本發(fā)明涉及高尿酸血癥和痛風的藥物領域。具體地講，本發(fā)明涉及對上述疾病具有治療作用的一類含二芳基甲烷結構的羧酸類尿酸轉運體1(URAT1)抑制劑、其制備方法，以及含有它們的藥物組合物以及在醫(yī)藥上的用途。
背景技術：
：痛風是一種以高尿酸血癥和尿酸單鈉鹽(MSU)沉積在關節(jié)等部位而引起痛疼為主要特征的慢性代謝性疾病，主要原因為嘌呤代謝紊亂和/或尿酸排出障礙。目前全球痛風患者有數(shù)千萬。目前的高尿酸血癥及痛風治療藥物主要包括：i)用于痛風急性發(fā)作關節(jié)腫脹、痛疼等癥狀控制的消炎止痛藥物，如秋水仙堿和非甾體抗炎藥物(NSAID)等；ii)用于抑制尿酸生成的藥物，如別嘌醇、奧昔嘌醇和非布索坦等黃嘌呤氧化酶(XO)抑制劑；iii)用于尿酸排泄的藥物，如丙磺舒和苯溴馬隆等；iv)用于急性痛風發(fā)作時迅速降低血尿酸的尿酸分解藥，如尿酸酶(uricase)以及聚乙二醇化的尿酸酶(pegloticase)。但是，這些藥物均具有比較嚴重的副作用，如秋水仙堿具有腹瀉、嘔吐、腹痛性痙攣等常見的不良反應，并且是其毒性的第一指征，治療有效劑量與其引起胃腸道癥狀的劑量相近；丙磺舒能引發(fā)腎絞痛和腎功能損害；苯溴馬隆有引起爆發(fā)性肝炎的危險；別嘌醇具有肝臟及骨髓毒性和變態(tài)反應等不良反應；尿酸酶制劑為注射給藥，病人的順應性不如口服制劑，只適應于急性痛風發(fā)作時降低血尿酸，不宜作為長期治療。尿酸轉運體1(uratetransporter1,URAT1)位于腎臟近曲小管的上皮細胞的刷狀緣上，是近年來發(fā)現(xiàn)的位于腎臟的重要尿酸轉運體，負責腎臟中尿酸的重吸收(Enomoto,A.；Kimura,H.；etal.Nature,2002,vol417,447-452)。很顯然，抑制URAT1就會抑制腎臟中尿酸的重吸收、增加尿液中尿酸的排泄，進而達到降低血尿酸和控制痛風發(fā)作的目的。Lesinurad等的臨床前研究和臨床研究已經(jīng)證實了URAT1抑制劑在治療高尿酸血癥和痛風方面的療效(Fleischmann,R.；Kerr,B.；etal.Rheumatology,2014,vol53,2167-2174)。Lesinurad(RDEA594)是一種由Ardea公司研制的可以抑制URAT1而排出血液中尿酸的口服藥物，最早由Valeant的抗病毒藥物RDEA806發(fā)展而來(如下式所示)。Lesinurad目前已經(jīng)向EMA遞交了上市申請(US2013345271和WO2014008295)，其所有權已經(jīng)屬于AstraZeneca。本發(fā)明公開了一類含二芳基甲烷結構的羧酸類URAT1抑制劑，這些化合物可用于制備高尿酸血癥和痛風的治療藥物。技術實現(xiàn)要素：本發(fā)明的一個目的是提供一種具有通式I的URAT1抑制劑及其藥學上可以接受的鹽。本發(fā)明的另一個目的是提供制備具有通式I的化合物及其藥學上可以接受的鹽的方法。本發(fā)明的再一個目的是提供含有通式I的化合物及其藥學上可以接受的鹽作為有效成分，以及一種或多種藥學上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑的藥用組合物，及其在治療痛風和高尿酸血癥方面的應用?，F(xiàn)結合本發(fā)明的目的對本
