凍干粉。(6)三烷基氧化膦反膠束溶液的再生最后對(duì)第(4)步所收集的上層三垸基氧化膦反膠束溶液，因水量及雜質(zhì)過多而渾濁，就在其中加入CaCL2干燥劑，靜置2天，收集上層清夜，即為反膠束再生液，可再次使用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用實(shí)施例l，2，3所制備的苦參堿和氧化苦參堿，分別用毛細(xì)管電泳法測(cè)定其純度，其結(jié)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>通過上表可以看出采用本發(fā)明方法所制備的苦參堿的純度為85~93.6%，最高時(shí)可達(dá)到93.6%，氧化苦參堿的純度為73.8~75.6%最高為75.6%。權(quán)利要求1.一種三烷基氧化膦反膠束溶液提取分離苦參堿和氧化苦參堿的方法，其特征在于其具體的方法步驟如下(1)苦參堿粗品溶液的制備以市購(gòu)苦參堿粗品為原料，按苦參堿粗品∶蒸餾水的質(zhì)量比為1∶10～20的比例，在苦參堿粗品中加入蒸餾水，攪拌溶解后，再過濾，收集濾液；(2)三烷基氧化膦反膠束溶液的制備先按三烷基氧化膦萃取劑∶環(huán)己烷稀釋劑的質(zhì)量比為1∶25～50的比例，在三烷基氧化膦萃取劑中，加入環(huán)己烷稀釋劑，攪拌下混合溶解，待形成透明均勻的溶液后，再加入蒸餾水，攪拌溶解，至形成透明均勻的、濃度為2～4％的三烷基氧化膦反膠束溶液，其三烷基氧化膦∶蒸餾水的質(zhì)量比為1∶0.05～0.2；(3)氧化苦參堿的制備在第(1)、(2)步完成后，按第(2)步制備出的三烷基氧化膦反膠束溶液∶第(1)步制備出的苦參堿粗品溶液的體積比為1∶1～3的比例，在萃取器中，加入苦參堿粗品溶液和三烷基氧化膦反膠束溶液，在攪拌下進(jìn)行萃取，萃取時(shí)間為80～120min，再在分液器中進(jìn)行分離，分別收集下層萃取液和上層萃取有苦參堿的三烷基氧化膦反膠束溶液，在收集的下層萃取液中，再加入三烷基氧化膦反膠束溶液，再進(jìn)行萃取分離，再分別收集下層萃取液和上層萃取有苦參堿的三烷基氧化膦反膠束溶液，其三烷基氧化膦反膠束溶液∶下層萃取液的體積比為1∶1～3，如此重復(fù)萃取2～3次，最后，將所收集的下層萃取液，放置在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中，在溫度為60～70℃、真空度為0.06～0.08MPa的條件下，進(jìn)行真空濃縮；(4)反萃取苦參堿溶液在第(3)步完成后，將第(3)步中所收集的上層萃取有苦參堿的三烷基氧化膦反膠束溶液，轉(zhuǎn)移至另一萃取器中，加入其1～5倍體積的蒸餾水，攪拌反萃取80～120min，再在分液器中進(jìn)行分離，并分別收集下層反萃取液和上層三烷基氧化膦反膠束溶液，對(duì)收集的上層三烷基氧化膦反膠束溶液，再加入其1～5倍體積的蒸餾水，再進(jìn)行反萃取分離，再分別收集下層反萃取液和上層三烷基氧化膦反膠束溶液，如此重復(fù)反萃取2～3次，最后對(duì)所收集的下層反萃取溶液，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中，在溫度為60～70℃、真空度為0.06～0.08MPa的條件下，進(jìn)行真空濃縮；(5)制備苦參堿和氧化苦參堿凍干粉在第(4)步完成后，分別對(duì)第(4)步制備出的苦參堿濃縮液及第(3)步制備出的氧化苦參堿濃縮液放置在冷凍干燥機(jī)中，在壓強(qiáng)為25～50Pa、干燥溫度為-50～-60℃、冷凍干燥時(shí)間為24～36h，就分別制備出純度為85～93.6％的苦參堿及純度為73.8～75.6％％的氧化苦參堿凍干粉；(6)三烷基氧化膦反膠束溶液的再生最后對(duì)第(4)步所收集的上層三烷基氧化膦反膠束溶液，在其中加入干燥劑，如分子篩或Na2SO4或CaCL2干燥劑，靜置1～2天，收集上層清夜。