專利名稱：依氟鳥氨酸前藥和偶合物及其使用方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及依氟鳥氨酸前藥和偶合物及其使用方法。
背景技術(shù)：
癌癥，也稱作惡性腫瘤，是以細胞的異常生長為特征的一類強增殖性疾病，這種異 常生長表現(xiàn)為不受控制的細胞分裂、入侵和相鄰組織的破壞，并且有時會轉(zhuǎn)移至體內(nèi)的其 他部位。存在100多種癌癥，包括乳腺癌、皮膚癌、肺癌、結(jié)腸癌、前列腺癌和淋巴癌。癌癥 能感染各年齡段的人，甚至是胎兒，但患上大多數(shù)癌癥的風險隨著年齡而增加。癌癥能感染 所有的動物。癌癥受到多重分子機制的影響。由于各病狀的復(fù)雜特性，用單一藥劑進行治療通 常只能取得有限的成功。因此，聯(lián)合給藥通常被用于癌癥的治療中。據(jù)報道，給藥的藥劑 數(shù)量和諸如急性淋巴細胞性白血病和轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌的癌癥的治愈率之間存在很強的相 關(guān)性(Frei, et al.，Clin. Cancer Res. 1998，4，2027-2037 ；Fi sher, M. D. Clin. Colo 直腸 Cancer 2001，1(2)，85-86)。a -雙氟甲基鳥氨酸(DFMO)或2_ (雙氟甲基)_DL_鳥氨酸，也被稱為依氟鳥氨酸， 是鳥氨酸脫羧酶(0DC)的抑制劑，限制多元胺的生物合成路徑的速率。作為這種多元胺合 成抑制的結(jié)果是，這種化合物能有效預(yù)防很多器官系統(tǒng)中癌癥的形成，抑制癌的生長，并且 能降低腫瘤的尺寸。它還與其他抗腫瘤藥劑具有協(xié)同增效作用。

發(fā)明內(nèi)容
一方面，本發(fā)明提供了一種用于治療或預(yù)防癌癥的化合物，所述化合物包括第一 部分和第二部分，所述第一部分與第二部分共價連接，其中所述第一部分是依氟鳥氨酸或 依氟鳥氨酸的類似物或衍生物，所述第二部分是非留族消炎藥(NSAID)。在一些具體實施方 案中，所述第一部分是依氟鳥氨酸。在一些具體實施方案中，所述第二部分選自阿司匹林、 醋氯芬酸、阿西美辛、阿氯芬酸、阿莫西普林(amoxiprin)、氨基安替比林、阿扎丙宗、貝諾 酯、溴芬那酸、膽堿和水楊酸鎂、水楊酸膽堿、塞來昔布、氯非宗、雙氯芬酸鉀、雙氯芬酸鈉、 雙氯芬酸鈉與米索前列醇、雙氟苯水楊酸、曲噁昔康、氯諾昔康、美洛昔康、替諾昔康、乙柳 酰胺、依托度酸、非諾洛芬鈣、菲斯胺(faislamine)、氟比洛芬、氟滅酸、布洛芬、異丁普生、 吲哚洛芬、阿明洛芬、咔洛芬、右旋布洛芬、右旋酮洛芬、芬布芬、氟諾洛芬、吲哚美辛、酮洛 芬、酮咯酸、酮保泰松、洛索洛芬、水楊酸鎂、甲氯芬那酸鈉、安乃近、布他酮、羥保泰松、非那 宗、苯磺唑酮、甲滅酸、美洛昔康、水楊酸甲酯、萘丁美酮、萘普生、萘普生鈉、萘丁美酮、噁丙 嗪、奧沙美辛、保泰松、丙谷美辛、吡羅昔康、吡洛芬、舒洛芬、羅非昔布、雙水楊酯、水楊酸水 楊酯、水楊酰胺、水楊酸鈉、舒林酸、噻洛芬酸、托滅酸、托美汀鈉和伐地考昔的組。在一些具 體實施方案中，所述NSAID是舒林酸。在一些具體實施方案中，所述NSAID是阿司匹林。在 一些具體實施方案中，所述第一和第二部分是通過共價鍵連接的，所述共價鍵選自酯鍵、酰 胺鍵、亞胺鍵、氨基甲酸酯鍵、碳酸酯鍵、硫酯鍵、酰氧基氨基甲酸酯鍵、酰氧基碳酸酯鍵、酰氧基硫代氨基甲酸酯鍵、磷酸酯鍵、氨基磷酸酯鍵和酰氧基磷酸酯鍵的組。在一些具體實施 方案中，所述化合物進一步包括將第一部分與第二部分共價連接的連接基。在一些具體實 施方案中，所述連接基是生理學上不穩(wěn)定的。在一些具體實施方案中，所述癌癥是腎上腺 皮質(zhì)癌、肛門癌、再生障礙性貧血、膽管癌、膀胱癌、骨癌、骨轉(zhuǎn)移、腦癌、中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS) 癌、周圍神經(jīng)系統(tǒng)(PNS)癌、乳腺癌、宮頸癌、兒童非霍奇金淋巴瘤、結(jié)腸和直腸癌、子宮內(nèi) 膜癌、食道癌、尤文腫瘤族(如尤文肉瘤)、眼癌、膽囊癌、胃腸道類癌、胃腸道間質(zhì)瘤、妊娠 滋養(yǎng)細胞腫瘤、毛細胞白血病、霍奇金淋巴瘤、卡波氏肉瘤、腎癌、喉和下咽癌、急性淋巴細 胞白血病、急性髓系白血病、兒童白血病、慢性淋巴細胞白血病、慢性髓系白血病、肝癌、肺 癌、肺類癌、非霍奇金淋巴瘤、男性乳腺癌、惡性間皮瘤、多發(fā)性骨髓瘤、骨髓增生異常綜合 征、骨髓增殖性疾病、鼻腔和副鼻竇癌、鼻咽癌、成神經(jīng)細胞瘤、口腔和口咽癌、骨肉瘤、卵巢 癌、胰腺癌、陰莖癌、垂體瘤、前列腺癌、視網(wǎng)膜母細胞瘤、橫紋肌肉瘤、唾液管癌癥、肉瘤、黑 素性皮膚癌、非黑素性皮膚癌、胃癌、睪丸癌、胸腺癌、甲狀腺癌、子宮癌(如子宮肉瘤)、移 行細胞癌、睪丸鞘膜癌、外陰癌、間皮瘤、鱗狀細胞或表皮樣癌、支氣管腺瘤、絨毛膜上皮癌、 頭脖癌、畸胎癌、或原發(fā)性巨球蛋白血癥。在一些具體實施方案中，所述癌癥是Ki-ras依賴 性癌癥。在一些具體實施方案中，所述化合物進一步包括離子或共價地連接到所述化合物 的第一部分或第二部分的第三部分。在一些具體實施方案中，所述化合物可與至少一種其 他治療性藥劑聯(lián)用。在一些具體實施方案中，所述其他治療性藥劑是抗癌烷基化劑、抗癌代 謝拮抗劑、抗癌抗生素、來源于植物的抗癌藥劑、抗癌有機鉬化物、抗癌喜樹堿衍生物、抗癌 酪胺酸激活酶抑制劑、單克隆抗體、干擾素、生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑、荷爾蒙抗腫瘤藥劑、血管生成 抑制劑、促分化藥物、或其藥學上可接受的鹽。在一些具體實施方案中，化合物可與外科手 術(shù)、放射治療、化學療法、基因治療、RNA治療、輔助治療、免疫療法、納米治療或其組合聯(lián)合 使用。在一些具體實施方案中，本發(fā)明提供了一種用于治療或預(yù)防癌癥的藥物組合物， 包括權(quán)利要求1所述的化合物和藥學上可接受的載體。在一些具體實施方案中，本發(fā)明提 供了一種用于治療或預(yù)防患者體內(nèi)的癌癥的試劑盒，所述試劑盒包括本發(fā)明的化合物或本 發(fā)明的藥物組合物，以及所述試劑盒的使用說明。在一些具體實施方案中，患者是動物，優(yōu) 選是人。在一些具體實施方案中，所述試劑盒進一步包括至少一種用于治療癌癥的其他藥 劑，以降低本發(fā)明的化合物所導(dǎo)致的副作用，和/或提高本發(fā)明的化合物的治療效果。另一方面，本發(fā)明提供了一種治療或預(yù)防癌癥的方法，所述方法包括向需要的患 者施加治療有效量的化合物，所述化合物包括第一部分和第二部分，所述第一部分與第二 部分共價連接，其中所述第一部分是依氟鳥氨酸或依氟鳥氨酸的類似物或衍生物，所述第 二部分是非留族消炎藥(NSAID)。在一些具體實施方案中，所述第一部分是依氟鳥氨酸。 在一些具體實施方案中，所述第二部分選自阿司匹林、醋氯芬酸、阿西美辛、阿氯芬酸、阿莫 西普林、氨基安替比林、阿扎丙宗、貝諾酯、溴芬那酸、膽堿和水楊酸鎂、水楊酸膽堿、塞來昔 布、氯非宗、雙氯芬酸鉀、雙氯芬酸鈉、雙氯芬酸鈉與米索前列醇、雙氟苯水楊酸、曲噁昔康、 氯諾昔康、美洛昔康、替諾昔康、乙柳酰胺、依托度酸、非諾洛芬鈣、菲斯胺、氟比洛芬、氟滅 酸、布洛芬、異丁普生、吲哚洛芬、阿明洛芬、咔洛芬、右旋布洛芬、右旋酮洛芬、芬布芬、氟諾 洛芬、吲哚美辛、酮洛芬、酮咯酸、酮保泰松、洛索洛芬、水楊酸鎂、甲氯芬那酸鈉、安乃近、布 他酮、羥保泰松、非那宗、苯磺唑酮、甲滅酸、美洛昔康、水楊酸甲酯、萘丁美酮、萘普生、萘普生鈉、nabumetone、噁丙嗪、奧沙美辛、保泰松、丙谷美辛、卩比羅昔康、吡洛芬、舒洛芬、羅非昔 布、雙水楊酯、水楊酸水楊酯、水楊酰胺、水楊酸鈉、舒林酸、噻洛芬酸、托滅酸、托美汀鈉和 伐地考昔的組。在一些具體實施方案中，所述NSAID是舒林酸。在一些具體實施方案中所 述NSAID是阿司匹林。在一些具體實施方案中，所述第一部分和第二部分通過共價鍵連接， 所述共價鍵選自酯鍵、酰胺鍵、亞胺鍵、氨基甲酸酯鍵、碳酸酯鍵、硫酯鍵、酰氧基氨基甲酸 酯鍵、酰氧基碳酸酯鍵、磷酸酯鍵、氨基磷酸酯鍵和酰氧基磷酸酯鍵的組。在一些具體實施 方案中，所述化合物進一步包括將第一部分與第二部分共價連接的連接基。在一些具體實 施方案中，所述連接基是生理學上不穩(wěn)定的。在一些具體實施方案中，所述化合物進一步包 括離子或共價地連接到所述化合物的第一部分或第二部分的第三部分。在一些具體實施方 案中，所述方法進一步包括向患者施加治療有效量的藥物組合物，所述組合物包括所述化 合物和藥學上可接受的載體。在一些具體實施方案中，所述患者是哺乳動物。在一些具體 實施方案中，所述患者是人。在一些具體實施方案中，所述化合物是非腸道給藥的。在一些 具體實施方案中，所述化合物是口腔給藥的。在一些具體實施方案中，與每一部分單獨給藥 相比，所述化合物或藥物組合物的給藥會導(dǎo)致副作用減少至少一種。在一些具體實施方案 中，與每一部分單獨給藥相比，所述化合物或藥物組合物的給藥會提高治療活性。另-
-方面，本發(fā)明提供了一種式(IV)或(V)的化合物或其藥學上可接受的鹽 在一些具體實施方案中，氨基磷酸酯基在體內(nèi)被切斷。在一些具體實施方案中，所 述化合物進一步包括藥學上可接受的載體。另一方面，本發(fā)明提供了一種治療或預(yù)防癌癥的方法，所述方法包括向需要的患 者施加治療有效量的式(IV)或(V)的化合物或其藥學上可接受的鹽。
