本發(fā)明涉及中藥提取領域，具體涉及一種從山茱萸果實中提純馬錢苷的方法。
背景技術：
山茱萸是山茱萸科植物山茱萸的成熟干燥果肉，是我國傳統(tǒng)珍稀藥材和常用名貴中藥，有澀精、斂汗、補肝腎等功效，常用于治療眩暈耳鳴、腰膝酸痛、陽痿遺精、遺尿尿頻、崩漏帶下、內熱消渴等癥，是六味地黃丸的組成部分之一。環(huán)烯醚萜苷是山茱萸主要的活性成分之一，馬錢苷作為山茱萸中環(huán)烯醚萜苷類的主要成分,具有降血糖、抗血小板凝集、免疫調節(jié)、抗休克、抗氧化、抑制前脂肪細胞分化等作用。目前該成分已成為對山茱萸研究的熱點,具有廣闊的開發(fā)前景。
從中藥山茱萸中提取分離馬錢苷的方法較少，多是實驗室方法，使用溶劑毒性較大，步驟繁瑣，且制備量較少。中國發(fā)明專利“從中藥山茱萸中制備馬錢苷的方法”，申請?zhí)?01310415843.3，主要通過乙醇加熱提取、大孔樹脂吸附、硅膠柱層析、重結晶等步驟制備馬錢苷，該專利通過硅膠柱層析，使用混合溶劑梯度洗脫來純化馬錢苷，溶劑使用量大，生產成本高，不適合工業(yè)規(guī)?；a。中國發(fā)明專利“一種從山茱萸中提取莫諾苷和馬錢苷的方法”，申請?zhí)?01010557777.X，通過高速逆流色譜分離馬錢苷，需使用特殊設備，成本較大，很難滿足工業(yè)化大生產的需要。
技術實現(xiàn)要素：
為了克服現(xiàn)有技術中馬錢苷提取工藝存在的缺點，本發(fā)明的目的是提供一種工藝簡單且適合工業(yè)化大生產的從山茱萸中提取馬錢苷的方法。
為達到以上目的，本發(fā)明的主要技術方案為：回流提取、酸反應除雜、有機溶劑提純、結晶與重結晶等步驟得到高純度的馬錢苷。
一種從山茱萸果實中提純馬錢苷的方法，其特征在于主要包括以下步驟：
(1)回流提?。荷杰镙枪麑嵱煤掖蓟亓魈崛。崛∫簼饪s。
(2)酸反應除雜：提取濃縮液加入乙醇，使反應體系成為含水乙醇溶液，該溶液在加熱條件下進行酸水解反應，反應結束，加堿性溶液中和至中性，中和反應液濃縮，烘干得干燥物。
(3)有機溶劑提純：向步驟(2)所得干燥物中加有機溶劑，回流提取，提取液濃縮，烘干得粗品。
(4)結晶與重結晶：粗品結晶與重結晶，得馬錢苷，純度大于95％。
優(yōu)選地，步驟(1)中使用的含水乙醇的體積分數(shù)為20％-80％。
優(yōu)選地，步驟(2)中酸反應體系的醇濃度為5％-95％，酸水解使用的酸性溶液選自鹽酸、硫酸、醋酸中的任意一種，加酸體積為待反應液體積的1/10-1/100，酸濃度為0.1-3mol/L，反應溫度為60-90℃，反應時間為1-4小時。堿性溶液選自NaOH、NaHCO3、Na2CO3中的任意一種。
優(yōu)選地，步驟(3)中提純所用有機溶劑為甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯中的任意一種。
優(yōu)選地，步驟(4)中結晶與重結晶使用的溶劑為甲醇、乙醇、丙酮的任意一種。
一種從山茱萸果實中提純馬錢苷的方法，主要包括如下步驟：
(1)回流提?。荷杰镙枪麑嵓?-10倍量體積分數(shù)20％-80％的乙醇，加熱回流提取2次，每次提取1-3小時，提取液濃縮至密度1.05-1.1；
(2)酸反應除雜：提取濃縮液加入乙醇，使反應體系乙醇濃度在5％-95％，加入酸溶液，進行酸反應，反應溫度60-90℃，時間1-4h，反應結束，加堿性溶液中和至中性，中和反應液濃縮，烘干得干燥物；
