一種使用超重力技術(shù)調(diào)整聚合物膠束粒徑的方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種使用超重力技術(shù)來(lái)調(diào)整聚合物膠束的粒徑的方法，其包括將具有第一粒徑分布的聚合物膠束溶液循環(huán)通過(guò)超重力機(jī)，以得到具有第二粒徑分布的聚合物膠束溶液，其中所述第二粒徑分布不同于第一粒徑分布，其中所述超重力機(jī)的離心加速度大于重力加速度。該方法尤其適合于調(diào)節(jié)兩親性嵌段共聚物膠束的粒徑。
【專利說(shuō)明】一種使用超重力技術(shù)調(diào)整聚合物膠束粒徑的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于聚合物膠束制備領(lǐng)域，更具體地，屬于聚合物膠束粒徑調(diào)節(jié)工藝。

【背景技術(shù)】
[0002] 兩親性嵌段共聚物是一種同時(shí)具有親水性和親油性的嵌段共聚物，其具有長(zhǎng)聚合 物主鏈，且具有親水鏈段和疏水鏈段。兩親性嵌段共聚物具有獨(dú)特的物理性質(zhì)，在水溶液 中，疏水鏈段會(huì)相互纏結(jié)，驅(qū)動(dòng)聚合物鏈發(fā)生聚集，從而膠束化。所形成的膠束內(nèi)核由疏水 鏈段締合構(gòu)成，親水鏈段以溶劑化形式分布在核周圍形成殼層以維持膠束的穩(wěn)定性。由于 溶劑化殼層的存在，上述膠束在一定濃度范圍內(nèi)可以長(zhǎng)時(shí)間穩(wěn)定存在。這種兩親性嵌段共 聚物膠束的尺寸通常在介觀尺寸范圍內(nèi)，與天然介觀輸送體系的尺寸類似，從而決定了其 具有獨(dú)特的體內(nèi)生理特性。通過(guò)改變嵌段共聚物成核嵌段的結(jié)構(gòu)性質(zhì)，利用不同的分子間 相互作用，可在嵌段共聚物膠束的核中包埋基因、蛋白質(zhì)以及其他多種不同性質(zhì)的藥物分 子。和普通的膠體粒子相比，嵌段共聚物在選擇性溶劑中所形成的聚集體比較穩(wěn)定，這是因 為成核嵌段相互纏結(jié)并被凍結(jié)，殼層嵌段可以起到保持膠束在溶劑中相對(duì)穩(wěn)定的作用，在 藥物控釋、分離以及催化研究等方面具有諸多潛在應(yīng)用，備受學(xué)術(shù)界和工業(yè)界的關(guān)注。
[0003] 兩親性嵌段共聚物自組裝聚集體有許多新奇的潛在應(yīng)用價(jià)值，特別是在藥物運(yùn) 輸、緩釋方面，但是，自組裝聚集體結(jié)構(gòu)的極性、表面浸潤(rùn)性質(zhì)以及粒徑大小對(duì)于其作為藥 物載體具有重要的影響。納米粒子的表面電荷、親水親油性及粒子的大小決定了納米聚集 體被血漿中特異性吸附或包裹的數(shù)量，從而確定了其在體內(nèi)的代謝過(guò)程。一般極性微粒不 易被吞噬，電荷越高，吞噬越少；表面雙親或親水性的納米粒在血中循環(huán)時(shí)間長(zhǎng)；粒徑大小 與革巴向性有關(guān)，小于5 μ m的粒子被肺毛細(xì)血管床捕獲，小于150nm的納米聚集體祀向骨髓， 小于200nm的納米聚集體靶向體循環(huán)，大于200nm的納米聚集體靶向脾。因此，分子聚集體 粒徑的大小和離散度對(duì)于給藥體系的靶向性以及生理毒性具有重要的影響，分子聚集體粒 徑的有效調(diào)控可以促進(jìn)其在納米藥物學(xué)方面的應(yīng)用。除此之外，膠束的形狀對(duì)其生理毒性、 載藥量以及吸收特性也具有極大的影響。眾所周知，只有直徑小于200納米的球形顆粒才 能夠順利通過(guò)脾臟，但是片狀的柔性紅細(xì)胞，即使其尺寸大于200納米，也可以毫無(wú)費(fèi)力的 穿越脾臟。相關(guān)研究工作也表明，不同形狀的膠體粒子所具有的載藥性、體外藥物釋放、毒 性和細(xì)胞吸收效率也大不相同。