在一些具體實施方案中，所述化合物是口腔給藥的。在一些具體實施方案中，所述 化合物是非腸道給藥的。在一些具體實施方案中，所述化合物與NSAID聯(lián)合給藥。在一些 具體實施方案中，所述NSAID選自阿司匹林、醋氯芬酸、阿西美辛、阿氯芬酸、阿莫西普林、 氨基安替比林、阿扎丙宗、貝諾酯、溴芬那酸、膽堿和水楊酸鎂、水楊酸膽堿、塞來昔布、氯非 宗、雙氯芬酸鉀、雙氯芬酸鈉、雙氯芬酸鈉與米索前列醇、雙氟苯水楊酸、曲噁昔康、氯諾昔 康、美洛昔康、替諾昔康、乙柳酰胺、依托度酸、非諾洛芬鈣、菲斯胺、氟比洛芬、氟滅酸、布洛 芬、異丁普生、吲哚洛芬、阿明洛芬、咔洛芬、右旋布洛芬、右旋酮洛芬、芬布芬、氟諾洛芬、吲哚美辛、酮洛芬、酮咯酸、酮保泰松、洛索洛芬、水楊酸鎂、甲氯芬那酸鈉、安乃近、布他酮、羥 保泰松、非那宗、苯磺唑酮、甲滅酸、美洛昔康、水楊酸甲酯、萘丁美酮、萘普生、萘普生鈉、萘 丁美酮、噁丙嗪、奧沙美辛、保泰松、丙谷美辛、吡羅昔康、吡洛芬、舒洛芬、羅非昔布、雙水楊 酯、水楊酸水楊酯、水楊酰胺、水楊酸鈉、舒林酸、噻洛芬酸、托滅酸、托美汀鈉和伐地考昔的 組。在一些具體實施方案中，所述NSAID是舒林酸。在一些具體實施方案中，所述NSAID是 阿司匹林。在一些具體實施方案中，所述NSAID在式(II)的化合物給藥之前、同時或之后 給藥的。在一些具體實施方案中，所述患者是哺乳動物。在一些具體實施方案中，所述患者 是人。在一些具體實施方案中，所述癌癥是腎上腺皮質(zhì)癌、肛門癌、再生障礙性貧血、膽管 癌、膀胱癌、骨癌、骨轉(zhuǎn)移、腦癌、中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)癌、周圍神經(jīng)系統(tǒng)(PNS)癌、乳腺癌、 宮頸癌、兒童非霍奇金淋巴瘤、結(jié)腸和直腸癌、子宮內(nèi)膜癌、食道癌、尤文腫瘤族(如尤文肉 瘤)、眼癌、膽囊癌、胃腸道類癌、胃腸道間質(zhì)瘤、妊娠滋養(yǎng)細胞腫瘤、毛細胞白血病、霍奇金 淋巴瘤、卡波氏肉瘤、腎癌、喉和下咽癌、急性淋巴細胞白血病、急性髓系白血病、兒童白血 病、慢性淋巴細胞白血病、慢性髓系白血病、肝癌、肺癌、肺類癌、非霍奇金淋巴瘤、男性乳腺 癌、惡性間皮瘤、多發(fā)性骨髓瘤、骨髓增生異常綜合征、骨髓增殖性疾病、鼻腔和副鼻竇癌、 鼻咽癌、成神經(jīng)細胞瘤、口腔和口咽癌、骨肉瘤、卵巢癌、胰腺癌、陰莖癌、垂體瘤、前列腺癌、 視網(wǎng)膜母細胞瘤、橫紋肌肉瘤、唾液管癌癥、肉瘤、黑素性皮膚癌、非黑素性皮膚癌、胃癌、睪 丸癌、胸腺癌、甲狀腺癌、子宮癌(如子宮肉瘤)、移行細胞癌、睪丸鞘膜癌、外陰癌、間皮瘤、 鱗狀細胞或表皮樣癌、支氣管腺瘤、絨毛膜上皮癌、頭脖癌、畸胎癌、或原發(fā)性巨球蛋白血 癥。在一些具體實施方案中，所述癌癥是Ki-ras依賴性癌癥。以引用形式納入本發(fā)明本說明書中提及的所有的出版物、專利和專利申請，都以引用的形式納入本發(fā)明， 其范圍與各出版物、專利和專利申請具體地、單獨地引用納入本發(fā)明時的一樣。
具體實施例方式一方面，本發(fā)明提供了一種依氟鳥氨酸-NSAID偶合物，包括通過共價鍵連接的至 少兩個部分。在一些具體實施方案種，所述偶合物的第一部分優(yōu)選包括依氟鳥氨酸類似物。 在一些具體實施方案中，所述偶合物的第二部分包括非留族消炎藥(NSAID)。所述偶合物的 第二部分的NSAIDS可包括，但不限于，水楊酸酯、芳基鏈烷酸、2-芳基丙酸(普魯芬)、N-芳 基鄰氨基苯甲酸、吡唑烷衍生物、噁西卡姆、C0X-2抑制劑、磺酰苯胺、或其藥學上可接受的 鹽。在一些具體實施方案種，所述NSAIDS包括但不限于，阿司匹林、膽堿和水楊酸鎂、水楊 酸膽堿、塞來昔布、雙氯芬酸鉀、雙氯芬酸鈉、雙氯芬酸鈉與米索前列醇、雙氟苯水楊酸、依 托度酸、非諾洛芬鈣、氟比洛芬、布洛芬、吲哚美辛、酮洛芬、水楊酸鎂、甲氯芬那酸鈉、甲滅 酸、美洛昔康、萘丁美酮、萘普生、萘普生鈉、噁丙嗪、吡羅昔康、羅非昔布、雙水楊酯、水楊酸 鈉、舒林酸、托美汀鈉、伐地考昔、或它們的組合。另一方面，本發(fā)明還提供了一種合成和制備依氟鳥氨酸前藥或依氟鳥氨酸-NSAID 偶合物的方法。另一方面，本發(fā)明包括采用依氟鳥氨酸前藥或依氟鳥氨酸-NSAID偶合物治療或 預(yù)防癌癥的方法，所述方法降低了癌癥治療所帶來的副作用，提高了癌癥的治療效果。依氟鳥氨酸類似物的例子包括，但不限于如下結(jié)構(gòu) 在一些具體實施方案中，依氟鳥氨酸和NSAID可通過氨基或羧基，直接連接，形成 如下連接基，所述連接基包括，但不限于，羧酸酯、氨基甲酸酯、碳酸酯、硫代碳酸酯、磷酸 酯、膦酸酯、次膦酸酯、氨基磷酸酯、硫代磷酸酯、磺酸酯、或亞磺酸酯。另外，所述依氟鳥氨 酸類似物和NSAID可通過在體內(nèi)可通過化學或酶作用而被切斷的連接基-X-連接。術(shù)語“DFM0”和“依氟鳥氨酸”可互換使用，是指化學名稱為2-(雙氟甲基)_DL_鳥 氨酸、2_(雙氟甲基)鳥氨酸、DL-a-雙氟甲基鳥氨酸、N-雙氟甲基鳥氨酸、依氟鳥氨酸 (ornidyl)和a S - 二氨基-a -(雙氟甲基)戊酸的化合物。在一些具體實施方案中，本發(fā) 明提供了一種式(I)、(II)和(III)的依氟鳥氨酸-NSAID偶合物 或其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物和同位素，其中X是連接基，其定義為NSAID和依氟鳥氨酸類似物之間的共價鍵。X的例子包括但 不限于下述那些 Z是NSAID和依氟鳥氨酸類似物之間的連接基的共價鍵，選自如下組 R1獨立地選自氫、烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、芳烷基、取代的芳烷基、環(huán) 烷基、取代的環(huán)烷基、環(huán)雜烷基、取代的環(huán)雜烷基、雜烷基、取代的雜烷基、雜芳基、取代的雜 芳基、雜芳烷基和取代的雜芳烷基的組；R2和R3獨立地選自氫、烷基、取代的烷基、酰基、取代的烷氧基羰基、取代的烷氧 基羰基、芳基、取代的芳基、芳烷基、取代的芳烷基、氨基甲?；?、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、環(huán) 烷氧基羰基、取代的環(huán)烷氧基羰基、雜芳基、取代的雜芳基、芳烷基、取代的芳烷基、雜芳烷 基和取代的雜芳烷基的組；R15選自氫、烷基、取代的烷基、?；?、取代的烷氧基羰基、取代的烷氧基羰基、芳 基、取代的芳基、芳烷基、取代的芳烷基、氨基甲?；h(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、環(huán)烷氧基羰 基、取代的環(huán)烷氧基羰基、雜芳基、取代的雜芳基、芳烷基、取代的芳烷基、雜芳烷基和取代 的雜芳烷基的組；R21和R22獨立地選自氫、烷基、取代的烷基、?；⒎蓟?、取代的芳基、芳烷基，取 代的芳烷基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、環(huán)烷氧基羰基、取代的環(huán)烷氧基羰基、雜芳基、取代的 雜芳基、芳烷基、取代的芳烷基、雜芳烷基和取代的雜芳烷基；本發(fā)明的化合物可通過其化學結(jié)構(gòu)和/或化學名稱加以確定。本發(fā)明的化合物可 包含一個或多個手性中心和/或雙鍵，因而可以以立體異構(gòu)體如雙鍵異構(gòu)體(即，幾何異構(gòu) 體)、對映異構(gòu)體或非對映異構(gòu)體的形式存在。因此，本發(fā)明所描述的化學結(jié)構(gòu)涵蓋了所示 化合物的所有可能的對映異構(gòu)體和立體異構(gòu)體，包括立體異構(gòu)純化合物形式(如幾何異構(gòu) 純、對映異構(gòu)純或非對映異構(gòu)純)、以及對應(yīng)異構(gòu)和立體異構(gòu)混合物。對映異構(gòu)和立體異構(gòu) 混合物可采用本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的分離方法或手性合成方法，拆分成各組分的對映異 構(gòu)體或立體異構(gòu)體。本發(fā)明的化合物也可以以幾種互變異構(gòu)體的形式存在，包括烯醇式、酮 式及其混合形式。因此，本發(fā)明所描述的化學結(jié)構(gòu)涵蓋了所示化合物的所有可能的互變異 構(gòu)形式。本發(fā)明的化合物還可包括同位素標記的化合物，其中一個或多個原子的原子質(zhì)量 不同于在自然界通常發(fā)現(xiàn)的原子質(zhì)量?？梢氡景l(fā)明的化合物的同位素的例子包括，但不 限于，2H、3H、13C、14C、15N、180、170、31P、32P、35S、18F和36C1。另外，應(yīng)當認為當示意的是本發(fā)明的 化合物的部分結(jié)構(gòu)時，括號所示的是所述部分結(jié)構(gòu)與分子的其他部分的連接點。另一方面，本發(fā)明提供了一種改性依氟鳥氨酸類似物或衍生物，其具有提高的口 服生物藥效率如可通過口服對患者進行給藥。在一些具體實施方案中，所述改性的依氟鳥 氨酸類似物是式(IV)和(V)的依氟鳥氨酸前藥 其中，R23選自氫、R24C(0)-、R240C(0)-、R24C(S)-、R24SC(0)-和(R240) (R240) P(0)_、 R24和R25獨立地選自烷基、取代的烷基、酰基、取代的?；?、芳基、取代的芳基，芳 基烷基、取代的芳烷基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、環(huán)烷氧基羰基、取代的環(huán)烷氧基羰基、雜芳 基、取代的雜芳基、芳烷基、取代的芳烷基、雜芳烷基和取代的雜芳烷基；W 可為-0-或-NH-；本發(fā)明中所用的“前藥”通常是指藥物的前體。前藥在變成活性藥物之前，一般要 經(jīng)過化學或生理學轉(zhuǎn)化。依氟鳥氨酸前藥的氨基磷酸酯基團在活體給藥之后被切斷，在體 內(nèi)釋放出活性形式的依氟鳥氨酸。在依氟鳥氨酸前藥以治療有效量的劑量施加給哺乳動物 時，由依氟鳥氨酸前藥釋放出的氨基磷酸酯基典型地是非毒性的。式(II)的依氟鳥氨酸前 藥可具有提高的水溶性(適于口腔劑型的，可避免依氟鳥氨酸衍生物的病人間變異性)、由 于酶代謝的溢出和polymorphism(代謝酶的基因多態(tài)性)所導(dǎo)致口服生物藥效率。在一 些具體實施方案中，與依氟鳥氨酸或其任何類似物或衍生物相比，依氟鳥氨酸前藥的水溶 性提高了大于約 5%，10%，15%，20%，30%，35%，40%，45%，50%，60%，70%或 80%。在 一些具體實施方案中，如本發(fā)明所述，本發(fā)明的改性的依氟鳥氨酸衍生物，如依氟鳥氨酸前 藥，可與NSAID共價偶合，從而形成依氟鳥氨酸-NSAID偶合物。一些具體實施方案進一步 提供了依氟鳥氨酸前藥的藥物組合物。另一方面，本發(fā)明提供了一種治療癌癥的方法，包括向需要的患者施加式(II)的 依氟鳥氨酸前藥，或其藥物組合物。在一些具體實施方案中，式(II)的依氟鳥氨酸前藥是 口腔給藥的。在一些具體實施方案中，式(II)的依氟鳥氨酸前藥被單獨施加給患者。在一 些具體實施方案中，式(II)的依氟鳥氨酸前藥與NSAID聯(lián)合給藥。所述NSAID可為本發(fā)明 所描述的任何NSAID。在一些具體實施方案中，依氟鳥氨酸前藥和NSAID是在同一劑型中給 藥的。在另一些具體實施方案中，依氟鳥氨酸前藥和NSAID是在不同的劑型中給藥的。式 (II)的依氟鳥氨酸前藥可在NSAID給藥之前、同時或之后給藥。與現(xiàn)有的治療方案相比，本發(fā)明的組合物和方法具有若干優(yōu)點。在一些具體實施 方案中，依氟鳥氨酸-NSAID偶合物可具有提高的生化性能(如溶解性，吸收性，新陳代謝 等)?？商峁└最A(yù)測的給藥方案和在癌癥病人中獲得更好的治療結(jié)果。在另一些具體 實施方案中，通過優(yōu)化所述偶合的兩個部分間的連接基，細胞毒性藥物(如依氟鳥氨酸和 NSAID)的釋放速率可以優(yōu)化。結(jié)果，與母藥的給藥相比，一些胃腸(GI)副作用可被降低。 而且，臨床效果也可通過在癌細胞內(nèi)同時釋放兩種協(xié)同增效的細胞毒性藥物而得以提高。
