專利名稱：：四氫吡咯并嘧啶二酮及其作為人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶抑制劑的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及取代3，4，6，7-四氫-lH-吡咯并[3，4-d]嘧啶-2，5-二酮雜環(huán)化合物及其在治療中的用途。
背景技術(shù)：
：人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(HNE)是一種在中性粒細(xì)胞的嗜天青顆粒中發(fā)現(xiàn)的32kDa絲氨酸蛋白酶。它具有降解多種細(xì)胞外基質(zhì)蛋白的作用，所述蛋白包括纖維結(jié)合蛋白、層粘連蛋白、蛋白聚糖、HI型和IV型膠原蛋白以及彈性蛋白(Bieth，G.InWe^//"/o/7oZW"W"cc咖w/a〃0/7，Mecham，R.P.編，AcademicPress,NY,USA1986，217-306)。長期以來HNE被認(rèn)為通過使組織結(jié)構(gòu)蛋白降解而修復(fù)和清理受損組織而在體內(nèi)穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮重要作用。它還通過降解細(xì)菌菌體參與細(xì)菌侵染的防御。HNE除了對(duì)基質(zhì)組織有作用之外，還參與IL-8基因表達(dá)的上調(diào)并誘發(fā)IL-8從肺上皮細(xì)胞中釋放。在被動(dòng)吸煙誘發(fā)的慢性阻塞性肺疾病的動(dòng)物模型中，HNE的小分子抑制劑和蛋白抑制劑都可抑制炎癥應(yīng)答和肺氣腫的發(fā)生(Wright,J.L.etal.J瓜/.Wesp/八Cr".Care2002，7",954-960;Churg，A.etal.血/.ie^/.厶Care歸.2003，199-207)。因此，HNE在基質(zhì)受損及以中性粒細(xì)胞的流入為特征的慢性呼吸疾病的炎癥應(yīng)答放大中都可能起作用。實(shí)際上，HNE被認(rèn)為在數(shù)種肺部疾病中起作用，包括慢性阻塞性肺疾患(COPD)、嚢性纖維化(CF)、急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)、肺氣腫、肺炎及肺纖維化。它還參與數(shù)種其中涉及組織重塑(tissuemodelling)的心血管疾病，例如心衰竭以及急性心肌梗死后缺血性組織損傷的發(fā)生。COPD是涵蓋3種不同的病理學(xué)病癥的概括性術(shù)語，它們都會(huì)產(chǎn)生氣流受限慢性支氣管炎、肺氣腫及小氣道疾病。通常，所有這3種病癥在出現(xiàn)COPD的患者中都不同程度地存在，并且它們都可能歸因于中性粒細(xì)胞介導(dǎo)的炎癥，這可從COPD患者的支氣管肺泡溢出(BAL)的體液中》見效'J到的中十生豐立細(xì)胞數(shù)目的增加得到證實(shí)(Thompson,A.B.;Daughton:D.;etal.J瓜Wer.1989，140，1527-1537)。長期以來，COPD的主要致病因素被認(rèn)為是蛋白酶-抗蛋白酶的平衡(也被稱為"彈性蛋白酶抗彈性蛋白酶假說")，其中HNE與內(nèi)源性抗蛋白酶例如al-抗胰蛋白酶(a廣AT)、分泌性白細(xì)胞蛋白酶抑制因子(SLPI)及前彈力素(pre-elafin)的失衡導(dǎo)致COPD的多種炎性疾病。具有蛋白酶抑制劑ocl-抗胰蛋白酶遺傳缺陷的個(gè)體會(huì)形成嚴(yán)重程度隨時(shí)間增加的肺氣肺(Laurrell,C.B.;Erikkson，SSca/^/./."http://7.7/Fe".1963/JT，132-140)。因此HNE的過量是破壞性的，會(huì)導(dǎo)致肺形態(tài)的破壞伴隨彈性的喪失和肺氣道中肺泡附著點(diǎn)的破壞(肺氣肺)，同時(shí)伴隨微血管滲透性增加及粘液分泌過多(慢性支氣管炎)。多體配體(multimericligand)由多個(gè)通過合適的支架束綽在一起的結(jié)合域組成。由此將各結(jié)合域連接在一起形成單個(gè)分子，增加了該多體與多個(gè)活性位點(diǎn)逐步序貫結(jié)合的概率，導(dǎo)致高親和性相互作用(Handl，H.L."a入7Mr.T^e"2004，8，565-586;Han，Y.F."a/.，A/.oc^.層.1999,7，2569-2575)。還可以將具有相對(duì)高的脫離率的多重結(jié)合相互作用(序貫地或并行地)結(jié)合從而產(chǎn)生該多體配體的總體上低較的脫離率。因此，可以預(yù)期由合適的接頭和配體組成的分子在作用的效能和/或持續(xù)性方面將優(yōu)于單體配體。多體化合物不大可能為口服生物有效(由Lipinski的"規(guī)則5"預(yù)測(cè))，但其在靶向肺部的吸入給藥途徑中是有利的，因?yàn)榧词乖谖虢o藥后，大部分藥物可能進(jìn)入胃腸道(GItract)。因此，可以預(yù)期這樣的化合物在吸入給藥后會(huì)展示出比口服給藥療法降低的全身接觸以及由此而改善的毒性反應(yīng)。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供新的化合物，所述化合物為HNE的抑制劑，并對(duì)治療HNE活性在其中發(fā)揮作用的疾病或病癥有益。本發(fā)明化合物可以作為單體使用，或者特別是對(duì)于通過吸入進(jìn)行局部肺部給藥的情況，可以通過接頭支架共價(jià)連接的多體例如二體形式使用。具體實(shí)施方式在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供式(I)的化合物:R一Na)其中A為芳基或雜芳基；D為氧或辟u;R1、W和W彼此獨(dú)立地為氫、面素、硝基、氰基、C廣C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、羥基或C廣C6烷氧基或C廠C6烯氧基，其中C廣C6烷基和d-c6烷氧基還可被1-3個(gè)選自鹵素、羥基和c廣C4烷氧基的相同或不同的基團(tuán)取代；R和r4各自獨(dú)立地代表式-[XL-[Al^]p-[QL-[Alk2]q-[X1]「Z的基團(tuán)，其中K、m、n、p和q獨(dú)立地為O或l;Aiy和Alk'各自獨(dú)立地代表任選被取代的C廣C6亞烷基或C廣C6亞烯基，所述基團(tuán)可任選包含醚鍵(-0-)、硫醚鍵(-s-)或氨鍵(-nra-)，其中ra為氫或c「C3烷基；q代表(i)-0-、—s—、一s(-0)-、-s(=0)2—、-s+(RA)-、-n(RA)—、-n+(ra)(rb)-、-c(=0)-、-c(=0)0-、-0C(=0)-、-c(=0)nra-、-nrac(=0)-、-S(02)nra-、-MaS(02)-、-NRAC(=0)NRB-、-NRaC(=NRa)NRb-、-C(=NRd)NRe-、-NReC(=NRd)-，其中Ra、Rb、r。和rb獨(dú)立地為氬、C廣c6烷基、或C3-C6環(huán)烷基，或者^和Rb、或者r和Re,與它們所連的氮一起形成一個(gè)具有5-7個(gè)環(huán)原子的單環(huán)雜環(huán)，該單環(huán)雜環(huán)還可含有選自n、o和s的另外的雜原子；或者(ii)一個(gè)任選被取代的二價(jià)單環(huán)或雙環(huán)的具有3-6個(gè)環(huán)元素的碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)；X代表-(CO-、-s(02)-、-c(-o)o-、-(c-o)nra-或-s(02)nra-，其中RA為氫，d-C6烷基或C3-C6環(huán)烷基；X'代表-0-、-S-或-NH;并且Z為氫或一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)的具有3-6個(gè)環(huán)元素的碳環(huán)基團(tuán)或雜環(huán)基團(tuán)。本發(fā)明還包括含有兩個(gè)、三個(gè)或四個(gè)以上式(I)化合物的分子的多體化合物，所述分子通過接頭支架共價(jià)連接。以上式(I)的化合物及其多體可以制備成其鹽的形式，特別是其藥學(xué)上可接受的鹽、N氧化物、水合物及其溶劑合物的形式。本文中任意化合物權(quán)利要求、或者提及"本發(fā)明的化合物"、"本發(fā)明涉及的化合物"、式(I)的化合物等時(shí)，均包括這些化合物的鹽、N氧化物、水合物及溶劑合物。本發(fā)明的化合物可以用于治療或預(yù)防涉及HNE的疾病，例如慢性阻塞性肺疾患(COPD)、慢性支氣管炎、肺纖維化、肺炎、急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)、肺氣肺、吸煙誘發(fā)的氣腫及嚢性纖維化。因此，本發(fā)明的其他方面為(i)包含本發(fā)明的化合物及藥學(xué)可接受的載體或賦形劑的藥物組合物；以及Ui)本發(fā)明的化合物用于制備治療或預(yù)防涉及HNE的疾病或病癥的藥劑的用途。術(shù)語本文使用的術(shù)語"(Ca-Cj烷基"一一其中a和b是整數(shù)_一是指具有a-b個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基基團(tuán)。因此，例如當(dāng)a為1且b為6時(shí)，該術(shù)語包括曱基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基及正己基。本文使用的術(shù)語"(Ca-Cb)烯基"一一其中a和b是整數(shù)一一是指具有a-b個(gè)碳原子且具有至少一個(gè)根據(jù)情況可為E或Z立體化學(xué)雙鍵的直鏈或支鏈烯基基團(tuán)。因此，例如當(dāng)a為2且b為6時(shí)，該術(shù)語包括例如乙烯基、烯丙基、1-丁烯基及2-丁烯基以及2-曱基-2-丙烯基。本文使用的術(shù)語"(Ca-CJ炔基"一一其中a和b是整數(shù)一一是指具有a-b個(gè)碳原子且還具有一個(gè)三鍵的直鏈或支鏈烴基。因此，例如當(dāng)a為l且b為6時(shí)，該術(shù)語包括例如乙炔基(-C^CH)、1-丙炔基、1-丁炔基及2-丁炔基、2-曱基-2-丙炔基、2-戊炔基、3-戊炔基、4-戊炔基、2-己炔基、3-己炔基、4-己炔基以及5-己炔基。本文使用的術(shù)語"二價(jià)(Ca-Cb)亞烷基基團(tuán)，，一一其中a和b是整數(shù)一一是指具有a-b個(gè)碳原子及兩個(gè)非飽和化合價(jià)的飽和烴鏈。本文使用的術(shù)語"二價(jià)(Ca-Cb)亞烯基基團(tuán)，，一一其中a和b是整數(shù)——是指具有2-6個(gè)碳原子及至少一個(gè)雙鍵的二價(jià)烴鏈。本文使用的非限制性術(shù)語"碳環(huán)的"是指具有至多16個(gè)均為碳的環(huán)原子的單環(huán)、雙環(huán)或三環(huán)基團(tuán)，包括芳基及環(huán)烷基。本文使用的非限制性術(shù)語"環(huán)烷基"是指具有3-8碳原子的單環(huán)的飽和碳環(huán)基團(tuán)，包括例如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基及環(huán)辛基。本文使用的非限制性術(shù)語"芳基"是指單環(huán)、雙環(huán)或三環(huán)的碳環(huán)芳基，包括具有兩個(gè)單環(huán)的碳環(huán)芳環(huán)，所述兩個(gè)碳環(huán)芳環(huán)通過共價(jià)鍵直接連接。