專利名稱：用作組織蛋白酶s抑制劑的化合物和組合物的制作方法
本申請是申請日為2005年8月16日、申請?zhí)枮?00580034401.8、發(fā)明名稱為“用作組織蛋白酶S抑制劑的化合物和組合物”的中國發(fā)明專利申請的分案申請。
本發(fā)明涉及新的2-氰基嘧啶衍生物、它們的制備、它們作為藥物的用途、含有它們的藥物組合物、這類化合物在制備用于治療疼痛的藥物中的用途以及治療溫血動物、尤其是人的這類疾患的方法。
令人驚訝的是，已發(fā)現(xiàn)本文所描述的2-氰基嘧啶衍生物具有有利的藥理學(xué)特性并抑制例如組織蛋白酶S的活性。式I的2-氰基嘧啶衍生物因此適合用于治療其中組織蛋白酶S活性抑制引起有益效果的疾病。
式I的2-氰基嘧啶衍生物特別適合于治療和預(yù)防神經(jīng)病變性疼痛(neuropathic pain)和以下所提及的其他疾病。
因此，本發(fā)明涉及式I的2-氰基嘧啶，
其中R1表示式Ia基團(tuán)
其中A、E和G彼此獨立地代表O、S或CH2，條件是A和E的至少一個代表CH2； 如果G是CH2，則T是O、S或鍵，如果G是O或S，則T是鍵； Ra、Rb和Rc彼此獨立地代表氫或C1-C4烷基； s是0、1或2，t是1、2、3或4，p是0、1或2； R2表示鹵素、C1-C4烷基、未取代或取代的芳基、5或6元雜環(huán)基、-C(O)NR4R5、-NHC(O)R4或-CH2NHC(O)R4，其中 R4代表 (a)C1-C7烷基，其未被取代或被以下基團(tuán)取代鹵素；氨基，其被C3-C5環(huán)烷基或C1-C6烷基單取代或二取代，后者在每種情況下未被取代或被鹵素單、二或三取代；包含至少一個氮原子的未取代或取代的C4-C8-脂族雜環(huán)基；未取代或取代的芳基；未取代或取代的雜芳基；未取代或取代的螺[4.5]癸烷，其包含1或2個選自氧、氮和硫的雜原子；未取代或取代的C3-C6環(huán)烷基；或1-氮雜-(C5-C8)雙環(huán)烷基； (b)未取代或取代的N-(C1-C4烷基)哌啶基或N-(C4-C6環(huán)烷基)哌啶基； (c)未取代或取代的芳基； (d)未取代或取代的C3-C6環(huán)烷基；或 (e)含有一個氮原子的未取代或取代的5或6元雜芳基；且 R5代表氫或C1-C4烷基；或 R4和R5與它們所連接的氮一起代表包含至少一個氮原子的未取代或取代的C4-C8-脂族雜環(huán)基；或 R2表示-N(R9)SO2R10， R9代表氫或C1-C4烷基；且 R10代表C1-C4烷基，其未被取代或被芳基取代；或 R9和R10一起構(gòu)成基團(tuán)-(CRR′)m-，其中m是2且包括2至5且包括5的整數(shù)，且R和R′均彼此獨立地代表氫或C1-C4烷基； R3表示氫、鹵素、苯基、未被取代或被鹵素單、二或三取代的吡啶基、Y-R6或NR7R8，其中 Y代表O、CH2、S、SO、SO2或NRN，其中RN表示氫或未被取代或被C1-C4烷氧基取代的C1-C4烷基； R6代表C1-C6烷基、苯基、五或六元含氮雜芳基-(CH2)q-，其中q是0至4的整數(shù)，或五或六元脂族雜環(huán)基-(CH2)n-，其中n是0至4的整數(shù)且雜環(huán)基部分包含至少一個環(huán)氮原子，該基團(tuán)在每種情況下可以未被取代或被取代； R7和R8與它們所連接的氮一起代表未取代或取代的五或六元脂族雜環(huán)基，其中雜環(huán)基部分包含至少一個氮原子； X表示O、HN、C1-C4烷基-N、S、SO、SO2、其中g(shù)是1或2的O(CH2)gNH、其中h是1或2的(CH2)h或未被取代或被鹵素、C1-C4烷基或C1-C4烷氧基單、二或三取代的芳基； 及這類2-氰基嘧啶的鹽和互變異構(gòu)體。
上下文所使用的通用術(shù)語優(yōu)選在本公開范圍內(nèi)具有以下含義，另有指示除外。
若對化合物、鹽等使用復(fù)數(shù)，則意味著也指單數(shù)化合物、鹽等。
鹵素或鹵代尤其是氟、氯、溴或碘，尤其是氟、氯或溴。
烷基尤其是具有1且包括1至7且包括7、優(yōu)選1且包括1至4且包括4個碳原子的烷基，且為直鏈或支鏈的；優(yōu)選地，烷基是甲基、乙基、丙基如正丙基或異丙基、丁基如正丁基、仲丁基、異丁基或叔丁基。
烷氧基尤其是甲氧基、乙氧基或丙氧基。
環(huán)烷基尤其是C3-C6環(huán)烷基，即環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基或環(huán)己基。
包含至少一個氮原子的脂族雜環(huán)基尤其是五或六元雜環(huán)基，具有一個環(huán)氮原子和任選另外1或2個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子，其可以是全飽和或部分飽和的，優(yōu)選咪唑烷基、吡咯烷基、哌啶基、嗎啉基、硫嗎啉基或哌嗪基，且該基團(tuán)可以未被取代或被取代。
在未取代或取代的芳基中，芳基優(yōu)選是具有6至14個環(huán)碳原子的單、二或三環(huán)芳族烴基，尤其是苯基、萘基或芴基，更優(yōu)選苯基。
本文所用的雜芳基尤其是噻吩基、吡咯基、呋喃基、噁唑基、異噁唑基、異噻唑基、噻唑基、吡唑基、咪唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基，更優(yōu)選噻吩基、呋喃基、吡啶基和吡唑基。
除非另外提及，本文所用術(shù)語“未取代或取代的”意指相關(guān)基團(tuán)未被取代或被一個或多個、優(yōu)選至多4個、尤其是1或2個選自以下的取代基取代氧代、氨基、C1-C4烷基氨基、二(C1-C4烷基)-氨基、羥基-C1-C4烷基氨基、苯基-C1-C4烷基氨基、C3-C5環(huán)烷基氨基、二(C3-C5)環(huán)烷基氨基、N-C1-C4烷基-N-C3-C5環(huán)烷基氨基、C1-C4烷?；被Ⅺu素、羥基、C1-C4烷氧基、未取代或取代的C3-C6環(huán)烷基、C3-C5環(huán)烷氧基、C1-C4烷氧基C1-C4烷氧基、二(C1-C4烷基)-氨基C1-C4烷氧基、氨甲?；-C1-C4烷基-氨甲?；?、N，N-二(C1-C4烷基)-氨甲?；?、硝基、氰基、羧基、C1-C4烷氧基羰基、C1-C4烷?；?、C1-C4烷酰氧基、苯甲?；?、脒基、胍基、脲基、巰基、C1-C4烷硫基、吡啶基、C1-C4烷基吡啶基、苯基、未取代或取代的苯基、苯氧基、C1-C4烷氧基苯基、苯硫基、苯基-C1-C4烷硫基、C1-C4烷基磺?；⒈交酋；1-C4烷基苯基磺?；1-C4鏈烯基、未取代或取代的C4-C8雜環(huán)基例如C5-C7氧雜環(huán)烷基或C5-C7二氧雜環(huán)烷基、未取代或取代的C4-C8雜環(huán)氧基例如四氫吡喃氧基、未取代或取代的C4-C8雜環(huán)基C1-C4烷氧基、鍵合在相鄰環(huán)C原子的C1-C4亞烷二氧基，及C1-C4烷基，其未被取代或被以下基團(tuán)取代鹵素、羥基、C1-C4烷氧基、硝基、亞氨基、氰基、羧基、C1-C4烷氧基羰基、C1-C4烷酰基、C1-C4烷酰氧基或未取代或取代的C4-C8雜環(huán)基。
鑒于新化合物的游離形式和它們的鹽形式、包括可用作例如純化和鑒別新化合物的中間體的那些鹽形式之間的密切關(guān)系，上下文中任何對游離化合物的稱謂應(yīng)理解為也酌情涉及相應(yīng)的鹽。
鹽例如作為酸加成鹽優(yōu)選用有機(jī)或無機(jī)酸自具有堿性氮原子的式I化合物形成，尤其是可藥用鹽。出于分離或純化目的，也可能使用藥學(xué)不可接受的鹽，例如苦味酸鹽或高氯酸鹽。對于治療應(yīng)用，僅使用可藥用鹽或游離化合物(適用時為藥物制劑形式)，因此這些鹽是優(yōu)選的。
式I化合物在哺乳動物中顯示有價值的藥理學(xué)特性，特別可用作組織蛋白酶S抑制劑。式I化合物的組織蛋白酶S抑制效果可在體外通過測量例如重組人組織蛋白酶S的抑制作用(體外組織蛋白酶S測定法)得到證實。
該體外測定法在透明、平底96孔微量滴定板(Greiner GmbH，德國)中、于環(huán)境溫度、使用重組人組織蛋白酶S進(jìn)行。人組織蛋白酶S的抑制作用在恒定的酶和各種底物(底物為Z-Leu-Leu-4-甲基香豆素基-7-酰胺(Bachem(瑞士))濃度下測試，所述酶和底物處于100份含有2mM EDTA的0.2M磷酸鈉溶液pH 7.0、2份1％Triton X-100、10份20mM二硫蘇糖醇(DTT)和58份蒸餾水中。向含有各種濃度的相應(yīng)底物和化合物的反應(yīng)混合物中加入酶溶液(濃度較重組人組織蛋白酶S的終濃度高13倍)以開始測定。所使用的底物濃度為3.4至17μM。所使用的組織蛋白酶S終濃度為0.04nM。所使用的供試化合物濃度為所確定的化合物對酶的IC50的0.4至2倍。連續(xù)測定相對熒光達(dá)30分鐘，由各個步進(jìn)曲線獲得初始速度。通過Dixon plot分析確定抑制模式和Ki值。
一般而言，式I化合物抑制人組織蛋白酶S的IC50低于約350nM至約1nM或更低，優(yōu)選約50nM或更低。
鑒于式I化合物作為組織蛋白酶S抑制劑的活性，它們特別可用作治療和預(yù)防哺乳動物中涉及組織蛋白酶S水平升高的疾病和醫(yī)學(xué)病癥的活性劑。這類疾病包括慢性神經(jīng)病變性疼痛，例如病癥如糖尿病性神經(jīng)病、帶狀皰疹后神經(jīng)痛、三叉神經(jīng)痛、致疼痛糖尿病性多發(fā)性神經(jīng)病、中風(fēng)后疼痛(中樞疼痛)、截肢后疼痛、脊髓病或神經(jīng)根病疼痛(例如錐管狹窄、蛛網(wǎng)膜炎、神經(jīng)根套膜纖維變性)、非典型顏面痛(atypical facial pain)和灼痛樣綜合征(causalgia-like syndrome)(復(fù)雜性區(qū)域疼痛綜合征)。
組織蛋白酶S存在于抗原呈遞細(xì)胞中，在涉及抗原呈遞的事件中扮演重要角色。在這方面，組織蛋白酶S抑制劑可以是有用的活性劑，用于預(yù)防、抑制或治療免疫和自身免疫疾病，包括但不限于哮喘、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、銀屑病和局限性回腸炎，并用于預(yù)防、抑制或治療組織移植排斥。
此外，組織蛋白酶S可由一些抗原呈遞細(xì)胞分泌，由此在細(xì)胞外基質(zhì)相互作用中扮演角色。因此，組織蛋白酶S抑制劑可以是有用的活性劑，用于預(yù)防、抑制或治療具有可能的炎性成分的神經(jīng)變性疾病、阿爾茨海默病、多發(fā)性硬化、帕金森病、亨庭頓舞蹈病、運動神經(jīng)元疾病、肌萎縮側(cè)索硬化(ALS)、HIV神經(jīng)病、糖尿病性神經(jīng)病、吉-巴綜合征、CIPD(慢性炎性脫髓鞘性多發(fā)性神經(jīng)根神經(jīng)病)、其他脫髓鞘性疾病、腦膜炎、腦/脊髓創(chuàng)傷、中風(fēng)、精神分裂癥。
組織蛋白酶S抑制劑可以是有用的活性劑，用于預(yù)防、抑制或治療涉及細(xì)胞外蛋白水解的各種其他疾病，如慢性阻塞性肺病中氣腫的發(fā)生、動脈粥樣硬化、再狹窄和腫瘤細(xì)胞侵襲。
組織蛋白酶存在于炎性細(xì)胞中，組織蛋白酶S抑制劑可以是有用的活性劑化合物，用于治療克-雅病、間質(zhì)性膀胱炎、炎性腸病和脈管炎性障礙(vasculitic disorder)。
于如下所述且本領(lǐng)域熟知的體外和體內(nèi)藥理實驗中評價有益效果。以上所述性質(zhì)可在體外和體內(nèi)實驗中證實，有利地使用哺乳動物例如大鼠、小鼠、狗、兔、猴或離體器官和組織以及天然或例如通過重組技術(shù)制備的哺乳動物酶制品進(jìn)行。式I化合物可以以溶液形式、例如優(yōu)選水溶液或懸液于體外應(yīng)用，經(jīng)腸或胃腸外、有利地口服、例如作為懸液或水溶液或作為固體膠囊或片劑制劑于體內(nèi)應(yīng)用。體外劑量可為約10-5至10-9摩爾濃度。體內(nèi)劑量取決于施用途徑可約0.1至100mg/kg。
式I化合物用于治療慢性炎性或神經(jīng)病變性疼痛的功效可以利用以下體內(nèi)動物模型確定。
慢性炎性疼痛模型 足底注射酵母多糖誘導(dǎo)的機(jī)械痛覺過敏可用作慢性炎性疼痛的模型(Meller等人，Neuropharmacology 331471-1478，1994)。在該模型中，通常使雄性Sprague-Dawley或Wistar大鼠(200-250g)接受一只后爪足底注射3mg/100μl酵母多糖。在該后爪中出現(xiàn)顯著的炎癥。一般而言，在炎性攻擊后24小時，即機(jī)械痛覺過敏被視為完全建立時，施用藥物以評價功效。慢性神經(jīng)病變性疼痛模型 可以使用兩種涉及某些形式外周神經(jīng)損傷的慢性神經(jīng)病變性疼痛動物模型。在Seltzer模型中(Seltzer等人，(1990)Pain 43205-218)，將大鼠麻醉，在一只大腿(通常為左大腿)中線切一小切口，以暴露坐骨神經(jīng)。小心地將神經(jīng)與周圍結(jié)締組織在轉(zhuǎn)子附近、恰在后二頭肌半腱肌神經(jīng)與總坐骨神經(jīng)分叉點遠(yuǎn)端處剝離。用3/8曲形反切小針將7-0絲質(zhì)縫合線插入神經(jīng)，并緊固結(jié)扎，使背部1/3至1/2的神經(jīng)厚度被結(jié)扎線夾持。用縫合線和夾子閉合肌肉和皮膚，傷口撒以抗生素粉。在假手術(shù)動物中暴露坐骨神經(jīng)但不結(jié)扎，如非假手術(shù)動物所述閉合傷口。
在慢性壓迫損傷(CCI)模型中(Bennett，GJ.和Xie，Y.K.Pain(1988)3387-107)，將大鼠麻醉，在一只大腿(通常為左大腿)中線切一小切口，以暴露坐骨神經(jīng)。將神經(jīng)與周圍結(jié)締組織剝離，將四條4/0鉻制結(jié)扎線疏松地系在神經(jīng)周圍，各自間隔約1mm，以使得結(jié)扎線恰好能壓迫神經(jīng)的表面。如上所述用縫合線和夾子閉合傷口。在假手術(shù)動物中，將坐骨神經(jīng)暴露但不結(jié)扎，如非假手術(shù)動物所述閉合傷口。
與Seltzer和CCI模型相對照，Chung模型涉及結(jié)扎脊神經(jīng)(Kim，S.O.和Chung，J.M.Pain(1992)50355-363)。在該模型中，將大鼠麻醉，以臥姿放置，在脊柱L4-S2節(jié)段左側(cè)切口。經(jīng)脊旁肌切開一深口，分離肌肉和L4-S2節(jié)段的脊突，暴露部分坐骨神經(jīng)，其分叉形成L4、L5和L6脊神經(jīng)。用小骨鉗小心除去L6橫突，使得這些脊神經(jīng)能夠顯現(xiàn)出來。分離L5脊神經(jīng)，用7-0絲質(zhì)縫合線緊密結(jié)扎。傷口用一根肌肉縫合線(6-0絲線)和1或2個皮膚閉合夾閉合，撒以抗生素粉末。在假手術(shù)動物中，如前暴露L5神經(jīng)但不結(jié)扎，并如前閉合傷口。
行為指數(shù) 在所有慢性疼痛模型中(炎性和神經(jīng)病變性)，通過使用Analgesymeter(Ugo-Basile，Milan)測量兩只后爪對不斷增加的壓力刺激的爪回縮閾值來評估機(jī)械痛覺過敏。機(jī)械觸摸痛(allodynia)是通過測量對非傷害性機(jī)械刺激的回縮閾值來評估，所述刺激用von Frey hair施加于兩只后爪的足底表面。熱痛覺過敏是通過測量對施加于每只后爪底面的傷害性熱刺激的回縮潛伏期來評估。對于所有模型，機(jī)械痛覺過敏和觸摸痛和熱痛覺過敏在手術(shù)后1-3天形成，持續(xù)至少50天。對于本文所述的測定法，可以在術(shù)前和術(shù)后施用藥物，以評估它們對痛覺過敏形成的效果，尤其是術(shù)后約14天，測定它們逆轉(zhuǎn)既已建立的痛覺過敏的能力。
痛覺過敏的逆轉(zhuǎn)百分比如下計算 ％逆轉(zhuǎn)＝(給藥后閾值-給藥前閾值)/(未試驗閾值-給藥前閾值)×100 在本文所述實驗中，Wistar大鼠(雄性)用于上述疼痛模型中。大鼠在手術(shù)時重約120-140克。所有手術(shù)在恩氟烷/O2吸入麻醉下進(jìn)行。在所有情況下，術(shù)后閉合傷口并使動物恢復(fù)。在所用所有疼痛模型中，除假手術(shù)動物外的所有動物于若干天后出現(xiàn)顯著的機(jī)械和熱痛覺過敏和觸摸痛，其中出現(xiàn)疼痛閾值降低和后爪對觸摸、壓力或熱刺激的反射回縮響應(yīng)增強(qiáng)。手術(shù)后，動物還顯示出所受累爪的特征性改變。在絕大多數(shù)動物中，受累后爪的腳趾保持成團(tuán)且腳略微轉(zhuǎn)向一側(cè)；在一些大鼠中，腳趾還卷曲朝下。結(jié)扎大鼠的步態(tài)各異，但不常見跛行?？梢娨恍┐笫髮⑹芾酆笞幕\底抬起，顯示后肢在把持時的不尋常剛性伸展。大鼠傾向于對觸摸非常敏感并且可能出聲。另外，大鼠的一般健康狀況良好。
本發(fā)明化合物治療骨關(guān)節(jié)炎的功效可利用模型諸如或類似于家兔部分外側(cè)半月板切除術(shù)模型來確定，如先前所述(Colombo等人，Arth.Rheum.199326，875-886)。化合物在該模型中的功效可利用組織學(xué)評分法定量，如先前所述(O′Byrne等人，lnflamm Res 1995，44，S117-S118)。
式I化合物可單獨或與一種或多種其他治療劑聯(lián)合施用，可能的聯(lián)合治療采取固定組合的形式，或交錯施用本發(fā)明化合物和一種或多種其他治療劑，或彼此獨立地給予，或聯(lián)合施用固定組合和一種或多種其他治療劑。對于疼痛的治療而言，包含本文所公開的組織蛋白酶S抑制劑和加巴噴丁、普瑞巴林(pregabalin)、非甾類抗炎藥、COX-2抑制劑、類固醇、三環(huán)類抗抑郁藥、其他抗驚厥藥(例如卡馬西平、拉莫三嗪、奧卡西平)或阿片樣物質(zhì)的具體組合是特別適合的。
本文所用的術(shù)語“阿片樣物質(zhì)”指的是具有嗎啡樣作用的所有天然和合成藥物。適合于本發(fā)明的阿片樣物質(zhì)尤其選自阿芬他尼、烯丙羅定、阿法羅定、阿利尼定、芐嗎啡、苯腈米特、丁丙諾啡、布托啡諾、氯尼他秦、可待因、cyclorphan、去氧嗎啡、右嗎拉米、地佐辛、二苯丙二胺、雙氫可待因、雙氫嗎啡、依他佐辛、乙基嗎啡、芬太尼、二氫可待因酮、氫嗎啡酮、羥哌替啶、左旋苯酰甲嗎喃、左啡烷、羅芬太尼、甲基嗎啡、嗎啡、necomorphine、去甲美沙痛、去甲嗎啡、阿片、羥可待酮、羥嗎啡酮、福爾可定、普羅法多和舒芬太尼。
