一種醫(yī)用軟膠囊殼用的蠶天然凝膠的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種醫(yī)用軟膠囊殼用的蠶天然凝膠的制備方法，對(duì)從絲膠蠶品種生產(chǎn)的全天然絲膠繭殼，利用溴化鋰溶媒物提取高分子量絲膠溶液；通過(guò)對(duì)獲得的絲膠溶液定量添加乙醇，獲得高分子量絲膠混合溶液；經(jīng)過(guò)絲膠凝膠浸入水中的放置處理，以絲膠凝膠與水共存條件下冷凍干燥制備多孔性絲膠凝膠，制備的高分子量的多孔絲膠凝膠，粒子小、成形性好，柔韌、彈性大，既保持天然絲膠蛋白質(zhì)的原有功能特性，又可與其他成分的藥品、藥劑的配合，不存在殘留危險(xiǎn)。透明符合明膠制備膠囊殼的條件，是替代從動(dòng)物皮骨等提取的明膠應(yīng)用于醫(yī)藥、保健食品的軟膠囊殼的優(yōu)質(zhì)材料。
【專利說(shuō)明】一種醫(yī)用軟膠囊殼用的蠶天然凝膠的制備方法

【背景技術(shù)】
[0001]本發(fā)明涉及一種醫(yī)用軟膠囊殼用的蠶天然凝膠的制備方法，屬于醫(yī)藥材料領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]目前較好的膠囊殼是用精處理明膠與輔助材料制造而成的，明膠是生產(chǎn)常規(guī)膠囊殼的主要原料，約占膠囊殼的96-99%。明膠從動(dòng)物的新鮮的骨、生皮、肌腱等的膠原質(zhì)中提取的一種水溶性蛋白質(zhì)。由于干雜骨以及制革廠的邊角裁削料等不能作為醫(yī)藥明膠生產(chǎn)的原料以及口蹄疫、瘋牛病(BSE)、禽流感等在世界范圍內(nèi)傳播，人們更是對(duì)動(dòng)物的骨、皮本身的利用有較大的恐懼心理，從而限制優(yōu)質(zhì)明膠的大量生產(chǎn)。
[0003]絲膠是天然的球狀絹絲蛋白質(zhì)。絲膠膠原蛋白是多種絲膠多肽組成的天然的球狀絹絲蛋白質(zhì)。具有優(yōu)秀而全面的功能特性，具體如下:(I)營(yíng)養(yǎng)性高，含有18種人體氨基酸，其中多種人體必需氨基酸，無(wú)毒、無(wú)味、無(wú)副作用，是人體流失的氨基酸的良好補(bǔ)充源；(2)功能特性強(qiáng)，生物相容性好，具有較高的抗氧化、抗菌、乳化、重金屬螯合、紫外吸收能力、吸放濕性等功能特性；(3)配伍性優(yōu)，親和性強(qiáng)與有機(jī)溶媒配合性強(qiáng)，可與其他醫(yī)用成分混合，性質(zhì)溫和，不產(chǎn)生各種酸、堿、表面活性劑等刺激性物質(zhì)的損害；(4)生物活性強(qiáng)，滲透性強(qiáng)，可調(diào)節(jié)多種生物酶活性，促進(jìn)新陳代謝，防止衰老；(5)絲膠蛋白質(zhì)在醫(yī)療材料、保健衛(wèi)生用產(chǎn)品等的利用形式多樣，可制備絲膠溶液、凝膠、粉末狀。
[0004]絲膠是醫(yī)用材料、保健食品、衛(wèi)生產(chǎn)品等的利用優(yōu)秀素材。目前利用的絲膠是從繅絲水溶液中回收的絲膠，由于熱、堿等處理等原因，凝膠化的絲膠發(fā)生變性，絲膠原有的功能結(jié)構(gòu)遭到破壞，絲膠形成的凝膠具有發(fā)脆、成形性差等缺點(diǎn)，絲膠固有的功能特性正常發(fā)揮受到限制。