所述基團(tuán)的實(shí)例有苯基、聯(lián)苯基及萘基(napthyl)。本文使用的非限制性術(shù)語"雜芳基"是指包含一個(gè)或多個(gè)選自S、N及O的雜原子的單環(huán)、雙環(huán)或三環(huán)的芳基基團(tuán)，并且包括具有兩個(gè)通過共價(jià)鍵直接連接的所述單環(huán)、或者一個(gè)所述單環(huán)及一個(gè)單環(huán)芳環(huán)的基團(tuán)。所述基團(tuán)的實(shí)例有噻吩基、苯并噻吩基、呋喃基、苯并呋喃基、吡咯基、咪唑基、苯并咪唑基、噻唑基、苯并噻唑基、異噻唑基、苯并異遙唑基、吡唑基、噁唑基、苯并噁唑基、異噁唑基、苯并異噁唑基、異噻唑基、三唑基、苯并三唑基、噻二唑基、噁二唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧咬基、吡嗪基、三嗪基、吲哚基和吲唑基(indazolyl)。本文使用的非限制性術(shù)語"雜環(huán)"、"雜環(huán)的"或"雜環(huán)烷基"包括上文定義的"雜芳基"，其非芳族含意涉及含有一個(gè)或多個(gè)選自于S、N和0的雜原子的單環(huán)、雙環(huán)或三環(huán)的非芳族基團(tuán)，以及涉及由含有一個(gè)或多個(gè)所述雜原子的單環(huán)非芳族基團(tuán)與另一個(gè)這樣的基團(tuán)或與一個(gè)單環(huán)碳環(huán)基團(tuán)共價(jià)連接所組成的基團(tuán)。所述基團(tuán)的實(shí)例有吡咯基、呋喃基、噻吩基、哌啶基、咪唑基、噁唑基、異噁唑基、噻唑基、噻二唑基、吡唑基、吡啶基、吡咯烷基、嘧咬基、嗎啉基、哌溱基、吲哚基、苯并呋喃基、吡喃基、異噁唑基、苯并咪唑基、亞曱基二氧基苯基、亞乙基二氧基苯基、馬來酰亞胺基和琥鉑酰亞胺基。除非在其出現(xiàn)的上下文中另外指出，本文中應(yīng)用于任何部分的術(shù)語"被取代的"意指最多用四個(gè)適合的取代基取代，所述每個(gè)取代基可以獨(dú)立地為例如(C廣C6)烷基、環(huán)烷基、(d-C6)烷氧基、羥基、羥基(d-Cj烷基、巰基、巰基(C廣C6)烷基、(d-Cj烷硫基、苯基、具有5或6個(gè)環(huán)原子的單環(huán)雜芳基、鹵素(包括氟、溴和氯)、三氟曱基、三氟曱氧基、硝基、氰基(-cn)、氧、-cooh、-coora、-cora、-S02Ra、-conh2、-S02nh2、—conhra、-so2nhra、-conrarb、-so2nrarb、-nh2、-nhra、-nrarb、-oconh2、-OCO腿a、-0C0NRaRb、-匿ORA、-匿OORA、-NRbC00Ra、mS020RA、-NRBS020H、-NRBS020RA、-NHC0NH2、-NRA0NH2、-NHCONHR8、-NRAC0NHRB、-NHCONRY或-NRAC0NRArb，其中W和118獨(dú)立地為(d-Cj烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、苯基或具有5或6個(gè)環(huán)原子的單環(huán)雜芳基，或者當(dāng)ra和rb連接至同一氮原子時(shí)形成環(huán)狀氨基環(huán)，例如哌啶基、嗎啉基或哌溱基。"任選的取代基"可以是上述取代基中的一個(gè)。本文4吏用的術(shù)語"鹽"包括堿式加成鹽、酸式加成鹽和季鹽。本發(fā)明的酸性化合物可以與以下物質(zhì)形成鹽，包括藥學(xué)可接受的鹽與堿，例如堿金屬氫氧化物例如氫氧化鈉和氬氧化鉀；與堿土金屬氫氧化物例如氫氧化釣、氫氧化鋇和氫氧化鎂；與有機(jī)堿例如n-曱基-d-葡糖胺、膽堿三(羥曱基)氨基甲烷、l-精氨酸、l-賴氨酸、n-乙基哌啶、二節(jié)胺等。那些為堿性的化合物(I)可以與以下物質(zhì)形成鹽，包括藥學(xué)可接受的鹽與無機(jī)酸，例如氫囟酸如氫氯酸或氫溴酸、硫酸、硝酸或磷酸等；與有機(jī)酸例如乙酸、酒石酸、琥珀酸、反丁烯二酸、馬來酸、蘋果酸、水楊酸、檸檬酸、曱磺酸、對(duì)甲苯磺酸、苯甲酸、苯磺酸(benzenesunfonic)、谷氨酸、乳酸和扁桃酸等。那些含有堿性氮的化合物(I)也可以與藥學(xué)可接受的抗衡離子形成季銨鹽，所述抗衡離子例如氯離子、溴離子、乙酸根、曱酸根、對(duì)曱苯磺酸根、琥3白酸才艮、半號(hào)S白酸才艮、茶一二4酸才艮(naphthalene—bissulfonate)、曱磺酸根、昔萘酸根(xinafoate)等。含有一個(gè)或多個(gè)實(shí)際的或潛在的手性中心的本發(fā)明化合物，由于存在不對(duì)稱碳原子，可以在每個(gè)手性中心具有r或s立體化學(xué)的多種非對(duì)映異構(gòu)體存在。本發(fā)明包括所有所述非對(duì)映異構(gòu)體及其混合物。在本發(fā)明式(I)的單體化合物中，在任意合適的組合中原子d可以是o或s，而當(dāng)前優(yōu)選o。環(huán)A為芳基或雜芳基，并且可以是以上所列芳基或雜芳基實(shí)例中的任何一個(gè)，特別是苯基和具有5或6個(gè)環(huán)原子的單環(huán)雜芳基。具體的實(shí)例包括吡啶基例如2-吡啶基和3-吡夂基，或者嘧咬基例如嘧啶-2基，而當(dāng)前優(yōu)選A為苯基。W和I^可以選自有關(guān)式(1)中定義的取代基類型中的任何一種，包括氫、鹵素、硝基、氰基、d-C3烷基、C廣C3烯基、C2-C3炔基、羥基或d-C3烷氧基或C廣C3烯氧基。所述取代基的具體實(shí)例包括氫、氟、氯、溴、氰基、甲基、曱氧基和-C^CH。例如-AR^可以為4-氰基苯基或4-乙炔基苯基。W和RS也可以選自有關(guān)式(I)中定義的取代基類型中的任何一種，但在當(dāng)前優(yōu)選的一類本發(fā)明化合物中，RS為氫且W為3-三氟曱基、3-氯或3-溴。當(dāng)前認(rèn)為，本發(fā)明的單體可以作為抑制劑與HNE作用，其R或R'取代基位于遠(yuǎn)離結(jié)合界面處，伸向溶劑。因此這些基團(tuán)可提供調(diào)節(jié)溶解性和其他藥物代謝動(dòng)力學(xué)性能的位點(diǎn)。因而R和R'可廣泛變化，并且在式(I)中被定義為式-[XL-[Alk1]「[QL-[Alk2]q-[X1]「2的一個(gè)基團(tuán)。根據(jù)該定義，k、m、n、p和q可以均為0，且Z可以為氬，這樣R或W本身可以為氫。但是，通過選擇這些變量值的不同的組合，也可將其他類的R或W取代基涵蓋在內(nèi)。例如，R或R"可選自于d-C6烷基、曱酰基、氨羰基、單-或雙-d-C4烷基氨羰基、C3-C8環(huán)烷基羰基、d-C6烷基羰基、d-C6烷氧基羰基、N-(d-C4烷基磺?；?-氨羰基、N-(d-C4烷基磺?；?-N-(d-C4烷基)-氨羰基、雜芳基、雜環(huán)烷基、雜芳基羰基或雜環(huán)烷基羰基；其中d-C6烷基、單-或雙-d-C4烷基氨羰基、d-C6烷基羰基、C廣Ce烷氧基羰基、雜芳基和雜環(huán)烷基可以被1-3個(gè)相同或不同的選自以下的基團(tuán)取代芳基、雜芳基、羥基、d-C4烷氧基、羥基羰基、d-C6烷氧基羰基、氨羰基、單-或雙-C廣C4烷基氨羰基、氨基、單-或雙-d-C4烷基氨基、d-C4烷基羰基氨基、氰基、N-(單-和雙-C廣C4烷基氨基-d-C4烷基)氨羰基、N-(d-C4烷氧基-C廣C4烷基)氨羰基和鹵素。在本發(fā)明化合物的一個(gè)具體亞類中，！^和/或R為式-[X]m-[Alk1]「[QL-[Alk2]「[X^-Z的基團(tuán)，其中m為0，k、p、n和q均為1，Q為-N(RA)或-N+(RA)(RB)-，IRA,RB、Alk1、Alk2、Xi和Z如式(I)中定義。在該亞類中，X'可以為例如-0-，Z可以為例如任選被取代的苯基或單環(huán)雜芳基，所述單環(huán)雜芳基具有5或6個(gè)環(huán)原子。在本發(fā)明的化合物中，R和^中的一個(gè)可以為氫，而另一個(gè)為除氫之外的一個(gè)取代基。其他類型的R和R4基團(tuán)具有式(vniA)、(vmB)或(vmc):oo、、Ao《v陽》(V川B)其中R"為氫或C廠Ce烷基，且s為l或2。其他類型的R和R4基團(tuán)具有式(IX)O、A(v川c)48R4CV10V2f^e闊其中ir為氫或d-G烷基；R4C、R4D、R"均為d-C6烷基，且它們連接的氮為四價(jià)并帶有一個(gè)正電荷；另外IT、R4D、IT中的任意兩個(gè)可連接形成環(huán)，并任選含有選自氧或氮的第二個(gè)雜原子；或者R"、R4D、R4B中的一個(gè)為孤對(duì)電子，其他基團(tuán)如上文所定義，且它們連接的氮為三價(jià)；并且vl和v2各自獨(dú)立i也為0-5。其他類型的R和R"基團(tuán)選自以下其中IT為氫或d-G烷基；R4C、R4D、R"各自為d-C6烷基，并且它們連接的氮為四價(jià)并帶有一個(gè)正電荷；另外R"、R4D、R"中的任意兩個(gè)可連接形成環(huán)，并任選含有選自氧或氮的第二個(gè)雜原子；或者R4e、R4D、IT中的一個(gè)為孤對(duì)電子并且其他基團(tuán)如上文所定義，并且它們連接的氮為三價(jià)；lT和R"獨(dú)立地為氬或d-C6烷基；iT和iT獨(dú)立地為氬或d-C6烷基，或者R"和iT與它們所連接的氮一起形成一個(gè)具有5-7個(gè)環(huán)原子的單環(huán)雜環(huán)，該環(huán)還可以含有一個(gè)選自N、O和S的另外的雜原子；并且vl和v2各自獨(dú)立地為0-5。在本發(fā)明的多體化合物中，本發(fā)明的單體化合物的兩個(gè)、三個(gè)或四個(gè)分子通過一個(gè)接頭支架共價(jià)連接。由于該接頭支架無需在與HNE酶相互作用中起活性作用，其作用僅僅是使一個(gè)或多個(gè)單體元素和所述酶之間進(jìn)行結(jié)合接觸。因此，該接頭支架可具有多種化學(xué)結(jié)構(gòu)。此外，所述單體元素與接頭支架的連接點(diǎn)可以根據(jù)采用的特定接頭的化學(xué)結(jié)構(gòu)進(jìn)行選擇。當(dāng)前優(yōu)選將兩個(gè)、三個(gè)或四個(gè)所述單體分子通過它們各自的如式(i)中所示與r或R4連接的氮原子連接至該接頭支架上。此外，當(dāng)前優(yōu)選僅兩個(gè)單體進(jìn)行這樣的連接。在此情況下，所述接頭支架可以是例如二價(jià)直鏈的飽和或不飽和烴基，其中在所述鏈上具有2-12個(gè)碳原子，并且其中一個(gè)或多個(gè)碳可以被以下基團(tuán)替代二價(jià)的單環(huán)或雙環(huán)的碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)，其中在每個(gè)環(huán)上具有3-7個(gè)環(huán)原子；或者-0-、-s-、-s(=0)-、-s(=0)2-、-c(=0)-、-n(rp)-、-n+(rp)(rq)-、-c(=0)0-、-oc(=0)-、-c(=0)nra-、-nrac(=0)-、-s(02)nra-、-nras(02)一、-nrac(=0)nrb-、-nrac(=nra)nrb-、-c(=nrd)nre-或-nrE(:(=nrd)-,其中ra、Rb、rd和re獨(dú)立地為氫、C廣C6烷基或C3-C6環(huán)烷基，并且RP和RQ獨(dú)立地為氫、c廣c6烷基或C3-C6環(huán)烷基、H0-(c廣C6烷基)-、rarbn-(c廣C6烷基)-或hoc卜o)-(d-(:6烷基)-,或者ra和rb、rd和re或者rp和rQ與它們所連接的氮一起形成一個(gè)5-7個(gè)環(huán)原子的單環(huán)雜環(huán)，并且該雜環(huán)還可以含有一個(gè)選自n、o和s的另外的雜原子。