例如，阿芬他尼可以例如以其市售形式、例如商標(biāo)RapifenTM施用；烯丙羅定可以例如以其市售形式、例如商標(biāo)AlperidineTM施用；阿利尼定可以例如以其市售形式、例如商標(biāo)LeritineTM施用；芐嗎啡可以例如以其市售形式、例如商標(biāo)PeronineTM施用；苯腈米特可以例如以其市售形式、例如商標(biāo)BurgodinTM施用；丁丙諾啡可以例如以其市售形式、例如商標(biāo)BuprenexTM施用；布托啡諾可以例如以其市售形式、例如商標(biāo)TorateTM施用；右嗎拉米可以例如以其市售形式、例如商標(biāo)PalfiumTM施用；地佐辛可以例如以其市售形式、例如商標(biāo)DalganTM施用；雙氫可待因可以例如以其市售形式、例如商標(biāo)NovicodinTM施用；雙氫嗎啡可以例如以其市售形式、例如商標(biāo)ParamorphanTM施用；依他佐辛可以例如以其市售形式、例如商標(biāo)SedapainTM施用；乙基嗎啡可以例如以其市售形式、例如商標(biāo)DioninTM施用；芬太尼可以例如以其市售形式、例如商標(biāo)FentanestTM或LeptanalTM施用；二氫可待因酮可以例如以其市售形式、例如商標(biāo)BekadidTM或CalmodidTM施用；氫嗎啡酮可以例如以其市售形式、例如商標(biāo)NovolaudonTM施用；羥哌替啶可以例如以其市售形式、例如商標(biāo)BemidoneTM施用；左啡烷可以例如以其市售形式、例如商標(biāo)DromoranTM施用；去甲美沙痛可以例如以其市售形式、例如商標(biāo)TicardaTM施用；羥可待酮可以例如以其市售形式、例如商標(biāo)DihydroneTM施用，羥嗎啡酮可以例如以其市售形式、例如商標(biāo)NumorphanTM施用。
在式I中，優(yōu)選獨立、聯(lián)合或以任意組合或亞組合形式的以下含義。
R1表示式(Ia)基團(tuán)
其中A和G均代表O或均代表CH2，E是CH2，T是鍵； Ra、Rb和Rc均代表氫； s是0或1，t是1或2，更優(yōu)選1，p是1； R2優(yōu)選表示-C(O)-NR4R5、-N(R9)-SO2-R10、溴、氯、C1-C4烷基、特別是異丙基、未取代的苯基或含有至少一個氧原子的6元雜環(huán)基； R3優(yōu)選表示氫、Y-R6、NR7R8或C1-C4烷基，更優(yōu)選Y-R6或NR7R8； R4優(yōu)選代表 (a)C1-C7烷基，其未被取代或被以下基團(tuán)取代 氨基，其被C3-C5環(huán)烷基或C1-C6烷基單取代或二取代，后者未被取代或被鹵素三取代； 1-氮雜-(C4-C8)環(huán)烷基，其未被取代或被C1-C4烷基取代； 吡咯烷基，其未被取代或被鹵素、C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基C1-C4烷基或C1-C4烷基氨基取代； 哌啶基，其未被取代或被以下基團(tuán)單或二取代鹵素、吡咯烷基、哌啶基、二(鹵代)哌啶基、(C4-C6)環(huán)烷基或C1-C6烷基，后者未被取代或被羥基或鹵素單取代或二取代； 哌嗪基，其被C1-C4烷基或苯基單取代或二取代； 苯基，其未被取代或被鹵素、嗎啉基、三氟甲基或C1-C4烷氧基單取代或二取代； 鹵素、C3-C5環(huán)烷基、嗎啉基、噻吩基、呋喃基、吡啶基、2-氧雜-6-氮雜-螺[4.5]癸烷或1-氮雜-(C5-C7)雙環(huán)烷基； (b)N-(C1-C4烷基)哌啶基，其被苯基取代； (c)苯基，其被以下基團(tuán)單、二或三取代苯基、C3-C5環(huán)烷氧基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基苯基、二(C1-C4烷基)-氨基C1-C4烷氧基、N-(C1-C4烷基)哌嗪基、N-(C1-C4烷基)哌啶氧基或N-(C1-C4烷基)哌啶基C1-C4烷氧基； (d)C3-C5環(huán)烷基； (e)吡唑基，其被吡啶基或苯基單取代或二取代；或 (f)N-(C1-C6烷基)哌啶基或N-(C4-C6環(huán)烷基)哌啶基，在兩種情況下均被苯基C1-C4烷基取代，其中苯基未被取代或被鹵素單取代； R9優(yōu)選代表氫或C1-C4烷基； R10優(yōu)選代表C1-C4烷基，其未被取代或被苯基取代； X優(yōu)選表示HN、C1-C4烷基-N或O；且 Y優(yōu)選代表O或NH。
在R3中，吡啶基優(yōu)選未被取代或被鹵素、C1-C4烷基或哌嗪基單、二或三取代。
在R4中， ●C1-C7烷基優(yōu)選未被取代或被以下基團(tuán)取代氨基，其被C3-C5環(huán)烷基或C1-C6烷基單或二取代，取代基在每種情況下未被取代或被鹵素單、二或三取代；包含至少一個氮原子的C4-C8-脂族雜環(huán)基，該基團(tuán)未被取代或被以下基團(tuán)單、二或三取代C1-C4烷基、鹵素、C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基C1-C4烷基、C1-C4烷基氨基、苯基、吡咯烷基、哌啶基、二(鹵代)-哌啶基、嗎啉基、C4-C6環(huán)烷基或C1-C6烷基，后者被羥基或鹵素單、二或三取代；或苯基，其未被取代或被鹵素、C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基C1-C4烷基、三氟甲基或C4-C8-脂族雜環(huán)基單、二或三取代；雜芳基，該基團(tuán)未被取代或被以下基團(tuán)單、二或三取代C1-C4烷基、鹵素、C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基C1-C4烷基、C1-C4烷基氨基、苯基、吡咯烷基、哌啶基、二(鹵代)-哌啶基、嗎啉基、C4-C6環(huán)烷基或C1-C6烷基，后者被羥基或鹵素單、二或三取代；螺[4.5]癸烷，其包含1或2個選自氧、氮和硫的雜原子；鹵素、C3-C6環(huán)烷基或1-氮雜-(C5-C8)雙環(huán)烷基； ●N-(C1-C4烷基)哌啶基優(yōu)選被苯基取代； ●苯基優(yōu)選被以下基團(tuán)單、二或三取代苯基、C3-C5環(huán)烷基氧基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基苯基、二(C1-C4烷基)-氨基C1-C4烷氧基、N-(C1-C4烷基)哌嗪基、N-(C1-C4烷基)哌啶基氧基或N-(C1-C4烷基)哌啶基C1-C4烷氧基； ●C3-C6環(huán)烷基優(yōu)選未被取代； ●異噁唑基、咪唑基或吡唑基優(yōu)選未被取代或被吡啶基或苯基單或二取代；和 ●N-(C1-C6烷基)哌啶基或N-(C4-C6環(huán)烷基)哌啶基優(yōu)選被苯基C1-C4烷基取代，其中苯基未被取代或被鹵素單、二或三取代； 如果R4和R5與它們所連接的氮一起代表吡咯烷基或哌啶基，該基團(tuán)優(yōu)選未被取代或被羥基、C1-C4烷氧基或C1-C4烷基單、二或三取代。
在R6中，C1-C6烷基優(yōu)選未被取代或被以下基團(tuán)單、二或三取代吡啶基、C1-C4烷基吡啶基、咪唑基、C1-C4烷基咪唑基、苯基、羥基苯基、羥基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基羰基、羥基C1-C4烷基氨基、C1-C4烷基-氨基、二-(C1-C4烷基)-氨基、C1-C4烷?；?氨基、苯基-C1-C4烷基氨基、C1-C4烷硫基、嗎啉基、嗎啉基羰基、2-氧代-咪唑烷基、2-氧代-吡咯烷基、C5-C7環(huán)烷基-氨基、C3-C5環(huán)烷基、氨基-C4-C7環(huán)烷基、羥基-C4-C7環(huán)烷基、四氫吡喃基-氧基、N-(C1-C4烷基)哌嗪基、氧雜-C5-C6環(huán)烷基、二氧雜-C5-C7環(huán)烷基，或哌啶基，其未被取代或被鹵素、尤其氟、羥基、亞氨基-C1-C4烷基、C1-C4烷基、C1-C4烷?；?、C1-C4烷基磺酰基或羥基C1-C4烷基取代。
在一個優(yōu)選的實施方案中，R6代表(a)C1-C6烷基，其未被取代或被二-(C1-C4烷基)-氨基、N-(C1-C4烷基)哌嗪基或羥基取代，或(b)N-(Q)-哌啶基-(CH2)n-，其中n是0至4的整數(shù)，且Q是氫、C1-C4烷基或N-(C1-C4烷基)哌啶基。
優(yōu)選地，R7和R8與它們所連接的氮一起代表哌啶基，其未被取代或被以下基團(tuán)取代C1-C4烷基、羥基、氨基羰基、氨基C1-C4烷基、羥基C1-C4烷基，或未被取代或取代的C4-C8脂族雜環(huán)基；嗎啉基或硫嗎啉基，其未被取代或被C1-C4烷基或氧代基取代；哌嗪基，其未被取代或被C1-C4烷基或C1-C4烷氧基C1-C4烷基取代，或吡咯烷基，其未被取代或被羥基C1-C4烷基、C1-C4烷氧基C1-C4烷基、甲酰基、二-C1-C4烷基氨基、C1-C4烷基氨基、氨基、C1-C4烷酰基氨基或氨基羰基取代， 如果R7和R8與它們所連接的氮一起代表哌啶基，該基團(tuán)優(yōu)選被N-(C1-C4烷基)哌嗪基取代。
在R10中，C1-C4烷基優(yōu)選未被取代或被苯基取代。
在X中，苯基優(yōu)選未被取代或被鹵素、C1-C4烷基或C1-C4烷氧基單、二或三取代。
本發(fā)明特別涉及式I的2-氰基-嘧啶，其中R1表示式(Ia)基團(tuán)，
其中A、E和G彼此獨立地代表O、S或CH2，條件是至少A和E之 一代表CH2； 如果G是CH2，則T是O、S或鍵，如果G是O或S，則T是鍵； Ra、Rb和Rc彼此獨立地代表氫或C1-C4烷基； s是0或1，t是1、2、3或4，且p是0、1或2； R2表示鹵素、C1-C4烷基、未取代或取代的苯基、5或6元雜環(huán)基、-C(O)NR4R5、-NHC(O)R4、-CH2NHC(O)R4或-N(R9)SO2R10，其中 R4代表 (a)C1-C7烷基，其未被取代或被以下基團(tuán)取代 氨基，其被C3-C5環(huán)烷基或C1-C6烷基單或二取代，后者未被取代或被鹵素三取代 氮雜-(C4-C8)環(huán)烷基，其未被取代或被以下基團(tuán)取代鹵素、C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基C1-C4烷基、C1-C4烷基氨基、吡咯烷基、哌啶基、二(鹵代)-哌啶基、(C4-C6)環(huán)烷基或C1-C6烷基，后者未被取代或被羥基或鹵素單或二取代； 哌嗪基，其被C1-C4烷基或苯基單或二取代；或 苯基，其未被取代或被鹵素、嗎啉基、三氟甲基或C1-C4烷氧基單或二取代； 鹵素、C3-C5環(huán)烷基、嗎啉基、噻吩基、呋喃基、吡啶基、2-氧雜-6-氮雜-螺[4.5]癸烷或1-氮雜-(C5-C7)雙環(huán)烷基； (b)N-(C1-C4烷基)哌啶基，其被苯基取代； (c)苯基，其被以下基團(tuán)單、二或三取代苯基、C3-C5環(huán)烷氧基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基苯基、二(C1-C4烷基)-氨基C1-C4烷氧基、N-(C1-C4烷基)哌嗪基、N-(C1-C4烷基)哌啶基氧基或N-(C1-C4烷基)哌啶基C1-C4烷氧基； (d)C3-C5環(huán)烷基； (e)異噁唑基、咪唑基或吡唑基，在每種情況下被吡啶基或苯基單或二取代；或 (f)N-(C1-C6烷基)哌啶基或N-(C4-C6環(huán)烷基)哌啶基，其在兩種情況下均被苯基C1-C4烷基取代，其中苯基未被取代或被鹵素單取代；且R5代表氫或C1-C4烷基；或 R4和R5與它們所連接的氮一起代表吡咯烷基或哌啶基，其未被取代或被羥基取代； R9代表氫或C1-C4烷基；且 R10代表C1-C4烷基，其未被取代或被苯基取代；或 R9和R10一起形成基團(tuán)-(CRR’)m-，其中m是2且包括2至4且包括4的整數(shù)，且R和R’均代表氫； R3表示氫、鹵素、苯基、吡啶基-其未被取代或被鹵素或哌嗪基單取代、Y-R6或NR7R8，其中 Y代表O、CH2、S、SO、SO2或NRN，其中RN表示氫或未被取代或被C1-C4烷氧基取代的C1-C4烷基； R6代表C1-C6烷基、苯基、五或六元含氮雜芳基-(CH2)q-，其中q是0至4的整數(shù)，或五或六元脂族雜環(huán)基-(CH2)n-，其中n是0至4的整且雜環(huán)基部分包含至少一個環(huán)氮原子，這些基團(tuán)在每種情況下可未被取代或被取代； R7和R8與它們所連接的氮一起代表未取代或取代的五或六元脂族雜環(huán)基，其中雜環(huán)基部分包含至少一個氮原子； X表示O、HN、C1-C4烷基-N、S、SO、SO2、OCH2CH2NH、CH2或苯基，其未被取代或被鹵素單取代； 或這類2-氰基-嘧啶的鹽。
特別地，優(yōu)選式I化合物，其中 R1表示式(Ia)基團(tuán)
其中A、E和G彼此獨立地代表O、S或CH2，條件是至少A和E之一代表CH2； 如果G是CH2，則T是O、S或鍵，如果G是O或S，則T是鍵； Ra、Rb和Rc彼此獨立地代表氫或C1-C4烷基； s是0或1，t是1、2、3或4，且p是0、1或2； R2表示溴代、氯代、C1-C4烷基、未取代的苯基或含有至少一個氧原子的六元雜環(huán)基、-C(O)-NR4R5或-N(R9)-SO2-R10，其中R4代表 (a)C1-C7烷基，其未被取代或被以下基團(tuán)取代 氨基，其被C3-C5環(huán)烷基或C1-C6烷基單或二取代，后者未被取代或被鹵素三取代 氮雜-(C4-C8)環(huán)烷基，其未被取代或被以下基團(tuán)取代鹵素、C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基C1-C4烷基、C1-C4烷基氨基、吡咯烷基、哌啶基、二(鹵代)-哌啶基、(C4-C6)環(huán)烷基或C1-C6烷基，后者未被取代或被羥基或鹵素單或二取代； 哌嗪基，其被C1-C4烷基或苯基單或二取代；或 苯基，其未被取代或被鹵素、嗎啉基、三氟甲基或C1-C4烷氧基單或二取代； 鹵素、C3-C5環(huán)烷基、嗎啉基、噻吩基、呋喃基、吡啶基、2-氧雜-6-氮雜-螺[4-5]癸烷或1-氮雜-(C5-C7)雙環(huán)烷基； (b)N-(C1-C4烷基)哌啶基，其被苯基取代； (c)苯基，其被以下基團(tuán)單、二或三取代苯基、C3-C5環(huán)烷氧基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基苯基、二(C1-C4烷基)-氨基C1-C4烷氧基、N-(C1-C4烷基)哌嗪基、N-(C1-C4烷基)哌啶基氧基或N-(C1-C4烷基)哌啶基C1-C4烷氧基； (d)C3-C5環(huán)烷基； (e)吡唑基，其被吡啶基或苯基單或二取代；或 (f)N-(C1-C6烷基)哌啶基或N-(C4-C6環(huán)烷基)哌啶基，其在兩種情況下均被苯基C1-C4烷基取代，其中苯基未被取代或被鹵素單取代；且 R5代表氫或C1-C4烷基；或 R4和R5與它們所連接的氮一起代表吡咯烷基； R9代表氫或C1-C4烷基；且 R10代表C1-C4烷基，其未被取代或被苯基取代；或 R9和R10一起形成基團(tuán)-(CRR′)m-，其中m是2且包括2至4且包括4的整數(shù)，且R和R’均代表氫； R3表示氫、Y-R6或NR7R8，其中 Y代表O或NRN，其中RN表示氫或未被取代或被C1-C4烷氧基取代的C1-C4烷基； R6代表C1-C6烷基、苯基、五或六元含氮雜芳基-(CH2)q-，其中q是0至4的整數(shù)，或五或六元脂族雜環(huán)基-(CH2)n-，其中n是0至4的整數(shù)且雜環(huán)基部分包含至少一個環(huán)氮原子，這些基團(tuán)在每種情況下可未被取代或被取代； R7和R8與它們所連接的氮一起代表未取代或取代的五或六元脂族雜環(huán)基，其中雜環(huán)基部分包含至少一個氮原子； X表示HN、C1-C4烷基-N或O； 以及這類2-氰基-嘧啶的相應(yīng)的鹽。
更優(yōu)選式I的2-氰基-嘧啶，其中 R1表示式(Ia)基團(tuán)，
其中A、E和G彼此獨立地代表O或CH2，條件是至少A和E之一代表CH2； 如果G是CH2，則T是O或鍵，如果G是O，則T是鍵； Ra、Rb和Rc均代表氫； s是0或1，t是1或2，且p是1； R2表示溴代、氯代、異丙基、未取代的苯基或含有兩個氧原子的六元雜環(huán)基、-C(O)-NR4R5或-N(R9)-SO2-R10，其中R4代表 (a)C1-C7烷基，其未被取代或被以下基團(tuán)取代 氨基，其被C3-C5環(huán)烷基或C1-C6烷基單或二取代，后者未被取代或被鹵素三取代 1-氮雜-(C7-C8)環(huán)烷基，其未被取代或被C1-C4烷基取代； 1-氮雜-(C4)環(huán)烷基，其未被取代或被C1-C4烷基取代； 吡咯烷基，其未被取代或被鹵素、C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基C1-C4烷基或C1-C4烷基氨基取代； 哌啶基，其未被取代或被以下基團(tuán)單或二取代鹵素、吡咯烷基、哌啶基、二(鹵代)-哌啶基、(C4-C6)環(huán)烷基或C1-C6烷基，后者未被取代或被羥基或鹵素單或二取代； 哌嗪基，其被C1-C4烷基或苯基單或二取代；或 苯基，其未被取代或被鹵素、嗎啉基、三氟甲基或C1-C4烷氧基單或二取代； 鹵素、C3-C5環(huán)烷基、嗎啉基、噻吩基、呋喃基、吡啶基、2-氧雜-6-氮雜-螺[4.5]癸烷或1-氮雜-(C5-C7)雙環(huán)烷基； (b)N-(C1-C4烷基)哌啶基，其被苯基取代； (c)苯基，其被以下基團(tuán)單、二或三取代苯基、C3-C5環(huán)烷氧基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基苯基、二(C1-C4烷基)-氨基C1-C4烷氧基、N-(C1-C4烷基)哌嗪基、N-(C1-C4烷基)哌啶基氧基或N-(C1-C4烷基)哌啶基C1-C4烷氧基； (d)C3-C5環(huán)烷基； (e)吡唑基，其被吡啶基或苯基單或二取代；或 (f)N-(C1-C6烷基)哌啶基或N-(C4-C6環(huán)烷基)哌啶基，其在兩種情況下均被苯基C1-C4烷基取代，其中苯基未被取代或被鹵素單取代；且 R5代表氫或C1-C4烷基；或 R4和R5與它們所連接的氮一起代表吡咯烷基； R9代表氫或C1-C4烷基；且 R10代表C1-C4烷基，其未被取代或被苯基取代；或 R9和R10一起形成基團(tuán)-(CRR′)m-，其中m是2且包括2至4且包括4的整數(shù)，且R和R’均代表氫； R3表示氫、Y-R6或NR7R8，其中 Y代表O或NRN，其中RN表示氫或未被取代或被C1-C4烷氧基取代的C1-C4烷基； R6代表C1-C6烷基、苯基、五或六元含氮雜芳基-(CH2)q-，其中q是0至4的整數(shù)，或五或六元脂族雜環(huán)基-(CH2)n-，其中n是0至4的整數(shù)且雜環(huán)基部分包含至少一個環(huán)氮原子，這些基團(tuán)在每種情況下可未被取代或被取代； R7和R8與它們所連接的氮一起代表未取代或取代的五或六元脂族雜環(huán)基，其中雜環(huán)基部分包含至少一個氮原子； X表示HN、C1-C4烷基-N或O； 或這類2-氰基-嘧啶的鹽。