發(fā)明內(nèi)容進行具體描述。本發(fā)明具有通式(I)的化合物具有下述結構式：其中，R1選自H，C1-C10的烷基，C3-C10的環(huán)烷基，F(xiàn)，Cl，Br，I，CN，NO2，SR4和OR4；R2選自H，F(xiàn)，Cl，Br和I；R3選自H和C1-C4的烷基；X選自S和CH2；其中R4選自C1-C10的烷基。優(yōu)選以下通式(I)化合物，其中，R1選自H，C1-C4的烷基，C3-C6的環(huán)烷基，F(xiàn)，Cl，CN，NO2和OR4；R2選自H，F(xiàn)，Cl，Br和I；R3選自H和Me；X選自S和CH2；其中R4選自C1-C4的烷基。更加優(yōu)選的具有通式(I)的化合物如下，本發(fā)明所述通式(I)化合物可以通過以下路線合成。(1)當X＝S時，本發(fā)明所述通式(I)化合物即為I-A：I-A可以采用下列路線合成：化合物II可以為市售化學原料或者按照本領域內(nèi)常規(guī)方法制備?；衔颕I與CuCN反應，得到化合物III，其中X1選自Cl、Br和I；化合物III被LiAlH4還原，得到化合物IV；化合物IV在堿存在下與硫光氣反應，得到化合物V；化合物V先與甲酰肼加成，得到的中間體VI用堿處理而環(huán)化得到化合物VII；化合物VII與鹵代酸酯VIII在堿存在下反應，得到化合物IX，其中X2選自Cl、Br和I，R5選自C1-C10的烷基；化合物IX使用鹵化劑處理，得到化合物X，其中X3選自F、Cl、Br、I，所述鹵化劑選自XeF2、N-氯代琥珀酰亞胺(NCS)、N-溴代琥珀酰亞胺(NBS)、N-碘代琥珀酰亞胺(NIS)、二溴海因和二氯海因；化合物X和化合物IX經(jīng)堿性水解即可得到化合物I-A；化合物I-A與堿成鹽得到其對應的藥學上可以接受的鹽I-A-S，其中M代表羧酸鹽中的陽離子；其中R1至R3的定義如前所述。(2)當X＝CH2時，本發(fā)明所述通式(I)化合物即為I-B：I-B可以采用下列路線合成：化合物XI可以為市售化學原料或者按照本領域內(nèi)常規(guī)方法制備。酰肼XI和N,N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛XII先加熱反應，得到中間體XIII，不用分離，直接與后加入的萘甲胺IV在酸催化下反應，關環(huán)得到三氮唑化合物XIV；化合物XIV經(jīng)過雙羥化得到鄰二醇化合物XV；XV用NaIO4處理得到醛XVI；化合物XVI進一步氧化，得到對應的酸XVII；化合物XVII與醇R6OH反應得到對應的酯XVIII，R6選自C1-C10的烷基；化合物XVIII使用鹵化劑處理，得到化合物XIX，其中X4選自F、Cl、Br、I，所述鹵化劑選自XeF2、N-氯代琥珀酰亞胺(NCS)、N-溴代琥珀酰亞胺(NBS)、N-碘代琥珀酰亞胺(NIS)、二溴海因和二氯海因；化合物XIX和化合物XVIII經(jīng)堿性水解即可得到化合物I-B；化合物I-B與堿成鹽得到其對應的藥學上可以接受的鹽I-B-S，其中M代表羧酸鹽中的陽離子；其中R1至R3的定義如前所述。本發(fā)明所述式I化合物的藥學上可接受的鹽包括，但不限于與各種無機堿，例如，NaOH、KOH、Mg(OH)2、Ca(OH)2、Sr(OH)2、Al(OH)3等，或無機碳酸鹽，例如Na2CO3、K2CO3、MgCO3、CaCO3、SrCO3等，或有機堿，例如氨基酸等，所生成的藥學上可接受的鹽。本發(fā)明所述式I化合物，可以與一種或多種藥學上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑共同制成藥物組合物。該藥物組合物可以制成固體口服制劑、液體口服制劑、注射劑等劑型。所述固體及液體口服制劑包括：片劑、分散片、糖衣劑、顆粒劑、干粉劑、膠囊劑和溶液劑。所述的注射劑包括：小針、大輸液、凍干粉針等。本發(fā)明的組合物，所述的藥學或食品學上可接受輔料選自：填充劑、崩解劑、潤滑劑、助流劑、泡騰劑、矯味劑、防腐劑、包衣材料、或其它賦形劑。本發(fā)明的組合物，所述的藥學或食品學上可接受輔料。