I.第一部分依氟鳥氨酸類似物—方面，本發(fā)明提供了一種用于治療癌癥或強增殖性疾病的組合物。在一些具體 實施方案中，所述組合物的第一部分是依氟鳥氨酸類似物。依氟鳥氨酸或二氟甲基鳥氨酸(DFM0)是鳥氨酸脫羧酶(0DC)的不可逆抑制劑，并 能潛在地表現(xiàn)出持續(xù)的顯著的抗腫瘤效果。這種藥劑在0.4gr/M2/天的低劑量下，對人相 對地不具有毒性，同時對腫瘤中的腐胺合成產(chǎn)生抑制作用。大鼠腫瘤模型中的研究證實， DFM0的注入能使腫瘤腐胺水平降低90%，而不會降低周邊血小板數(shù)。還發(fā)現(xiàn)依氟鳥氨酸對 非洲錐蟲病(昏睡病)的具有很高的療效。最近的一項研究表明，當與舒林酸(一種消炎 藥)聯(lián)用時，DFM0能顯著降低大腸息肉復(fù)發(fā)的風險。盡管DFM0能有效阻止腫瘤腐胺的生物合成，但最終的抗腫瘤效果是細胞抑制效 應(yīng)而不是細胞毒性。例如，DFM0能降低MCA肉瘤的生長速率，但不能使腫瘤消退。該發(fā)現(xiàn) 是與其他報道是一致的，這些其他報道表明DFM0是細胞抑制劑。但是，有研究表明DFM0藥 物的一個顯著的作用是，為將來含有DFM0的化學治療方案的研發(fā)提供了可能性。DFM0及其在良性前列腺肥大治療中的應(yīng)用在兩篇專利中已有描述，U. S. Pat. No. 4，413，141 和 4，330, 559。U. S. Pat. No. 4，413，141 描述了 DFM0 無論是在體外，還是在體 內(nèi)，都是鳥氨酸脫羧酶的強效抑制劑。DFM0的給藥，會使通常能活躍地產(chǎn)生腐胺和亞精胺這 些多胺的細胞中的腐胺和亞精胺濃度降低。另外，也表明當在標準腫瘤模型中進行測試時， DFM0能減緩腫瘤細胞的增殖。U. S. Pat. No. 4，330，559描述了將DFM0和DFM0衍生物用于 治療良性前列腺肥大。良性前列腺肥大，和以快速細胞增殖為特征的大多數(shù)疾病狀態(tài)類似， 伴隨著多胺濃度的異常升高。該參考文獻中的治療可通過給病人口服或非腸道給藥。盡管多胺合成的抑制作用，在臨床試驗中，作為一種抗癌策略，被證明為通常 是不起作用的，但在臨床前和臨床研究中是一種有效的化學防癌策略，特別是與消炎藥 聯(lián)用(Meyskens, FL Jr.Clin.Cancer Res. 1999,5(5),945-951 ；Gerner, E. ff. Nat. Rev. Cancer 2004,4(10), 781-792 ；Reddy B. S. Environ Mo1. Mutagen 2004,44(1), 26-35 ；Raul F. Biochem. Soc. Trans. 2007, 35, 353-355 ；Presentation by Dr. Frank Meyskens from UC Irvineon April 14th, 2008 at annual meeting of American Association forCancer Research in San Diego)。DFM0即依氟鳥氨酸的一個明顯的問題是快速的全身清除，因而需要經(jīng)常服藥 或持續(xù)注入以維持體循環(huán)中的治療或預(yù)防濃度(Na-Bangchang K，et. al. Eur. J. Clin. Pharmacol. 2004，60，269-278)。例如，治療非洲錐蟲病或癌癥的化學預(yù)防治療的給藥方案 為100mg/kg DFM0，間隔為6小時，持續(xù)14天；以短時注入或每天3 4次口服的形式給藥。緩釋劑型是解決快速全身清除問題的一個通常的解決方案，這是本領(lǐng)域技術(shù)人員 所熟知的(參見，例如“Remington, s Pharmaceutical Sciences, "Philadelphia College of Pharmacy and Science, 17th Edition，1985)。滲透給藥系統(tǒng)也被認為是緩釋給藥的一 種方法(參見，例如，Verma et al.，Drug Dev. Ind. Pharm.，2000，26，695-708)。DFM0 在通 過大腸時不被吸收。相反，其典型地在小腸內(nèi)，可能是通過氨基酸轉(zhuǎn)運載體機制進行吸收。 常規(guī)的劑型快速通過胃腸道的近端吸收區(qū)域，妨礙了緩釋技術(shù)的成功應(yīng)用。這樣，需要有 效緩釋氟鳥氨酸類似物，以使由于這種藥物的快速全身清除所帶來的給藥頻率的增大最小 化。
一方面，本發(fā)明提供了一種依氟鳥氨酸-NSAID偶合物，其具有新的化學實體，與 現(xiàn)有治療方案相比，所述實體具有若干優(yōu)點。首先，這些依氟鳥氨酸-NSAID偶合物在體內(nèi) 典型地是不穩(wěn)定的，一旦到達體循環(huán)和癌癥細胞，就被酶或化學途徑所切斷，產(chǎn)生相當數(shù)量 的依氟鳥氨酸類似物和NSAID。第二，一旦依氟鳥氨酸-NSAID偶合物被切斷，依氟鳥氨酸類 似物和NSAID，典型地瞄準兩個或多個與癌癥治療有關(guān)的生物學目標。從偶合物中釋放出的 連接基，當給哺乳動物施加與依氟鳥氨酸和NSAID聯(lián)合給藥時相當?shù)膭┝繒r，典型地是非 毒性的。第三，在一些具體實施方案中，與依氟鳥氨酸衍生物連接的NSAID是親脂性的。結(jié) 果，最終的依氟鳥氨酸-NSAID偶合物比母藥NSAID類似物更親水。因此，最終的依氟鳥氨 酸-NSAID偶合物可具有比母藥NSAID衍生物更高的水溶性/溶解速率。II.第二部分NSAIDNSAID是非甾族的消炎藥。除了消炎作用，它們還具有鎮(zhèn)痛、退熱和血小板抑制作 用。它們主要被用于治療伴隨著疼痛和發(fā)炎的慢性關(guān)節(jié)炎和某些軟組織疾病。它們通過抑 制環(huán)氧合酶(環(huán)氧合酶將花生四烯酸轉(zhuǎn)化為環(huán)狀內(nèi)過氧化物一一前列腺素的前體)，從而 阻斷前列腺素的合成起作用。由于對前列腺素合成的抑制作用，它們具有鎮(zhèn)痛、退熱和血小 板抑制作用；其他機理也可能對它們的消炎效果有貢獻。某些NSAID也可能抑制脂肪氧化 酶或磷脂酶 C，或可能調(diào)節(jié) T-細胞功能(AMA Drug Evaluations Annual，1994，pl814_5)。 NSAID的例子包括，但不限于，阿司匹林、醋氯芬酸、阿西美辛、阿氯芬酸，阿莫西普林、氨基 安替比林、阿扎丙宗、貝諾酯、溴芬那酸、膽堿和水楊酸鎂、水楊酸膽堿、塞來昔布、氯非宗、 雙氯芬酸鉀、雙氯芬酸鈉、雙氯芬酸鈉與米索前列醇、雙氟苯水楊酸、曲噁昔康、氯諾昔康、 美洛昔康、替諾昔康、乙柳酰胺、依托度酸、非諾洛芬鈣、菲斯胺、氟比洛芬、氟滅酸、布洛芬、 異丁普生、吲哚洛芬、阿明洛芬、咔洛芬、右旋布洛芬、右旋酮洛芬、芬布芬、氟諾洛芬、吲哚 美辛、酮洛芬、酮咯酸、酮保泰松、洛索洛芬、水楊酸鎂、甲氯芬那酸鈉、安乃近、布他酮、羥保 泰松、非那宗、苯磺唑酮、甲滅酸、美洛昔康、水楊酸甲酯、萘丁美酮、萘普生、萘普生鈉、萘丁 美酮、噁丙嗪、奧沙美辛、保泰松、丙谷美辛、吡羅昔康、吡洛芬、舒洛芬、羅非昔布、雙水楊 酯、水楊酸水楊酯、水楊酰胺、水楊酸鈉、舒林酸、噻洛芬酸、托滅酸、托美汀鈉、伐地考昔或 它們的組合。NSAID包括，但不限于，阿司匹林、布洛芬、吡羅昔康(Reddy et al. ,1990 ；Singh et al.，1994)、吲哚美辛(Nari sawa, 1981)和舒林酸(Piazza etal.，1997 ；Rao et al.， 1995)，在氧化偶氮甲烷(Azoxymethane (AOM))處理的大鼠模型中，能有效抑制結(jié)腸癌 發(fā)生。NSAID還能抑制潛伏有激活的Ki-ras的腫瘤的發(fā)展(Singh and Reddy, 1995) 0 NSAID通過誘導(dǎo)腫瘤細胞中的細胞凋亡，而表現(xiàn)出抑制癌發(fā)生的作用(Bedi et al. , 1995 ； Lupulescu, 1996 ；Piazza et al.，1995 ；Piazza et al.，1997b)。很多研究表明，NSAID具有 化學預(yù)防性質(zhì)，包括誘導(dǎo)細胞凋亡，這就是它們的抑制前列腺素合成的作用(reviewed in DuBois et al. ,1996 ；Lupulescu, 1996 ；Vane and Botting，1997)。但是，最近的研究表明， NSAID可能通過前列腺素依賴性和非依賴性機理而起作用(Alberts et al.，1995 ；Piazza et al.，1997a ；Thompson etal.，1995 ；Hanif，1996)。舒林酸砜化物，NSAID 舒林酸的代謝 產(chǎn)物，缺乏C0X-抑制活性，盡管其能誘導(dǎo)腫瘤細胞中的細胞凋亡(Piazza et al. , 1995 ； Piazza et al. , 1997b)以及在若干嚙齒動物癌發(fā)生模型中能抑制腫瘤的發(fā)展(Thompson et al. , 1995 ；Piazza et al.，1995，1997a)。臨床前和臨床研究表明，NSAID具有降低若干種癌癥發(fā)展風險的好處，所述癌癥包括但不限于，結(jié)直腸癌、乳腺癌和卵巢癌(Cha YI， et. al. Annu Rev Med. 2007 ；58 :239_52)。NSAID所帶來的兩個主要的藥物副作用是其對腸胃(GI)和腎臟的影響。這些影 響是劑量依賴性的，在很多情況下，會足夠嚴重從而有潰瘍穿孔、上消化道出血和死亡的風 險，這限制了 NSAID的治療應(yīng)用。據(jù)估計10-20%的NSAID病人經(jīng)歷過消化不良，而且據(jù)估 計，在美國每年與NSAID相關(guān)的上消化道副反應(yīng)事件導(dǎo)致103，000例住院治療和16，500例 死亡，占藥物相關(guān)的急診的43%。