本發(fā)明屬于生物學技術領域，具體涉及一種能夠減少人為主觀隨意性、增加生產(chǎn)工序連續(xù)性的懸浮細胞病變終點自動識別與控制系統(tǒng)及方法。

背景技術：

細胞培養(yǎng)為病毒疫苗的生產(chǎn)提供培養(yǎng)基質(zhì)，也是多種生物制品生產(chǎn)不可缺少的工具。細胞懸浮培養(yǎng)是利用生物反應器大規(guī)模培養(yǎng)細胞、生產(chǎn)生物制品的核心技術，是當前國際上生物制品生產(chǎn)的主流模式。細胞懸浮培養(yǎng)技術可以進行大規(guī)模細胞培養(yǎng)，能夠獲得大量的病毒產(chǎn)物和高質(zhì)量的疫苗產(chǎn)品。病毒有高度的寄生性，完全依賴宿主細胞的能量和代謝系統(tǒng)，獲取生命活動所需的物質(zhì)和能量，當遇到宿主細胞它會通過吸附、進入、復制、裝配、釋放子代病毒而顯示典型的生命體特征。通常，懸浮細胞培養(yǎng)及病毒繁殖流程為：已經(jīng)馴化的懸浮細胞種子復蘇培養(yǎng)后，通過扁瓶、搖瓶及生物反應器逐級培養(yǎng)放大，然后將病毒種子接種到放大的懸浮培養(yǎng)細胞中，進行細胞感染培養(yǎng)，當宿主細胞的物質(zhì)和能量被病毒繁殖吸收殆盡時，標志病毒繁殖培養(yǎng)到達終點(培養(yǎng)完成)，即細胞病變程度(或CPE)達100％。

雖然中國工業(yè)自動控制系統(tǒng)制造行業(yè)在近幾年取得了令人矚目的成績，但仍有些行業(yè)在自動化控制方面處于起步階段，特別是獸用疫苗生產(chǎn)行業(yè)。目前，很多企業(yè)都是通過人工取樣，并將樣品在顯微鏡下觀察后判斷細胞的病變程度，決定病毒的收獲時機。此過程中受人為的操作方法和主觀因素影響，產(chǎn)生很大的批間差，很大程度上靠經(jīng)驗生產(chǎn)。獸用疫苗生產(chǎn)行業(yè)近幾年剛從手工操作發(fā)展為機械設備工業(yè)化規(guī)模生產(chǎn)，在設備自動控制方面也多數(shù)為單臺控制，很少有系統(tǒng)自動化控制。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是為了解決上述問題，提供一種能夠減少人為主觀隨意性、自動并準確識別細胞病變終點、增加生產(chǎn)工序連續(xù)性的懸浮細胞病變終點自動識別與控制系統(tǒng)。

本發(fā)明的上述目的是由以下技術方案來實現(xiàn)的：

一種懸浮細胞病變終點自動識別與控制系統(tǒng)，包括病毒培養(yǎng)反應器(00)、病毒收獲儲罐(01)和閥門執(zhí)行器單元(04)，病毒培養(yǎng)反應器(00)的反應器出料口(2)與病毒收獲儲罐(01)的儲罐進料口(11)通過管道相連，病毒液在病毒培養(yǎng)反應器(00)中培養(yǎng)完成后通過反應器出料口(2)經(jīng)儲罐進料口(11)轉(zhuǎn)移到病毒收獲儲罐(01)的罐體內(nèi)保存；所述系統(tǒng)還包括電極探頭檢測單元(03)和識別控制單元(02)，所述電極探頭檢測單元(03)包括安裝于病毒培養(yǎng)反應器(00)的罐體上的溶解氧檢測電極(Q1)，溶解氧檢測電極(Q1)電連接到所述識別控制單元(02)，識別控制單元(02)利用溶解氧檢測電極(Q1)檢測出的病毒培養(yǎng)反應器(00)中的溶解氧值自動識別病毒培養(yǎng)過程中的懸浮細胞病變終點。