2.按照權(quán)利要求1所述的三烷基氧化膦反膠束溶液提取分離苦參堿和氧化苦參堿的方法，其特征在于一種三烷基氧化膦反膠束溶液提取分離苦參堿和氧化苦參堿的方法的具體步驟如下(1)苦參堿粗品溶液的制備以市購(gòu)苦參堿粗品為原料，按苦參堿粗品蒸餾水的質(zhì)量比為i:io的比例，在苦參堿粗品中加入蒸餾水，攪拌溶解后，再過濾，收集濾液；(2)三垸基氧化膦反膠束溶液的制備先按三烷基氧化膦萃取劑環(huán)己垸稀釋劑的質(zhì)量比為i:25的比例，在三烷基氧化膦萃取劑中，加入環(huán)己烷稀釋劑，攪拌下混合溶解，待形成透明均勻的溶液后，再加入蒸餾水，攪拌溶解，至形成透明均勻的、濃度為2%的三烷基氧化膦反膠束溶液，其三烷基氧化膦蒸餾水的質(zhì)量比為i:0.05;(3)氧化苦參堿的制備在第(i)、(2)步完成后，按第(2)步制備出的三浣基氧化膦反膠束溶液第(l)步制備出的苦參堿粗品溶液體積比為i:l比例，在萃取器中，加入苦參堿粗品溶液和三烷基氧化膦反膠束溶液，在攪拌下進(jìn)行萃取，萃取時(shí)間為80min，再在分液器中進(jìn)行分離，分別收集下層萃取液和上層萃取有苦參堿的三烷基氧化膦反膠束溶液，在收集的下層萃取液中，再加入三垸基氧化膦反膠束溶液，再進(jìn)行萃取分離，再分別收集下層萃取液和上層萃取有苦參堿的三垸基氧化膦反膠束溶液，其三垸基氧化膦反膠束溶液下層萃取液的體積比為l:l，如此重復(fù)萃取2次，最后，將所集的下層萃取液，放置在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中，在溫度為6CTC、真空度為0.06MPa的條件下，進(jìn)行真空濃縮；(4)反萃取苦參堿溶液在第(3)步完成后，將第(3)步中所收集的上層萃取有苦參堿的三垸基氧化膦反膠束溶液，轉(zhuǎn)移至另一萃取器中，加入其l倍體積的蒸餾水，攪拌反萃取80min，再在分液器中進(jìn)行分離，并分別收集下層反萃取液和上層三烷基氧化膦反膠束溶液，對(duì)收集的上層三垸基氧化膦反膠束溶液，再加入其l倍體積的蒸餾水，再進(jìn)行反萃取分離，再分別收集下層反萃取液和上層三垸基氧化膦反膠束溶液，如此重復(fù)反萃取2次，最后對(duì)所收集的下層反萃取溶液，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中，在溫度為60'C、真空度為0.06MPa的條件下，進(jìn)行真空濃縮；(5)制備苦參堿和氧化苦參堿凍干粉在第(4)步完成后，分別對(duì)第(4)步制備出的苦參堿濃縮液及第(3)步制備出的氧化苦參堿濃縮液放置在冷凍干燥機(jī)中，在壓強(qiáng)為25Pa、干燥溫度為-5(TC、冷凍干燥時(shí)間為24小時(shí)，就分別制備出純度為85%的苦參堿及純度為73.8%的氧化苦參堿凍干粉；(6)三烷基氧化膦反膠束溶液的再生最后對(duì)第(4)步所收集的上層三垸基氧化膦反膠束溶液，因水量及雜質(zhì)過多而渾濁，就在其中加入分子篩干燥劑，靜置1天，收集上層清夜。3.