專利名稱：一種從夏枯草中提取夏枯草皂苷a的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物領(lǐng)域，尤其是涉及一種從夏枯草中提取夏枯草皂苷A的方法。
背景技術(shù)：
夏枯草皂苷A屬三萜類皂苷，分子式C35H54O9,分子量618. 3，夏枯草為唇形科植物夏枯草的果穗，又叫棒槌草、鐵色草、大頭花、夏枯頭，性味辛、苦、寒，歸肝、膽經(jīng)，具有清火， 明目，散結(jié)，消腫功效。常用于目赤腫痛，目珠夜痛，頭痛眩暈，瘰疬，癭瘤，乳癰腫痛；甲狀腺腫大，淋巴結(jié)結(jié)核，乳腺增生，高血壓的之癥。研究表明夏枯草中含有三萜及其苷類、留醇及其苷類、黃酮類、香豆素、有機酸、揮發(fā)油及糖類等成分，藥理作用廣泛，主要有降壓、降糖、 抗菌、抗炎、抗過敏及抗病毒等作用，近年來由于其明確的抗病毒及抗癌作用受到研究者的重視?，F(xiàn)有從夏枯草中提取夏枯草皂苷A的方法公開甚少。一般采用硅膠柱分離方法制備，收率較低，操作繁瑣。如郭蘭珍等采用大孔樹脂、硅膠柱和反相硅膠柱分離方法分離得到夏枯草皂苷A。再如田晶等采用萃取法和反復(fù)柱層析分離得到夏枯草皂苷A。高速逆流色譜是一種獨特的不用固態(tài)載體的液液分配色譜技術(shù)，消除了由于樣品在固相載體上的不可逆吸附和降解造成的損失，能實現(xiàn)連續(xù)有效分離的實用分離制備技術(shù)，能采用多種多樣的溶劑系統(tǒng)對任何極性范圍的樣品進行分離，能實現(xiàn)從微克、微升量級的分析分離到上百毫克、數(shù)克量級的制備提純。在天然產(chǎn)物分離純化上的應(yīng)用特別廣泛。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種從夏枯草中提取夏枯草皂苷A的方法，該方法操作簡單，制備周期短。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)的一種從夏枯草中提取夏枯草皂苷A 的方法，其特征在于以下步驟
1)夏枯草藥材粉碎，加60-80%乙醇溶液微波或超聲提取2-3次，提取液加活性炭脫色， 濾出活性炭，濃縮至無醇后采用大孔樹脂法或正丁醇萃取法，制得粗品；
2)取乙酸乙酯、正丁醇、甲醇、水混合，分層后，取下相充滿高速逆流色譜柱，轉(zhuǎn)動主機， 泵入上相做流動相，將粗品溶于上相由進樣閥進樣，ELSD測器檢測，根據(jù)圖譜收集目的成分，減壓干燥流分，即得。步驟1)中所述的大孔樹脂法為濃縮液加入非極性大孔樹脂吸附，用 4-5BV50-70%乙醇洗脫，收集洗脫液濃縮干燥。步驟2)中所述的乙酸乙酯、正丁醇、甲醇、水混合比例為3-5:10-11:2-3:17-20。步驟2)中所述的主機轉(zhuǎn)速700-1200rpm，流動相流速Uml/min。本發(fā)明采用高速逆流色譜分離，操作簡單，減少了樣品在分離過程中的損失，制備周期短，可以連續(xù)化生產(chǎn)，實現(xiàn)了夏枯草皂苷A的批量制備，產(chǎn)品含量高，更有利于開展藥理研究，也可以做對照品使用。
下面將結(jié)合具體實施方式
進一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。
具體實施例方式實施例1
夏枯草藥材粉碎，取1kg，加7倍量60%乙醇溶液微波提取2次，提取液加1%活性炭脫色，濾出活性炭，濃縮至無醇，加入DlOl大孔樹脂柱，飽和吸附后，取4BV70%乙醇洗脫，洗脫液濃縮干燥，得到粗品13g。取乙酸乙酯、正丁醇、甲醇、水，按3:10:2:17在分液漏斗中充分混合，分層后，取下相充滿高速逆流色譜柱，開啟主機轉(zhuǎn)速調(diào)至900rpm，泵入上相做流動相，動態(tài)平衡后，流動相流速調(diào)至2ml/min，將粗品溶于上相由進樣閥進樣，ELSD測器檢測， 根據(jù)圖譜收集目的成分，減壓干燥流分，制得1. Ig夏枯草皂苷A，經(jīng)HPLC檢測，含量96. 8%。實施例2:
夏枯草藥材粉碎，取1kg，加5倍量80%乙醇溶液超聲提取3次，提取液加m活性炭脫色，濾出活性炭，濃縮至無醇，加入水飽正丁醇萃取，濃縮萃取液得到粗品15g。取乙酸乙酯、 正丁醇、甲醇、水，按5:11:3:20在分液漏斗中充分混合，分層后，取下相充滿高速逆流色譜柱，開啟主機轉(zhuǎn)速調(diào)至700rpm，泵入上相做流動相，動態(tài)平衡后，流動相流速調(diào)至％il/min， 將粗品溶于上相由進樣閥進樣，ELSD測器檢測，根據(jù)圖譜收集目的成分，減壓干燥流分，得 980mg夏枯草皂苷A，經(jīng)HPLC檢測，含量95. 1%。實施例3:
夏枯草藥材粉碎，取^g，加5倍量70%乙醇溶液微波提取3次，提取液加1%活性炭脫色，濾出活性炭，濃縮至無醇，加入HPD100大孔樹脂柱，飽和吸附后，取5BV50%乙醇洗脫， 洗脫液濃縮干燥，得到粗品^g。取乙酸乙酯、正丁醇、甲醇、水，按3:11:2:20在分液漏斗中充分混合，分層后，取下相充滿高速逆流色譜柱，開啟主機轉(zhuǎn)速調(diào)至SOOrpm，泵入上相做流動相，動態(tài)平衡后，流動相流速調(diào)至3ml/min，將粗品溶于上相由進樣閥進樣，ELSD測器檢測，根據(jù)圖譜收集目的成分，減壓干燥流分，制得2. Ig夏枯草皂苷A，經(jīng)HPLC檢測，含量 98. 1%。實施例2:
夏枯草藥材粉碎，取^g，加9倍量80%乙醇溶液超聲提取2次，提取液加m活性炭脫色，濾出活性炭，濃縮至無醇，加入水飽正丁醇萃取，濃縮萃取液得到粗品75g。取乙酸乙酯、 正丁醇、甲醇、水，按4:11:2:20在分液漏斗中充分混合，分層后，取下相充滿高速逆流色譜柱，開啟主機轉(zhuǎn)速調(diào)至750rpm，泵入上相做流動相，動態(tài)平衡后，流動相流速調(diào)至2ml/min， 將粗品溶于上相由進樣閥進樣，ELSD測器檢測，根據(jù)圖譜收集目的成分，減壓干燥流分，得 5. 6g夏枯草皂苷A，經(jīng)HPLC檢測，含量96. 7%。
權(quán)利要求
1.一種從夏枯草中提取夏枯草皂苷A的方法，其特征在于以下步驟1)夏枯草藥材粉碎，加60-80%乙醇溶液微波或超聲提取2-3次，提取液加活性炭脫色， 濾出活性炭，濃縮至無醇后采用大孔樹脂法或正丁醇萃取法，制得粗品；2)取乙酸乙酯、正丁醇、甲醇、水混合，分層后，取下相充滿高速逆流色譜柱，轉(zhuǎn)動主機， 泵入上相做流動相，將粗品溶于上相由進樣閥進樣，ELSD測器檢測，根據(jù)圖譜收集目的成分，減壓干燥流分，即得。
2.如權(quán)利要求1所述從夏枯草中提取夏枯草皂苷A的方法，其特征在于步驟1)中所述的大孔樹脂法為濃縮液加入非極性大孔樹脂吸附，用4-5BV50-70%乙醇洗脫，收集洗脫液濃縮干燥。
3.如權(quán)利要求1所述從夏枯草中提取夏枯草皂苷A的方法，其特征在于步驟2)中所述的乙酸乙酯、正丁醇、甲醇、水混合比例為3-5:10-11:2-3:17-20。
4.如權(quán)利要求1所述從夏枯草中提取夏枯草皂苷A的方法，其特征在于步驟2)中所述的主機轉(zhuǎn)速700-1200rpm，流動相流速Uml/min。
全文摘要
本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物領(lǐng)域，尤其是提供一種從夏枯草中提取夏枯草皂苷A的方法。方法步驟如下1)夏枯草藥材粉碎，加60-80%乙醇溶液微波或超聲提取2-3次，提取液加活性炭脫色，濾出活性炭，濃縮至無醇后采用大孔樹脂法或正丁醇萃取法，制得粗品；2)取乙酸乙酯、正丁醇、甲醇、水混合，分層后，取下相充滿高速逆流色譜柱，轉(zhuǎn)動主機，泵入上相做流動相，將粗品溶于上相由進樣閥進樣，ELSD測器檢測，根據(jù)圖譜收集目的成分，減壓干燥流分，即得。本發(fā)明工藝操作簡單，制備周期短，收率高，所得產(chǎn)品純度高。
文檔編號C07J63/00GK102329363SQ201110186348
公開日2012年1月25日 申請日期2011年7月5日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月5日
發(fā)明者蘇劉花 申請人:南京澤朗農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司