[0004] 綜上所述，聚合物膠束粒徑的大小和離散度、形狀都會(huì)對(duì)于給藥體系的靶向性、生 理毒性產(chǎn)生深遠(yuǎn)的影響。因此，我們需要獲得粒徑大小適中且分布均勻、具有特定形狀的聚 合物膠束以應(yīng)用于臨床實(shí)驗(yàn)。
[0005] 目前，人們通過(guò)改變兩親性嵌段共聚物膠束的外界環(huán)境的pH值、離子強(qiáng)度、氧化 還原類物質(zhì)等，來(lái)調(diào)節(jié)相應(yīng)體系中膠體粒子的形狀和粒徑；或者通過(guò)外加光能量、電流或熱 量刺激，也可以相應(yīng)的使具有光響應(yīng)、電響應(yīng)或熱響應(yīng)基團(tuán)的膠體粒子發(fā)生轉(zhuǎn)變。
[0006] 仍希望有更簡(jiǎn)單有效地調(diào)節(jié)聚合物膠束的粒徑的方法。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明中采用超重力技術(shù)來(lái)調(diào)節(jié)聚合物膠束的粒徑分布。
[0008] 因此，本發(fā)明提供了一種使用超重力技術(shù)來(lái)調(diào)整聚合物膠束的粒徑的方法，其包 括將具有第一粒徑分布的聚合物膠束溶液循環(huán)通過(guò)超重力機(jī)，以得到具有第二粒徑分布的 聚合物膠束溶液，其中所述第二粒徑分布不同于第一粒徑分布，其中所述超重力機(jī)的離心 加速度大于重力加速度。
[0009] 在優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述第一粒徑分布是雙峰分布，所述第二粒徑分布也是雙 峰分布，所述第二粒徑分布中的粒徑較大峰與所述第一粒徑分布中的粒徑較大峰的位置相 t匕，發(fā)生了偏移。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，其中所述第一粒徑分布是雙峰分布，其中粒徑較小 峰位于40nm處，粒徑較大峰位于400nm處；所述第二粒徑分布是雙峰分布，其中粒徑較小峰 位于40nm處，粒徑較大峰則在180?1300nm之間變化。
[0010] 在優(yōu)選的實(shí)施方案中，將所述具有第一粒徑分布的聚合物膠束溶液循環(huán)通過(guò)超重 力機(jī)150次以上。
[0011] 在優(yōu)選的實(shí)施方案中，還包括將所述具有第二粒徑分布的聚合物膠束溶液裝入滲 析袋中并將該滲析袋放入水相溶液中進(jìn)行滲析，以將所述具有第二粒徑分布的聚合物膠束 溶液中的有機(jī)相置換成水相。在優(yōu)選實(shí)施方案中，該水相溶液是與生物體相容的水相溶液， 例如生理鹽水、磷酸鹽緩沖溶液，等等。更優(yōu)選地，該水相溶液是既能維持所述聚合物膠束 的穩(wěn)定存在又能與生物體相容的水相溶液。
[0012] 在優(yōu)選的實(shí)施方案中，其中所述聚合物膠束是兩親性嵌段共聚物膠束，多個(gè)兩親 性嵌段共聚物分子的疏水鏈段彼此纏繞形成膠束內(nèi)核，而該兩親性嵌段共聚物的親水鏈段 以溶劑化形式分布在該膠束內(nèi)核周圍形成殼層。優(yōu)選地，所述聚合物膠束是能夠作為藥物 載體的聚合物膠束，即所述膠束內(nèi)核中載有藥物分子。
