青海柴達木枸杞多糖提取分離制備新方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種青海柴達木枸杞多糖提取分離制備新方法，該方法包括以下步驟：⑴以青海柴達木枸杞鮮果為原料，采用純水洗滌多次后除去雜質(zhì)，得到處理后的枸杞；⑵將處理后的枸杞常溫浸泡在純水中，然后進行破碎，得到破碎的枸杞；⑶破碎的枸杞中加入純水進行超聲提取，得到提取液；⑷提取液濾布過濾，分別得到濾液與濾渣；⑸濾液離心后分別得到上清液與殘渣；⑹上清液過非極性大孔樹脂后用純水清洗樹脂柱，得到多糖洗脫液；⑺多糖洗脫液經(jīng)陶瓷膜除去顆粒狀雜質(zhì)，得到透過液；⑻透過液經(jīng)超濾有機膜截留，得到截留液；該截留液經(jīng)冷凍干燥至恒重后，即得棕黃色粉末狀的柴達木枸杞多糖產(chǎn)品。本發(fā)明簡便、快速、成本低廉。
【專利說明】青海柴達木枸杞多糖提取分離制備新方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種枸杞多糖的制備方法，尤其涉及青海柴達木枸杞多糖提取分離制 備新方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 柴達木枸杞，主要出產(chǎn)于青藏高原上的柴達木盆地。青藏高原獨特的地理氣候造 就了柴達木枸杞優(yōu)良的品質(zhì)，具有顆粒大、色紅、肉厚、含糖量高、味甜的特點，是純天然，無 污染的高級補品。現(xiàn)代科學研究證明：枸杞具有調(diào)節(jié)免疫功能、降血糖、降血脂、抗衰老、抗 腫瘤等作用，而其藥理作用與其生物活性成分枸杞多糖LBP密切相關(guān)。因此，將其作為功能 因子來開發(fā)醫(yī)藥保健品具有廣闊的發(fā)展前景。
[0003] 傳統(tǒng)的枸杞多糖的提取分離主要采用水提醇沉法，多具長時間高熱的提取過程， 存在耗時、收率低、純度低、產(chǎn)品顏色深等缺點。超聲提取是利用超聲波的空化效應、機械效 應及熱效應，可有效增加提取率、縮短提取時間，并且提取過程不需高溫，不會改變提取成 分的結(jié)構(gòu)和生物活性。膜分離法是根據(jù)生物膜對物質(zhì)選擇性通透的原理進行分離的方法， 由于兼有分離、濃縮、純化和精制的功能，又有高效、節(jié)能、環(huán)保、分子級過濾及過濾過程簡 單、易于控制等特征，已廣泛應用于食品、醫(yī)藥、生物、環(huán)保、化工、冶金、能源、石油、水處理 等領(lǐng)域，產(chǎn)生了巨大的經(jīng)濟效益和社會效益，已成為當今分離科學中最重要的手段之一。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種簡便、快速、成本低廉的青海柴達木枸杞 多糖提取分離制備新方法。
[0005] 為解決上述問題，本發(fā)明所述的青海柴達木枸杞多糖提取分離制備新方法，包括 以下步驟： (1)以青海柴達木枸杞鮮果為原料，采用純水洗滌多次后除去雜質(zhì)，得到處理后的枸 杞； ⑵將所述處理后的枸杞按lg :3飛mL的比例常溫浸泡在純水中，8~12h后將浸泡后的枸 杞和浸泡液一起注入粉碎機進行破碎，得到破碎的枸杞； ⑶所述破碎的枸杞中按lg :l(T20mL的比例加入純水，在溫度為2(T40 °C、超聲功率為 60(Tl000 W、攪拌轉(zhuǎn)速為60(Tl000 rpm的條件下進行循環(huán)式超聲提取，提取次數(shù)為2次，每 次提取時間為4(T60 min，合并得到提取液； ⑷所述提取液用200目濾布過濾，分別得到濾液與濾渣； (5) 所述濾液經(jīng)管式離心機離心后，分別得到上清液與殘渣； (6) 