當(dāng)所述接頭支架的一個(gè)或多個(gè)-(ch》-基團(tuán)被二價(jià)的單環(huán)或雙環(huán)的碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)替代時(shí)，所述基團(tuán)可以選自例如以下基團(tuán)所述接頭支架可以具有例如以下結(jié)構(gòu)(a)、(b)、(c)、(d)、(E)、(G)和(E)之一(CH2)2.5-N(CH3)-(CH2)2-5-(CH2)2_5-N+(CH3)2-(CH2)2-5(B)(CH2)2.S——NH-(C-NH)-NH——(CH2)2.5~~(C).i:,.-.:,.-.-.-j.rr丄..jf|mf、ff',,、(CH2)2.5(CH2)2^5(D)(￡)(CH2)l2-CO魯(CH2),.2-N(CH3)-(CH2)l2-NH-CO-(CH2)l2一(G)(CH2)l2-CO-NH-(CH2〉l2-N+(CH3)2-(CH2)l2-NH-CO(CH2)l2一(H)以上類型的具體接頭支架包括存在于本文實(shí)施例中的二體化合物中的那些接頭支架。因此，本發(fā)明多體化合物的一個(gè)優(yōu)選的亞類具有式M-L-M1，其中L為例如以上所述接頭支架類型的二價(jià)接頭基團(tuán)，并且M和1^各自獨(dú)立地為式(IA)的基團(tuán)，其中D、A和R1-Rs如上文所定義并且如上文所述(IA)還優(yōu)選M和N^是相同的。本發(fā)明多體化合物的另一個(gè)優(yōu)選的亞類具有式M-L-M1，其中L為例如以上所述接頭支架類型的二價(jià)接頭基團(tuán)，并且M和M1各自獨(dú)立地為式(IB)的基團(tuán)，其中D、A和R、R1、R2、W和W如上文所定義并且如上文所述:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage21</formula>此處同樣地，優(yōu)選M和M'是相同的。所述式(IA)和(IB)的二體化合物的具體實(shí)例包括本文實(shí)施例中的那些二體化合物。本發(fā)明化合物的治療效用涉及已知至少部分地由人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶的作用介導(dǎo)的任何疾病。例如，本發(fā)明化合物對(duì)于慢性阻塞性肺疾患(C0PD)、嚢性纖維化(CF)、急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)、肺氣腫、肺炎及肺纖維化的治療可能是有益的。本發(fā)明還涉及含有本發(fā)明化合物作為活性成分的藥物制劑。其他化合物可以與本發(fā)明化合物結(jié)合用于預(yù)防和治療肺部的炎性疾病。因此本發(fā)明還涉及用于預(yù)防和治療肺部炎性疾病的藥物組合物，所述組合物包含一種治療有效量的本發(fā)明化合物及一種或多種其他治療劑。用于與本發(fā)明化合物結(jié)合治療的合適的治療劑包括(1)皮質(zhì)類固醇，例如氟替卡松(fluticasone)或布地奈德(budesonide);(2)P2-腎上腺素受體激動(dòng)劑，例如沙美特羅(salmeterol)或福莫特羅(formeterol);(3)白三烯調(diào)節(jié)劑，例如孟魯司特(montelukast)或普侖司特(pranlukast);(4)抗膽堿能藥物，例如選擇性毒萆堿-3(M3)受體拮抗劑例如漆托溴銨；(5)磷酸二酯酶-IV(PDE-IV)抑制劑，例如羅氟司特(roflumilast)或西洛司特(cilomilast);(6)鎮(zhèn)咳劑，例如可待因(codeine)或右美沙芬(dextramorphan);以及(7)非類固醇類抗炎藥(NSAID)例如布洛芬或酮洛芬(ketoprofen)。第一種和第二種活性成分的重量比可以變化，并且取決于每種成分的有效劑量。通常將使用每一種成分的有效劑量。本發(fā)明化合物的預(yù)防劑量或治療劑量的量級(jí)理所當(dāng)然將根據(jù)待治療病癥的嚴(yán)重性和具體的化合物及其給藥途徑而變化，并且通常將通過藥學(xué)領(lǐng)域所需的臨床試驗(yàn)進(jìn)行確定。它還將根據(jù)患者個(gè)體的年齡、體重和反應(yīng)而變化。通常日劑量范圍可以是每kg哺乳動(dòng)物體重約0.001mg-約100mg，優(yōu)選每kg體重0.01mg-約50mg，并且最優(yōu)選每kg體重0.l-10mg,其為單次劑量或分次劑量。另一方面，在某些情況下可能需要使用這些范圍之外的劑量。本發(fā)明的另一方面提供了含有本發(fā)明化合物及藥學(xué)可接受載體的藥物組合物。術(shù)語"組合物"，如在藥物組合物中所用的，意指包括含有一種或多種活性成分及構(gòu)成載體的一種或多種惰性成分(藥學(xué)上可接受的賦形劑)的產(chǎn)品，以及由以下方式直接或間接得到的任意產(chǎn)品任何兩種或多種成分的結(jié)合、絡(luò)合或聚集；一種或多種成分的離解；一種或多種成分的其他類型的反應(yīng)或相互作用。因此，本發(fā)明的藥物組合物包括通過混合本發(fā)明的一種化合物、一種或多種其他活性成分及藥學(xué)可接受的賦形劑而制得的任意組合物。本發(fā)明的藥物組合物包含本發(fā)明的一種化合物作為活性成分或者其藥學(xué)可接受的一種鹽，并且還可含有一種藥學(xué)可接受的栽體及任選的其他治療成分。術(shù)語"藥學(xué)可接受的鹽"是指由藥學(xué)可接受的無毒堿或酸包括無機(jī)堿或酸以及有機(jī)堿或酸而制備的鹽。任何適合的給藥途徑可用于向哺乳動(dòng)物尤其是人提供有效劑量的本發(fā)明的一種化合物。在治療性用途中，可以通過任何方便的、適合的或有效的途徑給予所述活性化合物。適合的給藥途徑是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的，包括口服給藥、靜脈給藥、直腸給藥、腸胃外給藥、局部給藥、眼部給藥、鼻腔給藥、口腔含化給藥及肺部給藥。優(yōu)選通過吸入送遞。適合通過吸入法給藥的組合物是已知的，并且可包括已知的用于這類組合物的栽體和/或稀釋劑。所述組合物可以包含0.01-99%重量的活性化合物。優(yōu)選地，單位劑量含有l(wèi)jag-10mg量的所述活性化合物?？梢酝ㄟ^本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何合適的方法確定最適合的劑量水平。然而，應(yīng)理解的是，對(duì)于任何特定患者的具體量將取決于多種因素，包括使用的具體化合物的活性，患者的年齡、體重、飲食、健康狀況和性別，給藥時(shí)間，給藥途徑，排泄速率，任何其他藥物的使用，以及所治療疾病的嚴(yán)重程度。對(duì)于通過吸入送遞，所述活性化合物優(yōu)選是微粒的形式。它們可以通過多種技術(shù)制備，包括噴霧干燥、冷凍干燥及微粉化。例如，可以將本發(fā)明的組合物制備成從噴霧器送遞的懸浮液，或者液體推進(jìn)劑中的氣霧劑，例如用于加壓的計(jì)量藥劑吸入器(PMDI)中。適合用于PMDI中的推進(jìn)劑是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的，包括CFC-12、HFA-134a、HFA-227、HCFC-22(CCI2F2)及HFA-152(CH4F2和異丁烷)。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物為干粉的形式，用于使用干粉吸入器(DPI)進(jìn)行送遞。DPI的許多類型是已知的。通過給藥送遞的微?？梢杂幂o助送遞和釋放的賦形劑進(jìn)行配制。例如，在干粉制劑中，微粒可以用輔助從DPI流入肺部的較大栽體顆粒進(jìn)行配制。合適的載體顆粒是已知的，并且包括乳糖顆粒；它們可以具有大于90jum的質(zhì)量中值空氣動(dòng)力學(xué)直徑(massmedianaerodynamic本發(fā)明的化合物可與在本發(fā)明化合物對(duì)其有益的疾病或病癥的治療/預(yù)防/抑制或改善中使用的其他藥物結(jié)合使用。所述其他藥物可以通過常規(guī)使用的途徑和量與本發(fā)明的化合物同時(shí)或依次地進(jìn)行給藥。當(dāng)本發(fā)明的化合物與一種或多種其他藥物同時(shí)使用時(shí)，優(yōu)選除本發(fā)明化合物之外還包含所述其他藥物的藥物組合物。因此，本發(fā)明的藥物組合物包括除本發(fā)明的化合物之外，還含有一種或多種其他活性成分的那些藥物組合物。本發(fā)明的藥劑可以以吸入的方式給藥。可以使用例如壓力驅(qū)動(dòng)的噴射霧化器或超聲霧化器生成氣霧劑，優(yōu)選使用推進(jìn)劑驅(qū)動(dòng)的計(jì)量氣霧劑，或者無推進(jìn)劑地給予來自例如吸入膠嚢或其他"干粉"送遞系統(tǒng)的微?；钚曰衔铩Ｋ龌钚曰衔锟筛鶕?jù)使用的吸入器系統(tǒng)按所述進(jìn)行給藥。除所述活性化合物之外，給藥形式還可含有賦形劑，例如推進(jìn)劑(例如在計(jì)量氣霧劑情況下的氟利昂)、表面活性物質(zhì)、乳化劑、穩(wěn)定劑、防腐劑、調(diào)味劑、填充劑(例如粉末吸入劑情況下的乳糖)，或者如果合適，還含有diameter)。在氣霧劑-基制劑的情況下本發(fā)明的化合物卵磷脂，NF液體濃液三氯氟曱烷，NF二氯二氟甲烷，NF優(yōu)選的組合物為:其他活性化合物。為吸入目的，許多體系均是可用的，用這些系統(tǒng)可以產(chǎn)生最佳粒度的氣霧劑，并可使用適合于患者的吸入技術(shù)進(jìn)行給藥。除使用適配器(adaptor)(間隔器(spacer)、擴(kuò)張器(expander))和梨形容器(例如Nebulator⑧，Volumatic)及發(fā)射噴霧的自動(dòng)裝置(Autohaler)之外，對(duì)于計(jì)量氣霧劑，特別是在粉末吸入劑的情況下，許多技術(shù)方案均是可用的(例如Diskhaler⑧、Rotadisk⑧、Turbohaler或者如EP-A-0505321所述的吸入劑)。合成方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明的化合物可以依照以下方案和實(shí)施例中的步驟使用適當(dāng)?shù)奈镔|(zhì)進(jìn)行制備，并且通過以下具體實(shí)施例進(jìn)一步示例說明。而且，通過利用本文所包含的公開內(nèi)容中所述的步驟，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可以容易地制備本文要求保護(hù)的本發(fā)明的其他化合物。但是，實(shí)施例中舉例的化合物不應(yīng)被解釋為構(gòu)成本發(fā)明所考慮的唯一種類。所述實(shí)施例還描述了制備本發(fā)明化合物的細(xì)節(jié)。本領(lǐng)域的技術(shù)人員將容易理解的是，以下制備步驟中的條件和過程的已知改變也可用于制備這些化合物。本發(fā)明的化合物可以分離為其藥學(xué)可接受的鹽的形式，例如上文所述的那些。對(duì)應(yīng)于所分離鹽的游離酸或游離堿形式可以通過以下方式產(chǎn)生用一種合適的堿或酸例如氫氧化鈉、碳酸鉀、乙酸和鹽酸中和，并將所釋放的游離酸或堿萃取至有機(jī)溶劑中，然后進(jìn)行蒸發(fā)。