[0013] 其中所使用的超重力機(jī)具有溶液入口、溶液出口、連通所述溶液入口和溶液出口 的離心處理區(qū)和將所述溶液出口連通至所述溶液入口的外循環(huán)管。液體能夠經(jīng)由上述溶液 入口、離心處理區(qū)、溶液出口和外循環(huán)管循環(huán)反復(fù)通過(guò)該超重力機(jī)進(jìn)行處理。所述超重力機(jī) 具有可旋轉(zhuǎn)組件，液體在流經(jīng)該可旋轉(zhuǎn)組件時(shí)發(fā)生旋轉(zhuǎn)并受到離心加速度的作用，該離心 加速度大于重力加速度，超重力因此而得名。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述離心加速度為重力 加速度的10- 775倍。
[0014] 本發(fā)明通過(guò)調(diào)節(jié)超重力機(jī)的離心加速度以及溶液循環(huán)次數(shù)，所述聚合物膠束溶液 的第二粒徑分布中，較大粒徑峰的位置能夠在180?1300nm之間自由調(diào)整。
[0015] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于，通過(guò)超重力離心技術(shù)有效地調(diào)整了聚合物膠束的粒徑。前文 已述，聚合物膠束的膠束內(nèi)核由疏水鏈段締合構(gòu)成，親水鏈段以溶劑化形式分布在核周圍 形成殼層以維持膠束的穩(wěn)定性。由于溶劑化殼層的存在，該聚合物膠束在一定濃度范圍內(nèi) 可以長(zhǎng)時(shí)間穩(wěn)定存在，這是一種熱力學(xué)相對(duì)穩(wěn)定的存在狀態(tài)。因此聚合物膠束一旦形成，再 對(duì)其粒徑進(jìn)行調(diào)節(jié)，勢(shì)必要打破原來(lái)穩(wěn)定的核殼結(jié)構(gòu)才能進(jìn)行，這是非常困難的。即便用施 加熱、光、電磁波、攪拌、震蕩等外加能量的方式打破上述核殼結(jié)構(gòu)使其進(jìn)行重新自組裝，在 上述外加能量消失后，聚合物膠束也傾向于回到其原始的熱力學(xué)相對(duì)穩(wěn)定的狀態(tài)，即傾向 于恢復(fù)其原來(lái)的粒徑分布，因此，采用上述傳統(tǒng)方式，也未必能確保重新自組裝后的聚合物 膠束的粒徑分布與原來(lái)的粒徑分布有很大不同。此外，施加熱、光、電磁波等方式，對(duì)于其內(nèi) 核載有藥物分子的聚合物膠束的粒徑調(diào)整來(lái)說(shuō)，未必合適，因?yàn)樗幬锓肿油斜容^敏 感的官能團(tuán)，可能會(huì)在熱、光、電磁波的作用下發(fā)生性質(zhì)改變，影響療效。相比之下，本發(fā)明 僅使用超重力離心技術(shù)，就有效地改變了聚合物膠束的粒徑分布，這在藥物學(xué)上具有重大 意義，因?yàn)榱椒植嫉母淖円馕吨邢蚱鞴俚母淖?，這使得經(jīng)過(guò)本發(fā)明的超重力離心處理 后的聚合物膠束作為藥物載體時(shí)，能夠根據(jù)具體靶向器官的需要而調(diào)整其粒徑分布，提高 給藥針對(duì)性。此外，使得經(jīng)過(guò)本發(fā)明的超重力離心處理后的聚合物膠束作為藥物載體時(shí)，避 免了傳統(tǒng)的粒徑調(diào)節(jié)方法中所使用的熱、光、電磁波等手段對(duì)藥物分子的性質(zhì)的影響。

【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0016] 圖1是對(duì)比實(shí)施例1中的未經(jīng)超重力離心處理（未使用超重力機(jī)）且經(jīng)過(guò)滲析步 驟后得到的聚乙二醇-聚乳酸嵌段共聚物膠束水溶液的粒徑分布圖。其中圖中的縱軸反映 了膠束顆粒的數(shù)目，橫軸則反映膠束顆粒的粒徑，其中橫軸為對(duì)數(shù)坐標(biāo)，下同。
[0017] 圖2是對(duì)比實(shí)施例2中的未經(jīng)超重力離心處理（超重力機(jī)轉(zhuǎn)速為零但膠束溶液循 環(huán)通過(guò)該機(jī)器不同次數(shù)）且經(jīng)過(guò)滲析步驟后得到的聚乙二醇-聚乳酸嵌段共聚物膠束水溶 液的粒徑分布圖。
