本發(fā)明屬于生物工程技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種地衣芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基。
背景技術(shù):
近年來隨著人們生活水平的提高和環(huán)保意識的增強,對水產(chǎn)品的安全和品質(zhì)提出了新的更高要求。但是由于水產(chǎn)養(yǎng)殖集約化、高密度飼養(yǎng)模式的大規(guī)模應(yīng)用,使得養(yǎng)殖水體中有機物、氨氮和亞硝酸氮等污染物的濃度增加,不但導(dǎo)致水質(zhì)惡化,而且直接毒害養(yǎng)殖動物,引起病害的頻繁發(fā)生,水產(chǎn)品品質(zhì)也在不斷下降,造成養(yǎng)殖水體生態(tài)遭到嚴重破壞。針對水產(chǎn)養(yǎng)殖中出現(xiàn)的這些問題,微生態(tài)制劑的調(diào)控技術(shù)已經(jīng)成為解決養(yǎng)殖水域污染病害問題的有效手段之一。相對于傳統(tǒng)的物理和化學(xué)方法而言,微生態(tài)技術(shù)具有成本低、收效大、無二次污染等優(yōu)點,是當前環(huán)境治理尤其是水環(huán)境污染治理的研究熱點。
具有高效除氮能力的細菌既有自養(yǎng)型細菌(硝化細菌、光合細菌等), 也有惡臭假單胞菌、芽孢桿菌等異養(yǎng)型細菌。一方面由于地衣芽孢桿菌在分離和培養(yǎng)方面對營養(yǎng)和環(huán)境條件均有較低要求,具有生長速率快、溶解氧要求濃度低、能忍受酸性的環(huán)境等優(yōu)點;另一方面地衣芽孢桿菌具有較強的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶的活性,能促進飼料中營養(yǎng)素降解,刺激動物免疫器官的發(fā)育,增強機體免疫力能產(chǎn)生抗活性物質(zhì)酶;并具有獨特的生物奪氧作用機制,能抑制致病菌的生長繁殖,是一種綠色飼料添加劑。
現(xiàn)有的一般生產(chǎn)工藝過程是將菌種在一定條件下進行發(fā)酵,然后將菌體從發(fā)酵液中分離,最后把菌體加載到載體上進行干燥后得到產(chǎn)品。此類工藝過程的缺點是:發(fā)酵原料使用豆粕,玉米粉等原料,原料成本高。
技術(shù)實現(xiàn)要素:
本發(fā)明的目的在于提供一種地衣芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基用生物氮源替代氮源,適合芽孢桿菌、多粘類芽孢桿菌等細菌快速生長,提高芽孢形成的數(shù)量,縮短發(fā)酵時間。
為實現(xiàn)上述目的,本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下:
本發(fā)明提供了一種地衣芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基,它是由如下質(zhì)量百分比的組分組成:玉米淀粉1%-3%、玉米漿干粉0.5%-2%、生物氮源0.5%-2%、蛋白胨0.1%-1%、硫酸鎂0.01%-0.1%、硫酸錳0.1%-0.5%、磷酸二氫鉀0.05%-0.5%、碳酸鈣0.01%-0.1%,余量為水。
根據(jù)上述的地衣芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基,它是由如下質(zhì)量百分比的組分組成:玉米淀粉1%-1.5%、玉米漿干粉1.2%-2%、生物氮源0.5%-1.0%、蛋白胨0.1%-0.6%、硫酸鎂0.06%-0.1%、硫酸錳0.1%-0.3%、磷酸二氫鉀0.25%-0.5%、碳酸鈣0.06%-0.1%,余量為水。
根據(jù)上述的地衣芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基,它是由如下質(zhì)量百分比的組分組成:玉米淀粉1.6%-3%、玉米漿干粉0.5%-1.1%、生物氮源1.1%-2%、蛋白胨0.7%-1%、硫酸鎂0.01%-0.05%、硫酸錳0.4%-0.5%、磷酸二氫鉀0.05%-0.2%、碳酸鈣0.01%-0.05%,余量為水。
根據(jù)上述的地衣芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基,它是由如下質(zhì)量百分比的組分組成:玉米淀粉2%、玉米漿干粉1%、生物氮源1%、蛋白胨0.5%、硫酸鎂0.06%、硫酸錳0.2%、磷酸二氫鉀0.1%、碳酸鈣0.05%,余量為水。