以該方式分離的游離形式可通過以下方式進(jìn)一步轉(zhuǎn)化成另一種藥學(xué)可接受的鹽溶解于有機(jī)溶劑中，然后添加合適的酸或堿，隨后進(jìn)行蒸發(fā)、沉淀或結(jié)晶。對(duì)用于制備本發(fā)明化合物的中間體上的反應(yīng)活性官能團(tuán)(例如羥基、氨基、硫基或羧基)進(jìn)行保護(hù)可能是必要的，以防止它們不必要地參與到形成所述化合物的反應(yīng)中?？梢允褂贸Ｒ?guī)保護(hù)基團(tuán)，例如由T.W.Greene和P.G.M.Wuts在"Protectivegroupsinorganicchemistry"JohnWileyandSons,1999中描述的那些保護(hù)基團(tuán)。本發(fā)明的化合物可以依照方案1和2中所示的途徑制備。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage25</formula>RNvJLwJ^n雙官能」0接頭分子方案以下實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行示例說明。總體實(shí)驗(yàn)細(xì)節(jié)所有的溶劑和市售試劑都以原樣使用。使用IsoluteSPESin柱純化產(chǎn)物時(shí)，'IsoluteSPESi柱，是指含有未鍵合的活性二氧化硅的不規(guī)則粒子的預(yù)填充聚丙烯柱，所述不規(guī)則粒子具有50ym平均大小和60A標(biāo)稱孔隙度。當(dāng)使用IsoluteSCX-2柱時(shí)，'IsoluteSCX-2柱，是指含有不封端的丙基磺酸官能化二氧化硅強(qiáng)陽離子交換吸附劑的預(yù)填充聚丙烯柱。'IsoluteAl-N柱，是指含有中性氧化鋁的預(yù)填充的聚丙烯柱，所述氧化鋁具有50-200jLim的平均粒度和120A孔徑。制備用HPLC的條件HPLC體系1:C18-反相柱(100x22.5mm內(nèi)徑的Genesis柱，粒徑7/am),用澳化溴化X豕離去基團(tuán)例如Bry-連接基例如(ci-y。G-活性基超例如OhB幽H,DMF雙官能接頭分子P，各r丄、0RNHj,NaHC03CH3CNRNH2,NaHC03p丫a《.26A:水+0.1%曱酸；B:乙腈+0.1°/甲酸進(jìn)行梯度洗脫，流速5ml/min,梯度為以1y。/min增加B。UV檢測(cè)波長230nm。化合物以所述曱酸鹽的形式獲得。HPLC體系2:C18—反相封端柱(250x21.2mm的Gemini柱，豐立^f圣5pm),用A:水+0.1%曱酸；B:乙腈+0.1%曱酸進(jìn)行梯度洗脫，流速通常為17ml/min，梯度為以1%/min增加B。UV檢測(cè)波長254nm?；衔镆运鰰跛猁}的形式獲得。HPLC體系3:C18-反相封端柱(250x21.2mmGemini柱，粒徑5pm),用A:水；B:乙腈進(jìn)行梯度洗脫，流速通常為17ml/min，梯度為以1%/min增加B。UV檢測(cè)波長254nm。HPLC體系4:C18-反沖目封端柱(250x21.2mmGemini柱，津立《圣5jum),用A:水；B:MeOH進(jìn)行梯度洗脫，流速通常為17ml/min，梯度為以1%/min增加B。UV檢測(cè)波長254nm。HPLC體系5:C18-反相柱(250x21.2mmLuna柱，豐立徑5jnm)，用A:7jc+0.1%曱酸；B:乙腈+0.1%曱酸進(jìn)行梯度洗脫，流速為15ml/min,梯度為以1%/min增加B。UV檢測(cè)波長254nm。化合物以所述甲酸鹽的形式獲得。LC-MS方法1具有C18-反相柱(30x4.6mmPhenomenexLuna,粒徑3jum)的WatersPlatformLC，用A:水+0.1%曱酸；B:乙腈+0.1%甲酸洗脫。梯度梯度-時(shí)間流速ml/min%A。/。B0.002.09550.502.09554.502.05955.502.05956.002.0955檢測(cè)-MS、ELS、UV(IOO|ul分流至具有在線UV檢測(cè)儀的MS)MS電離方法-電噴霧(正離子和負(fù)離子)LC-MS方法2具有C18-反相柱(30x4.6mmPhenomenexLuna,粒徑3jam)的WatersMicromassZMD，用A:7Jc+0.1°/。曱酸；B:乙腈+0.1%曱酸洗脫。梯度梯度-時(shí)間流速ml/min%A%Bo加2.09550.502.0站54.502,05955.502.05956.002.0955檢測(cè)-MS、ELS、UV(IOO|Lil分流至具有在線UV檢測(cè)儀的MS)MS電離方法-電噴霧(正離子和負(fù)離子)LC-MS方法3具有C18-反相柱(100x3.0mmHigginsClipeus,粒徑5jam)的MicromassPlatformLCT，用A:水+0.1%曱酸；B:乙腈+0.1%曱酸洗脫。梯度梯度-時(shí)間流速ml/min%A%B0.001.09551.001.095515,001.059520.001.059522.001.095525.001-0955檢測(cè)-MS、ELS、UV(IOOJul分流到具有在線UV檢測(cè)儀的MS)MS電離方法-電噴霧(正離子)LC-MS方法4使用C18-反相柱(100x3.0mmHigginsClipeus,粒徑5pm)的WatersMicromassZQ2000,用A:水+0.1%曱酸；B:乙腈+0.1%曱酸洗脫。梯度梯度-時(shí)間流速ml/min%A%B0.001.09551.001.095515.001.059520.001.05訴22.001.095525.001.0955檢測(cè)-MS、ELS、UV(IOOjil分流到具有在線UV檢測(cè)儀的MS)MS電離方法-電噴霧(正離子)在實(shí)驗(yàn)部分中使用的縮寫DCM=二氯甲烷DMF=A^"二曱基曱酰胺HPLC=高效液相色i普法IMS=工業(yè)用曱基化酒精RT=室溫Rt=保留時(shí)間THF-四氬p夫喃29以下中間體可以依照所給的參考文獻(xiàn)制備:<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table>中間體14將多磷酸(17.2g)懸浮于THF(90ml)中，并在加入3，5-二氟苯脲(5.40g，31.4mmol)、4-氰基苯曱醛(4.94g,37.6mmol)及乙酰乙酸乙酯(3.97ml,31.4mmol)的同時(shí)進(jìn)行機(jī)械攪拌。將得到的混合物加熱回流17小時(shí)，然后在室溫下放置48小時(shí)。在減壓下去除溶劑并且剩余物在水和EtOAc之間進(jìn)行分配。用水、碳酸鈉水溶液、水及鹽水洗滌有機(jī)層，并進(jìn)行干燥(MgS04)、過濾和濃縮。生成的泡沫狀物分兩批在Biotage快速色譜柱(90g)上進(jìn)行純化上樣至DCM中并用17.5-20-25%EtOAc的異己烷溶液洗脫。將這樣得到的泡沫狀物與異己烷/Et20—起研磨，然后通過過濾收集白色固體，用2:1的異己烷Et20進(jìn)行一次置換洗滌并在真空烘箱中干燥。產(chǎn)率6.63g(53%)LC-MS(方法l):Rt=3.55min，m/z=398[M+H]+中間體15中間體15使用與制備中間體14相似的方法由4-碘代苯曱醛、乙酰乙酸乙酯及3-(三氟曱基)苯脲制備。產(chǎn)率(25%)LC一MS(方法l):Rt=4.17min，m/z=531[M+H]+中間體16<formula>formulaseeoriginaldocumentpage32</formula>將中間體1(5.00g，11.7mmol)溶解于氯仿(140ml)中，并在攪拌下逐滴添加溴(1.87g，11.7mmol)。30分鐘后，再加入幾滴溴直至橙色維持不變。將揮發(fā)性物質(zhì)蒸發(fā)得到黃色泡沫狀物。產(chǎn)率定量的LC-MS(方法2):Rt=3.82min，m/z=508/510[M+H]+以下中間體以類似方式制備:中間體結(jié)構(gòu)前體中間體產(chǎn)率(％)IX~MSRt(min)質(zhì)量M+H]+方法117力83.78474/4761891003.72550/5M+CH3CN〗+19101003.77454/45633<table>tableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table>中間體22將中間體13(32mg，0.029mmol)溶解于氯仿(2ml)中并加入溴(4滴)。將該溶液在RT下攪拌lh，之后蒸發(fā)掉揮發(fā)性物質(zhì)。獲得乳狀泡沫產(chǎn)物。產(chǎn)率定量的LC-MS(方法2):Rt=3.35min，m/z=1182[M〗+以下中間體以類似方式制備:結(jié)構(gòu)前體中間體產(chǎn)率(%)Rt(mln)質(zhì)量離子方法22341004.601338M+H廣24&々、。"N"6643.381128[M+HJ*25#，，t3、>>1003.451142〖M〗+261003.361165[M〗+27《F121003.4011鄰M]+2821003.361228[哮中間體2935將中間體1(1.00g,2.331mmol)溶解于無水匿F(25ml)中，并將該溶液在氬氣氛下冷卻至-iox:。加入氫化鈉(60%的礦物油中的分散體)(93mg，2.331mmol),并攪拌反應(yīng)混合物直至停止冒泡。加入#3oc-3-溴丙胺(610mg,2.563mmol)并在O"C再繼續(xù)攪拌2.5h，之后加入飽和氯化銨水溶液(60ml)及EtOAc(60ml)。將有機(jī)層分離并且將水溶液用EtOAc(60ml)進(jìn)一步萃取。將該有機(jī)萃取液合并，并用水(50ml)和飽和鹽水(30ml)洗滌，干燥(Na2S04)并蒸發(fā)。在IsoluteSiII柱上用0-30%EtOAc的戊烷溶液洗脫從而純化該剩余物，得到淺黃色油狀產(chǎn)物。產(chǎn)率783mg(57%)LC-MS(方法2):Rt=4.31min，m/z=585[M+H]_中間體30將中間體29(776mg，1.32mmol)溶解于DCM(20ml)中并加入^溴代琥珀酰亞胺(236mg,1.32mmol)。將該溶液在RT攪拌1.5h,然后用DCM(80ml)稀釋該混合液，用飽和NaHC03水溶液(50ml)、水(50ml)及鹽水(30ml)洗滌，然后干燥(Na2S04)。蒸發(fā)產(chǎn)生淺黃色樹膠。產(chǎn)率定量的LC-MS(方法2):Rt=4.36min,m/z=565/567[M-Boc+2H]中間體31將中間體30(731mg，1.099mmol)溶解于乙腈(20ml)中，并加入碳酸氫鈉(277mg，3.297mmol)和2M乙胺的THF溶液(0.8ml,1.65mmol)。將該混合液在80t:加熱3.5h，進(jìn)行冷卻、過濾和蒸發(fā)。剩余物在DCM(70ml)和水(50ml)之間進(jìn)行分配。將有才幾層分離并蒸發(fā)，并將粗產(chǎn)物在IsoluteSiII柱(10g)上用40-80%EtOAc的戊烷溶液洗脫從而純化，得到乳狀泡沫產(chǎn)物。產(chǎn)率297mg(46%)LC-MS(方法2):Rt=3.17min,m/z=582[M-H]—中間體32將中間體31(292mg,0.501mmol)溶解于20%TFA的DCM溶液(20ml)中。2h后將揮發(fā)物蒸發(fā)掉，并將剩余物溶解于MeOH中，然后上樣至用MeOH預(yù)處理的IsoluteSCX-2柱(5g)上。用MeOH沖洗后，用2M氨的MeOH溶液洗脫該產(chǎn)物。