具有石油降解功能的細菌aw25和其用途及細菌載體的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及具有石油降解功能的細菌AW25以及利用 該菌株海洋環(huán)境治理領(lǐng)域的應(yīng)用，尤其是涉及石油污染后引起的石油污染的生物治理領(lǐng)域 的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 近年來，由于海上原油運輸、近海采油平臺及油港數(shù)量的急劇增加，以及各種石油 泄漏的事故也頻頻發(fā)生，海洋石油污染日益加劇。由于海洋石油污染將造成生物多樣性急 劇下降，尤其是石油中所含的多種芳烴類有毒化合物，因其在環(huán)境中穩(wěn)定、持久且具有生物 累積和放大效應(yīng)，以及某些化合物更是具有較強的致癌性、致突變性和致畸性。所以，其對 生態(tài)環(huán)境特別是生物多樣性的破壞將是致命的。同時，石油污染將降低海濱環(huán)境的使用價 值、破壞海岸設(shè)施、影響局部地區(qū)的水文氣象條件以及降低海洋的自凈能力。同時，這些被 污染環(huán)境的恢復(fù)以及生物種群的再恢復(fù)則需要漫長而艱難的過程。
[0003]目前，針對于石油污染，尤其是大面積石油泄漏，通常采用的應(yīng)急措施除了采油人 工打撈等物理方法，還采用加入消油劑使石油乳化，迅速沉降的方法以恢復(fù)海面暫時的清 潔，雖然這一方法短時看似起到了治理的效果，但背后卻隱藏著危機，其會造成二次化學(xué)污 染。
[0004] 因此，實施物理化學(xué)方法進行生態(tài)環(huán)境的重建幾乎不可能實現(xiàn)，生物修復(fù)海洋污 染成為唯一可行的途徑。但相對于陸地，海洋植物相對匱乏，污染海洋的生物修復(fù)還主要依 賴海洋微生物的降解作用，尤其依賴于已經(jīng)適應(yīng)海底環(huán)境的各種土著石油降解微生物。這 些石油降解微生物在海底能夠利用石油作為其唯一碳源，克服海底黑暗、低溫、寡養(yǎng)、缺氧 的極端條件，以石油為食，將石油進行分解轉(zhuǎn)化，從而改變而海底荒漠化問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 為解決上述海面石油污染處理的技術(shù)難題，本發(fā)明的第一個目的是提供一株具 有石油降解功能的細菌AW25。發(fā)明人設(shè)法獲得高效的海洋土著石油微生物并進行研宄，最 終得到了假單胞菌桿菌屬菌株AW25(Pseudomonasindoloxydans，CGMCCNo.10351)。發(fā)明 人在要求保護此菌株的同時要求對其用途進行保護。本發(fā)明的第三個目的是提供一種具有 營養(yǎng)功能載體，同時為上述具有凝聚和降解石油功能的細菌提供寄居場所的營養(yǎng)載體。
[0006] 本發(fā)明的技術(shù)方案如下：
[0007] 具有石油降解功能的細菌AW25,其16SrRNA序列如SEQIDNo. 1所示。
[0008] 具有石油降解功能的細菌AW25是發(fā)明人從自然界中分離得到的。具體是從大連 新港石油污染海域采集的海底沉積物中分離獲得。取泥樣5克用無菌水稀釋10 5倍，將原 油均勻涂布到ASM培養(yǎng)基上，15°C培養(yǎng)7天分離得到菌株。菌株AW25從大連新港石油污染 海域采集的海底沉積物中分離獲得，采集者姓名劉長建、采集者聯(lián)系方式0411-87656046。
[0009] 所述的具有石油降解功能的細菌AW25已提交保藏，具體保藏信息如下：
[0010] 保藏單位名稱：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心（CGMCC);
[0011] 保藏單位地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，中國科學(xué)院微生物研宄所；
[0012] 保藏日期：2015年01月13日；
[0013]保藏編號：CGMCCNo. 10351; 分類命名：Pseudomonasindoloxydans
[0014] 所述的具有石油降解功能的細菌AW25的形態(tài)及生理生化特征為：
[0015] (1)菌落形態(tài)特征
[0016] 菌株AW25的菌落形態(tài)為：在LB培養(yǎng)基上培養(yǎng)7天后，菌落半透明無色，表面略有 光澤，光滑，菌落邊緣不清晰。