所述生物氮源主要由氨基酸、維生素和礦物質(zhì)組成。
所述生物氮源的成分中干物質(zhì)大于70%,總氮大于8%,氨基酸態(tài)氮大于2%,灰分小于15%,pH值 5.0-6.5。
與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明的有益效果:
本發(fā)明培養(yǎng)基能夠促使地衣芽孢桿菌快速進入對數(shù)生長期,發(fā)酵液活菌數(shù)平均可提高 20% 以上,芽孢比例大于 90%??墒拱l(fā)酵周期縮短 4-6小時,從而大大提高了產(chǎn)品質(zhì)量,降低了生產(chǎn)成本。
具體實施方式
以下實施例旨在進一步說明本發(fā)明的內(nèi)容,但不限制本發(fā)明的保護范圍。
以下原料玉米淀粉、玉米漿干粉、生物氮源、蛋白胨、硫酸鎂、硫酸錳0.2%、磷酸二氫鉀和碳酸鈣均為市售;生物氮源的廠家為徐州市為天科技有限公司。
實施例1
一種地衣芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基,它是由如下質(zhì)量百分比的組分組成:玉米淀粉1%-3%、玉米漿干粉0.5%-2%、生物氮源0.5%-2%、蛋白胨0.1%-1%、硫酸鎂0.01%-0.1%、硫酸錳0.1%-0.5%、磷酸二氫鉀0.05%-0.5%、碳酸鈣0.01%-0.1%,余量為水。
地衣芽孢桿菌接種到本發(fā)明配方的培養(yǎng)基上進行發(fā)酵的工藝條件為:發(fā)酵溫度34-35℃,通氣比1:1、罐壓0.01-0.03MPa、攪拌轉(zhuǎn)速150轉(zhuǎn)/分、PH6-8.5、發(fā)酵周期20小時.
采用常規(guī)的發(fā)酵工藝在 500L 的發(fā)酵罐中發(fā)酵,用平板稀釋法測定活菌數(shù)高達40億cfu/ml,發(fā)酵23-24小時,通過鏡檢芽孢比例大于 90%。
實施例2
一種地衣芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基,它是由如下質(zhì)量百分比的組分組成:玉米淀粉2%、玉米漿干粉1%、生物氮源1%、蛋白胨0.5%、硫酸鎂0.06%、硫酸錳0.2%、磷酸二氫鉀0.1%、碳酸鈣0.05%,余量為水。
本實施例的發(fā)酵工藝條件與實施例1相同。
實施例3
一種地衣芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基,它是由如下質(zhì)量百分比的組分組成:玉米淀粉1%、玉米漿干粉2%、生物氮源0.5%、蛋白胨1%、硫酸鎂0.01%、硫酸錳0.5%、磷酸二氫鉀0.05%、碳酸鈣0.1%,余量為水。
本實施例的發(fā)酵工藝條件與實施例1相同。
實施例4
一種地衣芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基,它是由如下質(zhì)量百分比的組分組成:玉米淀粉1.2%、玉米漿干粉1.8%、生物氮源0.7%、蛋白胨0.9%、硫酸鎂0.02%、硫酸錳0.4%、磷酸二氫鉀0.1%、碳酸鈣0.02%,余量為水。
本實施例的發(fā)酵工藝條件與實施例1相同。
實施例5
一種地衣芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基,它是由如下質(zhì)量百分比的組分組成:玉米淀粉1.5%、玉米漿干粉1.6%、生物氮源0.8%、蛋白胨0.8%、硫酸鎂0.03%、硫酸錳0.3%、磷酸二氫鉀0.2%、碳酸鈣0.06%,余量為水。
本實施例的發(fā)酵工藝條件與實施例1相同。
實施例6
一種地衣芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基,它是由如下質(zhì)量百分比的組分組成:玉米淀粉1.8%、玉米漿干粉1.5%、生物氮源1%、蛋白胨0.7%、硫酸鎂0.04%、硫酸錳0.2%、磷酸二氫鉀0.3%、碳酸鈣0.04%,余量為水。
本實施例的發(fā)酵工藝條件與實施例1相同。
實施例7
一種地衣芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基,它是由如下質(zhì)量百分比的組分組成:玉米淀粉2.2%、玉米漿干粉1.2%、生物氮源1.2%、蛋白胨0.6%、硫酸鎂0.05%、硫酸錳0.1%、磷酸二氫鉀0.1%、碳酸鈣0.05%,余量為水。
本實施例的發(fā)酵工藝條件與實施例1相同。
實施例8