上述懸浮細胞病變終點自動識別與控制系統(tǒng)中，所述溶解氧檢測電極(Q1)安裝在帶密封圈的電極套筒內(nèi)，電極套筒通過快開卡箍和密封墊片與病毒培養(yǎng)反應器(00)的罐體上開設的電極安裝口連接，該電極與罐體內(nèi)液體直接接觸。

上述懸浮細胞病變終點自動識別與控制系統(tǒng)中，所述電極探頭檢測單元(03)還包括設置在病毒培養(yǎng)反應器(00)的罐體頂部和底部的反應器液位檢測探頭一(L1)和反應器液位檢測探頭二(L2)所構成的差壓液位計，反應器液位檢測探頭二(L2)接液相檢測到壓力P₁，反應器液位檢測探頭一(L1)接氣相檢測到壓力P₂，二者的差值與液位H存在關系H＝(P₁-P₂)/(ρg)，被測液體介質(zhì)的密度ρ已知，差壓液位計檢測到的壓差與液位高度成正比，所述差壓液位計通過檢測差壓可以得到液位高度值。

上述懸浮細胞病變終點自動識別與控制系統(tǒng)中，所述電極探頭檢測單元(03)還包括設置在病毒收獲儲罐(01)的罐體頂部和底部的儲罐液位檢測探頭一(L3)和反應器液位檢測探頭二(L4)所構成的差壓液位計，儲罐液位檢測探頭二(L4)接液相檢測到壓力P₁，儲罐液位檢測探頭一(L3)接氣相檢測到壓力P₂，二者的差值與液位H存在關系H＝(P₁-P₂)/(ρg)，被測液體介質(zhì)的密度ρ已知，差壓液位計檢測到的壓差與液位高度成正比，所述差壓液位計通過檢測差壓可以得到液位高度值。

上述懸浮細胞病變終點自動識別與控制系統(tǒng)中，所述電極探頭檢測單元(03)還包括設置在病毒培養(yǎng)反應器(00)的罐體上的反應器溫度檢測探頭T1和設置在病毒收獲儲罐(01)的罐體上的儲罐溫度檢測探頭T2。

上述懸浮細胞病變終點自動識別與控制系統(tǒng)中，所述閥門執(zhí)行器單元(04)包括設置在病毒培養(yǎng)反應器(00)的罐體上的反應器補氣口(3)、反應器排氣口(4)、反應器進料口(1)、反應器出料口(2)和病毒培養(yǎng)反應器(00)的控溫管道上的反應器溫控水進口(5)、反應器溫控水出口(6)處的反應器閥門(V1～V6)以及設置在病毒收獲儲罐(01)的罐體上的儲罐進料口(11)、儲罐出料口(12)、儲罐補氣口(13)、儲罐排氣口(14)和病毒收獲儲罐(01)的控溫管道上的儲罐溫控水進口(15)、儲罐溫控水出口(16)處的儲罐閥門(V11～V16)，各閥門均電連接到識別控制單元(02)。

上述懸浮細胞病變終點自動識別與控制系統(tǒng)中，所述識別控制單元(02)為PLC/DCS控制器，所述識別控制單元(02)包括用于記錄懸浮細胞病變時間的計時器和用于顯示電極探頭檢測單元(03)檢測到的數(shù)據(jù)和閥門執(zhí)行器單元(04)中各閥門的工作狀態(tài)以及設置工作參數(shù)的顯示屏。

上述懸浮細胞病變終點自動識別與控制系統(tǒng)中，所述工作參數(shù)包括懸浮細胞病變終點的溶氧值、溶氧消耗率、溶氧值和溶氧消耗率符合條件后的累計時間、病毒液收獲降溫溫度值和液位無變化固定時長。

本發(fā)明還提供一種懸浮細胞病變終點自動識別與控制方法，所述方法采用上述懸浮細胞病變終點自動識別與控制系統(tǒng)進行懸浮細胞病變終點的自動識別以及病毒培養(yǎng)條件和病毒液轉(zhuǎn)移、保存的自動控制，，包括以下步驟：

步驟一：啟動識別控制單元(02)和電極探頭檢測單元(03)，設定懸浮細胞病變終點的溶氧值、溶氧消耗率、溶氧值和溶氧消耗率符合條件后的累計時間、病毒液收獲降溫溫度值和液位無變化固定時長參數(shù)；