[0005]本發(fā)明旨在采用可容易飼養(yǎng)大量的可簡(jiǎn)便分離的天然絲膠蠶繭殼作為原材料，通過(guò)不變性、原有結(jié)構(gòu)功能不遭到破壞的系列處理方法，簡(jiǎn)便提取高分子量的絲膠蛋白，制備高質(zhì)量的多孔質(zhì)絲膠凝膠，以此替代明膠應(yīng)用于醫(yī)藥、保健食品的軟殼膠囊生產(chǎn)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的在于提供一種醫(yī)用軟膠囊殼用的蠶天然凝膠的制備方法，對(duì)從絲膠蠶品種生產(chǎn)的全天然絲膠繭殼，利用溴化鋰溶媒物提取高分子量絲膠溶液；通過(guò)對(duì)獲得的絲膠溶液定量添加乙醇，獲得高分子量絲膠混合溶液；經(jīng)過(guò)絲膠凝膠浸入水中的放置處理，以絲膠凝膠與水共存條件下冷凍干燥制備多孔性絲膠凝膠，替代從動(dòng)物皮骨等提取的明膠應(yīng)用于醫(yī)藥、保健食品的軟膠囊殼生產(chǎn)。
[0007]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下:
一種醫(yī)用軟膠囊殼用的蠶天然凝膠的制備方法，包括以下步驟:
(1)常規(guī)飼養(yǎng)日本“絲膠希望”蠶品種生產(chǎn)的絲膠蠶苗，通過(guò)手撕剝離倒出蠶蛹獲得無(wú)絲素的、不經(jīng)過(guò)干燥等處理的全絲膠繭層；
(2)按照重量比1:25-30的比例將絲膠繭殼和蒸餾水裝入溶解罐中，然后加入絲膠繭殼和蒸餾水總重量3-5%的8M溴化鋰水溶液，在溫度30-40°C下攪拌均勻后取出絲膠溶解液裝入離心器離的離心管，5000-6000r/min離心10_15min，再在平均孔徑0.2-0.3 μ m的過(guò)濾器中過(guò)濾，除去不溶物，然后在獲得溶液中加入IM的pH=9 tris -HCH buffer 4_8毫升，得到PH為7.5-8.5的高分子量絲膠提取溶液；
(3)將高分子量絲膠提取溶液倒入超濾器中，用截留50-60kDa分子量的超濾膜超濾，再次將分子量絲膠過(guò)濾液以5000-6000r/min的離心器離心10_15min,除去過(guò)濾、離心后的中的不溶物；
(4)將高分子量絲膠溶液裝入透析袋中用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1-0.2%的乙酸溶液透析2-3d，每8h換一次透析液，再用蒸餾水透析，除去不溶物及提取溶媒等，使絲膠溶液濃度濃縮到1_2%，獲得純度和濃度較高的絲膠蛋白水溶液；
(5)在濃縮的絲膠蛋白水溶液中加入溶液容量的10-20%的乙醇，添加酒精時(shí)，一邊添加一邊攪拌，緩緩添加；然后將含有酒精的絲膠混合物在室溫條件下靜置幾小時(shí)-幾天，獲得除去混合物氣泡的絲膠凝膠；再將得到的絲膠凝膠浸入過(guò)剩的乙醇中，靜置12-48小時(shí)，可以獲得強(qiáng)度和彈性增強(qiáng)的絲膠凝膠；
(6)將上述得到的絲膠凝膠浸入過(guò)剩量的水中，室溫條件下靜置1-2天后除去絲膠凝膠含有的酒精；除去酒精的絲膠凝膠為高分子絲膠和水組成的絲膠凝膠；
(7)將絲膠凝膠在-60°C以下的溫度放置1-2天后，在冷凍干燥器中以-20°C以下的溫度使絲膠凝膠進(jìn)行充分的冷凍干燥，除去水分，獲得收縮的優(yōu)質(zhì)多孔質(zhì)絲膠凝膠；
(8)為了較長(zhǎng)期保存將獲得的該多孔質(zhì)絲膠凝膠體在0.5%的乙醇等酒精保存。
[0008]所述“絲膠希望”蠶品種來(lái)自中國(guó)品種“CS 83”系統(tǒng)與“Nd”系統(tǒng)雜交后多次回交選育而成；所述“絲膠希望”蠶品種因?yàn)楹蟛拷z腺絲素退化，不合成絲素，生產(chǎn)的蠶繭殼為天然絲膠。
