本發(fā)明涉及微生物,尤其是涉及一種受群體感應調(diào)控的錳氧化菌及其應用。
背景技術(shù):
1、酸性礦山廢水(acid?mine?drainage,amd)是礦山開采或礦石堆積過程中,礦石中的金屬硫化物在空氣、水、微生物的共同作用下產(chǎn)生的廢水,具有硫酸鹽、重金屬離子含量高,ph低等特點。amd如不經(jīng)處理直接排放,會對水生和陸生生態(tài)系統(tǒng)造成嚴重破壞。在傳統(tǒng)的處理方法中,化學中和法雖具有較好的處理效果,但難以處理的次生沉淀,嚴重阻礙了該技術(shù)的大規(guī)模應用,而物理處理法則受限于高昂的材料成本和復雜的操作流程等因素,未能得到有效推廣。
2、相關(guān)研究表明,在自然界中廣泛存在一些能氧化低價mn的錳氧化菌(manganeseoxidation?bacteria,mob),如seudomonas?putida?mnb1,pseudomonas?putidastrain?gb-1,bacillus?sp.strain?sg-1等,基于錳氧化菌發(fā)展的amd生物處理技術(shù),因成本低廉、操作簡單和環(huán)境友好等優(yōu)點,受到了廣泛的關(guān)注。然而,實際應用中利用錳氧化菌進行amd生物處理仍存在一定的難點,如對mn(ii)的氧化能力不理想,或者對mn(ii)的耐受性有限,導致其在高濃度mn(ii)條件下難以生存,無法達到理想的效果。相關(guān)技術(shù)中,利用群體感應(quorumsensing,qs)調(diào)控提高菌種的關(guān)鍵特性成為一種有效策略。群體感應是廣泛存在于微生物間的一種調(diào)控機制,該機制是由于種群密度的增加,使環(huán)境中的化學信號分子濃度超過閾值,進入細胞內(nèi)的信號分子與受體蛋白形成復合體,進而啟動關(guān)聯(lián)基因的表達,最終使微生物表現(xiàn)出群體性行為。然而,目前對錳氧化菌與其他微生物之間的調(diào)控研究相對缺乏,且未見有能夠利用群體感應提高mn(ii)氧化性能的錳氧化菌相關(guān)報道。
3、基于此,亟需尋找到一種不僅具有高mn(ii)耐受性和優(yōu)異錳氧化性能,而且受群體感應調(diào)控的錳氧化菌。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、本發(fā)明旨在至少解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的技術(shù)問題之一。為此,本發(fā)明提出了一株受群體感應調(diào)控的錳氧化菌,其在含16.56mmol/l的mn(ii)的條件下生長,且當mn(ii)的濃度約為13.25mmol/l時,對菌株的促生長效果最好;此外,本發(fā)明的受群體感應調(diào)控的錳氧化菌具有優(yōu)異的錳氧化率,在含1mmol/l?mn(ii)的培養(yǎng)條件下時,72h后其錳氧化率達到97.3%,在含13.25mmol/l的mn(ii)條件下,其錳氧化率仍能達到39.70%,且當向體系中添加一定含量外源ahls,其錳氧化率能夠進一步提高。
2、本發(fā)明還提出一種受群體感應調(diào)控的錳氧化菌的篩選方法。
3、本發(fā)明還提出一種菌劑。
4、本發(fā)明還提出一種用于錳氧化的產(chǎn)品。
5、本發(fā)明還提出一種受群體感應調(diào)控的錳氧化菌、菌劑或用于錳氧化的產(chǎn)品在重金屬污水處理中的應用。
6、本發(fā)明還提出一種重金屬污水處理方法。
7、本發(fā)明的第一方面,提供一株受群體感應調(diào)控的錳氧化菌,所述錳氧化菌命名為pseudomonas?sp?yohu13,保藏單位:廣東省微生物菌種保藏中心,保藏編號:gdmcc?64553,保藏時間:2024年4月24日。
8、根據(jù)本發(fā)明實施例的受群體感應調(diào)控的錳氧化菌,至少具有如下有益效果:
9、(1)受群體感應調(diào)控,本發(fā)明的錳氧化菌yohu13不僅可分泌ahls,而且分泌能力較強,僅產(chǎn)生中長鏈的信號分子。此外,對其分泌的信號分子進行定量檢測,結(jié)果顯示20ml的lb體系中,本發(fā)明的錳氧化菌yohu13培養(yǎng)20h能夠產(chǎn)生約15nmol/l?c8-hsl當量的ahls,說明其具有較強的群體感應能力。
