專利名稱：抗幽門螺桿菌用醫(yī)藥組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥品，特別是抗幽門螺桿菌用醫(yī)藥組合物。具體涉及對(duì)幽門螺桿菌感染引起的各種疾病的治療及預(yù)防有效的抗幽門螺桿菌劑。
背景技術(shù)：
幽門螺桿菌是1983年發(fā)現(xiàn)的病原性細(xì)菌，可引發(fā)消化性潰瘍(如胃潰瘍或十二指腸潰瘍等)、炎癥(如胃炎等)、胃癌等上消化道疾病，MALT(與粘膜相關(guān)的淋巴組織)淋巴瘤或慢性心臟病等?，F(xiàn)在，對(duì)有關(guān)幽門螺桿菌感染癥的治療的研究正廣泛進(jìn)行，作為其治療法，以除菌為目的的治療法和以防止再次發(fā)作為目的的治療法的報(bào)道如下所述。例如，鉍、抗生素、質(zhì)子泵抑制劑(PPI)或抗?jié)儎┑葐蝿┙o藥或組合前述藥物等的多劑并用法(2劑并用、3劑并用)(內(nèi)科，特集，78卷1號(hào)(1996)，南江堂)。但是，上述治療方法有時(shí)給藥次數(shù)過多，需要常用量以上的用量，會(huì)出現(xiàn)因給藥而引起腹瀉、便秘等病癥，產(chǎn)生耐藥菌等諸多必須解決的問題。
與本發(fā)明有關(guān)的抗幽門螺桿菌用醫(yī)藥組合物的有用物質(zhì)在日本專利公開公報(bào)平7-189號(hào)中作為YL-02729S物質(zhì)被公開，其用途是對(duì)耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌有特別的抗菌作用。該專利申請(qǐng)中未有任何暗示和報(bào)道表明YL-02729S物質(zhì)對(duì)幽門螺桿菌具有抗菌活性。
發(fā)明的揭示本發(fā)明者們對(duì)上述YL-02729S物質(zhì)進(jìn)行認(rèn)真研究后發(fā)現(xiàn)，該物質(zhì)具有優(yōu)良的抗幽門螺桿菌活性，而且，該物質(zhì)的選擇性很高，對(duì)其他細(xì)菌無影響。
以下，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。
本發(fā)明是以下式(I)

表示的1-羥基-3-甲基-喹啉酮衍生物或其制藥學(xué)上允許的鹽為有效組分的抗幽門螺桿菌用醫(yī)藥組合物，較好的是以1-羥基-2-(2-反-壬烯基)-3-甲基-4(1H)-喹啉酮或其制藥學(xué)上允許的鹽為有效組分的抗幽門螺桿菌用醫(yī)藥組合物。為了制備該抗幽門螺桿菌用藥物制劑，使用了下式(I)

表示的1-羥基-3-甲基-喹啉酮衍生物或其制藥學(xué)上允許的鹽。
此外，本發(fā)明還包括以式(I)表示的1-羥基-3-甲基-喹啉酮衍生物或其制藥學(xué)上允許的鹽為有效組分的抗幽門螺桿菌用醫(yī)藥組合物在預(yù)防或治療幽門螺桿菌感染上的應(yīng)用；式(I)物質(zhì)與其他藥物制劑，較好是與抗生素、和酸有關(guān)的藥物制劑、H2阻斷劑同時(shí)或適時(shí)并用的方法；在防止幽門螺桿菌感染引起的疾病的再次發(fā)作上的應(yīng)用。另外，通過常規(guī)方法獲得的式(I)物質(zhì)的前藥也包括在本發(fā)明中。
由于本發(fā)明的抗幽門螺桿菌用醫(yī)藥組合物的有效組分(I)具有雙鍵，所以，存在順式體和反式體，還存在互變異構(gòu)體，互變異構(gòu)體的存在在日本專利公開公報(bào)平7-189號(hào)中有如下提示。