填充劑為填充劑包括乳糖、蔗糖、糊精、淀粉、預膠化淀粉、甘露醇、山梨醇、磷酸氫鈣、硫酸鈣、碳酸鈣、微晶纖維素的一種或幾種的組合物；所述的粘合劑包括蔗糖、淀粉、聚維酮、羧甲基纖維素鈉、羥丙甲纖維素、羥丙纖維素、甲基纖維素、聚乙二醇、藥用乙醇、水的一種或幾種的組合物；所述的崩解劑包括淀粉、交聯(lián)聚微酮、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、低取代羥丙基纖維素、羧甲纖維素鈉、泡騰崩解劑的一種或幾種的組合物。本發(fā)明所述通式I化合物具有URAT1抑制作用，可作為有效成分用于制備痛風和高尿酸血癥的治療藥物。本發(fā)明所述通式I化合物的活性是通過體外抑制表達了URAT1的細胞對14C-標記的尿酸的吸收實驗來驗證的。本發(fā)明的通式I化合物在相當寬的劑量范圍內(nèi)是有效的。例如每天服用的劑量約在1mg-1000mg/人范圍內(nèi)，分為一次或數(shù)次給藥。實際服用本發(fā)明通式I化合物的劑量可由醫(yī)生根據(jù)有關的情況來決定。具體實施方式下面結合實施例對本發(fā)明作進一步的說明。需要說明的是，下述實施例僅是用于說明，而并非用于限制本發(fā)明。本領域技術人員根據(jù)本發(fā)明的教導所做出的各種變化均應在本申請權利要求所要求的保護范圍之內(nèi)。實施例1化合物I-A-1的合成步驟1.化合物II-1的合成市售化合物II-A(8.41g,50mmol)溶于乙腈(150mL)中，室溫下攪拌，加入NBS(10.68g,60mmol)。所得反應混合物在室溫下攪拌過夜，此時TLC顯示反應完成。反應混合物傾倒入冰水(500mL)中，攪拌，用CH2Cl2(200mL×3)萃取。合并萃取有機相，依次用飽和Na2CO3溶液(100mL×3)和5％食鹽水(200mL)洗滌，無水Na2SO4干燥。干燥后的有機相在旋轉蒸發(fā)儀上蒸去溶劑，得到的殘余物經(jīng)過柱層析純化，得到產(chǎn)物II-1，無色油狀物，10.01g,產(chǎn)率81％。1HNMR(DMSO-d6,400MHz),δ8.43-8.47(m,1H),8.13-8.17(m,1H),7.75(d,1H,J＝7.6Hz),7.66-7.72(m,2H),7.15-7.17(m,1H),2.34-2.41(m,1H),1.03-1.08(m,2H),0.69-0.73(m,2H).步驟2.化合物III-1的合成化合物II-1(9.89g,40mmol)和CuCN(10.75g,120mmol)加入到DMF(200mL)中，在氮氣保護下在130℃下加熱攪拌，直到TLC顯示反應完成(一般10小時)。反應混合物冷卻到室溫后，加入乙酸乙酯(800mL)稀釋，而后在室溫下繼續(xù)攪拌5小時。所得混合物抽濾除去固體，所得濾液使用水洗滌(500mL×5)，無水Na2SO4干燥。干燥后的有機相在旋轉蒸發(fā)儀上蒸去溶劑，得到的殘余物經(jīng)過柱層析純化，得到產(chǎn)物III-1，白色固體，6.49g,產(chǎn)率84％。熔點48.5-49.5℃；1HNMR(DMSO-d6,400MHz),δ8.51-8.54(m,1H),8.09-8.11(m,1H),8.01(d,1H,J＝7.2Hz),7.73-7.81(m,2H),7.31(d,1H,J＝7.6Hz),2.51-2.56(m,1H),1.11-1.15(m,2H),0.79-0.83(m,2H).步驟3.化合物IV-1的合成化合物III-1(6.18g,32mmol)溶于干燥的THF(100mL)中，攪拌，在冰水浴冷卻下慢慢分批加入LiAlH4(1.90g,50mmol)，加完后反應混合物在室溫下繼續(xù)攪拌5小時，而后在氮氣保護下升溫回流1小時，此時TLC檢測發(fā)現(xiàn)反應完成。