步驟二：打開閥門執(zhí)行器單元(04)的反應器閥門(V1，V4)，從反應器進料口(1)向病毒培養(yǎng)反應器(00)的罐體內(nèi)添加細胞液和種毒，監(jiān)視反應器液位檢測探頭一(L1)和反應器液位檢測探頭二(L2)直到達到病毒培養(yǎng)反應器(00)的預定液位；打開反應器閥門(V5，V6)，使熱水從反應器溫控水進口(5)進入、反應器溫控水出口(6)出去，實現(xiàn)循環(huán)加熱升溫，將病毒培養(yǎng)反應器(00)的溫度控制到預定溫度，啟動其他培養(yǎng)系統(tǒng)達到預定培養(yǎng)條件，開始病毒培養(yǎng)；

步驟三：溶解氧檢測電極(Q1)實時檢測病毒培養(yǎng)反應器(00)中的溶氧值，并實時計算懸浮細胞的溶氧消耗率，即溶氧消耗率為(計時開始點溶氧值-計時結束點溶氧值)％/計時時長(min)；識別控制單元(02)比較溶氧值與溶氧設定值以及溶氧消耗率與溶氧消耗率設定值，如果同時滿足設定要求，啟動計時器，如果累計時間為時間設定值內(nèi),溶氧值與溶氧設定值以及溶氧消耗率與溶氧消耗率設定值一直滿足設定要求，執(zhí)行步驟四的操作，否則重復步驟三；

步驟四：對病毒培養(yǎng)反應器(00)中的病毒液進行降溫,使冷卻水從反應器溫控水進口(5)進入、反應器溫控水出口(6)出去，實現(xiàn)循環(huán)冷卻降溫，識別控制單元(02)比較反應器溫度檢測探頭(T1)檢測到的溫度值與溫度設定值，如果滿足設定條件，執(zhí)行步驟五，否則重復步驟四；

步驟五：關閉反應器閥門(V4)，打開反應器閥門(V3，V2)和儲罐閥門(V11，V14)，將病毒培養(yǎng)反應器(00)中的病毒液轉(zhuǎn)移到病毒收獲儲罐(01)中，同時打開病毒收獲儲罐(01)的儲罐閥門(V15，V16)，使病毒液在病毒收獲儲罐(01)中維持低溫狀態(tài)；當病毒培養(yǎng)反應器(00)的液位不再變化時并維持30秒即轉(zhuǎn)液結束，關閉病毒培養(yǎng)反應器(00)的反應器閥門(V3,V2)，打開反應器閥門(V4)，同時關閉病毒收獲儲罐(01)的儲罐閥門(V11,V14)，打開儲罐閥門(V13)，補加一定正壓將病毒液低溫保存。

上述懸浮細胞病變終點自動識別與控制方法中，步驟三中所述時間設定值為2小時。

采用上述技術方案，本發(fā)明的技術效果是：本發(fā)明系統(tǒng)通過溶解氧檢測電極檢測出病毒培養(yǎng)反應器中懸浮細胞液的溶解氧值，并通過識別控制單元自動識別病毒培養(yǎng)過程中的懸浮細胞病變終點，控制培養(yǎng)完成的病毒液自動降溫并自動轉(zhuǎn)移到病毒收獲儲罐，從而減少人為主觀隨意性，確定了標準統(tǒng)一的操作流程，又提高了操作時機的精確性和及時性，有利于生產(chǎn)工序的連續(xù)性，同時大大降低了產(chǎn)品的批間差，還提高了產(chǎn)品的收率。

附圖說明

圖1是本發(fā)明系統(tǒng)的整體結構示意圖；

圖2是本發(fā)明方法的識別與控制流程圖。

圖中附圖標記表示為：

00：病毒培養(yǎng)反應器，01：病毒收獲儲罐；02：識別控制單元，03：電極探頭檢測單元，04：閥門執(zhí)行器單元；

1：反應器進料口，2：反應器出料口，3：反應器補氣口，4：反應器排氣口，5：反應器溫控水進口，6：反應器溫控水出口；T1：反應器溫度檢測探頭，Q1：溶解氧檢測電極，L1：反應器液位檢測探頭一，L2：反應器液位檢測探頭二；

