專利名稱：一種桿菌肽鋅的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域，涉及一種在溶液中肽的一般制備方法，具體地說(shuō)，涉及一種在桿菌肽溶液中制備桿菌肽鋅的方法。它以桿菌肽發(fā)酵液為原料，對(duì)其采取分離、提取等化學(xué)以及物理方法，最終獲得桿菌肽鋅。
背景技術(shù)：
桿菌肽鋅(Bacitracin zinc，縮寫(xiě)為BcZn，CAS1405-89-6)是一種鋅和桿菌肽的絡(luò)合物，為白色或類(lèi)白色粉末，有特臭、味苦。該物質(zhì)在水、甲醇、丙酮、氯仿中幾乎不溶，而易溶于吡啶中，在乙醚中微溶。桿菌肽鋅是一種有效的窄譜多肽抗生素，其抗菌譜與青霉素類(lèi)似，主要針對(duì)革蘭氏陽(yáng)性球菌和桿菌，對(duì)少數(shù)革蘭氏陰性菌、螺旋體及放線菌也有一定的抑制作用，具有高效、低毒、殘留量少等優(yōu)點(diǎn)。因此，桿菌肽鋅不僅是一種重要的抗生素藥物，也是安全性良好的畜禽抗生素飼料添加劑。桿菌肽鋅是Si2+與桿菌肽的組氨酸的咪唑基的δ -N、噻唑啉環(huán)的硫原子和谷氨酸的羧酸酯形成的絡(luò)合物?，F(xiàn)有桿菌肽鋅生產(chǎn)技術(shù)主要通過(guò)微生物發(fā)酵法制備，以枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)和B類(lèi)地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)發(fā)酵液為原料，發(fā)酵液與氧化鋅或氯化鋅混合后，真空蒸發(fā)濃縮，使干基物質(zhì)含量從4. 5% 5%提高到17% 20%，再經(jīng)噴霧干燥得到桿菌肽鋅。該方法得到的產(chǎn)品組份復(fù)雜，只能用于飼料添加劑。美國(guó)專利US2809892公開(kāi)了一種水溶性的鋅鹽制備桿菌肽鋅的方法，將鋅鹽加入到酸化后的桿菌肽發(fā)酵液中，提高混合物的PH值，桿菌肽鋅沉淀出來(lái)，分離出桿菌肽鋅絡(luò)合物，再進(jìn)行干燥，該方法存在金屬氫氧化物的共沉淀的問(wèn)題，桿菌肽含量不超過(guò)4% 8%。美國(guó)專利US393769公開(kāi)了一種不含氫氧化鋅制備桿菌肽鋅的方法，但是用氨根離子絡(luò)合過(guò)量的鋅離子收率較低。桿菌肽鋅的制備方法已經(jīng)不少，但是，這些方法運(yùn)用在工業(yè)生產(chǎn)中，都存在不少困難。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種桿菌肽鋅的制備方法，該方法具有效率高、設(shè)備簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)性好、純度高、能耗低、可在常溫下連續(xù)操作等特點(diǎn)，特別適合工業(yè)化生產(chǎn)。本發(fā)明是通過(guò)如下步驟實(shí)現(xiàn)的在桿菌肽溶液中加入堿性溶液，調(diào)節(jié)PH = 8 11，加入無(wú)機(jī)鋅成鹽，用無(wú)機(jī)酸調(diào)節(jié)PH = 5 7，攪拌i 2小時(shí)，靜置5 10小時(shí)。然后通過(guò)分離、干燥、粉碎、篩分、檢驗(yàn)、 成品包裝等生產(chǎn)步驟得到合格的桿菌肽鋅。所述桿菌肽溶液是效價(jià)大于5000u/ml，電導(dǎo)小于2000 μ s/cm的枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)和B類(lèi)地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)發(fā)酵液的提取分離溶液。所述堿性溶液是氨水、氫氧化鈉中的一種。
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所述無(wú)機(jī)鋅是氧化鋅、氯化鋅、硫酸鋅的一種。所述無(wú)機(jī)酸是鹽酸、硫酸的一種。本發(fā)明方法制得的桿菌肽鋅的鋅含量為4. 0 6. 0%，桿菌肽A含量大于40. 0%, 桿菌肽A、B” B2和B3的總量大于70.0%,效價(jià)大于65U/g。本發(fā)明方法制得的桿菌肽鋅直接作為醫(yī)用注射劑、軟膏等制劑的原料。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例一在100L桿菌肽溶液中加入1.5M氫氧化鈉溶液，調(diào)節(jié)PH = 8 30%氯化鋅溶液成鹽，用鹽酸調(diào)節(jié)PH = 5 7，攪拌1 2小時(shí)，靜置6 離心機(jī)分離后裝入沸騰干燥箱進(jìn)行干燥，得到桿菌肽鋅11. 2Kgo實(shí)施例二在100L桿菌肽溶液中加入1.5M氫氧化鈉溶液，調(diào)節(jié)PH = 8 30%硫酸鋅溶液成鹽，用鹽酸調(diào)節(jié)PH = 5 7，攪拌1 2小時(shí)，靜置6 離心機(jī)分離后裝入沸騰干燥箱進(jìn)行干燥，得到桿菌肽鋅12. 