將UV活性餾分蒸發(fā)掉，得到淺黃色樹膠。產(chǎn)率221mg(91%)LC-MS(方法2):Rt33min，m/z=484[M+H]中間體33<formula>formulaseeoriginaldocumentpage38</formula>將中間體32(214mg，0.443mmol)溶解于DCM(10ml)中并加入l，l，-硫代羰基二吡啶酮(51mg，0.222mmol)。將該溶液在RT靜置48h，然后用結(jié)合有胺的樹脂處理15min。過濾后，將溶劑蒸發(fā)掉，并將粗產(chǎn)物在IsoluteSin柱(5g)上用0-5%MeOH的EtOAc溶液洗脫從而純化。將含有產(chǎn)物的餾分合并并蒸發(fā)，將剩余物溶解于MeOH中，并使其通過IsoluteSCX-2柱(5g)，再用甲醇進(jìn)一步?jīng)_洗。蒸發(fā)得到白色泡沫狀物。產(chǎn)率160mg(36%)LC—MS(方法2):Rt=3.91min，m/z=1009[M+H]+中間體34<formula>formulaseeoriginaldocumentpage38</formula>中間體34使用類似于合成中間體29所用的步驟由中間體1及溴乙酸叔丁酯制備。產(chǎn)率(80%)LC-MS(方法2):Rt=4.31min,m/z=488[M+H-tBu]中間體35中間體35使用類似于制備中間體30所用的方法由中間體34制備。產(chǎn)率(41%)LC—MS(方法2):Rt=4.41min，m/z=566/568[M+H-tBu]+中間體36將中間體35(467mg，0.751mmol)的乙腈(15ml)溶液用乂yF二(3-氨基丙基)曱胺(54mg，0.375mmol)和碳酸氫鈉(252mg，3.00mmol)處理。將該反應(yīng)物在80t:加熱3.5h。將該混合液冷卻后，進(jìn)行過濾并將濾液蒸發(fā)掉。使用IsoluteSin柱(10g)并用1-20%MeOH的EtOAc溶液洗脫從而進(jìn)行色語法純化，得到純的白色固體產(chǎn)物。產(chǎn)率182mg(43%)LC-MS(方法2):Rt=3.22min,m/z=1136[M+H]+中間體3739將中間體36(177mg，0.156mmol)溶解于DCM(30ml)和缺曱烷(8ml)的混合物中。在RT靜置3天后，蒸發(fā)掉揮發(fā)物并將剩余物溶于乙腈(13ml)中。加入捵曱烷(4ml)和碳酸氫鈉(39mg,0.468mmol)，并將該混合液在80r加熱回流。17h后，蒸發(fā)掉揮發(fā)物并且將剩余物在DCM(50ml)和水(50ml)之間進(jìn)行分配。將有機(jī)相分離并干燥(Na2S04)。蒸發(fā)得到淺褐色泡沫狀物。產(chǎn)率181mg(91%)LC-MS(方法2):Rt=3.20min，m/z=1150[M]+中間體38中間體38通過類似于合成中間體36所用的方法由中間體16和0.5當(dāng)量的(2-氨基乙基){2-[(2-氨基乙基)叔丁氧基羰基氨基]乙基}氨基曱酸叔丁酯制備。產(chǎn)率(61%)LC一MS(方法2):Rt=3.58min，m/z=1009[M+H]+中間體3940F.F使用類似于在中間體31脫保護(hù)中所述的步驟除去中間體39中的叔丁氧基羰基的保護(hù)基團(tuán)。產(chǎn)率(89%)LC-MS(方法2):Rt=2.17min，m/z=909[M+H〗+中間體40將中間體39(219mg，0.241mmol)和1，1，-硫代羰基二吡啶酮(28mg，0.121mmol)的DCM(10ml)溶液在RT靜置24h。再加入一份1，1，-硫代羰基二吡啶酮(20mg，0.086mmol)，4h之后，將反應(yīng)混合液用氨基樹脂處理。將該混合物攪拌15min，過濾并上樣至已經(jīng)MeOH調(diào)節(jié)的IsoluteSCX-2柱(10g)上。將該柱用MeOH沖洗，并將洗脫液蒸發(fā)掉。將所得白色固體在IsoluteSiII柱(10g)上用0-10%MeOH的EtOAc溶液洗脫而進(jìn)行色i普法純化。蒸發(fā)得到白色固體。產(chǎn)率150mg(66%)LC-MS(方法2):Rt=3.00min，m/z=951[M+H]+中間體4141<formula>formulaseeoriginaldocumentpage42</formula>將實(shí)施例23(130mg，0.117mmol)的三乙胺(0.5ml)和DMF(0.5ml)溶液脫氣，之后加入(三曱基曱硅烷基)乙炔(34nl,0.235mmol)、碘化銅(I)(1.7mg，3mol%)及二(三苯基膦)氯化鈀(II)(8.4mg，5mol%)，然后在氬氣氣氛下在115"C下攪拌并加熱2h。將經(jīng)冷卻的混合物倒入稀硫酸(25ml)中，并用EtOAc(2x25ml)萃取。用鹽水(10ml)洗滌該萃取液，然后將有機(jī)相分離、干燥(MgS(h)、過濾并在真空中濃縮。使用IsoluteSiII柱(10g)以0-10%MeOH的DCM溶液梯度洗脫完成純化。產(chǎn)物分離為乳膏狀固體。產(chǎn)率48mg(39%)LC—MS(方法l):Rt=3.36min，m/z=1050[M+H]+中間體42將中間體16(200mg，0.394mmol)和(3-氨基丁基)曱基氨基甲酸叔丁酯(370mg，1.83mmol)的乙腈(10ml)溶液在40*€加熱2h。將溶劑蒸發(fā)，將剩余物溶解于MeOH中并上樣至已經(jīng)MeOH調(diào)節(jié)的IsoluteSCX-2柱(5g)上。用MeOH沖洗出產(chǎn)物。產(chǎn)率225mg(98%)LC-MS(方法2):Rt=3.63min,m/z=484[M+H-Boc]中間體43將中間體42以類似于中間體31的方式脫保護(hù)。產(chǎn)率(94%)LC一MS(方法2):Rt=2.11min，m/z=484[M+H]中間體44將中間體3(219mg,0.379mmol)溶解于乙腈(13ml)中，并加入2M的曱胺的THF溶液(2ml)。將溶液在50X:加熱3h，然后將該溶液在RT下靜置3天。蒸發(fā)掉揮發(fā)物并且剩余物在DCM(100ml)和水(80ml)之間進(jìn)行分配。將有機(jī)層分離并干燥(Na2S04)。蒸發(fā)得到白色泡沫狀物。產(chǎn)率170mg(85%)LC-MS(方法2):Rt=2.67min,m/z=529[M+H]+中間體4543將中間體44(165mg，0.313mmo1)和苯氧基溴丙烷(67mg,0.313mmol)的乙腈(10ml)溶液用碳酸氫鈉(53mg，0.626mmol)處理，并將該反應(yīng)混合物在80。C加熱4天。將該溶液倒于已經(jīng)MeOH調(diào)節(jié)的IsoluteSCX-2柱(5g)中。將該柱用MeOH沖洗，然后用2M冊(cè)3的MeOH溶液洗脫產(chǎn)物。蒸發(fā)得到無色樹膠。產(chǎn)率105mg(51%)LC—MS(方法l):Rt=2.98min,m/z=663[M+H]+中間體46將中間體45(100mg，0.151腿ol)的氯仿(6ml)溶液用溴(6ml)處理。lh之后，再加入一份溴(20ial)。將揮發(fā)物蒸發(fā)掉，得到二溴化產(chǎn)物。產(chǎn)率定量的LC—MS(方法2):Rt=3.12min，m/z=821[M+H]+實(shí)施例1向中間體16(200mg，0.394mmol)的乙腈(5ml)溶液中加入2M的甲胺的THF溶液(1970.394腿ol)及碳酸氬鈉(165mg,1.97mmol)。將該溶液在80X:加熱16h,然后將該混合物過濾。通過HPLC體系l純化產(chǎn)物，并將含有純物質(zhì)的餾分合并并冷凍干燥。得到黃色固體產(chǎn)物。產(chǎn)率62mg(38%)LCMS(方法3):Rt=8.67min,m/z=413[M+H]+1HNMR(400MHz,DMSOd6):S-2.73(s，3H).3.78(d,1H),3.83(d，1H)，5,44(d，1H)'7.67-7.82(m,5H),7.85-7.90(m,2H),7.91(m,1H)，8.19(d,1H)ppm.以下實(shí)施例以類似方式由中間體16和胺制備:<table>tableseeoriginaldocumentpage45</column></row><table>4。伊58.0339^005276.39526.09J*、6210.40455.04376.435Q7.01實(shí)施例8向環(huán)己二胺(0.197mmol)的乙腈(5ml)溶液中加入中間體16(200mg，0.394mmol)及碳酸氬鈉(165mg,1.97mmol)，并將該反應(yīng)混合物在80X:加熱16h。將該混合物冷卻至RT，然后將該溶液過濾并將溶劑蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物通過HPLC體系1純化。將含有產(chǎn)物的餾分合并并冷凍干燥。得到白色固體產(chǎn)物。產(chǎn)率50mg(29%)46LCMS(方法3):m/z=879[M+H]+1HNMR(400MHz'DMSO-卿S=1,09(brs,4H);1.29(brs,4H);3.02-3.20(m,4H);3.79(s,4H);5.44(d,2H);7,68-7,92(m，16H);8.19(d，2H)ppm.以類似于實(shí)施例8的步驟，由指定的中間體和合適的二胺制備以下化合物實(shí)施例結(jié)構(gòu)前體中間體產(chǎn)率(%)LOMSRt(min)邁l擁蹈^916410.3(方法3)836.9101628(方法3)—935.06163410.56(方法3)明3.0212162911.09(方法3>966鄰13〖〖-16157.86(方法3)879.99實(shí)施例結(jié)構(gòu)前體中間體產(chǎn)率(%>(min)質(zhì)量[M+H]+14。、"°"""^0化2810.26(方法3)911>0015、316197.66(方法3)963.0616會(huì)一纟。16139.57(方法3)1012鄰170A^/>"一。1668,02(方法3)908.041816558.08(方法3)894.481917617.56(方法3)840.4820、'^18547.31(方法4)910.4748<table>tableseeoriginaldocumentpage49</column></row><table>實(shí)施例24向中間體28的乙腈(5ml)溶液中加入NaHC03(92mg，1.10mmol)及2M乙胺的THF溶液(220pl，0.44mmol)。將該反應(yīng)混合物在80°C加熱3.5h。再加入2M乙胺的THF溶液(220ju1,0.44mmol)并將該混合物在80X:加熱4h。將混合物過濾并將揮發(fā)物蒸發(fā)掉。通過HPLC體系1純化粗產(chǎn)物，將餾分合并并冷凍干燥從而得到產(chǎn)物，該產(chǎn)物再次通過HPLC體系1進(jìn)行純化。將純的餾分合并并冷凍干燥從而得到乳膏狀固體產(chǎn)物。產(chǎn)率16mg(7%)LC-MS(方法3):Rt=8.69min，m/z=1064.06[M+]以下實(shí)施例以類似方式制備:.結(jié)構(gòu)前體中間體產(chǎn)率(%>LC-MSm(min)質(zhì)量或wir25』rd492,70<方法2)96426j、^。259.33(方法3)978.2227*26428.92(方法4)1001.502827378.99<方法4)1004.522922259.05(方法4>1018.53將中間體23(195mg,0.146mmol)溶解于乙腈(10ml)中并加50入NaHC03(61mg，0.73mmol)及2M乙胺的THF溶液(1.5ml,2.917匪ol)。