專利名稱：乳清成分的分離和純化的制作方法
乳清成分的分離和純化本發(fā)明涉及用于乳清成分的分離和純化的方法，具體地但是非排他地從乳清滲透物分離乳清的成分，尤其是唾液酸乳糖(Sialyl lactose)，特別是3'唾液酸乳糖(或者稱作3' -SL或3-SL或3精華)的分離。乳酪生產(chǎn)通常包括或者通過(guò)酶對(duì)乳的作用或者通過(guò)使用合適的酸降低乳的pH， 使得乳蛋白(酪蛋白)凝聚，以將乳固體物和乳脂捕獲在凝乳基體中。之后將該凝乳基體固化以榨出液體級(jí)分，即乳酪乳清。乳酪乳清含有未被約束在凝乳基體中的乳固體物，尤其是乳的糖類和可溶性蛋白質(zhì)。乳清占乳酪制造過(guò)程中使用的乳的總體積的80-90%，并且含有超過(guò)一半的來(lái)自原始全乳的固體物，包括20%的蛋白質(zhì)和大部分的乳糖并且具有非常高的有機(jī)質(zhì)含量。由于其高有機(jī)質(zhì)含量，乳清的處理對(duì)于乳品加工業(yè)經(jīng)常是一個(gè)問(wèn)題?，F(xiàn)在可以從乳清回收可溶性蛋白質(zhì)以及來(lái)自乳糖的有價(jià)值物，并且明顯需要的是回收盡可能多的有機(jī)質(zhì)內(nèi)含物以降低流出流的有機(jī)負(fù)荷量并從乳清獲得更高的利潤(rùn)。為開(kāi)發(fā)對(duì)于該物品的使用，奶酪加工公司正在進(jìn)行大量的努力。在商業(yè)中對(duì)于乳清進(jìn)行超濾(UF)以提供蛋白質(zhì)濃縮物和乳清滲透物已經(jīng)變得普遍。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)濃縮物在動(dòng)物飼料、肥料、發(fā)酵以及作為食品填料中的應(yīng)用。然而，富乳糖滲透物通常保持為廢產(chǎn)物，這歸因于不能滿意地將滲透物的單獨(dú)成分分離并純化，以使得它們適合于進(jìn)一步使用。富乳糖滲透物包括多種低聚糖、如3'-唾液酸乳糖。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)它在例如藥品和嬰兒食品應(yīng)用中具有有價(jià)值的應(yīng)用，但是必需以足夠純的形式提供該成分。US 6 323 OOS(Pelletier)提供了用于由乳品源和奶酪加工廢物流制備唾液低聚糖的方法，所述方法通過(guò)使用α (2-3)反式-唾液酸酶的催化活性以利用在奶酪加工廢料中天然存在的高濃度的乳糖和唾液酸糖苷，以推動(dòng)α (2-3)唾液酸-乳糖的酶催化合成。將通過(guò)該酶作用制備的唾液酸乳糖通過(guò)使混合物通過(guò)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂之后通過(guò)強(qiáng)陰離子交換樹(shù)脂而純化。唾液酸乳糖被吸在陰離子交換樹(shù)脂上并且使用適當(dāng)?shù)娜芤簩⑵湎疵摗Ｔ摲椒ù_實(shí)純化了唾液酸乳糖但是受到以下缺點(diǎn)的困擾陽(yáng)離子交換樹(shù)脂僅移除一些陽(yáng)離子并有剩余的正電荷物種與唾液酸乳糖形成鹽。這之后需要強(qiáng)陰離子交換樹(shù)脂以將鹽分開(kāi)并且使得唾液酸乳糖能夠結(jié)合至樹(shù)脂。然而，實(shí)際上結(jié)合至柱的唾液酸乳糖的量將依賴于廢料中存在的其它陰離子相對(duì)于唾液酸乳糖的量，并且這將從而需要將富含其它陰離子的洗脫物的凈化。本發(fā)明的目標(biāo)是提供用于乳清成分的分離和純化的方法，尤其是3'-唾液酸乳糖，特別地但非排他地從乳清滲透物分離乳清成分，所述方法克服或至少減輕了上述缺點(diǎn)。因此，本發(fā)明的第一方面提供一種用于將乳清的所需成分，如3'-唾液酸乳糖， 從乳清分離和/或純化的方法，所述方法包括以下步驟使乳清與至少一個(gè)系列的離子交換樹(shù)脂接觸以將乳清脫礦質(zhì)，所述系列包括第一陽(yáng)離子交換樹(shù)脂、第一陰離子交換樹(shù)脂、第二陽(yáng)離子交換樹(shù)脂和第二陰離子交換樹(shù)脂；使該脫礦質(zhì)乳清與兩個(gè)另外的或最終離子交換樹(shù)脂接觸，所述兩個(gè)另外的或最終離子交換樹(shù)脂包括強(qiáng)酸陽(yáng)離子和最終弱堿陰離子交換樹(shù)脂，其中將所述所需成分吸在所述陰離子交換樹(shù)脂上；以及使用合適的洗脫劑將所需成分從最終陰離子交換樹(shù)脂洗脫。在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，在使原料乳清與離子交換樹(shù)脂接觸之前對(duì)其進(jìn)行超濾，所述超濾步驟提供蛋白質(zhì)濃縮物和乳清滲透物，其中所述乳清滲透物與離子交換樹(shù)脂接觸。然而，原料乳清或脫礦質(zhì)乳清可以被用于該方法。所需成分優(yōu)選為3'-唾液酸乳糖。其他成分可以包括滲透物中存在的6'-唾液酸乳糖和/或其它陰離子性低聚糖。優(yōu)選地，第一陽(yáng)離子交換樹(shù)脂是弱酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂。優(yōu)選的是第二陽(yáng)離子交換樹(shù)脂為強(qiáng)酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂。如果第二陽(yáng)離子交換樹(shù)脂為弱酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，應(yīng)該將進(jìn)入該樹(shù)脂的物質(zhì)的PH保持在高于pH 5，優(yōu)選高于pH 5. 5。優(yōu)選地，第一和第二堿陰離子(交換樹(shù)脂)包括弱堿陰離子(交換樹(shù)脂)。本發(fā)明的第二方面針對(duì)根據(jù)本發(fā)明的第一方面的方法從乳清分離和純化的所需成分，尤其是3'-唾液酸乳糖?？梢允钩瑸V(UF)乳清滲透物直接通過(guò)離子交換樹(shù)脂，或者可以使用如滲析、電滲析、納米過(guò)濾或者以上的任意組合的技術(shù)對(duì)其進(jìn)行完全或者更優(yōu)選部分預(yù)脫礦質(zhì)步驟以最優(yōu)化成本效率和/或技術(shù)效率。