反應混合物小心慢慢傾倒入攪拌的冰水(400mL)中，攪拌，用CH2Cl2(200mL×3)萃取。合并萃取有機相，用5％食鹽水(200mL)洗滌，無水Na2SO4干燥。干燥后的有機相在旋轉蒸發(fā)儀上蒸去溶劑，得到的殘余物經(jīng)過柱層析純化，得到產(chǎn)物IV-1，無色油狀物，5.56g,產(chǎn)率88％。1HNMR(DMSO-d6,400MHz),δ8.39-8.42(m,1H),8.10-8.13(m,1H),7.52-7.59(m,2H),7.42(d,1H,J＝7.2Hz),7.20(d,1H,J＝7.2Hz),4.14(s,2H),2.31-2.37(m,1H),1.83(bs,2H),1.00-1.05(m,2H),0.65-0.69(m,2H).步驟4.化合物V-1的合成化合物IV-1(5.33g,27mmol)和二異丙基乙基胺(DIPEA,11.63g,90mmol)溶于干燥的CH2Cl2(100mL)中，所得溶液在冰水浴冷卻下攪拌，而后慢慢滴加CSCl2(3.45g,30mmol)，滴加完畢后，所得溶液在室溫下繼續(xù)攪拌1小時，此時TLC檢查發(fā)現(xiàn)反應完成。反應混合物小心慢慢傾倒入攪拌的冰水(200mL)中，攪拌，分出有機相，水相用CH2Cl2(100mL×2)萃取。合并有機相，依次用2％稀鹽酸(200mL)和5％食鹽水(200mL)洗滌，無水Na2SO4干燥。干燥后的有機相在旋轉蒸發(fā)儀上蒸去溶劑，得到的殘余物經(jīng)過柱層析純化，得到產(chǎn)物V-1，白色固體，5.36g,產(chǎn)率83％。熔點67.5-69℃；1HNMR(DMSO-d6,400MHz),δ8.45-8.49(m,1H),8.05-8.09(m,1H),7.63-7.68(m,2H),7.48(d,1H,J＝7.2Hz),7.25(d,1H,J＝7.2Hz),5.33(s,2H),2.36-2.43(m,1H),1.03-1.07(m,2H),0.70-0.74(m,2H).步驟5.化合物VII-1的合成化合物V-1(5.27g,22mol)以THF(50mL)溶解，室溫下攪拌，加入甲酰肼(1.32g,22mmol)，然后繼續(xù)攪拌過夜，此時TLC檢測反應完成。反應混合物在旋蒸儀上蒸干，得到的殘余物即為VI-1的粗品，以DMF(60mL)溶解，加入固體K2CO3(3.04g,22mol)。反應混合物在50℃下攪拌，直到反應完成(通常5小時)。反應混合物冷卻到室溫后，傾倒到冰水(300mL)中，攪拌，以鹽酸調(diào)節(jié)pH＝5-6，用CH2Cl2(100mL×5)萃取。合并有機相，用5％食鹽水(200mL)洗滌，無水Na2SO4干燥。干燥后的有機相在旋轉蒸發(fā)儀上蒸去溶劑，得到的殘余物經(jīng)過柱層析純化，得到產(chǎn)物VII-1，白色固體，4.70g,產(chǎn)率76％(V-1→VII-1)。熔點188-189.5℃；1HNMR(DMSO-d6,400MHz),δ13.83(brs,1H),8.45-8.48(m,1H),8.28(s,1H),8.14-8.16(m,1H),7.58-7.65(m,2H),7.24(d,1H,J＝7.2Hz),7.19(d,1H,J＝7.2Hz),5.56(s,2H),2.36-2.42(m,1H),1.03-1.08(m,2H),0.69-0.73(m,2H).步驟6.化合物IX-1的合成化合物VII-1(4.50g,16mmol)溶于DMF(100mL)中，室溫下攪拌，加入固體K2CO3(6.63g,48mmol)和溴乙酸甲酯VIII-1(2.75g,18mmol)。所得反應混合物在室溫下繼續(xù)攪拌，直到TLC檢測發(fā)現(xiàn)反應完成(通常2小時)。