將該反應(yīng)混合物在80。C加熱4h，然后過濾并蒸發(fā)。將剩余物溶解于MeOH(12ml)中，并加入K2C03(242mg,1.75mmol)的水(5ml)溶液。在RT下攪拌該混合液，30min后加入EtOAc(50ml)和水(50ml)。分離有機(jī)溶液，用鹽水(30ml)洗滌，干燥(Na2S04)并蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物使用HPLC體系1純化并冷凍干燥，得到灰白色膏狀固體產(chǎn)物。產(chǎn)率49mg(31%)LC-MS(方法3):Rt=8.96min,m/z=1078.08[M+H]+實(shí)施例31將四-正丁基氟化銨溶液(1M的THF溶液，450.045mmol)在RT加入至處于攪拌狀態(tài)的中間體41(45mg，0.(M3mmo1)的THF(2ml)溶液中。1.5h后在真空下除去溶劑，加入水(25ml)并用EtOAc(2x25ml)萃取。用鹽水(10ml)洗滌這些萃取液，然后分離有機(jī)相，干燥(Na2S04)，過濾并在真空中濃縮。使用IsoluteSin柱以0-10%MeOH的DCM溶液梯度洗脫進(jìn)行純化，得到乳膏狀固體。使用HPLC體系2進(jìn)一步純化，接著使用經(jīng)MeOH洗滌的SCX-2柱進(jìn)行分離，然后用2M氨的MeOH溶液回收產(chǎn)物，得到米色固態(tài)的題述化合物。產(chǎn)率17mg(43%)LC-MS(方法3):Rt=8.53min，m/z=906.28[M+H]+實(shí)施例3251向?qū)嵤├?7(50mg,0.055mmol)的乙腈(2ml)溶液中加入過量的》典曱烷(500juL)和碳酸氫鈉(14mg，0.16mmol)。將該反應(yīng)混合物在RT攪拌18h，然后在真空中蒸發(fā)。通過HPLC體系l純化粗產(chǎn)物。將含有餾分的產(chǎn)物合并并冷凍干燥。產(chǎn)率31mg(54%)LCMS(方法3):m/z=922.08[M]+1HNMR(400MHz,DMSO-d6):5=1.71(brm，4H);2.82(s,6H);2.99-3,30(m，8H);3.81(s，4H);5.40(d,2H);7.61-7.90(m，16H);8.21(d，2H)ppm,以下實(shí)施例通過類似步驟制備:結(jié)構(gòu)前體產(chǎn)率(%)LC-MSRt(min)質(zhì)量[MT33至c實(shí)施例13327.90894.0434《'-.c力實(shí)施例19577.44(方法3)854.3352<table>tableseeoriginaldocumentpage53</column></row><table>將中間體28(347mg，0.256mmo1)和X^"二曱基乙二胺(135mg，1.536mmo1)溶解于乙腈(20ml)中并加入碳酸氫鈉(193mg,2.30mmol)。將該反應(yīng)混合物在80t:加熱5h，之后將其進(jìn)行過濾和蒸發(fā)。使用HPLC體系l純化粗產(chǎn)物，將純的餾分合并并冷凍干燥，得到灰白色固態(tài)的二曱酸鹽。產(chǎn)率45mg(14%)LC-MS(方法3):Rt=5.81min，m/z=575.79[M]2+/2實(shí)施例39<formula>formulaseeoriginaldocumentpage54</formula>將中間體33(155mg，0.154mmol)溶解于IMS(20ml)中并加入碘曱烷(4ml)。將該溶液在RT靜置3天。蒸發(fā)掉揮發(fā)物，將剩余物重新溶解于2M氨的EtOH溶液(7ml)中。將該反應(yīng)物在50匸加熱48h并濃縮，使用HPLC體系1純化該剩余物并冷凍干燥，得到白色固體產(chǎn)物。產(chǎn)率35mg(23%)LC—MS(方法3):Rt=9.44min,m/z=992.04[M+H]+實(shí)施例40<formula>formulaseeoriginaldocumentpage54</formula>實(shí)施例40通過類似于合成實(shí)施例38所用的方法由中間體24和(2-氨基乙基)三曱基氯化銨氫氯化物制備。使用HPLC體系1純化粗產(chǎn)物并冷凍干燥，得到白色固體。產(chǎn)率(20°/。)LC-MS(方法3):Rt=6.17min,m/z=539.86[M]2+/2實(shí)施例41將中間體37(175mg,0.137mmol)用TFA(5ml)和DCM(15ml)的混合物處理。將該溶液在RT靜置3h，然后將揮發(fā)物蒸發(fā)掉。將剩余物溶解于少量的DCM中并加入乙醚。將沉淀的乳膏狀固體過濾并干燥。產(chǎn)率150mg(95%)LC-MS(方法3):Rt=8.39min，m/z=1038.09[M]+實(shí)施例42將實(shí)施例41(130mg，0.133mmol)、《A^二曱基乙二胺(30mg，0.399mmol)及DIPEA(146ju1,1.13mmol)溶解于DMF(7ml)中并加入HATU(94mg,0.249mmol)。將該溶液在RT靜置30min并蒸發(fā)掉DMF。將剩余物用飽和的碳酸氳鈉水溶液(100ml)處理并用DCM(3x80ml)萃取。蒸發(fā)有機(jī)萃取液得淺黃色樹膠，將該樹膠使用HPLC體系l純化。將純的餾分冷凍干燥從而得到白色固態(tài)的二曱酸鹽。產(chǎn)率96mg(61%)LC一MS(方法3):Rt=5.99min，m/z=589.75[M]2+/2實(shí)施例4355<formula>formulaseeoriginaldocumentpage56</formula>實(shí)施例43使用類似于合成實(shí)施例39所用的步驟由中間體40制備。使用HPLC體系1純化產(chǎn)物，得到曱酸鹽。產(chǎn)率(20%)LC—MS(方法3):Rt=8.03min，m/z=934.47[M+H]+實(shí)施例44將實(shí)施例17(6.28g,6.92mmol)溶解于乙腈(100ml)中并加入30%溴曱烷的乙腈溶液(60ml)。將該溶液在密封的金屬管中在80°C加熱。24小時(shí)后，溶劑減少至約一半的體積，然后用水稀釋。將該溶液冷凍干燥，得到乳膏狀固體。產(chǎn)率定量的LC-MS(方法3):Rt=7.92min,m/z=922.37[M]+1HNMR《400MHz,DMSO-d6):S-1.71(brm,4H);2.82《s，6H);2.99-3.30(m，8H);3.81(s，4H);5.40(d,2H);7.61-7.90(m，16H);8.21(d,2H)ppm.以下實(shí)施例通過類似方式制備:結(jié)構(gòu)前體產(chǎn)率(%)LOMSRt(min)質(zhì)量間+站，o^實(shí)施例131007.71(方法4)894.1946實(shí)施例31005.87(方法'4)概2847"MO^N^實(shí)施例25329.30.'(方法3)978.42實(shí)施例48將實(shí)施例17(150mg,0.165mmol)和2-溴乙醇(420mg，1.65mmo1)溶解于乙腈(2ml)中并將該溶液在80t:加熱120h。蒸發(fā)掉揮發(fā)物并使用HPLC體系3純化產(chǎn)物。將純的餾分合并并冷凍干燥，得到乳膏狀固體。產(chǎn)率42mg(25%)LC一MS(方法4):Rt=7.67min，m/z=952.34[M]+以下實(shí)施例使用類似于制備中間體17的步驟和鹵代烷制備:57結(jié)構(gòu)產(chǎn)率(%)LC-鵬Rt(inin)(方法4>質(zhì)量M+Hr或MT49o人n^cy)"廣o138.52966.1850〖》NHs《；207.62鄉(xiāng).33實(shí)施例511(LinT^^N'oo將琥珀酸(5.9mg，0.0499mmol)的水(2ml)溶液加到含氧化4艮(I)(11.6mg,0.0499mmol)的管中。將該混合液在暗處攪拌17h，然后加入實(shí)施例44(100mg，0.0997mmol)的THF(2ml)溶液及乙腈(0.5ml)。繼續(xù)攪拌3天，然后將該混合物過濾。將濾液蒸發(fā)掉并通過HPLC體系3純化剩余物。將純的餾分合并并冷凍干燥，得到淡黃色固體。產(chǎn)率29mg(30%)LC-MS(方法4):Rt=7.70min，m/z=922.33[M〗+1H剛R(400MHz，MeOD):5=1.84(brm,8H);2.45(4H,s);2.92(s,12H);3.14(m,SH》;3.30(m,8H》;3.91(m,部分地與溶劑交換》;S,51《s,4H);7,64-7.82機(jī)32H)ppm.58以下化合物以類似的方式制備:結(jié)構(gòu)產(chǎn)率(％)LC~MS附(mln)質(zhì)量[M+H+52《457.76<方法4)922.3353307.74(方法4)922.33540y、"一o607.94<方法3>國.'....922.4555^《『9一408.01(方法3)922.4556Q*。111Tl19—528.08<方法3)922.45NMR數(shù)據(jù)實(shí)施例521HNMR(400MHz,IVteOD》:5=1.S4(brm,8H);2.92(s，12H》;3.14《m,8H》;3,30(m,8H〗;3Jl《m，部分地與溶荊交換》:5,§1fe,4H):6.60《2H,s》:7:64~7,82機(jī)32H)p降59實(shí)施例531HNMR(400MHz,MeOD):5-1.84(brm,8H);2.92{s,12H》;3.14(m,8H);3.30(m,8H);3,91(m,部分地與溶劑交換);5.61(S,4H);6.18(2H,s):7,64-7.82扭32H)ppm.實(shí)施例541HNMR(400MH之,MeOD):S豕1.84(brm,8H);2.92《s,12H);3.14《m,8H);3.30《m,8H);3.91(m,部分地與溶劑交換);4,22(2H，s);5.51《s,4H》;7.64-7,82(m'32H)ppm.實(shí)施例551H剛R(400MHz,DMSO-d6):5=1.71(brm,8H);2.82(s，12H);2,99>3.30(m,湖);3.81(s,8H〉;5.40(d,4H);7.34《dd,2H);7.61-7.90(m,16H);8.12(m,4H);8.81(ct，2H)ppm,實(shí)施例561HNMR(400MHz,OMSO誦d6):S=1.71(brm,8H);2.56(s,4H);2.82(s，12H);2.99-3.30(m,16H);3,81(s,8H);5.40(d，4H);7.61-7.90(m，32H);8.21(d,4H)pp!TL實(shí)施例57將實(shí)施例44(100mg，0.0997咖ol)溶解于MeOH(50ml)中并上樣至經(jīng)MeOH調(diào)節(jié)的IsoluteSCX-2柱上。將該柱用MeOH沖洗，然后將產(chǎn)物用1.25MHC1的MeOH溶液(60ml)洗脫。將溶劑蒸發(fā)掉，通過HPLC體系3純化產(chǎn)物。將純的餾分合并并冷凍干燥，得到白色固體。產(chǎn)率35mg(37%)LC一MS(方法4):Rt=7.72min，m/z=922.22[M]+實(shí)施例58將實(shí)施例57(956mg，0.998mmol)溶解于乙腈(50ml)中并加入曱苯磺酸鈉(290mg，1.50mmol)。將該反應(yīng)混合液在氬氣氣氛下于80匸加熱17h。冷卻后將固體濾出并將濾液蒸發(fā)掉。