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，在將濃縮物與如在本發(fā)明的第一方面中所定義的樹(shù)脂系列接觸之前，使用納米過(guò)濾將UF乳清滲透物濃縮。在該實(shí)施方案中，優(yōu)選的是使?jié)饪s物與兩個(gè)系列的樹(shù)脂接觸，即弱酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂、堿陰離子交換樹(shù)脂、強(qiáng)酸陽(yáng)離子交換樹(shù)月旨、堿陰離子交換樹(shù)脂的第一系列，之后是弱酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂、堿陰離子交換樹(shù)脂、強(qiáng)酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂、堿陰離子交換樹(shù)脂的第二系列。堿陰離子交換樹(shù)脂可以是強(qiáng)的或弱的，但是優(yōu)選為弱的以最小化損失并最優(yōu)化洗脫?？梢酝ㄟ^(guò)電滲析對(duì)滲透物進(jìn)行部分脫礦質(zhì)。這之后通過(guò)一系列的陽(yáng)離子和陰離子交換樹(shù)脂以使得完全凈化并且之后3-SL結(jié)合至最終陰離子交換樹(shù)脂上。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，在與根據(jù)本發(fā)明的第一方面的樹(shù)脂系列接觸之前， 可以通過(guò)離子滲透色譜(或離子排斥色譜)提高濃縮UF乳清滲透物中的相對(duì)3' -SL含量。優(yōu)選地，在升高的溫度下進(jìn)行離子滲透色譜，所述升高的溫度為優(yōu)選至少50°C，優(yōu)選 50°C至80°C。洗脫物包含含有帶電荷的分子(包括3'-唾液酸乳糖)的第一級(jí)分，之后是含有不帶電荷的分子如乳糖的第二級(jí)分。之后使含有3'-唾液酸乳糖的第一級(jí)分與樹(shù)脂系列接觸，使3'-唾液酸乳糖被吸在陰離子交換樹(shù)脂上。色譜分離樹(shù)脂優(yōu)選為由Rohm & Haas提供的CR 1310K。然而存在其他合適的樹(shù)脂。其實(shí)例包括，但是不限于，CR1310Ca & Na或CR1320 Ca、K或Na，陶氏(Dow)的 DOffEX Monosphere 99Ca/320 或者三菱(Mitsubishi)的 Diaion UBK530 或者 Purolite 的 PCR145K0使用堿、鹽、緩沖溶液或酸的適當(dāng)稀釋溶液將3'-唾液酸乳糖從陰離子交換樹(shù)脂洗脫。所使用的堿包括氫氧化銨、NaOH, KOH ；鹽溶液包括NaCl、KCl、氯化銨、乙酸銨、甲酸銨、碳酸銨等；并且酸包括稀HC1、乙酸、甲酸，和/或含有足以將3'-唾液酸乳糖從陰離子交換樹(shù)脂洗脫的抗衡陰離子的緩沖溶液，或者以上各項(xiàng)的適當(dāng)?shù)幕旌衔?。然而，銨鹽是優(yōu)選的，因?yàn)樗鼈儍A向于揮發(fā)?？梢詫?duì)使用合適的堿或鹽從陰離子交換樹(shù)脂洗脫的3'-唾液酸乳糖使用脫鹽樹(shù)脂如kphadex G25進(jìn)行鹽移除。例如，可以使用納米過(guò)濾將洗脫產(chǎn)物濃縮至 20-30% 固體物并且將所得到的物質(zhì)G25(或者市場(chǎng)上可得的其他這樣的脫鹽樹(shù)脂) 上層析。洗脫的第一物質(zhì)為與一些較大分子在一起的3'-唾液酸乳糖，之后是較小的分子如NPN類和鹽。如果要使用含有大離子如乙酸根、甲酸根等的溶液，這些分子通過(guò) SephadexG25或其等價(jià)樹(shù)脂的移除略差。然而可以通過(guò)調(diào)整樹(shù)脂床深度和流速提高純度。 在這種情況下，可以選擇使用合適的陰離子交換樹(shù)脂(強(qiáng)堿或弱堿陰離子交換樹(shù)脂)移除雜質(zhì)之后通過(guò)弱酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂將PH調(diào)節(jié)至中性。也可以將鹽通過(guò)滲濾、納米過(guò)濾、電滲析、滲析或其他方法移除。可以將凈化的洗脫物通過(guò)納米過(guò)濾和/或蒸發(fā)進(jìn)一步濃縮并且優(yōu)選將其干燥以形成白色產(chǎn)物。在本發(fā)明的方法中可以使用任何合適的強(qiáng)和弱陽(yáng)離子和陰離子交換樹(shù)脂。第一弱酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂為優(yōu)選聚丙烯酸類弱酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，優(yōu)選在商品名IMAC HP336下提供的聚丙烯酸類弱酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂。備選的聚丙烯酸類弱陽(yáng)離子交換樹(shù)脂包括由Rohm and Haas提供的PWC11、由陶氏(Dow)提供的DOWEX MAC-3或者由三菱(Mitsubishi)提供的Diaion WKlO和WK40。第一弱陰離子交換樹(shù)脂優(yōu)選為丙烯酸類弱堿陰離子交換樹(shù)脂， 優(yōu)選在商品名FPA55下提供的丙烯酸類弱堿陰離子交換樹(shù)脂。備選的丙烯酸類弱堿陰離子交換樹(shù)脂包括由三菱(Mitsubishi)提供的Diaion WA10、WA20、WA21J和WA30，或者由 Purolite提供的A847或PFA847。也可以使用苯乙烯弱堿陰離子交換樹(shù)脂。也可以使用強(qiáng)堿陰離子交換樹(shù)脂但是這可能導(dǎo)致用于后繼的樹(shù)脂清洗的再生劑的使用增加。第二強(qiáng)酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂為優(yōu)選苯乙烯-DVB強(qiáng)酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，更優(yōu)選在商品名HPlllO下出售的苯乙烯-DVB強(qiáng)酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂。備選的強(qiáng)酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂包括由 Rohm and Haas 提供的 FPC23、由陶氏(Dow)提供的 DOWEX 88、DOWEX 88 MB、DOWEX Monosphere 88，由三菱(Mitsubishi)提供的 Diaion SK1B、SK104、SK110、SK112、SK116、 PK208、PK212、PK216、PK220、PK228 或 HPK25，或者由 Purolite 提供的 PFClOO 或 PFC150。第二弱堿陰離子交換樹(shù)脂優(yōu)選為苯乙烯-DVB弱堿陰離子交換樹(shù)脂，更優(yōu)選為在商品名FPA51下出售的弱堿陰離子交換樹(shù)脂。備選的弱堿陰離子交換樹(shù)脂包括由陶氏(Dow)提供的 DOWEX 66、DOWEX Monosphere66 或 DOWEX Monosphere 77，或者由三菱 (Mitsubishi)提供的 DiaionWAlO、WA20、WA21J 和 WA30。可以將弱堿陰離子交換樹(shù)脂用強(qiáng)陰離子交換樹(shù)脂代替，雖然弱堿陰離子交換樹(shù)脂是優(yōu)選的。這樣的樹(shù)脂包括，但不限于，來(lái)自Rohm & Haas的FPA42、FPA90 ；來(lái)自Purolite的 A600、A400E、A420 和 A850 以及來(lái)自陶氏化學(xué)公司(Dow Chemical Co.)的 Dowex A, Dowex 1、Dowex 22、Dowex SAR0在另外的方面，本發(fā)明還提供一種用于制備富集有乳清的所需成分的乳制品的方法，所述方法包括根據(jù)本發(fā)明的第一方面的方法制備乳清的所需成分。乳清的所需成分可以任選地為3'唾液酸乳糖，并且該方法可以任選地用于制備富集有3'唾液酸乳糖的乳制品。任選地，乳制品為奶制品，但是可以使用需要富集有乳清的所需成分的任何乳制品。 可以通過(guò)使洗脫的所需成分與乳制品流接觸制備富集有乳清的所需成分的乳制品。洗脫的所需成分和乳制品流可以各自獨(dú)立地為液體或固體。任選地，洗脫的所需成分和乳制品流各自獨(dú)立地為液體。任選地，用于制備乳制品的方法還包括濃縮乳制品的步驟。濃縮步驟可以包括納米過(guò)濾、蒸發(fā)和干燥乳制品的任意一種，或其組合?，F(xiàn)在將更具體地描述本發(fā)明，附隨的實(shí)施例僅是示例的方式，其中實(shí)施例1描述了使用本發(fā)明的方法將3'-唾液酸乳糖從UF乳清滲透物直接分離；實(shí)施例2描述了使用本發(fā)明的方法將3 ‘-唾液酸乳糖從濃縮UF乳清滲透物分離，其中首先使用納米過(guò)濾將UF 乳清滲透物濃縮；并且實(shí)施例3至7描述了使用本發(fā)明的方法將唾液酸乳糖從濃縮UF乳清滲透物分離，其中將UF乳清滲透物首先使用納米過(guò)濾濃縮，之后通過(guò)離子滲透色譜，并且參考附圖進(jìn)行描述，其中

圖1是說(shuō)明包括在實(shí)施例1的方法中的步驟的流程圖；圖2是說(shuō)明包括在實(shí)施例2的方法中的步驟的流程圖；并且圖3是說(shuō)明包括在實(shí)施例3的方法中的步驟的流程圖。實(shí)施例1在本發(fā)明中對(duì)于所有實(shí)施例第一步是超濾(UF)步驟，借此將乳酪乳清中大部分蛋白質(zhì)移除。UF步驟可以包括乳清蛋白質(zhì)濃縮物(WPC)35、60、80和85的生產(chǎn)。該過(guò)程的副產(chǎn)品是 4至7%固體物的乳清滲透物，所述固體物由以下各項(xiàng)成分組成大約90至95% 乳糖、1至5%蛋白質(zhì)(NPN類和真蛋白質(zhì))、4至7%灰分和0.05至0.25% 3'-唾液酸乳糖(3-SL)。在一年的某些時(shí)間，3-SL的比例可能顯著地更高，高至固體物的0.5重量％。在本實(shí)施例中，將UF滲透物直接與一系列樹(shù)脂接觸并且3-SL最終被吸在陰離子交換樹(shù)脂上。附圖的圖1中概述了所述步驟。將1，0；35升的 5%固體物和 60ppm 3' -SL的UF乳清滲透物在200mm直徑的柱中泵送通過(guò)，使其直接與串聯(lián)的以下樹(shù)脂接觸· 15升的IMAC HP336 (聚丙烯酸類弱酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂)；· 22升的FPA55 (丙烯酸類弱堿陰離子交換樹(shù)脂)；· 23升的HP 1110 (苯乙烯-DVB強(qiáng)酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂)；· 23升的FPA51 (苯乙烯-DVB弱堿陰離子交換樹(shù)脂)；· 17升HP 1110 (苯乙烯-DVB強(qiáng)酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂)；· 17升的FPA51 (苯乙烯-DVB弱堿陰離子交換樹(shù)脂)。3-SL被吸在最后的陰離子交換樹(shù)脂上，用觀升的4. 4%氫氧化銨之后用50升脫礦質(zhì)水將其洗脫。洗脫物含有大約6至15重量％的3’ -唾液酸乳糖。接下來(lái)將它與30 升的IMAC HP336(聚丙烯酸類弱酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂)接觸之后通過(guò)23升的FPA51 (苯乙烯-DVB弱堿陰離子交換樹(shù)脂)以移除過(guò)量的氨，并將最終產(chǎn)物的PH調(diào)節(jié)到7至9. 5。所得到的產(chǎn)品含有大約占固體物12至50重量％的非常高純度形式的3'-唾液酸乳糖。最終物中的灰分含量< 10%，其余是蛋白質(zhì)。大約20至50%的蛋白質(zhì)價(jià)為NPN。 因而，在該實(shí)施例中通過(guò)以固定的流速泵送3-SL使?jié)B透物直接接觸通過(guò)串聯(lián)的以下樹(shù)脂 陽(yáng)離子交換樹(shù)脂-陰離子交換樹(shù)脂-陽(yáng)離子交換樹(shù)脂-陰離子交換樹(shù)脂-陽(yáng)離子交換樹(shù)脂-陰離子交換樹(shù)脂。這使得能夠移除不想要的和干擾分子，并且之后致使3-SL被特異性吸在最后的陰離子交換樹(shù)脂柱上。具體地，以下順序給出具有3-SL最大回收率的最佳結(jié)果