反應混合物冷卻到室溫后，傾倒到冰水(400mL)中，攪拌，用CH2Cl2(100mL×5)萃取。合并有機相，用5％食鹽水(200mL)洗滌，無水Na2SO4干燥。干燥后的有機相在旋轉蒸發(fā)儀上蒸去溶劑，得到的殘余物經(jīng)過柱層析純化，得到產(chǎn)物IX-1，白色固體，5.26g,產(chǎn)率93％。熔點123-125℃；1HNMR(DMSO-d6,400MHz),δ8.62(s,1H),8.46-8.49(m,1H),8.08-8.10(m,1H),7.61-7.67(m,2H),7.22(d,1H,J＝7.2Hz),6.94(d,1H,J＝7.6Hz),5.66(s,2H),4.06(s,2H),3.62(s,3H),2.36-2.43(m,1H),1.03-1.07(m,2H),0.69-0.72(m,2H).步驟7.化合物X-1的合成化合物IX-1(3.53g,10mmol)溶于乙腈(50mL)中，室溫下攪拌，加入NBS(2.14g,12mmol)，繼續(xù)在室溫下攪拌，直到TLC檢測反應完成(通常12小時以內(nèi))。反應混合物傾倒到冰水(200mL)中，攪拌，用CH2Cl2(100mL×3)萃取。合并有機相，依次用飽和Na2CO3溶液(100mL×3)和5％食鹽水(200mL)洗滌，無水Na2SO4干燥。干燥后的有機相在旋轉蒸發(fā)儀上蒸去溶劑，得到的殘余物經(jīng)過柱層析純化，得到產(chǎn)物X-1，無色油狀粘稠物，3.89g,產(chǎn)率90％。1HNMR(DMSO-d6,400MHz),δ8.48-8.50(m,1H),8.13-8.16(m,1H),7.66-7.71(m,2H),7.18(d,1H,J＝7.6Hz),6.43(d,1H,J＝7.2Hz),5.69(s,2H),4.06(s,2H),3.61(s,3H),2.36-2.41(m,1H),1.02-1.06(m,2H),0.67-0.71(m,2H).步驟8.化合物I-A-1的合成化合物X-1(3.46g,8mmol)加入甲醇(50mL)中，室溫下攪拌，加入由LiOH·H2O(0.84g,20mmol)和水(3mL)配成的溶液，而后室溫下攪拌，直到TLC檢測發(fā)現(xiàn)反應完成(通常2小時)。反應混合物傾倒到冰水(200mL)中，攪拌，用鹽酸調(diào)節(jié)pH＝2-3，用CH2Cl2(100mL×4)萃取。合并有機相，用5％食鹽水(200mL)洗滌，無水Na2SO4干燥。干燥后的有機相在旋轉蒸發(fā)儀上蒸去溶劑，得到的殘余物經(jīng)過柱層析純化，得到產(chǎn)物I-A-1，白色固體，2.78g,產(chǎn)率83％。熔點153.5-154.5℃；1HNMR(DMSO-d6,400MHz),δ13.10(brs,1H),8.48-8.50(m,1H),8.13-8.16(m,1H),7.66-7.71(m,2H),7.18(d,1H,J＝7.6Hz),6.43(d,1H,J＝7.2Hz),5.68(s,2H),3.96(s,2H),2.36-2.40(m,1H),1.02-1.06(m,2H),0.67-0.71(m,2H).實施例2化合物I-B-1的合成步驟1.化合物XIV-1的合成4-戊烯酰肼XI-1系按照文獻方法合成(Gilchrist,T.L.；etal.Synthesis,1983,153-154)。4-戊烯酰肼XI-1(11.41g,100mmol)和N,N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛XII(11.92g,100mmol)溶于乙腈(230mL)中，在50℃下加熱攪拌，直到TLC發(fā)現(xiàn)反應完成(通常0.5-1小時左右)。