按照權(quán)利要求1所述的三烷基氧化膦反膠束溶液提取分離苦參堿和氧化苦參堿的方法，其特征在于一種三烷基氧化膦反膠束溶液提取分離苦參堿和氧化苦參堿的方法的具體步驟如下(1)苦參堿粗品溶液的制備以市購(gòu)苦參堿粗品為原料，按苦參堿粗品蒸餾水的質(zhì)量比為l:13的比例，在苦參堿粗品中加入蒸餾水，攪拌溶解后，再過濾，收集濾液；(2)三垸基氧化膦反膠束溶液的制備先按三烷基氧化膦萃取劑環(huán)己烷稀釋劑的質(zhì)量比為i:35的比例，在三垸基氧化膦萃取劑中，加入環(huán)己烷稀釋劑，攪拌下混合溶解，待形成透明均勻的溶液后，再加入蒸餾水，攪拌溶解，至形成透明均勻的、濃度為3%的三垸基氧化膦反膠束溶液，其三垸基氧化膦蒸餾水的質(zhì)量比為1:0.8;(3)氧化苦參堿的制備在第(i)、(2)步完成后，按第(2)步制備出的三垸基氧化膦反膠束溶液第(i)步制備出的苦參堿粗品溶液體積比為i:2比例，在萃取器中，加入苦參堿粗品溶液和三垸基氧化膦反膠束溶液，在攪拌下進(jìn)行萃取，萃取時(shí)間為100min，再在分液器中進(jìn)行分離，分別收集下層萃取液和上層萃取有苦參堿的三垸基氧化膦反膠束溶液，在收集的下層萃取液中，再加入三垸基氧化膦反膠束溶液，再進(jìn)行萃取分離；再分別收集下層萃取液和上層萃取有苦參堿的三烷基氧化膦反膠束溶液，其三垸基氧化膦反膠束溶液下層萃取液的體積比為1:2，如此重復(fù)萃取2次，最后，將所集的下層萃取液，放置在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中，在溫度為65"、真空度為0.07MPa的條件下，進(jìn)行真空濃縮；(4)反萃取苦參堿溶液在第(3)步完成后，將第(3)步中所收集的上層萃取有苦參堿的三垸基氧化膦反膠束溶液，轉(zhuǎn)移至另一萃取器中，加入其3倍體積的蒸餾水，攪拌反萃取100min，再在分液器中進(jìn)行分離，并分別收集下層反萃取液和上層三烷基氧化膦反膠束溶液，對(duì)收集的上層三烷基氧化膦反膠束溶液，再加入其3倍體積的蒸餾水，再進(jìn)行反萃取分離，再分別收集下層反萃取液和上層三烷基氧化膦反膠束溶液，如此重復(fù)反萃取2次，最后對(duì)所收集的下層反萃取溶液，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中，在》顯度為65'C、真空度為0.07MPa的條件下，進(jìn)行真空濃縮；(5)制備苦參堿和氧化苦參堿凍干粉在第(4)步完成后，分別對(duì)第(4)步制備出的苦參堿濃縮液及第(3)步制備出的氧化苦參堿濃縮液放置在冷凍干燥機(jī)中，在壓強(qiáng)為40Pa、干燥溫度為-57°C、冷凍干燥時(shí)間為30h，就分別制備出純度為87.2%的苦參堿及純度為74.2%的氧化苦參堿凍干粉；(6)三烷基氧化膦反膠束溶液的再生最后對(duì)第(4)步所收集的上層三垸基氧化膦反膠束溶液，因水量及雜質(zhì)過多而渾濁，就在其中加入Na2S04干燥劑，靜置1天，收集上M清夜。4.按照權(quán)利要求1所述的三烷基氧化膦反膠束溶液提取分離苦參堿和氧化苦參堿的方法，其特征在于一種三烷基氧化膦反膠束溶液提取分離苦參堿和氧化苦參堿的方法的具體步驟如下(1)苦參堿粗品溶液的制備以市購(gòu)苦參堿粗品為原料，按苦參堿粗品蒸餾水的質(zhì)量比為l:20的比例，在苦參堿粗品中加入蒸餾水，攪拌溶解后，再過濾，收集濾液；(2)三烷基氧化膦反膠束溶液的制備先按三烷基氧化膦萃取劑環(huán)己烷稀釋劑的質(zhì)量比為i:50的比例，在三垸基氧化膦萃取劑中，加入環(huán)己烷稀釋劑，攪拌下混合溶解，待形成透明均勻的溶液后，再加入蒸餾水，攪拌溶解，至形成透明均勻的、