本發(fā)明屬于生物活性肽制備，具體涉及一種具有免疫增強(qiáng)功效的漢麻仁活性肽及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、現(xiàn)階段，因飲食不健康、壓力、疾病、藥物和缺乏鍛煉等因素導(dǎo)致的免疫力低下甚至免疫抑制的人群數(shù)量逐年增加。當(dāng)免疫系統(tǒng)受損時，人體無法及時清除入侵的病原體，這將增加疾病的風(fēng)險(xiǎn)。雖然一些合成藥物在提高人體免疫系統(tǒng)活性方面是有效的，但它們對人體健康的潛在毒性令人擔(dān)憂。

2、與藥物相比，食物來源的免疫調(diào)節(jié)肽不但具有促進(jìn)免疫、預(yù)防感染和癌癥等功能，而且還具有易吸收、免疫原性低、無毒的優(yōu)勢。

3、漢麻籽作為營養(yǎng)品、纖維和生物活性化合物的重要來源，含有豐富的蛋白質(zhì)(20％-25％)、油脂(30％以上)以及大量的維生素和礦物質(zhì)。此外，它的蛋白質(zhì)主要由漢麻仁球蛋白和白蛋白組成，因其易消化性和優(yōu)質(zhì)的必需氨基酸組成而被熟知。然而，漢麻蛋白的低水溶性限制其在食品行業(yè)中的應(yīng)用。因此，倘若通過酶促水解，開發(fā)具有免疫增強(qiáng)活性的漢麻多肽功能食品，對漢麻仁蛋白的高值利用及膳食漢麻多肽預(yù)防和改善免疫抑制具有重要意義。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、為了漢麻仁蛋白的高值利用、預(yù)防和改善免疫抑制的目的，本發(fā)明提供一種具有免疫增強(qiáng)功效的漢麻仁活性肽及其制備方法和應(yīng)用。

2、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取以下技術(shù)方案：

3、一種具有免疫增強(qiáng)功效的漢麻仁活性肽，氨基酸序列為dgdgsgff。

4、所述具有免疫增強(qiáng)功效的漢麻仁活性肽的制備方法，包括以下步驟：

5、漢麻仁經(jīng)超臨界萃取結(jié)合三相分離得到漢麻仁蛋白粉，然后將漢麻仁蛋白粉經(jīng)復(fù)合蛋白酶酶解得到酶解液；收集酶解液中分子量小于1kda的組分，進(jìn)行葡聚糖凝膠g-15柱色譜分離，測定各峰收集液的免疫增強(qiáng)活性，收集活性最高的組分，進(jìn)行l(wèi)c-ms/ms鑒定，化學(xué)合成即得漢麻仁活性肽。

6、在本發(fā)明中，三相分離的參數(shù)為：丁醇溶液的體積濃度為50％，硫酸銨溶液的體積濃度為60％，硫酸銨溶液與丁醇溶液的質(zhì)量比為1:3，超臨界萃取參數(shù)：萃取釜壓力30mpa，溫度:45℃，分離釜?。簤毫?0mpa，溫度60℃，分離釜ⅱ：壓力4.5mpa，溫度60℃，泵頻：28hz；流量：700l/h。酶解的步驟為：向漢麻仁蛋白粉中加水配置成液料比為16:1ml/g的懸濁液，使用風(fēng)味蛋白酶和木瓜蛋白酶對漢麻仁蛋白粉進(jìn)行復(fù)合酶解，所述風(fēng)味蛋白酶和木瓜蛋白酶的用量以蛋白重量計(jì)，優(yōu)選為每克蛋白添加5毫克風(fēng)味蛋白酶和5毫克木瓜蛋白酶，所述的酶解溫度優(yōu)選為55℃，酶解的時間優(yōu)選為300min，ph優(yōu)選為6.3。

7、在本發(fā)明中，所述葡聚糖凝膠g-15柱色譜，洗脫液為為超純水；柱型為：(直徑)1.6×100cm；檢測波長為280nm；上樣量為5ml，流速為1.2ml/min，洗脫體積為375ml，峰組分收集的體積為7.5ml/管。

8、一種免疫增強(qiáng)劑，包括所述的具有免疫增強(qiáng)功效的漢麻仁活性肽。

9、一種免疫增強(qiáng)產(chǎn)品，包括所述的具有免疫增強(qiáng)功效的漢麻仁活性肽。

10、一種免疫增強(qiáng)產(chǎn)品，包括所述的免疫增強(qiáng)劑。

11、一種所述的具有免疫增強(qiáng)功效的漢麻仁活性肽的應(yīng)用，所述具有免疫增強(qiáng)功效的漢麻仁活性肽在制備免疫增強(qiáng)活性產(chǎn)品中的應(yīng)用。所述產(chǎn)品包括食品、藥品或保健品。

