一種從槐米中提取蘆丁的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種新的從槐米中提取蘆丁的方法，包括以下步驟：將干燥槐米粉碎采用超臨界CO2進(jìn)行滅酶，洗滌甩干后，加入合理配比的表面活性劑Tween20和OP-15等，用60%～70%的乙醇在一定條件下進(jìn)行超聲波輔助提取，將提取液靜置結(jié)晶，抽濾得蘆丁粗品，將蘆丁粗品通過正丁醇精制，靜置結(jié)晶并在130℃下烘干，得到純度98%以上的蘆丁產(chǎn)品，收率達(dá)23%以上。綜合以上所述，本發(fā)明方法操作簡便，提取效率高，適用于生產(chǎn)實(shí)際。
【專利說明】一種從槐米中提取蘆丁的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本申請(qǐng)涉及一種從槐米中提取蘆丁的方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 槐米為豆科植物槐樹的干燥花及花蕾，入藥已有2000多年的歷史，《神農(nóng)本草經(jīng)》 將其列為上品?；泵字泻械奶J丁又稱蕓香苷、紫槲皮苷，屬于黃酮苷類化合物，能降低毛 細(xì)血管通透性和脆性，促進(jìn)細(xì)胞增生和防止血細(xì)胞凝聚，還具有抗炎、抗過敏、利尿、鎮(zhèn)咳、 降血脂的等作用。蘆丁在臨床上已用作高血壓病的輔助治療、防止因蘆丁缺乏導(dǎo)致的其他 出血癥，以及預(yù)防和治療糖尿病及合并高血脂癥。另外，蘆丁作為天然的抗氧化劑和使用黃 色素，也被廣泛使用在保健食品和化妝品種。蘆丁在槐米晾曬、洗滌、粉碎、提取過程中，易 受到共存于槐米中的蕓香酶作用而發(fā)生水解，因此，提取前或提取過程中滅酶或降低酶的 活性十分重要?，F(xiàn)有技術(shù)中采用的滅酶方法主要有干蒸、紫外線照射、 6°Co照射、微波滅酶 等，其中干蒸溫度高，在滅酶的同時(shí)即會(huì)造成蘆丁的水解和氧化，亦會(huì)導(dǎo)致部分蘆丁溶于熱 水而流失；而紫外線照射雖可有效滅酶，但用時(shí)較長，成本也高，使生產(chǎn)效率降低。隨著表面 活性劑在化工、食品、日用品生產(chǎn)和水處理等領(lǐng)域的廣泛使用，很多中藥中不溶于水或不易 溶于水的有效成分，如黃酮類物質(zhì)、生物堿、揮發(fā)油等，可以通過表面活性劑在其表面或界 面上形成吸附作用，或在溶液中形成分子聚合體，進(jìn)而改變這些成分在水溶液中的溶解性， 提高了中藥的提取效率，降低了提取成本，安全環(huán)保的特點(diǎn)。
[0003] 現(xiàn)有技術(shù)中有采用表面活性劑輔助蘆丁提取的報(bào)道，但多采用一種表面活性劑。 如李金秀等("蕓香甙提取工藝的改進(jìn)研究"，李金秀，龔盛昭，黃秋瑾，廣東化工，2003年第 1期，P15)采用了以下方法進(jìn)行蕓香苷的提取：槐米粉碎，加入5倍量的水，用石灰水調(diào)節(jié) pH8?9,在溫度為50?60°C提取20?30min，過濾，按同樣條件反復(fù)提取3次，濾液用鹽 酸調(diào)節(jié)pH為3,加入0. 5%表面活性劑0P，在60?70°C保溫lOmin，靜置30min，過濾，洗滌， 干燥，得到蕓香苷產(chǎn)品產(chǎn)率18. 4%，含量96%。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本申請(qǐng)旨在提供一種新的從槐米中提取蘆丁的方法。