其制藥學(xué)上的鹽包括與無機(jī)酸或有機(jī)酸形成的酸加成鹽，較好是制藥學(xué)上允許的鹽。這些鹽具體包括與鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、硝酸或磷酸等無機(jī)酸，或與甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富馬酸、馬來酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、甲磺酸或乙磺酸等有機(jī)酸，或與天冬氨酸或谷氨酸等酸性氨基酸形成的酸加成鹽等。另外，本發(fā)明的有效組分的水合物或各種溶劑合物也包括在內(nèi)。該有效組分有時(shí)具有多晶型，所有這些晶型都包括在內(nèi)。
本發(fā)明的抗幽門螺桿菌用醫(yī)藥組合物的有效組分的具有代表性的制備方法是日本專利公開公報(bào)平7-189號(hào)揭示的制備方法。這種用發(fā)酵法獲得上述有效組分的方法使用了屬于節(jié)桿菌(Arthrobacter)屬的細(xì)菌，如保藏在國(guó)立生命科學(xué)和人體技術(shù)研究所的保藏編號(hào)為FERM BP-6323號(hào)的節(jié)桿菌sp.(Arthrobacter sp.)YL-02729S菌株，較好的是對(duì)該菌株進(jìn)行培養(yǎng)，然后通過常規(guī)方法對(duì)培養(yǎng)物進(jìn)行分離精制的方法。
產(chǎn)業(yè)上利用的可能性本發(fā)明對(duì)幽門螺桿菌顯示抗菌作用，對(duì)治療或預(yù)防人體由幽門螺桿菌以及動(dòng)物由螺桿菌屬相關(guān)細(xì)菌引起的感染十分有效。此外，本發(fā)明的抗幽門螺桿菌用醫(yī)藥組合物能夠有效地預(yù)防(包括防止再次發(fā)作)和治療消化性潰瘍(如胃及十二指腸潰瘍)、炎癥(急性或慢性胃炎或十二指腸炎)、胃癌等上消化道疾病，MALT(與粘膜相關(guān)的淋巴組織)淋巴瘤或慢性心臟病等。
以下，對(duì)本發(fā)明的抗幽門螺桿菌用醫(yī)藥組合物的制劑法和給藥方法進(jìn)行詳細(xì)說明。
以1種或2種以上上述式(I)表示的物質(zhì)及其制藥學(xué)上允許的鹽為有效組分的醫(yī)藥組合物與常用于制劑的載體、賦形劑和其他添加劑結(jié)合可調(diào)制成片劑、散劑、細(xì)顆粒劑、顆粒劑、膠囊劑、丸劑、溶液劑、注射劑、栓劑、軟膏、貼劑等，可經(jīng)口或非經(jīng)口給藥。
本發(fā)明對(duì)人的臨床給藥量可根據(jù)患者的癥狀、體重、年齡和性別等作出適當(dāng)決定。
通常成人1天經(jīng)口服用0.1～500mg、非經(jīng)口服用0.01～100mg，可1次也可分?jǐn)?shù)次給藥。給藥量可根據(jù)各種條件發(fā)生變化，所以，有時(shí)給藥量小于上述范圍就足夠了。此外，本發(fā)明的抗幽門螺桿菌用醫(yī)藥組合物可與其他藥物，如后述的抗菌劑等組合使用，同時(shí)給藥或在適當(dāng)時(shí)間給藥。