特別優(yōu)選的本發(fā)明化合物是實施例的化合物。
相應(yīng)地，在其他方面，本發(fā)明提供了 ●用于人和動物體的治療方法中的式I的2-氰基-嘧啶或其互變異構(gòu)體或這類化合物的可藥用鹽； ●式I的2-氰基-嘧啶或其互變異構(gòu)體或這類化合物的可藥用鹽在制備用于治療神經(jīng)病變性疼痛或本文所述另一種疾病的藥物產(chǎn)品中的用途； ●治療神經(jīng)病變性疼痛或本文所述另一種疾病的方法，其包括向需要這類治療的溫血動物以有效對抗這類疾病的量施用式I的2-氰基-嘧啶或其互變異構(gòu)體或其可藥用鹽； ●藥物制劑，包含式I的2-氰基-嘧啶或其互變異構(gòu)體或這類化合物的可藥用鹽或其水合物或溶劑合物以及至少一種可藥用載體； ●在哺乳動物中使用式I化合物及其可藥用鹽或其藥物組合物的方法，用于抑制組織蛋白酶S并用于治療組織蛋白酶S依賴型病癥，如本文所述的組織蛋白酶S依賴型病癥，例如慢性炎性或神經(jīng)病變性疼痛；和 ●選擇性抑制哺乳動物組織蛋白酶S活性的方法，其包括向有需要的哺乳動物施用有效抑制組織蛋白酶S量的式I化合物，更具體而言涉及治療哺乳動物慢性炎性或神經(jīng)病變性疼痛(或本文所述的另一種疾病)的方法，包括向有需要的哺乳動物施用相應(yīng)有效量的式I化合物。
式I化合物可以通過盡管迄今未應(yīng)用于本發(fā)明的新化合物但本身已知的方法制備，尤其是特征如下的方法 a)對于如下式I化合物的合成而言，其中R2代表-C(O)NR4R5，R3表示氫、鹵素、苯基、未被取代或被鹵素單、二或三取代的吡啶基、其中Y代表O、NH或S的Y-R6或NR7R8，X表示HN、C1-C4烷基-N、O(CH2)gNH、O或S且其余基團(tuán)或符號R1、R4、R5、R6、R7、R8和g如對式I化合物所定義， 使式II的5-嘧啶基甲酸
其中R3表示氫、鹵素、苯基、未被取代或被鹵素單、二或三取代的吡啶基、其中Y代表O、NH或S的Y-R6或NR7R8，X表示HN、C1-C4烷基-N、O(CH2)gNH、O或S，且其余基團(tuán)或符號R1、R6、R7、R8和g如對式I化合物所定義， 如方法變體(a)下所定義與式III的胺反應(yīng)，
其中符號R4和R5如對式I化合物所定義； b)作為替代選擇，對于如下式I化合物的合成而言，其中R2代表-C(O)NR4R5，R3表示氫、鹵素、苯基、未被取代或被鹵素單、二或三取代的吡啶基、其中Y代表O、NH或S的Y-R6或NR7R8，X表示HN、C1-C4烷基-N、O(CH2)gNH、O或S且其余基團(tuán)或符號R1、R4、R5、R6、R7、R8和g如對式I化合物所定義， 使式IV的6-氯嘧啶衍生物
其中R2表示-C(O)NR4R5，R3表示氫、鹵素、苯基、未被取代或被鹵素單、二或三取代的吡啶基、其中Y代表O、NH或S的Y-R6或NR7R8，且其余基團(tuán)R6、R7和R8如對式I化合物所定義， 如方法變體(b)下所定義與式V化合物反應(yīng)， R1-X-H(V) 其中X表示HN、C1-C4烷基-N、O(CH2)gNH、O或S且R1具有如對式I化合物所定義的含義； c)對于如下式I化合物的合成而言，其中R2表示-N(R9)SO2R10，R3表示氫、鹵素、苯基、未被取代或被鹵素單、二或三取代的吡啶基、其中Y代表O、NH或S的Y-R6或NR7R8，X表示HN、C1-C4烷基-N、O(CH2)gNH、O或S，且其余基團(tuán)和符號R1、R6、R7、R8、R9、R10和g如對式I化合物所定義， 使式VI的5-氨基嘧啶
其中R3表示氫、鹵素、苯基、未被取代或被鹵素單、二或三取代的吡啶基、其中Y代表O、NH或S的Y-R6或NR7R8，X表示HN、C1-C4烷基-N、O(CH2)gNH、O或S，且其余基團(tuán)和符號R1、R6、R7、R8和g如對式I化合物所定義， 如方法變體(c)下所定義與式VII的磺酰鹵反應(yīng)，
其中基團(tuán)R10如對式I化合物所定義，且Hal表示鹵素， 任選地繼之以借助烷基化反應(yīng)將所得式I化合物的磺酰胺官能團(tuán)中的氫原子用基團(tuán)R9替代； 其中在所有情況下，如果必要，式II至VII的原料也可以具有被保護(hù)形式的官能團(tuán)，和/或為鹽的形式，只要存在成鹽基團(tuán)并且鹽形式的反應(yīng)是可能的； 其中隨后除去被保護(hù)式I化合物衍生物中的任何保護(hù)基； 并且如果需要，將可得到的式I化合物轉(zhuǎn)化為另一種式I化合物，將游離式I化合物轉(zhuǎn)化為鹽，將可得到的式I化合物的鹽轉(zhuǎn)化為游離化合物或另一種鹽，和/或?qū)⑹絀的異構(gòu)體化合物混合物分離為單個的異構(gòu)體。
方法變體(a)、(b)和(c)的詳細(xì)描述 方法變體(a) 式II羧酸的胺化可通過本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)工藝完成，例如通過添加適合的偶聯(lián)劑如POCl3、硫酰氟氯(sulfuryl chloride fluoride)、P2I4或特別是N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC-HCI)或N，N′-二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)使兩者化合物在適合的溶劑中反應(yīng)。當(dāng)使用EDC-HCl或DCC時，反應(yīng)可在例如二甲基甲酰胺中、在約10℃至約35℃的溫度、例如約20至24℃進(jìn)行約3至48小時，例如24小時或36小時。
方法變體(b) 反應(yīng)優(yōu)選在可用于氨基化合物親核置換離去基團(tuán)的標(biāo)準(zhǔn)條件下進(jìn)行。式IV的6-氯嘧啶衍生物可以與式V的親核體在堿存在下、在適合的溶劑中反應(yīng)。如果例如X表示NH、C1-C4烷基-N或O(CH2)gNH，則反應(yīng)可通過向適合溶劑中的式IV和V的原料添加堿進(jìn)行，例如氮堿如三乙胺或堿性鹽如堿金屬碳酸鹽例如碳酸鉀，所述溶劑如醚，例如二噁烷或四氫呋喃，或腈如乙腈，并加熱反應(yīng)混合物至約溶劑的回流溫度達(dá)約6至12小時，尤其是8小時至10小時。
方法變體(c) 其中R2表示-N(R9)SO2R10的式I的磺酰胺可如下制備在約10℃至約50℃的溫度，例如約20至25℃，在等摩爾量的吡啶或類似的堿以及任選催化量的二甲基氨基吡啶存在下，將式VII的磺酰鹵加至式VI的胺在適合溶劑如二氯甲烷或氯仿中的溶液達(dá)約1至12小時，例如2小時至6小時。
保護(hù)基 如果存在一個或多個其他官能團(tuán)例如羧基、羥基、氨基或巰基，可能需要在原料中通過保護(hù)基保護(hù)。所使用的保護(hù)基可以已經(jīng)存在于前體中并且應(yīng)該保護(hù)有關(guān)官能團(tuán)以免發(fā)生不需要的次級反應(yīng)，如?；?、醚化、酯化、氧化、溶劑分解和類似的反應(yīng)。保護(hù)基的特征在于它們自身通常通過溶劑分解、還原、光解或還通過酶活性、例如在類似于生理條件的條件下易于除去，即無不可取的次級反應(yīng)，并且它們不會存在于終產(chǎn)物中。專業(yè)人員了解或可容易地確立何種保護(hù)基適合于上下文中所述的反應(yīng)。
這類官能團(tuán)被這類保護(hù)基的保護(hù)、保護(hù)基自身以及它們的除去反應(yīng)例如在標(biāo)準(zhǔn)參考書中述及，如J.F.W.McOmie，“有機(jī)化學(xué)中的保護(hù)基”，Plenum Press，倫敦和紐約1973；T.W.Greene，“有機(jī)合成中的保護(hù)基”，Wiley，紐約1981；“The Peptides”，第3卷(編輯E.Gross和J.Meienhofer)，Academic Press，倫敦和紐約1981；“Methoden derorganischen Chemie”(有機(jī)化學(xué)方法)，Houben Weyl，第4版，第15/1卷，Georg Thieme Verlag，Stuttgart 1974；H.-D.Jakubke和H.Jescheit，

Peptide，Proteine”(氨基酸、肽和蛋白質(zhì))，Verlag Chemie，Weinheim，Deerfield Beach和Basel 1982；以及Jochen Lehmann，“Chemieder KohlenhydrateMonosaccharide und Derivate”(碳水化合物化學(xué)單糖和衍生物)，Georg Thieme Verlag，Stuttgart 1974。
其他方法步驟 具有成鹽基團(tuán)的式I化合物的鹽可以以本身已知的方式制備。式I化合物的酸加成鹽因此可通過用酸或用適合的陰離子交換試劑處理而獲得。具有兩個酸分子的鹽(例如式I化合物的二鹵化物)也可以轉(zhuǎn)化為每化合物具有一個酸分子的鹽(例如單鹵化物)；這可以通過加熱至熔化或例如通過在高真空、在升高的溫度例如130至170℃作為固體加熱來完成，每分子式I化合物被驅(qū)除一分子的酸。
鹽通?？赊D(zhuǎn)化為游離化合物，例如通過用適合的堿性試劑處理，例如堿金屬碳酸鹽、堿金屬碳酸氫鹽或堿金屬氫氧化物，通常為碳酸鉀和氫氧化鈉。
一般方法步驟 本文所述的所有方法步驟可在已知反應(yīng)條件下進(jìn)行，優(yōu)選在那些特別提及的條件下，不存在或通常存在溶劑或稀釋劑，優(yōu)選對所使用試劑呈惰性并能夠溶解它們的那些，不存在或存在催化劑、縮合劑或中和劑，例如離子交換劑，通常為陽離子交換劑，例如H+型陽離子交換劑，取決于反應(yīng)和/或反應(yīng)物的類型，在降低的、正?；蛏叩臏囟?，例如在-100℃至約190℃、優(yōu)選約-80℃至約150℃、例如-80至-60℃、在室溫、在-20至40℃或在所用溶劑的沸點溫度，在大氣壓下或在密閉容器中、酌情在壓力下，和/或在惰性氣氛中，例如在氬或氮氣氛下。
鹽可以存在于所有起始化合物和中間體中，如果它們含有成鹽基團(tuán)的話。鹽也可以存在于該類化合物的反應(yīng)過程中，只要反應(yīng)不因此被中斷即可。
可從中選擇的適合于所述反應(yīng)的溶劑包括例如水；酯，通常為低級烷基-低級鏈烷酸酯，例如二乙基乙酸酯；醚，通常為脂族醚，例如二乙基醚，或環(huán)狀醚，例如四氫呋喃；液體芳族烴，通常為苯或甲苯；醇，通常為甲醇、乙醇或1-或2-丙醇；腈，通常為乙腈；鹵代烴，通常為二氯甲烷；酰胺，通常為二甲基甲酰胺；堿，通常為雜環(huán)氮堿，例如吡啶；羧酸，通常為低級鏈烷羧酸，例如乙酸；羧酸酐，通常為低級鏈烷酸酐，例如乙酸酐；環(huán)狀、直鏈或支鏈烴，通常為環(huán)己烷、己烷或異戊烷，或這些溶劑的混合物，例如水溶液，除非在方法描述中另外提及。這類溶劑混合物也可以用于例如色譜或分配處理中。
在優(yōu)選的實施方案中，按照或類似于實施例中所定義的方法或方法步驟制備式I化合物。
活性成分的劑量取決于各種因素，包括患者的類型、種屬、年齡、體重、性別和醫(yī)學(xué)狀況；待治療病癥的嚴(yán)重性；施用途徑；患者的腎和肝功能；以及所使用的具體化合物。普通技能的內(nèi)科醫(yī)生、臨床醫(yī)生或獸醫(yī)能夠容易地確定并開具防止、對抗或遏制病癥進(jìn)展所需的藥物有效量。使藥物濃度處于產(chǎn)生功效而無毒性范圍的過程中的最佳精密度需要基于藥物對目標(biāo)位點可利用性的動力學(xué)的方案。這涉及對藥物分布、平衡和消除的考慮。
本發(fā)明還涉及藥物組合物，其包含有效量的、尤其是治療上述疾病之一有效量的式I化合物或其互變異構(gòu)體以及可藥用載體，所述載體適合于局部、腸內(nèi)、例如口服或直腸或胃腸外施用且可以是無機(jī)或有機(jī)的固體或液體。用于口服施用的尤其有片劑或明膠膠囊，其包含活性成分以及稀釋劑，例如乳糖、右旋糖、甘露醇和/或甘油，和/或潤滑劑和/或聚乙二醇。片劑也可以包含粘合劑，例如硅酸鋁鎂、淀粉如玉米、小麥或稻米淀粉、明膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和/或聚乙烯吡咯烷酮，如果需要還含有崩解劑，例如淀粉、瓊脂、海藻酸或其鹽如藻酸鈉，和/或泡騰混合物或吸附劑、染料、調(diào)味劑和甜味劑。也可以使用本發(fā)明藥理學(xué)活性化合物的胃腸外可施用組合物形式或輸注溶液形式。藥物組合物可以是無菌的和/或可包含賦形劑，例如防腐劑、穩(wěn)定劑、潤濕劑和/或乳化劑、增溶劑、調(diào)節(jié)滲透壓的鹽和/或緩沖劑。本發(fā)明的藥物組合物如果需要可包含其他藥理學(xué)活性物質(zhì)，其以本身已知的方式制備，例如借助常規(guī)的混合、制粒、成型、溶解或凍干方法，且包含約1％至95％、尤其約1％至約20％一種或多種活性成分。
原料 式II至VII的原料是已知的、商購可得或可類似于或按照本領(lǐng)域已知的、實施例中所述的或特別是如下所述的方法合成。
式II的5-嘧啶基甲酸
其中R3表示氫、鹵素、苯基、吡啶基-未被取代或被鹵素單、二或三取代、其中Y代表O、NH或S的Y-R6或NR7R8，X表示HN、C1-C4烷基-N或O(CH2)gNH，其余基團(tuán)或符號R1、R6、R7、R8和g如對式I化合物所定義，可如下獲得使式VIII的5-嘧啶基甲酸鹵
其中R3表示氫、鹵素、苯基、吡啶基-未被取代或被鹵素單、二或三取代、其中Y代表O、NH或S的Y-R6或NR7R8，且其余基團(tuán)R6、R7和R8如對式I化合物所定義， 在第一步中與醇AlkOH反應(yīng)，其中Alk表示烷基、優(yōu)選C1-C4烷基，在第二步中與式V的胺反應(yīng)， R1-X-H(V) 其中X表示HN、C1-C4烷基-N、O(CH2)gNH，且R1如對式I化合物所定義， 以便制備式IX的2-氯-嘧啶，
其中R3表示氫、鹵素、苯基、吡啶基-未被取代或被鹵素單、二或三取代、其中Y代表O、NH或S的Y-R6或NR7R8，Alk表示烷基、優(yōu)選C1-C4烷基，X表示HN、C1-C4烷基-N、O(CH2)gNH，且g、R1、R6、R7和R8如對式I化合物所定義。
式VIII的5-嘧啶基甲酸鹵與醇AlkOH的反應(yīng)可在常規(guī)條件下進(jìn)行，例如將酰鹵溶于適合的溶劑如二氯甲烷中，并在-10至25℃的溫度、優(yōu)選約0℃交錯或同時加入醇和等當(dāng)量的適合的堿如三(C1-C4烷基)胺。所得甲酸酯可有利地未經(jīng)中間體分離進(jìn)一步反應(yīng)，在-10至+25℃的溫度如約0℃添加式V的胺和等當(dāng)量的適合的堿，如與以上所用三(C1-C4烷基)胺相同或不同的堿。
然后，使式IX的2-氯-嘧啶與堿金屬氰化物如氰化鉀在適合的溶劑如二甲基甲酰胺或二甲亞砜中、在適合的堿如1，4-二氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛烷存在下、在+15至+35℃的溫度、優(yōu)選在約20至25℃進(jìn)一步反應(yīng)15至360分鐘，其中在式IX中R3表示氫、鹵素、苯基、吡啶基-未被取代或被鹵素單、二或三取代、其中Y代表O、NH或S的Y-R6或NR7R8，Alk表示烷基、優(yōu)選C1-C4烷基，X表示HN、C1-C4烷基-N、O(CH2)gNH且g、R1、R6、R7和R8如對式I化合物所定義，得到式X的2-氰基-嘧啶-5-甲酸酯
其中R3表示氫、鹵素、苯基、吡啶基-未被取代或被鹵素單、二或三取代、其中Y代表O、NH或S的Y-R6或NR7R8，Alk表示烷基、優(yōu)選C1-C4烷基，X表示HN、C1-C4烷基-N、O(CH2)gNH，且g、R1、R6、R7和R8如對式I化合物所定義。然后，通過加入大量過量的水，使所述式X的甲酸酯在本領(lǐng)域已知由適合的堿催化的條件下最后進(jìn)行皂化反應(yīng)，得到如上所定義的式II的5-嘧啶基甲酸。例如，可將甲酸酯溶于與水混溶的溶劑如四氫呋喃中，并在-5至20℃的溫度、優(yōu)選約0℃加入適合的堿如氫氧化鋰在水中的溶液。
式II的5-嘧啶基甲酸
其中R3表示氫、鹵素、苯基、吡啶基-未被取代或被鹵素單、二或三取代、其中Y代表O、NH或S的Y-R6或NR7R8，X表示O或S，且其余基團(tuán)R1、R6、R7和R8如對式I化合物所定義，可如下獲得使其中R3表示氫、鹵素、苯基、吡啶基-未被取代或被鹵素單、二或三取代、其中Y代表O、NH或S的Y-R6或NR7R8且其余基團(tuán)R6、R7和R8如對式I化合物所定義的式VIII的5-嘧啶基甲酰鹵在第一步中與水反應(yīng)，在第二步中與式V的醇或硫醇反應(yīng)，其中X表示O或S且R1如對式I化合物所定義，以便制備式XI的2-氯-嘧啶基-5-甲酸，
其中R3表示氫、鹵素、苯基、吡啶基-未被取代或被鹵素單、二或三取代、其中Y代表O、NH或S的Y-R6或NR7R8，X表示O或S，且其余基團(tuán)R1、R6、R7和R8如對式I化合物所定義。
式VIII的5-嘧啶基甲酰鹵與水的反應(yīng)可在常規(guī)條件下進(jìn)行，例如將酰鹵溶解于適合的與水混溶的溶劑如四氫呋喃中，在15至35℃、優(yōu)選約20至25℃加入過量的水。使所得羧酸與強(qiáng)堿如叔丁醇鉀和式V的醇或硫醇在適合的溶劑如四氫呋喃中、在-10至20℃的溫度、優(yōu)選約0℃反應(yīng)30至360分鐘。