濃度為4%的三烷基氧化膦反膠束溶液，其三烷基氧化膦蒸餾水的質(zhì)量比為i:0.2;(3)氧化苦參堿的制備在第(1)、(2)步完成后，按第(2)步制備出的三烷基氧化膦反膠束溶液第(l)步制備出的苦參堿粗品溶液體積比為l:3比例，在萃取器中加入苦參堿粗品溶液和三烷基氧化膦反膠束溶液，在攪拌下進(jìn)行萃取，萃取時(shí)間為120min，再在分液器中進(jìn)行分離，分別收集下層萃取液和上層萃取有苦參堿的三烷基氧化膦反膠束溶液，在收集的下層萃取液中，再加入三烷基氧化膦反膠束溶液，再進(jìn)行萃取分離，再分別收集下層萃取液和上層萃取有苦參堿的三烷基氧化膦反膠束溶液，其三烷基氧化膦反膠束溶液下層萃取液的體積比為1:3，如此重復(fù)萃取3次，最后，將所集的下層萃取液，放置在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中，在溫度為70'C、真空度為0.08MPa的條件下，進(jìn)行真空濃縮；(4)反萃取苦參堿溶液在第(3)步完成后，將第(3)步中所收集的上層萃取有苦參堿的三烷基氧化膦反膠束溶液，轉(zhuǎn)移至另一萃取器中，加入其5倍體積的蒸餾水，攪拌反萃取120min，再在分液器中進(jìn)行分離，并分別收集下層反萃取液和上層三烷基氧化膦反膠束溶液，對(duì)收集的上層三垸基氧化膦反膠束溶液，再加入其5倍體積的蒸餾水，再進(jìn)行反萃取分離，再分別收集下層反萃取液和上層三烷基氧化膦反膠束溶液，如此重復(fù)反萃取3次，最后對(duì)所收集的下層反萃取溶液，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中，在溫度為7(TC、真空度為0.08MPa的條件下，進(jìn)行真空濃縮；(5)制備苦參堿和氧化苦參堿凍干粉在第(4)步完成后，分別對(duì)第(4)步制備出的苫參堿濃縮液及第(3)步制備出的氧化苦參堿濃縮液放置在冷凍干燥機(jī)中，在壓強(qiáng)為50Pa、干燥溫度為-6(TC、冷凍干燥時(shí)間為36h，就分別制備出純度為93.6%的苦參堿及純度為75.6%的氧化苦參堿凍干粉；(6)三烷基氧化膦反膠束溶液的再生最后對(duì)第(4)步所收集的上層三烷基氧化膦反膠束溶液，因水量及雜質(zhì)過多而渾濁，就在其中加入CaCL2干燥劑，靜置2天，收集上層清夜。全文摘要一種三烷基氧化膦反膠束溶液提取分離苦參堿和氧化苦參堿的方法，涉及中藥活性成分苦參類生物堿的制備方法。本發(fā)明以市購(gòu)苦參堿粗品為原料，用三烷基氧化膦為萃取劑、環(huán)己烷為稀釋劑制備三烷基氧化膦反膠束溶液，對(duì)苦參堿粗品溶液進(jìn)行萃取分離，并對(duì)三烷基氧化膦反膠束溶液進(jìn)行再生利用。由于本發(fā)明方法簡(jiǎn)單，制備條件簡(jiǎn)便，且產(chǎn)率高，三烷基氧化膦反膠束溶液可進(jìn)行再生利用，不僅充分利用了資源，且利于對(duì)環(huán)境的保護(hù)，所制備出的苦參堿純度高達(dá)93.6％、氧化苦參堿純度高達(dá)75.6％。故采用本發(fā)明所制備的產(chǎn)品，可廣泛用于肝病的治療，抗菌，抗炎，治療心率不齊等，近年來在治療心血管疾病和抗癌方面的運(yùn)用越來越多。文檔編號(hào)C07D471/22GK101130541SQ200710092688公開日2008年2月27日申請(qǐng)日期2007年9月11日優(yōu)先權(quán)日2007年9月11日發(fā)明者周小華,琴康,柳小平,東王申請(qǐng)人:重慶大學(xué)