[0018] 圖3是本發(fā)明的實(shí)施例1中的經(jīng)過(guò)超重力離心循環(huán)處理不同次數(shù)且經(jīng)過(guò)滲析步驟 后得到的聚乙二醇-聚乳酸嵌段共聚物膠束水溶液的粒徑分布圖，其中離心加速度為重力 加速度的12倍。
[0019] 圖4是本發(fā)明的實(shí)施例2中的經(jīng)過(guò)超重力離心循環(huán)處理不同次數(shù)且經(jīng)過(guò)滲析步驟 后得到的聚乙二醇-聚乳酸嵌段共聚物膠束水溶液的粒徑分布圖，其中離心加速度為重力 加速度的108倍。
[0020] 圖5是本發(fā)明的實(shí)施例3中的經(jīng)過(guò)超重力離心循環(huán)處理不同次數(shù)且經(jīng)過(guò)滲析步驟 后得到的聚乙二醇-聚乳酸嵌段共聚物膠束水溶液的粒徑分布圖，其中離心加速度為重力 加速度的300倍。
[0021] 圖6是本發(fā)明的實(shí)施例4中的經(jīng)過(guò)超重力離心循環(huán)處理不同次數(shù)且經(jīng)過(guò)滲析步驟 后得到的聚乙二醇-聚乳酸嵌段共聚物膠束水溶液的粒徑分布圖，其中離心加速度為重力 加速度的435倍。
[0022] 圖7是本發(fā)明的實(shí)施例5中的經(jīng)過(guò)超重力離心循環(huán)處理不同次數(shù)且經(jīng)過(guò)滲析步驟 后得到的聚乙二醇-聚乳酸嵌段共聚物膠束水溶液的粒徑分布圖，其中離心加速度為重力 加速度的773倍。

【具體實(shí)施方式】
[0023] 通過(guò)以下對(duì)比實(shí)施例和實(shí)施例來(lái)說(shuō)明本發(fā)明的方法。實(shí)施例僅為舉例說(shuō)明，不以 任何方式限制本發(fā)明的范圍。
[0024] 對(duì)比實(shí)例1 :
[0025] 1)、配制聚乙二醇（PEG)-聚乳酸（PLA)兩親性嵌段共聚物的二氧六環(huán)溶液，濃度 為1暈克/暈升；
[0026] 2)、配制磷酸鹽緩沖溶液：取十二水合磷酸氫二鈉固體28. 656克，二水合磷酸二 氫鈉固體3. 121克，溶解于10升去離子水中，所得磷酸鹽緩沖溶液的pH為約7. 4 ;
[0027] 3)、將28ml步驟1)中所得溶液，與12ml步驟2)所得溶液，在攪拌的情況下進(jìn)行 混合，混合過(guò)程為將步驟2)所得溶液緩慢通入步驟1)的溶液中，通入速率為0. 12ml/min ;
[0028] 4)、未經(jīng)超重力離心處理步驟，將步驟3)中所得混合溶液直接裝入截留分子量為 3500的滲析袋中并浸入上述步驟2)所得磷酸鹽緩沖溶液中進(jìn)行滲析，其中所述滲析袋由 半透膜制成，其能允許小分子溶劑通過(guò)而截留聚合物膠束，下同。滲析持續(xù)三天，每8小時(shí) 更換一次磷酸鹽緩沖溶液；滲析后在滲析袋中得到聚合物膠束水溶液；
[0029] 5)、對(duì)步驟4)中得到的聚合物膠束水溶液進(jìn)行粒徑分布測(cè)試，測(cè)試結(jié)果見(jiàn)圖1。
[0030] 圖1顯示，所得到聚合物膠束水溶液的粒徑分布為雙峰分布。一峰位于40nm左右， 另一峰位于400nm左右。
[0031] 對(duì)比實(shí)例2:
[0032] 1)、配制聚乙二醇（PEG)-聚乳酸（PLA)兩親性嵌段共聚物的二氧六環(huán)溶液，濃度 為1暈克/暈升；
[0033] 2)、取十二水合磷酸氫二鈉固體28. 656克，二水合磷酸二氫鈉固體3. 121克，溶解 于10升去離子水中，所得磷酸鹽緩沖溶液的pH為約7. 4 ;