11：儲罐進料口，12：儲罐出料口，13：儲罐補氣口，14：儲罐排氣口，15：儲罐溫控水進口，16：儲罐溫控水出口；T2:儲罐溫度檢測探頭，L3：儲罐液位檢測探頭一，L4：儲罐液位檢測探頭二；

V1～V6：反應器閥門，V11～V16：儲罐閥門。

具體實施方式

細胞懸浮培養(yǎng)技術可以進行大規(guī)模細胞培養(yǎng)，能夠獲得大量的病毒產(chǎn)物和高質(zhì)量的疫苗產(chǎn)品。目前，很多生物制品企業(yè)都是通過人工取樣，并將樣品在顯微鏡下觀察后判斷細胞的病變程度，決定病毒的收獲時機，此過程中受人為的操作方法和主觀因素影響，很大程度上靠經(jīng)驗生產(chǎn)，產(chǎn)生很大的批間差。針對以上不足，本發(fā)明系統(tǒng)及方法采用識別控制單元自動識別病毒繁殖過程中的細胞病變終點，從而減少人為主觀隨意性，增加生產(chǎn)工序的連續(xù)性。本發(fā)明系統(tǒng)通過硬件設備檢測出細胞培養(yǎng)環(huán)境的溶解氧實際值，并與設定值相比較做出判斷，并自動執(zhí)行相應的流程，如自動停止培養(yǎng)流程、自動啟動降溫流程和自動啟動轉(zhuǎn)液流程，完成細胞病變過程，進而獲得病毒抗原。

以下結合附圖和具體實施例，對本發(fā)明的懸浮細胞病變終點自動識別與控制系統(tǒng)及方法進行詳細說明。

懸浮細胞病變終點自動識別與控制系統(tǒng)

圖1為本發(fā)明系統(tǒng)的結構示例(粗線表示物理管道連接，細線表示電連接)，在該實施例中，本發(fā)明的懸浮細胞病變終點識別與控制系統(tǒng)包括病毒培養(yǎng)反應器00、病毒收獲儲罐01、電極探頭檢測單元03、閥門執(zhí)行器單元04和識別控制單元02，其中：

病毒培養(yǎng)反應器00為中空的罐體結構，用于病毒在懸浮細胞中進行繁殖培養(yǎng)，罐體上部設置有反應器補氣口3和反應器排氣口4，分別用于病毒液收獲轉(zhuǎn)移時罐體補壓和罐體泄壓；罐體側壁上部設有反應器進料口1，用于加入細胞、種毒和病毒維持液，罐體底部對應設有反應器出料口2，當細胞病變完成后用于將培養(yǎng)好的病毒液轉(zhuǎn)移到病毒收獲儲罐01中；罐體側壁還設置有控溫管道，用于病毒培養(yǎng)時罐體的保溫和培養(yǎng)結束后罐體的降溫，該管道為U型橫截面的半開式管體呈螺旋狀焊接在病毒培養(yǎng)反應器的罐體上，該管道上端設有反應器溫控水出口6，下端設有反應器溫控水進口5。

病毒收獲儲罐01也為中空罐體結構，用于繁殖結束后的病毒在低溫條件下的保存，罐體上部設置有儲罐進料口11，該進料口與病毒培養(yǎng)反應器00的反應器出料口2通過管道相連，病毒液在病毒培養(yǎng)反應器00中培養(yǎng)完成后通過反應器出料口2經(jīng)儲罐進料口11轉(zhuǎn)移到病毒收獲儲罐01的罐體內(nèi)；同樣，病毒收獲儲罐01的罐體頂部設置有儲罐補氣口13和儲罐排氣口14，分別用于病毒液往下游工序轉(zhuǎn)移時罐體補壓和罐體泄壓；罐體底部對應設有儲罐出料口12，用于向下游工序轉(zhuǎn)出低溫病毒液；罐體側壁也設置有控溫管道，用于病毒液收獲后罐體的降溫和溫度維持，該管道為U型橫截面的半開式管體呈螺旋狀焊接在病毒收獲儲罐的罐體上，該管道上端設有儲罐溫控水出口16，下端設有儲罐溫控水進口15。