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·弱酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂(WAC)-弱堿陰離子交換樹(shù)脂(WBA)-強(qiáng)酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂(SAC)-弱堿陰離子交換樹(shù)脂(WBA)-強(qiáng)酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂(SAC)-弱堿陰離子交換樹(shù)脂(WBA)。3-SL與少量的蛋白質(zhì)(真蛋白質(zhì)+NPN類)和一些陰離子一起被吸在最后的陰離子柱上。之后使用氫氧化銨(也可以成功地使用氨、鉀、鈉、鎂或鈣的氯化物鹽或其組合) 各3-SL洗脫?？缭蕉鄠€(gè)床的壓降可能會(huì)過(guò)大，可以在合適的位置使用斷流水箱以收集處理過(guò)的滲透物，之后將所述滲透物泵送通過(guò)余下的柱。之后將洗脫的3-SL在陽(yáng)離子交換樹(shù)脂之后是陰離子交換樹(shù)脂上凈化，以移除鹽。 可以備選地通過(guò)滲濾、NF、電滲析、滲析或其他方法移除鹽。使用樹(shù)脂技術(shù)的更多益處在于還移除了某些不想要的NPN。所得到的物質(zhì)具有7至42重量％ 3-SL的3_SL含量，可以通過(guò)NF和/或蒸發(fā)將其濃縮并且最終將其干燥以產(chǎn)生具有非常高濃度3-SL的白色產(chǎn)物。3' -SL從滲透物吸附在最終的弱堿陰離子交換樹(shù)脂上的吸附率接近于100%，并洗脫率為所有吸附的3' -SL的85至100%。在以上方法中可能的是離子交換樹(shù)脂技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員可以考慮變更氫氧化銨的濃度或體積或兩者，以最優(yōu)化洗脫并從而在折衷或不折衷產(chǎn)率的情況下獲得最高純度。也可以選擇通過(guò)使用較低濃度的氫氧化銨洗脫陰離子交換樹(shù)脂的一些不想要的物質(zhì)作為預(yù)備步驟并且之后用最優(yōu)濃度的氫氧化銨洗脫以獲得 3-SL的最高純度和產(chǎn)率。實(shí)施例2再一次對(duì)乳清滲透物進(jìn)行如上面在實(shí)施例1中所述的超濾(UF)步驟。之后使用納米過(guò)濾(NF)將UF滲透物濃縮至30%的固體含量，并且使?jié)饪s物與根據(jù)本發(fā)明的一系列樹(shù)脂接觸，其中3-SL最終被吸在陰離子交換樹(shù)脂上。這些步驟概述在附圖的圖2中。通過(guò)納米過(guò)濾濃縮UF滲透物以產(chǎn)生 15至25%固體物并且含有186至208ppm 的3'-唾液酸乳糖的NF保留物。通過(guò)將2，500ml的以上NF保留物在25_mm直徑柱中泵送使其通過(guò)/泵送通過(guò)串聯(lián)的以下樹(shù)脂· 120ml的IMAC HP336 (聚丙烯酸類弱酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂)；· 180ml的FPA55 (丙烯酸類弱堿陰離子交換樹(shù)脂)；· 180ml的HP 1110 (苯乙烯-DVB強(qiáng)酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂)；· 180ml的FPA51 (苯乙烯-DVB弱堿陰離子交換樹(shù)脂)；· IOOml的IMAC HP336 (聚丙烯酸類弱酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂)；· 150ml的FPA55 (丙烯酸類弱堿陰離子交換樹(shù)脂)；· 150ml的HP 1110 (苯乙烯-DVB強(qiáng)酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂)；· 150ml的FPA51 (苯乙烯-DVB弱堿陰離子交換樹(shù)脂)。再一次，在第四柱之后成功地使用斷流水箱以避免壓降問(wèn)題。3-SL被吸在最后的陰離子交換樹(shù)脂上，將其用180ml的4. 4 %氫氧化銨之后用 300ml的脫礦質(zhì)水洗脫。洗脫物含有大約6至18重量％的3'-唾液酸乳糖。然后將其與250ml的IMAC HP336 (聚丙烯酸類弱酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂)之后是120ml的FPA51 (苯乙烯-DVB弱堿陰離子交換樹(shù)脂)接觸，以移除過(guò)量的氨并調(diào)節(jié)最終產(chǎn)物的PH到7至9. 5。所得到的產(chǎn)品含有大約占固體物的20至50重量％的非常高純度形式的3'-唾液酸乳糖。 最終物中的灰分含量< 10%，其余是蛋白質(zhì)。大約20至50%的蛋白質(zhì)價(jià)為NPN。實(shí)施例3再一次對(duì)乳清滲透物進(jìn)行如上面關(guān)于實(shí)施例1和2所述的超濾步驟。之后使用納米過(guò)濾將UF滲透物濃縮至20至30% (優(yōu)選25%)的固體含量并且之后在50至80°C的升高的溫度下對(duì)滲透物進(jìn)行離子滲透色譜(換言之經(jīng)常稱作離子排斥色譜)。將該洗脫物分為兩個(gè)級(jí)分-含有帶電荷分子的初始級(jí)分，所述帶電荷分子包含大部分的蛋白質(zhì)(包括NPN 類)、礦物質(zhì)和3-SL，之后是含有不帶電荷的分子如乳糖的級(jí)分。之后使含有3-SL的初始級(jí)分與如實(shí)施例1中所示的一系列樹(shù)脂接觸并且3-SL最終被吸在陰離子交換樹(shù)脂上。附圖的圖3中概述了這些步驟。更詳細(xì)地，離子滲透步驟包括使用色譜柱，所述色譜柱含有650升的CR1310K以給出用工藝用水標(biāo)定的3米的床高。評(píng)價(jià)+4至75°C之間的操作溫度，在升高的溫度下獲得最好的結(jié)果。通過(guò)納米過(guò)濾濃縮UF滲透物以產(chǎn)生 22至25 %固體物并含有118至304ppm (平均220ppm) 3 ‘-唾液酸乳糖的NF保留物。之后通過(guò)泵送納米過(guò)濾過(guò)的物質(zhì)之后是水通過(guò)離子排斥樹(shù)脂床，以對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行離子排斥過(guò)程。