本發(fā)明的經(jīng)口給藥的固體組合物可以是片劑、散劑、顆粒劑等。這些固體組合物中混合了1種或1種以上的活性物質(zhì)和至少1種惰性稀釋劑，如乳糖、甘露糖醇、葡萄糖、羥丙基纖維素、微晶纖維素、淀粉、聚乙烯吡咯烷酮、硅酸、鋁酸鎂。根據(jù)常規(guī)方法，組合物中還可包含惰性稀釋劑以外的添加劑，如硬脂酸鎂等潤(rùn)滑劑、纖維素乙醇酸鈣等崩解劑、乳糖等穩(wěn)定劑、谷氨酸或天冬氨酸等增溶劑或助溶劑。根據(jù)需要，還可在片劑或丸劑外包裹蔗糖、明膠、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯等胃溶性或腸溶性薄膜。
經(jīng)口給藥的液體組合物包括藥劑學(xué)上允許的乳劑、溶液劑、混懸劑、糖漿劑和酏劑等。常用惰性稀釋劑包括精制水和乙醇。該組合物中除惰性稀釋劑之外還可包含增溶劑或助溶劑、濕潤(rùn)劑、懸浮劑等助劑，甜味劑，矯味劑，芳香劑和防腐劑。
非經(jīng)口給藥的注射劑包括無菌水性或非水性溶液劑、混懸劑和乳劑。水性溶液劑和混懸劑的稀釋劑包括注射劑用蒸餾水及生理鹽水。非水溶性溶液劑和混懸劑的稀釋劑包括丙二醇、聚乙二醇、橄欖油等植物油、乙醇等醇類、吐溫80(商品名，聚氧化乙烯山梨糖醇酐高級(jí)脂肪酸酯)等。這些組合物中還包含等滲劑、防腐劑、濕潤(rùn)劑、乳化劑、分散劑、穩(wěn)定劑(如乳糖)、增溶劑或助溶劑等添加劑。使上述組合物例如通過濾菌薄膜過濾，再與殺菌劑配合使用或?qū)ζ溥M(jìn)行照射就可達(dá)到滅菌目的。也可制備無菌固體組合物，在使用前用無菌水或無菌注射用溶劑進(jìn)行溶解使用。
本發(fā)明化合物的溶解性較低時(shí)，還可進(jìn)行增溶處理。增溶處理可采用適合于醫(yī)藥制劑的公知方法。例如，添加表面活性劑(聚氧乙烯硬化蓖麻油類、聚氧乙烯山梨糖醇酐高級(jí)脂肪酸酯類、聚氧乙烯聚氧丙二醇類、蔗糖脂肪酸酯類等)的方法；藥物和增溶劑，如高分子(羥丙基甲基纖維素(HPMC)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚乙二醇(PEG)等水溶性高分子，羧甲基乙基纖維素(CMEC)、羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯(HPMCP)和甲基丙烯酸甲酯-甲基丙烯酸共聚體(商品名Eudragit L，S，Rohm&Haas公司生產(chǎn))等腸溶性高分子)形成固體分散體的方法。根據(jù)需要，還可采用形成可溶性鹽的方法，以及使用如α-環(huán)糊精、β-環(huán)糊精、γ-環(huán)糊精、羥丙基-β-環(huán)糊精等羥烷基化環(huán)糊精、甲基化環(huán)糊精或二甲基-β-環(huán)糊精等環(huán)糊精類或糊精類等，使其形成包合物的方法等。增溶方法可根據(jù)目的藥物的情況進(jìn)行適當(dāng)變化(《最新制劑技術(shù)及其應(yīng)用》，內(nèi)海勇等，Drug Journal157-159(1983)及《Pharmacology Monograph No.1，生物利用度》，永井恒司等，Soft Science公司，78-82(1988))。其中，較好的是采用形成藥物和增溶劑的固體分散體以改善溶解性的方法(日本專利公開公報(bào)昭56-49314號(hào)、FR2460667號(hào))。
本發(fā)明的前述活性化合物可單獨(dú)使用，也可與其他抗菌劑等組合使用(最好是1～3種)。
