一種土壤磷素微生物活化劑及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及微生物制劑領(lǐng)域，具體設(shè)及一種用于活化±壤中憐素的微生物制劑。【背景技術(shù)】
[0002] 憐是植物生長所必需的重要營養(yǎng)素之一，如何能使±壤中的憐成為有效憐是當(dāng)前 國內(nèi)外非常關(guān)注的研究領(lǐng)域。憐元素參與植物生長繁殖的諸多過程。憐不僅是植物細(xì)胞原 生質(zhì)的重要組成組分，而且還參與植物的光合作用，淀粉和糖的利用和能量的傳遞過程。憐 肥則可W提高植物幼苗期根系細(xì)胞生長速度，縮短植物的生長期。據(jù)研究，世界上絕大部分 農(nóng)業(yè)±壤缺憐（總憐不缺，活性憐缺），從1950年開始，我國大部分地區(qū)開始向±壤中施入 化學(xué)憐肥，但憐肥利用率很低，憐肥的當(dāng)季利用率一般只有10%~20%，我國農(nóng)田中約2/3 嚴(yán)重缺憐，±壤中95%W上的憐為無效形式，植物很難直接吸收利用，為了獲取高產(chǎn)每一年 都向±壤重復(fù)施加大批量的可溶性憐肥，然而因為±壤的板結(jié)等原因，作物對施入的憐肥 當(dāng)季節(jié)利用效率只有5%~10%，大部分與±壤中的Ca2+，化2+，化3+，A13+結(jié)合形成難溶性憐 酸鹽。自1950年W來，為了提高上壤憐素的利用率國內(nèi)外學(xué)者做了大量研究，其中解憐菌 是一類具有將難溶性憐鹽轉(zhuǎn)化為可溶性憐鹽的微生物，國內(nèi)外已有許多研究發(fā)現(xiàn)，解憐菌 不僅可W大幅度提高±壤中的憐利用效率，提高產(chǎn)量，從另一方面也能節(jié)約大量的憐礦資 源。
[0003] 目前，對于細(xì)菌解憐特性的生理學(xué)和遺傳學(xué)知識還了解得極少，尤其是在指示和 調(diào)節(jié)方面。對根際細(xì)菌性憐循環(huán)機制的了解還停留在早期的水平。但運方面的研究在農(nóng)業(yè) 上的應(yīng)用是巨大的，尤其是長期傳統(tǒng)憐肥的施用使得±壤中儲存的憐數(shù)量大增。而憐素在 ±壤中的過度積累不僅降低了憐肥的生產(chǎn)效益，而且引起環(huán)境問題，如水體富養(yǎng)化及養(yǎng)分 不平衡。
[0004] 20世紀(jì)80年代W后，國內(nèi)許多單位相繼開發(fā)出了有多種芽抱桿菌組成的復(fù)合解 憐菌制劑，但由于解憐細(xì)菌的遺傳穩(wěn)定性差，運些菌劑在生產(chǎn)上使用的效果并不理想。因 此，尋求一種穩(wěn)定高效的解憐微生物制劑來開采利用±壤中儲存的憐素則是緩解憐肥需求 矛盾，減少憐對環(huán)境的污染的途徑之一。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的一個目的是針對現(xiàn)有技術(shù)不足提供一種制法簡單且高效的活化憐素的 微生物制劑。
[0006] 為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：
[0007] 上述的一種±壤憐素微生物活化劑，是將一種具有解憐能力的菌株與菌株繁殖的 載體進(jìn)行科學(xué)復(fù)配，經(jīng)發(fā)酵制成的。
[0008] 上述該活化劑的活菌總數(shù)大于2X108CRJ/g。
[0009] 其中，上述的具有解憐能力的菌株是黑色真菌菌株毛霉，其保藏編號為CGMCC No.9637〇
[0010] 其中，上述菌株繁殖的載體包括但不限于麥教、豆巧、娃藻±、玉米粉、±壤、米慷、 活性炭、銀末的一種或幾種。
[0011] 其中，所述菌株繁殖的載體是將米慷、活性炭、銀末按一定的比例混合而成。
[0012] 可優(yōu)化為，所述繁殖載體是將米慷、活性炭、銀末按照質(zhì)量比為2~3 : 1~2 : 1 混合而制成。
[0013] 更進(jìn)一步優(yōu)化為，所述繁殖載體是將米慷、活性炭、銀末按照質(zhì)量比為3 : 1 : 1 混合而制成。
[0014] 其中，制備上述憐素微生物活化劑時按解憐菌與菌株繁殖的載體質(zhì)量比為 0. 26~1. 82 : 1進(jìn)行配比混合發(fā)酵。
[0015] 其中，制備上述憐素微生物活化劑時優(yōu)化為，按解憐菌與菌株繁殖的載體質(zhì)量比 為1.25 : 1進(jìn)行配比混合。
[0016] 其中，所述解憐菌與菌株繁殖的載體混合后進(jìn)行發(fā)酵時，發(fā)酵條件控制為：發(fā)酵溫 度28°C~32°C，發(fā)酵時間2~6天。