為了對病毒培養(yǎng)反應器00和病毒收獲儲罐01中的液體狀態(tài)、病毒在懸浮細胞中的病變過程進行監(jiān)視以及對病毒培養(yǎng)條件進行控制，在病毒培養(yǎng)反應器00和病毒收獲儲罐01的罐體上設置電極探頭檢測單元03，并在二者罐體的各種口處設置相應的控制閥門作為閥門執(zhí)行器單元04，用于控制各口的打開/關閉。

電極探頭檢測單元03包括設置在病毒培養(yǎng)反應器00的罐體上的反應器溫度檢測探頭T1、溶解氧檢測電極Q1和設置在罐體頂部和底部的反應器液位檢測探頭一L1和反應器液位檢測探頭二L2以及設置在病毒收獲儲罐01的罐體上的儲罐溫度檢測探頭T2和設置在罐體頂部和底部的儲罐液位檢測探頭一L3和儲罐液位檢測探頭二L4，其中，溶解氧檢測電極Q1安裝在帶密封圈的電極套筒內(nèi)，電極套筒通過快開卡箍和密封墊片與病毒培養(yǎng)反應器00的罐體上開設的電極安裝口連接，該電極與罐體內(nèi)液體直接接觸；本發(fā)明所使用的液位檢測器件為差壓液位計，即反應器液位檢測探頭一L1和反應器液位檢測探頭二L2組合使用構成該差壓液位計，其中，反應器液位檢測探頭二L2接液相檢測到壓力P₁，反應器液位檢測探頭一L1接氣相檢測到壓力P₂，二者的差值與液位H存在以下關系：H＝(P₁-P₂)/(ρg)，當被測液體介質(zhì)的密度ρ已知時，差壓液位計檢測到的壓差與液位高度成正比，于是通過檢測差壓可以得到液位高度值；病毒收獲儲罐01的儲罐液位檢測探頭一L3和儲罐液位檢測探頭二L4同樣為差壓液位計，工作原理與病毒培養(yǎng)反應器00的差壓液位計相同。以上各探頭和電極都電連接到識別控制單元02，各探頭和電極采集到的數(shù)據(jù)傳送到識別控制單元02進行顯示、處理。

閥門執(zhí)行器單元04包括設置在病毒培養(yǎng)反應器00的罐體上的反應器補氣口3、反應器排氣口4、反應器進料口1、反應器出料口2和病毒培養(yǎng)反應器00的控溫管道上的反應器溫控水進口5、反應器溫控水出口6處的反應器閥門V1～V6以及設置在病毒收獲儲罐01的罐體上的儲罐進料口11、儲罐出料口12、儲罐補氣口13、儲罐排氣口14和病毒收獲儲罐01的控溫管道上的儲罐溫控水進口15、儲罐溫控水出口16處的儲罐閥門V11～V16，以上各閥門均電連接到識別控制單元02，識別控制單元02根據(jù)檢測到的各探頭、電極參數(shù)生成相應的控制命令，控制各閥門的打開/關閉，進而控制病毒繁殖過程中各流程的執(zhí)行。

識別控制單元02是整個系統(tǒng)的控制部件，其可以是PLC/DCS控制器或其他控制器，用于實時采集電極探頭檢測單元03檢測數(shù)據(jù)并生成控制指令控制閥門執(zhí)行器單元04中各閥門的打開/關閉，以完成懸浮細胞病變的自動識別與控制。識別控制單元02的計時器用于記錄懸浮細胞病變時間，識別控制單元02的顯示屏用于顯示電極探頭檢測單元03檢測到的數(shù)據(jù)和閥門執(zhí)行器單元04中各閥門的工作狀態(tài)以及設置各控制參數(shù)(例如，懸浮細胞病變完成后的累計時間、懸浮細胞病變終點的溶氧值和溶氧消耗率等)。