然后，使其中各基團(tuán)具有如上所提供含義的式XI的2-氯-嘧啶基-5-甲酸在適合的溶劑如二甲基甲酰胺中、在30至60℃的溫度、優(yōu)選在約45至55℃與過量的烯丙基鹵、例如烯丙基溴在適合的堿如碳酸鉀存在下反應(yīng)10至120分鐘、更優(yōu)選30至45分鐘，得到式(XII)的甲酸烯丙基酯，
其中各基團(tuán)具有以上對式XI化合物所提供的含義。
然后，使其中各基團(tuán)具有以上對式XI化合物所提供含義的式(XII)的甲酸烯丙基酯與堿金屬氰化物如氰化鉀在適合的溶劑如二甲基甲酰胺或二甲亞砜中、在適合的堿如1，4-二氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛烷存在下、在+15至+35℃的溫度、優(yōu)選在約20至25℃反應(yīng)15至360分鐘，得到式(XIII)的甲酸烯丙基酯，
其中各基團(tuán)具有以上對式XI化合物所提供的含義。
最后，通過在+15至+35℃、優(yōu)選在約20至25℃的溫度向烯丙基酯在適合的溶劑如四氫呋喃中的溶液中加入Pd(0)催化劑、例如四(三苯基-膦)鈀(0)和嗎啉，繼之以加入碳酸氫鈉水溶液，水解所述式XIII的甲酸烯丙基酯，獲得如上所定義的式II化合物。
其中R3表示Y-R6，其中Y代表O、NH或S，X表示HN、C1-C4烷基-N或O(CH2)gNH且其余基團(tuán)和符號R1、R6和g如對式I化合物所定義的式II的5-嘧啶基甲酸也可如下獲得首先使式XIV的2-甲硫基-5-嘧啶基甲酸
與式XV的胺、醇或硫醇在強(qiáng)堿如氫化鈉存在下、在適合的溶劑如四氫呋喃中、在-10至30℃、優(yōu)選在約20℃的溫度反應(yīng)， H-R3(XV) 其中R3表示Y-R6，其中Y代表O、NH或S且R6如對式I化合物所定義，隨后，使反應(yīng)產(chǎn)物在適合的溶劑如二甲基甲酰胺中、在30至60℃、優(yōu)選約45至55℃的溫度與過量的烯丙基鹵、例如烯丙基溴在適合的堿如碳酸鉀存在下反應(yīng)10至120分鐘、更優(yōu)選45至75分鐘，得到式XVI的甲酸烯丙基酯，
其中R3表示Y-R6，其中Y代表O、NH或S且R6如對式I化合物所定義。
隨后，將式XVI的甲酸烯丙基酯中的甲硫基借助兩步反應(yīng)用氰基替代。在第一步中，將其中各基團(tuán)具有如上所提供含義的式XVI的甲酸烯丙基酯用適合的氧化劑、優(yōu)選用3倍摩爾過量的間氯過苯甲酸在適合的溶劑如二氯甲烷中、在-10至+10℃、優(yōu)選在約0℃氧化。在第二步中，通過所得中間體在適合的溶劑如二氯甲烷中與適合的氰化物如氰化鈉在適合的催化劑如四(烷基)溴化銨存在下、在15至30℃、優(yōu)選在約20至25℃的溫度反應(yīng)，將所得甲基磺?；们杌娲?，得到式XVII的2-氰基嘧啶基-5-甲酸烯丙基酯，
其中R3表示Y-R6，其中Y代表O、NH或S且R6如對式I化合物所定義。
最后，將其中R3表示Y-R6、其中Y代表O、NH或S且R6如對式I化合物所定義的所得式XVII的2-氰基嘧啶基-5-甲酸烯丙基酯如下轉(zhuǎn)化為式II的甲酸首先使式XVII的2-氰基嘧啶基-5-甲酸烯丙基酯與式V的胺和等當(dāng)量的適合的堿如與以上所用相同或不同的三(C1-C4烷基)胺在-10℃至+25℃如約0℃反應(yīng)，其次在+15至+35℃、優(yōu)選在約20至25℃的溫度向烯丙基酯在適合的溶劑如四氫呋喃中的溶液中加入Pd(0)催化劑、例如四(三苯基-膦)鈀(0)和嗎啉，繼之以加入碳酸氫鈉水溶液，將所得烯丙基酯水解。
式IV的6-氯嘧啶衍生物
其中R2表示-C(O)NR4R5，R3表示氫、鹵素、苯基、吡啶基-未被取代或被鹵素單、二或三取代、其中Y代表O、NH或S的Y-R6或NR7R8，且其余基團(tuán)R6、R7和R8如對式I化合物所定義，可從式XIV的2-甲硫基-5-嘧啶基甲酸開始獲得，
所述羧酸可如實施例中所述與草酰氯反應(yīng)，得到相應(yīng)的甲酰氯，其可通過與其中R4和R5具有如上對式I化合物所定義含義的式III的胺反應(yīng)而轉(zhuǎn)化為式XVIII的甲酸酰胺，
其中R2表示-C(O)NR4R5且R4和R5具有以上對式I化合物所定義的含義。該式XVIII的甲酸酰胺可進(jìn)一步與其中R3表示Y-R6、其中Y代表O、NH或S且R6如對式I化合物所定義的式XV的胺、醇或硫醇在強(qiáng)堿如氫化鈉存在下、在適合的溶劑如四氫呋喃中、在-10至30℃、優(yōu)選約20℃的溫度反應(yīng)，得到式XIX的2-甲硫基嘧啶衍生物，
其中R2表示-C(O)NR4R5，R3表示Y-R6，其中Y代表O、NH或S，且R4、R5和R6具有如以上對式I化合物所定義的含義。
最后，借助如對式XVI的甲酸烯丙基酯所述的兩步反應(yīng)，將式XIX的甲酸烯丙基酯中的甲硫基用氰基替代，得到如上所述的式IV的6-氯嘧啶衍生物。
式VI的5-氨基嘧啶衍生物
其中R3表示氫、鹵素、苯基、吡啶基-未被取代或被鹵素單、二或三取代、其中Y代表O、NH或S的Y-R6或NR7R8，X表示HN、C1-C4烷基-N、O(CH2)gNH、O或S，且其余基團(tuán)和符號R1、R6、R7、R8和g如對式I化合物所定義，可從式XIV的2-甲硫基-5-嘧啶基甲酸開始如下獲得
在第一步中，如以下實施例所述將式XIV的羧酸轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的式XX的氨基甲酸烯丙基酯
該式XX的氨基甲酸烯丙基酯可進(jìn)一步與其中R3表示Y-R6、其中Y代表O、NH或S且R6如對式I化合物所定義的式XV的胺、醇或硫醇在強(qiáng)堿如氫化鈉或叔丁醇鉀存在下、在適合的溶劑如四氫呋喃中、在-10至30℃、優(yōu)選在約20℃的溫度反應(yīng)，得到式XXI的2-甲硫基-嘧啶衍生物，
其中R3表示Y-R6，其中Y代表O、NH或S，且R6如對式I化合物所定義。
隨后，借助以上對式XIX的甲酸烯丙基酯所述的兩步反應(yīng)，將式XXI的2-甲硫基-嘧啶中的甲硫基用氰基替代，得到式XXII的2-氰基嘧啶基-5-氨基甲酸烯丙基酯，
其中R3表示Y-R6，其中Y代表O、NH或S，且R6如對式I化合物所定義。
最后，將所述2-氰基嘧啶基-5-氨基甲酸烯丙基酯如下轉(zhuǎn)化為式VI的5-氨基嘧啶衍生物首先使式XXII的化合物與如上文所述的式V的胺反應(yīng)，隨后在+15至+35℃、優(yōu)選在約20至25℃的溫度向氨基甲酸烯丙基酯在適合的溶劑如四氫呋喃中的溶液中加入Pd(0)催化劑、例如四(三苯基-膦)鈀(0)和嗎啉，繼之以加入碳酸氫鈉水溶液，將所得中間體中的氨基甲酸官能團(tuán)水解。
從其中各基團(tuán)如以上對式I化合物所定義的式VI的5-氨基嘧啶衍生物開始，通過本領(lǐng)域已知的簡單的酰化反應(yīng)，可獲得其中R2表示-NHC(O)R4，其中R4如以上對式I化合物所定義的式I的2-氰基嘧啶。
基團(tuán)R1中含有的螺環(huán)原料可按照實施側(cè)中所述的方法或通過縮醛化反應(yīng)制備。用作實施例中所述這類方法以及用于縮醛化反應(yīng)的原料的二醇可例如如下制備在第一步中使式XXIII的二甲酸酯進(jìn)行還原反應(yīng)，
其中R11是C1-C4烷基且b是選自1、2或3的整數(shù)， 例如用LiAIH4在四氫呋喃中還原，得到式(XXIV)的二醇，
其中b是選自1、2或3的整數(shù)。在第二步中，將羥基轉(zhuǎn)化為適合于親核取代反應(yīng)的離去基團(tuán)，例如與對-甲苯磺酰氯在適合的堿如三乙胺存在下、在適合的反應(yīng)條件下反應(yīng)。隨后，用氰化鉀在非質(zhì)子溶劑如二甲亞砜中進(jìn)行親核取代反應(yīng)，得到式XXV的二(氰基甲基)環(huán)烷基化合物，
其中b是選自1、2或3的整數(shù)。然后使式XXV的二(氰基甲基)環(huán)烷基化合物進(jìn)一步進(jìn)行堿水解，得到游離的二甲酸衍生物，最后，將所述二甲酸衍生物例如通過用LiAIH4在四氫呋喃中還原，得到式(XXVI)的二醇，
其中b是選自1、2或3的整數(shù)。
實施例 以下實施例用于闡述本發(fā)明而非限制其范圍。
溫度以攝氏度測量。除非另外指出，反應(yīng)在室溫進(jìn)行。終產(chǎn)物、中間體和原料的結(jié)構(gòu)通過標(biāo)準(zhǔn)分析方法確認(rèn)，例如微量分析和光譜表征(例如MS、IR、NMR)。
縮寫 所用縮寫是本領(lǐng)域常規(guī)縮寫，具體地具有以下所提供的含義。
Ac乙?；? aq. 水性/含水的 Boc 丁氧羰基 cone. 濃 mCPBA 間氯過苯甲酸 DABCO 1，4-二氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛烷 DMAP 二甲基氨基吡啶 DMF 二甲基甲酰胺 DMSO 二甲亞砜 Et乙基 EtOAc 乙酸乙酯 H 小時 iPr 異丙基 LAH 氫化鋁鋰 LDA 二異丙基氨基鋰 Me甲基 MS質(zhì)譜 NMR 核磁共振 Ph苯基 RP-HPLC 反相高壓液相色譜 sat.飽和的 soln. 溶液 TBAB四丁基溴化銨 TFA 三氟乙酸 THF 四氫呋喃 原料 2-氰基-4-[(螺[2.5]辛-6-基甲基)氨基]嘧啶-5-甲酸 在0℃向4-氯-2-氰基-嘧啶-5-羰基氯(8.80mmol)在CH2Cl2(30ml)中的溶液接連加入MeOH(9.60mmol)和i-Pr2NEt(9.80mmol)。在0℃攪拌15分鐘后，在0℃向反應(yīng)混合物接連加入C-螺[2.5]辛-6-基-甲基胺鹽酸鹽(8.50mmol)和三乙胺(24.0mmol)。將反應(yīng)混合物在0℃攪拌至室溫達(dá)50分鐘，然后，在真空中濃縮大部分溶劑。用AcOEt稀釋殘余物后，將混合物用KHSO4水溶液、水、飽和NaHCO3水溶液、水和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，在真空中濃縮。殘余物未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一反應(yīng)。
在室溫向上述殘余物在DMSO(10ml)中的溶液接連加入KCN(14.2mmol)在水(2ml)中的溶液和DABCO(2.80mmol)。在同樣溫度攪拌后，用AcOEt稀釋反應(yīng)混合物。將所得混合物用水(x2)和鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，在真空中濃縮。所得殘余物通過硅膠柱色譜純化(正己烷∶AcOEt＝5∶1)，得到氰基嘧啶，其未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一反應(yīng)。
在0℃向THF(20mL)中的以上氰基嘧啶加入LiOH-H2O(19.0mmol)在水(10mL)中的溶液。在室溫攪拌1小時后，加入KHSO4水溶液淬滅反應(yīng)。過濾所得沉淀的固體，用水洗滌，用少量CH3CN研磨，得到標(biāo)題化合物；1H NMR(400MHz，DMSO)，δ0.22(2H，dd)，0.32(2H，dd)，0.95-0.98(2H，m)，1.15-1.24(2H，m)，1.68-1.74(5H，m)，3.47(2H，t)，8.88(1H，t)。
4-(3，3-二氟-吡咯烷-1-基)哌啶鹽酸鹽 在室溫將3，3-二氟-吡咯烷鹽酸鹽(2.02mmol)、4-氧代-哌啶-1-甲酸叔丁基酯(2.02mmol)和Ti(OiPr)4(2.42mmol)在THF中的混合物攪拌1小時。向所得混合物加入乙醇(3mL)和NaBH3CN(1.21mmol)。攪拌17小時后，加入飽和NaHCO3水溶液淬滅反應(yīng)，濾出所得沉淀。濾液用AcOEt稀釋后，將混合物用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，在真空中濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜純化，得到4-(3，3-二氟-吡咯烷-1-基)-哌啶-1-甲酸叔丁基酯；1HNMR(CDCI)3δ1.34-1.52(2H，m)，1.45(9H，s)，1.79(2H，bd)，2.19-2.33(3H，m)，2.78(2H，dd)，2.83(2H，dd)，2.95(2H，dd)，4.00(2H，bs)。
將4-(3，3-二氟-吡咯烷-1-基)-哌啶-1-甲酸叔丁基酯(1.77mmol)用4N的HCl 1，4-二噁烷(6mL)溶液處理，并在室溫攪拌1小時。將反應(yīng)混合物在真空中濃縮，所得殘余物未經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步驟。
4-苯基-2-吡啶-2-基-2H-吡唑-3-基胺 在室溫向3-羥基-2-苯基丙烯腈(3.4mmol)在EtOH(6.8mL)中的溶液加入AcOH(0.66mL)和2-肼基吡啶(6.8mmol)。在80℃攪拌5小時后，將反應(yīng)混合物冷卻并在真空中濃縮。殘余物用H2O稀釋，用AcOEt萃取。有機(jī)萃取液用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥并在真空中濃縮。將所得殘余物用醚研磨，得到標(biāo)題化合物；1H NMR(CDCl3)δ6.27(br，2H)，7.11-7.14(m，1H)，7.21-7.25(m，1H)，7.40-7.48(m，4H)，7.65(s，1H)，7.79-7.84(m，1H)，8.02(d，1H)，8.35-8.37(m，1H)。
3-環(huán)丙基-2，2-二甲基丙基胺鹽酸鹽 在-78℃向異丁腈(29mmol)在THF(60mL)中的溶液加入LDA(2MTHF溶液，35mmol)。在-78℃攪拌2小時后，在-78℃向該溶液加入溴甲基環(huán)丙烷(32mmol)。將混合物在室溫攪拌13小時，然后加入NH4Cl水溶液淬滅反應(yīng)。用醚萃取混合物，合并有機(jī)萃取液，用H2O和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，在真空中濃縮，得到3-環(huán)丙基-2，2-二甲基丙腈，其未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一反應(yīng)。
在0℃向LAH(87mmol)在THF(200mL)中的懸液滴加濃H2SO4(44mmol)。在0℃攪拌0.5小時后，在0℃向該懸液加入3-環(huán)丙基-2，2-二甲基丙腈。將混合物回流4.5小時。冷卻至0℃后，加入Na2SO4-10H2O淬滅反應(yīng)。將所得混合物經(jīng)硅藻土過濾，濾液用HCl的1，4-二噁烷溶液處理。將所得懸液在真空中濃縮，得到標(biāo)題化合物；1H NMR(DMSO)δ0-0.03(2H，m)，0.39-0.44(2H，m)，0.97(6H，s)，1.19(2H，d)，2.66(q，2H)，8.05(3H，br)。
2-環(huán)丙基-2-甲基丙基胺鹽酸鹽 在-78℃向環(huán)丙基乙腈(25mmol)在THF(60mL)中的溶液加入LDA(2MTHF溶液，30mmol)。在-78℃攪拌2小時后，在-78℃向溶液加入碘甲烷(30mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫攪拌1小時，然后加入NH4Cl水溶液淬滅反應(yīng)。用醚萃取混合物后，將有機(jī)萃取液用水和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，在真空中濃縮，得到2-環(huán)丙基丙腈，其未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一反應(yīng)。
在-78℃向2-環(huán)丙基丙腈(25mmol)在THF(60mL)中的溶液加入LDA(2M THF溶液，74mmol)。在-78℃攪拌2.5小時后，在-78℃向溶液加入碘甲烷(99mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫攪拌11小時，然后加入NH4Cl水溶液淬滅反應(yīng)。用醚萃取混合物后，將有機(jī)萃取液用水和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，在真空中濃縮，得到2-環(huán)丙基-2-甲基丙腈，其未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一反應(yīng)。
在0℃向LAH(87mmol)在THF(200mL)中的懸液滴加濃H2SO4(44mmol)。在0℃攪拌0.5小時后，在0℃向該懸液加入3-環(huán)丙基-2，2-二甲基丙腈。將反應(yīng)混合物回流4.5小時。冷卻至0℃后，加入Na2SO4-10H2O淬滅反應(yīng)。將所得混合物經(jīng)硅藻土過濾，濾液用HCl的1，4-二噁烷溶液處理。在真空中濃縮所得懸液，得到標(biāo)題化合物，其未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一反應(yīng)。
2-(1-甲基環(huán)丁基)乙基胺鹽酸鹽 在0℃向環(huán)丁烷甲酸(50mmol)在THF(100mL)中的溶液加入LDA(2M THF溶液，125mmol)。在0℃攪拌2小時后，在0℃向溶液加入碘甲烷(125mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫攪拌14小時。加入水淬滅反應(yīng)，然后將水層與THF層分離。向該水層加入NH4Cl水溶液，用HCl水溶液將混合物酸化至pH＜2。用AcOEt萃取混合物后，將有機(jī)萃取液用水和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，在真空中濃縮，得到1-甲基環(huán)丁烷甲酸，其未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一反應(yīng)。
在0℃向LAH(200mmol)在THF(250mL)中的懸液加入1-甲基環(huán)丁烷甲酸(32mmol)。將反應(yīng)混合物在60℃攪拌6小時。冷卻至0℃后，加入Na2SO4-10H2O淬滅反應(yīng)。將所得混合物經(jīng)硅藻土過濾，濾液在真空中濃縮，得到(1-甲基環(huán)丁基)甲醇，其未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一反應(yīng)。
