一種分離純化甘草酸和甘草次酸的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種四區(qū)模擬移動床分離甘草酸和甘草次酸的方法。本發(fā)明的特征是：采用模擬移動床色譜系統(tǒng)，填料為纖維素-三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)，以甲醇為流動相。從甘草粗提物中分離出高純度的甘草酸和甘草次酸。模擬移動床色譜系統(tǒng)是連續(xù)化生產(chǎn)，自動化程度高，生產(chǎn)效率高。
【專利說明】一種分離純化甘草酸和甘草次酸的制備方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種天然產(chǎn)物的分離技術，特別是甘草酸和甘草次酸的模擬移動床色譜分離方法。
【背景技術】
[0002]豆科植物甘草是中藥中常用的重要藥材，1964年荷蘭Revers發(fā)現(xiàn)甘草提取物對醫(yī)治胃潰瘍有較好療效；此后又發(fā)現(xiàn)甘草有利尿、抗炎、抗?jié)?、抗癌、防治病毒性肝炎、高脂血癥、艾滋病和增強細胞免疫能力的功效?，F(xiàn)代醫(yī)學研究證明，甘草具有醫(yī)療保健功能的主要有效成分是甘草酸，而實際起治療效果的是甘草次酸。使用甘草次酸治療相應的疾病，可以更好地實現(xiàn)藥物劑量和實際治療的對應關系，以控制甘草酸類藥物所帶來的副作用。甘草次酸在工業(yè)中也有廣泛的應用，主要用于合成天然防腐劑、天然增色劑、天然增稠劑和防曬養(yǎng)護品等。我國甘草資源豐富，是甘草出口大國，然而目前多限于甘草原料及粗制品，價值較低，且很難打入國際市場，其藥效也沒有得到眾多國家的承認。目前甘草酸作為甜味劑而被廣泛應用。而高純度的甘草酸和甘草次酸的價格十分昂貴。因此，找到一條適合工業(yè)生產(chǎn)的提取純化甘草酸和甘草次酸的途徑很有現(xiàn)實意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的是提供一種甘草酸和甘草次酸的模擬移動床拆分的方法。
[0004]本發(fā)明為實現(xiàn)上述發(fā)明目的采用的技術方案如下:一種甘草粗提物的模擬移動床的拆分方法，其特征在于用纖維素-三(3，5_ 二甲基苯基氨基甲酸酯)為固定相，用甲醇為流動相，用模擬移動床系統(tǒng)從甘草粗提物中拆分出高純度的甘草酸和甘草次酸，包括一下步驟:
(1)、將甘草粗提物溶于甲·醇中，濃度為:(Tl00g/ml；
(2)、用模擬移動床拆分甘草粗提物；
(3)、濃縮、重結晶得到高純度的兩種甘草酸和甘草次酸。
[0005]本發(fā)明具有以下技術效果:本發(fā)明采用模擬移動床系統(tǒng)，從甘草粗提物中拆分出高純度的甘草酸和甘草次酸，工藝簡單，生產(chǎn)連續(xù)自動化，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，溶劑采用甲醇，可回收利用，無污染，實現(xiàn)清潔生產(chǎn)。
【具體實施方式】
[0006]1、設備及條件選擇
采用模擬移動床色譜系統(tǒng)，該系統(tǒng)包括洗脫泵、進樣泵、萃取泵、色譜柱、電磁閥、單向閥、控溫器和PLC系統(tǒng)控制器及計算機組成。樣品溶液和洗脫液分別從樣品液入口和洗脫液入口注入系統(tǒng)，甘草酸和甘草次酸分別從提余液和提取液兩個出口中流出，每隔一定的時間樣品液和洗脫液入口，提取液和提余液出口沿流動相流動的方向切換至下一支色譜柱。[0007]2、色譜柱填料及流動相(溶劑)選擇
填料纖維素-三(3，5_ 二甲基苯基氨基甲酸酯)涂覆型手性固定相，采用公知的方法(Okamoto Y , Kawashima M , Hatada K J.Chromatogr.1986，363:173~186)制備，填料粒度為f 150um，微粒越小，粒徑分布越窄，越有利于分離；但粒徑越小系統(tǒng)壓力越大，最適宜的粒徑范圍是2(T40um。流動相(溶劑)為甲醇。
[0008]3、分離步驟
A、樣品用甲醇溶解，濃度為0-100g/ml，由進樣泵注入色譜系統(tǒng)，進樣濃度的增加有利于提高產(chǎn)量，但其濃度受甘草粗提物的限制，色譜系統(tǒng)由4~24根制備柱組成，分為4個區(qū)，色譜柱數(shù)目越多分離越好，但系統(tǒng)的復雜度及系統(tǒng)壓力越高，最適合的是8~12根，通過模擬移動床色譜系統(tǒng)的控制器，定期控制電磁閥的開閉，使進樣口、萃取液出口及殘余液出口沿流動相的方向定期變換，使甘草酸和甘草次酸從提取液和提余液兩個出口流出系統(tǒng)；
B、得到的產(chǎn)品溶液，經(jīng)過濃縮、重結晶，得到純度在98%以上的合格產(chǎn)品；
C、成品檢驗 流動相:甲醇 流速:lml/min
泵:江蘇漢邦科技分析泵
色譜柱:4.6*250mm填料為自制涂敷型纖維素-三(3,5- 二甲基苯基氨基甲酸酯) 檢測器:江蘇漢邦科技紫外檢測器 檢測波長:230nm。
下面結合實例進一步說明本發(fā)明:
實施方式:
1、纖維素-三(3，5_ 二甲基苯基氨基甲酸酯)填料的制備
按照文獻(Okamoto Y , Kawashima M , Hatada K J.Chromatogr.1986，363:173~186)的方法制備。纖維素與異氫酸苯酯在吡咯溶液中在100°C下反應24小時，反應得到的甲醇不容物即為纖維素-三(3，5_ 二甲基苯基氨基甲酸酯)。纖維素-三(3，5_ 二甲基苯基氨基甲酸酯)溶于四氫呋喃，并將氨丙基硅膠加入到溶液中，電磁攪拌，至四氫呋喃揮發(fā)完，重復3次，得到纖維素-三(3，5_ 二甲基苯基氨基甲酸酯)涂敷型手性固定相。其中纖維素-三(3，5_ 二甲基苯基氨基甲酸酯)與氨丙基硅膠的重量比為1:5。
[0009]2、流動相流速的選擇
流動相的流速影響了甘草酸和甘草次酸的分離，同時也影響模擬移動床色譜的生產(chǎn)效率。首先用模擬移動床色譜系統(tǒng)的一支柱子(10*250mm)進行流速選擇分析，
模擬移動床的分離 流動相:甲醇 進樣濃度:(Tl00g/ml 進樣液流速:(T50ml/min 洗脫液流速:(Tl000ml/min 萃取液流速:CTl00ml/min 參與液流速:0~100ml/min 切換時間:3~20min色譜柱溫度:(T50°C
3、成品檢驗
泵:江蘇漢邦科技分析泵 檢測器:江蘇漢邦科技紫外檢測器 檢測波長:230nm 流動相:甲醇 流速:lml/min
色譜柱:4.6*250mm填料為自制涂敷型纖維素-三(3,5- 二甲基苯基氨基甲酸酯)
以下列出兩個分離實例:
分離實例1:
A操作條件 流動相:甲醇 進樣濃度:8g/ml 進樣液流速:2.0 ml/min 洗脫液流速:2.5 ml/min 萃取液流速:2.0ml/min 提余液流速:2.5 ml/min 切換時間:1Omin 系統(tǒng)溫度:30°C B成品分析
用分析柱分析提取液和提余液組成，提取液的純度為99.6%，提余液的純度為99.7%，每公斤固定相每天可生產(chǎn)甘草酸和甘草次酸各42.5kg，流動相消耗為0.213L/kg?；厥章蕿?99.0%。 [0010]分離實例2:
A操作條件 流動相:甲醇 進樣濃度:5g/ml 進樣液流速:1.0 ml/min 洗脫液流速:2.0 ml/min 萃取液流速:1.3 ml/min 提余液流速:1.7ml/min 切換時間:15min 系統(tǒng)溫度:30°C B成品分析
用分析柱分析提取液和提余液組成，提取液的純度為99.7%，提余液的純度為99.5%，每公斤固定相每天可生產(chǎn)甘草酸和甘草次酸各32kg，流動相消耗為0.193L/kg，回收率為98.3%。
[0011]上述實施實例用來解釋說明本發(fā)明，而不是對本發(fā)明進行限制，在本發(fā)明的精神和權力要求的保護范圍內(nèi)，對本發(fā)明做出的任何修改和改變，都落入本發(fā)明的保護范圍。
【權利要求】
1.一種甘草酸和甘草次酸的模擬移動床色譜拆分方法，其特征在于:采用模擬移動床色譜(簡稱SMBC)分離系統(tǒng)，系統(tǒng)中的洗脫泵流量O~1000ml/min，壓力O~lOMpa，進樣泵流量O~50ml/min,壓力O~IOMpa,萃取泵流量O~100ml/min,壓力O~IOMpa,工作溫度O~50°C，色譜柱填料為纖維素-三(3，5- 二甲基苯基氨基甲酸酯)，填料粒度10~30um，流動相為甲醇，該方法的分離步驟如下: A、甘草粗提物用甲醇溶解，濃度為O~100g/ml，由進樣泵進入色譜系統(tǒng)，色譜系統(tǒng)由4~24根制備柱組成，分成四個區(qū)，每區(qū)有I~6支柱子，其中一區(qū)位于洗脫液入口與提取液出口之間，在此區(qū)實現(xiàn)甘草酸的解吸；二區(qū)位于提取液出口與進樣口之間，在此區(qū)使甘草酸反復吸附、解吸、濃縮；三區(qū)位于進樣口與提余液出口之間在此區(qū)得到甘草次酸；四區(qū)位于提余液出口與洗脫液入口之間，一方面三區(qū)的洗脫液進入到該區(qū)可循環(huán)利用，另一方面將三區(qū)與一區(qū)隔開防止提余液中的甘草次酸進入到一區(qū)； B、得到的兩個產(chǎn)品，經(jīng)過濃縮重結晶，得到純度為98%以上的合格產(chǎn)品。
2.根據(jù)權利要求1所述的甘草粗提物的模擬移動床色譜分離方法，其特征在于所說的流動相為甲醇。
3.根據(jù)權利要求1所述的甘草粗提物的模擬移動床色譜分離方法，其特征在于進入模擬移動床系統(tǒng)的濃度為O~100g/ml，進樣流速為O~50ml/min，洗脫液流速為O~1000ml/min,萃取液流速為O~100ml/min,殘留液流速為O~100ml/min。
4.根據(jù)權利要求1所述的甘草粗提物的模擬移動床色譜分離方法，其特征在于所述的定期切換電磁閥的時間為:3~20min。
5.根據(jù)權利要求1所述的 甘草粗提物的模擬移動床色譜分離方法，其特征在于所述的模擬移動床色譜系統(tǒng)的操作溫度為O~50°C。
6.根據(jù)權利要求1所述的甘草粗提物的模擬移動床色譜分離方法，其特征在于所述的模擬移動床色譜系統(tǒng)的最適宜的操作溫度為25~30°C。
【文檔編號】C07J63/00GK103788150SQ201210425210
【公開日】2014年5月14日 申請日期:2012年10月31日 優(yōu)先權日:2012年10月31日
【發(fā)明者】居延娟, 郁萬中, 沈健增 申請人:江蘇漢邦科技有限公司