NSAID能誘導(dǎo)結(jié)腸腫瘤細胞系和動物組織中的細胞凋亡，也能表現(xiàn)出對腫瘤中的 Ki-ras活化的抑制作用。但是，并沒有研究表明Ki-ras的活化是NSAID介導(dǎo)的細胞毒性 機理。同樣不清楚的是，這種細胞毒性是否依賴于NSAID的消炎性質(zhì)。同樣能抑制Ki-ras 活化的NSAID舒林酸，被代謝成為具有不同的COX抑制能力的兩種不同的分子，盡管二者都 能通過細胞誘導(dǎo)凋亡表現(xiàn)出化學預(yù)防效果。舒林酸砜化物缺乏C0X-抑制活性，最有可能是 以獨立于前列腺素合成的方式，促進細胞的誘導(dǎo)凋亡。確實，若干出版的臨床研究已證實， 無論是單獨采用DFM0，還是與NSAID如舒林酸聯(lián)用，作為化學預(yù)防藥都是有效的(Gerner E. ff. et al. Amino Acids 2007,33(2),189-195 ；Simoneau A.R. et al. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. 2008，17(2)，292—299)。在一些具體實施方案中，本發(fā)明提供了 一種可降低NSAID帶來的副作用、提高依 氟鳥氨酸治療效果的組合物。阿司匹林阿司匹林具有消炎、退熱性質(zhì)，并且能起環(huán)氧合酶抑制劑的作用，從而產(chǎn)生抑制前 列腺素的生物合成的作用。阿司匹林還能抑制血小板聚集，被用于預(yù)防動脈和靜脈血栓形 @ (From Martindale,The Extra Pharmacopoeia, 30th ed，p5) 。H明的_ 口可 司匹林偶合物的一個例子參見實施例1。III.依氟鳥氨酸前藥和依氟鳥氨酸-NSAID偶合物的合成本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠知曉，式(I)-(XIV)具有某些共同的結(jié)構(gòu)特征。這些化合物 是DFM0 (依氟鳥氨酸)類似物，其上連接其他部分的前體或NSAID。
其中，X= -0-，-S- ；Y = -0-，-NH-, _S_ ；本發(fā)明的依氟鳥氨酸前藥或依氟鳥氨酸-NSAID偶合物，可通過示意

圖1-10的合 成方法獲得。本領(lǐng)域技術(shù)人員能知曉，本發(fā)明的依氟鳥氨酸前藥或依氟鳥氨酸-NSAID偶 合物的優(yōu)選合成路徑包括，連接其他部分的前體或NSAID，所述NSAID包括，但不限于，乙 酰水楊酸、雙氟苯水楊酸、乙柳酰胺、菲斯胺、雙氯芬酸、醋氯芬酸、阿西美辛、阿氯芬酸、溴 芬那酸、依托度酸、吲哚美辛、萘丁美酮、奧沙美辛、丙谷美辛、舒林酸、托美汀、布洛芬、阿 明洛芬、咔洛芬、右旋布洛芬、右旋酮洛芬、芬布芬、非諾洛芬、氟諾普洛芬(flunoprofen)、 氟比洛芬、異丁普生、吲哚洛芬、酮洛芬、酮咯酸、洛索洛芬、萘普生、噁丙嗪、吡洛芬、舒洛 芬、噻洛芬酸、甲滅酸、氟滅酸、甲氯芬那酸、托滅酸、坡洛昔康(poroxicam)、氯諾昔康、 美洛昔康、替諾昔康。依氟鳥氨酸的若干合成方法在現(xiàn)有技術(shù)中已有描述(參見，例如 Osipov, S.N.et al. Tetrahedron Lett. 1997，38，5965-5966 ;US Patent No. 6，730，809)。 本領(lǐng)域的合成依氟鳥氨酸的其他方法，對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言也是很容易獲得的。本 發(fā)明所述的各部分的前體或NSAID與依氟鳥氨酸的連接，在本領(lǐng)域是已知的，可通過已 知的步驟制備。將各部分的前體引入或含有眾多官能團(例如，羧基，羥基，酮基，巰 基，胺基，酰胺基，磺酰胺基)的NSAID連接到依氟鳥氨酸上，已描述在規(guī)定的操作程序 中(參見，例如 Greenet al.，“Protective Groups in Organic Chemistry，，，(Wiley, 2nd ed. 1991) ；Harrison et al.，“Compendium of Synthetic Organic Methods，，， Vols. 1-8 (John Wiley and Sons，1971-1996) ；“Beilstein Handbook ofOrganic Chemistry，，，Beilstein Institute of Organic Chemistry, Frankfurt, Germany ；Feiser et al. ,"Reagents for Organic Synthesis, "Volumes 1-17,Wiley Interscience ；Trost et al.，“ComprehensiveOrganic Synthesis，，，Pergamon Press，1991 ；“Theilheimer' s SyntheticMethods of Organic Chemistry, ” Volumes 1-45, Karger，1991 ；March， “Advanced Organic Chemistry，，，Wiley Interscience，1991 ；Larock “Comprehensive Organic Transformations，，，VCH Publishers，1989 ；Paquette，"Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis,，，JohnWiley&Sons，1995，Bodanzsky, “Principles of Peptide Synthesis,，，Springer Verlag，1984 ；Bodanzsky, "Practice of Peptide Synthesis,，，Springer Verlag, 1984)。
根據(jù)具體情況，用于制備本發(fā)明的化合物的起始物質(zhì)和中間體是商業(yè)上可獲得 的，或者可通過公知的合成方法制備。本發(fā)明中的合成所述前藥或依氟鳥氨酸-NSAID偶合 物的方法或者已描述在現(xiàn)有技術(shù)中，或者本領(lǐng)域技術(shù)人員在參考上文提供的引用文獻后， 很容易知曉并用來制備本發(fā)明的依氟鳥氨酸前藥或依氟鳥氨酸-NSAID偶合物。因此，本發(fā) 明示意圖中描述的方法只是示意性的，并不是全面的。在下文的任意一個示意圖中，在依氟鳥氨酸的氨基與NSAID或其他保護基團連接 之后，羧基可通過很多合成方法，被轉(zhuǎn)化為酯基或硫酯基，這對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是已知 的。第二個氨基也可通過合成方法，被轉(zhuǎn)化為酰胺基或氨基甲酸酯基衍生物，這對本領(lǐng)域技 術(shù)人員而言是已知的。在一個優(yōu)選的具體實施方案中，依氟鳥氨酸可在偶合劑(例如，碳二 亞胺和二甲氨基吡啶)存在下，與醇或硫醇反應(yīng)，以制備酯或硫酯。在另一個優(yōu)選的具體 實施方案中，依氟鳥氨酸可在堿的存在下，與烷基鹵反應(yīng)，以制備酯。本領(lǐng)域技術(shù)人員在參 考本發(fā)明所提供的引用文獻的基礎(chǔ)上，很容易知曉將依氟鳥氨酸轉(zhuǎn)化為酯或硫酯的其他方 法。示意圖1 圖中 coupling agent =f禹聯(lián)齊[J Base =石JU如示意圖1所示，含有羧基或其他部分的前體或含有羧基的NSAID可直接偶合到 依氟鳥氨酸衍生物(1)或(2)的端氨基上，得到加成物(3)或(4)。用于這種反應(yīng)的試劑對 本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是熟知的，包括但不限于，碳二亞胺、銨鹽和鱗鹽。另外，羧酸的反應(yīng)可通過形成酰氯、酸酐而加以活化，然后將依氟鳥氨酸衍生物(1)或(2)在堿(如，氫氧化物、 叔胺等)的存在下，用于合成⑶或(4)。示意圖2 imidazolyl = —，4_nitrophenoxy =石肖base =石JU如示意圖2所示，用各種碳酸衍生物(可由NSAID類似物衍生而來)在堿(如，氫 氧化物、叔胺等)的作用下，將依氟鳥氨酸衍生物⑴或⑵轉(zhuǎn)化為氨基甲酸酯(5)和(9)。 另外，可采用公知的醇與異氰酸酯(6)和(10)或硫代異氰酸酯(7)和(11)的加成反應(yīng)來 合成這些類似物。示意圖3 示意圖3所示意的是合成式(13)或(15)的依氟鳥氨酸-NSAID偶合物或依氟鳥氨 酸前藥的一種方法。首先用氨基離去基團如對硝基苯酚，在堿的存在下，處理氯甲酸酯，以 制備對硝基苯基碳酸酯，然后在碘化鈉和堿(叔胺、Cs2C03、Ag2C03)的存在下，與羧酸反應(yīng) (可為衍生自NSAID的羧酸)，制備化合物(13)。在堿的存在下，用依氟鳥氨酸衍生物(1) 或(2)處理中間體(13)，得到依氟鳥氨酸-NSAID偶合物或依氟鳥氨酸前藥(14)或(15)。示意圖4 示意圖4所示的是，依氟鳥氨酸-NSAID偶合物或依氟鳥氨酸前藥(17)或(19)的 合成。首先用依氟鳥氨酸類似物⑴或(2)，在堿的存在下，處理氯甲酸酯，制備中間體(16) 或(18)，然后與醇，特別是如具有酚部分的，在碘化鈉和堿的存在下反應(yīng)，制備最終的依氟 鳥氨酸-NSAID偶合物或依氟鳥氨酸前藥(17)或(19)。示意圖5 示意圖6所示的是合成依氟鳥氨酸-NSAID偶合物或依氟鳥氨酸前藥(26)或 (28)。氯甲酸酯(或衍生自NSAID的其他活性氨基甲酸酯或碳酸酯)在堿的存心下，與 a_羥基烷基乙酸酯反應(yīng)，得到碳酸酯或氨基甲酸酯。然后將所述酯解保護，得到中間體 (25)。化合物(25)與鹵素取代的碳酸酯在堿和碘化鈉的存在下反應(yīng)，得到化合物(26)。然 后化合物(26)在堿性環(huán)境下與依氟鳥氨酸類似物(1)或(2)偶合，得到最終的化合物(26) 或(28)。示意圖7 0 圖中，d印rotection =解除保護。示意圖7所示的是，依氟鳥氨酸-NSAID偶合物或依氟鳥氨酸前藥(29)或(30)的 合成。氯甲酸酯(或其他活性氨基甲酸酯或碳酸酯)與a-羥基烷基乙酸酯在堿性環(huán)境下 反應(yīng)，然后除去酯基，得到化合物(25)?；衔?25)然后與依氟鳥氨酸類似物(1)或(2) 偶合，得到最終的化合物(29)或(30)。示意圖8 示意圖10所示的是，依氟鳥氨酸的亞胺前藥或依氟鳥氨酸-NSAID偶合物可通過 將酮或酮相當物與依氟鳥氨酸衍生物(1)或(2)在脫水環(huán)境下，用任選的4A分子篩進行反 應(yīng)而合成。