在0℃向(1-甲基環(huán)丁基)甲醇(32mmol)在CH2Cl2(100mL)中的溶液加入三乙胺(65mmol)、三甲基胺鹽酸鹽(6mmol)以及對甲苯磺酰氯(49mmol)在CH2Cl2(50mL)中的溶液，然后將混合物在0℃攪拌0.5小時。加入水淬滅反應(yīng)，用CH2Cl2萃混合物取。合并有機(jī)萃取液，用水和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，在真空中濃縮，得到甲苯-4-磺酸1-甲基環(huán)丁基甲基酯，其未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一反應(yīng)。
向甲苯-4-磺酸1-甲基環(huán)丁基甲基酯在DMF(60mL)中的溶液加入氰化鉀(60mmol)。將反應(yīng)混合物在60℃攪拌11小時。冷卻至室溫后，用水稀釋混合物，然后用醚萃取。合并有機(jī)萃取液，用水和鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，在真空中濃縮，得到(1-甲基環(huán)丁基)乙腈，其未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一反應(yīng)。
在0℃向LAH(97mmol)在THF(200mL)中的懸液滴加濃H2SO4(49mmol)。在0℃攪拌1小時后，在0℃向懸液加入(1-甲基-環(huán)丁基)乙腈。將反應(yīng)混合物回流4.5小時。冷卻至0℃后，加入Na2SO4-10H2O淬滅反應(yīng)。將所得混合物經(jīng)硅藻土過濾，濾液用HCl的1，4-二噁烷溶液處理，然后在真空中濃縮懸液，得到標(biāo)題化合物，其未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一反應(yīng)。
2-苯基-2-吡咯烷-1-基乙基胺二鹽酸鹽 向苯甲醛(9.4mmol)在H2O(6mL)中的懸液加入硫酸氫鈉(9.4mmol)和吡咯烷(9.4mmol)。在室溫攪拌0.5小時后，向懸液加入氰化鈉(9.4mmol)，將所得混合物在室溫攪拌15小時。將反應(yīng)混合物用飽和NaHCO3水溶液稀釋，然后用AcOEt萃取。有機(jī)萃取液用水(x 2)和鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，在真空中濃縮，得到苯基吡咯烷-1-基乙腈，其未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一反應(yīng)。
在0℃向LAH(26mmol)在THF(100mL)中的溶液滴加濃H2SO4(13mmol)。在0℃攪拌0.5小時后，在0℃向溶液加入苯基吡咯烷-1-基乙腈，然后將混合物在60℃攪拌3小時。冷卻至0℃后，加入Na2SO4-10H2O淬滅反應(yīng)。所得混合物經(jīng)硅藻土過濾，濾液在真空中濃縮。用醚稀釋殘余物后，將混合物用HCl的1，4-二噁烷溶液處理。過濾收集沉淀，得到標(biāo)題化合物，其未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一反應(yīng)；1H NMR(DMSO)δ1.74-1.99(4H，m)，2.87(2H，br)，3.14(2H，br)，3.40-3.78(4H，m)，4.64(1H，br)，7.50-7.53(3H.m)，7.75-7.77(2H，m)，8.26(3H，br)。
2-苯基-3-吡咯烷-1-基丙基胺 向托品酸(0.12mmol)和吡咯烷(0.12mmol)在DMF(20mL)中的溶液加入HOAt(0.18mmol)和EDCI-HCl(0.18mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫攪拌14小時。用水稀釋反應(yīng)混合物，然后用AcOEt萃取。將有機(jī)萃取液接連用水、包含NaHCO3水溶液、H2O和鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，在真空中濃縮。殘余物經(jīng)硅膠柱色譜純化，得到3-羥基-2-苯基-1-吡咯烷-1-基丙-1-酮。
在0℃向LAH(10mmol)在THF(50mL)中的溶液加入3-羥基-2-苯基-1-吡咯烷-1-基丙-1-酮(5mmol)。將反應(yīng)混合物在0℃攪拌1.5小時。冷卻至0℃后，加入Na2SO4-10H2O淬滅反應(yīng)，將所得混合物經(jīng)硅藻土過濾，濾液在真空中濃縮，得到2-苯基-3-吡咯烷-1-基丙-1-醇，其未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一反應(yīng)。
在0℃向2-苯基-3-吡咯烷-1-基丙-1-醇(3.4mmol)在THF(10mL)中的溶液接連加入鄰苯二甲酰亞胺(4.1mmol)、三苯基膦(5.1mmol)和偶氮二甲酸二乙酯(5.1mmol)，然后將混合物在0℃攪拌1.5小時。用水稀釋后，將混合物用KHSO4水溶液酸化至pH＜3，然后用AcOEt洗滌。將水層用飽和NaHCO3水溶液堿化至pH＞11，然后用AcOEt萃取。有機(jī)萃取液用水和鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，在真空中濃縮。將殘余物用醚研磨，得到2-(2-苯基-3-吡咯烷-1-基丙基)異吲哚-1，3-二酮，其未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一反應(yīng)。
將2-(2-苯基-3-吡咯烷-1-基丙基)異吲哚-1，3-二酮(3mmol)和肼一水合物(6mmol)在乙醇(10ml)中的溶液回流3.5小時。將反應(yīng)混合物冷卻并經(jīng)硅藻土過濾。將濾液在真空中濃縮，得到標(biāo)題化合物，其未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一反應(yīng)。
C-[1-(4-甲氧基芐基)-4-苯基-哌啶-4-基]-甲基胺二鹽酸鹽
向4-苯基哌啶-4-甲腈(9.0mmol)在MeOH(20mL)中的溶液加入4-甲氧基苯甲醛(14mmol)和三乙酰氧基硼氫化鈉(27mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫攪拌2.5小時，然后在真空中濃縮大部分溶劑。用水稀釋后，將混合物用AcOEt萃取。有機(jī)萃取液用水、飽和NaHCO3水溶液、水和鹽水洗滌，然后經(jīng)MgSO4干燥，過濾，在真空中濃縮。將殘余物溶于醚，然后用HCl的AcOEt溶液處理。過濾收集沉淀，得到1-(4-甲氧基芐基)-4-苯基哌啶-4-甲腈鹽酸鹽，其未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一反應(yīng)；1H NMR(CDCl3)δ2.19(2H，d)，3.10-3.24(4H，m)，3.59(2H，d)，3.84(3H，s)，4.17(2H，d)，6.99(2H，d)，7.35-7.45(3H，m)，7.57-7.62(4H，m)，13.08(1H，br)。
在0℃向LAH(27mmol)在THF(100mL)中的溶液滴加濃H2SO4(14mmol)達(dá)0.5小時，然后在0℃加入1-(4-甲氧基芐基)-4-苯基哌啶-4-甲腈，然后將反應(yīng)混合物回流2小時。冷卻至0℃后，加入Na2SO4-10H2O淬滅反應(yīng)。將所得混合物經(jīng)硅藻土過濾，濾液用HCl的1，4-二噁烷溶液處理，然后在真空中濃縮，得到標(biāo)題化合物，其未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一反應(yīng)。
1-(4-氨基甲基-4-苯基哌啶-1-基)-乙酮鹽酸鹽 在0℃向C-[1-(4-甲氧基芐基)-4-苯基-哌啶-4-基]-甲基胺二鹽酸鹽(3.9mmol)在醚(20mL)和1N NaOH水溶液(20mL)中的溶液加入BOC2O(4.6mmol)，然后將混合物在室溫攪拌18小時。用10％KHSO4水溶液將反應(yīng)混合物酸化至pH＜3，然后將水層和有機(jī)層分離。用NaOH水溶液將酸性水層堿化至pH＞12，然后迅速用AcOEt萃取(x 2)混合物。合并有機(jī)萃取液，用水和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，濃縮，得到[1-(4-甲氧基-芐基)-4-苯基哌啶-4-基甲基]氨基甲酸叔丁基酯，其未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一反應(yīng)。
向[1-(4-甲氧基-芐基)-4-苯基哌啶-4-基甲基]氨基甲酸叔丁基酯(3.2mmol)在CH2Cl2中的溶液加入氯甲酸1-氯乙基酯(4.7mmol)，然后將混合物在室溫攪拌2.5小時。在真空中濃縮大部分溶劑后，將殘余物混懸于醚中并過濾。在真空中濃縮濾液后，將殘余物混懸于己烷中并過濾。在真空中濃縮濾液，得到4-(叔丁氧基羰基氨基甲基)-4-苯基哌啶-1-甲酸1-氯乙基酯，其未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一反應(yīng)。
將4-(叔丁氧基羰基氨基甲基)-4-苯基哌啶-1-甲酸1-氯乙基酯在MeOH中的混合物在60℃攪拌5小時，然后將反應(yīng)混合物在真空中濃縮，得到(4-苯基哌啶-4-基甲基)氨基甲酸叔丁基酯，其未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一反應(yīng)。
在0℃向(4-苯基哌啶-4-基甲基)氨基甲酸叔丁基酯(2.1mmol)在CH2Cl2中的溶液加入乙酸酐(3.1mmol)和三乙胺(3.1mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫攪拌2.5小時，然后在真空中濃縮大部分溶劑。將殘余物混懸于AcOEt后，用水和鹽水洗滌混合物，經(jīng)MgSO4干燥，過濾，在真空中濃縮，得到(1-乙酰基-4-苯基哌啶-4-基甲基)氨基甲酸叔丁基酯，其未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一反應(yīng)。
向(1-乙?；?4-苯基哌啶-4-基甲基)氨基甲酸叔丁基酯在醚中的溶液加入4N HCl的1，4-二噁烷溶液。將反應(yīng)混合物在室溫攪拌1小時，在真空中濃縮。將所得固體用醚洗滌，得到標(biāo)題化合物，其未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一反應(yīng)。
4-(2-氟苯基)-1-甲基哌啶-4-甲腈鹽酸鹽 向(2-氟苯基)乙腈(15mmol)在THF(20mL)中的溶液接連加入二-(2-氯乙基)甲基胺鹽酸鹽(16mmol)、硫酸氫四丁基銨(1.5mmol)和40％NaOH水溶液(20mL)，然后將混合物回流5.5小時。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用水稀釋，然后用THF萃取。有機(jī)萃取液用水(x 2)和鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，在真空中濃縮。將殘余物溶于醚，然后加入HCl的1，4-二噁烷溶液。過濾收集沉淀，得到標(biāo)題化合物，其未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一反應(yīng)；1H NMR(DMSO)δ2.43-2.60(4H，m)，2.86(3H，d)，3.20-3.28(2H，m)，4.02-4.04(2H，m)，7.31-7.40(2H，m)，7.48-7.60(2H，m)，11.16(1H，br)。1，4-二苯基哌啶-4-甲腈 向4-苯基哌啶-4-甲腈鹽酸鹽(6.7mmol)在甲苯(30mL)中的懸液接連加入溴苯(8.0mmol)、叔丁醇鈉(17mmol)、三鄰甲苯基膦(1.3mmol)和三(二亞芐基丙酮)二鈀(0.7mmol)，然后將混合物回流20小時。將反應(yīng)混合物冷卻，用水稀釋，然后用AcOEt萃取。有機(jī)萃取液用水和鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，在真空中濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜純化，得到標(biāo)題化合物；1H NMR(CDCl3)δ2.12-2.20(2H，m)，2.23-2.28(2H，m)，2.94-3.01(2H，m)，3.86(2H，d)，6.83(1H，t)，7.04(2H，d)，7.22-7.28(2H，m)，7.36-7.41(1H，m)，7.45-7.49(2H，m)，7.56-7.59(2H，m)。
C-(1-甲基-4-苯基哌啶-4-基)甲基胺二鹽酸鹽 在0℃向LAH(7.5mmol)在THF(10mL)中的溶液滴加濃H2SO4(3.8mmol)。在0℃攪拌0.5小時后，在0℃加入1-甲基-4-苯基哌啶-4-甲腈鹽酸鹽(2.5mmol)。將反應(yīng)混合物在60℃攪拌6小時。冷卻至0℃后，加入Na2SO4-10H2O淬滅反應(yīng)。將所得混合物經(jīng)硅藻土過濾，在真空中濃縮濾液。將殘余物混懸于醚中并用HCl的1，4-二噁烷溶液處理。過濾收集所得白色固體，得到標(biāo)題化合物，其未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一反應(yīng)。
C-[4-苯基-1-(2，2，2-三氟乙基)哌啶-4-基]甲基胺二鹽酸鹽 在0℃向4-苯基哌啶-4-甲腈鹽酸鹽(6.7mmol)在吡啶(13mL)中的溶液加入三氟乙酸酐(10mmol)，然后將混合物在0℃攪拌1小時。將反應(yīng)混合物用水稀釋，用AcOEt萃取。有機(jī)萃取液接連用水和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，在真空中濃縮，得到4-苯基-1-(2，2，2-三氟乙?；?哌啶-4-甲腈，其未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一反應(yīng)。
在0℃向LAH(40mmol)在THF(40mL)中的溶液滴加濃H2SO4(20mmol)，并將混合物攪拌0.5小時。在0℃向溶液加入4-苯基-1-(2，2，2-三氟乙?；?哌啶-4-甲腈，然后將混合物回流3小時。將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，加入Na2SO4-10H2O淬滅反應(yīng)。將所得混合物經(jīng)硅藻土過濾，在真空中濃縮濾液。將殘余物混懸于醚中并用HCl的1，4-二噁烷溶液處理。過濾收集白色固體，得到標(biāo)題化合物，其未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一反應(yīng)。
C-螺[3.5]壬-7-基-甲基胺鹽酸鹽 在0℃向1，1-二-(2-羥基乙基)-環(huán)丁烷(37.8g，262mmol)和Me3N·HCl(5.136g，53.7mmol)在CH2Cl2(680mL)中的溶液加入Et3N(146mL，1052mmol)。5分鐘后，在同樣溫度加入對甲苯磺酰氯(106.4g，558mmol)。將反應(yīng)混合物在0℃攪拌2小時，然后升至室溫達(dá)2小時。將所得混合物用CH2Cl2(1600mL)稀釋，用飽和NaHCO3水溶液(400mL，水層pH為9)和鹽水(400mL)洗滌。有機(jī)層經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，在真空中濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜純化(硅膠，正己烷∶EtOAc＝2∶1)，得到所需二甲苯磺酸酯。
在0℃、30分鐘內(nèi)向NaH(60％，34.3g，858mmol)在THF(890mL)中的懸液滴加丙二酸二乙酯(160mL)在THF(640mL)中的溶液。劇烈釋放氫氣。在0℃攪拌10分鐘后，白色懸液溶解得到無色溶液，在0℃滴加前一反應(yīng)的二甲苯磺酸酯(110.9g，245mmol)在THF(660mL)中的溶液。在0℃攪拌至室溫達(dá)1小時后，將反應(yīng)混合物(黃色懸液)回流20小時。將混合物冷卻至0℃，然后在0℃加入飽和NH4Cl水溶液(800mL)和水(400mL)。分離各層。水層用EtOAc萃取(500mL x 4)。合并有機(jī)層，用鹽水(500mL)洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，在真空中濃縮。蒸餾除去過量的丙二酸二乙酯，得到所需的螺[3.5]環(huán)壬烷-7，7-二-甲酸二乙酯。
在室溫向螺[3.5]環(huán)壬烷-7，7-二-甲酸二乙酯(62.4g，233mmol)在DMSO(620mL)中的溶液加入LiCl(19.7g)和H2O(4.2mL)。將反應(yīng)混合物在185℃攪拌13小時。將混合物冷卻至0℃，傾入水(1600mL)中。將所得混合物用EtOAc萃取(300mL x 4)。合并萃取液，用水(150mL x 2)洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，在真空中濃縮，得到螺[3.5]環(huán)壬烷-7-甲酸乙酯，其立即進(jìn)行下一反應(yīng)。
在0℃、1小時內(nèi)向LiAlH4(15.6g)在THF(450mL)中的懸液滴加螺[3.5]環(huán)壬烷-7-甲酸乙酯在THF(220mL)中的溶液。將反應(yīng)混合物在0℃攪拌至室溫達(dá)14小時，在0℃用Na2SO4-10H2O淬滅過量的LiAlH4。將混合物在0℃攪拌30分鐘，然后經(jīng)硅藻土墊過濾。濃縮濾液，得到7-(羥基甲基)-螺[3.5]環(huán)壬烷。