給藥方式如前所述，可以與本發(fā)明的幽門螺桿菌用醫(yī)藥組合物同時(shí)，也可在適當(dāng)時(shí)間并用。這些其他抗菌劑包括硝基咪唑類抗菌藥(如替硝唑及甲硝唑)、四環(huán)素類藥物(如四環(huán)素、米諾環(huán)素或多西環(huán)素等)、青霉素類藥物(如阿莫西林、氨芐青霉素、酞氨西林、巴氨西林、侖氨西林、美洛西林和舒他西林等)、頭孢菌素類藥物(如頭孢克洛、頭孢羥氨芐、頭孢氨芐、頭孢泊肟酯、頭孢克肟、頭孢地尼、頭孢丁烯、頭孢替安酯、頭孢他美酯或頭孢呋辛酯)、青霉烯類藥物(如faropenem或ritipenem acoxil等)、大環(huán)內(nèi)酯類藥物(如紅霉素、竹桃霉素、交沙霉素、麥迪霉素、羅他霉素、clarithromycin、羅紅霉素或阿奇霉素等)、林可霉素類藥物(如林可霉素或克林霉素等)、氨基糖苷類藥物(如巴龍霉素)、喹諾酮類藥物(如氧氟沙星、左氧氟沙星、諾氟沙星、依諾沙星、環(huán)丙沙星、洛美沙星、tosufloxacin、氟羅沙星、司氟沙星、temafloxacin、nadifloxacin、grepafloxacin或pazufloxacin)及呋喃妥因。此外，用于治療與酸有關(guān)的疾病的醫(yī)藥化合物(如酸泵抑制劑(奧美拉唑或蘭索拉唑等)、H2阻斷劑(如雷尼替丁、西米替丁或法莫替丁等))或具有幽門螺桿菌胃粘膜附著抑制作用的胃粘膜保護(hù)劑和前述活性化合物的組合也包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。
實(shí)施發(fā)明的最佳形式以下，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行更為詳細(xì)的說明。當(dāng)然，本發(fā)明并不僅限于此。
實(shí)施例1本發(fā)明物質(zhì)的體外試驗(yàn)按照以下方法進(jìn)行。
抗菌活性的測(cè)定(1)含有抗菌物質(zhì)的瓊脂平板的制作將需要進(jìn)行評(píng)估的物質(zhì)溶于100％二甲亞砜(DMSO)，進(jìn)行連續(xù)2倍稀釋。然后，將該稀釋液裝入滅菌圓形培養(yǎng)皿中，接著，在其中加入滅菌后溫度被保持在50℃的10ml Brucella瓊脂培養(yǎng)基(0.1％β-環(huán)糊精)，混合后凝固，DMSO的最終濃度在1％以下。
(2)接種材料的調(diào)制和結(jié)果判定根據(jù)濁度，用Brucella肉湯調(diào)制使用37℃的多氣培養(yǎng)箱(N280％、CO215％、O25％)在Brucella瓊脂培養(yǎng)基(含有5％小牛血清)中培養(yǎng)了3天的幽門螺桿菌菌，如幽門螺桿菌ATCC43504，使1ml肉湯中存在約108個(gè)菌。同樣，用Brucella肉湯對(duì)本菌液稀釋100倍，用微型接種器在含有藥劑的瓊脂表面接種約5μ1菌液。將接種后的瓊脂平板放置在上述多氣培養(yǎng)箱中，于37℃培養(yǎng)3天(72小時(shí))。觀察培養(yǎng)結(jié)束后的瓊脂平板，將未觀察到增殖的最小藥劑濃度記為MIC。其結(jié)果是，本發(fā)明的抗幽門螺桿菌用醫(yī)藥組合物的MIC為0.025μg/ml。
實(shí)施例2前述物質(zhì)的體外試驗(yàn)按照以下方法進(jìn)行。
抗菌活性的測(cè)定含有抗菌物質(zhì)的瓊脂平板的制作將需要進(jìn)行評(píng)估的物質(zhì)溶于100％二甲亞砜(DMSO)，進(jìn)行連續(xù)2倍稀釋。然后，將該稀釋液裝入滅菌圓形培養(yǎng)皿中，接著，在其中加入滅菌后溫度被保持在50℃的10ml Brucella瓊脂培養(yǎng)基(0.1％β-環(huán)糊精)，混合后使之凝固，DMSO的最終濃度在1％以下。