6Kg。實(shí)施例三在100L桿菌肽溶液中加入1. 5M氫氧化鈉溶液，調(diào)節(jié)PH = 8 30%硫酸鋅溶液成鹽，用硫酸調(diào)節(jié)PH = 5 7，攪拌1 2小時(shí)，靜置6 離心機(jī)分離后裝入沸騰干燥箱進(jìn)行干燥，得到桿菌肽鋅11. 3Kgo實(shí)施例四在100L桿菌肽溶液中加入1. 5M氫氧化鈉溶液，調(diào)節(jié)PH = 8 11，加入1. 9Kg氧化鋅和7. 5Kg水，攪拌2小時(shí)，用硫酸調(diào)節(jié)PH = 5 7，攪拌1 2小時(shí)，靜置6 7小時(shí)。 再通過(guò)離心機(jī)分離后裝入沸騰干燥箱進(jìn)行干燥，得到桿菌肽鋅9. SKgo以上顯示和描述了本發(fā)明的基本原理和主要特征以及本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)。本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)該了解，本發(fā)明并不限于這里所描述的特殊實(shí)例和實(shí)施方案。在這里包含這些特殊實(shí)例和實(shí)施方案的目的在于幫助本領(lǐng)域中的技術(shù)人員實(shí)踐本發(fā)明。任何本領(lǐng)域中的技術(shù)人員很容易在不脫離本發(fā)明精神和范圍的情況下進(jìn)行進(jìn)一步的改進(jìn)和完善，因此，本發(fā)明只受到本發(fā)明權(quán)利要求的內(nèi)容和范圍的限制，其意圖涵蓋所有權(quán)利要求所限定的本發(fā)明精神和范圍內(nèi)的備選方案和等同方案。
權(quán)利要求
1.一種桿菌肽鋅的制備方法。其特征步驟如下在桿菌肽溶液中加入堿性溶液，調(diào)節(jié)PH = 8 11，加入無(wú)機(jī)鋅成鹽，用無(wú)機(jī)酸調(diào)節(jié)PH =5 7，攪拌1 2小時(shí)，靜置5 10小時(shí)。然后通過(guò)分離、干燥、粉碎、篩分、檢驗(yàn)、成品包裝等生產(chǎn)步驟得到合格的桿菌肽鋅。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的桿菌肽鋅的制備方法，其特征在于所述桿菌肽溶液是效價(jià)大于5000u/ml，電導(dǎo)小于2000 μ s/cm的枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)和B類(lèi)地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)發(fā)酵液的提取分離溶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的桿菌肽鋅的制備方法，其特征在于所述的堿性溶液是氨水、 氫氧化鈉中的一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的桿菌肽鋅的制備方法，其特征在于所述的無(wú)機(jī)鋅是氧化鋅、 氯化鋅、硫酸鋅中的一種。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的桿菌肽鋅的制備方法，其特征在于所述的無(wú)機(jī)酸是鹽酸、硫酸中的一種。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的桿菌肽鋅的制備方法，其特征在于所述的桿菌肽鋅的鋅含量為4. 0 6. 0 %，桿菌肽A含量大于40. 0 %，桿菌肽A、B1、化和 的總量大于70. 0 %，效價(jià)大于65U/g。
全文摘要
一種桿菌肽鋅的制備方法，其特征在于包括下述步驟在桿菌肽溶液中加入堿性溶液，調(diào)節(jié)PH＝8～11，加入無(wú)機(jī)鋅成鹽，用無(wú)機(jī)酸調(diào)節(jié)PH＝5～7，攪拌1～2小時(shí)，靜置5～10小時(shí)。然后通過(guò)分離、干燥、粉碎、篩分、檢驗(yàn)、成品包裝等生產(chǎn)步驟得到合格的桿菌肽鋅。本發(fā)明具有效率高、設(shè)備簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)性好、純度高、能耗低、可在常溫下連續(xù)操作等特點(diǎn)，特別適合桿菌肽鋅的工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C07K14/32GK102161693SQ20101060657
公開(kāi)日2011年8月24日 申請(qǐng)日期2010年12月27日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月27日
發(fā)明者孫立文, 李軍, 楊宏, 陳軍 申請(qǐng)人:江蘇九陽(yáng)生物制藥有限公司