(3)有機溶劑提純：向步驟(2)所得干燥物中加乙醇，回流提取，提取液濃縮，烘干得粗品；
(4)結晶與重結晶：馬錢苷粗品加乙醇加熱溶解，趁熱過濾，緩慢降溫，析出白色晶體，繼續(xù)用乙醇重結晶1-3次，得馬錢苷。
本發(fā)明步驟簡單，容易操作，重現(xiàn)性高，通過本方法所得馬錢苷純度達到95-98％。
與現(xiàn)有技術中馬錢苷的提純方法相比，本發(fā)明的優(yōu)點在于：
(1)本發(fā)明提純過程加入酸反應這一步驟，去除了一些雜質，與其他專利和文獻報道的馬錢苷純化相比較，不需使用特殊設備，不需用多種有機溶劑，簡便可行，縮短了純化步驟，大大提高了馬錢苷的收率和純度。
(2)本發(fā)明使用溶劑種類少，成本低，生產工藝簡單，易于操作，更加適合工業(yè)化大規(guī)模生產。
具體實施方式
下面將結合具體實施案例進一步說明本發(fā)明，本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于以下實施方式。
實施例1
取山茱萸干燥果實1kg，加7L體積分數(shù)50％的乙醇，加熱回流提取兩次，每次提取1小時，合并兩次提取液，濃縮，加乙醇調節(jié)醇濃度為30％，加1/20體積2mol/L醋酸，80℃反應2小時，反應結束，加NaOH溶液中和至中性，中和液濃縮至干，得干燥物，該干燥物加400mL乙醇回流提取兩次，每次2小時，提取液合并濃縮，得馬錢苷粗品。該粗品用100mL甲醇加熱回流溶解，不溶物趁熱過濾，濾液降至室溫，攪拌析晶，過濾干燥，繼續(xù)用甲醇重結晶2次，得馬錢苷3.8g，含量為96.3％。
實施例2
取山茱萸干燥果實1kg，加10L體積分數(shù)20％的乙醇，加熱回流提取兩次，每次提取2小時，合并兩次提取液，濃縮，加乙醇調節(jié)醇濃度為5％，加1/10體積1mol/L鹽酸，70℃反應3小時，反應結束，加NaHCO3溶液中和至中性，中和液濃縮至干，得干燥物，該干燥物加600mL丙酮回流提取兩次，每次2小時，提取液合并濃縮，得馬錢苷粗品。該粗品用200mL無水乙醇加熱回流溶解，不溶物趁熱過濾，濾液降至室溫，攪拌析晶，過濾干燥，繼續(xù)用無水乙醇重結晶2次，得馬錢苷3.2g，含量為98.1％。
實施例3
取山茱萸干燥果實4kg，加32L體積分數(shù)60％的乙醇，加熱回流提取兩次，每次提取2小時，合并兩次提取液，濃縮，加乙醇調節(jié)醇濃度為70％，加1/100體積3mol/L鹽酸，60℃反應4小時，反應結束，加NaHCO3溶液中和至中性，中和液濃縮至干，得干燥物，該干燥物加1L甲醇回流提取兩次，每次2小時，提取液合并濃縮，得馬錢苷粗品。該粗品用800mL乙醇加熱回流溶解，不溶物趁熱過濾，濾液降至室溫，攪拌析晶，過濾干燥，繼續(xù)用乙醇重結晶2次，得馬錢苷16.2g，含量為97.2％。
實施例4
取山茱萸干燥果實10kg，加60L體積分數(shù)80％的乙醇，加熱回流提取兩次，每次提取2小時，合并兩次提取液，濃縮，加乙醇調節(jié)醇濃度為95％，加1/10體積0.1mol/L硫酸，90℃反應1小時，反應結束，加Na2CO3溶液中和至中性，中和液濃縮至干，得干燥物，該干燥物加8L乙酸乙酯提取三次，每次2小時，提取液合并濃縮，得馬錢苷粗品。該粗品用3L丙酮加熱回流溶解，不溶物趁熱過濾，濾液降至室溫，攪拌析晶，過濾干燥，繼續(xù)用丙酮重結晶2次，得馬錢苷36.7g，含量為95.4％。