在0℃向7-(羥基甲基)-螺[3.5]環(huán)壬烷(11g，71.3mmol)在CH2Cl2(100mL)中的溶液加入Et3N(21.8mL)和Me3N-HCl(682mg)。在0℃向反應(yīng)混合物滴加對甲苯磺酰氯(14.28g)在CH2Cl2(20mL)中的溶液。將反應(yīng)混合物在0℃攪拌30分鐘，然后除去大部分溶劑。用EtOAc(300mL)稀釋殘余物后，將混合物用KHSO4水溶液(80mL x 2)、水(80mL)、飽和NaHCO3水溶液(80mL)、水(80mL)和鹽水(80mL)洗滌。有機(jī)層經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，濃縮，得到相應(yīng)的甲苯磺酸酯，其未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一反應(yīng)。
在室溫向上述甲苯磺酸酯在DMF(100mL)中的溶液加入NaN3(27.5g)。將反應(yīng)混合物在60℃攪拌13小時。用醚(300mL)稀釋后，將混合物用水(80mL x 2)和鹽水(80mL)洗滌。有機(jī)層經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，濃縮，得到7-疊氮基甲基-螺[3.5]環(huán)壬烷，其未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一反應(yīng)。
在室溫向上述疊氮化物在THF(100mL)-H2O(50mL)中的溶液加入Ph3P(20g)。將反應(yīng)混合物在相同溫度攪拌3小時。用EtOAc(200mL)稀釋后，將混合物用1N HCl(80mL x 3)萃取。合并水性萃取液，用CH2Cl2(50mL)洗滌，然后用6N NaOH堿化。所得混合物用醚(100mL x 3)萃取。合并有機(jī)萃取液，經(jīng)K2CO3干燥，過濾。向該濾液加入4N氯化氫的EtOAc溶液，過濾所得鹽酸鹽，用醚洗滌，在55℃減壓下干燥，得到C-螺[3.5]壬-7-基-甲基胺鹽酸鹽。
參考實施例12-氰基-4-(環(huán)己基甲基氨基)嘧啶-5-甲酸(2-嗎啉-4-基-1-苯基乙基)酰胺
在室溫向2-氰基-4-(環(huán)己基甲基氨基)-嘧啶-5-甲酸(0.33mmol，步驟1.4)在DMF(2.0mL)中的溶液加入2-嗎啉-4-基-1-苯基乙基胺(69mg，步驟1.3)、EDCl-H2O(0.50mmol)和HOAt(0.50mmol)。在室溫攪拌24小時后，用AcOEt稀釋反應(yīng)混合物。將混合物用水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，在真空中濃縮。所得殘余物經(jīng)RP-HPLC純化，得到標(biāo)題化合物；1H NMR(DMSO)δ0.6-1.08(m，2H)，1.20-1.35(m，3H)，1.65-1.78(m，6H)，2.48-2.53(m，2H)，2.60-2.62(m，2H)，2.87-2.93(m，2H)，3.31-3.35(m，1H)，3.36-3.44(M，1H)，3.60-3.68(m，4H)，5.29-5.35(m，1H)，7.34-7.36(m，1H)，7.43-7.47(m，2H)，7.50-7.52(m，2H)，8.86(s，1H)，9.00-9.04(m，1H)，9.21(d，1H)。
步驟1.1(2-嗎啉-4-基-2-氧代-1-苯基乙基)氨基甲酸叔丁基酯 在室溫向叔丁氧羰基氨基苯基乙酸(4.0mmol)在CH2Cl2(8.0mL)中的溶液加入嗎啉(4.0mmol)、EDCl-H2O(4.8mmol)和DMAP(0.40mmol)。在室溫攪拌24小時后，加入水淬滅反應(yīng)。用AcOEt萃取將混合物。合并有機(jī)萃取液，用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，在真空中濃縮。所得固體用醚-正己烷研磨，得到標(biāo)題化合物；1H NMR(CDCl3)δ1.41(s，9H)，3.08-3.12(m，1H)，3.20-3.28(m，1H)，3.39-3.45(m，1H)，3.49-3.60(m，3H)，3.66-3.76(m，2H)，5.54(d，1H)，6.01(d，1H)，7.29-7.36(m，5H)。
步驟1.22-氨基-1-嗎啉-4-基-2-苯基乙酮 在0℃向(2-嗎啉-4-基-2-氧代-1-苯基乙基)氨基甲酸叔丁基酯(3.0mmol)在CH2Cl2(6.0mL)中的溶液加入TFA(2.0mL)。在室溫攪拌24小時后，用飽和NaHCO3水溶液將反應(yīng)混合物堿化至pH 8。用CH2Cl2萃取混合物，然后合并有機(jī)萃取液，經(jīng)Na2SO4干燥，在真空中濃縮，得到標(biāo)題化合物；1H NMR(CDCl3)δ2.02(s，2H)，3.09-3.14(m，1H)，3.20-3.25(m，1H)，3.34-3.40(m，1H)，3.46-3.60(m，3H)，3.65-3.71(m，1H)，3.74-3.80(m，1H)，7.27-7.34(m，5H)。
步驟1.32-嗎啉-4-基-1-苯基乙基胺 在0℃向LAH(6.1mmol)在THF(25mL)中的攪拌懸液滴加2-氨基-1-嗎啉-4-基-2-苯基乙酮(670mmol)在THF(5mL)中的溶液。將反應(yīng)混合物回流2小時，然后在0℃加入Na2SO4-10H2O淬滅反應(yīng)。在室溫攪拌0.5小時后，所得混合物經(jīng)硅藻土過濾，在真空中濃縮濾液，得到標(biāo)題化合物，其未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一反應(yīng)。
步驟1.42-氰基-4-(環(huán)己基甲基氨基)-嘧啶-5-甲酸 在0℃向2，4-二氯-嘧啶-5-羰基氯(8.80mmol)在CH2Cl2(30mL)中的溶液接連加入MeOH(9.60mmol)和i-Pr2NEt(9.80mmol)。在0℃攪拌15分鐘后，在0℃向反應(yīng)混合物接連加入環(huán)己基甲基胺鹽酸鹽(8.50mmol)和三乙胺(24.0mmol)。將反應(yīng)混合物在0℃攪拌至室溫達(dá)50分鐘，然后真空濃縮大部分溶劑。用AcOEt稀釋殘余物后，將混合物用KHSO4水溶液、水、飽和NaHCO3水溶液、水和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，在真空中濃縮。殘余物未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一反應(yīng)。
在室溫向上述殘余物在DMSO(10mL)中的溶液接連加入KCN(14.2mmol)在水(2mL)中的溶液和DABCO(2.80mmol)。在同樣溫度攪拌1小時后，用AcOEt稀釋反應(yīng)混合物。將所得混合物用水(x 2)和鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，在真空中濃縮。所得殘余物經(jīng)硅膠柱色譜純化(正己烷∶AcOEt＝5∶1)，得到氰基嘧啶，其未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一反應(yīng)。
在0℃向上述氰基嘧啶在THF(20mL)中的溶液加入LiOH-H2O(19.0mmol)在水(10mL)中的溶液。在室溫攪拌1小時后，加入KHSO4水溶液淬滅反應(yīng)。過濾所得沉淀的固體，用水洗滌，用少量的CH3CN研磨，得到標(biāo)題化合物。
參考實施例24-[2-(6-氯-2甲磺?；奏?4-基氧基)乙基]-哌啶-1-甲酸叔丁基酯 在0℃向4-[2-(6-氯-2-甲基硫基嘧啶-4-基氧基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯粗品(4.7g，步驟參考實施例2.1)在CH2Cl2(100mL)中的溶液加入m-CPBA(40mmol)。在室溫攪拌3小時后，在0℃用10％Na2SO3淬滅反應(yīng)混合物。分離有機(jī)層，用飽和NaHCO3洗滌兩次，經(jīng)MgSO4干燥。有機(jī)層在真空中蒸發(fā)。將所得殘余物溶于正己烷∶AcOEt(1∶1)，向混合物加入硅膠。過濾后，在真空中蒸發(fā)濾液，得到4-[2-(6-氯-2-甲磺?；奏?4-基氧基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯粗品。
參考實施例2步驟2.04-[2-(6-氯-2-甲基硫基嘧啶-4-基氧基)-乙基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯 在0℃將NaH(6.4mmol)加至4-(2-羥基-乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(5.3mmol)在THF(10mL)中的溶液中。在室溫攪拌30分鐘后，向反應(yīng)混合物滴加4，6-二氯-2-甲基硫基-嘧啶(5.3mmol)在THF(10mL)中的溶液。將反應(yīng)混合物在室溫攪拌12小時，用H2O淬滅。將混合物用AcOEt萃取。有機(jī)層用H2O洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，在真空中蒸發(fā)，得到4-[2-(6-氯-2-甲基硫基嘧啶-4-基氧基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯粗品。
參考實施例2步驟2.14-[2-(6-氯-2-氰基嘧啶-4-基氧基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯 在室溫向4-[2-(6-氯-2-甲磺酰基嘧啶-4-基氧基)乙基]-哌啶-1-甲酸叔丁基酯粗品(4.9g)和NaCN(14mmol)在CH2Cl2∶H2O(50mL，4∶1)中的溶液加入TBAB(四丁基溴化銨)(0.06mmol)。在同樣溫度攪拌10小時后，向反應(yīng)混合物加入TBAB(0.19mml)。將反應(yīng)混合物在室溫攪拌2小時，加入H2O。分離有機(jī)層，經(jīng)MgSO4干燥并在真空中蒸發(fā)。所得殘余物經(jīng)硅膠柱色譜純化，得到4-[2-(6-氯-2-氰基嘧啶-4-基氧基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯；1H-NMR(CDCl3)，δ1.14-1.28(2H，m)，1.45(9H，s)，1.56-1.78(7H，m)，2.69(2H，t)，4.11(2H，m)，4.49(2H，t)，6.93(1H，s)。
參考實施例2步驟2.24-(2-{2-氰基-6-[(螺[3.5]壬-7-基甲基)氨基]嘧啶-4-基氧基}乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯 在室溫向4-[2-(6-氯-2-氰基嘧啶-4-基氧基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯(0.82mmol)和C-螺[3.5]壬-7-基甲基胺(0.86mmol)在CH3CN(10mL)中的溶液加入K2CO3(2.2mmol)。在80℃攪拌12小時后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用AcOEt稀釋。有機(jī)層用H2O洗滌兩次，經(jīng)MgSO4干燥并在真空中蒸發(fā)，得到4-(2-{2-氰基-6-[(螺[3.5]壬-7-基甲基)氨基]嘧啶-4-基氧基}乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯粗品。
實施例2至57 重復(fù)上述方法，使用適合的原料和條件，獲得以下化合物。











實施例582-氰基-4-[(螺[2.5]辛-6-基甲基)氨基]嘧啶-5-甲酸[5-(1-甲基哌啶-4-基氧基)聯(lián)苯基-2-基]酰胺 在0℃向5-(1-甲基哌啶-4-基氧基)聯(lián)苯基-2-基胺(0.27mmol，步驟58.2)和2-氰基-4-[(螺[2.5]辛-6-基甲基)氨基]嘧啶-5-甲酸(0.33mmol)在DMF(2mL.)中的溶液加入EDCl-HCl(0.54mmol)和HOAt(0.54mmol)。在環(huán)境溫度攪拌過夜后，通過RP-HPLC純化反應(yīng)混合物，得到標(biāo)題化合物，為白色固體；1H NMR(CDCl3)，δ0.18-0.21(2H，m)，0.27-0.30(2H，m)，0.90-0.94(2H，m)，1.14-1.25(2H，m)，1.58-1.78(5H，m)，1.85-1.92(2H，m)，2.02-2.06(2H，m)，2.32(3H，s)，2.70(2H，br s)，3.41-3.44(2H，t)，4.35(1H，m)，6.89(1H，d)，6.97(1H，dd)，7.35-7.37(2H，m)，7.45-7.52(3H，m)，7.65(1H，s)，7.92(1H，s)，8.06(1H，d)，8.90(1H，s)。
步驟58.15-氟-2-硝基聯(lián)苯 在0℃向5-氟-2-硝基苯酚(10.0mmol)和三乙胺(12.0mmol)在CH2Cl2(100mL)中的溶液加入三氟甲磺酸酐(11.0mmol)。在同樣溫度、N2下攪拌0.5小時后，用H2O稀釋反應(yīng)混合物。將混合物分別用CH2Cl2和AcOEt萃取(x 2)。合并有機(jī)萃取液，經(jīng)Na2SO4干燥，經(jīng)硅藻土和硅膠短墊過濾，用AcOEt洗滌。在真空中濃縮濾液，得到三氟甲磺酸5-氟-2-硝基苯基酯，為黃色油。
在室溫向三氟甲磺酸5-氟-2-硝基苯基酯(4.0mmol)在DME(10mL)中的溶液加入苯基代硼酸(4.8mmol)、Pd(PPh3)4(0.4mmol)和K3PO4(3.2mmol)。在80℃攪拌6小時后，將反應(yīng)混合物經(jīng)硅藻土過濾，濾餅用AcOEt洗滌。將濾液用水稀釋，用醚萃取(x 2)。合并有機(jī)萃取液，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，在真空中濃縮。殘余物經(jīng)硅膠柱色譜純化(正己烷∶AcOEt＝6∶1)，得到標(biāo)題化合物；1H NMR(CDCl3)，δ7.12-7.19(2H，m)，7.29-7.32(2H，m)，7.42-7.45(3H，t)，7.94(1H，dd)。
步驟58.25-(1-甲基哌啶-4-基氧基)聯(lián)苯基-2-基胺 在室溫向5-氟-2-硝基聯(lián)苯(0.86mmol)在甲苯/KOH水溶液(2mL/2mL)中的溶液加入1-甲基哌啶-4-醇(1.1mmol)和TBAB(0.17mmol)。在70℃攪拌過夜后，將反應(yīng)混合物用AcOEt和水稀釋，用AcOEt萃取(x 2)。合并有機(jī)萃取液，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，在真空中濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜純化(CH2Cl2∶MeOH＝10∶1)，得到1-甲基-4-(6-硝基聯(lián)苯基-3-基氧基)哌啶，為黃色固體。
在N2氣氛下向1-甲基-4-(6-硝基聯(lián)苯基-3-基氧基)哌啶(0.63mmol)在EtOH(5mL)中的溶液加入5％披鈀活性炭(50mg)。將反應(yīng)混合物在室溫于H2下劇烈攪拌2.5小時，然后經(jīng)硅藻土過濾(用AcOEt沖洗)。將濾液在真空中濃縮為標(biāo)題化合物，為褐色油；1H NMR(CDCl3)，δ1.79-1.87(2H，m)，1.96-2.01(2H，m)，2.25-2.31(2H，m)，2.29(3H，s)，2.70(2H，brs)，3.52(2H，m)，4.15-4.18(1H，m)，6.70(1H，d)，6.76-6.80(2H，m)，7.32-7.38(1H，m)，7.42-7.45(4H，m)。
實施例59至65 重復(fù)上述方法，使用適合的原料和條件，獲得以下化合物。



實施例662-氰基-4-[(螺[2.5]辛-6-基甲基)氨基]嘧啶-5-甲酸(4-芐基-1-異丙基哌啶-4-基)酰胺 在0℃向4-氨基-4-芐基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(0.38mmol，步驟66.1)和2-氰基-4-[(螺[2.5]辛-6-基甲基)氨基]嘧啶-5-甲酸(0.38mmol)在DMF(1.3mL)中的溶液加入HOAt(0.51mmol)和EDCl-HCl(0.51mmol)。升至室溫并攪拌15小時后，將反應(yīng)混合物用AcOEt稀釋，用1N KHSO4水溶液、飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，在真空中濃縮。殘余物經(jīng)硅膠柱色譜純化，得到4-芐基-4-({2-氰基-4-[(螺[2.5]辛-6-基甲基)-氨基]-嘧啶-5-羰基}氨基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯。
在0℃向4-芐基-4-({2-氰基-4-[(螺[2.5}辛-6-基甲基)氨基]-嘧啶-5-羰基}氨基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(0.14mmol)在CH2Cl2(1.5mL)中的溶液加入TFA(0.4mL)。在室溫攪拌0.5小時后，在真空中濃縮反應(yīng)混合物。將殘余物溶于DMF(1.5mL)，在0℃用K2CO3(0.35mmol)和異丙基碘(0.28mmol)處理。在室溫攪拌5小時后，將反應(yīng)混合物用AcOEt稀釋，用H2O和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，在真空中濃縮。殘余物經(jīng)RP-HPLC純化，得到標(biāo)題化合物；1H NMR(CDCl3)，δ0.18-0.26(2H，m)，0.27-0.34(2H，m)，0.91-0.99(2H，m)，1.01-1.13(6H，s)，1.17-1.33(2H，m)，1.63-1.97(7H，m)，2.15-2.40(4H，m)，2.64-2.90(3H，m)，3.15(2H，s)，3.46(2H，dd)，5.28(1H，s)，7.02-7.10(2H，m)，7.20-7.30(3H，m)，8.05(1H，s)，8.70(1H，bs)。