[0009]所述蠶品種也可以為飼養(yǎng)綠S、白S、絲膠N、絲膠蠶、Nd-S等絲膠蠶。
[0010]本發(fā)明的有益效果:
1、本發(fā)明的制備方法是在穩(wěn)定平緩的條件下提取高分子量絲膠多孔凝膠，不會(huì)產(chǎn)生繭層中的絲膠分子崩潰和變性等，也不會(huì)發(fā)生絲膠的低分子化，保持天然絲膠蛋白質(zhì)的原有功能特性。
[0011]2、本發(fā)明方法制備的多孔絲膠凝膠，不僅自身具有的全面營(yíng)養(yǎng)容易為人體吸收，而且與其他成分的藥品、藥劑的配合，不存在殘留危險(xiǎn)。
[0012]3、本發(fā)明的制備的多孔絲膠凝膠，絲膠分子間以氫鍵結(jié)合，相互作用力強(qiáng)，力學(xué)性質(zhì)出色，粒子小、成形性好，柔韌、彈性大，透明符合明膠制備膠囊殼的條件。
[0013]4、本發(fā)明的造方法中獲得的多孔絲膠凝膠，可浸入酒精中加以穩(wěn)定保存，保持功能特性不變。

【具體實(shí)施方式】
[0014]一種醫(yī)用軟膠囊殼用的蠶天然凝膠的制備方法，包括以下步驟:
(1)常規(guī)飼養(yǎng)日本“絲膠希望”蠶品種生產(chǎn)的絲膠蠶苗，通過(guò)手撕剝離倒出蠶蛹獲得無(wú)絲素的、不經(jīng)過(guò)干燥等處理的全絲膠繭層；
(2)按照重量比1:30的比例將絲膠繭殼和蒸餾水裝入溶解罐中，然后加入絲膠繭殼和蒸餾水總重量4%的8M溴化鋰水溶液，在溫度30-40°C下攪拌均勻后取出絲膠溶解液裝入離心器離的離心管，5000r/min離心15min，再在平均孔徑0.2 μ m的過(guò)濾器中過(guò)濾，除去不溶物，然后在獲得溶液中加入IM的pH=9 tris -HCH buffer 6毫升，得到pH為7.5-8.5的高分子量絲膠提取溶液；
(3)將高分子量絲膠提取溶液倒入超濾器中，用截留60kDa分子量的超濾膜超濾，再次將分子量絲膠過(guò)濾液以5000r/min的離心器離心15min，除去過(guò)濾、離心后的中的不溶物；
(4)將高分子量絲膠溶液裝入透析袋中用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的乙酸溶液透析2-3d，每8h換一次透析液，再用蒸餾水透析，除去不溶物及提取溶媒等，使絲膠溶液濃度濃縮到1_2%，獲得純度和濃度較高的絲膠蛋白水溶液；
(5)在濃縮的絲膠蛋白水溶液中加入溶液容量的15%的乙醇，添加酒精時(shí)，一邊添加一邊攪拌，緩緩添加；然后將含有酒精的絲膠混合物在室溫條件下靜置幾小時(shí)-幾天，獲得除去混合物氣泡的絲膠凝膠；再將得到的絲膠凝膠浸入過(guò)剩的乙醇中，靜置24小時(shí)，可以獲得強(qiáng)度和彈性增強(qiáng)的絲膠凝膠；
(6)將上述得到的絲膠凝膠浸入過(guò)剩量的水中，室溫條件下靜置2天后除去絲膠凝膠含有的酒精；除去酒精的絲膠凝膠為高分子絲膠和水組成的絲膠凝膠；
(7)將絲膠凝膠在-60°C以下的溫度放置2天后，在冷凍干燥器中以-20°C以下的溫度使絲膠凝膠進(jìn)行充分的冷凍干燥，除去水分，獲得收縮的優(yōu)質(zhì)多孔質(zhì)絲膠凝膠；
(8)為了較長(zhǎng)期保存將獲得的該多孔質(zhì)絲膠凝膠體在0.5%的乙醇等酒精保存。
【權(quán)利要求】