接種材料的調(diào)制和結(jié)果判定在37℃的多氣培養(yǎng)箱(N280％、CO215％、O25％)中，對(duì)Brucella瓊脂培養(yǎng)基(含有5％小牛血清)中的幽門螺桿菌菌，如幽門螺桿菌ATCC43504進(jìn)行3天培養(yǎng)，然后，根據(jù)濁度，用Brucella肉湯進(jìn)行調(diào)制使1ml肉湯中存在約108個(gè)菌。同樣，用Brucella肉湯對(duì)本菌液稀釋100倍，用微型接種器在含有藥劑的瓊脂表面接種約5μl菌液。將接種后的瓊脂平板放置在上述多氣培養(yǎng)箱中，于37℃培養(yǎng)3天(72小時(shí))。觀察培養(yǎng)結(jié)束后的瓊脂平板，將未觀察到增殖的最小藥劑濃度記為MIC。其結(jié)果是，1-羥基-2-(2-反-壬烯基)-3-甲基-4(1H)-喹啉酮的MIC為0.025μg/ml。
實(shí)施例3兼性厭氧菌、需氧菌的體外試驗(yàn)按照以下方法進(jìn)行。
含有抗菌物質(zhì)的瓊脂平板的制作將需要進(jìn)行評(píng)估的物質(zhì)溶于100％二甲亞砜(DMSO)，進(jìn)行連續(xù)2倍稀釋。然后，將該稀釋液裝入滅菌圓形培養(yǎng)皿中，接著，在其中加入滅菌后溫度被保持在50℃的10ml Muller-Hinton瓊脂培養(yǎng)基，混合后使之凝固，DMSO的最終濃度在1％以下。
接種材料的調(diào)制和結(jié)果判定在溫度設(shè)定為37℃的培養(yǎng)箱中，將Muller-Hinton肉湯中的菌液培養(yǎng)過夜，然后，用Muller-Hinton肉湯稀釋調(diào)制使1ml肉湯中存在約106個(gè)菌。再用微型接種器在含有藥劑的瓊脂培養(yǎng)基表面接種約5μ1本菌液。將接種后的瓊脂平板放置在37℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18小時(shí)。觀察培養(yǎng)結(jié)束后的瓊脂平板，將未觀察到增殖的最小藥劑濃度記為MIC。
其結(jié)果是，1-羥基-2-(2-反-壬烯基)-3-甲基-4(1H)-喹啉酮對(duì)金黃色葡萄球菌FDA209P、大腸桿菌O-1、綠膿桿菌NCTC 10490等具有代表性的兼性厭氧菌、需氧菌的MIC在12.5μg/ml以上。
實(shí)施例4厭氧菌的體外試驗(yàn)按照以下方法進(jìn)行。
含有抗菌物質(zhì)的瓊脂平板的制作將需要進(jìn)行評(píng)估的物質(zhì)溶于100％二甲亞砜(DMSO)，進(jìn)行連續(xù)2倍稀釋。然后，將該稀釋液裝入滅菌圓形培養(yǎng)皿中，接著，在其中加入滅菌后溫度被保持在50℃的10ml GAM瓊脂培養(yǎng)基，混合后使之凝固，DMSO的最終濃度在1％以下。
接種材料的調(diào)制和結(jié)果判定在用N280％、CO210％、H210％的混合氣體進(jìn)行過氣體置換的厭氧菌培養(yǎng)裝置中，于37℃對(duì)GAM肉湯中的菌液培養(yǎng)過夜，然后，用同一GAM肉湯進(jìn)行調(diào)制使1ml肉湯中存在約106個(gè)菌。再用微型接種器在含有藥劑的瓊脂培養(yǎng)基表面接種約5μl本菌液。將接種后的瓊脂平板放置在上述37℃的厭氧菌培養(yǎng)裝置中培養(yǎng)18小時(shí)。觀察培養(yǎng)結(jié)束后的瓊脂平板，將未觀察到增殖的最小藥劑濃度記為MIC。