[0034] 3)、將28ml步驟1)中所得溶液，與12ml步驟2)所得溶液，在攪拌的情況下進(jìn)行 混合，混合過(guò)程為將步驟2)所得溶液緩慢通入步驟1)的溶液中，通入速率為0. 12ml/min ;
[0035] 4)、將步驟3)中所得混合溶液通入超重力機(jī)中，采取外循環(huán)方式，但超重力轉(zhuǎn)速 為Ohz，即實(shí)際上未進(jìn)行超重力離心處理而進(jìn)行外循環(huán)，分別于50、100、150、200、300、400、 500、600、800、1000次循環(huán)后取樣lml，快速加入1. 8ml前述磷酸鹽緩沖溶液，攪拌均勻，裝 入截留分子量為3500的滲析袋中并浸入前述磷酸鹽緩沖溶液中滲析三天，每8小時(shí)更換一 次磷酸鹽緩沖溶液，滲析后在滲析袋中得到的即為聚合物膠束水溶液；
[0036] 5)、對(duì)步驟4)中得到的聚合物膠束水溶液進(jìn)行粒徑分布測(cè)試，結(jié)果見(jiàn)圖2。
[0037] 圖2顯示，僅外循環(huán)而未經(jīng)超重力離心處理，樣品的粒徑分布仍為雙峰分布，一峰 位于40nm左右，另一峰位于400nm左右，循環(huán)次數(shù)的增多，并不影響雙峰的分布情況。這說(shuō) 明僅使聚合物膠束溶液循環(huán)通過(guò)超重力機(jī)但未經(jīng)施加超重力離心處理時(shí)，樣品的粒徑分布 不發(fā)生明顯變化。
[0038] 實(shí)施例1 :
[0039] 1)、配制聚乙二醇（PEG)-聚乳酸（PLA)兩親性嵌段共聚物的二氧六環(huán)溶液，濃度 為1暈克/暈升；
[0040] 2)、取十二水合磷酸氫二鈉固體28. 656克，二水合磷酸二氫鈉固體3. 121克，溶解 于10升去離子水中，所得磷酸鹽緩沖溶液的pH為約7. 4 ;
[0041] 3)、將28ml步驟1)中所得溶液，與12ml步驟2)所得溶液，在攪拌的情況下進(jìn)行混 合，混合過(guò)程為將步驟2)所得緩沖溶液緩慢通入步驟1)所得溶液中，通入速率為0. 12ml/ min ；
[0042] 4)、將步驟3)中所得混合溶液通入超重力機(jī)中，采取外循環(huán)方式進(jìn)行循環(huán)，超重 力轉(zhuǎn)速為l〇hz(超重力機(jī)轉(zhuǎn)子半徑為3cm，經(jīng)計(jì)算離心加速度約為120m/s 2,為重力加速度 的 12 倍左右），分別于 50、100、150、200、300、400、500、600、800、1000 次循環(huán)后取樣 lml，向 樣品中快速加入1. 8ml步驟2)溶液，攪拌均勻，裝入截留分子量為3500的滲析袋中并浸入 前述磷酸鹽緩沖溶液中滲析三天，每8小時(shí)更換一次磷酸鹽緩沖溶液，滲析后在滲析袋中 得到的即為聚合物膠束水溶液；
[0043] 5)、對(duì)步驟4)中得到的經(jīng)過(guò)超重力機(jī)調(diào)整過(guò)粒徑分布的聚合物膠束水溶液進(jìn)行 粒徑分布測(cè)試，結(jié)果見(jiàn)圖3。
[0044] 圖3表明，在循環(huán)轉(zhuǎn)速為10Hz時(shí)，樣品的粒徑分布為雙峰分布，一峰位于40nm左 右，另一峰位于數(shù)百納米左右，隨著循環(huán)次數(shù)的增多，造成大粒徑分布峰位置發(fā)生偏移，先 變大，后減小，依次為 620，740，860，900，1300，900，700，610，570，450nm 左右。此外，小粒徑 分布峰的位置也有偏移。
[0045] 實(shí)施例2 :
[0046] 1)、配制聚乙二醇（PEG)-聚乳酸（PLA)兩親性嵌段共聚物的二氧六環(huán)溶液，濃度 為1暈克/暈升；
[0047] 2)、取十二水合磷酸氫二鈉固體28. 656克，二水合磷酸二氫鈉固體3. 121克，溶解 于10升去離子水中，所得磷酸鹽緩沖溶液的pH為約7. 4 ;
