本發(fā)明屬于藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一類P-糖蛋白抑制劑，本發(fā)明還公開了其制備方法以及該類化合物在多藥耐藥逆轉(zhuǎn)劑中的應(yīng)用。

技術(shù)背景

多藥耐藥(multidrug resistance，MDR)是指腫瘤細(xì)胞對(duì)一種抗腫瘤藥物產(chǎn)生耐藥后，對(duì)其它結(jié)構(gòu)和作用機(jī)制不同的抗腫瘤藥物也產(chǎn)生交叉耐藥的現(xiàn)象。目前，多藥耐藥已成為腫瘤化學(xué)治療失敗的一個(gè)主要原因。因此，尋找逆轉(zhuǎn)MDR藥物以抑制多藥耐藥的產(chǎn)生已成為腫瘤治療中亟待解決的問題。

腫瘤多藥耐藥現(xiàn)象產(chǎn)生的機(jī)制多樣，涉及復(fù)雜的分子生物學(xué)基礎(chǔ)，目前尚未被完全解析，但其中腫瘤細(xì)胞跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白——P-糖蛋白(P-glycoprotein，P-gp)的過度表達(dá)被認(rèn)為是多藥耐藥產(chǎn)生的最主要原因。過度表達(dá)的P-gp利用ATP水解釋放的能量將進(jìn)入腫瘤細(xì)胞內(nèi)的藥物泵出細(xì)胞外，從而導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)抗腫瘤藥物的濃度低于有效濃度，使腫瘤細(xì)胞對(duì)多種化療藥物耐受，產(chǎn)生MDR。自第一個(gè)多藥耐藥逆轉(zhuǎn)劑維拉帕米被發(fā)現(xiàn)以來，多藥耐藥逆轉(zhuǎn)劑的研究已歷經(jīng)三代。第一代以維拉帕米和環(huán)孢霉素A為代表，此類抑制劑具有較大的心血管副作用。第二代抑制劑活性增強(qiáng)，如Valspodar和Biricodard，但該類抑制劑明顯影響與其聯(lián)合應(yīng)用抗癌藥物的血漿藥物動(dòng)力學(xué)，限制了其在臨床上的應(yīng)用。第三代抑制劑是基于構(gòu)效關(guān)系研究而設(shè)計(jì)開發(fā)的化合物，此類化合物抑制劑具有較好的活性和選擇性，如Elacridar、Tariquidar和WK-X-34等。然而，由于各種副作用的出現(xiàn)，目前仍未有有效的逆轉(zhuǎn)劑應(yīng)用于臨床治療。

本發(fā)明涉及結(jié)構(gòu)新穎的喹唑啉-N-苯乙基四氫異喹啉類化合物，其具有P-糖蛋白抑制活性，且大部分化合物活性高于維拉帕米。因此所述通式(I)化合物及其藥用鹽具有潛在的預(yù)防和治療腫瘤多藥耐藥發(fā)生的作用。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一類新型具有P-gp抑制作用的新型腫瘤多藥耐藥逆轉(zhuǎn)劑。該類化合物具有喹唑啉-N-乙基四氫異喹啉結(jié)構(gòu)，有較低的細(xì)胞毒性和較強(qiáng)的MDR逆轉(zhuǎn)活性，有利于提高抗腫瘤藥物的療效。

本發(fā)明的目的在還于提供一類喹唑啉-N-乙基四氫異喹啉類腫瘤多藥耐藥逆轉(zhuǎn)劑的制備方法。

詳細(xì)發(fā)明內(nèi)容如下：

本發(fā)明合成了一系列通式(I)化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽：

其中R₁和R₂相同或不同，分別選自：H、F、Cl、Br、I、C₁-C₅的烷基或烷氧基；

其中R₃選自：取代或未取代芳香基、芳雜環(huán)基、碳環(huán)，其中所述的取代基包括C₁～C₅烷基、C₁～C₅烷氧基、C₁～C₅烷胺基、硝基，亞甲二氧基和鹵素；

其中R₄和R₅相同或不同，分別選自：H、C₁～C₅烷氧基。

本發(fā)明的優(yōu)選方案，一種通式(I)的化合物或其可藥用的鹽，其是通式(II)所示的化合物或其可藥用的鹽：

其中R₁和R₂相同或不同，分別選自：H、F、Cl、Br、I、C₁～C₅的烷基或烷氧基；

其中R₃選自：取代或未取代C₅～C₁₀芳香基、C₅～C₁₀芳雜環(huán)基，其中所述的取代基包括C₁～C₅烷基、C₁～C₅烷氧基、C₁～C₅烷胺基、硝基，亞甲二氧基和鹵素。

本發(fā)明的優(yōu)選化合物包括，但不限于：

N-(4-2(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基-乙基)苯基)-2-苯基喹唑啉-4-胺(I-1)；

N-(4-2(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基-乙基)苯基)-2-(2-甲氧基苯基)喹唑啉-4-胺(I-2)；

N-(4-2(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基-乙基)苯基)-2-(3-甲氧基苯基)喹唑啉-4-胺(I-3)；

N-(4-2(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基-乙基)苯基)-2-(4-甲氧基苯基)喹唑啉-4-胺(I-4)；

N-(4-2(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基-乙基)苯基)-2-(3，4-二甲氧基苯基)喹唑啉-4-胺(I-5)；

N-(4-2(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基-乙基)苯基)-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)喹唑啉-4-胺(I-6)；

2-(苯并[d][1，3]二茂基-5-基)-N-4(-2(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基-乙基)苯基))喹唑啉-4-胺(I-7)；