所述上清液以ΚΚΓ300 mL/min的流速過非極性大孔樹脂D900,反復循環(huán)，直到洗脫 液在450 nm的吸光值不發(fā)生變化；然后用3~5倍柱床體積的純水清洗樹脂柱，以置換樹脂 柱中的多糖提取液，得到多糖洗脫液； ⑴將所述多糖洗脫液經(jīng)孔徑為5(T200 nm的陶瓷膜除去顆粒狀雜質(zhì)，得到透過液； (8)將所述透過液先經(jīng)截留分子量為100000的超濾有機膜截留，再經(jīng)截留分子量為 100(Γ10000的超濾有機膜截留，當滲透側(cè)不再有透過液流出時，加5(T200 L純水使循環(huán)繼 續(xù)，得到截留液；該截留液經(jīng)冷凍干燥至恒重后，即得棕黃色粉末狀的柴達木枸杞多糖產(chǎn) 品。
[0006] 所述步驟⑴中陶瓷膜除雜的條件是指壓力為0· 5~3 MPa、流速為10(T500 mL/min。
[0007] 所述步驟⑶中超濾有機膜的條件是指壓力為5~20 Kg、流速為5(T300 mL/min。
[0008] 所述步驟(8)中冷凍干燥的條件是指樣品預凍溫度為-3(T-5(TC、樣品加熱板溫度 為(T30°C、冷阱溫度為-5(T-78°C、真空度為0· 1?100 Pa。
[0009] 本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點： 1、本發(fā)明采用超聲提取柴達木枸杞多糖，提取效率高，且提取過程不需高溫，可有效避 免高溫對枸杞多糖結(jié)構(gòu)和生物活性的破壞。
[0010] 2.本發(fā)明采用D900大孔樹脂進行多糖提取液的脫色，成本低、效率高，易于實現(xiàn) 工業(yè)化。
[0011] 3.本發(fā)明采用陶瓷膜和超濾有機膜結(jié)合的膜分離技術(shù)，具有工藝流程短、操作簡 單、效率高、能耗低等優(yōu)點，有效地降低了生產(chǎn)成本，同時所得到的柴達木枸杞多糖產(chǎn)品性 質(zhì)均一穩(wěn)定、純度高出〇%~78%)，具有一定的抗氧化活性，可開發(fā)具有抗氧化作用的醫(yī)藥保 健品。
[0012] 4.本發(fā)明采用在低溫、低壓下進行的冷凍干燥技術(shù)，可有效避免常規(guī)干燥技術(shù)中 高溫對產(chǎn)品質(zhì)量的影響。

【具體實施方式】
[0013] 實施例1 青海柴達木枸杞多糖提取分離制備新方法，包括以下步驟： ⑴以10 Kg青海柴達木枸杞鮮果為原料，采用純水洗滌多次后除去雜質(zhì)，得到處理后的 枸杞。
[0014] ⑵將處理后的枸杞按lg :3mL的比例常溫浸泡在純水中，8h后將浸泡后的枸杞和 浸泡液一起注入粉碎機進行破碎，得到破碎的枸杞。
[0015] ⑶破碎的枸杞中按lg :10mL的比例加入純水，在溫度為20°C、超聲功率為600 W、 攪拌轉(zhuǎn)速為600 rpm的條件下進行循環(huán)式超聲提取，提取次數(shù)為2次，每次提取時間為40 min，合并得到提取液。
[0016] ⑷提取液用200目濾布過濾，分別得到濾液與濾渣。
[0017] (5)濾液經(jīng)管式離心機以20000 rpm的轉(zhuǎn)速離心后，分別得到上清液與殘渣。
[0018] (6)上清液以100 mL/min的流速過非極性大孔樹脂D900,反復循環(huán)，直到洗脫液在 450 nm的吸光值不發(fā)生變化；然后用3倍柱床體積的純水清洗樹脂柱，以置換樹脂柱中的多 糖提取液，得到多糖洗脫液。
[0019] ⑴將多糖洗脫液經(jīng)孔徑為50 nm的陶瓷膜，在壓力為0· 5 MPa、流速為100 mL/min 的條件下除去顆粒狀雜質(zhì)，得到透過液。