連接基在本發(fā)明中，所述第一部分與第二部分共價連接。在一些具體實施方案中，這兩部 分是通過連接基連接的?？捎糜诒景l(fā)明的連接基包括，但不限于下面這些 生理學上的不穩(wěn)定連接可為在接近生理流體如血漿的生理條件下，不穩(wěn)定的任何 適當?shù)倪B接基。所述連接基可為直接鍵(如，酰胺基、酯基、碳酸酯基、氨基甲酸酯基、酰 氧基氨基甲酸酯基、磺酸酯基或氨基磺酸酯基連接)、或可為連接基團(如C1-C12 二醇、 C1-C12羥基鏈烷酸、C1-C12羥基烷基胺、C1-C12 二酸、C1-C12氨基酸、或C1-C12 二胺)。特 別優(yōu)選的連接基是酰胺基、酯基、碳酸酯基、氨基甲酸酯基和氨基磺酸酯的直接連接基；以 及通過琥珀酸、水楊酸、二甘醇酸、含氧酸(oxa acids)、氧亞甲基(oxamethylene)和它們 的鹵化物進行的連接。所述連接在生理條件下(通常意味著PH值為約6 約8)是不穩(wěn)定 的。這種連接的不穩(wěn)定性取決于連接所用的特定類型的連接、生理流體的精確PH值和離子 強度、和能催化體內(nèi)水解反應(yīng)的酶的存在與否。一般地，所述連接在體內(nèi)的不穩(wěn)定性，相對 于沒有溶于生理流體的化合物的穩(wěn)定的連接，是可以測量的。這樣，盡管本發(fā)明的一些化合 物在某些生理流體中相對穩(wěn)定，但是與它們?yōu)榧兊男问交蛉苡诜巧砹黧w(如非水性溶劑 如丙酮)中相比，它們在體內(nèi)(或體外，當溶于生理流體中，自然發(fā)生或進行模擬)相對容 易水解。因而，所述不穩(wěn)定的連接為這樣的連接，當藥物溶解在水性溶劑時，特別是生理流 體如血漿中，反應(yīng)被驅(qū)動以得到水解產(chǎn)物。盡管上文所述的二酸、二醇、氨基酸等是適當?shù)倪B接基，其他連接基也包含在本發(fā) 明之內(nèi)。例如，盡管本發(fā)明的化合物的水解產(chǎn)物可含有二酸，用于形成連接基實際試劑可為，例如二酰鹵(如琥珀酰氯)、或酸酐(如琥珀酸酐或二甘醇酸酐)。本領(lǐng)域技術(shù)人員會 認識到其他可能的酸、純、胺、硫酸根合和氨磺酰衍生物也可被用作制備相應(yīng)的連接基的試 劑。IV.本發(fā)明的藥物組合物本發(fā)明的另一個方面涉及含有依氟鳥氨酸-NSAID偶合物或所述偶合物與其他藥 劑的混合物的藥物組合物的劑型、給藥途徑和有效劑量。本發(fā)明的化合物可以藥物劑型的形式給藥，所述劑型包括那些適于口腔(包括口 含和舌下)、直腸、鼻部、局部、透皮貼劑、肺部、陰道、栓劑、或非腸道(包括肌內(nèi)、動脈內(nèi)、 鞘內(nèi)、皮內(nèi)、腹膜內(nèi)、皮下和靜脈內(nèi))給藥的劑型，或者是以適于霧化、吸入或吹入給藥的 劑型。給藥系統(tǒng)的一般信息可參見 Ansel et al. , Pharmaceut ical Dosage Forms and Drug Delivery Systems (Lippencott ffilliams&ffilkins, Baltimore Md. (199)。所述組 合物是按照公知的配方技術(shù)制備的。制備本發(fā)明的組合物的詳細的指導(dǎo)可參考第18和 19 版 Remington' s Pharmaceutical Sciences,由 Mack Publishing Co.出版，Easton, Pa. 18040，其全部內(nèi)容以引用方式納入本發(fā)明。本發(fā)明中采用了單劑量或多劑量，每種劑量在特定的臨床設(shè)定中都具有優(yōu)點。單 劑量可含有經(jīng)過計算，以在癌癥的治療方案中產(chǎn)生預(yù)期效果的預(yù)定量的活性化合物。當需 要采用多種單劑量、或分劑量以取得預(yù)期結(jié)果時，多劑量形式特別有用。這兩種劑量形式的 規(guī)格由如下因素直接支配或取決于這些因素特定的依氟鳥氨酸-NSAID偶合物的獨特性 質(zhì)、期望取得的特定的治療效果、以及在制備用于癌癥治療的特定的藥物偶合物的現(xiàn)有技 術(shù)中所固有的限制。單劑量含有治療有效量的劑量，足以治療患者的癌癥，可含有約1 lOOOrng藥物 偶合物，優(yōu)選為約5 500mg。在一些具體實施方案中，本發(fā)明優(yōu)選的組合物被制成用于口腔給藥的適當?shù)膭?型——可吞咽片劑、口腔片、膠囊、囊片、酏劑、混懸劑、糖漿、口含片、薄片、錠劑等。在一些 具體實施方案中，所述口腔劑型是片劑或膠囊?？梢圆捎靡延械臉藴实膭┬椭苽浼夹g(shù)，使所 述化合物的性質(zhì)與提供的賦形劑匹配，以制備適當?shù)慕M合物，從而得到適當?shù)膭┬?。在某?具體實施方案中，片劑或膠囊可含有約5 約500mg式(I)、(II)和(III)的藥物偶合物。
所述劑型可對所述化合物快速給藥，或者延緩給藥。所述化合物可封裝在硬或軟 膠囊中，可被壓縮成片劑，或者可被放入飲料、食物或飲食中。一般地，含有本發(fā)明的依氟鳥氨酸-NSAID偶合物的濃度水平為約0. 5 %，約5 %，約10 %，約20 %，或約30 %至約50 %， 約60%，約70%，約80%或約90%，基于口腔劑型的組合物的重量，其用量足以提供期望的 單劑量。本發(fā)明的優(yōu)選的組合物是這樣制備的，以使口腔單劑量劑型在劑量單位重量中含 有約5 約50wt%，為5 lOOOmg。在一些具體實施方案中，本發(fā)明的化合物可非腸道給藥(如，靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下 或腹膜內(nèi))。載體或賦形劑或賦形劑混合物可為溶劑或分散介質(zhì)，含有，例如，各種極性或非 極性溶劑、它們適當?shù)幕旌衔锘蛴?。所述化合物或它們藥學上可接受的鹽可單獨提供，或者 與一種或多種其他藥劑或一種或多種其他劑型聯(lián)用的形式提供。例如，劑型可以以特定的 比例含有一種或多種藥劑，這取決于各藥劑的相對效價和預(yù)定的適應(yīng)癥。例如，在用于瞄準 兩個不同宿主目標的組合物中，并且效價相近，可采用約1 1的藥物。這兩種形式可一起 以相同的劑量單位配制例如，于同一乳劑、栓劑、片劑、膠囊、氣溶膠噴霧、或用于溶解在飲 料中的粉末包中；或者每種形式可以以分開的單位配制，例如，于兩種乳劑、兩種栓劑、兩種 片劑、兩種膠囊、一種片劑和用于溶解所述片劑的液體、兩種氣溶膠噴霧、或粉末包和用于 溶解所述粉末的液體等。典型的藥物可接受的鹽是那些無機離子，諸如鈉、鉀、鈣、鎂離子等。這些鹽包括與 無機或有機酸的鹽，如鹽酸、溴酸、磷酸、硝酸、硫酸、甲磺酸、對甲苯磺酸、乙酸、富馬酸、琥 珀酸、乳酸、扁桃酸、蘋果酸、檸檬酸、酒石酸或馬來酸。另外，如果藥劑中含有羧基或其他酸 性基團，所述藥劑用無機或有機堿反應(yīng)而轉(zhuǎn)化成的藥學上可接受的加成鹽。適當?shù)膲A的離 子包括，但不限于，氫氧化鈉、氫氧化鉀、氨、環(huán)己胺、二環(huán)己基胺、乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇 胺等。藥學上可接受的酯或酰胺包括，但不限于，乙基、甲基、異丁基、乙二醇等。典型的 酰胺包括，但不限于，未取代的酰胺、烷基酰胺、二烷基酰胺等。在一些具體實施方案中，當被局部給藥或在特定的疼痛部位或附近給藥時，含有 本發(fā)明的依氟鳥氨酸-NSAID偶合物的藥物組合物產(chǎn)生局部和區(qū)域效果。直接的局部應(yīng)用， 例如粘性液體、溶液、混懸液、二甲亞砜(DMS0)-堿溶液、脂質(zhì)體劑型、凝膠、凍膠、乳劑、洗 劑、軟膏劑、栓劑、泡沫或氣溶膠噴霧可用于局部給藥，以產(chǎn)生例如局部/區(qū)域效果。這些劑 型的藥學上適當?shù)馁x形劑包括，例如，低級脂肪醇、聚二醇(如丙三醇或聚乙二醇)、脂肪酸 酯、油、脂肪、有機硅樹脂等。這些制劑也可含有防腐劑(如對羥基苯甲酸酯)和/或抗氧 化齊U (如抗壞血酸禾口生育酷)。也可參見Dermatological Formulations percutaneous absorption, Barry(Ed.), Marcel Dekker Incl，1983。本發(fā)明的組合物可為適于局部應(yīng)用的劑型，包括但不限于水性、水-醇或油性溶 液，洗劑或血清分散液，水性、無水或油性凝膠，將脂肪相分散在水相(0/W或水包油)或相 反(W/0或油包水)而得到的乳液，微乳液或微膠囊、微?；螂x子和/或非離子型的脂囊泡 分散體。這些組合物可用通常的方法制備。在配制皮膚軟膏中，本發(fā)明的依氟鳥氨酸-NSAID 偶合物可在油質(zhì)烴基質(zhì)、無水吸收基質(zhì)、油包水吸收基質(zhì)、水可除去的水包油基質(zhì)和/或水 溶性基質(zhì)中進行。這些載體和賦形劑的例子包括，但不限于，潤濕劑(如脲)、二醇(如丙 二醇)、醇(如乙醇)、脂肪酸(如油酸)、表面活性劑(如肉豆蔻酸異丙酯和十二烷基硫 酸鈉)、吡咯烷酮、甘油單月桂酸酯、亞砜、萜烯(如薄荷醇)、胺、酰胺、鏈烷、鏈烷醇、水、碳 酸鈣、磷酸鈣、各種糖、淀粉、纖維素衍生物、明膠和聚合物如聚乙二醇。用于藥劑給藥的透皮貼劑的結(jié)構(gòu)和應(yīng)用，是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的，參見，例如U. S. Pat. Nos. 5，023，252， 4，992，445and5, 001，139。當本發(fā)明的依氟鳥氨酸-NSAID偶合物是酸性的時，其可包括自由酸、藥學上可接 受的鹽、溶劑化物或水合物形式的任何上述劑型。能充分保持自由酸活性的藥學上可接受 的鹽，可通過與堿反應(yīng)進行制備，并且表現(xiàn)出比自由酸形式更易溶于水性和其他質(zhì)子溶劑。含有本發(fā)明的依氟鳥氨酸-NSAID偶合物的藥物組合物可通過通常的混合、溶解、 造粒、糖衣丸制造、研磨、乳化、微囊化、包埋或凍干工藝制備。V.治療方法一方面，本發(fā)明提供了癌癥的治療和預(yù)防方法，向需要的患者施加治療有效量的 本發(fā)明的化合物或藥物組合物。在一些具體實施方案中，本發(fā)明的化合物包括第一部分和 第二部分，所述第一部分與第二部分共價連接，所述第一部分是依氟鳥氨酸或依氟鳥氨酸 的類似物或衍生物，所述第二部分是NSAID。另一方面，本發(fā)明提供了一種治療癌癥的方法，施加式(IV)或(V)的化合物，即依 氟鳥氨酸前藥。在一個優(yōu)選的具體實施方案中，依氟鳥氨酸前藥通過口腔給藥，被施加給患 者，優(yōu)選為人。在一些具體實施方案中，所述依氟鳥氨酸前藥是單獨給藥的。在其他具體實 施方案中，所述依氟鳥氨酸前藥與本發(fā)明公開的NSAID聯(lián)合給藥。NSAID可在式(IV)或(V) 的化合物給藥之前、同時或之后給藥