反應完成后，反應混合物稍冷，在旋轉蒸發(fā)儀上濃縮至原來體積的1/3，此時得到了XIII-1的溶液。往其中加入4-環(huán)丙基萘甲胺IV-1(19.73g,100mmol)和冰醋酸(230mL)，反應混合物在氮氣保護下在120℃下攪拌過夜，TLC檢查發(fā)現(xiàn)反應完成。反應混合物冷卻后，傾倒到冰水(1000mL)中，攪拌，用CH2Cl2(200mL×3)萃取。合并萃取有機相，依次用1％稀鹽酸(200mL)、飽和NaHCO3(200mL)和5％食鹽水(200mL)洗滌，無水Na2SO4干燥。干燥后的有機相在旋轉蒸發(fā)儀上蒸去溶劑，得到的殘余物經(jīng)過柱層析純化，得到產(chǎn)物XIV-1，25.49g,產(chǎn)率84％。MS,m/z＝304([M+H]+).步驟2.化合物XV-1的合成化合物XIV-1(24.27g,80mmol)溶于THF/H2O(240mL,體積比90/10)的混合溶劑中，室溫下攪拌，加入N-甲基嗎啉N-氧化物(NMMO,18.74g,160mmol)和0.16M的OsO4的80％的叔丁醇水溶液(25mL,4mmol)。反應混合物在室溫下攪拌過夜，TLC檢查發(fā)現(xiàn)反應完成。反應混合物抽濾，濾液傾倒入冰水(600mL)中，攪拌，用CH2Cl2(200mL×3)萃取。合并萃取有機相，依次用Na2S2O3溶液(200mL)和5％食鹽水(200mL)洗滌，無水Na2SO4干燥。干燥后的有機相在旋轉蒸發(fā)儀上蒸去溶劑，得到的殘余物經(jīng)過柱層析純化，得到產(chǎn)物XV-1，23.75g,產(chǎn)率88％。MS,m/z＝338([M+H]+).步驟3.化合物XVI-1的合成化合物XV-1(23.28g,69mmol)溶于THF/H2O(330mL,體積比90/10)的混合溶劑中，室溫下攪拌，慢慢分批加入NaIO4(44.28g,207mmol)，加完后，反應混合物在室溫下繼續(xù)攪拌，直到TLC跟蹤反應完成。反應混合物傾倒入冰水(700mL)中，攪拌，用CH2Cl2(200mL×3)萃取。合并萃取有機相，依次用Na2S2O3溶液和5％食鹽水洗滌，無水Na2SO4干燥。干燥后的有機相在旋轉蒸發(fā)儀上蒸去溶劑，得到的殘余物經(jīng)過柱層析純化，得到產(chǎn)物XVI-1，16.67g,產(chǎn)率91％。MS,m/z＝306([M+H]+).步驟4.化合物XVII-1的合成化合物XVI-1(18.32g,60mmol)溶于THF(400mL)中，室溫下攪拌，加入2-甲基-2-丁烯(126.23g,1800mmol)，而后慢慢加入由NaClO2(16.28g,180mmol)和NaH2PO4(43.19g,360mmol)溶于水(100mL)而配制而成的溶液。加完后，反應混合物在室溫下繼續(xù)攪拌，直到TLC檢查反應完成(通常6小時)。反應混合物傾倒入冰水(800mL)中，攪拌，用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH＝2-3，用CH2Cl2(200mL×3)萃取。合并萃取有機相，用清水洗滌，無水Na2SO4干燥。干燥后的有機相在旋轉蒸發(fā)儀上蒸去溶劑，得到的殘余物經(jīng)過柱層析純化，得到產(chǎn)物XVII-1，16.58g,產(chǎn)率86％。MS,m/z＝320([M-H]-).步驟5.化合物XVIII-1的合成化合物XVII-1(14.46g,45mmol)溶于干燥的THF(145mL)中，室溫下攪拌，加入甲醇(14.42g,450mmol)，而后依次加入N-(3-二甲氨基丙基)-N'-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(EDCI,11.50g,60mmol)和4-二甲氨基吡啶(DMAP,11.00g,90mmol)。