[0020] ⑶將透過液在壓力為5 Kg、流速為50 mL/min的條件下，先經(jīng)截留分子量為100000 的超濾有機膜截留，再經(jīng)截留分子量為1000的超濾有機膜截留，當滲透側(cè)不再有透過液流 出時，加50 L純水使循環(huán)繼續(xù)，得到截留液；該截留液在-30°c下預凍、樣品加熱板溫度為 〇°C、冷阱溫度為-50°c、真空度為0. 1 Pa的條件下經(jīng)冷凍干燥至恒重后，即得1. 10 Kg棕黃 色粉末狀的柴達木枸杞多糖產(chǎn)品。
[0021] 經(jīng)測試，該柴達木枸杞多糖產(chǎn)品的多糖含量為62%，對DPPH ·的清除率可達到62%， 在β -胡蘿卜素-亞油酸體系反應中抑制率可達到66%，呈現(xiàn)良好的抗氧化活性。
[0022] 實施例2 青海柴達木枸杞多糖提取分離制備新方法，包括以下步驟： ⑴以10 Kg青海柴達木枸杞鮮果為原料，采用純水洗滌多次后除去雜質(zhì)，得到處理后的 枸杞。
[0023] ⑵將處理后的枸杞按lg :4mL的比例常溫浸泡在純水中，10h后將浸泡后的枸杞和 浸泡液一起注入粉碎機進行破碎，得到破碎的枸杞。
[0024] ⑶破碎的枸杞中按lg :10mL的比例加入純水，在溫度為30°C、超聲功率為800 W、 攪拌轉(zhuǎn)速為700 rpm的條件下進行循環(huán)式超聲提取，提取次數(shù)為2次，每次提取時間為50 min，合并得到提取液。
[0025] ⑷提取液用200目濾布過濾，分別得到濾液與濾渣。
[0026] (5)濾液經(jīng)管式離心機以20000 rpm的轉(zhuǎn)速離心后，分別得到上清液與殘渣。
[0027] (6)上清液以100 mL/min的流速過非極性大孔樹脂D900,反復循環(huán)，直到洗脫液在 450 nm的吸光值不發(fā)生變化；然后用5倍柱床體積的純水清洗樹脂柱，以置換樹脂柱中的多 糖提取液，得到多糖洗脫液。
[0028] ⑴將多糖洗脫液經(jīng)孔徑為200 nm的陶瓷膜，在壓力為3 MPa、流速為500 mL/min的 條件下除去顆粒狀雜質(zhì)，得到透過液。
[0029] ⑶將透過液在壓力為5 Kg、流速為50 mL/min的條件下，先經(jīng)截留分子量為100000 的超濾有機膜截留，再經(jīng)截留分子量為1000的超濾有機膜截留，當滲透側(cè)不再有透過液流 出時，加50 L純水使循環(huán)繼續(xù)，得到截留液；該截留液在-40°c下預凍、樣品加熱板溫度為 10°C、冷阱溫度為-60°C、真空度為10 Pa的條件下經(jīng)冷凍干燥至恒重后，即得1. 14 Kg棕黃 色粉末狀的柴達木枸杞多糖產(chǎn)品。
[0030] 經(jīng)測試，該柴達木枸杞多糖產(chǎn)品的多糖含量為60%，對DPPH ·的清除率可達到60%， 在β -胡蘿卜素-亞油酸體系反應中抑制率可達到65%，呈現(xiàn)良好的抗氧化活性。
[0031] 實施例3 青海柴達木枸杞多糖提取分離制備新方法，包括以下步驟： ⑴以10 Kg青海柴達木枸杞鮮果為原料，采用純水洗滌多次后除去雜質(zhì)，得到處理后的 枸杞。
[0032] ⑵將處理后的枸杞按lg :4mL的比例常溫浸泡在純水中，10h后將浸泡后的枸杞和 浸泡液一起注入粉碎機進行破碎，得到破碎的枸杞。
[0033] ⑶破碎的枸杞中按lg :10mL的比例加入純水，在溫度為30°C、超聲功率為800 W、 攪拌轉(zhuǎn)速為800 rpm的條件下進行循環(huán)式超聲提取，提取次數(shù)為2次，每次提取時間為50 min，合并得到提取液。
[0034] ⑷提取液用200目濾布過濾，分別得到濾液與濾渣。