(IV)(V)合適的患者可為，例如人、非人類靈長類動物(包括但不限于，大猩猩、黑猩猩、猩 猩或猴子)、嚙齒動物(包括但不限于，小鼠、大鼠、豚鼠或沙鼠)、狗、貓、馬、牛、豬、綿羊、兔 子或山羊。患者優(yōu)選為哺乳動物，最優(yōu)選為人。在一些具體實施方案中，本發(fā)明的依氟鳥氨酸-NSAID偶合物和/或藥物組合物被 施加給哺乳動物，優(yōu)選為人，以治療各種癌癥。 本發(fā)明的依氟鳥氨酸-NSAID偶合物和/或組合物可單獨給藥，或與一種或多種藥 學活性物質(zhì)(包括但不限于本發(fā)明所述的其他化合物)聯(lián)合給藥。本發(fā)明的依氟鳥氨酸-NSAID偶合物和/或其組合物優(yōu)選通過口腔給藥。依氟鳥 氨酸-NSAID偶合物/或其組合物還可通過任何非腸道的途徑給藥，例如注入或彈丸注射、 通過上皮或皮膚粘膜系的吸收(如口腔粘膜、直腸和腸粘膜等)。給藥可為全身給藥或局部 給藥。各種公知的給藥系統(tǒng)都可用于依氟鳥氨酸-NSAID偶合物和/或其組合物的給藥，例 如，脂質(zhì)體封裝、微粒、微膠囊、膠囊等。給藥方法包括，但不限于，皮內(nèi)、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、靜脈 內(nèi)、皮下、鼻內(nèi)、硬膜外、口腔、舌下、腦內(nèi)、陰道內(nèi)、透皮、直腸、吸入，局部地、特別地施加給 耳、鼻、眼或皮膚，如上文第IV部分所描述的那樣。在一些優(yōu)選的具體實施方案中，緩釋劑型按第IV部分所描述的那樣使用。系統(tǒng)
28通過將依氟鳥氨酸-NSAID偶合物納入(incorporating)、包封、圍繞(surrounding)或包 埋在脂囊泡或脂質(zhì)體之中或之上，或被其或微膠束所納入、包封、圍繞或包埋，對依氟鳥氨 酸-NSAID偶合物進行抑制。附有脂質(zhì)體的前藥可優(yōu)選插入脂肪的?；溨g。本發(fā)明的依氟鳥氨酸-NSAID偶合物可被化學和/或酶所切斷。哺乳動物的胃、腸 腔、腸組織、血液、肝臟、腦或其他適當?shù)慕M織中存在的一種或多種酶可酶切斷所述依氟鳥 氨酸-NSAID偶合物的連接基。依氟鳥氨酸-NSAID偶合物的切斷機理可能是本領(lǐng)域已知的， 或者未知的、或者對相關(guān)領(lǐng)域而言是新的。依氟鳥氨酸-NSAID偶合物的連接基可在被胃腸 道吸收之前或被胃腸道吸收之后(如在哺乳動物的腸組織、血液、肝臟或其他適當?shù)慕M織 中)被切斷。如果依氟鳥氨酸-NSAID偶合物的連接基在被腸胃道吸收之前被切斷，藥劑和 依氟鳥氨酸類似物可被通常的主動轉(zhuǎn)運和/或被動擴散吸收進入體循環(huán)中。鍾適于用在本發(fā)明中的藥物組合物包括活性成分是以有效量存在的組合物，所述有 效量即在癌癥或至少一種癌癥癥狀的宿主中能獲得治療和/或預(yù)防效果的有效的含量。特 定應(yīng)用的實際有效量依賴于治療的癥狀，患者的健康狀況，痛苦的嚴重性，劑型和給藥途 徑，以及本領(lǐng)域技術(shù)人員所知的其他因素。可任選進行體內(nèi)或體外化驗，這有助于確定最佳 劑量范圍?？紤]到本發(fā)明所公開的內(nèi)容，依氟鳥氨酸-NSAID偶合物的有效量的確定在本領(lǐng) 域技術(shù)人員的能力所及范圍之內(nèi)，可用常規(guī)優(yōu)化方法確定。用于人的有效量可由動物模型確定。例如，人的劑量可由循環(huán)系統(tǒng)、肝臟、局部和 /或胃腸地濃度為在動物中發(fā)現(xiàn)為有效的濃度而確定。依氟鳥氨酸-NSAID偶合物優(yōu)選在 至少一種動物模型中進行測試，以證實其安全性和有效性。在一些具體實施方案中，本發(fā)明 的依氟鳥氨酸-NSAID偶合物的治療有效劑量，與單獨化合物給藥或兩種母體化合物的混 合劑型相比，盡管能提供協(xié)同增效，但是能在不導(dǎo)致實質(zhì)上的毒性的前提下取得治療效果。 依氟鳥氨酸-NSAID偶合物的毒性可采用標準藥物方法確定，而且很容易由本領(lǐng)域技術(shù)人 員確定。中毒劑量和治療劑量的比為治療指數(shù)。在一些具體實施方案中，與它們的母體化 合物相比，在治療本發(fā)明所提及的癌癥中，依氟鳥氨酸-NSAID偶合物表現(xiàn)出更高的治療指 數(shù)。依氟鳥氨酸-NSAID偶合物的劑量處于循環(huán)系統(tǒng)濃度(circulating concentration) 的范圍之內(nèi)，就會產(chǎn)生很小或沒有毒性。本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠確定人使用的有效量，特別是 在考慮到本發(fā)明所描述的動物模型試驗之后。基于動物數(shù)據(jù)，以及其他類似數(shù)據(jù)，本領(lǐng)域技 術(shù)人員能夠確定本發(fā)明的組合物適于人的有效劑量。VI.使用方法A.聯(lián)合治療在本發(fā)明的某些具體實施方案中，本發(fā)明的依氟鳥氨酸-NSAID偶合物可與至少 一種其他藥劑一起，被用于聯(lián)合治療中。本發(fā)明的依氟鳥氨酸-NSAID偶合物和藥劑的作用 可累加或者更優(yōu)選為協(xié)同增效。聯(lián)合治療包括將本發(fā)明的偶合物和至少一種第二藥劑作為一個治療方案的一部 分給藥，以獲得這些藥劑共同作用后得到的效果。聯(lián)合治療的有益效果包括，但不限于，由 這些藥劑的組合獲得的藥代動力學或藥效學的共同結(jié)果。這些藥劑的聯(lián)合給藥典型地是在 確定的時間段內(nèi)進行的(通常是分鐘，小時，天或周，這取決于所選擇的組合)。聯(lián)合治療可 順序進行或?qū)嵸|(zhì)上同時進行。在大于一種藥劑的順序給藥的情況下，每種藥劑是在不同的
29時間給藥的。在同時給藥的情況下，在相同的藥物組合物中或者是在不同的藥物組合物中 的至少兩種藥劑是在實質(zhì)上同時給藥的。實質(zhì)上同時給藥可通過，例如，對患者施加具有每 種藥劑的固定配比的單個膠囊，或者每種藥劑具有單個膠囊的多個膠囊。在一個優(yōu)選的具 體實施方案中，含有本發(fā)明的依氟鳥氨酸-NSAID偶合物的組合物是與其他藥劑同時給藥 的，所述其他藥劑其可能是與本發(fā)明的依氟鳥氨酸-NSAID偶合物相同組合物的一部分，或 者是不同的組合物的一部分。在另一個具體實施方案中，含有本發(fā)明的依氟鳥氨酸-NSAID 偶合物的組合物是在其他藥劑給藥之前、或隨后給藥的。每種藥劑的順序或?qū)嵸|(zhì)上同時給藥受到適當?shù)慕o藥途徑的影響，所述途徑包括， 但不限于，口腔途徑、靜脈內(nèi)途徑、肌內(nèi)途徑和粘膜組織的直接吸收。藥劑可以以相同的途 徑或不同的途徑給藥。例如，聯(lián)合給藥的第一藥劑可通過靜脈注射給藥，而聯(lián)合給藥的其他 藥劑可通過口腔給藥。另外，例如，所有藥劑都可通過口腔給藥，或所有藥劑都可通過靜脈 注射給藥。藥劑的給藥順序沒有嚴格的限制。聯(lián)合治療還包括將上述依氟鳥氨酸-NSAID偶合物的給藥進一步與其他治療方法 相結(jié)合，所述其他治療方法包括，但不限于外科手術(shù)、放射治療、基因治療、免疫療法、RNA治 療、輔助治療、納米治療或它們的組合。當聯(lián)合治療另外包括非藥物治療時，所述非藥物治 療可在任何適當?shù)臅r間進行，只要能從藥劑和非藥物治療的聯(lián)合治療中獲得有益效果。例 如，在適當?shù)那闆r下，當非藥物治療與藥劑的給藥間隔相當長的時間時，仍然能取得有益效 果。所述偶合物和其他藥學活性物質(zhì)可同時、順序或聯(lián)合施加給患者。當采用本發(fā)明的組 合時，本發(fā)明的化合物和其他藥學活性物質(zhì)可處于相同的藥學上可接收的載體中，從而能 同時給藥，這是所希望的。它們也可處于分開的載體中，如常規(guī)的口腔劑型，然后被同時給 藥。術(shù)語“聯(lián)合”還指化合物是以分開的劑型提供，順序給藥的情況?；瘜W預(yù)防劑某些藥劑可被用于預(yù)防癌癥的初始發(fā)生、或防止復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移。這種化學預(yù)防劑和 本發(fā)明的依氟鳥氨酸-NSAID偶合物的聯(lián)合給藥既能起到治療癌癥的作用，也能起到預(yù)防 癌癥復(fù)發(fā)的作用。適用于本發(fā)明的化學預(yù)防劑的例子包括，但不限于，他莫西芬、雷洛西芬、 替勃龍、二磷酸鹽、伊班膦酸鹽、雌激素受體調(diào)節(jié)劑、芳香酶抑制劑(來曲唑、阿那曲唑)、黃 體生成素釋放激素激動劑、戈舍瑞林、維生素A、視黃醛、視黃酸、芬維A胺、9-cis-視黃酸、 13-cis-視黃酸、全反式視黃酸、異維甲酸、維他命A酸、維生素B6、維生素B12、維生素C、維 生素D、維生素E、環(huán)氧合酶抑制劑、非留族消炎藥(NSAIDs)、阿司匹林、布洛芬、塞來昔布、 多酚、多酚E、綠茶提取物、葉酸、葡糖二酸、α干擾素、anethole dithiolethione、鋅、吡哆 醇、非那雄胺、多沙唑嗪、硒、吲哚-3-甲醛、α-二氟甲基鳥氨酸、類胡蘿卜素、β-胡羅卜 素、番茄紅素、抗氧化劑、輔酶Q10、類黃酮、槲皮黃酮、姜黃素、兒茶素、表沒食子兒茶素沒食 子酸酯、N-乙?；腚装彼?、吲哚-3-甲醇、六磷酸肌醇、異黃酮、葡萄糖酸、迷迭香、大豆、 鋸櫚和鈣。適合用于本發(fā)明的化學預(yù)防劑的其他例子是癌癥疫苗。這些疫苗可通過采用經(jīng) 過免疫方法處理的全部或部分癌細胞，使病人產(chǎn)生免疫反應(yīng)而產(chǎn)生。B.副作用的降低和療效的提高另一方面，本發(fā)明還提供了一種降低癌癥治療所帶來的副作用和/或提高療效的 方法，所述癌癥治療是向需要的患者施加治療有效量的依氟鳥氨酸-NSAID偶合物或其藥 物組合物。
30
