專利名稱：負(fù)載維生素a和e的絲素蛋白納米纖維膜及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于絲素蛋白納米纖維膜及其制備領(lǐng)域，特別涉及一種負(fù)載維生素A和E 的絲素蛋白納米纖維膜及其制備方法。
背景技術(shù)：
納米纖維由于具有尺度小、比表面積大和物理性能優(yōu)異等特點(diǎn)，在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。納米纖維膜有小的孔徑和高的比表面積能促進(jìn)止血反應(yīng)而不用止血?jiǎng)?。納米纖維膜多孔結(jié)構(gòu)有利于細(xì)胞的呼吸而不引起傷口干燥，同時(shí)小的孔徑有效阻止細(xì)菌侵入，又具有良好的透氣透氧性能。換敷料帶來干擾神經(jīng)組織再生的幾率。靜電紡納米纖維能給皮膚細(xì)胞更好的自我修復(fù)路徑，從組織工程的觀點(diǎn)出發(fā)，仿生的納米纖維結(jié)構(gòu)有好的細(xì)胞傳導(dǎo)性和改善血液的相容性，使傷口更容易愈合和皮膚再生。納米纖維還是封裝藥物的理想材料，它不但能將固體藥物以顆粒形式封裝入纖維內(nèi)，還可以將液體藥物以雙層纖維或鏈珠狀纖維形式進(jìn)行封裝，從而有效實(shí)現(xiàn)對(duì)藥物的控制釋放。由于絲素蛋白是一種自然界非常豐富的天然蛋白質(zhì)，具有良好的生物相容性、生物可降解性、良好的透氣、透濕性、無免疫原性等優(yōu)異的性能，近年來被廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)藥領(lǐng)域。多種維生素被發(fā)現(xiàn)與皮膚健康有密切關(guān)系，在專利CN 101736430 A中，就公布了一種負(fù)載有維生素C的絲素蛋白納米纖維的制備方法，其纖維具有護(hù)膚功效。維生素A是一種脂溶性物質(zhì)，可以使上皮器官保持正常代謝。太陽的紫外線會(huì)引起人體皮膚中的維生素A缺乏癥，并可能導(dǎo)致皮膚的早衰和皮膚癌，如果用維生素A預(yù)處理皮膚會(huì)大大降低紫外線對(duì)皮膚的破壞作用，因此維生素A具有減少由光老化的作用，維生素A還可治療急性早幼粒細(xì)胞性白血病，粉刺及其他皮膚皮膚病癥，并可減慢皮膚老化，去除皺紋。維生素A的穩(wěn)定性問題，目前在國內(nèi)仍未得到徹底解決。許多廠家在制作含維生素A的水溶液制劑過程中，采取了諸如調(diào)節(jié)溶液的PH值、加絡(luò)合劑除去金屬離子、成品中充二氧化碳等措施，穩(wěn)定維生素A。維生素E又稱為抗不生育維生素或生育酚，是一種透明淡黃色粘稠油狀物，不溶于水，溶于有機(jī)溶劑，酸堿氫化過程及高溫均不會(huì)破壞維生素E。但它在空氣中會(huì)緩慢氧化， 紫外線照射可使其分解。它可以保護(hù)其他易被氧化的物質(zhì)使其不被破壞，所以它是極有效的氧化劑，可以預(yù)防重金屬、產(chǎn)生自由基的肝毒素和可以引起氧化劑致傷的各種藥物損害。 聚乙二醇維生素 E 琥珀酸酯(D-α -tocopherol polyethylene glycol succinate, TPGS, Vitamin E TPGS, Tocophersolan)是維生素E的水溶性衍生物，由維生素E琥珀酸酯(VES) 的羧基與聚乙二醇(PEG)酯化而成，已載入《美國藥典》。TPGS最早由美國festman公司生產(chǎn)并上市，在國外現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于制劑研究中，作為增溶劑、吸收促進(jìn)劑、乳化劑、增塑劑以及水難溶性和脂溶性藥物傳遞系統(tǒng)的載體，如固體分散體、眼部給藥的載體、鼻腔內(nèi)給藥的載體等，美國現(xiàn)已有TPG(質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20%的水溶液)產(chǎn)品上市(如Mazuri )，作為維生素 E的營養(yǎng)補(bǔ)充劑，折合成維生素E效價(jià)約為77. 