[0035] (5)濾液經(jīng)管式離心機以20000 rpm的轉(zhuǎn)速離心后，分別得到上清液與殘渣。
[0036] (6)上清液以200 mL/min的流速過非極性大孔樹脂D900,反復循環(huán)，直到洗脫液在 450 nm的吸光值不發(fā)生變化；然后用4倍柱床體積的純水清洗樹脂柱，以置換樹脂柱中的多 糖提取液，得到多糖洗脫液。
[0037] (7)將多糖洗脫液經(jīng)孔徑為100 nm的陶瓷膜，在壓力為2 MPa、流速為350 mL/min的 條件下除去顆粒狀雜質(zhì)，得到透過液。
[0038] (8)將透過液在壓力為10 Kg、流速為150 mL/min的條件下，先經(jīng)截留分子量為 100000的超濾有機膜截留，再經(jīng)截留分子量為1000的超濾有機膜截留，當滲透側(cè)不再有透 過液流出時，加100 L純水使循環(huán)繼續(xù)，得到截留液；該截留液在-35°C下預凍、樣品加熱板 溫度為20°C、冷阱溫度為-70°C、真空度為40 Pa的條件下經(jīng)冷凍干燥至恒重后，即得1. 08 Kg棕黃色粉末狀的柴達木枸杞多糖產(chǎn)品。
[0039] 經(jīng)測試，該柴達木枸杞多糖產(chǎn)品的多糖含量為64%，對DPPH ·的清除率可達到63%， 在β -胡蘿卜素-亞油酸體系反應中抑制率可達到69%，呈現(xiàn)良好的抗氧化活性。
[0040] 實施例4 青海柴達木枸杞多糖提取分離制備新方法，包括以下步驟： ⑴以5 Kg青海柴達木枸杞鮮果為原料，采用純水洗滌多次后除去雜質(zhì)，得到處理后的 枸杞。
[0041] ⑵將處理后的枸杞按lg : 5mL的比例常溫浸泡在純水中，12h后將浸泡后的枸杞 和浸泡液一起注入粉碎機進行破碎，得到破碎的枸杞。
[0042] ⑶破碎的枸杞中按lg :20mL的比例加入純水，在溫度為40°C、超聲功率為1000 W、 攪拌轉(zhuǎn)速為1000 rpm的條件下進行循環(huán)式超聲提取，提取次數(shù)為2次，每次提取時間為60 min，合并得到提取液。
[0043] ⑷提取液用200目濾布過濾，分別得到濾液與濾渣。
[0044] (5)濾液經(jīng)管式離心機以20000 rpm的轉(zhuǎn)速離心后，分別得到上清液與殘渣。
[0045] (6)上清液以300 mL/min的流速過非極性大孔樹脂D900,反復循環(huán)，直到洗脫液在 450 nm的吸光值不發(fā)生變化；然后用5倍柱床體積的純水清洗樹脂柱，以置換樹脂柱中的多 糖提取液，得到多糖洗脫液。
[0046] (7)將多糖洗脫液經(jīng)孔徑為200 nm的陶瓷膜，在壓力為3 MPa、流速為500 mL/min的 條件下除去顆粒狀雜質(zhì)，得到透過液。
[0047] (8)將透過液在壓力為20 Kg、流速為300 mL/min的條件下，先經(jīng)截留分子量為 100000的超濾有機膜截留，再經(jīng)截留分子量為10000的超濾有機膜截留，當滲透側(cè)不再有 透過液流出時，加200 L純水使循環(huán)繼續(xù)，得到截留液；該截留液在-50°c下預凍、樣品加熱 板溫度為30°C、冷阱溫度為-78°C、真空度為100 Pa的條件下經(jīng)冷凍干燥至恒重后，即得 0. 092 Kg棕黃色粉末狀的柴達木枸杞多糖產(chǎn)品。
[0048] 經(jīng)測試，該柴達木枸杞多糖產(chǎn)品的多糖含量為76%，對DPPH ·的清除率可達到72%， 在β -胡蘿卜素-亞油酸體系反應中抑制率可達到77%，呈現(xiàn)良好的抗氧化活性。