對(duì)于最優(yōu)的結(jié)果，將每循環(huán)的樹(shù)脂與NF保留物裝料比保持在1 0. 1之后是0. 9bv的水(這里Ibv =總樹(shù)脂體積，即650升)。評(píng)價(jià) 0. 3至0. 86bv/小時(shí)之間的恒定流速。對(duì)于所獲得的色譜圖的性質(zhì)，流速上的變化沒(méi)有顯著的影響。將洗脫物分為兩個(gè)級(jí)分-含有與礦物質(zhì)&蛋白質(zhì)(包括NPN類)一起的3'-唾液酸乳糖的初始級(jí)分，之后是含有幾乎純凈形式的乳糖的第二級(jí)分。每循環(huán)獲得的3'-唾液酸乳糖富集級(jí)分的凈體積為135升。固體含量在0. 5至之間變化并且3'-唾液酸乳糖水平為固體物的0.5至1.3重量％。3'-唾液酸乳糖的回收率在80至100%的范圍內(nèi)，95個(gè)操作循環(huán)的平均回收率為85%。之后使950升的3-SL富集級(jí)分通過(guò)串聯(lián)的以下樹(shù)脂· 15升的IMAC HP336 (聚丙烯酸類弱酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂)；· 22升的FPA55 (丙烯酸類弱堿陰離子交換樹(shù)脂)；· 17升的HP 1110(苯乙烯-DVB強(qiáng)酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂)；· 17升的FPA51 (苯乙烯-DVB弱堿陰離子交換樹(shù)脂)。3-SL被吸在最后的陰離子交換樹(shù)脂上，將它用觀升的4. 4%銨之后通過(guò)用50升脫礦質(zhì)水洗脫。洗脫物含有大約6至15重量％的3'-唾液酸乳糖。接下來(lái)將它與30升的IMAC HP336(聚丙烯酸類弱酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂)接觸，之后是23升的FPA51 (苯乙烯-DVB 弱堿陰離子交換樹(shù)脂)，以移除過(guò)量的氨，并調(diào)節(jié)最終產(chǎn)物的PH到7至9. 5。所得到的具有 0. 3至之間的固體含量的產(chǎn)品含有占固體物的大約0. 5至3重量％的3'-唾液酸乳糖。最終物中的灰分含量< 10%，乳糖含量為30至50%，其余是蛋白質(zhì)。大約20至50% 的蛋白質(zhì)價(jià)為NPN。實(shí)施例4在備選的方法中，將由納米過(guò)濾和如實(shí)施例3中所述的離子滲透步驟制備的 1，600升的3-SL富集級(jí)分通過(guò)在200-mm直徑柱中泵送，使其與串聯(lián)的以下樹(shù)脂接觸· 15升的IMAC HP336 (聚丙烯酸類弱酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂)；· 22升的FPA55 (丙烯酸類弱堿陰離子交換樹(shù)脂)；
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· 17升的HP 1110(苯乙烯-DVB強(qiáng)酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂)；· 17升的FPA51 (苯乙烯-DVB弱堿陰離子交換樹(shù)脂)；· 17升的HP 1110 (苯乙烯-DVB強(qiáng)酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂)；· 17升的FPA51 (苯乙烯-DVB弱堿陰離子交換樹(shù)脂)。3-SL被吸在最后的陰離子交換樹(shù)脂上，用28升的4. 4%氫氧化銨之后用50升脫礦質(zhì)水將其洗脫。洗脫物含有大約6至15重量％的3'-唾液酸乳糖。接下來(lái)將它與30 升的IMAC HP336(聚丙烯酸類弱酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂)接觸，之后通過(guò)23升的FPA51 (苯乙烯-DVB弱堿陰離子交換樹(shù)脂)，以移除過(guò)量的氨，并調(diào)節(jié)最終產(chǎn)物的PH到7至9. 5。所得到的產(chǎn)品含有占固體物的大約20至70重量％的非常高濃度的純化的3'-唾液酸乳糖。 最終物中的灰分含量< 10%，其余是蛋白質(zhì)。大約15至30%的蛋白質(zhì)價(jià)為NPN。實(shí)施例5再一次對(duì)乳清滲透物進(jìn)行如上面關(guān)于實(shí)施例1和2所述的超濾步驟。使UF滲透物與根據(jù)本發(fā)明的一系列樹(shù)脂在兩個(gè)階段中接觸，其中3-SL最終被吸在陰離子交換樹(shù)脂上。 這些步驟是在附圖的圖1中概述的那些步驟的變體。使用2至6%固體物并且含有30至80ppm 3'-唾液酸乳糖的UF滲透物。在本實(shí)施例的階段I，將一定量的以上UF保留物通過(guò)在200-mm直徑柱中泵送使其通過(guò)/泵送過(guò)串聯(lián)的以下樹(shù)脂· 15升的IMAC HP336 (聚丙烯酸類弱酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂)；· 22升的FPA55 (丙烯酸類弱堿陰離子交換樹(shù)脂)；· 17升的HP 1110(苯乙烯-DVB強(qiáng)酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂)；· 17升的FPA51 (苯乙烯-DVB弱堿陰離子交換樹(shù)脂)；UF保留物加載的截止點(diǎn)被確定為當(dāng)流出物電導(dǎo)率達(dá)到大約300至400微西門子時(shí)的點(diǎn)。以上程序的三次連續(xù)重復(fù)分別產(chǎn)生610升、650升和600升的保留物加載。將已經(jīng)通過(guò)以上四個(gè)樹(shù)脂柱的含有脫礦質(zhì)3' -SL的所關(guān)心的產(chǎn)物(保留物)用100升的工藝用水置換，在上述三個(gè)連續(xù)重復(fù)中分別產(chǎn)生684升、7M升和674升的階段I產(chǎn)物。在本實(shí)施例的階段II中，接下來(lái)使800升的階段I洗脫物與17升的HPlllO (苯乙烯-DVB強(qiáng)酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂)接觸，之后與17升的FPA51 (苯乙烯-DVB弱堿陰離子交換樹(shù)脂)接觸。含有純化的3' -SL的所關(guān)心的產(chǎn)物被吸在最后一個(gè)樹(shù)脂上并且用20升的