[0017] 可優(yōu)化為，所述發(fā)酵條件控制為：發(fā)酵溫度30°C，發(fā)酵時間4天。
[0018] 進(jìn)一步地，本發(fā)明的另一目的是提供一種大量制備上述高效的活化憐素的微生 物制劑的方法。
[0019] 上述方法，包括如下步驟：
[0020] 1)將一種具有解憐能力的菌株與菌株繁殖的載體進(jìn)行科學(xué)復(fù)配進(jìn)行發(fā)酵，逐級擴 大培養(yǎng)，獲得長有大量菌體的餅±母劑；
[0021] 2)培制出來的母劑作為接種劑，接種大堆堆料，進(jìn)一步擴大培制，將制得菌劑風(fēng)干 或在40°CW下烘干。
[0022] 更近一步地，本發(fā)明的再一目的在于提供上述微生物制劑在提高±壤中憐素的利 用效率上的應(yīng)用。
[0023] 其中，上述微生物制劑用作基肥、拌種或用做追肥施用于作物生長區(qū)域。
[0024] 其中，上述作物生長區(qū)域包括農(nóng)田、林場或景觀苗圃。
[0025] 本發(fā)明的憐素微生物活化劑具有良好的解憐效果，可通過實施例中的解憐實驗可 知，該制劑優(yōu)先利用可溶性憐，當(dāng)可溶性憐利用殆盡時，啟動解憐機制，將難溶性憐轉(zhuǎn)化為 可溶性憐，從而使溶液中可溶性憐的含量提高，可溶性憐含量的提高能促進(jìn)植物對憐素的 吸收和利用，進(jìn)而可促進(jìn)作物的生長提高作物產(chǎn)量?？梢?，本發(fā)明提供的憐素微生物活化劑 對發(fā)展持續(xù)高效農(nóng)業(yè)具有深遠(yuǎn)意義。
[0026] 此外，利用該解憐微生物制劑來開采±壤中儲存的憐素是緩解憐肥需求矛盾，減 少憐對環(huán)境的污染的一個有效途徑。
【附圖說明】
[0027] 圖1為黑色真菌菌株毛霉顯微示意圖； 陽02引 圖2為憐的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖；
[0029] 圖3A和圖3B為制得的解憐微生物菌劑外觀圖；圖3A為菌劑制備過程發(fā)酵情 況，圖3B為菌劑成品，從左到右為米慷、銀末、活性炭的質(zhì)量比為3 : 1 : 1，1 : 2 : 1， 2 ： 2 ： 1 ;
[0030] 圖4為接菌量對有效憐增量的影響柱狀圖；
[0031] 圖5為發(fā)酵溫度對有效憐增量的影響柱狀圖； 陽0巧圖6為發(fā)酵時間對有效憐增量的影響柱狀圖；W及
[0033] 圖7為3種微生物制劑解解憐動態(tài)圖。
【具體實施方式】
[0034]W下實施例用于進(jìn)一步說明本發(fā)明，但不應(yīng)理解為對本發(fā)明的限制。在不背離本 發(fā)明精神和實質(zhì)的前提下，對本發(fā)明所作的修飾或者替換，均屬于本發(fā)明的范疇。
[0035] 實施例1憐素活化微生物制劑制備參數(shù)篩選
[0036] 1. 1試驗材料
[0037] 1. 1. 1試驗菌株和載體
[0038] 試驗菌株：具有解憐能力的黑色真菌菌株毛霉，上述黑色真菌菌株毛霉已于2014 年9月4號保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中屯、，保藏單位地址：北京市 朝陽區(qū)北辰西路1號院3號中國科學(xué)院微生物研究所，其分類命名毛霉（MucorSP.)，其保 藏編號為CGMCCNo. 9637,該菌株的顯微觀察如圖1所示； 陽039] 菌株載體：米慷、活性炭、銀末
[0040] 1. 1. 2主要試驗儀器
[0041] 恒溫培養(yǎng)箱，DHG-9053A干燥箱，QHZ-98A搖床，722型可見分光光度計，SW-CJ-IB 無菌操作臺，粉碎機，高壓蒸汽滅菌鍋，F(xiàn)A1104型電子天平
[0042] 1. 1. 3試驗試劑
[0043] 發(fā)酵培養(yǎng)液：葡萄糖10克，氯化鐘0. 3g，氯化鋼0. 3g，，硫酸錠0. 5g，屯水合硫酸 儘0. 3g，屯水合硫酸亞鐵0. 03g，憐礦粉5g，四水硫酸儘0. 03g，蒸饋水1000血，調(diào)節(jié)溶液抑 至中性，憐礦粉不能提前加入到溶液中，要單獨滅菌后混合。
[0044] 無機憐固體培養(yǎng)基：瓊脂18-20g加入到無機憐發(fā)酵培養(yǎng)液中。 W45] 鋼錬膽存溶液：準(zhǔn)確量取153mL濃H2SO4,徐徐加入到裝有400mL蒸饋水的燒 杯中，自然冷卻至室溫。在300血水（約60°C)中溶解鋼酸錠[(NH4)sM0A4? &0,研磨 細(xì)]lOg，自然冷卻。將硫酸溶液徐徐加入到鋼酸錠溶液中，加入lOOmL的0. 5 %酒石酸錬鐘 怔SbOC4H4化?1/2&0]溶液，冷卻后，