[0048] 3)、將28ml步驟1)中所得溶液，與12ml步驟2)所得溶液，在攪拌的情況下進(jìn)行混 合，混合過(guò)程為將步驟2)所得緩沖溶液緩慢通入步驟1)所得溶液中，通入速率為0. 12ml/ min ；
[0049] 4)、將步驟3)中所得混合溶液通入超重力機(jī)中，采取外循環(huán)方式，超重力轉(zhuǎn)速為 30Hz (超重力機(jī)轉(zhuǎn)子半徑為3cm，經(jīng)計(jì)算離心加速度約為1066m/s2,為重力加速度的108倍 左右），分別于50、100、150、200、300、400、500、600、800、1000次循環(huán)后取樣lml，快速加入 1. 8ml步驟2)溶液，攪拌均勻，裝入截留分子量為3500的滲析袋中并浸入前述磷酸鹽緩沖 溶液中滲析三天，每8小時(shí)更換一次磷酸鹽緩沖溶液，滲析后在滲析袋中得到的即為聚合 物膠束水溶液；
[0050] 5)、對(duì)步驟4)中得到的經(jīng)過(guò)超重力機(jī)調(diào)整過(guò)粒徑分布的聚合物膠束水溶液進(jìn)行 粒徑分布測(cè)試，結(jié)果見(jiàn)圖4。
[0051] 圖4表明，在循環(huán)轉(zhuǎn)速為30Hz時(shí)，樣品的粒徑分布為雙峰分布，一峰位于40nm左 右，另一峰位于數(shù)百 nm左右，循環(huán)時(shí)間的延長(zhǎng)，造成大粒徑分布峰位置發(fā)生偏移，先變大， 后減小，依次為540, 590,650, 770,900,650, 540,470, 390, 350nm左右。此外，小粒徑分布峰 的位置也有偏移。
[0052] 實(shí)施例3 :
[0053] 1)、配制聚乙二醇（PEG)-聚乳酸（PLA)兩親性嵌段共聚物的二氧六環(huán)溶液，濃度 為1暈克/暈升；
[0054] 2)、取十二水合磷酸氫二鈉固體28. 656克，二水合磷酸二氫鈉固體3. 121克，溶解 于10升去離子水中，所得磷酸鹽緩沖溶液的pH為約7. 4 ;
[0055] 3)、將28ml步驟1)中所得溶液，與12ml步驟2)所得溶液，在攪拌的情況下進(jìn)行混 合，混合過(guò)程為將步驟2)所得緩沖溶液緩慢通入步驟1)所得溶液中，通入速率為0. 12ml/ min ；
[0056] 4)、將步驟3)中所得混合溶液通入超重力機(jī)中，采取外循環(huán)方式，超重力轉(zhuǎn)速為 50Hz，（超重力機(jī)轉(zhuǎn)子半徑為3cm，經(jīng)計(jì)算離心加速度約為2960m/s 2,為重力加速度的300倍 左右）分別于50、100、150、200、300、400、500、600、800、1000次循環(huán)后取樣lml，快速加入 1. 8ml步驟2)溶液，攪拌均勻，裝入截留分子量為3500的滲析袋中并浸入前述磷酸鹽緩沖 溶液中滲析三天，每8小時(shí)更換一次磷酸鹽緩沖溶液；滲析后在滲析袋中得到的即為聚合 物膠束水溶液；
[0057] 5)、對(duì)步驟4)中得到的經(jīng)過(guò)超重力機(jī)調(diào)整過(guò)粒徑分布的聚合物膠束溶液進(jìn)行粒 徑分布測(cè)試，結(jié)果見(jiàn)圖5。
[0058] 圖5表明，在循環(huán)轉(zhuǎn)速為50Hz時(shí)，樣品的粒徑分布為雙峰分布，一峰位于40nm左 右，另一峰位于數(shù)百納米左右，循環(huán)時(shí)間的延長(zhǎng)，造成大粒徑分布峰位置發(fā)生偏移，先變大， 后減小，依次為800,810,920,1000,940,600, 500, 375, 300, 250nm左右。此外，小粒徑分布 峰的位置也有偏移。
[0059] 實(shí)施例4 :