[0049] 實施例5 青海柴達木枸杞多糖提取分離制備新方法，包括以下步驟： ⑴以5 Kg青海柴達木枸杞鮮果為原料，采用純水洗滌多次后除去雜質(zhì)，得到處理后的 枸杞。
[0050] ⑵將處理后的枸杞按lg :5mL的比例常溫浸泡在純水中，9h后將浸泡后的枸杞和 浸泡液一起注入粉碎機進行破碎，得到破碎的枸杞。
[0051] ⑶破碎的枸杞中按lg :20mL的比例加入純水，在溫度為30°C、超聲功率為800 W、 攪拌轉(zhuǎn)速為900 rpm的條件下進行循環(huán)式超聲提取，提取次數(shù)為2次，每次提取時間為50 min，合并得到提取液。
[0052] ⑷提取液用200目濾布過濾，分別得到濾液與濾渣。
[0053] (5)濾液經(jīng)管式離心機以20000 rpm的轉(zhuǎn)速離心后，分別得到上清液與殘渣。
[0054] (6)上清液以300 mL/min的流速過非極性大孔樹脂D900,反復循環(huán)，直到洗脫液在 450 nm的吸光值不發(fā)生變化；然后用3倍柱床體積的純水清洗樹脂柱，以置換樹脂柱中的多 糖提取液，得到多糖洗脫液。
[0055] ⑴將多糖洗脫液經(jīng)孔徑為50 nm的陶瓷膜，在壓力為0· 5 MPa、流速為100 mL/min 的條件下除去顆粒狀雜質(zhì)，得到透過液。
[0056] ⑶將透過液在壓力為20 Kg、流速為300 mL/min的條件下，先經(jīng)截留分子量為 100000的超濾有機膜截留，再經(jīng)截留分子量為10000的超濾有機膜截留，當滲透側(cè)不再有 透過液流出時，加200 L純水使循環(huán)繼續(xù)，得到截留液；該截留液在-45°C下預凍、樣品加 熱板溫度為15°C、冷阱溫度為_65°C、真空度為70 Pa的條件下經(jīng)冷凍干燥至恒重后，即 得.085 Kg棕黃色粉末狀的柴達木枸杞多糖產(chǎn)品。
[0057] 經(jīng)測試，該柴達木枸杞多糖產(chǎn)品的多糖含量為78%，對DPPH ·的清除率可達到75%， 在β -胡蘿卜素-亞油酸體系反應中抑制率可達到80%，呈現(xiàn)良好的抗氧化活性。
[0058] 實施例6 青海柴達木枸杞多糖提取分離制備新方法，包括以下步驟： ⑴以5 Kg青海柴達木枸杞鮮果為原料，采用純水洗滌多次后除去雜質(zhì)，得到處理后的 枸杞。
[0059] ⑵將處理后的枸杞按lg :4mL的比例常溫浸泡在純水中，llh后將浸泡后的枸杞和 浸泡液一起注入粉碎機進行破碎，得到破碎的枸杞。
[0060] ⑶破碎的枸杞中按lg :20mL的比例加入純水，在溫度為30°C、超聲功率為800 W、 攪拌轉(zhuǎn)速為800 rpm的條件下進行循環(huán)式超聲提取，提取次數(shù)為2次，每次提取時間為50 min，合并得到提取液。
[0061] ⑷提取液用200目濾布過濾，分別得到濾液與濾渣。
[0062] (5)濾液經(jīng)管式離心機以20000 rpm的轉(zhuǎn)速離心后，分別得到上清液與殘渣。
[0063] (6)上清液以200 mL/min的流速過非極性大孔樹脂D900,反復循環(huán)，直到洗脫液在 450 nm的吸光值不發(fā)生變化；然后用4倍柱床體積的純水清洗樹脂柱，以置換樹脂柱中的多 糖提取液，得到多糖洗脫液。
[0064] ⑴將多糖洗脫液經(jīng)孔徑為100 nm的陶瓷膜，在壓力為2 MPa、流速為350 mL/min的 條件下除去顆粒狀雜質(zhì)，得到透過液。