[0017] (2)菌株形態(tài)及其生理生化特性
[0018] 革蘭氏陰性好氧細菌，氧化酶陽性，無色素產(chǎn)生，菌體桿狀，1. 0-1. 8*0. 2-0. 3ym。 在NaCl濃度0-20%范圍內(nèi)均能生長，最適NaCl濃度4%，生長的溫度范圍10-45°C，最是溫 度范圍28-35°C，pH范圍5. 5-10. 5,最適pH7. 5-8. 5,明膠液化，不水解淀粉，不能利用葡萄 糖、蔗糖、乳糖、半乳糖、麥芽糖、阿拉伯糖、果糖、木糖、甘露糖。硝酸還原酶陰性，產(chǎn)生吲哚， 產(chǎn)生H2S。
[0019] 所述的具有石油降解功能的細菌AW25用途為以降解石油的方式進行石油污染的 治理。
[0020] 進一步的，所述的具有石油降解功能的細菌AW25用于將漂浮于海面的石油逐步 降解，同時進行清理。
[0021] 本發(fā)明的有益效果在于：
[0022] 1.本發(fā)明首次從海洋土著微生物中篩選出具有石油降解功能的細菌AW25 ;
[0023] 2.發(fā)明人研發(fā)的菌劑顆粒，制造成本低廉，使用效果好，有很強的應(yīng)用價值。
【附圖說明】
[0024] 圖1菌株AW25的菌落形態(tài)圖；
[0025] 圖2菌株AW25的菌體的掃描電子顯微鏡觀察圖；
[0026] 圖3菌株AW25的系統(tǒng)發(fā)育樹；
[0027] 圖4菌株AW25的石油降解性能測定；
[0028] 圖5本發(fā)明菌株AW25菌劑顆粒形態(tài)圖。
【具體實施方式】
[0029] 下面以具體實施的方式對本發(fā)明的技術(shù)方案作進一步的說明，但本發(fā)明不以任何 形式受限于實施例內(nèi)容。
[0030] 一、實施例
[0031] 實施例1
[0032] 海底沉降石油降解菌劑，是將菌種AW25的發(fā)酵料與石油降解微生物載體的制備 原料按照1:15的質(zhì)量比混合后造粒烘干而得；進一步的，使最終的菌劑濃度為KTcfu/ml 以上為佳；
[0033] 所述的石油降解微生物載體的制備原料及其配比包括：
[0034]
[0035] 〇
【主權(quán)項】
1. 具有石油降解功能的細菌AW25,其特征在于，其保藏編號為CGMCC No. 10351，其 16SrRNA 序列如 SEQ ID No. 1 所示。
2. 如權(quán)利要求1所述的具有石油降解功能的細菌AW25,形態(tài)及生理生化特征如下： (1) 菌落形態(tài)特征 菌株AW25的菌落形態(tài)為：在LB培養(yǎng)基上培養(yǎng)7天后，菌落半透明無色，表面略有光澤， 光滑，菌落邊緣不清晰； (2) 菌株形態(tài)及其生理生化特性 革蘭氏陰性好氧細菌，氧化酶陽性，無色素產(chǎn)生，菌體桿狀，1. 0-1. 8*0. 2-0. 3 μπι，在 NaCl濃度0-20%范圍內(nèi)均能生長，最適NaCl濃度4%，生長的溫度范圍10-45°C，最是溫 度范圍28-35°C，pH范圍5. 5-10. 5,最適pH7. 5-8. 5,明膠液化，不水解淀粉，不能利用葡萄 糖、鹿糖、乳糖、半乳糖、麥芽糖、P可拉伯糖、果糖、木糖、甘露糖，硝酸還原酶陰性，產(chǎn)生吲哚， 產(chǎn)生H2S。
3. 如權(quán)利要求1所述的具有石油降解功能的細菌AW25以降解石油的方式進行石油污 染的治理的用途。
【專利摘要】具有石油降解功能的細菌AW25和其用途及細菌載體，屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域，發(fā)明人提供一株具有石油降解功能的細菌AW25，所述的具有石油降解功能的細菌AW25用途為以降解石油的方式進行石油污染的治理。該用途以菌劑顆粒的形式實現(xiàn)。本發(fā)明首次從海洋土著微生物中篩選出AW25；發(fā)明人研發(fā)的菌劑顆粒載體，制造成本低廉，使用效果好，有很強的應(yīng)用價值。1035120150113
【IPC分類】C12N11-10, C12N1-20, C12R1-38, C02F3-34, C12N11-14, C02F101-32
【公開號】CN104830723
【申請?zhí)枴緾N201510222043
【發(fā)明人】于基成, 劉秋, 齊小輝, 潘俊華
【申請人】大連民族學(xué)院
【公開日】2015年8月12日
【申請日】2015年4月30日