N-(4-2(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基-乙基)苯基)-2-(3-甲基苯基)喹唑啉-4-胺(I-8)；

N-(4-2(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基-乙基)苯基)-2-(4-甲基苯基)喹唑啉-4-胺(I-9)；

2-(4-(叔丁基)苯基)-N-(4-(2-(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-乙基)苯基)喹唑啉-4-胺(I-10)；

N-(4-(2-(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-乙基)苯基)-2-(吡啶-4-基)喹唑啉-4-胺(I-11)；

N-(4-(2-(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-乙基)苯基)-2-(吡啶-3-基)喹唑啉-4-胺(I-12)；

N-(4-(2-(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-乙基)苯基)-2-(喹啉-2-基)喹唑啉-4-胺(I-13)；

N-(4-(2-(6，7-二甲氧基-3，4-一二氫異喹啉-2(1H)-基)-乙基)苯基)-2-(3-硝基苯基)喹唑啉-4-胺(I-14)

N-(4-(2-(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-乙基)苯基)-2-(4-硝基苯基)喹唑啉-4-胺(I-15)；

2-(4-氯苯基)-N-(4-(2-(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-乙基)苯基)喹唑啉-4-胺(I-16)；

N-(4-(2-(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-乙基)苯基)-2-(4-氟苯基)喹唑啉-4-胺(I-17)；

7-氯-N-(4-(2-(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-乙基)苯基)-2-苯基喹唑啉-4-胺(I-18)；

N-(4-(2-(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-乙基)苯基)-6，7-二甲氧基-2-苯基喹唑啉-4-胺(I-19)。

部分化合物的結(jié)構(gòu)為：

根據(jù)本發(fā)明，藥學(xué)上可接受的鹽包括與下列酸形成的加成鹽：鹽酸、硫酸、磷酸、氫溴酸、醋酸、三氟乙酸、丙酮酸、檸檬酸、酒石酸、乳酸、馬來酸、苯磺酸、琥珀酸以及與類似的已知可以接受的酸所成的鹽。

本發(fā)明喹唑啉-N-苯乙基四氫異喹啉類化合物的制備方法如下：

以下是本發(fā)明部分化合物的藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)：

1、化合物對(duì)耐阿霉素人白血病細(xì)胞(K562/A02)的逆轉(zhuǎn)作用

維拉帕米(Verapamil，VRP)為陽性對(duì)照。K562/A02耐阿霉素人白血病細(xì)胞株用含10％小牛血清的和加入終濃度為1mg/L阿霉素(ADM)的RPMI 1640培養(yǎng)基在37℃、5％CO₂飽和濕度的條件下培養(yǎng)，并且實(shí)驗(yàn)前耐藥細(xì)胞株在無阿霉素的條件下培養(yǎng)14天。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以1×10⁴個(gè)/ml密度接種于96孔培養(yǎng)板中，在37℃5％CO₂條件下培養(yǎng)24h后，分別加入終濃度為5μmol/L的受試化合物和一系列濃度梯度的阿霉素，繼續(xù)孵育48h后，每孔加入MTT(5mg/ml)，再培養(yǎng)4小時(shí)，離心，洗板機(jī)吸去培養(yǎng)液，每孔加入150μL DMSO溶解，搖床振搖20min，然后在酶標(biāo)儀上以波長(zhǎng)570nm進(jìn)行測(cè)定，分別計(jì)算抑制細(xì)胞生長(zhǎng)達(dá)50％時(shí)的濃度，以IC₅₀值表示，逆轉(zhuǎn)倍數(shù)以IC₅₀(ADM)/IC₅₀(ADM+逆轉(zhuǎn)劑)表示。

本實(shí)驗(yàn)測(cè)定了19個(gè)化合物在1μmol/L濃度下對(duì)耐阿霉素的白血病細(xì)胞抗藥性的逆轉(zhuǎn)活性，如表1所示，試驗(yàn)結(jié)果表明，19個(gè)化合物均具有逆轉(zhuǎn)MDR活性，且部分化合物的逆轉(zhuǎn)活性超過陽性對(duì)照品維拉帕(verapamil)。

表1 化合物(5μM)對(duì)耐阿霉素人白血病細(xì)胞耐藥性的逆轉(zhuǎn)作用

2、化合物的細(xì)胞毒作用

本試驗(yàn)測(cè)試了19個(gè)化合物對(duì)K562/A02和K562細(xì)胞的細(xì)胞毒作用。耐阿霉素的人白血病細(xì)胞株K562/A02用含10％小牛血清的和加入終濃度為1mg/L阿霉素RPMI 1640培養(yǎng)基在37℃、5％CO₂飽和濕度的條件下培養(yǎng)，并且實(shí)驗(yàn)前耐藥細(xì)胞株在無阿霉素的條件下培養(yǎng)14天。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以6×104個(gè)/ml密度接種于96孔培養(yǎng)板中，每孔180μL，在37℃5％CO2條件下培養(yǎng)。過夜后分組，分別為空白對(duì)照組、受試化合物組。受試化合物組中分別加入終濃度為一系列濃度梯度的待測(cè)化合物；陽性對(duì)照組給予阿霉素；空白對(duì)照組給予等體積的0.1％DMSO。給藥體積均為20μL。孵育48小時(shí)，然后每孔加入20μl MTT(5mg/ml)，再培養(yǎng)4小時(shí)，離心，洗板機(jī)吸去培養(yǎng)液，每孔加入150μl DMSO溶解，搖床振搖20min，然后在酶標(biāo)儀上于波長(zhǎng)490nm處讀取光密度(OD)，計(jì)算化合物對(duì)細(xì)胞的抑制率，并以GraphPad Prism 5.0軟件中的量效曲線計(jì)算化合物的IC₅₀值。