4IU · g—1。TPGS非常穩(wěn)定，室溫放置不水解， 且?guī)缀鯚o味，可作為人維生素E補(bǔ)充劑，特別是那些對(duì)脂溶性維生素E吸收有障礙的人。在 US 523469中，以亞洲象和非洲象作為受試動(dòng)物，與服用脂溶性維生素E相比，口服質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20%的TPGS溶液后，體內(nèi)維生素E濃度增長快，較低劑量的水溶性維生素E就能達(dá)到較高的血藥濃度。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種負(fù)載維生素A和E的絲素蛋白納米纖維膜及其制備方法，該絲素蛋白納米纖維膜應(yīng)用人工皮膚、醫(yī)用敷料、止血材料、護(hù)膚產(chǎn)品等多個(gè)生物醫(yī)藥領(lǐng)域，在本發(fā)明整個(gè)制備過程中，不涉及到任何對(duì)環(huán)境和人類健康不友好的物質(zhì)，無污染，成本低，操作簡(jiǎn)單。本發(fā)明的一種負(fù)載維生素A和E的絲素蛋白納米纖維膜，所述納米纖維膜包括絲素蛋白納米纖維和負(fù)載于絲素蛋白納米纖維中的脂溶性維生素A和水溶性維生素E，納米纖維膜的直徑為10-800nm。所述水溶性維生素E為維生素E聚乙二醇琥珀酸酯。所述脂溶性維生素A為維生素A棕櫚酸酯或維生素A醋酸酯。所述納米纖維膜的直徑為300-600·。本發(fā)明的一種負(fù)載維生素A和E的絲素蛋白納米纖維膜的制備方法，包括(1)將脂溶性維生素A和水溶性維生素E加熱至融化，攪拌均勻，隨后于80 100°C加入相對(duì)于維生素E質(zhì)量4-9倍的去離子水，攪拌10-20min至透明液體，即維生素A 和E乳液；( 在上述維生素A和E乳液中加入絲素蛋白及去離子水至終濃度，攪拌至絲素蛋白完全溶解，得絲素蛋白-維生素A-維生素E溶液；其中，維生素E的終濃度為0. l-2wt %， 絲素蛋白的終濃度為20-35Wt%，維生素A的終濃度為0. l-8wt% ；(3)將上述絲素蛋白-維生素A-維生素E溶液移入注射器中進(jìn)行靜電紡絲，即得絲素蛋白納米纖維膜。所述步驟⑵中的絲素蛋白的制備方法為將去蛹蠶繭在100°C的0. 5wt% Na2CO3 水溶液中煮2-5次，每次30min進(jìn)行脫膠，得到絲素，用摩爾比為1 2 8的CaCl2、C2H5OH 和H2O或用0. 8g/ml LiBr水溶液在40_60°C溶解l_2h，用蒸餾水透析3_5天，冷凍干燥即得。所述步驟O)中的維生素E的終濃度為0. 5-2wt%。所述步驟O)中的絲素蛋白的終濃度為25_30wt %。所述步驟⑵中的維生素A的終濃度為0. 5-8wt %。所述步驟(3)中的靜電紡絲的工藝條件為靜電壓為16-20千伏，接受距離為 80-220mm,紡絲速率為0. 1-1. 0毫升/小時(shí)。本發(fā)明使用TPGS作為乳化劑，將維生素A負(fù)載入納米纖維中，從而保護(hù)維生素A， 提高藥物的利用率，減少用藥量，降低并防止藥物對(duì)身體其他部位的傷害，同時(shí)降低代謝系統(tǒng)的負(fù)擔(dān)。有益效果本發(fā)明可使維生素A、維生素E及絲素蛋白同時(shí)溶解在水中，在本發(fā)明整個(gè)制備過程中，不涉及到任何對(duì)環(huán)境和人類健康不友好的物質(zhì)，無污染，成本低，操作簡(jiǎn)單，并結(jié)合利用納米纖維、維生素A與E和絲素蛋白的優(yōu)良特點(diǎn)，本發(fā)明的負(fù)載有水溶性維生素A和E的納米纖維可應(yīng)用人工皮膚、醫(yī)用敷料、止血材料、護(hù)膚產(chǎn)品等多個(gè)生物醫(yī)藥領(lǐng)域。