氯化鉀之后是45升的工藝用水將其洗脫。在階段II的兩次重復(fù)中，獲得共計(jì)120升的洗脫產(chǎn)物。接下來(lái)對(duì)其進(jìn)行納米過(guò)濾之后滲濾以產(chǎn)生7. 3升的保留物。該產(chǎn)物含有占固體物的27重量％的3'-唾液酸乳糖。在冷凍干燥之后，2. 96升的納米過(guò)濾并且滲濾的產(chǎn)物產(chǎn)生420g的干燥產(chǎn)物，所述干燥產(chǎn)物含有占固體物的30重量％的3' -SL0最終物中的灰分含量16%，蛋白質(zhì)為30% 并且2%的蛋白質(zhì)價(jià)為NPN。實(shí)施例6在另一個(gè)方法中，將來(lái)自實(shí)施例3中描述的離子排斥步驟的3-SL富集級(jí)分通過(guò)納米過(guò)濾濃縮至 12%的固體含量。將15ml的該物質(zhì)在150ml的kphadex G25上層析以產(chǎn)生含有占固體物的4至6重量％的3-SL的最終產(chǎn)物?；厥章蕿?98%。可以使用市場(chǎng)中可得的任何主體(bulk)脫鹽樹(shù)脂如iToyopearl HW40或Bio-Gel P-4或Bio-Gel P-6或者
10包括kphadex GlO的任何其他的這種脫鹽樹(shù)脂。如在以上實(shí)施例中說(shuō)明的，本發(fā)明的分離方法基本上包括使?jié)B透物(在實(shí)施例1 的情況下未處理的UF滲透物，在實(shí)施例2的情況下納米過(guò)濾的滲透物或者在實(shí)施例3至6 的情況下的離子排除物)通過(guò)以下樹(shù)脂·弱酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂(例如Imac HP 336或WK 40)·弱或強(qiáng)陰離子交換樹(shù)脂(例如FPA55或FPA42)·強(qiáng)酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂(例如Imac HP 1110或FPC23)·弱或強(qiáng)陰離子交換樹(shù)脂(例如FPA51、FPA55或FPA42)這使得能夠凈化滲透物。在凈化之后，3-SL可以被吸附在適當(dāng)?shù)碾x子交換樹(shù)脂上 (在優(yōu)選實(shí)施方案中為FPA51，因?yàn)樗沟媚軌蜻M(jìn)行最好的洗脫)?？梢允乖撐镔|(zhì)通過(guò)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂之后通過(guò)陰離子交換樹(shù)脂，以允許所有3' -SL被吸在陰離子交換樹(shù)脂上。使用在前面有或沒(méi)有陽(yáng)離子交換樹(shù)脂的強(qiáng)堿陰離子交換樹(shù)脂也將使得3' -SL被吸在該樹(shù)脂上，但是將需要較高強(qiáng)度的洗脫介質(zhì)。使用氫氧化銨、氯化鈣、NaCl和KCl或其組合完成從樹(shù)脂的洗脫。實(shí)施例7在沿與實(shí)施例5中相同的路線進(jìn)行的另一系列的實(shí)驗(yàn)中，將3'-唾液酸乳糖的洗脫級(jí)分分為多個(gè)級(jí)分，并且以19-20%的降低的產(chǎn)率獲得100%純3'-唾液酸乳糖的級(jí)分。在通過(guò)合適的方法濃縮固體之后可以將該級(jí)分直接冷凍干燥或者噴霧干燥。有關(guān)本發(fā)明的方法原理由移除不想要的和/或干擾的帶負(fù)電荷的分子至足以使得3-SL優(yōu)先附著于陰離子交換樹(shù)脂(FPA51)的程度構(gòu)成。陽(yáng)離子交換樹(shù)脂主要是在可以通過(guò)陰離子交換樹(shù)脂將3-SL吸收之前使3-SL成為帶負(fù)電荷的?？梢灶A(yù)期的是在使用任意強(qiáng)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂將帶正電荷的分子移除之后，3-SL將被吸在任意陰離子交換樹(shù)脂上。但是令人驚訝地表現(xiàn)出的不是這樣的情況，這暗示3' -SL 與樹(shù)脂之間的鍵非常弱，它易于被任何競(jìng)爭(zhēng)陰離子物種的存在所破壞。必要的是具有上述串聯(lián)的所有四種樹(shù)脂。例如當(dāng)使用納米過(guò)濾的滲透物作為起始材料時(shí)(參見(jiàn)實(shí)施例2)，高度需要的是具有上述四種樹(shù)脂外加再一次的這四種樹(shù)脂以便使3-SL被吸在含有弱陰離子交換樹(shù)脂的最后的柱上。純凈和天然形式的3-SL作為非常弱地帶負(fù)電荷的分子存在。陰離子交換樹(shù)脂僅在將除H+離子以外幾乎所有陽(yáng)離子物種移除并且將大量的競(jìng)爭(zhēng)陰離子移除的情況下吸收 3-SL。本發(fā)明方法的目的在于獲得在固體的大約3至60重量％濃度的范圍內(nèi)變化的純凈形式的3-SL。這不是直接實(shí)現(xiàn)的。第一弱酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂移除乳清中存在的大量的二價(jià)陽(yáng)離子如Ca和Mg以及較少量的Na和K以及某些氨基酸和蛋白質(zhì)。第二樹(shù)脂，弱堿陰離子交換樹(shù)脂，吸收一些帶負(fù)電荷的分子如氯化物、磷酸鹽和硫酸鹽，以及在一定程度上吸收檸檬酸鹽、乳酸鹽和帶負(fù)電荷的氨基酸和蛋白質(zhì)。第三樹(shù)脂是強(qiáng)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，它之后吸收幾乎所有的剩余陽(yáng)離子。第四樹(shù)脂是弱堿陰離子交換樹(shù)脂，它吸收優(yōu)先于3-SL的任何剩余陰離子。為了確保最小量的3-SL被該柱吸收，優(yōu)選的是過(guò)度處理(over process)以使得任何被第四樹(shù)脂吸收的3-SL被競(jìng)爭(zhēng)陰離子選擇性地?fù)舫?knocked out)。