試驗(yàn)結(jié)果如表2所示，從測(cè)試結(jié)果可以看出，19個(gè)化合物對(duì)K562均表現(xiàn)出明顯細(xì)胞毒性，IC50在2μM～16μM范圍，除化合物I-4和I-6對(duì)K562/A02細(xì)胞表現(xiàn)出弱的細(xì)胞毒性IC50s＞40μM，其它化合物對(duì)K562/A02細(xì)胞表現(xiàn)出明顯細(xì)胞毒性，IC₅₀在7.9μM～21μM范圍。根據(jù)細(xì)胞毒抑制率計(jì)算結(jié)果，化合物在1.0μM濃度時(shí)對(duì)耐藥細(xì)胞基本無抑制作用，如1.0μM濃度的化合物I-11對(duì)K562/A02細(xì)胞基本無抑制作用。

表2 化合物對(duì)K562及K562/A02細(xì)胞的細(xì)胞毒作用IC₅₀(μM，n＝3，)

3、不同濃度化合物I-11對(duì)K562/A02細(xì)胞耐阿霉素的逆轉(zhuǎn)作用

維拉帕米(Verapamil，VRP)為陽性對(duì)照。K562/A02耐阿霉素人白血病細(xì)胞株用含10％小牛血清的和加入終濃度為1mg/L阿霉素(ADM)的RPMI 1640培養(yǎng)基在37℃、5％CO₂飽和濕度的條件下培養(yǎng)，并且實(shí)驗(yàn)前耐藥細(xì)胞株在無阿霉素的條件下培養(yǎng)14天。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以1×10⁴個(gè)/ml密度接種于96孔培養(yǎng)板中，在37℃、5％CO₂條件下培養(yǎng)24h后，分別加入終濃度為1.0μmol/L，0.5μmol/L，0.25μmol/L，0.10μmol/L，0.050μmol/L，0.025μmol/L的受試化合物I-11和一系列濃度梯度的阿霉素，.繼續(xù)孵育48h后，每孔加入MTT(5mg/ml)，再培養(yǎng)4小時(shí)，離心，洗板機(jī)吸去培養(yǎng)液，每孔加入150μL DMSO溶解，搖床振搖20min，然后在酶標(biāo)儀上以波長(zhǎng)570nm進(jìn)行測(cè)定，分別計(jì)算抑制細(xì)胞生長(zhǎng)達(dá)50％時(shí)的濃度，以IC₅₀值表示，逆轉(zhuǎn)倍數(shù)以IC₅₀(ADM)/IC₅₀(ADM+逆轉(zhuǎn)劑)表示。試驗(yàn)結(jié)果如表3所示，表明化合物I-11在濃度降低到0.31μmol/L時(shí)仍具有較高逆轉(zhuǎn)K562/A02細(xì)胞耐藥性的作用，逆轉(zhuǎn)倍數(shù)高達(dá)8.6，而且化合物I-11對(duì)逆轉(zhuǎn)K562/A02耐阿霉素細(xì)胞的敏感性遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于維拉帕米。

表3 不同濃度化合物I--11對(duì)K562/A02細(xì)胞耐阿霉素逆轉(zhuǎn)作用

以上藥理學(xué)數(shù)據(jù)顯示，本發(fā)明通式(I)化合物與陽性對(duì)照藥維拉帕米相比具有較強(qiáng)的逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥的作用，并且優(yōu)選化合物幾乎無細(xì)胞毒性。

本發(fā)明還包括藥物制劑，該制劑包含作為活性劑的通式(I)化合物或其藥用鹽和藥學(xué)上可接受的載體。藥學(xué)上可接受的載體是指一種或幾種惰性的、非毒性的固體或液體填充物、稀釋劑、助劑等，它們不逆向與活性化合物或病人發(fā)生作用。

本發(fā)明組合物的劑型可以是片劑、膠囊、丸劑、栓劑、軟膠囊、口服液、混懸劑、注射液等藥劑學(xué)上常用的劑型?？诜盟幤泛湍z囊含有傳統(tǒng)的賦形劑如填充物、稀釋劑、潤滑劑、分散劑以及粘合劑?？砂凑毡绢I(lǐng)域內(nèi)熟知的方法進(jìn)行制備。

以上活性劑的劑量將因配方而異。

一般地，已證明有利的量，為達(dá)到所需結(jié)果，每千克體重24小時(shí)給藥的式(I)化合物的總量為約0.01-80mg，優(yōu)選總量約0.1-40mg/kg。如果必要，以幾次單劑量的形式給藥。

然而，如果必要，可偏離上述用量，即這取決于待治療的受試者的類型和體重、個(gè)體對(duì)藥物的行為、疾病的性質(zhì)和嚴(yán)重性、制劑和給藥的類型、以及給藥時(shí)間或間隔。

以下通過實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步描述。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明。需要說明的是，下述實(shí)施例僅用于說明，而并非用于限制本發(fā)明。本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)本發(fā)明的教導(dǎo)所做出的各種變化均應(yīng)在本申請(qǐng)權(quán)利要求所要求的保護(hù)范圍之內(nèi)。