本發(fā)明所述的毒性和療效可用標準的藥學方法在試驗動物上測定，如測定被試化 合物的IC50和LD50 (在被測試的動物中導(dǎo)致50%的死亡的致命劑量)。在一些具體實施方案中，本發(fā)明的化合物降低了由于各種癌癥治療方案所帶來的 不希望的副作用的發(fā)生，所述副作用包括，但不限于，聽力損傷、頭暈、眩暈、血小板減少癥、 腹瀉、惡心、嘔吐、虛弱、疲勞、低血細胞數(shù)量、頭發(fā)脫落、胃口差、發(fā)燒、體重減輕、總體活動 能力的下降、膀胱炎、便秘、呼吸短促、失眠、咳嗽、頭痛、脫水、寒戰(zhàn)、皮疹、腸胃氣脹、臉紅、 口腔潰瘍、胃痛、腫脹和發(fā)炎。下文的實施例的目的應(yīng)當理解為是說明性的，而不是限制性的。在閱讀上文的描 述之后，許多具體實施方案對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。因此，本發(fā)明的范圍不應(yīng) 當是參照上文的描述和下文的實施例所確定的，而是應(yīng)當參照所附的權(quán)利要求書、以及與 這些權(quán)利要求所要求范圍的等同的所有范圍后確定的。實施例實施例1 依氟鳥氨酸_阿司匹林偶合物的合成本發(fā)明提供了一種合成依氟鳥氨酸-NSAID偶合物的方法。下面所示的實施例一 般性地描述了依氟鳥氨酸類似物-NSAID偶合物的合成，更具體地說是依氟鳥氨酸_阿司匹 林偶合物的合成。 實施例2 依氟鳥氨酸前藥的合成本實施例一般性地提供了依氟鳥氨酸前藥的制備方法，更具體的說是氨基磷酸酯 前藥。 實施例3 依氟鳥氨酸偶合物或依氟鳥氨酸前藥的Caco-2細胞滲透性的體外測試本發(fā)明的依氟鳥氨酸-NSAID偶合物或依氟鳥氨酸前藥的被動滲透性是在體外進 行的，采用本領(lǐng)域公知的方法(參見，例如，Stewart，et al.，Pharm. Res.，1995，12，693)。例 如，被動滲透性是透過測試依氟鳥氨酸-NSAID偶合物或依氟鳥氨酸前藥通過經(jīng)過培養(yǎng)的 極化的細胞單層膜(如Caco-2細胞)的通量而測定。經(jīng)過連續(xù)培養(yǎng)(低于28代)獲得的 Caco-2細胞以高濃度傳至Transwell聚碳酸酯濾網(wǎng)上。細胞被保存在DMEM/10%胎牛血清 +0. ImM非必需氨基酸+2mM L-Gln, 5% C02/95% 02，37°C，直至試驗?zāi)翘臁B透性研究是在 PH 為 6. 5 的頂部(在 50mM 含有 ImM CaC12、lmM MgC12、150mMNaCl、3mM KClUmM NaH2P04、 5mM葡萄糖的MES緩沖液中)和pH為7. 4的基底外側(cè)(在含有IOmM HEPES的Hanks，平衡 鹽溶液中)，在外排泵抑制劑(250μΜ MK-571，250uM異搏定，ImM氧氟沙星)的存在下進行 的。插入板被放置在含有緩沖液的12或24孔板中，在37°C下培養(yǎng)30分鐘。在頂部或基底 外側(cè)小室(給體)加入偶合物藥劑或前藥(200 μ Μ)，每隔1小時，采用LC/MS/MS測量相對 的小室(受體)中的偶合物藥劑或前藥和/或釋放的母藥的濃度。用下式計算表觀滲透率 (Papp)的值 Papp = Vr (dC/dt) / (ACo)其中Vr是受體小室的體積，mL ；dC/dt是依氟鳥氨酸-NSAID偶合物或前藥和母藥 的總通量(μ M/s)，由受體小室中的濃度與時間曲線的斜率確定；Co是依氟鳥氨酸-NSAID 偶合物的初始濃度，μM;A是膜的表面積，Cm2。優(yōu)選地，依氟鳥氨酸-NSAID偶合物具有顯 著的穿細胞滲透性，Papp of ^ lxl0-6cm/s更優(yōu)選地，Papp of ^ lxl0_5cm/s，進一步優(yōu)選 地，Papp of 彡 5xl0-5cm/so實施例4:化學穩(wěn)定性為了進行化學穩(wěn)定性研究，配制了 pH 2.0(采用0. IM磷酸鉀和0. 5MNaCl)，pH 7.4 和pH 8. 0 (采用0. IM Tri s-HCl和0. 5M NaCl)的緩沖液?；衔?5 μ Μ)用緩沖液在37°C 下培養(yǎng)1小時，溫度由HPLC自動取樣器控制。在加入0和1小時之后，注入試樣。試樣用 LC/MS/MS分析，如下文所述。實施例5:代謝穩(wěn)定性血漿穩(wěn)定性將化合物(5μΜ)在90%的大鼠或人血漿中，在37°C下培養(yǎng)1小時。 在加入零和1小時之后取樣，并立即用甲醇淬滅，以防止進一步轉(zhuǎn)化。分析前，淬滅的試樣 被冷凍，并保存在-80°C下。試樣用LC/MS/MS分析，如下文所述。
肝勻漿將化合物(5μΜ)在大鼠或人肝臟S9中，在0.5mg蛋白質(zhì)/mL下，在存在 ImM NADPH, pH 7. 4和37°C下，培養(yǎng)1小時。在加入零和1小時之后取樣，并立即用甲醇淬 滅，以防止進一步轉(zhuǎn)化。分析前，淬滅的試樣被冷凍，并保存在-80°C下。試樣用LC/MS/MS 分析，如下文所述。Caco-2細胞勻漿Cac0-2細胞在燒瓶中生長21天。然后細胞被清洗/刮入冰冷 的PH值為7. 4的IOmM磷酸鈉/0. 15M氯化鉀中。細胞在4oC下用探頭超聲波破碎儀進行 超聲溶解，在4°C，9，OOOx g下離心分離20分鐘，得到的上清液(Caco-2細胞勻漿S9成分) 等分試樣被轉(zhuǎn)移至0. 5mL的小瓶中，在使用之前保存在-80°C下。為了進行穩(wěn)定性研究，將 化合物(5μΜ)用Caco-2S9(0. 5mg蛋白質(zhì)/mL)，在pH 7. 4和37°C下培養(yǎng)1小時。在加入 零和1小時之后取樣，并立即用甲醇淬滅，以防止進一步轉(zhuǎn)化。分析前，淬滅的試樣被冷凍， 并保存在-80°C下。試樣用LC/MS/MS分析，如下文所述。胰酶將化合物(5 μ Μ)在豬胰酶(10mg/mL，在pH 7.5的緩沖液中)中，在37°C 下培養(yǎng)1小時。在加入零和1小時之后取樣，并立即用甲醇淬滅，以防止進一步轉(zhuǎn)化。分析 前，淬滅的試樣被冷凍，并保存在-80°C下。試樣用LC/MS/MS分析，如下文所述。偶合物藥劑或前藥在不同物種中的代謝將偶合物藥劑(ΙΟμΜ)在來自大鼠、狗、 猴子和人的血漿、腸S9、肺S9、肝S9和腎S9中，在37oC下培養(yǎng)1小時。所有的制劑都應(yīng)當 含有Img蛋白質(zhì)/mL。在加入零和1小時之后取樣，并立即用甲醇淬滅，以防止進一步轉(zhuǎn)化。 分析前，淬滅的試樣被冷凍，并保存在-80°C下。試樣用LC/MS/MS分析，如下文所述。計算 每種基體中，偶合物藥劑轉(zhuǎn)化為母藥的速率pmol/min/mg蛋白質(zhì)。實施例6 在依氟鳥氨酸、NSAID、依氟鳥氨酸-NSAID偶合物和依氟鳥氨酸前藥對 大鼠給藥之后，依氟鳥氨酸類似物和偶合的NSAID的攝入在6-24小時內(nèi)緩慢釋放藥劑的口腔緩釋劑型，一般在結(jié)腸中釋放出相當部分的 劑量。這樣，適用于這種劑型的藥劑優(yōu)選具有好的結(jié)腸吸收性。本試驗是為了評估依氟鳥 氨酸-NSAID偶合物是否適用于口腔緩釋劑型。步驟A 給藥方案大鼠由商購獲得，并在上行結(jié)腸和頸靜脈中預(yù)先插入導(dǎo)管。在試驗時，動物應(yīng)當 是有意識的。所有的動物都被拴住一夜，直至給藥4小時后。研究的化合物以溶液的形 式(在水中或其他溶劑中如PEG 400)，以所期望的劑量，直接通過導(dǎo)管進入結(jié)腸給藥。每 隔8小時，由頸部導(dǎo)管獲得血樣(0. 5mL)，然后立即加入乙腈/甲醇淬滅，以防止依氟鳥氨 酸-NSAID偶合物或依氟鳥氨酸前藥的進一步轉(zhuǎn)化血液的分析參見下文。步驟B 結(jié)腸吸收藥劑試樣制備在空的1. 5mL印pendorf試管中，加入300 μ L的50/50乙腈/甲醇和20 μ L的對
氯苯丙氨酸，作為內(nèi)標。1.在不同的時間點采集大鼠血液，立即將100 μ L血液加入印pendorf試管中，旋 轉(zhuǎn)混合。2.將 10 μ L 的依氟鳥氨酸或 NSAID 標準溶液(0. 04、0. 2、1、5、25、100 μ g/mL)加入 90 μ L的空白大鼠血液中，制得最終校準用基準(0. 004,0. 02、0· 1、0· 5、2· 5、10 μ g/mL)。然 后在每個試管中加入300 μ L的50/50乙腈/甲醇，再加入20 μ L的對氯苯丙氨酸。3.旋轉(zhuǎn)試樣，在14，OOOrpm下離心分離10分鐘。
4.取出上清液，用LC/MS/MS分析。步驟C :LC/MS/MS 分析在分析中，采用裝有IOADVp雙泵和CTC HTS-PAL自動取樣器的LC/MS/MS光譜儀。 在分析過程中，將選擇的柱加熱到45°C。移動相可為不同的溶劑混合物，如0. 的甲酸 (A)和含有0. 的甲酸的乙腈(B)。梯度條件可根據(jù)所分析的化合物而改變。在LC/MS/MS 上可采用TurboIonSpray源如API 2000。所述分析可在陽離子和陰離子模式下進行，MRM 檢測可根據(jù)所分析的化合物加以選擇。注入20 μ L的試樣。峰可用Analyst 1. 1定量分析 軟件求積分。在這些依氟鳥氨酸-NSAID偶合物或前藥的結(jié)腸給藥之后，將依氟鳥氨酸和 NSAID的最大血漿濃度(Cmax)，以及依氟鳥氨酸和NSAID的血漿濃度與時間的曲線(AUC) 下的面積與母藥進行比較。期望的偶合物或前藥應(yīng)該比依氟鳥氨酸和NSAID各自具有較高 的依氟鳥氨酸和NSAID的Cmax，以及較大的AUC值。該數(shù)據(jù)證明本發(fā)明的化合物可被配制 組合物，該組合物具有提高的吸收性和/或?qū)σ婪B氨酸和選擇的NSAID具有有效的緩釋 作用，以使由于依氟鳥氨酸的快速全身清除所導(dǎo)致的服藥頻率最小化。實施例7 ,ttimmmkmm^ A^mtUAmmmmm^m NSAID am 代動力學向4只雄性獼猴，施加水溶液形式的依氟鳥氨酸-NSAID偶合物水溶液，給藥是將 期望劑量的通過靜脈內(nèi)的彈丸注射進入隱靜脈血管。在給藥后，間隔超過24小時，從所有 的動物中取血樣。血液立即在4°C下處理成血漿。所有的血漿試樣隨后采用上文所述的LC/ MS/MS法分析依氟鳥氨酸或NSAID。^MM 8 ^^g^MiiaK^ii^Mii -NSAID {^mmmmmmmm^