12、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：

13、本發(fā)明首次從漢麻仁蛋白水解物中分離鑒定獲得了一種氨基酸序列為dgdgsgff的漢麻仁活性肽，本發(fā)明提供的肽具有增強(qiáng)免疫活性的作用，可以用于制備具備增強(qiáng)免疫活性功能的食品和藥品，為免疫抑制性疾病患者和免疫功能低下人群的預(yù)防及治療提供新的思路。

技術(shù)特征：

1.一種具有免疫增強(qiáng)功效的漢麻仁活性肽，其特征在于：具有免疫增強(qiáng)功效的漢麻仁多肽的氨基酸序列為dgdgsgff。

2.一種具有免疫增強(qiáng)功效的漢麻仁活性肽的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述超臨界萃取技術(shù)參數(shù)為：萃取釜壓力為30mpa，溫度為45℃；分離釜ⅰ的壓力為10mpa，溫度為60℃；分離釜ⅱ的壓力為4.5mpa，溫度為60℃；泵頻為28hz；流量為700l/h；所述三相分離技術(shù)的參數(shù)為：丁醇溶液的體積濃度為50％，硫酸銨溶液的體積濃度為60％，硫酸鹽溶液與丁醇溶液的質(zhì)量比為1:3。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于：所述復(fù)合蛋白酶包括風(fēng)味蛋白酶和木瓜蛋白酶，所述風(fēng)味蛋白酶和木瓜蛋白酶的用量以蛋白重量計(jì)，每克蛋白添加5毫克風(fēng)味蛋白酶和5毫克木瓜蛋白酶；酶解溫度為55℃，酶解時間為300min，ph6.3；酶解結(jié)束后95℃加熱滅酶10min，酶解物離心分離，棄去沉淀，所得上清液為酶解液。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于：所述葡聚糖凝膠g-15柱色譜分離的參數(shù)為：洗脫液為超純水；柱型為：直徑φ＝1.6×100cm；檢測波長為280nm；上樣量為5ml，流速為1.2ml/min，洗脫體積為375ml，峰組分收集的體積為7.5ml/管。

6.一種免疫增強(qiáng)劑，其特征在于：所述免疫增強(qiáng)劑包括權(quán)利要求1所述的具有免疫增強(qiáng)功效的漢麻仁活性肽。

7.一種免疫增強(qiáng)產(chǎn)品，其特征在于：所述免疫增強(qiáng)產(chǎn)品包括權(quán)利要求1所述的具有免疫增強(qiáng)功效的漢麻仁活性肽。

8.一種免疫增強(qiáng)產(chǎn)品，其特征在于：所述免疫增強(qiáng)產(chǎn)品包括權(quán)利要求6所述的免疫增強(qiáng)劑。

9.一種權(quán)利要求1所述的具有免疫增強(qiáng)功效的漢麻仁活性肽的應(yīng)用，其特征在于：所述具有免疫增強(qiáng)功效的漢麻仁活性肽在制備免疫增強(qiáng)活性產(chǎn)品中的應(yīng)用。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于：所述產(chǎn)品包括食品、藥品或保健品。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種具有免疫增強(qiáng)功效的漢麻仁活性肽及其制備方法和應(yīng)用，屬于生物活性肽制備技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明提供的漢麻仁蛋白源免疫增強(qiáng)活性肽，其氨基酸序列為DGDGSGFF。本發(fā)明提供的漢麻仁蛋白源免疫增強(qiáng)活性肽是首次從漢麻仁蛋白中分離得到的，為一種新的漢麻仁蛋白源免疫增強(qiáng)活性肽，具有良好的免疫增強(qiáng)活性，可以作為天然免疫增強(qiáng)劑用于食品、保健品及免疫增強(qiáng)藥品中，具有良好的應(yīng)用前景。

技術(shù)研發(fā)人員：董艷,張正海,魏連會,葛婧儀,呂文慶,張曉燕,溫維浩,于宗玄,孫凱旋,韓舒晨,王菁菁,田媛,張鵬舉
受保護(hù)的技術(shù)使用者：黑龍江省科學(xué)院大慶分院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/19