[0005] 本發(fā)明所述方法包括以下步驟： (1)清洗滅酶：將干燥槐米粉碎至20?80目，加入溫度為30?40°C，pH = 4?5的 酸水后，置入超臨界C02萃取裝置中，在壓力為30MPa、溫度為30?40°C下處理20?40min， 之后使用溫度為〇?5°C, pH = 4?5的酸水洗漆兩次后甩干； ⑵提?。核Ω珊蟮幕泵最w粒加入1?5%的硼砂、1?5%的Na2S03和15-30倍的60? 70%乙醇中，使用碳酸氫鈉調(diào)節(jié)pH至9?10,再加入0. 3?0. 4%的Tween 20和0. 05? 0. 2%的OP-15,在20?30kHz、30?50°C的條件下避光超聲波提取10?30min，之后過濾， 濾液在30?50°C下避光備用；濾渣再次以上述同樣的條件提取一次，得到的濾液與之前濾 液合并，向合并后的濾液中加入5%活性炭，30?50°C下避光攪拌lOmin，將過濾除炭后的濾 液酸化至pH=3?4,靜置20?30min,抽濾得蘆丁粗品； (3)精制：將蘆丁粗品置于烘箱中，40°C下烘干至無醇味，再逐漸升溫至130°C烘干， 將得到的干燥蘆丁加入正丁醇中加熱至溶解，過濾，向?yàn)V液中加入去離子水，采用20? 30kHz的超聲在0?5°C下避光處理20?30min，靜置結(jié)晶并在130°C下烘干，得到純度98% 達(dá)以上的蘆丁，收率達(dá)23%以上。
[0006] 進(jìn)一步地，本發(fā)明所述步驟（1)中，滅酶處理的時(shí)間優(yōu)選40min ;所述酸水可以為 鹽酸水溶液。
[0007] 進(jìn)一步地，本發(fā)明所述步驟（2)中，優(yōu)選加入3?4%的硼砂和1%的Na2S0 3。
[0008] 進(jìn)一步地，本發(fā)明所述步驟（2)中，優(yōu)選加入0· 35?0· 45%的Tween 20和0· 05? 0· 15% 的 0P-15。
[0009] 進(jìn)一步地，本發(fā)明所述步驟（2)中，超聲波提取的條件優(yōu)選在30kHz、40?5(TC下 提取15?25min ; 進(jìn)一步地，本發(fā)明所述步驟（3)中，加入正丁醇的體積與槐米原料質(zhì)量之比為20? 30mL/g ;加入去離子水的體積與槐米原料質(zhì)量之比為2?3mL/g ;超聲波處理的條件優(yōu)選在 30 kHz 下處理 20 ?30min。
[0010] 本發(fā)明采用超臨界co2進(jìn)行滅酶，用時(shí)短，且蘆丁在超臨界co2條件下不易溶解，不 會(huì)導(dǎo)致蘆丁的水解、氧化和流失，最大限度地保留了蘆丁的有效成分含量；合理配比的表面 活性劑Tween 20和0P-15使提取時(shí)間與結(jié)晶時(shí)間均有縮短，提取效率提高，再輔以超聲波， 使蘆丁在提取過程中的氧化流失減少，收率增加明顯。采用正丁醇對(duì)蘆丁進(jìn)行精制，可以有 效去除殘留膠質(zhì)、脂肪酸等雜質(zhì)，提高蘆丁的純度。綜合本發(fā)明所述的各個(gè)步驟來看，本發(fā) 明所述方法操作簡便，提取效率高，適用于生產(chǎn)實(shí)際。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0011] 圖1為蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品HPLC譜圖。
[0012] 圖2為實(shí)施例2中蘆丁終產(chǎn)物的HPLC譜圖。

【具體實(shí)施方式】
