專利名稱：一種小百部苷b的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種小百部苷B的制備方法。
背景技術(shù)：
小百部又名滇百部，為百合科(Liliaceae)天門冬屬植物羊齒天門冬的塊根，主產(chǎn)于云南和四川，為民間常用藥物，用于治療氣管炎、肺炎和咳嗽?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，小百部具有抑瘤、抑菌、鎮(zhèn)咳等多種藥理活性。已從小百部中分離得小百部苷A、小百部苷B、小百部苷C、Asp IV -22-甲氧基化物等4種留體皂苷，其中小百部苷B的抗腫瘤活性較強。小百部苷B (Aspafilioside B)為白色針晶(甲醇)，mp. 180-182 °C，分子式為C H7(l016,分子量為843. 02,分子結(jié)構(gòu)式為CHj
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OH—目前對小百部皂苷和單體成分小百部苷B的研究尚處于起步階段，相關(guān)研究報道較少，提取方法僅限于實驗室少量制備用于化學(xué)成分鑒別，因此提供一種簡單、產(chǎn)品含量高的提取制備小百部苷B的方法具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種小百部苷B的制備方法。本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的
一種小百部苷B的制備方法，其特征在于包括以下步驟
a.將干燥小百部粉碎，采用連續(xù)逆流提取，小百部與溶劑重量比為1:10-14，提取溫度45-65°C，提取時間為I. 5-2. 5h，過濾得到提取液；
b.提取液濃縮至無醇，提取液濃縮至無醇，加水分散，過濾，濾液通過大分子量的超濾膜得到超濾液，再通過小分子量的超濾膜，得到超濾液；
c.超濾液減壓濃縮，真空干燥即得小百部苷B粗品，采用制備高效液相色譜分離得到小百部苷B純品。所述溶劑為60-90%的乙醇溶液。所述大分子量的超濾膜為截留分子量8000-10000的中空復(fù)合膜，壓力O. 3-0. 7Mpa，小分 子量的超濾膜為截留分子量為2000-3000的中空復(fù)合膜，壓力為O. 5-1. 2Mpa。本發(fā)明的有益效果是1、采用連續(xù)逆流提取實現(xiàn)連續(xù)操作，提高了生產(chǎn)能力，同時提高了對原料的利用率、節(jié)省成本；2、兩次超濾能有效除去多種雜質(zhì)，產(chǎn)品質(zhì)量好，并能實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。
具體實施例方式 下面將結(jié)合具體實施方式
進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。實施例I :
將干燥小百部粉碎，取lkg，采用連續(xù)逆流提取，加入10kg78%的乙醇溶液，于50°C溫度下提取2h，過濾得到提取液，提取液濃縮至無醇，加3L水分散，過濾，濾液通過截留分子量8000-10000的中空復(fù)合膜，壓力O. 6Mpa，超濾液再通過截留分子量為2000的中空復(fù)合膜，壓力為O. 7Mpa，得到二次超濾液，減壓濃縮，真空干燥即得小百部苷B粗品，用80%甲醇溶解，配制成30mg/ml的溶液，經(jīng)O. 45 μ m微濾膜過濾，制備型高液相色譜制備柱以C18鍵合相為填料，進(jìn)樣體積為40ml，以72%乙腈水溶液為流動相，控制流動相流速為40ml/min，紫外在線監(jiān)測，收集小百部苷B的高純度流分，濃縮、低溫干燥，得到含量98. 4%的小百部苷B純品I. 84g。實施例2:
將干燥小百部粉碎，取lkg，采用連續(xù)逆流提取，加入12kg60%的乙醇溶液，于65°C溫度下提取2. 5h，過濾得到提取液，提取液濃縮至無醇，加4L水分散，過濾，濾液通過截留分子量8000-10000的中空復(fù)合膜，壓力O. 3Mpa，超濾液再通過截留分子量為3000的中空復(fù)合膜，壓力為O. 8Mpa，得到二次超濾液，減壓濃縮，真空干燥即得小百部苷B粗品，用80%甲醇溶解，配制成45mg/ml的溶液，經(jīng)O. 45 μ m微濾膜過濾，制備型高液相色譜制備柱以C18鍵合相為填料，進(jìn)樣體積為40ml，以72%乙腈水溶液為流動相，控制流動相流速為20ml/min，紫外在線監(jiān)測，收集小百部苷B的高純度流分，濃縮、低溫干燥，得到含量98. 6%的小百部苷B 純品 I. 76g。實施例3:
將干燥小百部粉碎，取lkg，采用連續(xù)逆流提取，加入13kg65%的乙醇溶液，于45°C溫度下提取I. 5h，過濾得到提取液，提取液濃縮至無醇，加6L水分散，過濾，濾液通過截留分子量8000-10000的中空復(fù)合膜，壓力O. 5Mpa，超濾液再通過截留分子量為3000的中空復(fù)合膜，壓力為I. OMpa，得到二次超濾液，減壓濃縮，真空干燥即得小百部苷B粗品，用80%甲醇溶解，配制成35mg/ml的溶液，經(jīng)O. 45 μ m微濾膜過濾，制備型高液相色譜制備柱以C18鍵合相為填料，進(jìn)樣體積為40ml，以72%乙腈水溶液為流動相，控制流動相流速為50ml/min，紫外在線監(jiān)測，收集小百部苷B的高純度流分，濃縮、低溫干燥，得到含量98. 3%的小百部苷B 純品 1.89g。實施例4:將干燥小百部粉碎，取2kg，采用連續(xù)逆流提取，加入20kg80%的乙醇溶液，于60°C溫度下提取2. 5h，過濾得到提取液，提取液濃縮至無醇，加8L水分散，過濾，濾液通過截留分子量8000-10000的中空復(fù)合膜，壓力O. 4Mpa，超濾液再通過截留分子量為2000的中空復(fù)合膜，壓力為O. 6Mpa，得到二次超濾液，減壓濃縮，真空干燥即得小百部苷B粗品，用80%甲醇溶解，配制成40mg/ml的溶液，經(jīng)O. 45 μ m微濾膜過濾，制備型高液相色譜制備柱以C18鍵合相為填料，進(jìn)樣體積為50ml，以72%乙腈水溶液為流動相，控制流動相流速為30ml/min，紫外在線監(jiān)測，收集小百部苷B的高純度流分，濃縮、低溫干燥，得到含量99. 2%的小百部苷B 純品 3. 56g。實施例5:
將干燥小百部粉碎，取2kg，采用連續(xù)逆流提取，加入28kg90%的乙醇溶液，于55°C溫度下提取2h，過濾得到提取液，提取液濃縮至無醇，加IOL水分散，過濾，濾液通過截留分子量8000-10000的中空復(fù)合膜，壓力O. 7Mpa，超濾液再通過截留分子量為3000的中空復(fù)合膜，壓力為I. 2Mpa，得到二次超濾液，減壓濃縮，真空干燥即得小百部苷B粗品，用80%甲醇溶 解，配制成50mg/ml的溶液,經(jīng)O. 45 μ m微濾膜過濾,制備型高液相色譜制備柱以C18鍵合相為填料，進(jìn)樣體積為50ml，以72%乙腈水溶液為流動相，控制流動相流速為25ml/min，紫外在線監(jiān)測，收集小百部苷B的高純度流分，濃縮、低溫干燥，得到含量98. 8%的小百部苷B純品3. 68g。
權(quán)利要求
1.一種小百部苷B的制備方法，其特征在于包括以下步驟 a.將干燥小百部粉碎，采用連續(xù)逆流提取，小百部與溶劑重量比為1:10-14，提取溫度45-65°C，提取時間為I. 5-2. 5h，過濾得到提取液； b.提取液濃縮至無醇，提取液濃縮至無醇，加水分散，過濾，濾液通過大分子量的超濾膜得到超濾液，再通過小分子量的超濾膜，得到超濾液； c.超濾液減壓濃縮，真空干燥即得小百部苷B粗品，采用制備高效液相色譜分離得到小百部苷B純品。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種小百部苷B的制備方法，其特征在于所述溶劑為60-90%的乙醇溶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種小百部苷B的制備方法，其特征在于所述大分子量的超濾膜為截留分子量8000-10000的中空復(fù)合膜，壓力O. 3-0. 7Mpa，小分子量的超濾膜為截留分子量為2000-3000的中空復(fù)合膜，壓力為O. 5-1. 2Mpa。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種小百部苷B的制備方法，該提取物是由下列步驟制得的以小百部為原料，采用連續(xù)逆流提取，小百部與溶劑重量比為110-14，提取液濃縮至無醇，加水分散，過濾，濾液通過兩次超濾膜濾過，得到超濾液，減壓濃縮，干燥得小百部苷B粗品，采用制備高效液相色譜分離得到小百部苷B純品。本發(fā)明的小百部苷B的制備方法工藝合理，提取效率高，產(chǎn)品質(zhì)量好。
文檔編號C07J71/00GK102875638SQ20121036902
公開日2013年1月16日 申請日期2012年9月27日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月27日
發(fā)明者蘇劉花 申請人:南京澤朗農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司