以上部件安裝上述連接關系組裝形成本發(fā)明的懸浮細胞病變終點自動識別與控制系統(tǒng)，該系統(tǒng)通過檢測溶解氧的狀態(tài)變化，及時、準確地判斷細胞病變終點，并利用識別控制單元02自動控制系統(tǒng)執(zhí)行相應的操作流程，進而獲得病毒抗原。

懸浮細胞病變終點自動識別與控制方法

細胞在生長繁殖的過程中，需要培養(yǎng)液中的溶解氧來維持生命，當病毒在細胞體內(nèi)繁殖的過程中，隨著病毒子代粒子的增多，細胞的生命特征會逐漸減弱，細胞生存所消耗的氧氣量也會減少，培養(yǎng)液中的溶解氧消耗越來越少，當細胞病變完成時及細胞完全裂解時，培養(yǎng)液中的溶解氧消耗為零，以此為依據(jù)建立細胞病變終點的識別系統(tǒng)，進而判斷細胞病變的終點。因此，配置的溶解氧檢測電極Q1檢測到的溶解氧狀態(tài)數(shù)據(jù)(即溶解氧濃度值和細胞的實際耗氧值)是識別的目標，也是判斷懸浮細胞病變終點的依據(jù)，是自動控制識別單元02將間接的數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細胞生長狀態(tài)和病毒繁殖情況的主要信息源。細胞的實時耗氧量間接地體現(xiàn)了病毒在反應器中繁殖狀況，當細胞的實際耗氧值小于細胞病變完成判斷設定值0.5％/min時，判斷細胞病變基本完成，病毒繁殖結束。

本發(fā)明的懸浮細胞病變終點自動識別與控制方法以溶解氧檢測電極Q1檢測到的溶解氧狀態(tài)數(shù)據(jù)為依據(jù)、以識別控制單元02作為控制器進行判斷懸浮細胞病變終點，并控制相應的操作流程，包括以下步驟(參照圖2)：

步驟一：啟動識別控制單元02和電極探頭檢測單元03，設定懸浮細胞病變終點的溶氧值、溶氧消耗率、溶氧值和溶氧消耗率符合條件后的累計時間、病毒液收獲降溫溫度值、液位無變化固定時長等參數(shù)；

步驟二：打開閥門執(zhí)行器單元04的反應器閥門V1和反應器閥門V4，從反應器進料口1向病毒培養(yǎng)反應器00的罐體內(nèi)添加細胞液和種毒，監(jiān)視反應器液位檢測探頭一L1和反應器液位檢測探頭二L2直到達到病毒培養(yǎng)反應器00的預定液位；打開反應器閥門V5、V6，使熱水從反應器溫控水進口5進入、反應器溫控水出口6出去，實現(xiàn)循環(huán)加熱升溫，將病毒培養(yǎng)反應器00的溫度控制到預定溫度，啟動其他培養(yǎng)系統(tǒng)達到預定培養(yǎng)條件如補氧系統(tǒng)、調(diào)節(jié)PH系統(tǒng)等，開始病毒培養(yǎng)；

步驟三：溶解氧檢測電極Q1實時檢測病毒培養(yǎng)反應器00中的溶氧值，并實時計算懸浮細胞的溶氧消耗率，即溶氧消耗率為(計時開始點溶氧值-計時結束點溶氧值)％/計時時長(min)；識別控制單元02比較溶氧值與溶氧設定值以及溶氧消耗率與溶氧消耗率設定值，如果同時滿足設定要求，啟動計時器，如果累計時間為時間設定值(例如2小時)內(nèi),溶氧值與溶氧設定值以及溶氧消耗率與溶氧消耗率設定值一直滿足設定要求，執(zhí)行步驟四的操作，否則重復步驟三；

步驟四：對病毒培養(yǎng)反應器00中的病毒液進行降溫,打開反應器閥門和反應器閥門V6，使冷卻水從反應器溫控水進口5進入、反應器溫控水出口6出去，實現(xiàn)循環(huán)冷卻降溫，識別控制單元02比較反應器溫度檢測探頭T1檢測到的溫度值與溫度設定值，如果滿足設定條件，執(zhí)行步驟五，否則重復步驟四；