步驟66.14-氨基-4-芐基-哌啶-1-甲酸叔丁基酯 在室溫向4-芐基-哌啶-1，4-二甲酸單叔丁基酯(0.65mmol)在1，4-二噁烷(2mL)中的溶液加入Et3N(0.71mmol)和DPPA(0.71mmol)。升至100℃并攪拌2小時后，將反應(yīng)混合物用AcOEt稀釋。有機(jī)層用飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾，在真空中濃縮。將殘余物溶于THF(4mL)，在室溫加入6N NaOH水溶液(0.22mL)。攪拌4小時后，將反應(yīng)混合物用CH2Cl2稀釋，用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾，在真空中濃縮。殘余物經(jīng)硅膠柱色譜純化，得到標(biāo)題化合物；1H NMR(CDCl3)，δ1.18(2H，bs)，1.28-1.37(2H，m)，1.46(9H，s)，1.51-1.64(2H，m)，2.66(2H，s)，3.20(2H，dd)，3.74(2H，bd)，7.13-7.19(2H，m)，7.21-7.34(3H，m)。
實施例67至72 重復(fù)上述方法，使用適合的原料和條件，獲得以下化合物。


實施例73(R)-2-氰基-4-(甲基螺[2.5]辛-6-基甲基氨基)嘧啶-5-甲酸(2-苯基-1-吡咯烷-1-基甲基乙基)酰胺 在室溫向2-氰基-4-(甲基螺[2.5]辛-6-基甲基氨基)嘧啶-5-甲酸粗品(82mg，步驟73.4)在DMF(1.5mL)中的溶液加入(R)-2-苯基-1-吡咯烷-1-基甲基乙基胺(0.3mmol)、EDCl-HCl(0.4mmol)和HOAt(0.4mmol)。將反應(yīng)混合物攪拌24小時，加入水淬滅反應(yīng)。用AcOEt萃取混合物，有機(jī)萃取液經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，在真空中濃縮。所得殘余物經(jīng)RP-HPLC純化，得到標(biāo)題化合物；MS(M+1)+488，Rf(溶劑)0.13(CH2Cl2∶MeOH＝10∶1)。
步驟73.12，4-二氯嘧啶-5-甲酸烯丙基酯 在0℃向2，4-二氯嘧啶-5-羰基氯(5.1mmol)在THF(10mL)中的溶液加入烯丙基醇(5.1mmol)和DIEA(N，N-二異丙基乙基胺)(6.1mmol)。在0℃攪拌3.5小時后，過濾反應(yīng)混合物，在真空中濃縮濾液。所得殘余物經(jīng)硅膠柱色譜純化，得到標(biāo)題化合物；1H NMR(CDCl3)δ4.87-4.89(m，2H)，5.35-5.48(m，2H)，5.97-6.08(M，1H)，9.05(s，1H)。
步驟73.22-氯-4-(甲基螺[2.5]辛-6-基甲基氨基)嘧啶-5-甲酸烯丙基酯 在室溫向2，4-二氯嘧啶-5-甲酸烯丙基酯(1.6mmol)在二噁烷(6mL)中的溶液加入Et3N(2.4mmol)。向反應(yīng)混合物滴加甲基-螺[2.5]辛-6-基甲基胺(1.6mmol)在二噁烷(2.0mL)中的溶液。將反應(yīng)混合物在室溫攪拌12小時，加入水淬滅反應(yīng)。用CH2Cl2萃取混合物。有機(jī)萃取液經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，在真空中濃縮。所得殘余物經(jīng)硅膠柱色譜純化，得到標(biāo)題化合物(370mg)；1H NMR(CDCl3)δ0.15-0.19(m，2H)，0.25-0.29(m，2H)，0.87-0.91(m，2H)，1.08-1.20(m，2H)，1.60-1.85(m，5H)，2.95(s，3H)，3.59(d，2H)，4.77-4.78(m，2H)，5.29-6.08(m，1H)，8.48(s，1H)。
步驟73.32-氰基-4-(甲基螺[2.5]辛-6-基甲基氨基)嘧啶-5-甲酸烯丙基酯 在室溫向2-氯-4-(甲基螺[2.5]辛-6-基甲基氨基)嘧啶-5-甲酸烯丙基酯(1.1mmol)在DMSO(2.0mL)中的溶液加入KCN(1.6mmol)、DABCO(0.3mmol)和H2O(0.2mL)。將反應(yīng)混合物在室溫攪拌3小時，加入水淬滅反應(yīng)。用AcOEt萃取混合物。有機(jī)萃取液用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，在真空中濃縮。所得殘余物經(jīng)硅膠柱色譜純化，得到標(biāo)題化合物。
步驟73.42-氰基-4-(甲基螺[2.5]辛-6-基甲基氨基)嘧啶-5-甲酸 在室溫向2-氰基-4-(甲基螺[2.5]辛-6-基甲基氨基)嘧啶-5-甲酸烯丙基酯(0.87mmol)在THF(8.7mL)中的溶液加入Pd(PPh3)4(0.087mmol)和嗎啉(1.7mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫攪拌0.5小時，加入水和飽和NaHCO3水溶液淬滅反應(yīng)。用醚洗滌混合物。用飽和KHSO4水溶液將水層酸化至pH 2。用AcOEt萃取混合物。有機(jī)萃取液用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，在真空中濃縮，得到標(biāo)題化合物。
實施例74(R)-2-氰基-4-(螺[2.5]辛-6-基甲基)嘧啶-5-甲酸(2-苯基1-吡咯烷-1-基甲乙基)酰胺 在室溫向2-氰基-4-(螺[2.5]辛-6-基甲基)嘧啶-5-甲酸粗品(22mg，步驟74.5)在DMF(1.5mL)中的溶液加入(R)-2-苯基-1-吡咯烷-1-基甲基乙基胺(0.083mmol)、EDCl-H2O(0.11mmol)和HOAt(0.11mmol)。將反應(yīng)混合物攪拌24小時，加入H2O淬滅反應(yīng)。用AcOEt萃取混合物，有機(jī)萃取液經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，在真空中濃縮。所得殘余物經(jīng)RP-HPLC純化，得到標(biāo)題化合物；MS(M+1)+474，Rf(溶劑)0.63(CH2Cl2∶MeOH＝10∶1)。
步驟74.12，4-二氯嘧啶-5-甲酸 在室溫向2，4-二氯嘧啶-5-羰基氯(24mmol)在THF(24mL)中的溶液加入H2O(0.64mL)。將反應(yīng)混合物在室溫攪拌0.83小時，然后用H2O稀釋。用AcOEt萃取混合物。有機(jī)萃取液用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，在真空中濃縮，得到標(biāo)題化合物粗品；1H NMR(CDCl3)δ6.80(brs，1H)，9.18(s，1H)。
步驟74.22-氯-4-(螺[2.5]辛-6-基甲氧基)嘧啶-5-甲酸 在0℃向2，4-二氯嘧啶-5-甲酸(440mg)在THF(4.0mL)中的溶液加入THF(1.0mL)中的t-BuOK(叔丁醇鉀)(5.7mmol)和螺[2.5]辛-6-基甲醇(2.3mmol)。在0℃攪拌1.5小時后，加入飽和NaHCO3水溶液淬滅反應(yīng)。將混合物用醚洗滌。將水層用飽和KHSO4水溶液酸化至pH 2，然后用AcOEt萃取。有機(jī)萃取液用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，在真空中濃縮，得到標(biāo)題化合物粗品。
步驟74.32-氯-4-(螺[2.5]辛-6-基甲氧基)嘧啶-5-甲酸烯丙基酯 在室溫向2-氯-4-(螺[2.5]辛-6-基甲氧基)嘧啶-5-甲酸(490mg)在DMF(2.9mL)中的溶液加入K2CO3(4.4mmol)和烯丙基溴(7.4mmol)。在50℃攪拌0.5小時后，將反應(yīng)混合物冷卻，用H2O稀釋。用AcOEt萃取混合物。有機(jī)萃取液用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，在真空中濃縮。所得殘余物經(jīng)硅膠柱色譜純化，得到標(biāo)題化合物粗品。
步驟74.42-氰基-4-(螺[2.5]辛-6-基甲氧基)嘧啶-5-甲酸烯丙基酯 在室溫向2-氯-4-(螺[2.5]辛-6-基甲氧基)嘧啶-5-甲酸烯丙基酯(0.62mmol)在DMSO(1.0mL)中的溶液加入KCN(0.94mmol)、DABCO(0.19mmol)和H2O(0.10mL)。將反應(yīng)混合物在室溫攪拌0.5小時，加入水淬滅反應(yīng)。用AcOEt萃取混合物。有機(jī)萃取液用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，在真空中濃縮。所得殘余物經(jīng)硅膠柱色譜純化，得到標(biāo)題化合物；1H NMR(CDCl3)δ0.19-0.20(m，2H)，0.21-0.33(m，2H)，0.91-0.96(m，2H)，1.23-1.33(m，3H)，1.72-1.85(m，4H)，4.38(d，2H)，4.84(d，2H)，5.31-5.45(m，1H)，9.01(s，1H)。
步驟74.52-氰基-4-(螺[2.5]辛-6-基甲氧基)嘧啶-5-甲酸 在室溫向2-氰基-4-(螺[2.5]辛-6-基甲氧基)嘧啶-5-甲酸烯丙基酯(0.096mmol)在THF(1.0mL)中的溶液加入Pd(PPh3)4(四(三苯基-膦)鈀)(0.0096mmol)和嗎啉(0.19mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫攪拌0.5小時，加入飽和NaHCO3水溶液淬滅反應(yīng)。用醚萃取混合物。將水層用飽和KHSO4水溶液酸化至pH 2。用AcOEt萃取混合物。有機(jī)萃取液用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，在真空中濃縮，得到標(biāo)題化合物粗品。
實施例752-氰基-4-[2-(1-甲基哌啶-4-基)乙氧基]-6-[(螺[3.5]壬-7-基-甲基)氨基]嘧啶-5-甲酸甲基酰胺 在0℃向4-[2-(1-叔丁氧羰基哌啶-4-基)乙氧基]-2-氰基-6-[(螺[3.5]壬-7-基甲基)氨基]嘧啶-5-甲酸(0.23mmol，步驟75.4)和2M甲基胺(0.30mmol)在DMF(1mL)中的溶液加入EDCl-HCl(0.34mmol)和HoAt(0.34mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫攪拌1小時。用AcOEt稀釋后，將混合物用H2O和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，濃縮。殘余物經(jīng)硅膠柱色譜純化，得到4-(2-{2-氰基-5-甲基氨基甲?；?6-[(螺[3.5]壬-7-基甲基)氨基]-嘧啶-4-基氧基}乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯，為白色固體；1H-NMR(CDCl3)，δ0.98-1.07(2H，m)，1.14-1.85(20H，m)，146(9H，s)，2.70(2H，t)，2.93(3H，d)，3.33(2H，t)，4.05-4.15(2H，m)，4.54(2H，t)，7.80-7.85(1H，m)，10.10-10.15(1H，m)。
在室溫向4-(2-{2-氰基-5-甲基氨基甲酰基-6-[(螺[3.5]壬-7-基-甲基)氨基]-嘧啶-4-基氧基}乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(0.25mmol)在CH2Cl2(3mL)中的溶液加入TFA(0.70mL)。在同樣溫度攪拌0.5小時后，將反應(yīng)混合物在真空中蒸發(fā)，直接用于下一反應(yīng)。在室溫向粗產(chǎn)物在THF(5mL)中的溶液加入HCHO水溶液(0.10mL)。在同樣溫度攪拌0.5小時后，在0℃向反應(yīng)混合物加入1M NaBH3CN溶液(0.10mmol)。將反應(yīng)混合物升至室溫，進(jìn)一步攪拌0.5小時。用AcOEt稀釋后，將有機(jī)層用H2O洗滌兩次，在真空中蒸發(fā)。殘余物經(jīng)RP-HPLC純化，得到2-氰基-4-[2-(1-甲基哌啶-4-基)乙氧基]-6-[(螺[3.5]壬-7-基甲基)氨基]嘧啶-5-甲酸甲基酰胺(NVP-TAF059)，為白色固體，1H-NMR(CDCl3)，δ0.97-1.07(2H，m)，1.19-1.26(2H，m)，1.43-1.88(18H，m)，2.14-2.17(2H，m)，2.42(3H，S)，2.93(3H，d)，3.05-3.08(2H，m)，3.32(2H，t)，4.54(2H，t)，7.81(1H，br d)，10.14(1H，brt)。
步驟75.14-[2-(1-叔丁氧羰基哌啶-4-基)乙氧基]-6-氯-2-甲硫基-嘧啶-5-甲酸烯丙基酯 在0℃向NaH(9.0mmol)和N-BOC-4-哌啶乙醇(4.9mmol)在無水THF(15mL)中的混合物滴加4，6-二氯嘧啶-2-甲硫基-5-甲酸(3.8mmol)在無水THF中的溶液，將混合物在室溫攪拌1.5小時。將混合物用AcOEt稀釋，用H2O和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，濃縮，得到加合產(chǎn)物(1.6g)，其未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一反應(yīng)。
在室溫向上述產(chǎn)物(1.5mmol)在DMF(7mL)中的溶液加入烯丙基溴(7.5mmol)和K2CO3(17.4mmol)。在50℃攪拌1小時后，將混合物用AcOEt稀釋。有機(jī)層用水和鹽水洗滌。經(jīng)MgSO4干燥后，過濾混合物，在減壓下濃縮。殘余物直接用于下一反應(yīng)。1H-NMR(CDCl3)，δ1.12-1.73(9H，m)，1.46(9H，s)，2.54(3H，s)，2.67-2.69(2H，m)，4.08-4.13(2H，m)，4.47(2H，t)，4.80(2H，dt)，5.30(1H，brd)，5.43(1H，m)，5.98(1H，ddt)。
步驟75.24-[2-(1-叔丁氧羰基哌啶-4-基)乙氧基]6-氯-2-甲磺酰基-嘧啶-5-甲酸烯丙基酯 按照參考實施例2步驟2.1所述的方法，在0℃將4-[2-(1-叔丁氧羰基哌啶-4-基)乙氧基]-2，6-二氯嘧啶-5-甲酸烯丙基酯(3.0mmol)用m-CPBA(8.9mmol)在CH2Cl2(10mL)中處理。常規(guī)處理后，將粗產(chǎn)物經(jīng)硅膠色譜純化，得到4-[2-(1-叔丁氧羰基哌啶-4-基)乙氧基]6-氯-2-甲磺?；奏?5-甲酸烯丙基酯，為無色油。1H-NMR(CDCl3)，δ1.12-1.73(9H，m)，1.46(9H，s)，2.67-2.69(2H，m)，3.20(3H，s)，4.08-4.11(2H，m)，4.46(2H，t)，4.87(2H，dt)，5.33-5.37(1H，m)，5.42-5.47(1H，m)，5.98(1H，ddt)。
步驟75.34-[2-(1-叔丁氧羰基哌啶-4-基)乙氧基]-6-氯-2-氰基嘧啶-5-甲酸烯丙基酯 按照參考實施例2所述合成方法，將4-[2-(1-叔丁氧羰基哌啶-4-基)乙氧基]-6-氯-2-甲磺?；奏?5-甲酸烯丙基酯(1.8mmol)在CH2Cl2(5mL)中的溶液用NaCN(2.2mmol)和四正丁基溴化銨(0.10mmol)在水(2mL)中的溶液處理0.5小時。常規(guī)處理后，將粗產(chǎn)物經(jīng)硅膠色譜純化，得到4-[2-(1-叔丁氧羰基哌啶-4-基)乙氧基]-6-氯-2-氰基嘧啶-5-甲酸烯丙基酯，為無色油；1H-NMR(CDCl3)，δ1.12-1.73(9H，m)，1.48(9H，s)，2.68(2H，brt)，4.05-4.09(2H，m)，4.55(2H，t)，4.87(2H，dt)，5.33-5.37(1H，m)，5.41-5.47(1H，m)，5.98(1H，ddt)。
步驟75.44-[2-(1-叔丁氧羰基哌啶-4-基)乙氧基]2-氰基-6-[(螺[3.5]壬-7-基甲基)氨基]嘧啶-5-甲酸 在室溫向4-[2-(1-叔丁氧羰基哌啶-4-基)乙氧基]-6-氯-2-氰基嘧啶-5-甲酸烯丙基酯(1.1mmol)和C-螺[3.5]壬-7-基-甲基胺(1.4mmol)在C2H5CN(10mL)中的溶液加入三乙胺(2.8mmol)。在80℃攪拌1小時后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用AcOEt稀釋。有機(jī)層用H2O、KHSO4水溶液和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，在真空中蒸發(fā)，其未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一反應(yīng)。
向4-[2-(1-叔丁氧羰基哌啶-4-基)乙氧基]-2-氰基-6-[(螺[3.5]壬-7-基甲基)氨基]嘧啶-5-甲酸烯丙基酯粗品(1.1mmol)在THF(5mL)中的溶液接連加入嗎啉(3.4mmol)和Pd(PPh3)4(0.06mmol)。在同樣溫度攪拌0.5小時后，將反應(yīng)混合物用AcOEt稀釋。有機(jī)層用H2O洗滌，在真空中蒸發(fā)。殘余物經(jīng)硅膠柱色譜純化，得到4-[2-(1-叔丁氧羰基哌啶-4-基)乙氧基]-2-氰基-6-[(螺[3.5]壬-7-基甲基)氨基]嘧啶-5-甲酸，為黃灰色固體；1H-NMR(CDCl3)，δ0.97-1.08(2H，m)，1.15-1.29(5H，m)，1.48(9H，s)，1.48-1.86(15H，m)，2.69(2H，t)，3.39(2H，t)，4.11(2H，m)，4.66(2H，t)，9.42(1H，brt)。