[0065] ⑶將透過液在壓力為10 Kg、流速為250 mL/min的條件下，先經(jīng)截留分子量為 100000的超濾有機膜截留，再經(jīng)截留分子量為10000的超濾有機膜截留，當滲透側(cè)不再有 透過液流出時，加100 L純水使循環(huán)繼續(xù)，得到截留液；該截留液在-40°c下預凍、樣品加 熱板溫度為25°C、冷阱溫度為_75°C、真空度為80 Pa的條件下經(jīng)冷凍干燥至恒重后，即得 0. 09 Kg棕黃色粉末狀的柴達木枸杞多糖產(chǎn)品。
[0066] 經(jīng)測試，該柴達木枸杞多糖產(chǎn)品的多糖含量為75%，對DPPH ·的清除率可達到71%， 在β -胡蘿卜素-亞油酸體系反應中抑制率可達到75%，呈現(xiàn)良好的抗氧化活性。
[0067] 實施例7 青海柴達木枸杞多糖提取分離制備新方法，包括以下步驟： ⑴以7 Kg青海柴達木枸杞鮮果為原料，采用純水洗滌多次后除去雜質(zhì)，得到處理后的 枸杞。
[0068] ⑵將處理后的枸杞按lg :4mL的比例常溫浸泡在純水中，llh后將浸泡后的枸杞和 浸泡液一起注入粉碎機進行破碎，得到破碎的枸杞。
[0069] ⑶破碎的枸杞中按lg :15mL的比例加入純水，在溫度為30°C、超聲功率為800 W、 攪拌轉(zhuǎn)速為900 rpm的條件下進行循環(huán)式超聲提取，提取次數(shù)為2次，每次提取時間為50 min，合并得到提取液。
[0070] ⑷提取液用200目濾布過濾，分別得到濾液與濾渣。
[0071] (5)濾液經(jīng)管式離心機以20000 rpm的轉(zhuǎn)速離心后，分別得到上清液與殘渣。
[0072] (6)上清液以lOOmL/min的流速過非極性大孔樹脂D900,反復循環(huán)，直到洗脫液在 450 nm的吸光值不發(fā)生變化；然后用5倍柱床體積的純水清洗樹脂柱，以置換樹脂柱中的多 糖提取液，得到多糖洗脫液。
[0073] ⑴將多糖洗脫液經(jīng)孔徑為50 nm的陶瓷膜，在壓力為3 MPa、流速為400 mL/min的 條件下除去顆粒狀雜質(zhì)，得到透過液。
[0074] ⑶將透過液在壓力為20 Kg、流速為250 mL/min的條件下，先經(jīng)截留分子量為 100000的超濾有機膜截留，再經(jīng)截留分子量為5000的超濾有機膜截留，當滲透側(cè)不再有透 過液流出時，加200 L純水使循環(huán)繼續(xù)，得到截留液；該截留液在-35°C下預凍、樣品加熱板 溫度為25°C、冷阱溫度為-55°C、真空度為30Pa的條件下經(jīng)冷凍干燥至恒重后，即得0. 18 Kg棕黃色粉末狀的柴達木枸杞多糖產(chǎn)品。
[0075] 經(jīng)測試，該柴達木枸杞多糖產(chǎn)品的多糖含量為70%，對DPPH ·的清除率可達到66%， 在β -胡蘿卜素-亞油酸體系反應中抑制率可達到72%，呈現(xiàn)良好的抗氧化活性。
[0076] 實施例8 青海柴達木枸杞多糖提取分離制備新方法，包括以下步驟： ⑴以7 Kg青海柴達木枸杞鮮果為原料，采用純水洗滌多次后除去雜質(zhì)，得到處理后的 枸杞。
[0077] ⑵將處理后的枸杞按lg :4mL的比例常溫浸泡在純水中，llh后將浸泡后的枸杞和 浸泡液一起注入粉碎機進行破碎，得到破碎的枸杞。
[0078] ⑶破碎的枸杞中按lg :15mL的比例加入純水，在溫度為30°C、超聲功率為800 W、 攪拌轉(zhuǎn)速為700 rpm的條件下進行循環(huán)式超聲提取，提取次數(shù)為2次，每次提取時間為50 min，合并得到提取液。
[0079] ⑷提取液用200目濾布過濾，分別得到濾液與濾渣。
[0080] (5)濾液經(jīng)管式離心機以20000 rpm的轉(zhuǎn)速離心后，分別得到上清液與殘渣。
[0081] (6)上清液以200 mL/min的流速過非極性大孔樹脂D900,反復循環(huán)，直到洗脫液在 450 nm的吸光值不發(fā)生變化；然后用4倍柱床體積的純水清洗樹脂柱，以置換樹脂柱中的多 糖提取液，得到多糖洗脫液。
[0082] (7)將多糖洗脫液經(jīng)孔徑為100 nm的陶瓷膜，在壓力為2 MPa、流速為350 mL/min的 條件下除去顆粒狀雜質(zhì)，得到透過液。
[0083] (8)將透過液在壓力為10 Kg、流速為200 mL/min的條件下，先經(jīng)截留分子量為 100000的超濾有機膜截留，再經(jīng)截留分子量為5000的超濾有機膜截留，當滲透側(cè)不再有透 過液流出時，加100 L純水使循環(huán)繼續(xù)，得到截留液；該截留液在-50°c下預凍、樣品加熱板 溫度為15°C、冷阱溫度為_65°C、真空度為60 Pa的條件下經(jīng)冷凍干燥至恒重后，即得0. 2 Kg 棕黃色粉末狀的柴達木枸杞多糖產(chǎn)品。
【權(quán)利要求】
1. 青海柴達木枸杞多糖提取分離制備新方法，包括以下步驟： (1)以青海柴達木枸杞鮮果為原料，采用純水洗滌多次后除去雜質(zhì)，得到處理后的枸 杞； ⑵將所述處理后的枸杞按lg :3飛mL的比例常溫浸泡在純水中，8~12h后將浸泡后的枸 杞和浸泡液一起注入粉碎機進行破碎，得到破碎的枸杞； ⑶所述破碎的枸杞中按lg :l(T20mL的比例加入純水，在溫度為2(T40 °C、超聲功率為 60(Tl000 W、攪拌轉(zhuǎn)速為60(Tl000 rpm的條件下進行循環(huán)式超聲提取，提取次數(shù)為2次，每 次提取時間為4(T60 min，合并得到提取液； ⑷所述提取液用200目濾布過濾，分別得到濾液與濾渣； (5) 所述濾液經(jīng)管式離心機離心后，分別得到上清液與殘渣； (6) 所述上清液以ΚΚΓ300 mL/min的流速過非極性大孔樹脂D900,反復循環(huán)，直到洗脫 液在450 nm的吸光值不發(fā)生變化；然后用3~5倍柱床體積的純水清洗樹脂柱，以置換樹脂 柱中的多糖提取液，得到多糖洗脫液； ⑴將所述多糖洗脫液經(jīng)孔徑為5(T200 nm的陶瓷膜除去顆粒狀雜質(zhì)，得到透過液； ⑶將所述透過液先經(jīng)截留分子量為100000的超濾有機膜截留，再經(jīng)截留分子量為 100(Γ10000的超濾有機膜截留，當滲透側(cè)不再有透過液流出時，加5(T200 L純水使循環(huán)繼 續(xù)，得到截留液；該截留液經(jīng)冷凍干燥至恒重后，即得棕黃色粉末狀的柴達木枸杞多糖產(chǎn) 品。
2. 如權(quán)利要求1所述的青海柴達木枸杞多糖提取分離制備新方法，其特征在于：所述 步驟(7)中陶瓷膜除雜的條件是指壓力為0. 5~3 MPa、流速為10(T500 mL/min。
3. 如權(quán)利要求1所述的青海柴達木枸杞多糖提取分離制備新方法，其特征在于：所述 步驟⑶中超濾有機膜的條件是指壓力為5~20 Kg、流速為5(T300 mL/min。
4. 如權(quán)利要求1所述的青海柴達木枸杞多糖提取分離制備新方法，其特征在于：所述 步驟(8)中冷凍干燥的條件是指樣品預凍溫度為-3(T-5(TC、樣品加熱板溫度為(T30°C、冷 阱溫度為-5(T_78°C、真空度為0· 1?100 Pa。
【文檔編號】C08B37/00GK104059163SQ201410327027
【公開日】2014年9月24日 申請日期:2014年7月8日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月8日
【發(fā)明者】陳濤, 李玉林, 陳晨 申請人:中國科學院西北高原生物研究所