在將該物質(zhì)凈化之后(或者> 90%脫礦質(zhì))，可以將其輸送通過(guò)強(qiáng)酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂以基本上清光所有的剩余陽(yáng)離子，從而使得3-SL以其天然或自由狀態(tài)(很可能為"H-3-SL")存在。接下來(lái)處于其-OH形式的弱陰離子將易于與"H-3-SL"反應(yīng)(H與OH反應(yīng)以形成水)并且現(xiàn)在帶負(fù)電荷的3-SL易于由弱陰離子交換樹(shù)脂吸收。從上面清楚地是，在使含有3' -SL的物質(zhì)與樹(shù)脂接觸之前，可以選擇通過(guò)選自如滲析、電滲析、滲濾等的方法/技術(shù)降低樹(shù)脂上的離子負(fù)載。這將提高樹(shù)脂的吸收容量，但是不改變分離感興趣的低聚糖的基礎(chǔ)原理。在所有的情況下最后的樹(shù)脂為弱堿陰離子交換樹(shù)脂，雖然技術(shù)上強(qiáng)堿陰離子交換樹(shù)脂將同樣好的適用于吸收3-SL。然而，與弱堿陰離子交換樹(shù)脂比較，從強(qiáng)堿陰離子交換樹(shù)脂洗脫更困難。氯化物鹽如KC1、NaCl或CaCl2或其組合是優(yōu)選的。其他揮發(fā)性鹽將包括氫氧化銨、乙酸銨、甲酸銨、甲酸、乙酸等在從陰離子柱洗脫之后，使該物質(zhì)與弱酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂接觸以移除氨和/或 Ca(如果使用CaCl2)或者K(如果使用KCl)，之后是弱陰離子交換樹(shù)脂如FPA51以將pH調(diào)節(jié)回中性點(diǎn)，并且如果使用KCl或CaCl2那么移除過(guò)量的氯化物。備選地，可以將該物質(zhì)納米過(guò)濾和/或滲濾以獲得產(chǎn)品中所需的目標(biāo)規(guī)格。本領(lǐng)域技術(shù)人員也可以使用以下技術(shù)獲取含有3'-唾液酸乳糖的洗脫級(jí)分部分，從而獲得100%純度的所需產(chǎn)物，雖然犧牲了產(chǎn)率。雖然說(shuō)明本方法的實(shí)施例限于3' -SL，滲透物中存在多種感興趣的成分，如蛋白質(zhì)、氨基酸以及其他低聚糖，其可以使用本說(shuō)明書(shū)中描述的相同的操作原理將它們成功地分離。此外，通過(guò)改變洗脫溶液的濃度，樹(shù)脂技術(shù)領(lǐng)域的任何技術(shù)人員可以通過(guò)將被吸收的物質(zhì)從樹(shù)脂選擇性分離而提高純度。
權(quán)利要求
1.一種用于將乳清中的所需成分從乳清分離和/或純化的方法，所述方法包括以下步驟使所述乳清與至少一個(gè)系列的離子交換樹(shù)脂接觸以將所述乳清脫礦質(zhì)，所述系列包括第一陽(yáng)離子交換樹(shù)脂、第一陰離子交換樹(shù)脂、第二陽(yáng)離子交換樹(shù)脂和第二陰離子交換樹(shù)脂；使該脫礦質(zhì)乳清與兩個(gè)另外的或最終的離子交換樹(shù)脂接觸，所述兩個(gè)另外的或最終的離子交換樹(shù)脂包括強(qiáng)酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂和之后的弱堿陰離子交換樹(shù)脂，其中所述所需成分被吸在該陰離子交換樹(shù)脂上；以及將所述所需成分從所述陰離子交換樹(shù)脂洗脫。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，所述方法還包括在與所述離子交換樹(shù)脂接觸之前對(duì)所述乳清進(jìn)行超濾步驟，以提供蛋白質(zhì)濃縮物和乳清滲透物，其中使所述乳清滲透物與所述離子交換樹(shù)脂接觸。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2所述的方法，其中所述所需成分是3'唾液酸乳糖。
4.根據(jù)權(quán)利要求1、權(quán)利要求2或權(quán)利要求3所述的方法，其中所述第一陽(yáng)離子交換樹(shù)脂是弱酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4中的任一項(xiàng)所述的方法，其中所述第二陽(yáng)離子交換樹(shù)脂是強(qiáng)酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂。
6.根據(jù)權(quán)利要求1至4中的任一項(xiàng)所述的方法，其中所述第二陽(yáng)離子交換樹(shù)脂是弱酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其中將所述乳清保持在至少5.5的pH。
8.根據(jù)在前權(quán)利要求中的任一項(xiàng)所述的方法，其中第一和第二陰離子交換樹(shù)脂的一個(gè)或兩個(gè)包括弱堿陰離子交換樹(shù)脂。
9.根據(jù)在前權(quán)利要求中的任一項(xiàng)所述的方法，其中在所述乳清或乳清滲透物通過(guò)所述樹(shù)脂之前對(duì)所述乳清或乳清滲透物進(jìn)行濃縮步驟。
10.根據(jù)在前權(quán)利要求中的任一項(xiàng)所述的方法，其中對(duì)所述乳清或乳清滲透物進(jìn)行另外的程序以提高所述所需成分的分離和純化，所述另外的程序選自滲析、電滲析、滲濾、納米過(guò)濾和離子交換樹(shù)脂。
11.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，所述方法還包括在使?jié)饪s物與所述至少一個(gè)系列的樹(shù)脂接觸之前，使用納米過(guò)濾來(lái)濃縮所述乳清或乳清滲透物。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，所述方法還包括使所述濃縮物與兩個(gè)系列的樹(shù)脂接觸，第一系列包括弱酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂、堿陰離子交換樹(shù)脂、強(qiáng)酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂、堿陰離子交換樹(shù)脂、弱酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂和堿陰離子交換樹(shù)脂，并且第二系列包括強(qiáng)酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂和堿陰離子交換樹(shù)脂。