實施例762-氰基-4-[2-(1-甲基哌啶-4-基)乙氧基]-6[(螺[2.5]辛-6-基甲基)氨基]嘧啶-5-甲酸芐基酰胺 在0℃向4-(2-{5-芐基氨基甲酰基-2-氰基-6-[(螺[2.5]辛-6-基甲基)氨基]-嘧啶-4-基氧基}乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(0.68mmol)在CH2Cl2(10mL)中的溶液加入TFA(2mL)。在0℃、N2氣氛下攪拌2小時后，將混合物濃縮，在真空中干燥，得到2-氰基-4-(2-哌啶-4-基-乙氧基)-6-[(螺[2.5]辛-6-基甲基)氨基]嘧啶-5-甲酸芐基酰胺，為黃色固體。1H-NMR(CDCl3)，δ0.17-0.30(4H，m)，0.89-0.93(2H，m)，1.00-1.11(2H，m)，1.14-1.24(2H，m)，1.29-1.38(1H，m)，1.51-1.81(9H，m)，2.41-2.48(2H，m)，2.99-3.02(2H，m)，3.42(2H，t)，4.45(2H，t)，4.56(2H，d)，7.29-7.39(5H，m)，8.17(1H，t)，10.16(1H，t)。
向2-氰基-4-(2-哌啶-4-基-乙氧基)-6-[(螺[2.5]辛-6-基甲基)氨基]-嘧啶-5-甲酸芐基酰胺(0.19mmol)在THF(2mL)中的溶液加入甲醛溶液(100μL)，將所得溶液在室溫攪拌0.5小時。冷卻至0℃后，滴加1M NaBH3CN在THF中的溶液，并將反應(yīng)混合物在室溫攪拌2小時。加入H2O淬滅反應(yīng)，用AcOEt萃取兩次。有機(jī)層經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，濃縮。殘余物經(jīng)硅膠柱純化，得到2-氰基-4-[2-(1-甲基-哌啶-4-基)乙氧基]-6-[(螺[2.5]辛-6-基甲基)氨基]嘧啶-5-甲酸芐基酰胺，為無色油；1H-NMR(CDCl3)，δ0.17-0.30(4H，m)，0.89-0.94(2H，m)，1.14-1.29(3H，m)，1.40-1.50(2H，m)，1.58-1.78(9H，m)，1.95-2.01(3H，m)，2.38(3H，S)，2.95-2.98(2H，m)，3.42(2H，t)，4.46(2H，t)，4.56(2H，d)，7.31-7.39(5H，m)，8.13(1H，t)，10.16(1H，t)。
步驟76.14，6-二氯-2-甲硫基嘧啶-5-甲酸芐基酰胺 在0℃向4，6-二氯-2-甲硫基嘧啶-5-甲酸(2.1mmol)在CH2Cl2(20mL)中的懸液加入草酰氯(4.2mmol)和一滴DMF。在室溫、N2氣氛下攪拌3小時后，將反應(yīng)混合物濃縮，在真空中干燥，得到4，6-二氯-2-甲硫基嘧啶-5-羰基氯，為黃色晶體。
在0℃向4，6-二氯-2-甲硫基嘧啶-5-羰基氯在THF(15mL)中的溶液加入三乙胺(2.3mmol)和芐基胺(2.5mmol)。在室溫攪拌2小時后，將反應(yīng)混合物用AcOEt和H2O稀釋。將混合物用AcOEt萃取兩次。有機(jī)層經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，濃縮。殘余物經(jīng)硅膠柱色譜純化，得到4，6-二氯-2-甲硫基嘧啶-5-甲酸芐基酰胺，為白色固體。1H-NMR(CDCl3)，δ2.57(3H，s)，4.66(2H，d)，6.08(1H，br s)，7.31-7.35(2H，m)，7.36-7.38(3H，m)。
步驟76.24-[2-(5-芐基氨基甲?；?6-氯-2-甲硫基嘧啶-4-基氧基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯 在0℃、N2下向4，6-二氯-2-甲硫基嘧啶-5-甲酸芐基酰胺(3mmol)在THF(20mL)中的溶液加入KOtBu(3.6mmol)。在0℃攪拌20分鐘后，在-78℃將以上混合物滴加至4-(2-羥基乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(3.3mmol)在THF(20mL)中的溶液。將所得混合物在2.5小時內(nèi)逐漸升溫至-30℃。加入H2O淬滅反應(yīng)。將混合物用AcOEt萃取兩次。有機(jī)層經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，濃縮，得到4-[2-(5-芐基氨基甲?；?6-氯-2-甲硫基嘧啶-4-基氧基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯，為白色固體；1H-NMR(CDCl3)，δ1.07-1.17(2H，m)，1.48(9H，s)，1.62-1.70(2H，m)，2.54(3H，s)，2.64(2H，br t)，4.06(2H，m)，4.45(2H，t)，4.64(2H，d)，6.06(1H，t)，7.30-7.34(2H，m)，7.35-7.36(3H，m)。
步驟76.34-[2-(5-芐基氨基甲?；?6-氯-2-氰基嘧啶-4-基氧基)乙基]-哌啶-1-甲酸叔丁基酯 在0℃向4-[2-(5-芐基氨基甲酰基-6-氯-2-甲硫基嘧啶-4-基氧基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯(2.7mmol)在CH2Cl2(50mL)中的溶液加入m-CPBA(4.1mmol)。在N2氣氛下攪拌過夜后，在0℃加入Na2S2O3和飽和NaHCO3水溶液淬滅反應(yīng)。將混合物用CH2Cl2萃取兩次，合并有機(jī)萃取液，用飽和NaHCO3水溶液和水洗滌。有機(jī)層經(jīng)Na2SO4干燥，濃縮，得到4-[2-(5-芐基氨基甲?；?6-氯-2-甲磺酰基嘧啶-4-基氧基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯，為白色固體；1H-NMR(CDCl3)，δ1.08-1.18(2H，m)，1.45(9H，s)，1.63-1.75(5H，m)，2.64(2H，br t)，3.32(3H，s)，4.05-4.08(2H，m)，4.59(2H，1)，4.66(2H，d)，6.20(1H，t)，7.31-7.37(5H，m)。
在0℃向上述產(chǎn)物4-[2-(5-芐基氨基甲?；?6-氯-2-甲磺酰基-嘧啶-4-基氧基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯在CH2Cl2/H2O(20mL/2mL)中的溶液加入NaCN(3.3mmol)和四正丁基溴化銨(0.14mmol)。溫至室溫后，將反應(yīng)混合物在室溫劇烈攪拌1.5小時。將混合物用CH2C12稀釋，用NaHCO3水溶液洗滌。有機(jī)層經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，濃縮。殘余物經(jīng)硅膠柱色譜純化，得到4-[2-(5-芐基氨基甲?；?6-氯-2-氰基-嘧啶-4-基氧基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯，為白色固體。1H-NMR(CDCl3)，δ1.09-1.19(2H，m)，1.46(9H，s)，1.63-1.74(5H，m)，2.66(2H，br t)，4.07(2H，m)，4.51(2H，t)，4.66(2H，d)，6.11(1H，t)，7.31-7.37(5H，m)。
步驟76.44-(2-{5-芐基氨基甲?；?2-氰基-6-[(螺[2.5]辛-6-基甲基)氨基]-嘧啶-4-基氧基}乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯 在室溫向4-[2-(5-芐基氨基甲酰基-6-氯-2-氰基嘧啶-4-基氧基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯(0.23mmol)在CH3CN(5mL)中的溶液加入C-螺[2.5]辛-6-基-甲基胺鹽酸鹽(0.25mmol)和K2CO3(0.7mmol)。升溫至70℃后，將反應(yīng)混合物攪拌過夜。將混合物用H2O和AcOEt稀釋，用AcOEt萃取兩次。有機(jī)層經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，濃縮，得到4-(2-{5-芐基氨基甲?；?2-氰基-6-[(螺[2.5]辛-6-基甲基)氨基]嘧啶-4-基氧基}乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯，為白色固體；1H-NMR(CDCl3)，δ0.17-0.30(4H，m)，0.89-1.06(4H，m)，1.14-1.38(3H，m)，1.46(9H，s)，1.49-1.79(9H，m)，2.51(2H，br t)，3.42(2H，t)，4.00(2H，m)，4.45(2H，t)，4.55(2H，d)，7.30-7.39(5H，m)，8.12(1H，t)，10.16(1H，t)。
實施例77至164 重復(fù)上述方法，使用適合的原料和條件，獲得以下化合物。













HPLC條件Phenomenex Luna反相柱C183μm 30x 4.6mm柱。線性梯度在10分鐘內(nèi)，90％含0.08％甲酸的水∶10％乙腈至100％乙腈。檢測254nm。
(i)實施例114的化合物熔點＝159℃。
實施例165N-{2-氰基-4-[2-(1-甲基哌啶-4-基)乙氧基]-6-[(螺[3.5]壬-7-基甲基)氨基]嘧啶-5-基}-C-苯基甲磺酰胺 按照4-[2-(1-甲基哌啶-4-基)乙氧基]-6-[(螺[3.5]壬-7-基甲基)氨基]嘧啶-2-甲腈的合成方法，將4-(2-{2-氰基-5-苯基甲磺?；被?6-[(螺[3.5]壬-7-基甲基)氨基]嘧啶-4-基氧基}乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯轉(zhuǎn)化為N-{2-氰基-4-[2-(1-甲基哌啶-4-基)乙氧基]-6-[(螺[3.5]壬-7-基甲基)氨基]嘧啶-5-基}-C-苯基甲磺酰胺。
步驟165.1(4，6-二氯-2-甲硫基嘧啶-5-基)氨基甲酸烯丙基酯 在室溫、N2氣氛下向4，6-二氯-2-甲硫基嘧啶-5-甲酸(5.5mmol)在二噁烷(10mL)中的溶液加入疊氮磷酸二苯酯(diphenyl phosphorylazide)(6.6mmol)、三乙胺(6.6mmol)和烯丙基醇(11mmol)。在100℃攪拌1小時后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用AcOEt稀釋。有機(jī)層用H2O洗滌兩次，在真空中蒸發(fā)。所得殘余物經(jīng)硅膠柱色譜純化，得到(4，6-二氯-2-甲硫基-嘧啶-5-基)氨基甲酸烯丙基酯。
步驟165.24-[2-(5-烯丙基氧基羰基氨基-6-氯-2-甲硫基嘧啶-4-基氧基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯 按照參考實施例2步驟2.0所述合成方法，將(4，6-二氯-2-甲硫基嘧啶-5-基)氨基甲酸烯丙基酯轉(zhuǎn)化為4-[2-(5-烯丙基氧基羰基氨基-6-氯-2-甲硫基嘧啶-4-基氧基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯。
步驟165.34-[2-(5-烯丙基氧基羰基氨基-6-氯-2-氰基-嘧啶-4-基氧基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯 按照參考實施例2對4-[2-(6-氯-2-氰基嘧啶-4-基氧基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯所述的合成方法，將4-[2-(5-烯丙基氧基羰基氨基-6-氯-2-甲硫基嘧啶-4-基氧基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯轉(zhuǎn)化為4-[2-(5-烯丙基氧基羰基氨基-6-氯-2-氰基-嘧啶-4-基氧基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯。
步驟165.44-(2-{5-烯丙基氧基羰基氨基-2-氰基-6-[(螺[3.5]壬-7-基甲基)-氨基]嘧啶-4-基氧基}乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯 按照參考實施例2步驟2.2對4-(2-{2-氰基-6-[(螺[3.5]壬-7-基甲基)-氨基]嘧啶-4-基氧基}乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯所述的合成方法，將4-[2-(5-烯丙基氧基羰基氨基-6-氯-2-氰基-嘧啶-4-基氧基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯轉(zhuǎn)化為4-(2-{5-烯丙基氧基羰基氨基-2-氰基-6-[(螺[3.5]壬-7-基甲基)氨基]嘧啶-4-基氧基}乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯。
步驟165.54-(2-{5-氨基-2-氰基-6-[(螺[3.5]壬-7-基甲基)氨基]嘧啶-4-基氧基}乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯 在室溫、N2氣氛下向4-(2-{5-烯丙基氧基羰基氨基-2-氰基-6-[(螺[3.5]壬-7-基甲基)氨基]嘧啶-4-基氧基}乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯粗品(230mg)在THF(10mL)中的溶液加入三乙胺(1.25mmol)和Pd(PPh3)4(催化量)。在同樣溫度攪拌1小時后，將反應(yīng)混合物用AcOEt稀釋。有機(jī)層用H2O洗滌，在真空中蒸發(fā)。所得殘余物經(jīng)硅膠柱色譜純化，得到4-(2-{5-氨基-2-氰基-6-[(螺[3.5]壬-7-基甲基)氨基]嘧啶-4-基氧基}乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯；1H-NMR(CDCl3)，δ0.97-1.07(2H，m)，1.13-1.28(4H，m)，1.42-1.88(25H，m)，2.69(2H，t)，3.22(2H，s)，3.31(2H，t)，4.04-4.16(2H，m)，4.40(2H，t)，4.51(1H，1)。
步驟165.64-(2-{2-氰基-5-苯基甲磺?；被?6-[(螺[3.5]壬-7-基甲基)氨基]嘧啶-4-基氧基}乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯 在0℃將芐基磺酰氯(0.50mmol)加至4-(2-{5-氨基-2-氰基-6-[(螺[3.5]壬-7-基甲基)氨基]嘧啶-4-基氧基}乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(167mg)和吡啶(0.66mmol)在CH2Cl2(3mL)中的溶液，在室溫攪拌1小時后，再向反應(yīng)混合物加入芐基磺酰氯(0.50mmol)、吡啶(0.66mmol)和DMAP(催化量)。將反應(yīng)混合物在室溫攪拌1小時，用AcOEt稀釋。有機(jī)層用H2O洗滌，在真空中蒸發(fā)。所得殘余物經(jīng)硅膠柱色譜純化，得到4-(2-{2-氰基-5-苯基甲磺?；被?6-[(螺[3.5]壬-7-基甲基)氨基]嘧啶-4-基氧基}乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯。
實施例166和167 重復(fù)上述方法，使用適合的原料和條件，獲得以下化合物。


實施例168-173 重復(fù)上述方法，使用適合的原料和條件，獲得以下化合物。


Me＝甲基 (ii)實施例168的化合物熔點＝131℃；(M+H)+＝412。
實施例174軟膠囊 如下制備5000粒軟膠囊，各包含0.05g前述實施例所述式I化合物之一作為活性成分 組成 活性成分 250g Lauroglycol 2升 制備方法將粉狀活性成分混懸于

(丙二醇月桂酸酯，GattefosséS.A.，Saint Priest，法國)并在濕法粉碎機(jī)中研磨，制得約1至3μm的顆粒大小。然后使用膠囊填充機(jī)將0.419g每份的混合物裝入軟明膠膠囊中。
權(quán)利要求
1.式(I)的2-氰基嘧啶
其中
R1表示式(Ia)基團(tuán)
其中A、E和G彼此獨立地代表O、S或CH2，條件是至少A和E之一代表CH2；
如果G是CH2，則T是O、S或鍵，如果G是O或S，則T是鍵；
Ra、Rb和Rc彼此獨立地代表氫或C1-C4烷基；
s是0、1或2，t是1、2、3或4，p是0、1或2；
R2表示鹵素、C1-C4烷基、未取代或取代的芳基、5或6元雜環(huán)基、-C(O)NR4R5、-NHC(O)R4或-CH2NHC(O)R4，其中
R4代表
(a)C1-C7烷基，其未被取代或被以下基團(tuán)取代鹵素；氨基，其被C3-C5環(huán)烷基或C1-C6烷基單取代或二取代，后者在每種情況下未被取代或被鹵素單、二或三取代；包含至少一個氮原子的未取代或取代的C4-C8-脂族雜環(huán)基；未取代或取代的苯基；未取代或取代的雜芳基；未取代或取代的螺[4.5]癸烷，其包含1或2個選自氧、氮和硫的雜原子；未取代或取代的C3-C6環(huán)烷基；或1-氮雜-(C5-C8)雙環(huán)烷基；
(b)未取代或取代的N-(C1-C4烷基)哌啶基或N-(C4-C6環(huán)烷基)哌啶基；
(c)未取代或取代的芳基；
全文摘要
本發(fā)明涉及式(I)的2-氰基嘧啶化合物的游離形式或鹽形式以及可能時的互變異構(gòu)形式作為組織蛋白酶S活性抑制劑的用途，其中R1、R2、R3和X如說明書和權(quán)利要求中所定義。
文檔編號C07D239/46GK101671310SQ20091017911
公開日2010年3月17日 申請日期2005年8月16日 優(yōu)先權(quán)日2004年8月17日
發(fā)明者T·W·哈特, A·哈利特, 橫川文昭, 甚目平雄, 江原建, 巖崎厚子, 榊潤一, 升谷敬一, 岸田雅司, 入江統(tǒng) 申請人:諾瓦提斯公司