一種地衣芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基,它是由如下質(zhì)量百分比的組分組成:玉米淀粉2.4%、玉米漿干粉1%、生物氮源1.4%、蛋白胨0.5%、硫酸鎂0.06%、硫酸錳0.3%、磷酸二氫鉀0.08%、碳酸鈣0.09%,余量為水。
本實施例的發(fā)酵工藝條件與實施例1相同。
實施例9
一種地衣芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基,它是由如下質(zhì)量百分比的組分組成:玉米淀粉2.5%、玉米漿干粉0.9%、生物氮源1.5%、蛋白胨0.4%、硫酸鎂0.07%、硫酸錳0.2%、磷酸二氫鉀0.05%、碳酸鈣0.06%,余量為水。
本實施例的發(fā)酵工藝條件與實施例1相同。
實施例10
一種地衣芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基,它是由如下質(zhì)量百分比的組分組成:玉米淀粉2.8%、玉米漿干粉0.8%、生物氮源1.8%、蛋白胨0.8%、硫酸鎂0.06%、硫酸錳0.3%、磷酸二氫鉀0.3%、碳酸鈣0.06%,余量為水。
本實施例的發(fā)酵工藝條件與實施例1相同。
實施例11
一種地衣芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基,它是由如下質(zhì)量百分比的組分組成:玉米淀粉2%、玉米漿干粉0.7%、生物氮源1.4%、蛋白胨0.6%、硫酸鎂0.06%、硫酸錳0.3%、磷酸二氫鉀0.4%、碳酸鈣0.08%,余量為水。
本實施例的發(fā)酵工藝條件與實施例1相同。
實施例12
一種地衣芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基,它是由如下質(zhì)量百分比的組分組成:玉米淀粉3%、玉米漿干粉0.5%、生物氮源2%、蛋白胨0.1%、硫酸鎂0.1%、硫酸錳0.1%、磷酸二氫鉀0.5%、碳酸鈣0.01%,余量為水。
本實施例的發(fā)酵工藝條件與實施例1相同。
實施例13
一種地衣芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基,它是由如下質(zhì)量百分比的組分組成:玉米淀粉2.6%、玉米漿干粉1.2%、生物氮源1.5%、蛋白胨0.6%、硫酸鎂0.09%、硫酸錳0.2%、磷酸二氫鉀0.35%、碳酸鈣0.08%,余量為水。
本實施例的發(fā)酵工藝條件與實施例1相同。
實施例14
一種地衣芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基,它是由如下質(zhì)量百分比的組分組成:玉米淀粉2%、玉米漿干粉1.5%、生物氮源1%、蛋白胨0.4%、硫酸鎂0.04%、硫酸錳0.5%、磷酸二氫鉀0.25%、碳酸鈣0.07%,余量為水。
本實施例的發(fā)酵工藝條件與實施例1相同。
實施例15
一種地衣芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基,它是由如下質(zhì)量百分比的組分組成:玉米淀粉2%、玉米漿干粉1%、生物氮源1.5%、蛋白胨0.6%、硫酸鎂0.03%、硫酸錳0.4%、磷酸二氫鉀0.2%、碳酸鈣0.05%,余量為水。
本實施例的發(fā)酵工藝條件與實施例1相同。
實施例16
一種地衣芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基,它是由如下質(zhì)量百分比的組分組成:玉米淀粉1.5%、玉米漿干粉0.5%、生物氮源2%、蛋白胨1%、硫酸鎂0.1%、硫酸錳0.1%、磷酸二氫鉀0.05%、碳酸鈣0.01%,余量為水。
本實施例的發(fā)酵工藝條件與實施例1相同。
實施例17
一種地衣芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基,它是由如下質(zhì)量百分比的組分組成:玉米淀粉2.5%、玉米漿干粉0.5%、生物氮源1.5%、蛋白胨0.4%、硫酸鎂0.05%、硫酸錳0.2%、磷酸二氫鉀0.2%、碳酸鈣0.1%,余量為水。
本實施例的發(fā)酵工藝條件與實施例1相同。
實施例18
一種地衣芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基,它是由如下質(zhì)量百分比的組分組成:玉米淀粉1.5%、玉米漿干粉2%、生物氮源1%、蛋白胨0.8%、硫酸鎂0.05%、硫酸錳0.5%、磷酸二氫鉀0.2%、碳酸鈣0.03%,余量為水。
本實施例的發(fā)酵工藝條件與實施例1相同。
實施例2~18培養(yǎng)得到的產(chǎn)品用于檢測,檢測結(jié)果見表1: