一種從紅腺忍冬花及花蕾或枝葉中提取分離馬錢子苷的方法
【專利摘要】一種從紅腺忍冬花及花蕾或枝葉中提取分離馬錢子苷的方法。屬醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，發(fā)明公開了一種從廣西特色藥材紅腺忍冬(Loliseria?hypoglauca?Miq)的花及花蕾或枝葉中提取制備化合物馬錢子苷(Loganin)的方法，其特征是通過高濃度低級(jí)醇(如甲醇，乙醇)提取，濃縮后經(jīng)乙酸乙酯萃取除去脂溶性成分，再用正丁醇萃取，聚酰胺柱色譜法富集，經(jīng)SephadexLH-20凝膠色譜，以低級(jí)醇(如甲醇，乙醇)為洗脫劑洗脫、回收溶劑濃縮、析出結(jié)晶、重結(jié)晶，得到純度95％以上的馬錢子苷。本發(fā)明是從紅腺忍冬花和采花后修剪的廢枝葉中回收具有廣闊市場前景的天然藥物活性成分，對(duì)于紅腺忍冬的綜合利用有巨大的促進(jìn)作用。
【專利說明】一種從紅腺忍冬花及花蕾或枝葉中提取分離馬錢子苷的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及天然藥物化學(xué)領(lǐng)域。具體涉及一種從紅腺忍冬話及花蕾，或農(nóng)作物廢棄物“紅腺忍冬枝葉”中以較低成本快速提取制備馬錢子苷的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]紅腺忍冬(Lonicera hypoglauca Miq)的花和花蕾,在傳統(tǒng)中醫(yī)藥中被作為金銀花(Honeysuckle Flower Japanese Honeysuckle)使用，在 2005 以后版的“藥典”明確規(guī)定紅腺忍冬的花為山銀花，而忍冬(Lonicera japonica Thunb)的花作為金銀花,從化學(xué)成分來講，它們有一定的差異性，但并不大。而在廣西地區(qū)，特別是喀斯特熔巖地貌地區(qū)，紅腺忍冬最適宜種植，這不僅可以提高農(nóng)民收入還可以對(duì)環(huán)境石漠化進(jìn)行很好的治理，對(duì)當(dāng)?shù)氐乃帘３旨白匀画h(huán)境修復(fù)治理起到至關(guān)重要的作用，目前已形成了良性循環(huán)。但是，隨著山銀花與金銀花的在藥典中的分開，原先許多傳統(tǒng)中藥原料藥用“金銀花”(包括現(xiàn)在的金銀花及山銀花)的品種，在現(xiàn)行藥典中還是沿用以前的規(guī)定:“金銀花”為原料藥。從而使一些質(zhì)量優(yōu)良的山銀花價(jià)格急劇下降，嚴(yán)重挫傷了藥農(nóng)的生產(chǎn)積極性，對(duì)廣西地區(qū)的山銀花產(chǎn)業(yè)幾乎是毀滅性的打擊。廣西一些地方出現(xiàn)盲目的毀山銀花而改種金銀花的現(xiàn)象(喀斯特地區(qū)不適宜)。如何提高山銀花的種植收益，提高藥農(nóng)的生產(chǎn)積極性，迫在眉睫。為此我們對(duì)山銀花在廣西的代表植物-紅腺忍冬展開全面的研究，以期從活性成分、基因遺傳的親緣關(guān)系、藥理藥效等各方面為挽救廣西山銀花產(chǎn)業(yè)提供理論依據(jù)。調(diào)查資源時(shí)發(fā)現(xiàn)，藥農(nóng)每年在紅腺忍冬產(chǎn)花后就要對(duì)其枝葉進(jìn)行修剪，從而產(chǎn)生了大量的廢棄枝葉。在研究紅腺忍冬化學(xué)成分異同的過程中，我們發(fā)現(xiàn)紅腺忍冬的花和枝葉中，含有豐富的環(huán)烯醚萜類成分，提取回收利用這些有效成分，對(duì)于山銀花附加值的提升有重大的價(jià)值和意義。
[0003]綠原酸及其衍生物， 黃酮類、三萜及其皂苷類化合物是目前報(bào)道的金銀花或山銀花的主要活性成分。以往有些研究也表明金銀花中含有環(huán)烯醚萜類化合物，但是作為主要活性物質(zhì)，環(huán)烯醚萜類化合物在金(山)銀花生物活性中所起的作用目前研究尚不夠。環(huán)烯醚職類化合物(iridoids)是一類特殊的單職類化合物,為蟻臭二醒(iridodial)的縮醒衍生物。作為眾多植物藥的有效成分之一，環(huán)烯醚萜類化合物具有廣泛的生物活性，如抗腫瘤、抗病毒、抗菌、抗氧化、保肝利膽、解痙鎮(zhèn)痛、增強(qiáng)免疫、降糖調(diào)脂等多種活性，并且對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和消化系統(tǒng)具有藥理作用。關(guān)于忍冬屬植物中環(huán)烯醚萜苷類有效部位藥理作用的研究尚不多見，有必要對(duì)其化學(xué)成分和藥理作用進(jìn)行深入研究，為忍冬屬植物的質(zhì)量控制和應(yīng)用提供依據(jù)和參考。
[0004]環(huán)烯醚萜有閉環(huán)環(huán)烯醚萜及開環(huán)環(huán)烯醚萜兩大類。馬錢子苷(見結(jié)構(gòu)式)屬于閉環(huán)環(huán)烯醚萜苷，又名馬錢素、番木鱉苷(CAS:1 8524-94-2，分子式:C17H26Oltl，分子量:390，熔點(diǎn):105~108°C)易溶于水，微溶于無水乙醇，幾乎不溶于非極性溶劑(乙醚、乙酸乙酯、丙酮和氯仿)。對(duì)非持異性免疫功能有增強(qiáng)作用，能促進(jìn)巨噬細(xì)胞吞噬功能，延緩衰老，廣泛用作山茱萸等中藥材的質(zhì)量控制指標(biāo)。作為常用的中成藥物原料有效成分之一，有良好的抗炎、抗菌、鎮(zhèn)咳及祛痰等作用。馬錢苷能降低大鼠前脂肪細(xì)胞內(nèi)cAMP的含量，且可拮抗腎上腺素使大鼠前脂肪細(xì)胞內(nèi)的cAMP水平升高的作用，并使其cAMP含量恢復(fù)到正常水平。據(jù)報(bào)道該成分無溶血性，無明顯的血管刺激性，并且注射給藥劑量小于口服給藥劑量，而藥效優(yōu)于口服給藥，可將其開發(fā)為中藥注射劑供臨床應(yīng)用。
[0005]基于以上原因，我們針對(duì)紅腺忍冬花及花蕾以及枝葉中的環(huán)烯醚萜類化合物-馬
錢子苷的提取分離進(jìn)行了研究，通過研究提出本發(fā)明。
[0006]
【權(quán)利要求】
1.從紅腺忍冬的花及花蕾或枝葉中提取分離一種環(huán)烯醚萜類化合物-馬錢子苷，其特征在于通過高濃度低級(jí)醇提取，再經(jīng)乙酸乙酯萃取除去脂溶性成分，后用正丁醇萃取，正丁醇萃取物充分回收溶劑后，殘余物用水溶解后經(jīng)聚酰胺柱色譜法富集，用水與低級(jí)醇(如甲醇，乙醇，下同)混合物為洗脫劑洗脫、回收溶劑后，濃縮液經(jīng)S印hadexLH-20凝膠色譜，以低級(jí)醇為洗脫劑洗脫、回收溶劑濃縮放冷、析出結(jié)晶，重結(jié)晶，得到純度95%以上的馬錢子苷白色結(jié)晶或無定型粉末。
2.權(quán)利要求1所述的馬錢子苷結(jié)構(gòu)符合下述結(jié)構(gòu)式:
3.權(quán)利要求2所述化合物的提取工藝為: 3.1紅腺忍冬(Loliseria hypoglauca Miq)花及花蕾或枝葉的粗粉,采用高濃度低級(jí)醇提??； 3.2提取液回收醇溶劑后，得醇提取殘余液，加水相當(dāng)于殘余液的0.5到I倍體積，充分混懸； 3.3混懸液分別用乙酸乙酯、正丁醇等有機(jī)溶劑依次萃取，收集正丁醇部分，回收正丁醇溶劑得到正丁醇提取物； 3.4正丁醇提取物經(jīng)聚酰胺柱層析、葡聚糖凝膠柱層析等操作制得馬錢子苷； 3.5有關(guān)上述提取工藝的說明: 1)3.1所述用于提取的低級(jí)醇的濃度為70%到95% ； 2)3.1所述提取方法可為:回流、浸潰、滲漉、超聲、微波提取等多種方法； 3)3.3所述醇提取殘余液相對(duì)密度為:1.05~1.35 / 60°C ； 4)聚酰胺柱層析所用洗脫劑為:水-低級(jí)醇，梯度洗脫；葡聚糖凝膠柱層析所用洗脫劑為低級(jí)醇。
4.權(quán)利要求1所述的馬錢子苷可作為標(biāo)準(zhǔn)品用于吳茱萸等藥材或有關(guān)中成藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制中。也可制成藥物制劑應(yīng)用在抗炎，抗菌、抗癌、鎮(zhèn)咳，祛痰等方面。
【文檔編號(hào)】C07H17/04GK103524580SQ201310505271
【公開日】2014年1月22日 申請(qǐng)日期:2013年10月24日 優(yōu)先權(quán)日:2013年10月24日
【發(fā)明者】宋志軍, 繆劍華, 姚彩云, 藍(lán)鳴生, 陳路, 杜芳黎, 李漢浠, 陳廣鉅, 吳慶華, 黃丹娜 申請(qǐng)人:廣西壯族自治區(qū)藥用植物園