實(shí)施例1

化合物(i)的制備

冰浴下，將新鮮制備的芳香酰氯(20mmol)緩慢加入取代或未取代的鄰氨基苯甲酸(30mmol)的吡啶(15ml)溶液中，冰浴下攪拌30min后，室溫繼續(xù)攪拌12h。將反應(yīng)液倒入水(200ml)中，劇烈攪拌至有大量固體析出，靜置，抽濾，水洗(20ml×5)，干燥，得白色固體產(chǎn)物(i)。

實(shí)施例2

化合物(ii)的制備

將制備得到的化合物(i)，氨水(15ml)和乙醇(20ml)加入耐壓瓶中，密封后，加熱至80℃反應(yīng)12h，冷卻，抽濾，水洗(15ml×3)，干燥，得白色固體產(chǎn)物(ii)。

實(shí)施例3

化合物(iii)的制備

將制備得到的化合物(ii)(1equiv)加入到氯化亞砜(10equiv)中，加入催化量的DMF后，加熱至50℃反應(yīng)6h。減壓蒸除過量的氯化亞砜，得到淡黃色固體殘留物。將殘留物加入到適量的1N氫氧化鈉溶液中，攪拌后加入等體積的二氯甲烷，萃取，有機(jī)層分別以水，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，抽濾，減壓蒸除溶劑后得白色或淡黃色固體產(chǎn)物(iii)。

實(shí)施例4

化合物(iv)的制備

將四氫異喹啉鹽酸鹽(1equiv)，四硝基苯乙基溴(1.1equiv)溶于乙腈中，加入無水碳酸鉀(2.5equiv)，加熱回流反應(yīng)18h。冷卻，過濾，二氯甲烷洗滌濾餅，濾液經(jīng)減壓蒸除溶劑得到黃色固體殘留物，乙醇重結(jié)晶得到黃色針狀結(jié)晶固體(iv)。

實(shí)施例5

化合物(v)的制備

將制備得到的化合物(iv)(1equiv)，溶于乙醇/二氯甲烷(1∶1，)的混合液中，室溫下Pd/C(0.03equiv)催化下氫氣還原反應(yīng)48h。硅藻土作鋪墊層過濾，二氯甲烷洗滌濾餅，濾液經(jīng)減壓蒸除溶劑得到淡黃色固體，二氯甲烷/石油醚重結(jié)晶得到米白色固體(v)。

實(shí)施例6

N-(4-(2-(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-乙基)苯基)-2-苯基喹唑啉-4-胺(I-1)的制備：

將制備所得的化合物(v)(1equiv)與4-氯-2-苯基喹唑啉(1equiv)加入無水乙醇中，室溫?cái)嚢柘录尤氪呋康募淄榛撬?，加熱至回流反?yīng)4h，有淡黃色固體析出，冷卻，抽濾，無水乙醇洗滌，干燥，得淡黃色固體鹽酸鹽。將產(chǎn)物以1N的氫氧化鈉溶液游離，并以二氯甲烷萃取，有機(jī)層分別以水，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，抽濾，減壓蒸除溶劑得黃色或淡黃色固體產(chǎn)物，產(chǎn)率52.5％；¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δppm：9.82(s，1H，NH)，8.57(d，J＝8.4Hz，1H，ArH)，8.46-8.43(m，2H，ArH)，7.91-7.85(m，4H，ArH)，7.51-7.49(m，3H，ArH)，7.37-7.34(m，3H，ArH)，6.66-6.64(2s，2H，ArH)，3.69(s，6H，2×OCH₃)，3.57(s，2H，ArCH₂N)，2.89-2.72(m，8H，4×CH₂)；¹³C NMR(75MHz，DMSO-d6)δppm：157.82，150.4，138.3，137.1，135.8，133.11，130.21，128.62，128.35，128.06，127.84，126.65，125.9，125.8，122.9，122.07，113.97，111.73，109.9，59.54，55.42，55.09，50.55，32.47，28.31；ESI-MS m/z：517.2([M+H]⁺)。

實(shí)施例7

N-(4-(2-(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-乙基)苯基)-2-(2-甲氧基苯基)喹唑啉-4-胺(I-2)的制備：

參照實(shí)施例6中I-1的制備方法，制得化合物I-2，得淡黃色固體，產(chǎn)率43.7％；¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δppm：9.73(s，1H，NH)，8.57(d，J＝8.1Hz，1H，ArH)，7.94-7.79(m，4H，ArH)，7.64-7.59(m，2H，ArH)，7.42(dd，J＝7.5，1.7Hz，1H，ArH)，7.24(d，J＝8.4Hz，2H，AH)，7.14(d，J＝8.4Hz，1H，ArH)，7.03(dd，J＝7.5，7.5Hz，1H，ArH)，6.65，6.63(2s，2H，ArH)，3.80(s，3H，OCH3)，3.73(s，6H，2×OCH₃)，3.53(s，2H，ArCH₂N)，2.80-2.49(m，8H，4×CH₂)；¹³C NMR(75MHz，DMSO-d₆)δppm：157.06，146.83，137.3，135.3，，132.8，130.8，130.1，128.4，127.9，126.6，125.8，122.7，121.6，119.9，113.4，111.9，111.7，109.9，59.59，55.49，55.42，55.03，50.55，32.43，28.27；ESI-MS m/z：547.2([M+H]⁺)。

實(shí)施例8

N-(4-(2-(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-乙基)苯基)-2-(3-甲氧基苯基)喹唑啉-4-胺(I-3)的制備：