氟鳥氨酸或偶合的NSAID的攝入對4只雄性獼猴，施加期望劑量的水溶液形式或混懸劑形式的依氟鳥氨酸、NSAID 和依氟鳥氨酸-NSAID偶合物，給藥是通過留置的插管進行彈丸注射，直接進入結(jié)腸。對于 結(jié)腸給藥，將柔性的法制導(dǎo)管插入每只猴子的直腸，然后采用熒光鏡檢查延伸至近側(cè)結(jié)腸 (約16英寸)。在給藥過程中，對猴子施加Telazol/氯胺酮，使其輕微鎮(zhèn)定。在兩次治療 之間，可以有至少5 7天的清除期。給藥之后，間隔超過24小時，取血樣，并且立即淬滅， 在4°C下處理成血漿。采用上文所述的LC/MS/MS法分析所所有血樣的依氟鳥氨酸、NSAID 和未變化的依氟鳥氨酸-NSAID偶合物。依氟鳥氨酸-NSAID偶合物的結(jié)腸給藥之后，依氟 鳥氨酸和NSAID的最大血漿濃度(Cmax)，以及依氟鳥氨酸和NSAID的血漿濃度與時間的曲 線(AUC)下的面積，遠遠大于依氟鳥氨酸自身單獨對結(jié)腸給藥后的值。該數(shù)據(jù)證明這些依 氟鳥氨酸-NSAID偶合物可被配制組合物，該組合物具有提高的吸收性和/或?qū)σ婪B氨酸 具有有效的緩釋作用，以使由于依氟鳥氨酸的快速全身清除所導(dǎo)致的服藥頻率最小化。實施例9 依氟鳥氨酸-NSAID偶合物對獼猴講行口腔給藥之后依氟鳥氨酸和偶合 的NSAID的攝入對4只雄性獼猴，分別施加水溶液形式或混懸劑形式的依氟鳥氨酸-NSAID偶合 物，給藥是通過口腔管飼法進行的。給藥之后，間隔超過24小時，取血樣，并且立即淬滅，在 4°C下處理成血漿。采用上文所述的LC/MS/MS法分析所有血樣的依氟鳥氨酸、NSAID和未 變化的依氟鳥氨酸-NSAID偶合物。盡管本發(fā)明的優(yōu)選具體實施方案已在本文中加以描述了，但是對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，很明顯，這些具體實施方案僅僅是以示例的形式提供的。對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，在 不偏離本發(fā)明的前提下，可以進行各種改變、變化和替換。應(yīng)當認為，對本發(fā)明所述的具體 實施方案的各種改變也能實施本發(fā)明。下面的權(quán)利來要求書的目的是限定本發(fā)明的范圍， 其覆蓋了這些權(quán)利要求范圍之內(nèi)的方法和結(jié)構(gòu)以及它們的等同物。
權(quán)利要求
一種用于治療癌癥的化合物，所述化合物含有第一部分和第二部分，所述第一部分與第二部分共價連接，所述第一部分是依氟鳥氨酸或依氟鳥氨酸的類似物或衍生物，所述第二部分是非甾族消炎藥NSAID。
2.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中第一部分是依氟鳥氨酸。
3.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中第二部分選自由阿司匹林、醋氯芬酸、阿西美辛、 阿氯芬酸、阿莫西普林、氨基安替比林、阿扎丙宗、貝諾酯、溴芬那酸、膽堿和水楊酸鎂、水楊 酸膽堿、塞來昔布、氯非宗、雙氯芬酸鉀、雙氯芬酸鈉、雙氯芬酸鈉與米索前列醇、雙氟苯水 楊酸、曲噁昔康、氯諾昔康、美洛昔康、替諾昔康、乙柳酰胺、依托度酸、非諾洛芬鈣、菲斯胺、 氟比洛芬、氟滅酸、布洛芬、異丁普生、吲哚洛芬、阿明洛芬、咔洛芬、右旋布洛芬、右旋酮洛 芬、芬布芬、氟諾洛芬、吲哚美辛、酮洛芬、酮咯酸、酮保泰松、洛索洛芬、水楊酸鎂、甲氯芬那 酸鈉、安乃近、布他酮、羥保泰松、非那宗、苯磺唑酮、甲滅酸、美洛昔康、水楊酸甲酯、萘丁美 酮、萘普生、萘普生鈉、萘丁美酮、噁丙嗪、奧沙美辛、保泰松、丙谷美辛、吡羅昔康、吡洛芬、 舒洛芬、羅非昔布、雙水楊酯、水楊酸水楊酯、水楊酰胺、水楊酸鈉、舒林酸、噻洛芬酸、托滅 酸、托美汀鈉和伐地考昔組成的組。
4.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中NSAID是舒林酸。
5.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中NSAID是阿司匹林。
6.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中第一部分和第二部分是通過選自由酯鍵、酰胺鍵、 亞胺鍵、氨基甲酸酯鍵、碳酸酯鍵、硫酯鍵、酰氧基氨基甲酸酯鍵、酰氧基碳酸酯鍵、酰氧基 硫代氨基甲酸酯鍵、磷酸酯鍵、氨基磷酸酯鍵和酰氧基磷酸酯鍵的組的共價鍵連接的。
7.如權(quán)利要求1所述的化合物，進一步包括將第一部分和第二部分共價連接的連接基。
8.如權(quán)利要求7所述的化合物，其中所述連接基是生理學上不穩(wěn)定的。
9.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中所述癌癥是腎上腺皮質(zhì)癌、肛門癌、再生障礙性 貧血、膽管癌、膀胱癌、骨癌、骨轉(zhuǎn)移、腦癌、中樞神經(jīng)系統(tǒng)癌、周圍神經(jīng)系統(tǒng)癌、乳腺癌、宮頸 癌、兒童非霍奇金淋巴瘤、結(jié)腸和直腸癌、子宮內(nèi)膜癌、食道癌、尤文腫瘤族、眼癌、膽囊癌、 胃腸道類癌、胃腸道間質(zhì)瘤、妊娠滋養(yǎng)細胞腫瘤、毛細胞白血病、霍奇金淋巴瘤、卡波氏肉 瘤、腎癌、喉和下咽癌、急性淋巴細胞白血病、急性髓系白血病、兒童白血病、慢性淋巴細胞 白血病、慢性髓系白血病、肝癌、肺癌、肺類癌、非霍奇金淋巴瘤、男性乳腺癌、惡性間皮瘤、 多發(fā)性骨髓瘤、骨髓增生異常綜合征、骨髓增殖性疾病、鼻腔和副鼻竇癌、鼻咽癌、成神經(jīng)細 胞瘤、口腔和口咽癌、骨肉瘤、卵巢癌、胰腺癌、陰莖癌、垂體瘤、前列腺癌、視網(wǎng)膜母細胞瘤、 橫紋肌肉瘤、唾液管癌癥、肉瘤、黑素性皮膚癌、非黑素性皮膚癌、胃癌、睪丸癌、胸腺癌、甲 狀腺癌、子宮癌、移行細胞癌、睪丸鞘膜癌、外陰癌、間皮瘤、鱗狀細胞或表皮樣癌、支氣管腺 瘤、絨毛膜上皮癌、頭脖癌、畸胎癌或原發(fā)性巨球蛋白血癥。
10.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中所述癌癥是Ki-ras依賴性癌癥。
11.如權(quán)利要求1所述的化合物，進一步包括離子或共價連接到所述化合物的第一部 分或第二部分上的第三部分。
12.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中所述化合物可與至少一種其他藥劑聯(lián)用。
13.如權(quán)利要求12所述的化合物，其中所述其他藥劑是抗癌烷基化劑、抗癌代謝拮抗 劑、抗癌抗生素、來源于植物的抗癌藥劑、抗癌有機鉬化物、抗癌喜樹堿衍生物、抗癌酪胺酸激活酶抑制劑、單克隆抗體、干擾素、生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑、荷爾蒙抗腫瘤藥劑、血管生成抑制 劑、促分化藥物或其藥學上可接受的鹽。
14.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中所述化合物可與外科手術(shù)、放射治療、化學療法、 基因治療、RNA核糖核酸治療、輔助治療、免疫療法、納米治療或其組合聯(lián)用。
15.一種用于治療或預(yù)防癌癥的藥物組合物，包括權(quán)利要求1所述的化合物和藥學上 可接受的載體。
16.一種治療或預(yù)防癌癥的方法，所述方法包括向需要的患者施加治療有效量的化合 物，所述化合物包括第一部分和第二部分，所述第一部分與第二部分共價連接，所述第一部 分依氟鳥氨酸或依氟鳥氨酸的類似物或衍生物，所述第二部分是非留族消炎藥NSAID。
17.如權(quán)利要求16所述的方法，其中所述化合物可與外科手術(shù)、放射治療、化學療法、 基因治療、RNA核糖核酸治療、輔助治療、免疫療法、納米治療或它們的組合聯(lián)合給藥。
18.如權(quán)利要求16所述的方法，其中所述患者是人。
19.如權(quán)利要求16所述的方法，其中所述化合物是口腔給藥的。
20.如權(quán)利要求16所述的方法，其中所述化合物或藥物組合物的給藥，與各部分單獨 給藥相比，要減少至少一種副作用。
21.如權(quán)利要求16所述的方法，其中所述化合物或藥物組合物的給藥，與各部分單獨 給藥相比，能提高治療活性。
22.式(IV)或(V)的化合物或其藥學上可接受的鹽OOH H2N7VF唧F(IV)R23(V)。
23.如權(quán)利要求22所述的化合物，其中氨基磷酸酯基在體內(nèi)被切斷。
24.如權(quán)利要求22所述的化合物，進一步包括藥學上可接受的載體。
25.治療或預(yù)防癌癥的方法，所述方法包括向需要的患者施加藥學有效量的式(IV)或 (V)的化合物或其藥學上可接受的鹽。OοH H2N Vf唧 TfFR23F(IV)(V)
26.如權(quán)利要求25所述的方法，其中所述化合物是口腔給藥的。
27.如權(quán)利要求25所述的方法，其中所述化合物是非腸道給藥的。
28.如權(quán)利要求25所述的方法，其中所述化合物與NSAID聯(lián)合給藥。
29.如權(quán)利要求28所述的方法，其中NSAID是舒林酸。
30.如權(quán)利要求28所述的方法，其中NSAID是阿司匹林。
31.如權(quán)利要求25所述的方法，其中所述患者是人。
32.如權(quán)利要求25所述的方法，其中所述癌癥是腎上腺皮質(zhì)癌、肛門癌、再生障礙性 貧血、膽管癌、膀胱癌、骨癌、骨轉(zhuǎn)移、腦癌、中樞神經(jīng)系統(tǒng)癌、周圍神經(jīng)系統(tǒng)癌、乳腺癌、宮頸3癌、兒童非霍奇金淋巴瘤、結(jié)腸和直腸癌、子宮內(nèi)膜癌、食道癌、尤文腫瘤族、眼癌、膽囊癌、 胃腸道類癌、胃腸道間質(zhì)瘤、妊娠滋養(yǎng)細胞腫瘤、毛細胞白血病、霍奇金淋巴瘤、卡波氏肉 瘤、腎癌、喉和下咽癌、急性淋巴細胞白血病、急性髓系白血病、兒童白血病、慢性淋巴細胞 白血病、慢性髓系白血病、肝癌、肺癌、肺類癌、非霍奇金淋巴瘤、男性乳腺癌、惡性間皮瘤、 多發(fā)性骨髓瘤、骨髓增生異常綜合征、骨髓增殖性疾病、鼻腔和副鼻竇癌、鼻咽癌、成神經(jīng)細 胞瘤、口腔和口咽癌、骨肉瘤、卵巢癌、胰腺癌、陰莖癌、垂體瘤、前列腺癌、視網(wǎng)膜母細胞瘤、 橫紋肌肉瘤、唾液管癌癥、肉瘤、黑素性皮膚癌、非黑素性皮膚癌、胃癌、睪丸癌、胸腺癌、甲 狀腺癌、子宮癌、移行細胞癌、睪丸鞘膜癌、外陰癌、間皮瘤、鱗狀細胞或表皮樣癌、支氣管腺 瘤、絨毛膜上皮癌、頭脖癌、畸胎癌或原發(fā)性巨球蛋白血癥。
全文摘要
一方面，本發(fā)明提供了一種依氟鳥氨酸類似物與消炎藥的共價偶合物的組合物。另一方面，本發(fā)明提供了一種依氟鳥氨酸前藥組合物。另一方面，本發(fā)明提供了用依氟鳥氨酸類似物的偶合物或依氟鳥氨酸前藥治療或預(yù)防癌癥的方法。
文檔編號C07C271/22GK101898978SQ20091014365
公開日2010年12月1日 申請日期2009年5月31日 優(yōu)先權(quán)日2009年5月31日
發(fā)明者徐鋒 申請人:徐鋒