圖1為實(shí)施例1所制得的納米纖維膜材料的掃描電鏡圖；圖2為實(shí)施例2所制得的納米纖維膜材料的掃描電鏡圖；圖3為實(shí)施例3所制得的納米纖維膜材料的掃描電鏡圖；圖4為實(shí)施例1所得的納米纖維膜材料的纖維直徑分布圖；圖5為成纖維細(xì)胞在乳液紡維生素A-維生素E絲素蛋白納米纖維支架細(xì)胞增殖狀態(tài)比較；圖6為乳液紡維生素A-維生素E納米纖維支架細(xì)胞抗氧化性能比較。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對(duì)本發(fā)明作各種改動(dòng)或修改，這些等價(jià)形式同樣落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求書所限定的范圍。實(shí)施例1(1)將去蛹蠶繭在100°C的0. 5wt% Na2CO3水溶液中煮2次，每次30min進(jìn)行脫膠， 將脫膠得到絲素，用摩爾比為1 2 8的CaCl2、C2H5OH和H2O在60°C溶解1. 5h，冷凍干燥得到疏松的多孔狀固體絲素蛋白。(2)準(zhǔn)確稱取0. 16克TPGS及0. 02克維生素A棕櫚酸酯，加熱至融化，磁力攪拌均勻，隨后加熱1. Mml的90°C的去離子水，充分?jǐn)嚢?5min，撤去熱源，攪拌至呈透明的、微黃色液體，在維生素A-維生素E乳液中加入1. Og絲素蛋白及去離子水，最終質(zhì)量為4. Og, 密封后繼續(xù)攪拌至絲素蛋白完全溶解，隨后靜置數(shù)分鐘后將紡絲液轉(zhuǎn)移至注射器中，電壓為20kV，注射泵推進(jìn)速度為0. 3ml/h,采用鋁箔接收，接收距離為18cm，，得負(fù)載維生素A和 E的絲素蛋白納米纖維膜，平均直徑為465 士 161nm。實(shí)施例2(1)將去蛹蠶繭在100°C的0. 5wt% Na2CO3水溶液中煮4次，每次30min進(jìn)行脫膠， 將脫膠得到絲素，0. 8g/ml LiBr水溶液在45°C溶解池，冷凍干燥得到疏松的多孔狀固體絲
素蛋白。(2)準(zhǔn)確稱取0. 32克TPGS及0. 08克維生素A棕櫚酸酯，加熱至融化，磁力攪拌均勻，隨后加熱1.2ml的90°C的去離子水，充分?jǐn)嚢?5min，撤去熱源，攪拌至呈透明的、微黃色液體，在維生素A-維生素E乳液中加入1. Og絲素蛋白及去離子水，最終質(zhì)量為4. Og,密封后繼續(xù)攪拌至絲素蛋白完全溶解，隨后靜置數(shù)分鐘后將紡絲液轉(zhuǎn)移至注射器中，電壓為 18kV，注射泵推進(jìn)速度為(Mml/h，采用鋁箔接收，接收距離為18cm，，得負(fù)載維生素A和E的絲素蛋白納米纖維膜，平均直徑為405 士 llOnm。實(shí)施例3(1)將去蛹蠶繭在100°C的0. 5wt% Na2CO3水溶液中煮5次，每次30min進(jìn)行脫膠， 將脫膠得到絲素，0. 8g/ml LiBr水溶液在45°C溶解池，冷凍干燥得到疏松的多孔狀固體絲素蛋白。(2)準(zhǔn)確稱取0. 016克TPGS及0. 04克維生素A棕櫚酸酯，加熱至融化，磁力攪拌均勻，隨后加熱1. 2ml的85°C的去離子水，充分?jǐn)嚢?5min，撤去熱源，攪拌至呈透明的、微黃色液體，在維生素A-維生素E乳液中加入1. 5g絲素蛋白及去離子水，最終質(zhì)量為4. Og, 密封后繼續(xù)攪拌至絲素蛋白完全溶解，隨后靜置數(shù)分鐘后將紡絲液轉(zhuǎn)移至注射器中，電壓為18kV，注射泵推進(jìn)速度為0. 4ml/h,采用鋁箔接收，接收距離為18cm，得負(fù)載維生素A和E 的絲素蛋白納米纖維膜。實(shí)施例4(1)將去蛹蠶繭在100°C的0. 5wt% Na2CO3水溶液中煮5次，每次30min進(jìn)行脫膠， 將脫膠得到絲素，0. 8g/ml LiBr水溶液在40°C溶解lh，冷凍干燥得到疏松的多孔狀固體絲
素蛋白。(2)準(zhǔn)確稱取0. 32克TPGS及0. 08克維生素A棕櫚酸酯，加熱至融化，磁力攪拌均勻，隨后加熱1.2ml的90°C的去離子水，充分?jǐn)嚢?5min，撤去熱源，攪拌至呈透明的、微黃色液體，在維生素A-維生素E乳液中加入0. Sg絲素蛋白及去離子水，最終質(zhì)量為4. Og,密封后繼續(xù)攪拌至絲素蛋白完全溶解，隨后靜置數(shù)分鐘后將紡絲液轉(zhuǎn)移至注射器中，電壓為 20kV，注射泵推進(jìn)速度為lml/h，采用鋁箔接收，接收距離為22cm，得負(fù)載維生素A和E的絲素蛋白納米纖維膜。實(shí)施例5(1)將去蛹蠶繭在100°C的0. 5wt% Na2CO3水溶液中煮5次，每次30min進(jìn)行脫膠， 將脫膠得到絲素，0. 8g/ml LiBr水溶液在45°C溶解池，冷凍干燥得到疏松的多孔狀固體絲
素蛋白。(2)準(zhǔn)確稱取0. 32克TPGS及0. 02克維生素A棕櫚酸酯，加熱至融化，磁力攪拌均勻，隨后加熱1. 38ml的90°C的去離子水，充分?jǐn)嚢?5min，撤去熱源，攪拌至呈透明的、微黃色液體，在維生素A-維生素E乳液中加入0. Sg絲素蛋白及去離子水，最終質(zhì)量為4. 0g，密封后繼續(xù)攪拌至絲素蛋白完全溶解，隨后靜置數(shù)分鐘后將紡絲液轉(zhuǎn)移至注射器中，電壓為 16kV，注射泵推進(jìn)速度為lml/h，采用鋁箔接收，接收距離為0. 8cm,得負(fù)載維生素A和E的絲素蛋白納米纖維膜。效果實(shí)施例1生物相容性檢測(cè)(1)材料制備及處理如前述實(shí)施例1，2方法配制溶液并采用實(shí)施例1，2方法中的其他紡絲參數(shù)，采用直徑為14mm的圓形蓋玻片接收靜電紡納米纖維，將纖維膜放置于真空干燥箱中干燥，置于 75% (ν/ν)乙醇蒸汽中Mh，進(jìn)行材料的后處理及消毒滅菌，用于細(xì)胞培養(yǎng)。其中使用質(zhì)量濃度為25%的純絲素蛋白紡絲液，電壓為20kV，注射泵推進(jìn)速度為0. :3ml/h，采用直徑為14mm的圓形蓋玻片接收靜電紡納米纖維，接收距離為18cm，作為對(duì)比實(shí)施例1中的納米纖維組。采用14mm的圓形蓋玻片，作為對(duì)比實(shí)施例2中的玻片組。對(duì)照組同樣置于75% (ν/ν)乙醇蒸汽中Mh，進(jìn)行材料的后處理及消毒滅菌，用于細(xì)胞培養(yǎng)。O) MTT 實(shí)驗(yàn)
將IO4個(gè)/mL的成纖維細(xì)胞懸液接種于M孔培養(yǎng)板中經(jīng)消毒的實(shí)施例1，2，3和對(duì)比實(shí)施例1，2，每孔接種細(xì)胞懸液200 μ L，每組3孔。分別培養(yǎng)ld、3d、5d和7d后，每組3 孔換加不含血清的培養(yǎng)液360 μ L和MTT溶液(5mg/mL) 40 μ L，培養(yǎng)箱培養(yǎng)3 4h，吸去孔內(nèi)培養(yǎng)液，每孔加入400 μ L 二甲基亞砜，振蕩30min使結(jié)晶物溶解。每孔各取二甲基亞砜溶解液100 μ L加入96孔酶標(biāo)板中，然后在酶標(biāo)儀上用492nm波長段測(cè)OD值。每組設(shè)3復(fù)孔，并重復(fù)實(shí)驗(yàn)3次。結(jié)果如附圖5所示MTT 效果附圖5為所示為成纖維細(xì)胞在不同維生素A及維生素E濃度下的納米纖維支架上培養(yǎng)1、3、5、7天的增殖情況。與玻片相比(對(duì)比實(shí)施例2)，細(xì)胞在靜電紡納米纖維支架上都有更好的增殖。值得注意的是，實(shí)施例1納米纖維支架由于其纖維結(jié)構(gòu)更為圓潤均勻，更有益于細(xì)胞的增殖粘附。而實(shí)施例2納米纖維由于串珠數(shù)量較多，且纖維結(jié)構(gòu)不規(guī)則，其細(xì)胞增殖的活性低于另兩組納米纖維支架(實(shí)施例1和對(duì)比實(shí)施例1)。由此可知，維生素 A與維生素E的濃度配比是非顯而易見的，組分的微妙變化也會(huì)造成生物相容性效果的不同。培養(yǎng)7天后，細(xì)胞在負(fù)載有維生素及純絲素納米纖維支架上(實(shí)施例1，2以及對(duì)比實(shí)施例1)的增殖明顯快于玻片組，存在顯著性差異(P < 0. 05)，且各納米纖維組之間也存在顯著性差異(P <0.05)。由此可知，乳液紡維生素絲素蛋白復(fù)合納米纖維具有優(yōu)良的生物相容性，且實(shí)施例1中的納米纖維組，生物相容性優(yōu)于實(shí)施例2。效果實(shí)施例2抗氧化性能細(xì)胞按實(shí)驗(yàn)室常規(guī)操作接種只材料上培養(yǎng)至融合度達(dá)到90% (生長面積覆蓋約 90% )，加入不同濃度的氧化劑t-BHP(50,100，200，400 μ Μ)，共同培養(yǎng)24小時(shí)，隨后使用 PBS緩沖液洗3遍，每孔加入預(yù)熱的DMEM培養(yǎng)基360 μ L，然后加入預(yù)熱的MTT 40 μ L繼續(xù)培養(yǎng)4小時(shí)，吸出培養(yǎng)基，每孔加入DMSO 400 μ L，在37°C搖床中溶解20min，形成紫色溶液， 然后用移液槍吸取溶液加入96孔培養(yǎng)板中，每孔100 μ L，測(cè)定吸光值。抗氧化結(jié)果t-BHP可以誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞的細(xì)胞損傷及凋亡，常用作氧化損傷模型，本實(shí)施例考察負(fù)載維生素的絲素蛋白納米纖維支架是否有助于皮膚細(xì)胞對(duì)抗t-BHP造成的氧化損傷。細(xì)胞按前述MTT實(shí)驗(yàn)中的方法接種后培養(yǎng)至融合度達(dá)到90% (細(xì)胞的鋪滿程度)，加入不同濃度的氧化劑t-BHP (50，100，200，400 μ Μ)，共同培養(yǎng)24小時(shí)，隨后使用PBS 緩沖液洗3遍，每孔加入預(yù)熱的DMEM培養(yǎng)基360 μ L，然后加入預(yù)熱的MTT 40 μ L繼續(xù)培養(yǎng) 4小時(shí)，吸出培養(yǎng)基，每孔加入DMSO 400 μ L，在37°C搖床中溶解20min，形成紫色溶液，然后用移液槍吸取溶液加入96孔培養(yǎng)板中，每孔100 μ L，測(cè)定吸光值。結(jié)果如附圖6所示如圖6中所示，玻片對(duì)照組(對(duì)比實(shí)施例2)上的皮膚成纖維細(xì)胞活力隨著t-BHP 濃度的增大呈現(xiàn)顯著遞減趨勢(shì)。低濃度的t-BHP (50-100 μ M)對(duì)實(shí)施例1所制得的乳液紡維生素A-維生素E絲素蛋白納米纖維支架上的細(xì)胞沒有損害，反而輕微地增加了其活性 (與未添加t-BHP的純培養(yǎng)基組相比)，當(dāng)t-BHP濃度增加至200 μ M以上時(shí)，細(xì)胞的活性依然保持在85%左右(與未添加t-BHP的純培養(yǎng)基組相比)。而純絲素納米纖維組(對(duì)比實(shí)施例1)對(duì)高濃度GOO μ M) t-BHP的耐受較差，細(xì)胞活性僅為70%左右，表明其抗氧化效果不及乳液紡維生素(A-E)納米纖維組。維生素E的抗氧化作用早已為人們所知曉，維生素A能夠與酚氧自由基發(fā)生反應(yīng)，從而有效地起到抗氧化的作用。上述表明維生素A-維生素 E絲素蛋白納米纖維有助于皮膚成纖維細(xì)胞對(duì)抗氧化損傷。
權(quán)利要求
1.一種負(fù)載維生素A和E的絲素蛋白納米纖維膜，其特征在于所述納米纖維膜包括絲素蛋白納米纖維和負(fù)載于絲素蛋白納米纖維中的脂溶性維生素A和水溶性維生素E，納米纖維膜的直徑為10-800nm。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種負(fù)載維生素A和E的絲素蛋白納米纖維膜，其特征在于 所述水溶性維生素E為維生素E聚乙二醇琥珀酸酯。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種負(fù)載維生素A和E的絲素蛋白納米纖維膜，其特征在于 所述脂溶性維生素A為維生素A棕櫚酸酯或維生素A醋酸酯。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種負(fù)載維生素A和E的絲素蛋白納米纖維膜，其特征在于 所述納米纖維膜的直徑為300-600nm。