步驟五：關閉反應器閥門V4，打開反應器閥門V3、反應器閥門V2和儲罐閥門V11和儲罐閥門V14，將病毒培養(yǎng)反應器00中的病毒液轉(zhuǎn)移到病毒收獲儲罐01中，同時打開病毒收獲儲罐01的儲罐閥門V15、V16，使病毒液在病毒收獲儲罐01中維持低溫狀態(tài)；當病毒培養(yǎng)反應器00的液位不再變化時并維持30秒即轉(zhuǎn)液結束，關閉病毒培養(yǎng)反應器00的反應器閥門V3、V2，打開反應器閥門V4，同時關閉病毒收獲儲罐01的儲罐閥門V11、V14，打開儲罐閥門V13，補加一定正壓將病毒液低溫保存。

測試例

表1示出了依照本發(fā)明方法采用本發(fā)明系統(tǒng)進行測試的實驗數(shù)據(jù)示例。參照表1和圖2，該測試例數(shù)據(jù)分為數(shù)據(jù)檢測、病毒培養(yǎng)終點識別判斷、啟動降溫、病毒收獲轉(zhuǎn)移和病毒低溫儲存控制幾個階段，其中：

(1)數(shù)據(jù)檢測階段：從表1中的開始時間到7:07:53的時間段為數(shù)據(jù)檢測階段。此階段內(nèi)，病毒培養(yǎng)反應器00的電極探頭檢測單元03通過溶解氧檢測電極Q1檢測到細胞液中的實時溶解氧值，溶解氧值一直處于升高-降低-升高-降低的循環(huán)狀態(tài)即耗氧量趨勢，細胞的生命耗氧量間接地體現(xiàn)了病毒在反應器中繁殖狀況。

(2)病毒培養(yǎng)終點識別判斷階段：懸浮細胞病變終點判斷的條件為：在一定時間內(nèi)連續(xù)滿足溶氧檢測值大于溶氧設定值(例如35％)且細胞的實際溶解氧消耗值小于細胞病變完成判斷設定值(例如0.5％/min)，如實際情況在一定時間內(nèi)(如2小時)連續(xù)滿足懸浮細胞病變終點判斷的條件，則判定為病毒繁殖結束。

從表1中的7:07:53(溶解氧檢測值為37.62％)開始到9:07:53(溶解氧檢測值為46.01％)的整個階段。此階段內(nèi)病毒培養(yǎng)反應器00的溶解氧實際檢測值從37.62％-46.01％，一直處于逐步升高態(tài)勢，識別控制單元02以溶解氧設定值為基準(例如35.0％)，與實際溶解氧檢測值相對比，細胞的實際溶解氧消耗值已為負數(shù)，表明細胞的實際溶解氧消耗值小于細胞病變完成判斷設定值(0.5％/min)，且檢測值從7:07:53開始計時到9:07:53為2個小時，判斷細胞病變基本完成，病毒繁殖結束。

(3)啟動降溫、病毒收獲轉(zhuǎn)移和病毒低溫儲存控制階段：從表1中的9:07:53(溫度值為36.41℃)開始到9:57:53(溫度值為14.49℃)的整個階段為降溫階段，此階段溫度逐步降低，直到降到溫度設定值(15.0℃)以下；從表1中的9:57:53(稱重值為1445.5Kg)開始到10:27:53(稱重值為0.03Kg)的整個階段為病毒收獲轉(zhuǎn)移階段，此階段內(nèi)病毒培養(yǎng)反應器00的重量逐步減少，直至病毒液全部轉(zhuǎn)移出去，病毒液被轉(zhuǎn)移到病毒收獲儲罐01內(nèi)，繼續(xù)低溫存放。至此，整個程序全部結束。

表1：懸浮細胞病變終點自動識別與控制方法的試驗數(shù)據(jù)表

本領域技術人員應當理解，這些實施例或?qū)嵤┓绞絻H用于說明本發(fā)明而不限制本發(fā)明的范圍，對本發(fā)明所做的各種等價變型和修改均屬于本發(fā)明公開內(nèi)容。