白;
[0022](2)超濾:將脫色液用〈I萬分子量的超濾膜進(jìn)行超濾除蛋白,合格后送去結(jié)晶;
[0023](3)結(jié)晶:超濾液先用CP級HCl調(diào)pH至2.5-3.3,再用> I萬分子量的超濾膜進(jìn)行超濾除蛋白,合格后放入結(jié)晶釜,開動攪拌,開始加入95% (v/v)乙醇,出現(xiàn)白色混濁前酒精加入速度控制在100L/h ;出現(xiàn)白色混濁時,停止加酒精,攪拌半小時,然后繼續(xù)加酒精至料液體積的1.5-2.0倍,保持溫度攪拌半小時,然后開夾套冷卻水,將料液冷至室溫,靜止I小時;
[0024]離心分離結(jié)晶液,濕品先用95% (v/v)酒精洗滌,再用無水乙醇浸泡,最后用干送去干燥;母液調(diào)PH至6.0-7.0后送蒸餾工段進(jìn)行回收酒精;
[0025]4)干燥包裝
[0026](I)干燥:將濕品放入干燥箱中,真空度彡一 0.085Mpa,控制溫度在34_40°C,加P2O5吸濕,烘干過程定時翻料,并檢測水分,當(dāng)水分< 8%時可出料;
[0027](2)包裝:將合格的產(chǎn)品按規(guī)定的批量放入混合器中混合15-20分鐘,然后按進(jìn)行包裝送檢,合格入庫。
[0028]本發(fā)明中,所用原料的用量按重量份計(jì)為:腺苷38-42份、速凍酵母880-920份、磷酸二氫鉀38-42份、磷酸氫二鉀230-235份、氯化鎂18-22份、蔗糖190-210份、苯扎溴銨溶液18-22份、反滲透水1950-2050份。
[0029]進(jìn)一步優(yōu)選,所用原料的用量按重量份計(jì)為:腺苷40份、速凍酵母900份、磷酸二氫鉀40份、磷酸氫二鉀232份、氯化鎂20份、蔗糖200份、苯扎溴銨溶液20份、反滲透水2000 份。
[0030]步驟2)所述的速凍酵母,是指將啤酒酵母泥用適量反滲透水清洗,然后再用板框過濾器過濾,得到白色或淡褐色泥狀物,再通過速凍得到。
[0031]步驟2)所述上樣,定時檢測流出液,優(yōu)選當(dāng)流出液中ATP濃度< 0.025%時,每兩小時取樣檢定一次;當(dāng)流出液中0.025%〈ATP濃度〈0.03% (夏季或酵母異常時可控制在0.05%以下)時,每小時取樣檢定一次。
[0032]步驟2)中所述的ATP濃度單位為g/ml,所述洗脫,洗脫流速控制在100_300ml/min (6_18L/h)。
[0033]與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn):
[0034]1、現(xiàn)有技術(shù)中,生化反應(yīng)的酶促反應(yīng)金屬離子化合物是選用硫酸鎂,但是后續(xù)工藝中使用的強(qiáng)堿性陰離子樹脂對硫酸根離子的吸附能力很強(qiáng),對后期的樹脂再生再生處理帶來很大困難,會引入新的雜質(zhì)離子;而用氯化鎂替代硫酸鎂,強(qiáng)堿性陰離子樹脂對氯離子的吸附能力比對硫酸根離子的吸附能力弱,利于后期的樹脂再生再生處理,不會引入新的雜質(zhì)1?子。
[0035]2、現(xiàn)有技術(shù)中,活性劑的選擇是使用甲苯,甲苯是有毒物質(zhì),對人有毒害作用,而且甲苯蒸汽能與空氣形成爆炸性混合物,對廠房、設(shè)備、設(shè)施有更高要求,增加額外投入,同時,甲苯不溶于水,增加后期處理難度。而本發(fā)明是使用苯扎溴銨作為活性劑,苯扎溴銨是一種消毒劑,無毒無害,且不對后期處理增加難度,是合理的替代物。
[0036]3、現(xiàn)有技術(shù)使用酵母,一般是直接使用啤酒廠生產(chǎn)啤酒后廢棄的酵母泥,這樣會存在一些不足,例如酵母泥的衛(wèi)生條件不好、不耐久存等,而本發(fā)明通過將啤酒酵母泥用適量反滲透水清洗,然后再用板框過濾器過濾,得到白色或淡褐色泥狀物,再通過速凍得到,一方面可以清洗干凈酵母泥,而且通過速凍,可以長期保存酵母泥,通過本發(fā)明得到速凍酵母,在生產(chǎn)中,生化反應(yīng)的AR轉(zhuǎn)化不會逆轉(zhuǎn),腺苷的轉(zhuǎn)化率達(dá)到100 %。
【具體實(shí)施方式】
[0037]下面以實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明,但本發(fā)明并不局限于這些實(shí)施例。
[0038]實(shí)施例1:
[0039]三磷酸腺苷二鈉的生產(chǎn)方法,包括如下步驟:
[0040]I)生化反應(yīng)
[0041](I)氯化鎂溶液、腺苷溶液、苯扎溴銨溶液的制備:
[0042]①用少量反滲透水溶解氯化鎂制成氯化鎂溶液;
[0043]②用適量加熱至85°C以上的反滲透水溶解腺苷制成腺苷溶液;
[0044]③用適量的反滲透水溶解苯扎溴銨稀釋成5%苯扎溴銨溶液;
[0045](2)投放速凍酵母:加反滲透水于反應(yīng)鍋中,開動攪拌用夾套熱水加熱至40-450C,投放蔗糖及磷酸二氫鉀和磷酸氫二鉀,使其溶解,待其全部溶解后,停止加熱,開循環(huán)水降溫,當(dāng)溫度降至40°C以下時,投放速凍酵母,并用夾套熱水緩慢升溫;
[0046](3) ATP生化反應(yīng):當(dāng)反應(yīng)鍋內(nèi)溫度升至20°C ± I時,依次投放氯化鎂溶液、苯扎溴銨溶液、腺苷溶液,反應(yīng)開始計(jì)時,將反應(yīng)液繼續(xù)加熱至36-39°C,保溫,待有氣泡溢出,開始取樣測定ATP轉(zhuǎn)化率,當(dāng)反應(yīng)達(dá)到ATP —條帶時,反應(yīng)結(jié)束;
[0047](4)滅活、調(diào)酸堿:反應(yīng)結(jié)束,立即放掉夾套熱水,迅速投放大量冰于反應(yīng)鍋內(nèi),并通冷卻水降溫,當(dāng)溫度降至4°C以下,用磷酸調(diào)pH至2.5-3.0,I小時后,再用液堿調(diào)pH至5.5-6.0,調(diào)好堿后30分鐘開始壓榨,壓榨完畢,再用反滲透水頂洗濾餅,水頂液合并壓榨液,檢驗(yàn)含量、透光度,合格送分離工段處理;
[0048]2)樹脂分離
[0049](I)上樣:將壓榨液及水頂液稀釋至0.2-0.45 %,上D296樹脂柱,流速為4-6L/min,定時檢測流出液,查看是否有ATP漏出;當(dāng)流出液中ATP濃度多0.03%時,停止上樣,用反滲透水正頂至流出液ATP濃度< 0.01 %后,繼續(xù)上樣,如此反復(fù)直至上樣結(jié)束;
[0050](2)水洗雜質(zhì):上樣結(jié)束,用反滲透水正進(jìn)洗滌至流出液A257nm^i 0.2 ;然后反進(jìn)水洗至樹脂上層無渾濁機(jī)械雜質(zhì)且流出液A257nmS 0.2后結(jié)束;流速控制在4-6L/min ;
[0051](3)稀鹽洗雜質(zhì):水洗結(jié)束,用 ρΗ2.0-2.2 的 0.04mol/LNaCl—0.01mol/L HCl 稀鹽液反進(jìn)流洗,流速為6-10L/min ;每小時取樣,測流出液中ATP濃度,當(dāng)流出液中ATP濃度^ 0.03%時,反進(jìn)洗雜質(zhì)結(jié)束;改正進(jìn),正進(jìn)流速不變,每小時取樣一次,測流出液中ATP的濃度,當(dāng)流出液中ATP濃度多0.025 %時,每半小時取樣一次監(jiān)測;當(dāng)流出液pH跳至2-4,且ADP基本洗盡或只有ATP時,洗滌結(jié)束,開始洗脫;
[0052](4)洗脫:用 ρΗ3.5-3.8 的 lmol/LnaCl-0.01mol/L HCl 濃鹽液進(jìn)行洗脫,當(dāng)洗脫流出液ATP濃度>0.38%時,收集洗脫液,送脫色;當(dāng)洗脫流出液ATP濃度〈0.38%時,即停止收集;
[0053]3)精制
[0054](I)脫色:洗脫液根據(jù)色澤加入0.1-0.5%活性炭和0.1-0.3%硅藻土攪拌I小時脫色,離心分離過濾后,脫色液經(jīng)檢驗(yàn)合格后送超濾除蛋白;
[0055](2)超濾:將脫色液用〈I萬分子量的超濾膜進(jìn)行超濾除蛋白,合格后送去結(jié)晶;
[0056](3)結(jié)晶:超濾液先用CP級HCl調(diào)pH至2.5-3.3,再用> I萬分子量的超濾膜進(jìn)行超濾除蛋白,合格后放入結(jié)晶釜,開動攪拌,開始加入95% (v/v)乙醇,出現(xiàn)白色混濁前酒精加入速度控制在100L/h ;出現(xiàn)白色混濁時,停止加酒精,攪拌半小時,然后繼續(xù)加酒精至料液體積的1.5-2.0倍,保持溫度攪拌半小時,然后開夾套冷卻水,將料液冷至室溫,靜止I小時;
[0057]離心分離結(jié)晶液,濕品先用95% (v/v)酒精洗滌,再用無水乙醇浸泡,最后用干送去干燥;母液調(diào)PH至6.0-7.0后送蒸餾工段進(jìn)行回收酒精;
[0058]4)干燥包裝