[0013] 實(shí)施例1 將50g干燥槐米粉碎至40目，加入溫度為40°C、pH = 4?5的酸水后，置入超臨界C02 萃取裝置中，在壓力30MPa、溫度40°C下處理20?40min，之后使用溫度為0?5°C，pH = 4?5的酸水洗滌兩次后甩干；甩干后的槐米顆粒加入3%的硼砂、1%的Na2S03和25倍的 60%乙醇中，使用碳酸氫鈉調(diào)節(jié)pH至9?10,再加入0. 35%的Tween 20和0. 15%的0P-15， 在30kHz、40°C的條件下避光超聲波提取20min，之后過濾，濾液在40°C下避光備用；濾渣再 次以上述同樣的條件提取一次，得到的濾液與之前濾液合并，向合并后的濾液中加入5%活 性炭，40°C下避光攪拌lOmin，將過濾除炭后的濾液酸化至pH=3?4,靜置20min，抽濾得蘆 丁粗品；將蘆丁粗品置于烘箱中，40°C下烘干至無醇味，再逐漸升溫至130°C烘干，將得到 的干燥蘆丁加入1300mL正丁醇中加熱至溶解，過濾，向?yàn)V液中加入130mL去離子水，采用 30kHz的超聲在0?5°C下避光處理20min，靜置結(jié)晶，130°C下烘干，得到純度98. 33%的蘆 丁 11. 61g，收率 23. 21%。
[0014] 實(shí)施例2 將80g干燥槐米粉碎至50目，加入溫度為40°C、pH = 4?5的酸水后，置入超臨界C02 萃取裝置中，在壓力30MPa、溫度40°C下處理30min，之后使用溫度為4°C，pH = 4?5的酸水 洗滌兩次后甩干；甩干后的槐米顆粒加入4%的硼砂、1%的Na2S03和20倍的70%乙醇中，使 用碳酸氫鈉調(diào)節(jié)pH至9?10,再加入0. 4%的Tween 20和0. 1%的0P-15,在30kHz、40°C的 條件下避光超聲波提取25min，之后過濾，濾液在40°C下避光備用；濾渣再次以上述同樣的 條件提取一次，得到的濾液與之前濾液合并，向合并后的濾液中加入5%活性炭，40°C下避 光攪拌lOmin，將過濾除炭后的濾液酸化至pH=3?4,靜置25min，抽濾得蘆丁粗品；將蘆丁 粗品置于烘箱中，40°C下烘干至無醇味，再逐漸升溫至130°C烘干，將得到的干燥蘆丁加入 2L正丁醇中加熱至溶解，過濾，向?yàn)V液中加入200mL去離子水，采用30kHz的超聲在0?5°C 下避光處理30min，靜置結(jié)晶，130°C下烘干，得到純度98. 27%的蘆丁 18. 77g，收率23. 46%。
[0015] 實(shí)施例3 將120g干燥槐米粉碎至50目，加入溫度為40°C、pH = 4?5的酸水后，置入超臨界 C02萃取裝置中，在壓力30MPa、溫度40°C下處理30min，之后使用溫度為0?5°C，pH = 4? 5的酸水洗滌兩次后甩干；甩干后的槐米顆粒加入3%的硼砂、1%的Na2S03和30倍的60? 70%乙醇中，使用碳酸氫鈉調(diào)節(jié)pH至9?10,再加入0. 45%的Tween 20和0. 05%的OP-15， 在30kHz、40°C的條件下避光超聲波提取25min，之后過濾，濾液在40°C下避光備用；濾渣再 次以上述同樣的條件提取一次，得到的濾液與之前濾液合并，向合并后的濾液中加入5%活 性炭，40°C下避光攪拌lOmin，將過濾除炭后的濾液酸化至pH=3?4,靜置30min，抽濾得蘆 丁粗品；將蘆丁粗品置于烘箱中，40°C下烘干至無醇味，再逐漸升溫至130°C烘干，將得到 的干燥蘆丁加入3L正丁醇中加熱至溶解，過濾，向?yàn)V液中加入300mL去離子水，采用30kHz 的超聲在〇?5°C下避光處理25min，靜置結(jié)晶并在130°C下烘干，得到純度98. 35%的蘆丁 28. 22g，收率 23. 52%。