[0060] 1)、配制聚乙二醇（PEG)-聚乳酸（PLA)兩親性嵌段共聚物的二氧六環(huán)溶液，濃度 為1暈克/暈升；
[0061] 2)、取十二水合磷酸氫二鈉固體28. 656克，二水合磷酸二氫鈉固體3. 121克，溶解 于10升去離子水中，所得磷酸鹽緩沖溶液的pH為約7. 4 ;
[0062] 3)、將28ml步驟1)中所得溶液，與12ml步驟2)所得溶液，在攪拌的情況下進(jìn)行混 合，混合過(guò)程為將步驟2)所得緩沖溶液緩慢通入步驟1)所得溶液中，通入速率為0. 12ml/ min ；
[0063] 4)、將步驟3)中所得混合溶液通入超重力機(jī)中，采取外循環(huán)方式，超重力轉(zhuǎn)速為 60Hz (超重力機(jī)轉(zhuǎn)子半徑為3cm，經(jīng)計(jì)算離心加速度約為4265m/s2,為重力加速度的435倍 左右），分別于50、100、150、200、300、400、500、600、800、1000次循環(huán)后取樣lml，快速加入 1. 8ml步驟2)溶液，攪拌均勻，裝入截留分子量為3500的滲析袋中并浸入前述磷酸鹽緩沖 溶液中滲析三天，每8小時(shí)更換一次磷酸鹽緩沖溶液，滲析后在滲析袋中得到的即為聚合 物膠束水溶液；
[0064] 5)、對(duì)步驟4)中得到的經(jīng)過(guò)超重力機(jī)調(diào)整過(guò)粒徑分布的聚合物膠束水溶液進(jìn)行 粒徑分布測(cè)試，結(jié)果見(jiàn)圖6。
[0065] 圖6表明，在循環(huán)轉(zhuǎn)速為60Hz時(shí)，樣品的粒徑分布為雙峰分布，一峰位于40nm左 右，另一峰位于數(shù)百納米左右，循環(huán)時(shí)間的延長(zhǎng)，造成大粒徑分布峰位置發(fā)生偏移，先變大， 后減小，依次為510,615,1000,820, 720, 580, 510,420, 320, 210nm左右。此外，小粒徑分布 峰的位置也有偏移。
[0066] 實(shí)施例5 :
[0067] 1)、配制聚乙二醇（PEG)-聚乳酸（PLA)兩親性嵌段共聚物的二氧六環(huán)溶液，濃度 為1暈克/暈升；
[0068] 2)、取十二水合磷酸氫二鈉固體28. 656克，二水合磷酸二氫鈉固體3. 121克，溶解 于10升去離子水中，所得磷酸鹽緩沖溶液的pH為約7. 4 ;
[0069] 3)、將28ml步驟1)中所得溶液，與12ml步驟2)所得溶液，在攪拌的情況下進(jìn)行混 合，混合過(guò)程為將步驟2)所得緩沖溶液緩慢通入步驟1)所得溶液中，通入速率為0. 12ml/ min ；
[0070] 4)、將步驟3)中所得混合溶液通入超重力機(jī)中，采取外循環(huán)方式，超重力轉(zhuǎn)速為 80Hz (超重力機(jī)轉(zhuǎn)子半徑為3cm，經(jīng)計(jì)算離心加速度約為7580m/s2,為重力加速度的773倍 左右），分別于50、100、150、200、300、400、500、600、800、1000次循環(huán)后取樣lml，快速加入 1. 8ml步驟2)溶液，攪拌均勻，裝入截留分子量為3500的滲析袋中并浸入前述磷酸鹽緩沖 溶液中滲析三天，每8小時(shí)更換一次磷酸鹽緩沖溶液，滲析后在滲析袋中得到的即為聚合 物膠束水溶液；
[0071] 5)、對(duì)步驟4)中得到的經(jīng)過(guò)超重力機(jī)調(diào)整過(guò)粒徑分布的聚合物膠束水溶液進(jìn)行 粒徑分布測(cè)試，結(jié)果見(jiàn)圖7。