參照實(shí)施例6中I-1的制備方法，制得化合物I-3，淡黃色固體，產(chǎn)率60.6％；¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δppm：9.83(s，1H，NH)，8.56(d，J＝7.8Hz，1H，ArH)，8..05-8.01(m，2H，ArH)，7.89-7.84(m，4H；ArH)，7.62-7.59(m，1H，ArH)，7.42-7.31(m，3H，ArH)，7.06-7.04(m，1H，ArH)，6.65，6.63(2s，2H，ArH)，3.82(s，3H，OCH₃)，3.68(s，6H，2×OCH₃)，3.55(s，2H，ArCH₂N)，2.85-2.49(m，8H，4×CH₂)；¹³C NMR(75MHz，DMSO-d₆)δppm：159.3，158.7，157.7，150.4，147.1，146.8，139.8，137.1，135.8，133.0，129.3，128.5，128.0，126.6，125.9，125.8，122.9，122.2，120.2，116.2，114.0，112.6，111.7，110.0，59.5，55.4，55.0，54.9，50.5，32.4，28.2；ESI-MS m/z：547.2([M+H]+)。

實(shí)施例9

N-(4-(2-(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-乙基)苯基)-2-(4-甲氧基苯基)喹唑啉-4-胺(I-4)的制備：

參照實(shí)施例6中I-1的制備方法，制得化合物I-4，淡黃色固體，產(chǎn)率63.2％；¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δppm：9.77(s，1H，NH)，8.54(d，J＝8.4Hz，1H，ArH)，8.41(d，J＝8.7Hz，2H，ArH)，7.89(d，J＝8.7Hz，2H，ArH)，7.82(d，J＝3.8Hz，2H，ArH)，7.57-7.52(m，1H，ArH)，7.32(d，J＝8.4Hz，2H，ArH)，7.04(d，J＝8.9Hz，2H，ArH)，6.63，6.61(2s，2H，ArH)，3.82(s，3H，OCH3)，3.68(s，6H，2×OCH₃)，3.53(s，2H，ArCH₂N)，2.85-2.49(m，8H，4×CH2)；¹³C NMR(75MHz，DMSO-d₆)δppm：161.10，158.89，157.67，150.54，147.10，146.86，137.20，129.49，128.57，127.85，126.65，125.91，125.30，122.92，121.99，113.68，111.73，109.96，59.52，55.44，55.40，55.19，55.08，50.51，32.48，28.30；ESI-MS m/z：547.2([M+H]⁺)。

實(shí)施例10

N-(4-(2-(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-乙基)苯基)-2-(3，4-二甲氧基苯基)喹唑啉-4-胺(I-5)的制備：

參照實(shí)施例6中I-1的制備方法，制得化合物I-5，淡黃色固體，產(chǎn)率56.2％；¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δppm：9.79(s，1H，NH)，8.54(d，J＝8.4Hz，1H，ArH)，8.06-8.03(m，2H，ArH)，7.79(d，J＝8.4Hz，2H，ArH)，7.82(d，J＝3.9Hz，2H，ArH)，7.57-7.53(m，1H，ArH)，7.34(d，J＝8.4Hz，2H，ArH)，7.07(d，J＝8.7Hz，2H，ArH)，6.66，6.64(2s，2H，ArH)，4.04，4.01(2s，6H，2×OCH₃)，3.85-3.83(2s，6H，2×OCH₃)，3.56(s，2H，ArCH₂N)，2.85-2.49(m，8H，4×CH₂)；¹³C NMR(75MHz，DMSO-d₆)δppm：158.76，157.58，150.74，148.35，147.11，146.87，137.17，135.79，132.98，130.93，128.46，127.86，126.63，125.90，125.31，122.93，122.26，120.92，113.70，111.75，110.97，109.96，59.63，55.50，55.42，55.11，50.55，32.46，28.28；ESI-MS m/z：577.3([M+H]⁺)。

實(shí)施例11

N-(4-(2-(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-乙基)苯基)-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)喹唑啉-4-胺(I-6)的制備：

參照實(shí)施例6中I-1的制備方法，制得化合物I-6，淡黃色固體，產(chǎn)率48.4％；¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm：9.86(s，1H，NH)，8.54(d，J＝8.4Hz，1H，ArH)，7.89-7.81(，6H，ArH)，7.61-7.56(m，1H，ArH)，7.33(d，J＝8.7Hz，2H，ArH)，6.66，6.64(2s，2H，ArH)，3.87(s，6H，2×OCH₃)，3.73，3.70(2s，9H，3×OCH₃)，3.55(s，2H，ArCH₂N)，2.87-2.68(m，8H，4×CH₂)；¹³C NMR(75MHz，DMSO-d6)δppm：158.37，157.59，152.67，147.11，146.86，139.42，137.06，135.98，133.61，128.38，127.99，126.62，125.89，125.63，122.94，122.52，113.78，111.75，109.97，104.97，60.04，59.68，55.57，55.44，55.08，50.55，32.46，28.27；ESI-MS m/z：608.4([M+H]⁺)。

實(shí)施例12

2-(苯并[d][1，3]二茂基-5-基)-N-(4-(2-(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-乙基)苯基)喹唑啉-4-胺(I-7)的制備：