【權(quán)利要求】
1. 一種從槐米中提取蘆丁的方法，其特征在于包括以下步驟： (1)清洗滅酶：將干燥槐米粉碎至20?80目，加入溫度為30?40°C，pH = 4?5的 酸水后，置入超臨界C02萃取裝置中，在壓力為30MPa、溫度為30?40°C下處理20?40min， 之后使用溫度為〇?5°C, pH = 4?5的酸水洗漆兩次后甩干； ⑵提?。核Ω珊蟮幕泵最w粒加入1?5%的硼砂、1?5%的Na2S03和15-30倍的60? 70%乙醇中，使用碳酸氫鈉調(diào)節(jié)pH至9?10,再加入0. 3?0. 5%的Tween 20和0. 05? 0. 2%的OP-15,在20?30kHz、30?50°C的條件下避光超聲波提取10?30min，之后過濾， 濾液在30?50°C下避光備用；濾渣再次以上述同樣的條件提取一次，得到的濾液與之前濾 液合并，向合并后的濾液中加入5%活性炭，30?50°C下避光攪拌lOmin，將過濾除炭后的濾 液酸化至pH=3?4,靜置20?30min,抽濾得蘆丁粗品； (3)精制：將蘆丁粗品置于烘箱中，40°C下烘干至無醇味，再逐漸升溫至130°C烘干， 將得到的干燥蘆丁加入正丁醇中加熱至溶解，過濾，向?yàn)V液中加入去離子水，采用20? 30kHz的超聲在0?5°C下避光處理20?30min，靜置結(jié)晶并在130°C下烘干，得到純度98% 達(dá)以上的蘆丁，收率達(dá)23%以上。
2. 如權(quán)利要求1所述的一種提取蘆丁的方法，其特征在于：所述步驟（1)中，滅酶處理 的時(shí)間為40min ;所述酸水可以為鹽酸水溶液。
3. 如權(quán)利要求1或2所述的一種提取蘆丁的方法，其特征在于：所述步驟（2)中，加入 3?4%的硼砂和1%的Na2S03。
4. 如權(quán)利要求1或2所述的一種提取蘆丁的方法，其特征在于：所述步驟（2)中，加入 0· 35 ?0· 45% 的 Tween 20 和 0· 05 ?0· 15% 的 0P-15。
5. 如權(quán)利要求1或2所述的一種提取蘆丁的方法，其特征在于：所述步驟⑵中，在 30kHz、40?50°C條件下超聲波提取15?25min。
6. 如權(quán)利要求1或2所述的一種提取蘆丁的方法，其特征在于：所述步驟（3)中，加入 正丁醇的體積與槐米原料質(zhì)量之比為20?30mL/g ;加入去離子水的體積與槐米原料質(zhì)量 之比為2?3mL/g ;在30 kHz下超聲波處理20?30min。
7. 如權(quán)利要求3所述的一種提取蘆丁的方法，其特征在于：所述步驟（2)中，加入 0. 35 ?0. 45% 的 Tween 20 和 0. 05 ?0. 15% 的 0P-15 ;在 30kHz、40 ?50°C條件下超聲波 提取15?25min。
8. 如權(quán)利要求7所述的一種提取蘆丁的方法，其特征在于：所述步驟（3)中，加入正丁 醇的體積與槐米原料質(zhì)量之比為20?30mL/g ;加入去離子水的體積與槐米原料質(zhì)量之比 為2?3mL/g ;在30 kHz下超聲波處理20?30min。
【文檔編號(hào)】C07H17/07GK104098635SQ201410390859
【公開日】2014年10月15日 申請(qǐng)日期:2014年8月11日 優(yōu)先權(quán)日:2014年8月11日
【發(fā)明者】高旭光, 馬亞瓊, 張成亮, 白易, 劉宏 申請(qǐng)人:白心亮