5.一種負(fù)載維生素A和E的絲素蛋白納米纖維膜的制備方法，包括(1)將脂溶性維生素A和水溶性維生素E加熱至融化，攪拌均勻，隨后于80 100°C加入相對(duì)于維生素E質(zhì)量4-9倍的去離子水，攪拌10-20min至透明液體，即維生素A和E乳液；(2)在上述維生素A和E乳液中加入絲素蛋白及去離子水至終濃度，攪拌至絲素蛋白完全溶解，得絲素蛋白-維生素A-維生素E溶液；其中，維生素E的終濃度為0. l-2wt%，絲素蛋白的終濃度為20-35wt%，維生素A的終濃度為0. I-Swt % ；(3)將上述絲素蛋白-維生素A-維生素E溶液移入注射器中進(jìn)行靜電紡絲，即得絲素蛋白納米纖維膜。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種負(fù)載維生素A和E的絲素蛋白納米纖維膜的制備方法， 其特征在于所述步驟O)中的絲素蛋白的制備方法為將去蛹蠶繭在100°C的0.5wt% Na2CO3水溶液中煮2-5次，每次30min進(jìn)行脫膠，得到絲素，用摩爾比為1 2 8的CaCl2、 C2H5OH和H2O或用0. 8g/ml LiBr水溶液在40_60°C溶解l_2h，用蒸餾水透析3_5天，冷凍干燥即得。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種負(fù)載維生素A和E的絲素蛋白納米纖維膜的制備方法， 其特征在于所述步驟O)中的維生素E的終濃度為0. 5-2wt%。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種負(fù)載維生素A和E的絲素蛋白納米纖維膜的制備方法， 其特征在于所述步驟O)中的絲素蛋白的終濃度為25-30wt%。
9.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種負(fù)載維生素A和E的絲素蛋白納米纖維膜的制備方法， 其特征在于所述步驟O)中的維生素A的終濃度為0. 5-8wt%。
10.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種負(fù)載維生素A和E的絲素蛋白納米纖維膜的制備方法， 其特征在于所述步驟(3)中的靜電紡絲的工藝條件為靜電壓為16-20千伏，接受距離為 80-220mm,紡絲速率為0. 1-1. 0毫升/小時(shí)。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種負(fù)載維生素A和E的絲素蛋白納米纖維膜及其制備方法，納米纖維膜包括絲素蛋白納米纖維和負(fù)載于絲素蛋白納米纖維中的脂溶性維生素A和水溶性維生素E。制備方法包括(1)將維生素A和E加熱至融化，攪拌均勻，隨后于80～100℃加入去離子水，攪拌10-20min至透明液體，即維生素A和E乳液；(2)在上述維生素A和E乳液中加入絲素蛋白及去離子水至終濃度，攪拌至絲素蛋白完全溶解，得三者混合溶液；(3)將上述溶液移入注射器中進(jìn)行靜電紡絲，即得。本發(fā)明無污染，成本低，操作簡(jiǎn)單，本發(fā)明的納米纖維可應(yīng)用人工皮膚、醫(yī)用敷料、止血材料、護(hù)膚產(chǎn)品等多個(gè)生物醫(yī)藥領(lǐng)域。
文檔編號(hào)C07K1/14GK102560887SQ20121001438
公開日2012年7月11日 申請(qǐng)日期2012年1月17日 優(yōu)先權(quán)日2012年1月17日
發(fā)明者何創(chuàng)龍, 崔呈俊, 王紅聲, 盛曉悅, 范林鵬, 莫秀梅, 韓峰 申請(qǐng)人:東華大學(xué)