參照實(shí)施例6中I-1的制備方法，制得化合物I-7，淡黃色固體，產(chǎn)率57.1％；¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm：9.86(s，1H，NH)，8.57(d，J＝8.2Hz，1H，ArH)，8.04(dd，J＝8.2，1.6Hz，1H，ArH)，7.89-7.86(m，3H，ArH)，7.81-7.93(m，2H，ArH)，7.59-7.53(m，1H，ArH)，7.35(d，J＝8.4Hz，1H，ArH)，7.03(d，J＝8.2，1.6Hz，1H，ArH)，6.71，6.68(2s，2H，ArH)，6.11(s，2H，OCH₂)，3.82(s，2H，ArCH₂N)，3.71，3.70(2s，6H，2×OCH₃)，2.95-2.83(m，8H，4×CH₂)；¹³C NMR(75MHz，DMSO-d6.)δppm：158.48，157.67，150.41，149.15，147.48，147.08，137.36，134.74，133.08，132.69，128.93，128.60，127.87，125.50，125.16，123.02，122.56，122，20，113.79，111.65，109.85，108.08，107.60，101.39，58.46，56.39，55.48，55.43，54.06，50.08，31.49，27.19；ESI-MS m/z：561.2([M+H]⁺)。

實(shí)施例13

N-(4-(2-(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-乙基)苯基)-2-(3-甲基苯基)喹唑啉-4-胺(I-8)的制備：

參照實(shí)施例6中I-1的制備方法，制得化合物I-8，淡黃色固體，產(chǎn)率53.8％；¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δppm：9.95(s，1H，NH)，8.66(d，J＝8.4Hz，1H，ArH)，8.30-8.23(m，2H，ArH)，8.01(d，J＝8.4Hz，2H，ArH)，7.86(d，J＝3.6Hz，2H，ArH)，7.62-7.57(m，1H，ArH)，7.42-7.37(m，3H，ArH)，7.31(d，J＝8.4Hz，1H，ArH)，6.78，6.75(2s，2H，ArH)，4.16(s，2H，ArCH₂N)，3.73，3.72(2s，6H，2×OCH₃)，3.12-2.97(m，8H，4×CH₂)，2.42(s，3H，CH₃)；¹³C NMR(75MHz，DMSO-d₆)δppm：159.06，157.77，150.45，148.01，147.45，138.32，137.91，137.33，133.08，130.84，128.59，128.49，128.26，127.99，125.75，125.11，124.04，123.19，122.21，114.01，111.59，109.75，56.91，55.54，55.49，52.32，49.30，29.96，25.58，21.21；ESI-MS m/z：531.6([M+H]⁺)。

實(shí)施例14

N-(4-(2-(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-乙基)苯基)-2-(4-甲基苯基)喹唑啉-4-胺(I-9)的制備：

參照實(shí)施例6中I-1的制備方法，制得化合物I-9，淡黃色固體，產(chǎn)率61.1％；¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δppm：9.80(s，1H，NH)，8.57(d，J＝8.1Hz，1H，ArH)，8.35(d，J＝8.1Hz，2H，ArH)，7.90(d，J＝8.3Hz，2H，ArH)，7.84(d，J＝3.4Hz，2H，ArH)，7.60-7.54(m，1H，ArH)，7.34-7.29(m，4H，ArH)，6.64，6.62(2s，2H，ArH)，3.78，3.75(2s，6H，2×OCH₃)，3.54(s，2H，ArCH₂N)，2.84-2.70(m，8H，4×CH₂)，1.91(s，3H，CH₃)；¹³C NMR(75MHz，DMSO-d₆)δppm：159.11，157.75，150.48，147.12，146.88，139.84，137.19，135.69，132.98，128.94，128.57，127.97，127.88，126.67，125.93，125.54，122.95，122.00，113.93，111.76，109.98，59.48，55.42，55.09，50.49，32.48，28.30，20.95；ESI-MS m/z：532.2([M+H]+)。

實(shí)施例15

2-(4-(叔丁基)苯基)-N-(4-(2-(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-乙基)苯基)喹唑啉-4-胺(I-10)的制備：

參照實(shí)施例6中I-1的制備方法，制得化合物I-10，淡黃色固體，產(chǎn)率47.1％；¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δppm：9.79(s，1H，NH)，8.57(d，J＝8.4Hz，1H，ArH)，8.37(d，J＝8.4Hz，2H，ArH)，7.91(d，J＝8.4Hz，2H，ArH)，7.84(d，J＝3.9Hz，2H，ArH)，7.58-7.51(m，3H，ArH)，7.35(d，J＝8.4Hz，2H，ArH)，6.66，6.64(2s，2H，ArH)，3.69(s，6H，2×OCH₃)，3.57(s，2H，ArCH₂N)，2.87-2.49(m，8H，4×CH2)，1.33(s，9H，3×CH₃)；¹³C NMR(75MHz，DMSO-d₆)δppm：159.11，157.73，152.88，150.51，147.13，146.89，137.23，135.73，135.63，132.97，128.57，128.01，127.74，126.65，125.91，125.57，125.11，122.94，121.95，113.94，111.76，109.99，59.53，55.42，55.08，50.54，34.47，32.50，30.99，28.30；ESI-MS m/z：573.3([M+H]⁺)。

實(shí)施例16

N-(4-(2-(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-乙基)苯基)-2-(吡啶-4-基)喹唑啉-4-胺(I-11)的制備：