13.根據(jù)權(quán)利要求1至11中的任一項(xiàng)所述的方法，所述方法還包括通過(guò)離子滲透色譜(或離子排斥色譜)的方式增加未濃縮的或濃縮的乳清或乳清滲透物中所述所需成分的相對(duì)濃度，以提供含有包含所述所需成分的帶電荷分子的第一級(jí)分，之后是第二級(jí)分，其中，之后使所述第一級(jí)分與所述至少一個(gè)系列的樹(shù)脂接觸。
14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的方法，其中將富集的第一級(jí)分與至少一個(gè)系列的樹(shù)脂接觸以獲得脫礦質(zhì)的富集級(jí)分。
15.根據(jù)權(quán)利要求13或權(quán)利要求14所述的方法，其中將所述富集的級(jí)分與至少一個(gè)系列的樹(shù)脂接觸以將所述所需成分吸附到另外的陰離子交換樹(shù)脂上。
16.根據(jù)權(quán)利要求13、14或15所述的方法，所述方法還包括在至少50°C的升高的溫度下進(jìn)行所述離子滲透色譜。
17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的方法，其中所述升高的溫度為50°C至80°C。
18.根據(jù)在前權(quán)利要求中的任一項(xiàng)所述的方法，所述方法還包括使用堿、鹽、緩沖溶液或酸的適當(dāng)稀釋的溶液，將所述所需成分從所述另外的陰離子交換樹(shù)脂洗脫。
19.根據(jù)權(quán)利要求18所述的方法，其中使用銨鹽用于所述洗脫。
20.根據(jù)權(quán)利要求18所述的方法，其中使用堿土金屬或任意二價(jià)陽(yáng)離子的氯化物鹽用于所述洗脫。
21.根據(jù)在前權(quán)利要求中的任一項(xiàng)所述的方法，所述方法還包括通過(guò)使所述洗脫物與合適的陽(yáng)離子交換樹(shù)脂接觸之后與弱堿陰離子交換樹(shù)脂接觸而凈化所述洗脫物。
22.根據(jù)在前權(quán)利要求中的任一項(xiàng)所述的方法，所述方法還包括通過(guò)選自以下各項(xiàng)的程序凈化所述洗脫物滲濾、納米過(guò)濾、電滲析和滲析。
23.根據(jù)在前權(quán)利要求中的任一項(xiàng)所述的方法，所述方法還包括通過(guò)納米過(guò)濾和/或蒸發(fā)將所述洗脫物濃縮，和/或?qū)a(chǎn)物干燥。
24.根據(jù)權(quán)利要求6至23中的任一項(xiàng)所述的方法，其中所述第一陽(yáng)離子交換樹(shù)脂是聚丙烯酸類弱酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂。
25.根據(jù)權(quán)利要求8至M中的任一項(xiàng)所述的方法，其中所述第一陰離子交換樹(shù)脂是丙烯酸類弱堿陰離子交換樹(shù)脂。
26.根據(jù)權(quán)利要求5至25中的任一項(xiàng)所述的方法，其中所述第二陽(yáng)離子交換樹(shù)脂是苯乙烯-DVB強(qiáng)酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂。
27.根據(jù)權(quán)利要求8至沈中的任一項(xiàng)所述的方法，其中所述第二陰離子交換樹(shù)脂是苯乙烯-DVB或丙烯酸類弱堿陰離子交換樹(shù)脂。
28.根據(jù)在前權(quán)利要求中的任一項(xiàng)所述的方法，其中所述第三陽(yáng)離子交換樹(shù)脂是苯乙烯-DVB強(qiáng)酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂。
29.根據(jù)在前權(quán)利要求中的任一項(xiàng)所述的方法，其中所述第三陰離子交換樹(shù)脂是苯乙烯-DVB弱堿陰離子交換樹(shù)脂。
30.通過(guò)根據(jù)權(quán)利要求1至四中的任一項(xiàng)所述的方法制備的3'-唾液酸乳糖。
31.一種用于制備乳制品的方法，所述方法包括根據(jù)權(quán)利要求1至四中的任一項(xiàng)所述的方法制備乳清的所述所需成分。
32.根據(jù)權(quán)利要求31所述的方法，其中乳清的所述所需成分是3'唾液酸乳糖。
33.根據(jù)權(quán)利要求31或32所述的方法，所述方法還包括使來(lái)自所述洗脫步驟的所述所需成分與乳制品流接觸的步驟。
34.根據(jù)權(quán)利要求31至33中的任一項(xiàng)所述的方法，其中所述乳制品是奶制品。
35.根據(jù)權(quán)利要求31至34中的任一項(xiàng)所述的方法，所述方法還包括通過(guò)納米過(guò)濾和/ 或蒸發(fā)將所述乳制品濃縮，和/或干燥所述乳制品。
全文摘要
一種用于從乳清，尤其是乳酪乳清分離和/或純化所需成分，尤其是3′唾液酸乳糖的方法，所述方法包括以下步驟任選地對(duì)乳清進(jìn)行超濾以提供蛋白質(zhì)濃縮物和乳清滲透物；將乳清或乳清滲透物與至少一個(gè)系列的離子交換樹(shù)脂接觸以將乳清滲透物脫礦質(zhì)，所述系列包括第一弱酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂、第一弱堿陰離子交換樹(shù)脂、第二強(qiáng)酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂、第二弱堿陰離子交換樹(shù)脂；使該脫礦質(zhì)滲透物與兩個(gè)最終離子交換樹(shù)脂接觸，所述最終離子交換樹(shù)脂包括強(qiáng)酸陽(yáng)離子交換樹(shù)脂和最終弱堿陰離子交換樹(shù)脂，其中所述所需成分，如3′唾液酸乳糖，被吸在最終陰離子交換樹(shù)脂上；以及將所述所需成分從所述最終陰離子交換樹(shù)脂洗脫。
文檔編號(hào)C07H19/00GK102482313SQ201080021669
公開(kāi)日2012年5月30日 申請(qǐng)日期2010年3月17日 優(yōu)先權(quán)日2009年3月17日
發(fā)明者斯蒂芬·尼爾·斯科特, 阿肖克·克里希納皮萊 申請(qǐng)人:分離技術(shù)投資有限公司