將產(chǎn)物在IsoluteA1-N柱(10g)上用0-6%MeOH的DCM溶液洗脫而進(jìn)行純化，得到乳膏狀固體。產(chǎn)率5.03(46%)LC—MS(方法3):Rt=7.97min，m/z=922.38[M]+1H隨R(400MHz,DMSOd6):5=1.71(brm,4H);2.24(s，3H);2.82(s,6H〉;2.99-3.30(m，8H);3.81(s，4H);5.40(d'2H);7.10(d,2H);7.43(d,2H);7.61-7.90(m，16H>;8.21(d,2H)ppm.使實(shí)施例32通過HPLC體系5純化。將純的餾分合并并冷凍干燥從而得到米色固體。LC-MS(方法3):Rt=7.86min,m/z=922.15[M]+1H,R(400MHz,DMSO-d6):5=1.71(brm，4H);2.82(s,6H);2.99-3.30(m,8H);3.81(s，4H);5.40《d，2H);7,61-7.90(m，16H);8.21(d,2H);8.27(s,1H)ppm,實(shí)施例6061<formula>formulaseeoriginaldocumentpage62</formula>實(shí)施例60使用類似于合成中間體45所用的方法由中間體43制備。產(chǎn)率(36%)LC-MS(方法4):Rt=7.49min，m/z=618.34[M+H]+實(shí)施例61<formula>formulaseeoriginaldocumentpage62</formula>實(shí)施例61使用類似于合成中間體44所用的步驟由實(shí)施例60制備,產(chǎn)率定量的LC-MS(方法3):Rt=7.87min,m/z=632.29[M]+實(shí)施例62<formula>formulaseeoriginaldocumentpage62</formula>將實(shí)施例46(124mg,0.151mmol)的乙腈(6ml)溶液用2M乙胺的THF溶液(755|al，1.51mmol)處理。將該溶液在RT靜置17h。將溶劑蒸發(fā)得到剩余物，將該剩余物使用HPLC體系2進(jìn)行純化。產(chǎn)率24mg(48%)LC-MS(方法4):Rt=8.74min,m/z=738.35/740.30[M+H]實(shí)施例63實(shí)施例63使用類似于制備實(shí)施例44所用的方法由實(shí)施例62制備。產(chǎn)率定量的LC-MS(方法3):Rt=9.11min,m/z=752.31/754.31[M]十實(shí)施例64》實(shí)施例64在合成實(shí)施例60的過程中獲得?？购怆x子的交換發(fā)生在HPLC(體系2)過程中。產(chǎn)率(9%)LC-MS(方法4):Rt=8.72min，m/z=752.46[M]+實(shí)施例65將實(shí)施例44(50mg，0.0499mmol)的水(1ml)及THF(1ml)溶液用氧化銀(I)(5.76mg，0.0248mmol)處理。18h之后，將混合物過濾并用琥珀酸(2.94mg,0.0248mmol)處理該濾液。1h之后，使用HPLC體系4純化該混合物。得到白色固體產(chǎn)物。產(chǎn)率10mg(20%)LC一MS(方法4):Rt=3.19min，m/z=954.19[M+H]+實(shí)施例66將實(shí)施例18(30mg,0.0335mmol)和2-溴乙醇(92mg，0.774mmo1)在碳酸鈉(62mg,0.774mmol)存在的情況下溶于乙腈(5ml)中，并將該反應(yīng)混合物在80'C加熱攪拌48h。將該懸浮液過濾并濃縮，并且通過HPLC體系3純化剩余物。將含有產(chǎn)物的餾分合并并冷凍干燥，得到白色松散粉末。產(chǎn)率14mg(39%)LC-MS(方法3):Rt=7.84min，m/z=982.42[M+]生物試驗(yàn)1測(cè)試了本發(fā)明化合物的HNE抑制活性。64試驗(yàn)在96孔板中進(jìn)行，總試驗(yàn)體積為100/a1。酶(人白細(xì)胞彈性蛋白酶，SigmaE8140)的終濃度為0.00036單位/孔。使用肽底物(MeO-Suc—Ala-Ala-Pro-ValAMC，Calbiochem#324745)，終濃度為100jaM。在試驗(yàn)緩沖液(O.05MTris.HCl，pH7.5,0.1MNaCl;0.1MCaCh;0.0005%聚氧乙烯月桂醚(brij-35))中DMSO的終濃度為1%。通過加入酶引發(fā)酶促反應(yīng)。在RT下進(jìn)行酶促反應(yīng)，30分鐘后通過;^^irir^jr胰蛋白酶抑制劑(SigmaT~9003)終止所迷反應(yīng)，終濃度為50jug/孔。在使用380nm激發(fā)濾光片和460nm發(fā)射濾光片的FLEXstation(MolecularDevices)上讀取熒光。由1000nM-0.051nM范圍內(nèi)的10個(gè)濃度的濃度系列確定所述化合物的效能。結(jié)果為兩個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的平均值，每個(gè)實(shí)驗(yàn)實(shí)施兩次。炎^《^標(biāo)記^浮遂蛋^試驗(yàn)在96孔板中進(jìn)行，總試驗(yàn)體積為100jul。酶(人白細(xì)胞彈性蛋白酶，SigmaE8140)的終濃度為0.002單位/孔。使用來自牛頸部韌帶的熒光標(biāo)記的、溶解的彈性蛋白(MolecularProbes,E-12056)，終濃度為15yg/ml。在試驗(yàn)緩沖液(0.1MTris-HCI，pH8.0,含0.2mM的疊氮化鈉)中固SO的終濃度為2.5%。通過加入酶引發(fā)酶促反應(yīng)。在RT進(jìn)行酶促反應(yīng)并在120分鐘進(jìn)行讀取。在使用485nm激發(fā)濾光片和530nni發(fā)射濾光片的FLEXstation(MolecularDevices)上讀取熒光。由25000nM-1nM范圍內(nèi)的10個(gè)濃度的濃度系列確定所述化合物的效能。結(jié)果為兩個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的平均值，每個(gè)實(shí)驗(yàn)實(shí)施兩次。除實(shí)施例23之外的所有實(shí)施例化合物在l-50nM的范圍內(nèi)均有活性。實(shí)施例23在50-500nm的范圍內(nèi)有活性。滲發(fā)'#義篇^單;^j&將人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(HNE)滴注入大鼠肺中引起急性肺損傷?？赏ㄟ^測(cè)量肺出血評(píng)估該損傷的程度。雄性SpragueDawley大鼠u75-220g)獲自HarlanUKLtd.，收到之后進(jìn)行完全的隔離喂養(yǎng)并保證不接觸指定的微生物。對(duì)動(dòng)物稱重并隨機(jī)地指定處理組(每組7-12個(gè)動(dòng)物)。使用的載體為1%的DMS0/鹽水。將抑制劑溶于1%DMSO中，之后加入0.9°/。的鹽水。65在每一個(gè)研究中的動(dòng)物用于確定通過多種途徑局部地送遞至肺的彈性蛋白酶抑制劑的藥效。用吸入性麻醉劑異氟烷(4%)麻醉大鼠，此時(shí)在給藥人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(HNE)前30分鐘-6小時(shí)給予此劑量；或用hypnorm:hyp謂el:7JC(1.5:1:2，2.7ml/kg)進(jìn)行末端麻醉，此時(shí)在HNE給藥前小于30分鐘內(nèi)給予前劑量并且使用PermCentury微型噴霧器經(jīng)口腔進(jìn)行氣管內(nèi)(i.t.)給藥或通過將液體滴入鼻孔內(nèi)進(jìn)行鼻內(nèi)(i.n.)給藥。動(dòng)物接受0.5ml/kg劑量體積的栽體或化合物。在給藥后已恢復(fù)的動(dòng)物用hypnorm:hypnovel:7JC(1.5:1:2，2.7ml/kg)進(jìn)行末端麻醉。一旦充分麻醉即使用PermCentury微型噴霧器以100pl的體積經(jīng)口腔進(jìn)行氣管內(nèi)滴注給藥HNE(600單位/ml)或無菌鹽水。將動(dòng)物在溫度控制盒內(nèi)保持溫暖，并且按需要給予最高麻醉劑量以確保持續(xù)麻醉直至結(jié)束。在HNE起作用后1小時(shí)將動(dòng)物處死(0.5ml-lml的戊巴比妥鈉)。使氣管暴露并在兩個(gè)氣管環(huán)之間切一小口以將插管(10號(hào)，外徑2-10mm，PortexLtd.)在氣管中向肺的方向插入約2cm。將該插管用棉繃帶固定在該位置。然后將肺用4ml等分的新鮮的肝素化(10單位/ml)磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)灌洗(BAL)3次。將所得的BALF置于冰上直至將其進(jìn)行離心分離。在冷卻至4-10匸的離心機(jī)中以1000r.p.m.將所述BALF離心分離10分鐘。去除上清液并將細(xì)胞團(tuán)再重新懸浮于1ml0.1%CETAB/PBS中以溶解細(xì)胞。將細(xì)胞溶解產(chǎn)物冷凍直至可對(duì)血液含量進(jìn)行分光光度分析。通過制備全大鼠血液的0.1%CETAB/PBS的溶液來制備標(biāo)準(zhǔn)樣。每種溶解的100n1細(xì)胞懸浮液一經(jīng)解凍即放入96孔平底板的分隔的孔中。所有樣品都試驗(yàn)兩次，并且將100pl0.1%CETAB/PBS;故置在板上作為空白試驗(yàn)。通過spectramax250(Moleculardevices)在415nm下測(cè)量每個(gè)孔的內(nèi)含物中的0D。通過測(cè)量0.1%CETAB/PBS中不同濃度的血液(30、10、7、3、1、0.3、0.ljLil/ml)中的OD(在415nm下)構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。通過與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較計(jì)算每個(gè)實(shí)驗(yàn)樣品中的血含量。然后按以下分析數(shù)據(jù)1)計(jì)算兩次試驗(yàn)的平均OD2)從所有其他樣品的值中減去所述空白試驗(yàn)的值663)估計(jì)數(shù)據(jù)以評(píng)估分布的正態(tài)性。在以上試驗(yàn)中測(cè)試了實(shí)施例17、18、26、27、30、32、40、41、42、43、49、59、61和64的化合物，并且這些化合物相對(duì)于對(duì)照樣展示出有效減少的出血量。例如，實(shí)施例32的化合物在給藥HNE前1小時(shí)以30mg/kg進(jìn)行氣管內(nèi)給藥時(shí)，相對(duì)于對(duì)照樣展示出出血率統(tǒng)計(jì)上顯著減少了67°/。權(quán)利要求1.一種式(I)的化合物其中A為芳基或雜芳基；D為氧或硫；2.權(quán)利要求l中要求的化合物，其中R1、W和W各自獨(dú)立地為氫、鹵素、硝基、氰基、d-C3烷基、C2-C3烯基、C廣C3炔基、羥基或C廣C3烷氧基或C2-C3烯氧基。3.權(quán)利要求1中要求的化合物，其中R1、R'和W各自獨(dú)立地為氫、氟、氯、溴、氰基、甲基、曱氧基和-CsCH。4.前述權(quán)利要求任一項(xiàng)中要求的化合物，其中A為苯基、吡啶基或嘧啶基。5.前述權(quán)利要求任一項(xiàng)中要求的化合物，其中W和R2中的一個(gè)為甲基、-C^CH或氰基。