加完后，反應混合物在室溫下攪拌過夜，然后再升溫回流3小時，TLC檢查發(fā)現(xiàn)反應完成。反應混合物傾倒入冰水(500mL)中，攪拌，用CH2Cl2(200mL×3)萃取。合并萃取有機相，依次用5％稀鹽酸(300mL)、飽和Na2CO3溶液(100mL)和5％食鹽水(200mL)洗滌，無水Na2SO4干燥。干燥后的有機相在旋轉蒸發(fā)儀上蒸去溶劑，得到的殘余物經(jīng)過柱層析純化，得到產(chǎn)物XVIII-1，12.38g,產(chǎn)率82％。MS,m/z＝336([M+H]+).步驟6.化合物XIX-1的合成化合物XVIII-1(3.35g,10mmol)溶于乙腈(50mL)中，室溫下攪拌，加入NBS(2.14g,12mmol)，繼續(xù)在室溫下攪拌，直到TLC檢測反應完成(通常12小時以內(nèi))。反應混合物傾倒到冰水(200mL)中，攪拌，用CH2Cl2(100mL×3)萃取。合并有機相，依次用飽和Na2CO3溶液(100mL×3)和5％食鹽水(200mL)洗滌，無水Na2SO4干燥。干燥后的有機相在旋轉蒸發(fā)儀上蒸去溶劑，得到的殘余物經(jīng)過柱層析純化，得到產(chǎn)物XIX-1，3.77g,產(chǎn)率91％。MS,m/z＝414、416([M+H]+).步驟7.化合物I-B-1的合成化合物XIX-1(3.31g,8mmol)加入甲醇(50mL)中，室溫下攪拌，加入由LiOH·H2O(0.84g,20mmol)和水(3mL)配成的溶液，而后室溫下攪拌，直到TLC檢測發(fā)現(xiàn)反應完成(通常2小時)。反應混合物傾倒到冰水(200mL)中，攪拌，用鹽酸調(diào)節(jié)pH＝2-3，用CH2Cl2(100mL×4)萃取。合并有機相，用5％食鹽水(200mL)洗滌，無水Na2SO4干燥。干燥后的有機相在旋轉蒸發(fā)儀上蒸去溶劑，得到的殘余物經(jīng)過柱層析純化，得到產(chǎn)物I-B-1，2.59g,產(chǎn)率81％。MS,m/z＝398、400([M-H]-).實施例3-50參考實施例1和實施例2的方法，合成了下列具有通式I的化合物。實施例51由化合物I-A-1合成其鈉鹽I-A-1-S化合物I-A-1(0.418g,1mmol)溶于甲醇(5mL)中，室溫下攪拌，慢慢加入由NaOH(0.400g,1mmol)和水(1mL)配制的溶液，加完后，反應混合物在室溫下繼續(xù)攪拌10分鐘。反應混合物在旋轉蒸發(fā)儀上蒸干，得到的殘余物用甲醇(20mL×2)溶解后再蒸干以便除去殘余物中的水，得到的殘余物進一步在真空油泵上在35℃的水浴中干燥12小時，得到I-A-1的鈉鹽I-A-1-S，白色固體，0.431g,產(chǎn)率98％。1HNMR(DMSO-d6,400MHz),δ8.47-8.50(m,1H),8.15-8.17(m,1H),7.67-7.70(m,2H),7.18(d,1H,J＝7.2Hz),6.35(d,1H,J＝7.2Hz),5.66(s,2H),3.65(s,2H),2.34-2.41(m,1H),1.01-1.05(m,2H),0.68-0.71(m,2H).實施例52-70由實施例2-50中部分化合物合成其鈉鹽參照實施例51的方法，可以將下表所列具有通式I的化合物轉化為其對應的鈉鹽I-S。實施例71組分用量/粒實施例1樣品100mg微晶纖維素30mg預膠化淀粉20mg聚乙烯吡咯烷酮3mg硬脂酸鎂2mg滑石粉1mg將活性成分、預膠化淀粉和微晶纖維素過篩，充分混合，加入聚乙烯吡咯烷酮溶液，混合，制軟材，過篩，制濕顆粒，于50-60℃干燥，將硬脂酸鎂和滑石粉預先過篩，然后加入到上述的顆粒中，裝膠囊，即得。