其結(jié)果是，1-羥基-2-(2-反-壬烯基)-3-甲基-4(1H)-喹啉酮對(duì)雙歧桿菌CAYA21-1、產(chǎn)生消化鏈球菌CAYA12-2、脆弱擬桿菌GAI 5562這樣的兼性厭氧菌的MIC大于25μg/ml。
實(shí)施例5對(duì)幽門螺桿菌的體內(nèi)抗菌活性的測(cè)定按照以下方法進(jìn)行。
體內(nèi)抗菌活性用報(bào)告有穩(wěn)定感染的長(zhǎng)爪沙鼠進(jìn)行感染實(shí)驗(yàn)(J.Gastroenterology31supple IX，24-28，1996)。用探子(sound)在禁食過夜的長(zhǎng)爪沙鼠(蒙古沙鼠(Mongolian gerbils)，(MGS/Sea)，雄性，4周齡)的胃內(nèi)接種在添加了5％小牛血清的Brucella肉湯中培養(yǎng)過夜的幽門螺桿菌ATCC43504株的菌液。感染約1周后開始進(jìn)行治療，按照常規(guī)方法使需要進(jìn)行評(píng)估的藥劑溶于溶劑中，以10mg/kg、1mg/kg或0.1ml/kg的量經(jīng)口給藥，1天2次共3天。給藥結(jié)束后的第2天取出胃，進(jìn)行粉碎。對(duì)胃勻漿液進(jìn)行連續(xù)10倍稀釋，接種到改良的Skirrow培養(yǎng)基中，在微需氧的條件下或10％CO2的條件下，于37℃培養(yǎng)6～7天。由生長(zhǎng)的菌落數(shù)算出胃內(nèi)菌數(shù)。其結(jié)果是，確認(rèn)1-羥基-2-(2-反-壬烯基)-3-甲基-4(1H)-喹啉酮可使胃內(nèi)的存活菌數(shù)減少。
權(quán)利要求
1.一種抗幽門螺桿菌用醫(yī)藥組合物，其特征在于，以下式(I)
表示的1-羥基-3-甲基-喹啉酮衍生物或其制藥學(xué)上允許的鹽為有效組分。
2.一種抗幽門螺桿菌用醫(yī)藥組合物，其特征在于，以1-羥基-2-(2-反-壬烯基)-3-甲基-4(1H)-喹啉酮或其制藥學(xué)上允許的鹽為有效組分。
3.下式(I)
表示的1-羥基-3-甲基-喹啉酮衍生物或其制藥學(xué)上允許的鹽在抗幽門螺桿菌用藥物制劑的制備上的應(yīng)用。
全文摘要
以下式(Ⅰ)表示的1－羥基－3－甲基—喹啉酮衍生物或其制藥學(xué)上允許的鹽為有效組分的抗幽門螺桿菌用醫(yī)藥組合物。由于對(duì)幽門螺桿菌顯示抗菌作用,所以上述化合物可有效地治療或預(yù)防人體幽門螺桿菌感染以及動(dòng)物與之相關(guān)的螺桿菌屬細(xì)菌感染。此外,本發(fā)明的抗幽門螺桿菌用醫(yī)藥組合物能夠有效地預(yù)防(包括防止復(fù)發(fā))和治療消化性潰瘍(如胃及十二指腸潰瘍等)、炎癥(急性或慢性胃炎或十二指腸炎)、胃癌等上消化道疾病,MALT(與粘膜相關(guān)的淋巴組織)淋巴瘤或慢性心臟病等。
文檔編號(hào)C07D215/60GK1255853SQ98805082
公開日2000年6月7日 申請(qǐng)日期1998年5月14日 優(yōu)先權(quán)日1997年5月16日
發(fā)明者渡邊正人, 田中幸一, 小宮正行, 倫蒂阿亞脫莫德喬R·M 申請(qǐng)人:山之內(nèi)制藥株式會(huì)社, P·T·卡爾貝藥物公司