參照實(shí)施例6中I-1的制備方法，制得化合物I-11，淡黃色固體，產(chǎn)率61.1％；¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δppm 9.94(s，1H，NH)，8.74(d，J＝5.5Hz，2H，ArH)，8.64(d，J＝8.0Hz，2H，ArH)，7.91(d，J＝8.4Hz，2H，ArH)，8.26(d，J＝5.5Hz，2H，ArH)，7.91-7.85(m，1H，ArH)，7.36(d，J＝8.3Hz，2H，ArH)，6.66，6.64(2s，2H，ArH)，3.70，3.69(2s，6H，2×OCH₃)，3.58(s，2H，ArCH₂N)，2.90-2.49(m，8H，4×CH2)；¹³C NMR(75MHz，DMSO-d₆)δppm：158.07，157.25，150.15，150.08，147.11，146.87，145.54，136.82，136.10，133.34，128.65，128.28，126.66，125.91，123.07，122.28，121.72，114.41，111.77，109.98，59.47，55.46，55.43，55.09，50.51，32.49，28.30；ESI-MS m/z：518.3([M+H]⁺)。

實(shí)施例17

N-(4-(2-(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-乙基)苯基)-2-(吡啶-4-基)喹唑啉-4-胺(I-12)的制備：

參照實(shí)施例6中I-1的制備方法，制得化合物I-12，淡黃色固體，產(chǎn)率44.8％；¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δppm：9.92(s，1H，NH)，9.54(s，1H，ArH)，8.68(d，J＝5.5Hz，2H，ArH)，8.58(d，J＝8.2Hz，1H，ArH)，7.88-7.84(m，4H，ArH)，7.65-7.61(m，1H，ArH)，7.55-7.50(m，1H，ArH)，7.35(d，J＝8.2Hz，2H，ArH)，6.65，6.63(2s，2H，ArH)，3.69(s，6H，2×OCH₃)，3.55(s，2H，ArCH₂N)，2.88-2.50(m，8H，ArH)；¹³C NMR(75MHz，DMSO-d₆)δppm：157.89，157.44，150.76，150.53，150.16，149.17，136.90，135.98，135.01，133.65，133.21，130.35，129.79，128.94，128.58，128.03，126.51，7，126.15，123.48，123.07，122.43，122.31，114.13，111.73，109.95，59.41，56.65，56.06，55.44，50.02，50.45，38.43，28.21；ESI-MS m/z：518.2([M+H]⁺)。

實(shí)施例18

N-(4-(2-(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-乙基)苯基)-2-(喹啉-2-基)喹唑啉-4-胺(I-13)的制備：

參照實(shí)施例6中I-1的制備方法，制得化合物I-13，淡黃色固體，產(chǎn)率43.7％；¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δppm 9.94(s，1H，NH)，8.67(d，J＝8.4Hz，1H，ArH)，8.57(d，J＝8.4Hz，1H，ArH)，8.50(d，J＝8.4Hz，1H，ArH)，8.22-8.16(m，3H，ArH)，8.07-7.82(m，5H，ArH)，7.72-7.65(m，2H，ArH)，7.37(d，J＝8.4Hz，2H，ArH)，6.67，6.66(2s，2H，ArH)，3.69-3.65(m，8H，2×OCH₃，ArCH₂N)，2.89-2.77(m，8H，4×CH₂)；¹³C NMR(75MHz，DMSO-d6)δppm：158.38，158.14，154.84，149.17，148.29，147.65，147.35，138.11，136.81；133.60，132.33，130.01，129.67，128.73，128.08，127.89，127.61，127.48，126.89，123.52，123.38，122.34，120.72，120.03，114.27，111.52，109.66，55.95，55.57，55.52，51.26，48.85，29.05，24.53；ESI-MS m/z：568.3([M+H]⁺)。

實(shí)施例19

N-(4-(2-(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-乙基)苯基)-2-(3-硝基苯基)喹唑啉-4-胺(I-14)的制備：

參照實(shí)施例6中I-1的制備方法，制得化合物I-14，淡黃色固體，產(chǎn)率59.5％；¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δppm：10.01(s，1H，NH)，9.16(d，J＝1.4Hz，1H，ArH)，8.76(dd，J＝7.8，1.02Hz，1H，ArH)，8.61(d，J＝8.1Hz，1H，ArH)，8.31-8.27(m，1H，ArH)，7.91-7.83(m，4H，ArH)，7.75(t，J＝8.0Hz，1H，ArH)，7.65-7.60(m，1H，ArH)，7.36(d，J＝8.4Hz，1H，ArH)，6.70，6.68(2s，2H，ArH)，3.82(s，2H，ArCH₂N)，3.70(s，6H，2×OCH₃)，2.96-2.83(m，8H，4×CH₂)；¹³C NMR(75MHz，DMSO-d6)δppm：157.94，156.80，150.09，148.01，147.45，147.09，139.96，137.10，135.05，133.62，133.28，129.92，128.55，128.11，126.36，125.14，124.53，123.13，122.45，122.24，114.18，111.67，109.86，58.50，55.44，54.04，50.06，31.54，27.24；ESI-MS m/z：562.1([M+H]⁺)。

實(shí)施例20

N-(4-(2-(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-乙基)苯基)-2-(4-硝基苯基)喹唑啉-4-胺(I-15)的制備：

參照實(shí)施例6中I-1的制備方法，制得化合物I-15，淡黃色固體，產(chǎn)率55.4％；¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δppm：9.95(s，1H，NH)，8.65-8.59(m，3H，ArH)，8.33(d，J＝7.8Hz，1H，ArH)，7.92-7.85 90(m，4H，ArH)，7.70-7.64(m，1H，ArH)，7.37(d，J＝8.4Hz，2H，ArH)，6.66，6.64(2s，2H，ArH)，3.69(s，6H，2×OCH₃)，3.58(s，2H，ArCH₂N)，2.88-2.73(m，8H，4×CH₂)；¹³C NMR(75MHz，DMSO-d₆)δppm：157.91，157.10，150.09，148.32，147.12，146.88，144.32，136.82，136.02，133.30，128.78，128.63，128.25，126.62，125.90，123.48，123.02，122.23，114.11，111.74，109.97，59.48，55.45，55.40，55.08，50.52，32.53，28.30；ESI-MS m/z：562.1([M+H]⁺)。