[0072] 圖7表明，在循環(huán)轉(zhuǎn)速為80Hz時(shí)，樣品的粒徑分布為雙峰分布，一峰位于40nm左 右，另一峰位于數(shù)百納米左右，循環(huán)時(shí)間的延長(zhǎng)，造成大粒徑分布峰位置發(fā)生偏移，先變大， 后減小，依次為745,890,930,645, 580, 555,465, 280, 230,185nm左右。此外，小粒徑分布峰 的位置也有偏移。
[0073] 從以上實(shí)施例1、2、3、4和5可見(jiàn)，本發(fā)明通過(guò)調(diào)節(jié)超重力機(jī)的轉(zhuǎn)速以及循環(huán)次數(shù) 的組合物，可以在很寬的粒徑范圍內(nèi)，自如地調(diào)節(jié)兩親性嵌段聚合物膠束的粒徑分布情況。 另外，雖然實(shí)施例中僅以聚乙二醇（PEG)-聚乳酸（PLA)兩親性嵌段共聚物膠束為例進(jìn)行了 舉例說(shuō)明，但本發(fā)明的方法顯然并不僅限于這一類兩親性嵌段共聚物膠束，而是一種適用 于所有兩親性嵌段共聚物膠束的通用方法，因?yàn)樗鼈兌季哂邢嗤奈⒂^結(jié)構(gòu)。
【權(quán)利要求】
1. 一種使用超重力技術(shù)來(lái)調(diào)整聚合物膠束的粒徑的方法，其包括將具有第一粒徑分 布的聚合物膠束溶液循環(huán)通過(guò)超重力機(jī)，以得到具有第二粒徑分布的聚合物膠束溶液，其 中所述第二粒徑分布不同于第一粒徑分布，其中所述超重力機(jī)的離心加速度大于重力加速 度。
2. 權(quán)利要求1的方法，其中將所述具有第一粒徑分布的聚合物膠束溶液循環(huán)通過(guò)超重 力機(jī)150次以上。
3. 權(quán)利要求1的方法，其還包括將所述具有第二粒徑分布的聚合物膠束溶液裝入滲析 袋中并將該滲析袋放入水相溶液中進(jìn)行滲析，以將所述具有第二粒徑分布的聚合物膠束溶 液中的有機(jī)相置換成水相。
4. 權(quán)利要求1的方法，其中所述聚合物膠束是兩親性嵌段共聚物膠束，多個(gè)兩親性嵌 段共聚物分子的疏水鏈段彼此纏繞形成膠束內(nèi)核，所述膠束內(nèi)核中任選地載有藥物分子； 而多個(gè)兩親性嵌段共聚物的親水鏈段以溶劑化形式分布在該膠束內(nèi)核周圍形成殼層；優(yōu)選 地，所述聚合物膠束是聚乙二醇-聚乳酸兩親性嵌段共聚物。
5. 權(quán)利要求1的方法，其中所述超重力機(jī)具有溶液入口、溶液出口、連通所述溶液入口 和溶液出口的離心處理區(qū)以及將所述溶液出口連通至所述溶液入口的外循環(huán)管。
6. 權(quán)利要求1的方法，其中所述超重力機(jī)的離心加速度為重力加速度的10- 775倍。
7. 權(quán)利要求3的方法，其中所述水相溶液是與生物體相容的水相溶液。
8. 權(quán)利要求1的方法，其中所述第一粒徑分布是雙峰分布，所述第二粒徑分布也是雙 峰分布，所述第二粒徑分布中的粒徑較大峰與所述第一粒徑分布中的粒徑較大峰的位置相 t匕，發(fā)生了偏移。
9. 權(quán)利要求1的方法，其中所述第一粒徑分布是雙峰分布，其中粒徑較小峰位于40nm 處，粒徑較大峰位于400nm處；所述第二粒徑分布是雙峰分布，其中粒徑較小峰位于40nm 處，粒徑較大峰則在180?1300nm之間變化。
10. 權(quán)利要求8的方法，其中通過(guò)調(diào)節(jié)超重力機(jī)的離心加速度以及溶液循環(huán)次數(shù)來(lái)調(diào) 節(jié)第二粒徑分布中的粒徑較大峰的位置。
【文檔編號(hào)】C08J3/00GK104151568SQ201410367896
【公開(kāi)日】2014年11月19日 申請(qǐng)日期:2014年7月29日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月29日
【發(fā)明者】石峰, 姜超 申請(qǐng)人:北京化工大學(xué)