6.權(quán)利要求1中要求的化合物，其中-AR^為4-氰基苯基或4-乙7.前述權(quán)利要求任一項(xiàng)中要求的化合物，其中D為0。8.前述權(quán)利要求任一項(xiàng)中要求的化合物，其中RS為氫且W為3-三氟甲基、3-氯或3-溴。9.前述權(quán)利要求任一項(xiàng)中要求的化合物，其中W和/或R為式-[XL—[Alk1p-[Q〗「[Alk2]cr[X1〗「Z的基團(tuán)，其中m為0，k、p、n和q各自為l，Q為—N(RA)或—N+(RA)GO-,且RA、RB、Alk1、Alk2、X'和Z如權(quán)利要求l中所限定。10.權(quán)利要求9中要求的化合物，其中X〗為-0-。11.權(quán)利要求9或10中要求的化合物，其中Z為任選被取代的苯基或單環(huán)雜芳基，后者具有5或6個(gè)環(huán)原子。12.權(quán)利要求9-11任一項(xiàng)中要求的化合物，其中R和R4中的一個(gè)為氫。13.權(quán)利要求l-8任一項(xiàng)中要求的化合物，其中R或W選自C廣C6烷基、曱?；濒驶?、單-或雙-d-C4烷基氨羰基、C廣C8環(huán)烷基羰基、d-C6烷基羰基、d-C6烷氧基羰基、N-(d-C4烷基磺酰基)-氨羰基、N-(d-C4烷基磺?；?-N-(C廣C4烷基)-氨羰基、雜芳基、雜環(huán)烷基、雜芳基羰基或雜環(huán)烷基羰基；其中d-C6烷基、單-或雙-C廣C4-烷基氨羰基、d-"烷基羰基、d-Ce烷氧基羰基、雜芳基和雜環(huán)烷基可以被1-3個(gè)相同或不同的選自以下的基團(tuán)取代芳基、雜芳基、羥基、d-。烷氧基、羥基羰基、d-"烷氧基羰基、氨羰基、單-或雙-d-C4烷基氨羰基、氨基、單-和雙-C廣C4烷基氨基、C廣G烷基羰基氨基、氰基、N-(單-和雙-C廣G烷基氨基-d-C4烷基)-氨羰基、N-(d-C4烷氧基-C廣C4烷基)氨羰基和卣素。14.權(quán)利要求l-8任一項(xiàng)中要求的化合物，其中R和/或R4代表式(vniA)、(vniB)或(vmc)的基團(tuán)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>其中(v出c)R為氫或d-Ce烷基，且s為1或2。15.權(quán)利要求l-8任一項(xiàng)中要求的化合物，其中R和/或R4代表式(IX)的一個(gè)基團(tuán)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>其中R"為氫或d-G烷基；lT、iT和lT各自為d-Ce烷基，且它們連接的氮為四價(jià)并攜帶一個(gè)正電荷；此外R"、R4D、IT中的任意兩個(gè)可連接形成環(huán)，該環(huán)任選含有一個(gè)選自氧或氮的第二雜原子；或者R4e、R4D、R4E中的一個(gè)為孤對(duì)電子，其他基團(tuán)如上文所限定，它們連接的氮為三價(jià)；并且vl和v2各自獨(dú)立地為0-5。16.權(quán)利要求l-8任一項(xiàng)中要求的化合物，其中R和/或R4代表選自以下的一個(gè)基團(tuán):<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>其中R"為氫或d-C6烷基；R4C、R4D、R"各自為d-C6烷基，它們連接的氮為四價(jià)并攜帶一個(gè)正電荷；此外R4e、lT和R"中的任意兩個(gè)可連接形成環(huán)，該環(huán)任選含有一個(gè)選自氧或氮的第二雜原子；或者R4e、R4D、R4E中的一個(gè)為孤對(duì)電子，其他基團(tuán)如上文所限定，它們連接的氮為三價(jià)；IT和R"獨(dú)立地為氫或d-C6烷基；R"和IT獨(dú)立地為氫或d-G烷基，或者R"和IT與它們連接的氮一起形成一個(gè)5-7個(gè)環(huán)原子的單環(huán)雜環(huán)，所述單環(huán)雜環(huán)還可含有一個(gè)選自N、O和S的另外的雜原子；并且vl和v2各自獨(dú)立i也為0-5。17.權(quán)利要求13-16任一項(xiàng)中要求的化合物，其中R或R4——但不是兩者一一為氫。18.權(quán)利要求13-16任一項(xiàng)中要求的化合物，其中R或R4——但不是兩者一一選自C廣C6烷基、曱?；濒驶?、單-或雙-C廣C4烷基氨羰基、C3-Cs環(huán)烷基羰基、d-C6烷基羰基、C廣C6烷氧基羰基、N-(C廣C4烷基磺?；?-氨羰基，N-(d-C4烷基磺?；?-N-(d-C4烷基)-氨羰基、雜芳基、雜環(huán)烷基、雜芳基羰基或雜環(huán)烷基羰基；其中d-C6烷基、單-和雙-d-C4-烷基氨羰基、d-Cs烷基羰基、d-C6烷氧基羰基、雜芳基和雜環(huán)烷基可以被1-3個(gè)相同或不同的選自以下的基團(tuán)取代芳基、雜芳基、幾基、C廣。烷氧基、羥基羰基、C廣C6烷氧基羰基、氨羰基、單-或雙-C廣C4烷基氨羰基、氨基、單-和雙-d-C4烷基氨基、d-C4烷基羰基氨基、氰基、N-(單-和雙-d-C4烷基氨基-C廠C4烷基)氨羰基、N-(d-C4烷氧基-d-C4烷基)-氨羰基和由素。19.一種多體化合物，包含2個(gè)、3個(gè)或4個(gè)權(quán)利要求1-16任一項(xiàng)中要求的化合物的分子，所述分子通過接頭支架共價(jià)連接。20.權(quán)利要求19中要求的多體化合物，其中所述2個(gè)、3個(gè)或4個(gè)權(quán)利要求1-16任一項(xiàng)中要求的化合物的分子通過它們各自的如式(I)中所示連至R上的氮原子連于所述接頭支架上。21.—種具有式M-L-1^的多體化合物，其中L為一個(gè)二價(jià)接頭基團(tuán)且M和1^各自獨(dú)立地為式(IA)的一個(gè)基團(tuán)，式中D、A和W-RS如權(quán)利要求1-18任一項(xiàng)中所限定22.權(quán)利要求19中要求的多體化合物，其中所述2個(gè)、3個(gè)或4個(gè)權(quán)利要求7要求的分子通過它們各自的如式(I)中所示連至W上的氮原子而連于所述接頭支架上。23.—種具有式M-L-I^的多體化合物，其中L為一個(gè)二價(jià)接頭基團(tuán)并且M和I^各自獨(dú)立地為式(IB)的一個(gè)基團(tuán)，式中D、A和R、R1、R2、R、,O令W和R5如權(quán)利要求1-18任一項(xiàng)中所限定:R324.權(quán)利要求21或23中要求的化合物，其中M和I^是相同的。25.權(quán)利要求21、23或24中要求的化合物，其中所述接頭支架或接頭基團(tuán)L為一個(gè)二價(jià)直鏈的飽和或不飽和烴基，其中在所述鏈上具有2-12個(gè)碳原子，并且其中一個(gè)或多個(gè)碳可以被以下基團(tuán)替代二價(jià)單環(huán)或雙環(huán)的碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)，所述基團(tuán)在環(huán)上或每個(gè)環(huán)上具有3-7個(gè)環(huán)原子；或者-0-、-S-、-S(=0)-、-S(=0)2-、-C(=0)-、-N(RP)-、-N+(RP)(RQ)-、-C(=0)0-、—OC(-O)-、-C(=0)NRA-、-NRAC(=0)-、-S(02)NRA-、—NRAS(02)-、-NRAC(=0)NRB-、-NRaC(=NRa)NRb-、-C(=NRd)NRE-或-NReC(=NRd)-,其中RA、RB、RD和RE獨(dú)立地為氳、d-C6烷基或C3-C6環(huán)烷基，且RP和W獨(dú)立地為氫、d-C6烷基或C「C6環(huán)烷基、HO-(d-C6烷基)-、RARBN-(C廣C6烷基)-或HOC(-O)-(C廣C6烷基)-，或者RA和RB、或RD和RE、或RP和R"與它們連接的氮一起形成5-7個(gè)環(huán)原子的單環(huán)雜環(huán)，所述雜環(huán)還可以含有一個(gè)選自N、O和S的另外的雜原子。26.權(quán)利要求25中要求的化合物，其中當(dāng)所述接頭支架或接頭基團(tuán)L中的一個(gè)或多個(gè)-(CH2)-基團(tuán)被二價(jià)的單環(huán)或雙環(huán)的碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)替代時(shí)，所述基團(tuán)選自以下基團(tuán)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>27.權(quán)利要求25中要求的化合物，其中所述接頭支架或接頭基團(tuán)l具有以下結(jié)構(gòu)(a)、(b)、(c)、(d)和(e)之一<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>(D)(曰28.權(quán)利要求25中要求的化合物，其中所述接頭支架或接頭基團(tuán)l具有以下結(jié)構(gòu)(g)和(e)之一—(CH2)kCO-NH-(CH2)l2-N(CH3)-(CH2)l2-NH-CO-(CH^一(G)《CH2)l2-CO揚(yáng)(CH2)l2魯(CH3)2-(嗎.2德.2—(H)29.權(quán)利要求1要求的化合物或權(quán)利要求19要求的多體化合物，所述化合物及所述多體化合物具有本文任一實(shí)例的化合物的結(jié)構(gòu)。30.前述權(quán)利要求任一項(xiàng)中要求的化合物，為藥學(xué)可接受的鹽的形式。31.權(quán)利要求19要求的化合物，所述化合物具有式(X)、(Y)或(Z)的結(jié)構(gòu)其中A為藥學(xué)可接受的陰離子。32.前述權(quán)利要求任一項(xiàng)中要求的化合物，用于治療中。33.—種藥物組合物，所藥物述組合物包含一種權(quán)利要求1-31任一項(xiàng)要求的化合物及一種藥學(xué)可接受的載體或賦形劑。34.權(quán)利要求l-31任一項(xiàng)要求的化合物的用途，用于制備用來治療或預(yù)防涉及HNE的疾病或病癥的藥劑。35.—種治療涉及HNE的疾病或病癥的方法，所述方法包括對(duì)患有這樣的疾病的受試者施予有效量的權(quán)利要求1-31任一項(xiàng)要求的化合物。36.權(quán)利要求34的用途或者權(quán)利要求35的治療方法，其中所述疾病或病癥為慢性阻塞性肺疾患(COPD)、慢性支氣管炎、肺纖維化、肺炎、急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)、肺氣腫、吸煙誘發(fā)的氣腫及嚢性纖維化。37.權(quán)利要求34的用途或者權(quán)利要求35的治療方法，其中所述疾病或病癥為哮喘、鼻炎、牛皮癬、皮炎、(特應(yīng)性的和非特應(yīng)性的)、克羅恩病、潰瘍性結(jié)腸炎或過敏性腸疾病。全文摘要式(I)的化合物及其多體是人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶活性抑制劑，以及它們?cè)诶鏑OPD的治療中的用途，其中所有取代基如權(quán)利要求1中所限定。文檔編號(hào)C07D487/04GK101479270SQ200780023789公開日2009年7月8日申請(qǐng)日期2007年5月3日優(yōu)先權(quán)日2006年5月4日發(fā)明者C·愛德華茲,E·奧康娜,H·芬奇,N·C·雷申請(qǐng)人:阿根塔發(fā)明有限公司