實(shí)施例21

N-(4-(2-(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-乙基)苯基)-2-(4-硝基苯基)喹唑啉-4-胺(I-16)的制備：

參照實(shí)施例6中I-1的制備方法，制得化合物I-16，淡黃色固體，產(chǎn)率41.2％；¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δppm：9.86(s，1H，NH)，8.57(d，J＝8.4Hz，1H，ArH)，8.44-8.40(m，2H，ArH)，7.86-7.83(m，4H，ArH)，7.64-7.54(m，3H，ArH)，7.34(d，J＝8.4Hz，2H，ArH)，6.65，6.63(2s，2H，ArH)，3.69(s，6H，2×OCH₃)，3.56(s，2H，ArCH₂N)，2.88-2.71(m，8H，4×CH2)；¹³C NMR(75MHz，DMSO-d₆)δppm：158.02，157.84，150.27，147.11，146.86，137.88，137.23，137.02，135.80，135.01，133.08，130.38，129.81，129.52，128.95，128.57，128.34，128.01，126.58，125.88，123.03，122.14，121.10，113.99，111.69，59.43，56.04，55.43，55.38，55.05，50.44，32.45，28.26；ESI-MS m/z：551.2([M+H]⁺)。

實(shí)施例22

N-(4-(2-(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-乙基)苯基)-2-(4-氟苯基)喹唑啉-4-胺(I-17)的制備：

參照實(shí)施例6中I-1的制備方法，制得化合物I-17，淡黃色固體，產(chǎn)率61.1％；¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δppm：9.91(s，1H，NH)，8.57(d，J＝8.3Hz，1H，ArH)，8.49-8.44(m，2H，ArH)，7.87-7.82(m，4H，ArH)，7.62-7.57(m，1H，ArH)，7.44-7.28(m，4H，ArH)，6.66，6.64(2s，2H，ArH)，3.69(s，6H，2×OCH₃)，3.59(s，2H，ArCH₂N)，2.89-2.50(m，8H，4×CH₂)；¹³C NMR(75MHz，DMSO-d₆)δppm：165.23，161.95，158.09，157.81，150.34，147.13，146.86，138.22，137.10，135.68，134.84，133.39，132.97，130.03，128.92，128.53，127.93，126.48，125.67，123.05，122.14，121.07，115.23，114.94，113.90，111.66，109.89，105.40，59.69，59.36，56.50，55.95，55.40，55.34，54.98，50.35，32.39，28.20；ESI-MS m/z：536.3([M+H]⁺)。

實(shí)施例23

7-氯-N-(4-(2-(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-乙基)苯基)-2-苯基喹唑啉-4-胺(I-18)的制備：

參照實(shí)施例6中I-1的制備方法，制得化合物I-18，淡黃色固體，產(chǎn)率61.1％；1H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δppm：9.93(s，1H，NH)，8.60(d，J＝8.9Hz，1H，ArH)，8.46-8.42(m，2H，ArH)，7.89-7.86(m，3H，ArH)，7.62(dd，J＝8.8，1.9Hz，1H，ArH)，7.51-7.49(m，4H，ArH)，7.34(d，J＝8.3Hz，2H，ArH)，6.64，6.61(2s，2H，ArH)，3.70(s，6H，2×OCH₃)，3.54(s，2H，ArCH₂N)，2.87-2.70(m，8H，4×CH₂)；¹³C NMR(75MHz，DMSO-d₆)δppm：160.22，157.67，151.48，147.10，146.86，137.97，137.67，136.83，136.00，130.47，128.59，128.33，128.01，126.69，126.62，125.97，125.89，125.22，122.14，112.66，111.72，109.94，59.44，55.43，55.40，55.07，50.46，32.46，28.29；ESI-MS m/z：551.2([M+H]⁺)。

實(shí)施例24N-(4-(2-(6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-乙基)苯基)-6，7-二甲氧基-2-苯基喹唑啉-4-胺(I-19)的制備：

參照實(shí)施例6中I-1的制備方法，制得化合物I-19，淡黃色固體，產(chǎn)率52.3％；¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δppm：9.50(s，1H，NH)，8.46-8.42(m，2H，ArH)，7.88-7.83(m，3H，ArH)，7.51-7.44(m，3H，ArH)，7.34-7.27(m，3H，ArH)，6.63，6.63(2s，2H，ArH)，3.97，3.95(2s，6H，2×OCH₃)，3.70，3.69(2s，6H，2×OCH₃)，3.54(s，2H，ArCH₂N)，2.87-2.69(m，8H，4×CH₂)；¹³C NMR(75MHz，DMSO-d₆)δppm 157.50，156.47，154.29，148.73，147.56，147.10，146.86，138.73，137.47，135.30，129.66，128.53，128.23，127.50，126.66，125.92，121.95，111.71，109.94，107.64，107.50，102.09，59.51，56.18，55.70，55.43，55.39，55.08，54.84，50.47，32.48，28.30；ESI-MS m/z：577.3([M+H]⁺)。

實(shí)施例25

含活性劑I-11的片劑：

按常規(guī)方法將原輔料混合，制粒，干燥，壓片。