實施例72組分用量/片實施例2樣品300mg微晶纖維素80mg預膠化淀粉70mg聚乙烯吡咯烷酮6mg羧甲基淀粉鈉鹽5mg硬脂酸鎂2mg滑石粉2mg將活性成分、預膠化淀粉和微晶纖維素過篩，充分混合，加入聚乙烯吡咯烷酮溶液，混合，制軟材，過篩，制濕顆粒，于50-60℃干燥，將羧甲基淀粉鈉鹽，硬脂酸鎂和滑石粉預先過篩，然后加入到上述的顆粒中壓片。實施例73組分用量/50mL實施例51樣品10mg檸檬酸100mgNaOH適量(調(diào)pH4.0-5.0)蒸餾水50mL在蒸餾水中，先加入蒸餾水和檸檬酸，攪拌溶解和后，再加入樣品，微熱使溶解，調(diào)pH值為4.0-5.0，加0.2g活性碳，室溫下攪拌20分鐘，過濾，濾液，中控測定溶液濃度，按每安瓶5mL分裝，高溫滅菌30分鐘，即得注射液。實施例74顆粒劑組分/100袋實施例52樣品10.0g乳糖55.0g甘露醇14.0g阿司巴甜0.05g香精0.05g2％羥丙甲纖維素(純水配制)QS制備工藝：將主藥與輔料分別過100目篩，充分混合，然后稱取處方量輔料與主藥充分混合。再加入粘合劑制軟材，14目篩制粒，55℃干燥，12目篩整粒，測定袋重包裝。實施例75組分用量實施例53樣品2.0g泊洛沙姆1.0g氫氧化鈉0.2g枸櫞酸QS甘露醇26.0g乳糖23.0g[0127][0127]注射用水100mL制備工藝：取注射用水80mL，加主藥、甘露醇、乳糖、泊洛沙姆攪拌使溶解后，加1mol/L的枸櫞酸調(diào)節(jié)pH至7.0-9.0，補加水至100mL。加入0.5g活性炭，在30℃下攪拌20分鐘，脫炭，采用微孔濾膜過濾除菌，濾液按每支1mL進行分裝，預凍2小時后，冷凍下減壓干燥12小時,至樣品溫度到室溫后，再干燥5小時，制得白色疏松塊狀物，封口即得。實施例76化合物體外抑制URAT1分析胰酶消化后，將穩(wěn)定表達URAT1基因的表達細胞(HEK293)和mock細胞均接種于賴氨酸包被24孔培養(yǎng)盤，細胞接種密度為1×105個/孔，在37℃、5％CO2、飽和濕度的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)2天。移去培養(yǎng)板內(nèi)培養(yǎng)液，將培養(yǎng)細胞用DPBS清洗兩次，并在37℃DPBS緩沖液中溫浴10min，然后以500μL含有放射性標記的探針底物([8-14C]尿酸)和10μM待測化合物(或者空白)溶液置換DPBS，[8-14C]尿酸的濃度為30μM，每孔放射強度為0.867μCi。2min后，用冰浴DPBS緩沖液終止反應，并清洗3次，然后各孔添加500μL0.1mol/LNaOH裂解細胞，提取裂解液于閃爍瓶中，添加3mL的閃爍液(Aquasol-2)，并用Tri-Carb2910TR液閃儀(PerkinElmer,Waltham,USA)測定樣品中的放射性強度。使用上述測定的數(shù)據(jù)根據(jù)下列公式計算待測化合物對URAT1的抑制率：抑制率＝(control-testcompound)/(control-mock)×100％其中：control＝無待測化合物的孔對應的放射性強度testcompound＝待測化合物的孔對應的放射性強度mock＝未轉染URAT1的空白細胞的孔對應的放射性強度結果匯總見下表1。表1化合物對URAT1的抑制率結果從上表結果可以看出，本發(fā)明的化合物對URAT1具有很強的抑制作用，且普遍性地顯著強于以lesinurad、化合物A(US2014005136)和化合物B(CN201510008880.1)為代表的三氮唑和萘環(huán)直接以共價鍵相連為結構特征的URAT1抑制劑，可以作為制備治療痛風和高尿酸血癥的藥物。當前第1頁1 2 3