10、(2)高錳耐受性,本發(fā)明受群體感應調(diào)控的錳氧化菌pseudomonas?sp?yohu13對mn(ii)具有高耐受性,其最高耐受濃度達到13.25mmol/l,在最大耐受濃度范圍內(nèi),錳氧化菌yohu13的生物量隨著mn2+的濃度增加而增加。
11、(3)優(yōu)異的錳氧化率,本發(fā)明的錳氧化菌yohu13在含1mmol/l?mn(ii)的培養(yǎng)條件下時,72h后其錳氧化率能夠達到97.3%;在含13.25mmol/l的mn(ii)條件下,其錳氧化率仍能達到39.70%,且當向體系中添加一定含量外源ahls,其錳氧化率能夠進一步提高,其中在含0.5~2g/l?mnso4的培養(yǎng)條件下,添加外源ahls后,其錳氧化率提升百分比在23.88%~36.71%之間。
12、在本發(fā)明的一些實施方式中,所述受群體感應調(diào)控的錳氧化菌的16s?rdna序列如seqid?no:1所示。
13、在本發(fā)明的一些實施方式中,所述受群體感應調(diào)控的錳氧化菌為革蘭氏陰性菌。
14、在本發(fā)明的一些實施方式中,所述受群體感應調(diào)控的錳氧化菌呈直且兩端頓圓的“米粒狀”。
15、在本發(fā)明的一些實施方式中,所述受群體感應調(diào)控的錳氧化菌的生長ph值為3~9;優(yōu)選為5~7。
16、在本發(fā)明的一些實施方式中,所述受群體感應調(diào)控的錳氧化菌的生長溫度為10~45℃;優(yōu)選為10~37℃,更優(yōu)選為15~30℃。
17、在本發(fā)明的一些實施方式中,所述受群體感應調(diào)控的錳氧化菌生長所需底物選自葡萄糖、麥芽糖、蛋白胨、酵母提取物、檸檬酸鐵銨中的至少一種。
18、本發(fā)明的第二方面,提供一種第一方面所述的受群體感應調(diào)控的錳氧化菌的篩選方法,包括以下步驟:
19、用無菌水稀釋采集的沉積物,然后接種至含錳離子的培養(yǎng)基中進行富集培養(yǎng),經(jīng)篩選后,即得。
20、在本發(fā)明的一些實施方式中,所述沉積物采自浙江省麗水市遂昌縣遂昌黃鐵礦103平硐。
21、在本發(fā)明的一些實施方式中,所述培養(yǎng)基為pycm培養(yǎng)基。
22、在本發(fā)明的一些實施方式中,pycm培養(yǎng)基包括以下組分:2.0g/l檸檬酸鐵銨、0.1g/l蛋白胨、0.5g/l酵母提取物、0.5g/l?cacl2、0.1g/l?mgso4?7h2o、0.1g/l?nano3和0.1g/lkh2po4。優(yōu)選地,所述pycm培養(yǎng)基的ph為6.8~7.2。
23、本發(fā)明的第三方面,提供一種菌劑,所述菌劑含有第一方面所述的受群體感應調(diào)控的錳氧化菌。
24、本發(fā)明的第四方面,提供一種用于錳氧化的產(chǎn)品,包括第一方面所述的受群體感應調(diào)控的錳氧化菌或第三方面所述的菌劑。
25、在本發(fā)明的一些實施方式中,所述產(chǎn)品中還包含群體感應分子。
26、在本發(fā)明的一些實施方式中,所述群體感應分子包括?;呓z氨酸內(nèi)酯(n-acyl-l-homoserine?lactones,ahls);ahls是革蘭氏陰性菌進行種間交流的信號分子。
27、本發(fā)明的第五方面,提供第一方面所述的受群體感應調(diào)控的錳氧化菌、第三方面所述的菌劑或第四方面所述的用于錳氧化的產(chǎn)品中任一種在重金屬污水處理中的應用。
28、在本發(fā)明的一些實施方式中,所述重金屬污水處理包括酸性礦山廢水處理。
29、本發(fā)明的第六方面,提供一種重金屬污水處理方法,包括用第一方面所述的受群體感應調(diào)控的錳氧化菌、第三方面所述的菌劑或第四方面所述的用于錳氧化的產(chǎn)品中任一種接觸重金屬污水。
30、本發(fā)明的其它特征和優(yōu)點將在隨后的說明書中闡述,并且,部分地從說明書中變得顯而易見,或者通過實施本發(fā)明而了解。