1.一種醫(yī)用軟膠囊殼用的蠶天然凝膠的制備方法，其特征在于包括以下步驟: (1)常規(guī)飼養(yǎng)日本“絲膠希望”蠶品種生產(chǎn)的絲膠蠶苗，通過(guò)手撕剝離倒出蠶蛹獲得無(wú)絲素的、不經(jīng)過(guò)干燥等處理的全絲膠繭層； (2)按照重量比1:25-30的比例將絲膠繭殼和蒸餾水裝入溶解罐中，然后加入絲膠繭殼和蒸餾水總重量3-5%的8M溴化鋰水溶液，在溫度30-40°C下攪拌均勻后取出絲膠溶解液裝入離心器離的離心管，5000-6000r/min離心10_15min，再在平均孔徑0.2-0.3 μ m的過(guò)濾器中過(guò)濾，除去不溶物，然后在獲得溶液中加入IM的pH=9 tris -HCH buffer 4_8毫升，得到PH為7.5-8.5的高分子量絲膠提取溶液； (3)將高分子量絲膠提取溶液倒入超濾器中，用截留50-60kDa分子量的超濾膜超濾，再次將分子量絲膠過(guò)濾液以5000-6000r/min的離心器離心10_15min,除去過(guò)濾、離心后的中的不溶物； (4)將高分子量絲膠溶液裝入透析袋中用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1-0.2%的乙酸溶液透析2-3d，每8h換一次透析液，再用蒸餾水透析，除去不溶物及提取溶媒等，使絲膠溶液濃度濃縮到1_2%，獲得純度和濃度較高的絲膠蛋白水溶液； (5)在濃縮的絲膠蛋白水溶液中加入溶液容量的10-20%的乙醇，添加酒精時(shí)，一邊添加一邊攪拌，緩緩添加；然后將含有酒精的絲膠混合物在室溫條件下靜置幾小時(shí)-幾天，獲得除去混合物氣泡的絲膠凝膠；再將得到的絲膠凝膠浸入過(guò)剩的乙醇中，靜置12-48小時(shí)，可以獲得強(qiáng)度和彈性增強(qiáng)的絲膠凝膠； (6)將上述得到的絲膠凝膠浸入過(guò)剩量的水中，室溫條件下靜置1-2天后除去絲膠凝膠含有的酒精；除去酒 精的絲膠凝膠為高分子絲膠和水組成的絲膠凝膠； (7)將絲膠凝膠在-60°C以下的溫度放置1-2天后，在冷凍干燥器中以-20°C以下的溫度使絲膠凝膠進(jìn)行充分的冷凍干燥，除去水分，獲得收縮的優(yōu)質(zhì)多孔質(zhì)絲膠凝膠； (8)為了較長(zhǎng)期保存將獲得的該多孔質(zhì)絲膠凝膠體在0.5%的乙醇等酒精保存。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種醫(yī)用軟膠囊殼用的蠶天然凝膠的制備方法，其特征在于，所述“絲膠希望”蠶品種來(lái)自中國(guó)品種“CS 83”系統(tǒng)與“Nd”系統(tǒng)雜交后多次回交選育而成；所述“絲膠希望”蠶品種因?yàn)楹蟛拷z腺絲素退化，不合成絲素，生產(chǎn)的蠶繭殼為天然絲膠。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種醫(yī)用軟膠囊殼用的蠶天然凝膠的制備方法，其特征在于，所述蠶品種也可以為飼養(yǎng)綠S、白S、絲膠N、絲膠蠶、Nd-S等絲膠蠶。
【文檔編號(hào)】C08J9/28GK104130443SQ201410329637
【公開(kāi)日】2014年11月5日 申請(qǐng)日期:2014年7月11日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月11日
【發(fā)明者】陳復(fù)生, 李冰, 葉崇軍, 文薇, 秦鳳, 李家寶, 劉太榮, 胡在進(jìn), 高峰林, 郭輝, 孫鳳柱, 肖立新, 胡虹 申請(qǐng)人:安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶桑研究所